CN112087950B - 安全剂用于提高水稻作物对除草剂的抗性的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的除草混合物，其中所述除草混合物包含：a)抑制乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的除草剂或抑制4‑羟苯基丙酮酸双加氧酶(HPPD)的除草剂或抑制乙酰乳酸(乙酰羟酸)合酶ALS(AHAS)的除草剂或其组合，和b)除草剂安全剂，其选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD‑67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合。本发明还提供了包含本文公开的除草混合物的组合物，以及使用本文公开的除草混合物和组合物防治水稻作物附近的不想要的植物的方法。

Description

安全剂用于提高水稻作物对除草剂的抗性的用途
本申请要求于2018年3月21日提交的美国临时申请No.62/646,075的优先权，其全部内容通过引用并入本文。
在本申请全文中，引用了各种出版物。这些文件的全部公开内容在此通过引用整体并入本申请中，以更全面地描述本发明所属领域的现有技术。
技术领域
本发明提供了用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的混合物、组合物和方法。具体而言，本发明提供了一种除草混合物，其包含(i)抑制乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的除草剂或抑制4-羟苯基丙酮酸双加氧酶(HPPD)的除草剂或抑制乙酰乳酸(乙酰羟酸)合酶(ALS或AHAS)的除草剂，或其任意组合；和(ii)至少一种安全剂，其选自双苯噁唑酸(isoxadifen)、喹氧乙酸(cloquintocet)、AD-67、解草酮(benoxacor)和解草啶(fenclorim)，以及其酯、盐及其组合。抗除草剂的水稻作物为对抑制ACCase、ALS和HPPD的除草剂及其任意组合的抗性栽培品种和杂种。
背景技术
防治不想要的植物对于实现高作物效率极为重要。然而，在许多情况下，有效根除广谱杂草的除草剂还损害作物。为了保护作物免受除草剂的不利影响并提高作物对除草剂的抗性，经常使用安全剂。
安全剂通常通过诱导编码参与除草剂解毒的酶的基因表达而起作用，所述除草剂解毒使得除草剂更快降解从而不会达到有害浓度。已知作为不同除草剂和作物的安全剂的各种化学品。安全剂的实例为双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶及其酯。然而，安全剂也可降低杂草对除草剂的敏感性。在安全剂的存在下，难以预测杂草的行为。
此外，即使已知每种机理单独地得到期望的结果，但是将两种机理结合以得到期望的结果(即除草剂的植物毒性降低、对除草剂的抗性增加和/或除草剂作用降低)的结果仍是不可预测的。生物学机理之间的体内相互作用是复杂的。当将安全剂施用至抗除草剂的水稻作物时，由所述安全剂诱导的生物途径是否会补充、不影响或干扰涉及赋予水稻作物除草剂抗性的生物途径是不可预测的。这两种机理之间的相互作用不仅可影响预期的结果，而且相互作用还可增加毒性。提交申请时的现有技术为，在可得到正式研究的结果之前，无法预测将选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施用至抗除草剂的水稻作物的效果。
芳氧基苯氧基丙酸酯(FOP)是这样的一类除草剂，其通过抑制乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)而起作用，所述乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)使脂肪酸生物合成受到抑制。FOP(即抑制ACCase的除草剂)的实例包括炔草酯(clodinafop-propargyl)、氰氟草酯(cyhalofop-butyl)、禾草灵(diclofop-methyl)、吡氟禾草灵丁酯(fluazifop-butyl)、氟吡禾灵(haloxyfop)、喔草酯(propaquizafop)((R)-2-[[(1-甲基亚乙基)氨基]氧基]乙基2-[4-[(6-氯-2-喹喔啉基)氧基]苯氧基]丙酸酯，最早由P.F.Bocion等人报道(Proc.1987Br.Crop Prot.Conf.-Weeds,1,55))和喹禾灵(quizalofop)((2-异亚丙基氨基-氧乙基(R)-2-[4-(6-氯喹喔啉-2-基氧基)苯氧基]丙酸酯，最早由G.Sakata等人报道(Proc.10th Int.Congr.Plant Prot.1983,1,315))。
咪唑啉酮(imidazolinone)是这样的一类除草剂，其通过抑制乙酰乳酸合酶(ALS)(也称为乙酰羟酸合酶(AHAS))而起作用，所述乙酰乳酸合酶(ALS)使支链氨基酸合成生物合成受到抑制。具体地，它们抑制ALS(AHAS)的催化作用。咪唑啉(imidazoline)(即抑制ALS(AHAS)的除草剂)的实例包括咪草烟(imazethapyr)(2-[4,5-二氢-4-甲基-4-(1-甲基乙基)-5-氧代-1H-咪唑-2-基]-5-乙基-3-吡啶甲酸，最早由T.Malefyt等人报道(Abstr.1984Weed Sci.Soc.Mtg.,Miami,第18页,摘要49))、咪草啶酸(imazamox)(2-[(RS)-4-异丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉-2-基]-5-甲氧基甲基烟酸)、甲咪唑烟酸(imazpic)(5-甲基-2-[4-甲基-5-氧代-4-(丙烷-2-基)-4,5-二氢-1H-咪唑-2-基]吡啶-3-羧酸)和咪唑烟酸(imazapyr)((RS)-2-(4-甲基-5-氧代-4-丙烷-2-基-1H-咪唑-2-基)吡啶-3-羧酸，最早由P.L.Orwick等人报道(Proc.South.Weed Sci.Soc.Annu.Mtg.,36th,1983,第291页))。
环己烷-1,3-二酮是这样的一类除草剂，其通过抑制HPPD而起作用(即抑制HPPD的除草剂)，所述HPPD使类胡萝卜素生物合成受到抑制。环己烷-1,3-二酮(即抑制HPPD的除草剂)的实例包括甲基磺草酮(mesotrione)(2-[4-(甲基磺酰基)-2-硝基苯甲酰基]环己烷-1,3-二酮)、环磺酮(tembotrione)(2-{2-氯-4-(甲基磺酰基)-3-[(2,2,2-三氟乙氧基)甲基]苯甲酰基}-1,3-环己二酮或2-{2-氯-4-甲磺酰基-3-[(2,2,2-三氟乙氧基)甲基]苯甲酰基}环己烷-1,3-二酮)和苯吡唑草酮(topramezone)([3-(4,5-二氢-3-异噁唑基)-2-甲基-4-(甲基磺酰基)苯基](5-羟基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲酮)。
有多种野生、野性和杂草水稻品种作为杂草存在于水稻中，包括红稻。水稻中的杂草与水稻作物争夺养分、水和空间。杂草水稻品种特别难以防治，因为它们在遗传上与商业水稻密切相关，而且还由于其形态变异、生长行为、交叉授粉的能力以及与作物品种的高生物亲和力。防治杂草水稻需要使用对作物也有剧毒的除草剂。实际上，所有已知的杀死杂草水稻的除草剂也会显著损害水稻作物，而杂草对于商业水稻耐受的除草剂也是耐受的。
目前的杂草水稻防治方法昂贵、费时并且通常不能完全消除杂草侵害。不完全防治是有问题的，因为即使少量的残留杂草水稻也可以产生足够的种子来恢复原始的土壤种子库种群水平。
需要有效且高度选择性地防治杂草水稻而不损害想要的商业水稻。因此，需要找到一种有效地防治杂草水稻而不显著损害水稻作物的除草混合物。
发明内容
本发明提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的除草混合物，其中所述除草混合物包含：a)抑制乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的除草剂或抑制乙酰乳酸(或乙酰羟酸)合酶(ALS或AHAS))的除草剂或抑制4-羟苯基丙酮酸双加氧酶(HPPD)的除草剂，或其任意组合，和b)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明还提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的除草组合物，其中所述除草组合物包含本文公开的任何除草混合物和至少一种农业上可接受的载体。
本发明还提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的除草组合物，其中所述除草组合物包含：a)至少一种抑制ACCase的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或抑制HPPD的除草剂，或其任意组合，和b)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明提供了一种除草组合物，其包含：a)抑制ACCase的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或抑制HPPD的除草剂，或其任意组合，和b)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明还提供了一种除草组合物，其包含(i)喔草酯和双苯噁唑酸的混合物，和(ii)至少一种农业上可接受的载体。
本发明还提供了一种除草组合物，其包含(i)喹禾灵和双苯噁唑酸的混合物，和(ii)至少一种农业上可接受的载体。
本发明还提供了一种除草组合物，其包含(i)咪草烟和双苯噁唑酸的混合物，和(ii)至少一种农业上可接受的载体。
本发明还提供了一种除草组合物，该组合物包含(i)咪草啶酸和双苯噁唑酸的混合物，和(ii)至少一种农业上可接受的载体。
本发明还提供了一种试剂盒，其包含本文公开的除草混合物或组合物中的任一种或其组分。
本发明还提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的方法，其包括将本文公开的除草混合物或组合物中的任一种施用于不想要的植物的场所(locus)，以有效地防治不想要的植物。
本发明还提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的方法，其包括将以下组分施用于不想要的植物的场所以有效地防治不想要的植物：a)有效量的抑制ACCase的除草剂或抑制HPPD的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂，或其任意组合，和b)有效量的至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明还提供了一种降低抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用的方法，其中所述方法包括将有效量的至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物，从而与抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂对未施用安全剂的相同水稻作物的植物毒性作用相比，有效地降低其对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用。
本发明还提供了一种提高抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂的抗性的方法，其包括将有效量的至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物，从而与未施用安全剂的相同水稻作物对抑制ACCase的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂的抗性相比，提高抗除草剂的水稻作物对其的抗性。
本发明还提供了一种在抗除草剂的水稻作物中降低抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂的除草剂作用的方法，其包括将至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物的植物和/或种子，从而与在未施用安全剂的相同水稻作物中的除草剂作用相比，降低在抗除草剂的水稻作物中的除草剂作用。
本发明还提供了一种提高抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂的抗性的方法，其中将所述抗除草剂的水稻作物使用至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂处理。
本发明还提供了一种抗除草剂的水稻作物，其对抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂具有提高的抗性，其中将所述水稻作物使用至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂处理。
本发明还提供了一种协同组合物，其包含(i)至少一种对a)抑制ACCase的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或抑制HPPD的除草剂或其任意组合具有抗性的突变体，和(ii)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明还提供了一种协同组合物，其包含(i)至少一种对抑制ACCase的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或抑制HPPD的除草剂或其任意组合具有抗性的水稻作物，和(ii)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明还提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的方法，其包括：(i)将至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物的种子，和(ii)将有效量的抑制ACCase的除草剂或抑制HPPD的除草剂或抑制ALS(AHLS)的除草剂或其任意组合施用于不想要的植物的场所，以有效地防治不想要的植物。
附图说明
图1示出了在施用喹禾灵(quizalofop-ethyl)后，双苯噁唑酸对突变水稻再生长的作用。
图2A、2B和2C示出了喹禾灵对在安全剂的存在下的(A)野生型水稻、对在安全剂的存在下的(B)突变型和(C)突变型的响应曲线。
图3A、3B和3C示出了咪草啶酸对在安全剂的存在下的(A)野生型水稻、对在安全剂的存在下的(B)突变型和(C)突变型的响应曲线。
具体实施方案
定义
在详细阐述本主题之前，提供本文中使用的某些术语的定义应是有帮助的。除非另有定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语具有与该主题所属领域的技术人员通常所理解的相同含义。
如本文所用，短语“农业上可接受的载体”意指在本领域中已知并接受的用于形成农业或园艺用途的制剂的载体。
如本文所用，术语“作物”包括整个植物、植物器官(例如叶、茎、细枝、根、树干、枝、芽、果实等)、植物细胞或植物种子。该术语涵盖植物作物，如果实。该术语还涵盖植物繁殖材料，其可包括种子和孢子，以及营养结构，如鳞茎(bulb)、球茎(corm)、块茎(tuber)、根茎(rhizome)、根干(roots stem)、基生芽(basal shoot)、匍匐枝(stolon)和芽(bud)。
如本文所用，术语“抗除草剂的水稻作物”是指对特定除草剂具有抗性的水稻作物突变系。抗除草剂的水稻作物包括转基因和非转基因水稻作物。非转基因抗除草剂的水稻作物可通过诸如选择的技术获得。
抗除草剂的水稻作物是指但不限于对抑制HPPD的除草剂和/或抑制ACCase的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂具有抗性的水稻。抗除草剂的水稻作物包括但不限于ML0831266-03093(ATCC保藏号PTA-13620)、ML0831265-01493(ATCC保藏号PTA-12933、突变G2096S)、PL121448M2-80048(ATCC保藏号PTA-121362)和PL1214418M2-73009(ATCC保藏号PTA-121398)(在例如WO2015/025031中所记载的)。
如本文所用，术语“场所”不仅包括其中可已经生长了不想要的植物的区域，还包括其中还未出现不想要的植物的区域和正在耕种的区域。
如本文所用，术语“出苗后”是指将除草混合物或组合物施用于已经从土壤中萌出的不想要的植物。术语“出苗前”是指在不想要的植物从土壤中萌出之前，将除草混合物或组合物施用于生境、不想要的植物或土壤。
如本文所用，术语“防治不想要的植物”是指干扰不想要的植物的正常生长和发育。防治行动的实例包括但不限于抑制根生长、抑制芽生长、抑制芽萌出、抑制种子产生或减少不想要的植物的生物量。
如本文所用，当描述用于防治不想要的植物的方法时，术语“有效”意指所述方法提供对不想要的植物的良好防治水平，而不显著干扰作物的正常生长和发育。
如本文所用，术语“有效量”是指当摄入、接触或感测(sense)时，足以实现良好防治水平的混合物的量。
如本文所用，术语“表面活性剂”是指赋予乳化性、稳定性、铺展性、润湿性、分散性或其他表面改性性能的任何农业上可接受的物质。
如本文所用，术语“混合物”或“结合(combination)”是指但不限于任何物理形式的结合，例如共混物、溶液、合金(alloy)等。
如本文所用，除非另有明确说明，否则本文所用的术语“一”(“a”or“an”)包括单数和复数。因此在本申请中，术语“一”或“至少一”可互换使用。
如本文所用，当与数值结合使用时，术语“约”包括指示值的±10％范围。此外，本文中针对相同组分或性能的所有范围的端点均包括端点，可独立组合，并且包括所有中间点和范围。应理解，在提供参数范围的情况下，本发明还提供该范围内的所有整数及其十分位。例如，“0.1-99重量％”包括0.1重量％、0.2重量％、0.3重量％等至最高达99重量％。
如本文所用，当与水稻作物的生长条件结合使用时，术语“低光强度”意指光强度小于300μM/m2/秒。优选地，光强度小于150μM/m2/秒。
如本文所用，当与水稻作物的生长条件结合使用时，术语“高光强度”意指光强度大于700μM/m2/秒。优选地，光强度为800μM/m2/秒至1000μM/m2/秒。
本发明涉及安全剂用于提高抗除草剂的水稻作物对除草剂的抗性的用途，从而使除草剂的施用不会显著损害抗除草剂的水稻作物。
除草剂对水稻作物的作用差异很大，并且是不可预测的。通常，对杂草水稻具有高效力的除草剂对水稻作物也是毒性的，并可损害水稻作物。因此，在本领域中需要有效防治杂草水稻并且不显著损害水稻作物的除草混合物和组合物。
本发明提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的除草混合物，其中所述除草混合物包含：a)抑制乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的除草剂或抑制4-羟苯基丙酮酸双加氧酶(HPPD)的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂，或其任意组合，和b)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
在一些实施方案中，除草混合物包含抑制ACCase的除草剂。抑制ACCase的除草剂可包括但不限于喔草酯、喹禾灵、精喹禾灵(quizalofop-P-ethyl)、四氢糠基酯(quizalofop-P-terfuryl)、精喹禾灵甲酯(quizalofop-P-methyl)和精吡氟禾草灵(fluazifop-P)及其酯衍生物。在一些实施方案中，抑制ACCase的除草剂为喔草酯。在一些实施方案中，抑制ACCase的除草剂为喹禾灵。
在一些实施方案中，除草混合物包含抑制HPPD的除草剂。抑制HPPD的除草剂可包括但不限于甲基磺草酮、环磺酮、异噁氟草(isoxaflutole)和苯吡唑草酮。在一些实施方案中，抑制HPPD的除草剂为甲基磺草酮。在一些实施方案中，抑制HPPD的除草剂为环磺酮。在一些实施方案中，抑制HPPD的除草剂为异噁氟草。
在一些实施方案中，除草混合物包含抑制ALS(AHAS)的除草剂。抑制ALS(AHAS)的除草剂可包括但不限于咪草烟、咪草啶酸、甲咪唑烟酸和咪唑烟酸。在一些实施方案中，抑制ALS(AHAS)的除草剂为咪草烟。在一些实施方案中，抑制ALS(AHAS)的除草剂为咪唑烟酸。在一些实施方案中，抑制ALS(AHAS)的除草剂为咪草啶酸。
可用于本申请的混合物和组合物中的除草剂安全剂可包括但不限于8-喹啉基-氧基乙酸(例如喹氧乙酸(cloquintocet-mexyl))、1-苯基-5-卤代烷基-1,2,4-三唑-3-羧酸(如解草唑(fenchlorazole、fenchlorazole-ethyl)、1-苯基-5-烷基-2-吡唑啉-3,5-二羧酸(如吡唑解草酯(mefenpyr、mefenpyr-diethyl))、4,5-二氢-5,5-二芳基-1,2-噁唑-3-羧酸(如双苯噁唑酸(isoxadifen、isoxadifen-ethyl))、二氯乙酰胺(如烯丙酰草胺(dichlormid)、解草噁唑(furilazole)、解草酮(benoxacor)和dicyclonon))、α-(烷氧基亚氨基)-苯乙腈(如解草胺腈(cyometrinil)和解草腈(oxabetrinil))、苯乙酮肟(如氟草肟(fluxofenim))、4,6-二卤代-2-苯基嘧啶(如解草啶(fenclorim))、N-((4-烷基氨基甲酰基)-苯磺酰基)-2-苯甲酰胺(如环丙磺酰胺(cyprosulfamide))、1,8-萘二甲酸酐、2-卤-4-卤代烷基-1,3-噻唑-5-羧酸和2-卤-4-卤代烷基-1,3-噻唑-5-羧酸酯(如解草胺(flurazole))、N-烷基-O-苯基氨基甲酸酯(如mephenate)、N-烷基-N'-芳基尿素(例如杀草隆(daimuron)和苄草隆(cumyluron))、S-烷基-N-烷基硫代氨基甲酸酯(如哌草丹(dimepiperate))和硫代磷酸酯(例如增效磷(dietholate))以及其农业上有用的盐；在存在羧酸官能的情况下，以及其农业上有用的衍生物，如酰胺、酯和硫代酯。
在一些实施方案中，除草剂安全剂为双苯噁唑酸。在一些实施方案中，除草剂安全剂为喹氧乙酸。在一些实施方案中，除草剂安全剂为AD-67。在一些实施方案中，除草剂安全剂为解草酮。在一些实施方案中，除草剂安全剂为解草啶。
在一些实施方案中，除草混合物中除草剂与除草剂安全剂的重量比为1:4至10:1。在一些实施方案中，除草混合物中除草剂与除草剂安全剂的重量比为1:4或1:3或1:2或1:1或2:1或3:1或4:1或5:1或6:1或7:1或8:1或9:1或10:1。
在一些实施方案中，除草混合物包含约0.1重量％至约99重量％的除草剂。在一些实施方案中，除草混合物包含约0.1重量％至约25重量％的除草剂。在一些实施方案中，除草混合物包含约25重量％至约50重量％的除草剂。在一些实施方案中，除草混合物包含约50重量％至约75重量％的除草剂。在一些实施方案中，除草混合物包含约75重量％至约99重量％的除草剂。
在一些实施方案中，除草混合物包含约0.1重量％至约90重量％的安全剂。在一些实施方案中，除草混合物包含约0.1重量％至约25重量％的安全剂。在一些实施方案中，除草混合物包含约25重量％至约50重量％的安全剂。在一些实施方案中，除草混合物包含约50重量％至约75重量％的安全剂。在一些实施方案中，除草混合物包含约75重量％至约90重量％的安全剂。
在一些实施方案中，水稻作物为抗除草剂的。在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物具有至少一个赋予抗性的基因突变。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂具有抗性。在一些实施方案中，抗除草剂的作物对抑制HPPD的除草剂具有抗性。在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ALS(AHAS)的除草剂具有抗性。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase或HPPD或ALS的除草剂或其任意组合具有抗性，并且安全剂有效地提高抗除草剂的水稻作物对除草混合物中的抑制ACCase或HPPD或ALS(AHAS)的除草剂或其任意组合的抗性。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂具有抗性，并且安全剂有效地提高抗除草剂的水稻作物对除草混合物中的抑制ACCase的除草剂的抗性。在一些实施方案中，抗除草剂的作物对抑制HPPD的除草剂具有抗性，并且安全剂有效地提高抗除草剂的水稻作物对除草混合物中的抑制HPPD的除草剂的抗性。在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ALS(AHAS)的除草剂具有抗性，并且安全剂有效地提高抗除草剂的水稻作物对除草混合物中的抑制ALS(AHAS)的除草剂的抗性。
在一些实施方案中，安全剂和突变的结合有效地提高除草剂的ED50。
在一些实施方案中，当将安全剂施用于抗除草剂的水稻作物时，其有效地提高除草剂的ED50。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂具有抗性，所述抑制ACCase的除草剂与除草混合物中的抑制ACCase的除草剂相同。在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂具有抗性，所述抑制ACCase的除草剂与除草混合物中的抑制ACCase的除草剂不同。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制HPPD的除草剂具有抗性，所述抑制HPPD的除草剂与除草混合物中的抑制HPPD的除草剂相同。在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制HPPD的除草剂具有抗性，所述抑制HPPD的除草剂与除草混合物中的抑制HPPD的除草剂不同。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ALS(AHAS)的除草剂具有抗性，所述抑制ALS(AHAS)的除草剂与除草混合物中的抑制ALS(AHAS)的除草剂相同。在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ALS(AHAS)的除草剂具有抗性，所述抑制ALS(AHAS)的除草剂与除草混合物中的抑制ALS(AHAS)的除草剂不同。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物含有赋予对抑制HPPD的除草剂的抗性的1个或2个或3个或更多个基因。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物含有赋予对抑制ACCase的除草剂的抗性的1个或2个或3个或更多个基因。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物含有赋予对抑制ALS(AHAS)的除草剂的抗性的1个或2个或3个或更多个基因。
在一些实施方案中，不想要的植物为单子叶植物、双子叶植物和莎草(sedge)。在一些实施方案中，单子叶植物为杂草水稻、稗草、千金子属(sprangletop species)、阔叶信号草(broadleaf signalgrass)、马唐草(crabgrass)、稷属(panicum)或其他草属种。在一些实施方案中，杂草水稻为红稻。在一些实施方案中，莎草为黄纳特格拉斯(yellownutsedge)、牵牛花属种(morningglory species)或大果田菁(hemp sesbania)。
在一些实施方案中，环境条件影响抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂或抑制HPPD的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或其组合的抗性程度。在一些实施方案中，与高光强度条件相比，当抗除草剂的水稻作物在低光强度条件下生长时，抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂或抑制HPPD的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或其组合的抗性程度降低。
在一些实施方案中，除草剂安全剂有效地降低除草剂对在低光强度条件下生长的抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用。在一些实施方案中，除草剂安全剂有效地降低除草剂对在高光强度条件下生长的抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用。
在一些实施方案中，除草剂安全剂有效地提高在低光强度条件下生长的抗除草剂的水稻作物的抗性。在一些实施方案中，除草剂安全剂有效地提高在高光强度条件下生长的抗除草剂的水稻作物的抗性。
植物毒性的水平和/或安全剂的保护作用可通过植物的再生长来测量，所述植物的再生长包括在将植物的顶部切除后，在规定的时间内再生的新组织的高度和/或重量。
在一些实施方案中，环境条件可包括但不限于光强度和温度。
作物的除草剂抗性程度受其生长和新陈代谢速率的影响。
例如，在低光强度条件(如多云或有雾)下和/或在低温(如低于65°F)下，作物的生长和新陈代谢速率降低，因此作物的除草抗性降低。
在一些实施方案中，与除草剂对未施用安全剂的相同水稻作物的植物毒性作用相比，安全剂将除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用有效地降低至少10％。在一些实施方案中，与除草剂对未施用安全剂的相同水稻作物的植物毒性作用相比，安全剂将除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用有效地降低至少15％。在一些实施方案中，与除草剂对未施用安全剂的相同水稻作物的植物毒性作用相比，安全剂将除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用有效地降低至少20％。
在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物的抗性相比，安全剂将抗除草剂的水稻作物对除草剂的抗性有效地提高至少10％。在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物的抗性相比，安全剂将水稻作物对除草剂的抗性有效地提高至少15％。在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物的抗性相比，安全剂将水稻作物对除草剂的抗性有效地提高至少70％。
在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物中的除草剂作用相比，安全剂将抗除草剂的水稻作物中的除草剂作用有效地降低至少10％。在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物中的除草剂作用相比，安全剂将抗除草剂的水稻作物中的除草剂作用有效地降低至少15％。在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物中的除草剂作用相比，安全剂将抗除草剂的水稻作物中的除草剂作用有效地降低至少20％。在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物中的除草剂作用相比，安全剂将抗除草剂的水稻作物中的除草剂作用有效地降低至少70％。
本发明还提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的除草组合物，其中所述除草组合物包含本文公开的除草混合物中的任一种和至少一种农业上可接受的载体。
在一些实施方案中，组合物中除草剂和安全剂的量为约0.1-99重量％，基于组合物的总重量计。在一些实施方案中，组合物中除草剂和安全剂的量为约0.1-25重量％，基于组合物的总重量计。在一些实施方案中，组合物中除草剂和安全剂的量为约25-50重量％，基于组合物的总重量计。在一些实施方案中，组合物中除草剂和安全剂的量为约50-75重量％，基于组合物的总重量计。在一些实施方案中，组合物中除草剂和安全剂的量为约75-99重量％，基于组合物的总重量计。
在一些实施方案中，农业上可接受的载体选自表面活性剂、固体载体、液体载体及其组合。
合适的表面活性剂的实例包括但不限于非离子、阴离子、阳离子和两性类型，如烷氧基化的脂肪醇、乙氧基化的聚山梨醇酯(例如tween20)、乙氧基化的蓖麻油、木质素磺酸盐、脂肪酸磺酸盐(例如月桂基磺酸盐)、磷酸酯(如醇烷氧基化物的磷酸酯、烷基酚烷氧基化物的磷酸酯和苯乙烯基苯酚乙氧基化物的磷酸酯)、磺化萘和萘衍生物与甲醛的缩合物、萘与苯酚和甲醛的缩合物、萘磺酸与苯酚和甲醛的缩合物、烷基芳基磺酸盐、乙氧基化的烷基酚和芳基酚、聚亚烷基二醇山梨糖醇酯、碱金属、木质磺酸盐的钠盐、三苯乙烯基酚乙氧基化物磷酸酯、脂族醇乙氧基化物、烷基酚乙氧基化物、环氧乙烷/环氧丙烷嵌段共聚物、接枝共聚物以及聚乙烯醇-乙酸乙烯酯共聚物。可根据需要使用本领域已知的其他表面活性剂。
可用于本发明组合物中的合适的液体载体的实例包括但不限于：水；芳烃，如烷基苯和烷基萘；醇，如甲醇、环己醇和癸醇；乙二醇；聚丙二醇；二丙二醇；N,N-二甲基甲酰胺；二甲基亚砜；二甲基乙酰胺；N-烷基吡咯烷酮，如N-甲基-2-吡咯烷酮；石蜡；各种油，如橄榄油、蓖麻油、亚麻籽油、桐油、芝麻油、玉米油、花生油、棉籽油、大豆油、菜籽油或椰子油；脂肪酸酯；酮，如环己酮、2-庚酮、异佛尔酮和4-羟基-4-甲基-2-戊酮；等等。
可用于本发明组合物中的合适的固体载体的实例包括但不限于：矿物土，如硅胶、硅酸盐、滑石、高岭土、绢云母、活性白土(attaclay)、石灰石、膨润土、石灰、白垩、红玄武土、芒硝、黄土、粘土、白云石、沸石、硅藻土、碳酸钙、硫酸钙、硫酸镁、氧化镁、碳酸钠和碳酸氢钠以及硫酸钠；地面合成材料(ground synthetic material)；肥料，如硫酸铵、磷酸铵、硝酸铵、尿素，以及植物来源的产品，如谷物粉、树皮粉、木粉和果壳粉；纤维素粉；和其他固体载体。
在一些实施方案中，除草组合物还包含至少一种选自湿润剂、消泡剂、胶粘剂、中和剂、增稠剂、粘合剂、螯合剂(sequestrate)、肥料和防冻剂的额外的组分。
本发明还提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的除草组合物，其中所述除草组合物包含：a)至少一种抑制ACCase的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或抑制HPPD的除草剂，或其任意组合，和b)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明提供了一种除草组合物，其包含：a)抑制ACCase的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或抑制HPPD的除草剂，和b)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明还提供了一种除草组合物，其包含(i)喔草酯和双苯噁唑酸的混合物，和(ii)至少一种农业上可接受的载体。
本发明还提供了一种除草组合物，其包含(i)喹禾灵和双苯噁唑酸的混合物，和(ii)至少一种农业上可接受的载体。
本发明还提供了一种除草组合物，其包含(i)咪草烟和双苯噁唑酸的混合物，和(ii)至少一种农业上可接受的载体。
本发明还提供了一种除草组合物，其包含(i)咪草啶酸和双苯噁唑酸的混合物，和(ii)至少一种农业上可接受的载体。
本发明的组合物可在使用时制备或在使用时稀释。本发明的组合物还可为即用型组合物。
本发明的组合物可以以任何常规形式使用或制备，例如以双包装形式，或例如作为可湿性粉剂(WP)、乳液浓缩剂(EC)、微乳液浓缩剂(MEC)、水溶性粉剂(SP)、水溶性浓缩剂(SL)、悬浮乳剂(SE)、油分散剂(OD)、浓缩乳剂(BW)(如水包油乳剂和油包水乳剂)、可喷雾溶液剂或乳剂、胶囊悬浮剂(CS)、悬浮浓缩剂(SC)、悬浮浓缩剂、撒粉产品(DP)、油溶性溶液剂(OL)、微粒形式的颗粒剂(GR)、可喷洒颗粒剂、包衣颗粒剂和吸收颗粒剂、用于土壤施用或播撒的颗粒剂、水溶性颗粒剂(SG)、水分散性颗粒剂(WDG)、ULV制剂、微胶囊剂或蜡剂(waxes)。这些单个的制剂类型是本领域已知的。
本发明的组合物还可配制成种子处理组合物。对于种子处理，可将组合物配制成干种子处理粉剂(DS)、种子处理凝胶剂(GF)、浆状种子处理水分散粉剂(WS)、种子处理水溶性粉剂(SS)、种子处理溶液剂(LS)、种子处理乳剂(ES)、悬浮浓缩剂(SC)、种子处理可流动浓缩剂(FS)、胶囊悬浮剂(CS)、涂有农药的种子(PS)。
优选地，用于种子处理的组合物配制成种子处理乳剂(ES)、悬浮浓缩剂(SC)、种子处理可流动浓缩剂(FS)和胶囊悬浮剂(CS)。所述组合物可使用农业上可接受的载体、表面活性剂或本领域已知的配制科技和配制技术中惯用的其他促进施用的佐剂配制。
水溶液应用形式可由乳液浓缩剂、悬浮剂、糊剂、可湿性粉剂或水分散性颗粒剂通过添加水制备。为了制备乳剂、糊剂或油分散剂，可通过润湿剂、增稠剂、分散剂或乳化剂将组合物的组分本身或溶于油或溶剂中而在水中均质化。或者，还可制备包含活性成分、润湿剂、增稠剂、分散剂或乳化剂以及溶剂或油(如果需要)的浓缩剂，其适于用水稀释。
可通过将安全剂和稀释剂配制成合适的拌种组合物形式(如上所述)将拌种组合物施用于种子。拌种组合物可含有例如封装形式的单一活性成分或活性成分的组合。在一些实施方案中，用于种子处理施用的桶混组合物可包含1-85重量％的除草剂和安全剂，基于组合物的总重量计，组合物的其余部分包含固体或液体助剂(包括例如溶剂、表面活性剂等)。用于种子处理施用的典型的预混组合物可包含0.5-99.9重量％的除草剂和安全剂，基于组合物的总重量计，组合物的其余部分包含固体或液体助剂(包括例如溶剂、表面活性剂等)。
本发明还提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的方法，其包括将本文公开的除草混合物中的任一种施用于不想要的植物的场所，以有效地防治不想要的植物。
本发明还提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的方法，其包括将本文公开的除草组合物的任一种施用于不想要的植物的场所，以有效地防治不想要的植物。
在一些实施方案中，除草混合物的施用率为1g/ha至600g/ha。在一些实施方案中，除草混合物的施用率为1g/ha至500g/ha。在一些实施方案中，除草混合物的施用率为1g/ha至300g/ha。在一些实施方案中，除草混合物的施用率为80g/ha至300g/ha。在一些实施方案中，除草混合物的施用率为125g/ha。在一些实施方案中，除草混合物的施用率为350g/ha至500g/ha。
在一些实施方案中，除草混合物的施用率为0.1升/ha至300升/ha。在一些实施方案中，除草混合物的施用率为100升/ha至300升/ha。在一些实施方案中，除草混合物的施用率为约200升/ha。在一些实施方案中，除草混合物的施用率为0.1升/ha至10升/ha。在一些实施方案中，除草混合物的施用率为0.2升/ha至5升/ha。在一些实施方案中，除草混合物的施用率为1.25升/ha。
在一些实施方案中，除草混合物可在种植前作为种子处理剂施用于水稻作物的种子。在一些实施方案中，除草混合物以0.1g/100kg种子至1000g/100kg种子的比率施用于种子。在一些实施方案中，除草混合物以1g/100kg种子至750g/100kg种子的比率施用于种子。在另一个实施方案中，除草混合物以30g/100kg种子至300g/100kg种子的比率施用于种子。
在一些实施方案中，所述方法包括施用有效量的抑制ACCase的除草剂。抑制ACCase的除草剂可包括但不限于喔草酯、喹禾灵、精喹禾灵、四氢糠基酯和精喹禾灵甲酯。在一些实施方案中，抑制ACCase的除草剂为喔草酯。在一些实施方案中，抑制ACCase的除草剂为喹禾灵。
在一些实施方案中，所述方法包括施用有效量的抑制HPPD的除草剂。抑制HPPD的除草剂可包括但不限于甲基磺草酮和环磺酮。异噁氟草为抑制HPPD的除草剂的另一个实例。
在一些实施方案中，所述方法包括施用有效量的抑制ALS(AHAS)的除草剂。抑制ALS(AHAS)的除草剂可包括但不限于咪草烟、咪草啶酸、甲咪唑烟酸和咪唑烟酸。在一些实施方案中，抑制ALS(AHAS)的除草剂为咪草啶酸。
在一些实施方案中，安全剂为双苯噁唑酸。
在一些实施方案中，所述方法包括将两种或更多种安全剂施用于抗除草剂的水稻作物或其种子。在一些实施方案中，所述方法包括用两种或更多种安全剂的混合物处理抗除草剂的水稻作物或其种子。
在一些实施方案中，将除草剂和/或安全剂施用于水稻作物、水稻作物的场所和/或水稻作物的繁殖材料。
在一些实施方案中，在出苗前，将除草剂和/或安全剂施用于不想要的植物的场所。在一些实施方案中，在出苗后，将除草剂和/或安全剂施用于不想要的植物的场所。
结合的施用率可根据期望的效果变化。
在一些实施方案中，如果在没有安全剂的情况下施用除草剂，则除草剂以抑制水稻作物生长的比率施用。
在一些实施方案中，除草剂的施用率为约1g/ha至约250g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约1g/ha至约200g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约1g/ha至约150g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约1g/ha至约75g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为g/ha至约20g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约1g/ha至约10g/ha。
在一些实施方案中，除草剂的施用率为2g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为6g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为18g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为54g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为162g/ha。
在一些实施方案中，除草剂的施用率为2.2g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为6.6g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为19.7g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为54.9g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为177.3g/ha。
在一些实施方案中，除草剂的施用率为约25g/ha至约250g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约25g/ha至约50g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约50g/ha至约250g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约50g/ha至约100g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约100g/ha至约200g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约200g/ha至约250g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约30g/ha至约70g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约5g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约10g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约15g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约20g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约30g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约40g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约50g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约60g/ha。在一些实施方案中，除草剂的施用率为约70g/ha。
在一些实施方案中，安全剂的施用率为约1g/ha至约150g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为约1g/ha至约100g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为约5g/ha至约50g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为约1g/ha至约12.5g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为约12.5g/ha至约25g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为约25g/ha至约50g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为约50g/ha至约100g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为约100g/ha至约150g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为约12.5g/ha至约100g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为约12.5g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为约25g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为约50g/ha。在一些实施方案中，安全剂的施用率为100g/ha。
在一些实施方案中，将安全剂施用于抗除草剂的水稻作物的种子。
在一些实施方案中，安全剂的施用率为每kg种子0.1g至5g安全剂。
在一些实施方案中，安全剂的施用率为每kg种子0.5g至2g安全剂。
在一些实施方案中，安全剂的施用率为每kg种子0.5g至1g安全剂。
在一些实施方案中，安全剂的施用率为每kg种子1g至2g安全剂。在一些实施方案中，安全剂的施用率为每kg种子0.5g安全剂。在一些实施方案中，安全剂的施用率为每kg种子1g安全剂。在一些实施方案中，安全剂的施用率为每kg种子2g安全剂。
在一些实施方案中，除草剂和安全剂同时施用、分开施用或依序施用。在一些实施方案中，除草剂和安全剂在桶混物中同时施用。
在一些实施方案中，桶混物中安全剂与除草剂的重量比为约1:1至约1:5。
在一些实施方案中，将除草剂在生长季节施用一至三次。
在一些实施方案中，将除草剂和安全剂制备成单独的制剂，并且各制剂按本身施用或稀释至预定浓度施用。在其他实施方案中，将除草剂和安全剂制备成单独的制剂，并且当稀释至预定浓度时将制剂混合。在其他实施方案中，将除草剂和安全剂制备成单独的制剂，并且在稀释至预定浓度之前或之后将制剂以桶混物的形式混合。在其他实施方案中，将除草剂和安全剂一起配制，并将制剂按自身施用，或将制剂稀释至预定浓度。
在一些实施方案中，将除草剂和/或安全剂通过叶面施用、基施、土壤施用、土壤掺入、土壤注入或种子处理来施用。
在一些实施方案中，在施用除草剂之前7天、6天、5天、4天、3天、2天或1天施用安全剂。
在一些实施方案中，在施用除草剂之后1天、2天、3天或4天施用安全剂。
在一些实施方案中，将安全剂与除草剂的施用平行施用。
在一些实施方案中，将安全剂和除草剂在同一天施用。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物中除草剂的新陈代谢速率大于3天、5天、10天、20天、30天或50天。
在一些实施方案中，抗除草剂抗性水稻作物对抑制ACCase的除草剂具有抗性。在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物的抗性相比，安全剂有效地提高抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂的抗性。在一些实施方案中，与相同除草剂对未施用安全剂的相同水稻作物的植物毒性作用相比，安全剂有效地降低抑制ACCase的除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用。在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物中的除草剂作用相比，安全剂有效地降低抗除草剂的水稻作物中的抑制ACCase的除草剂的除草剂作用。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制HPPD的除草剂具有抗性。在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物的抗性相比，安全剂有效地提高抗除草剂的水稻作物对抑制HPPD的除草剂的抗性。在一些实施方案中，与相同除草剂对未施用安全剂的相同水稻作物的植物毒性作用相比，安全剂有效地降低抑制HPPD的除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用。在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物中的除草剂作用相比，安全剂有效地降低抗除草剂的水稻作物中的抑制HPPD的除草剂的除草剂作用。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ALS(AHAS)的除草剂具有抗性。在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物的抗性相比，安全剂有效地提高抗除草剂的水稻作物对抑制ALS(AHAS)的除草剂的抗性。在一些实施方案中，与相同除草剂对未施用安全剂的相同水稻作物的植物毒性作用相比，安全剂有效地降低抑制ALS(AHAS)的除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用。在一些实施方案中，与未施用安全剂的相同水稻作物的除草剂作用相比，安全剂有效地降低抗除草剂的水稻作物中的抑制ALS(AHAS)的除草剂的除草剂作用。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂具有抗性，所述抑制ACCase的除草剂与所施用的抑制ACCase的除草剂相同。在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂具有抗性，所述抑制ACCase的除草剂与所施用的抑制ACCase的除草剂不同。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制HPPD的除草剂具有抗性，所述抑制HPPD的除草剂与所施用的抑制HPPD的除草剂相同。在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制HPPD的除草剂具有抗性，所述抑制HPPD的除草剂与所施用的抑制HPPD的除草剂不同。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ALS(AHAS)的除草剂具有抗性，所述抑制ALS(AHAS)的除草剂与所施用的抑制ALS(AHAS)的除草剂相同。在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物对抑制ALS(AHAS)的除草剂具有抗性，所述抑制ALS(AHAS)的除草剂与所施用的抑制ALS(AHAS)的除草剂不同。
在一些实施方案中，不想要的植物为单子叶植物、双子叶植物和莎草。在一些实施方案中，单子叶植物为杂草水稻、稗草、千金子属、阔叶信号草、马唐草、稷属或其他草属种。在一些实施方案中，杂草水稻为红稻。在一些实施方案中，莎草为黄纳特格拉斯、牵牛花属种或大果田菁。
本发明还提供了一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的方法，其包括将以下组分施用于不想要的植物的场所以有效地防治不想要的植物：a)有效量的抑制ACCase的除草剂或抑制HPPD的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂，或其任意组合，和b)有效量的至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明还提供了一种降低抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用的方法，其中所述方法包括将有效量的至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物，从而与未施用安全剂的相同水稻作物相比，有效地降低抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用。
本发明还提供了一种提高抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂的抗性的方法，其包括将有效量的至少一种选自喹氧乙酸、AD-67、双苯噁唑酸、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物，从而与未施用安全剂的相同水稻作物的抗性相比，提高抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂的抗性。
本发明还提供了一种降低抗除草剂的水稻作物中的抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂的除草剂作用的方法，其包括将至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物的植物和/或种子，从而与未施用安全剂的相同水稻作物中的除草剂作用相比，降低抗除草剂的水稻作物中的除草剂作用。
在一些实施方案中，在施用除草剂之前7天、6天、5天、4天、3天、2天或1天施用安全剂。
在一些实施方案中，在施用除草剂之后1天、2天、3天或4天施用安全剂。
在一些实施方案中，将安全剂施用于抗除草剂的水稻作物平行于除草剂的施用。
在一些实施方案中，将安全剂和除草剂在同一天施用于抗除草剂的水稻作物。
在一些实施方案中，抗除草剂的水稻作物中除草剂的新陈代谢速率大于3天、5天、10天、20天、30天或50天。
本发明还提供了一种提高抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂的抗性的方法，其中将所述抗除草剂的水稻作物使用至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂处理。
本发明还提供了一种抗除草剂的水稻作物，其具有对抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂的提高的抗性，其中将水稻作物使用至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂处理。
本发明还提供了一种对抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂具有抗性的水稻作物，其中将所述水稻作物使用至少一种选自喹氧乙酸、AD-67、双苯噁唑酸、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂处理。
本发明还提供了一种使用至少一种选自以下的安全剂处理的水稻作物：双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合。
本发明还提供了一种试剂盒，其包含本文公开的除草混合物或组合物中的任一种或其组分。除了上述活性成分之外，所述试剂盒还可在提供的除草组合物中包含或单独地包含一种或多种额外的活性和/或非活性成分，如佐剂。某些试剂盒包含除草剂和除草剂安全剂，其各自在单独的容器中，并且各自任选地与载体结合。
本发明还提供了一种协同组合物，其包含(i)至少一种对抑制ACCase的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或抑制HPPD的除草剂或其任意组合具有抗性的突变水稻作物，和(ii)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明还提供了一种协同组合物，其包含(i)至少一种对抑制ACCase的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或抑制HPPD的除草剂或其任意组合具有抗性的水稻作物，和(ii)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
在农业领域中，通常理解术语“协同”如由Colby S.R.在journal Weeds,1967,15,第20-22页发表的题为“Calculation of the synergistic and antagonistic responsesof herbicide combinations”的文章中所定义的。两种活性组分的给定结合的预期效果可计算如下：
Figure GDA0003291002970000241
其中，E表示两种活性组分结合的预期效果，X和Y表示各活性组分单独的效果。当结合的测定效果大于使用Colby方程计算的结合的预期效果时，存在协同作用。
在本发明的上下文中，E表示在规定的除草剂剂量下，当安全剂施用于突变水稻作物时预期的抗性水平。X为在规定的除草剂剂量下，当安全剂施用于野生型水稻作物时的抗性水平。Y为在规定的除草剂剂量下，在不施用安全剂的情况下突变水稻作物的抗性水平。在规定的除草剂剂量下，在突变水稻上施用安全剂时测定的抗性水平大于使用Colby方程计算的预期的抗性水平时，存在协同作用。
在本申请中，在以下情形下也显示出协同作用：与(i)在安全剂的存在下，将除草剂施用于野生型水稻作物(即抗性水平仅归因于安全剂)，或(ii)在没有安全剂的情况下，将除草剂施用于突变水稻作物(即抗性水平仅归因于突变)相比，在安全剂的存在下将除草剂施用于突变水稻时对除草剂产生更高的抗性水平。
本发明提供了一种用于防治在水稻作物附近的不想要的植物的除草混合物，其中所述除草混合物包含：a)抑制乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的除草剂或抑制乙酰乳酸(或乙酰羟酸)合酶(ALS或AHAS)的除草剂或抑制4-羟苯基丙酮酸双加氧酶(HPPD)的除草剂或其任意组合，和b)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明还提供了一种用于防治水稻作物附近的不想要的植物的除草组合物，其中所述除草组合物包含本文公开的除草混合物中的任一种和至少一种农业上可接受的载体。
本发明还提供了一种用于防治水稻作物附近的不想要的植物的除草组合物，其中所述除草组合物包含：a)至少一种抑制ACCase的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或抑制HPPD的除草剂或其任意组合，和b)至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明还提供了一种除草组合物，其包含(i)喹禾灵和双苯噁唑酸的混合物，和(ii)至少一种农业上可接受的载体。
本发明还提供了一种用于防治在水稻作物附近的不想要的植物的方法，所述方法包括将本文公开的除草混合物或组合物中的任一种施用于不想要的植物的场所，以有效地防治不想要的植物。
本发明还提供了一种用于防治水稻作物附近的不想要的植物的方法，所述方法包括将以下组分施用于不想要的植物的场所以有效地防治不想要的植物：a)有效量的抑制ACCase的除草剂或抑制HPPD的除草剂或抑制ALS(AHAS)的除草剂或其任意组合，和b)有效量的至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂。
本发明还提供了一种降低抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂对水稻作物的植物毒性作用的方法，其中所述方法包括将有效量的至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于水稻作物，从而与抑制ACCase的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂对未使用安全剂的相同水稻作物的植物毒性作用相比，有效地降低其对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用。
本发明还提供了一种提高水稻作物对抑制ACCase的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂的抗性的方法，其包括将有效量的至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物，从而与未施用安全剂的相同水稻作物的抗性相比，提高抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂和/或抑制ALS(AHAS)的除草剂和/或抑制HPPD的除草剂的抗性。
本发明还提供了一种水稻作物，其使用至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施处理。
本发明还提供了一种用于防治水稻作物附近的不想要的植物的方法，其包括：(i)将至少一种选自双苯噁唑酸、喹氧乙酸、AD-67、解草酮和解草啶以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物的种子，和(ii)将有效量的抑制ACCase的除草剂或抑制HPPD的除草剂或抑制ALS(AHLS)的除草剂或其任意组合施用于不想要的植物的场所，以有效地防治不想要的植物。
预期本文公开的各实施方案可适用于各其他公开的实施方案。因此，本文描述的各要素的所有组合均在本发明的范围内。此外，在混合物实施方案中所述的要素可用于本文所述的组合物、方法、用途、试剂盒和水稻作物实施方案中，反之亦然。
在下文中提供实施例有利于对本主题的更完整理解。以下实施例说明了制备和实施本主题的示例性模式。然而，本主题的范围不限于这些实施例中公开的具体实施方式，所述实施例仅出于说明的目的。通过考虑说明书和实施例，其他实施例对于本领域技术人员将是显而易见的。旨在将说明书(包括实施例)视为仅仅是示例性的，而不限制本主题的范围和精神。
实验细节
实施例1：喔草酯、喹禾灵和安全剂对突变水稻的影响
突变水稻
使用专有的ACCase抗性水稻品种(即RTA1)的种子。RTA1，ML0831265-01493(ATCC保藏号PTA-12933，突变G2096S)品种水稻种子由RiceTec提供。RTA1水稻栽培品种在ACCase基因中含有赋予ACCase抗性的单一突变。所述突变使酶对喹禾灵不敏感。
可类似地使用其他ACCase抗性和/或ALS(AHAS)抗性和/或HPPD抗性的水稻品种，包括但不限于ML0831266-03093(ATCC保藏号PTA-13620)、PL121448M2-80048(ATCC保藏号PTA-121362)和PL1214418M2-73009(ATCC保藏号PTA-121398)。
生长条件、材料和方法
将突变水稻种子种植在10x10x10 cm塑料盆中的商业温室土壤混合物中。各盆中放入250mL土壤，然后将种子放于土壤上，并用100-150mL土壤覆盖种子。每个盆中种植约8-10粒种子。然后，对各盆浇100mL Miracle Grow和Fertiplus(铁补充剂)的混合物。将盆置于温室中(38℃/20℃白天/夜间，在补充光照下14h光周期)。温室中的平均光强度为150μM/m2/秒。
使植物生长直到种植后10天，然后将盆转移到托盘上，使植物在水下生长。当植物达到3-5叶期时对其进行处理。
除草剂和安全剂的施用
通常，对植物使用40g/ha精喹禾灵(DuPontTM出售的
Figure GDA0003291002970000272
II)或50g/ha喔草酯通过移动喷嘴喷雾系统以200l/ha的喷雾量处理。将安全剂与除草剂在喷雾瓶中进行桶混。
评估除草剂的植物毒性和突变水稻对除草剂的抗性水平的方法
当单独施用除草剂以及将除草剂与安全剂结合施用时，使用以下方法评估除草剂对突变水稻植物的植物毒性。
处理后四天，切下植物的顶部，使得保留距土壤顶部约2.5cm的植物。使植物再生长3天，此时通过测量再生的组织的鲜重来称量再生量。比较切割后芽的再生量表明，除草剂对突变水稻植物的植物毒性水平以及除草剂与安全剂结合施用时突变水稻对除草剂的提高的抗性水平。
评估安全剂对于突变水稻对除草剂的抗性水平的影响的方法
当单独施用除草剂以及将除草剂与安全剂结合施用时，使用以下方法评估安全剂对于突变水稻对除草剂的抗性的影响。
处理后四天，切下植物的顶部，使得保留距土壤顶部约2.5cm的植物。使植物再生长3天，此时通过测量再生的组织的鲜重来称量再生量。
结果和讨论：
在不同安全剂的存在下，进行了功效试验，以确定喹禾灵和喔草酯对G2096S替代的水稻植物(ML0831265-01493(ATCC保藏号PTA-12933，突变G2096S)的影响。
将安全剂与抑制ACCase的除草剂以不同的重量比施用于水稻植物。结果示于表1。
表1：安全剂与喔草酯或喹禾灵的桶混物对突变水稻的耐受性的影响，其中耐受性通过再生量评估，所述再生量通过称量在2.5cm以上再生的材料量来计算
Figure GDA0003291002970000271
Figure GDA0003291002970000281
*列内具有相同字母的值没有显著差异(p＝0.05)
将对ACCase抗性水稻测定的植物再生量与对杂草水稻测定的再生量进行比较。杂草水稻被测试量的喹禾灵杀死，因此没有再生长。
还将安全剂相对于抑制ACCase的除草剂以各种重量比施用于水稻种子。结果示于表2。
表2：喔草酯或喹禾灵对用安全剂处理(作为种子处理)的ACCase抑制剂抗性水稻种子(ML0831265-01493(ATCC保藏号PTA-12933，突变G2096S))的耐受性的影响，其中所述耐受性通过再生量来评估，所述再生量通过称量在2.5cm以上再生的材料量来计算
Figure GDA0003291002970000282
Figure GDA0003291002970000291
*列内具有相同字母的值没有显著差异(p＝0.05)
图1示出了在施用喹禾灵后，双苯噁唑酸对突变水稻再生长的影响。
实施例2：在低和高光强度的生长条件下，安全剂对于突变水稻对除草剂的抗性的 影响
在低光强度(150uM/m2/秒)下生长时，40g/ha喹禾灵使突变水稻的生长减少80％。施用100g/ha双苯噁唑酸提高突变水稻对喹禾灵的抗性，从而使生长减少量低于20％。
在高光强度(800-1000uM/m2/秒)下，突变水稻对喹禾灵具有更高的抗性。在40g/ha下，没有抑制生长，但是在70g/ha下，生长减少了80％以上。施用双苯噁唑酸降低了喹禾灵的损害作用，因此在任何试验施用率下再生长都不会受到显著影响。结果示于表3。
表3
Figure GDA0003291002970000292
Figure GDA0003291002970000301
*列内具有相同字母的值没有显著差异(p＝0.05)
实施例3：测定抗除草剂的水稻作物(突变体)和安全剂的协同作用的功效试验
进行功效试验以测定在双苯噁唑酸(安全剂)的存在下，喹禾灵对抗除草剂的水稻作物(具有G2096S替代的水稻植物(ML0831265-01493(ATCC保藏号PTA-12933，突变G2096S))的作用，着重于协同作用。
评估安全剂与突变体对除草剂的协同作用的方法
在安全剂(双苯噁唑酸，100g/ha)的存在或不存在下，将喹禾灵(以0、2、6、18、54和162g/ha的施用率)施用于野生型水稻和抗除草剂的水稻。
处理后四天，切下植物的顶部，使得保留距土壤顶部约2.5cm的植物。使植物再生长3天，此时通过测量再生的组织的鲜重来称量再生量。
再生长的改善通过从a)野生型水稻，和野生型水稻与双苯噁唑酸；b)抗除草剂的水稻；以及c)抗除草剂的水稻与双苯噁唑酸中减去再生量来计算。
对喹禾灵的各施用率进行计算。计算了安全剂单独和突变单独对降低除草剂作用/提高除草剂抗性的功效。再生长相对鲜重为活性的百分比(对于Colby)。
将再生长数据再现为曲线，并计算协同作用。
使用Colby方程计算协同作用：
Figure GDA0003291002970000311
其中，E表示在规定的除草剂剂量下，将安全剂施用于突变水稻的预期的再生长百分比。X为在规定的除草剂剂量下，将安全剂施用于野生型水稻作物的再生长百分比。Y为在规定的除草剂剂量下，在不使用安全剂的情况下突变水稻作物的再生长百分比。在规定的除草剂剂量下，在突变水稻作物上施用安全剂时测定的再生长百分比大于使用Colby方程计算的预期的再生长百分比时，存在协同作用。
计算和结果示于表4和图2。
表4.再生长相对鲜重和协同结果
Figure GDA0003291002970000312
图2中所示的结果还可总结如下：
Figure GDA0003291002970000313
表5：响应曲线拟合
Figure GDA0003291002970000321
在规定的除草剂剂量下，在突变水稻作物上施用安全剂时测定的再生长百分比大于使用Colby方程计算的预期的再生长百分比。该结果表明协同作用。
证明协同作用的另一种方法是提高ED50的能力(图2)。将除草剂施用于野生型水稻而不施用安全剂时，ED50为2.2g/ha。在安全剂的存在下，ED50增加至6.0g/ha。安全剂使抗性提高了2.7倍。将除草剂施用于突变水稻而不施用安全剂时，ED50为5.2g/ha。突变使对除草剂的耐受性提高了2.4倍。
与不使用安全剂的野生型水稻相比，安全性和突变的加和作用应使ED50提高5.1倍(2.7+2.4＝5.1)。在安全剂的存在下，测定的抗除草剂的水稻的ED50增加至69g/ha，其为不使用安全剂的野生型水稻的31.4倍。该结果示出了预料不到的协同作用。
在一些实施方案中，功效通过经处理的作物的再生长来测量。
实施例4：ALS除草剂和安全剂对突变水稻的影响
突变水稻
水稻栽培品种在ALS基因中包含一个或多个突变，所述突变使该酶对咪草啶酸不敏感。
生长条件、材料和方法
将ALS抗性水稻品种(具有A205V和G654E替代的水稻植物(ATCC登录号PTA-123859、PTA-123860和/或PTA-123861)的种子种植在10x10x10 cm塑料盆中的商业温室土壤混合物中。各盆中放入250mL土壤，然后将种子放在土壤上，并用100-150mL土壤覆盖种子。每个盆中种植约8-10粒种子。然后，对各盆浇100mL Miracle Grow和Fertiplus(铁补充剂)的混合物。将盆置于温室中(38℃/20℃白天/夜间，在补充光照下14h光周期)。温室中的平均光强度为150μM/m2/秒。
使植物生长直到种植后10天，然后将盆转移到托盘上，使植物在水下生长。当植物达到3-5叶期时对其进行处理。
除草剂的施用
通常，对植物通过移动喷嘴喷雾系统以200l/ha或187l/ha的喷雾量处理。将双苯噁唑酸与除草剂在喷雾瓶中以100g/ha的施用率进行桶混。
除草作用的测量
处理后四天，切下植物的顶部，使得保留距土壤顶部约3cm。使植物再生长7天，此时通过切下土壤顶部3cm以上的所有生长并称量再生长的组织来测量再生量。
进行功效试验以测定在安全剂(双苯噁唑酸)的存在下，咪草啶酸对具有A205V和G654E替代的水稻植物(ATCC登录号PTA-123859、PTA-123860和/或PTA-123861)的影响。
在安全剂(双苯噁唑酸，100g/ha)的存在或不存在下，将咪草啶酸(以0、2.2、6.6、19.7、54.9和177.3g/ha的施用率)施用于野生型水稻和抗除草剂的水稻。
再生长的改善通过从a)野生型水稻，和野生型水稻与双苯噁唑酸；b)抗除草剂的水稻；以及c)抗除草剂的水稻与双苯噁唑酸中减去再生量来计算。
对咪草啶酸的各施用率进行计算。计算了安全剂单独和突变单独对降低除草剂作用/提高除草剂抗性的功效。再生长相对鲜重为活性的百分比(对于Colby)。
将再生长数据再现为曲线，并计算协同作用。测定的功效高于计算的功效。
计算和结果如表6和图3所示。
表6.再生长相对鲜重和协同结果
Figure GDA0003291002970000331
Figure GDA0003291002970000341
图3中所示的结果还可总结如下：
Figure GDA0003291002970000342
表7：响应曲线拟合
Figure GDA0003291002970000343
在规定的除草剂剂量下，在突变水稻作物上施用安全剂时测定的再生长百分比大于使用Colby方程计算的预期的再生长百分比。该结果表明协同作用。
证明协同作用的另一种方法是提高ED50的能力(图3)。将除草剂施用于野生型水稻而不施用安全剂时，ED50为0.49g/ha。在安全剂的存在下，ED50增加至1.95g/ha。安全剂使抗性提高了4倍。将除草剂施用于突变水稻而不施用安全剂时，ED50为42g/ha。突变使对除草剂的耐受性提高了85倍。
安全剂和突变体的加和作用应为4+85＝89倍的ED50。
在安全剂的存在下，测定的抗除草剂的水稻的ED50增加至59g/ha，为野生型的120倍。该结果显示了预料不到的协同作用。
实施例5：甲基磺草酮、环磺酮、异噁氟草和安全剂对突变水稻的影响
突变水稻
水稻栽培品种在HPPD基因中含有一个或多个突变，所述突变使酶对甲基磺草酮和/或环磺酮和/或异噁氟草不敏感。
突变水稻可为对抑制HPPD的除草剂具有抗性的任何突变水稻系。
生长条件、材料和方法
将HPPD抗性水稻品种的种子种植在10x10x10 cm塑料盆中的商业温室土壤混合物中。各盆中放入250mL土壤，然后将种子放于土壤上，并用100-150mL土壤覆盖种子。每个盆中种植约8-10粒种子。然后，对各盆浇100mL Miracle Grow和Fertiplus(铁补充剂)的混合物。将盆置于温室中(38℃/20℃白天/夜间，在补充光照下14h光周期)。温室中的平均光强度为150μM/m2/秒。
使植物生长直到种植后10天，然后将盆转移到托盘上，使植物在水下生长。当植物达到3-5叶期时对其进行处理。
除草剂的施用
通常，对植物使用50-250g/ha甲基磺草酮或环磺酮或异噁氟草通过移动式喷嘴喷雾系统以200l/ha或187l/ha的喷雾量处理。将双苯噁唑酸与除草剂在喷雾瓶中进行桶混。桶混物中安全剂与除草剂的重量比为1:1至1:5。
除草作用的测量
处理后四天，切下植物的顶部，使得保留距土壤顶部约3cm。使植物再生长7天，此时通过切下土壤顶部3cm以上的所有生长并称量再生的组织来测量再生量。
进行功效试验以测定在双苯噁唑酸的存在下，甲基磺草酮对突变水稻的影响。
将在施用甲基磺草酮的突变水稻上再生长的芽的重量与在以不同比例下施用甲基磺草酮和双苯噁唑酸的突变水稻上再生长的芽的重量进行比较。
结果表明，与未使用双苯噁唑酸处理的相同突变水稻相比，双苯噁唑酸的施用显著降低了甲基磺草酮对突变水稻的植物毒性。
结果还表明，与未使用双苯噁唑酸处理的相同突变水稻相比，双苯噁唑酸的施用显著提高了突变水稻对甲基磺草酮的抗性水平。
进行功效试验以测定在双苯噁唑酸的存在下，环磺酮对突变水稻的影响。
将在施用环磺酮的突变水稻上再生长的芽的重量与在以不同比例下施用环磺酮和双苯噁唑酸的突变水稻上再生长的芽的重量进行比较。
结果表明，与未使用双苯噁唑酸处理的相同突变水稻相比，双苯噁唑酸的施用显著降低了环磺酮对突变水稻的植物毒性。
结果还表明，与未使用双苯噁唑酸处理的相同突变水稻相比，双苯噁唑酸的施用显著提高了突变水稻对环磺酮的抗性水平。
进行功效试验以测定在双苯噁唑酸的存在下，异噁氟草对突变水稻的影响。
将在施用异噁氟草的突变水稻上再生长的芽的重量与在以不同比例下施用异噁氟草和双苯噁唑酸的突变水稻上再生长的芽的重量进行比较。
结果表明，与未使用双苯噁唑酸处理的相同突变水稻相比，双苯噁唑酸的施用显著降低了异噁氟草对突变水稻的植物毒性。
结果还表明，与未使用双苯噁唑酸处理的相同突变水稻相比，双苯噁唑酸的施用显著提高了突变水稻对异噁氟草的抗性水平。

Claims (18)

1.一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的除草混合物，其中所述除草混合物包含由以下物质组成的活性成分：a)选自抑制乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的除草剂的除草剂，所述抑制ACCase的除草剂选自喔草酯和喹禾灵，和b)至少一种除草剂安全剂，其选自双苯噁唑酸以及其酯、盐及其组合。
2.根据权利要求1所述的除草混合物，其中：
a.除草混合物中除草剂与安全剂的重量比为1:4至10:1，
b.除草混合物包含0.1重量％至99重量％的除草剂，和/或
c.除草混合物包含0.1重量％至90重量％的安全剂。
3.根据权利要求2所述的除草混合物，其中：
a.与未施用安全剂的相同水稻作物的抗性相比，安全剂有效地提高抗除草剂的水稻作物对除草混合物中的抑制ACCase的除草剂的抗性，
b.与相同除草剂对未施用安全剂的相同水稻作物的植物毒性作用相比，安全剂有效地降低抑制ACCase的除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用，和/或
c.与未施用安全剂的相同水稻作物中的除草剂作用相比，安全剂有效地降低抗除草剂的水稻作物中的抑制ACCase的除草剂的除草剂作用。
4.一种除草组合物，其包含如权利要求1所述的除草混合物和至少一种农业上可接受的载体。
5.根据权利要求4所述的除草组合物，其中：
a.组合物中除草剂和安全剂的量为0.1-99重量％，基于组合物的总重量计，
b.农业上可接受的载体选自表面活性剂、固体载体和液体载体，和/或
c.所述组合物还包含至少一种选自润湿剂、消泡剂、胶粘剂、中和剂、增稠剂、粘合剂、螯合剂、肥料和防冻剂的额外的组分。
6.根据权利要求4或5所述的除草组合物，其中所述组合物为种子处理组合物。
7.一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的方法，其包括将
一种除草混合物，其包含由以下物质组成的活性成分：a)选自喹禾灵和喔草酯的除草剂，和b)至少一种选自双苯噁唑酸以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂
或
一种除草组合物，其包含由以下物质组成的活性成分：a)选自喹禾灵和喔草酯的除草剂，b)至少一种选自双苯噁唑酸以及其酯、盐及其组合的除草剂安全剂，和至少一种农业上可接受的载体
施用于不想要的植物的场所，以有效地防治不想要的植物。
8.一种用于防治在抗除草剂的水稻作物附近的不想要的植物的方法，其包括：(i)将至少一种选自双苯噁唑酸以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物的种子；和(ii)将有效量的由喹禾灵或喔草酯组成的除草剂施用于不想要的植物的场所，以有效地防治不想要的植物。
9.根据权利要求7或8所述的方法，其中：
a.所述方法包括施用两种或更多种安全剂的混合物，
b.将安全剂和/或除草剂施用于水稻作物、水稻作物的场所和/或水稻作物的繁殖材料，
c.在出苗前施用安全剂和/或除草剂，
d.在出苗后施用安全剂和/或除草剂，
e.除草混合物的施用率为1g/ha至600g/ha，
f.除草混合物的施用率为0.1升/ha至300升/ha，
g.除草混合物以0.1g/100kg种子至1000g/100kg种子的比率用于种子处理，
h.除草剂的施用率为1g/ha至250g/ha，
i.安全剂的施用率为1g/ha至150g/ha，或
j.安全剂以每kg种子0.1g至5g安全剂的比率施用于抗除草剂的水稻作物的种子。
10.根据权利要求9所述的方法，其中除草剂的施用率为1g/ha至200g/ha和/或安全剂的施用率为100g/ha。
11.根据权利要求7或8所述的方法，其中除草剂和安全剂同时施用、分开施用或依序施用。
12.根据权利要求9所述的方法，其中除草剂和安全剂同时施用、分开施用或依序施用。
13.根据权利要求7或8所述的方法，其中不想要的植物为单子叶植物或双子叶植物。
14.根据权利要求13所述的方法，其中不想要的植物为红稻。
15.一种降低抑制ACCase的除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用的方法，其中所述方法包括将有效量的至少一种选自双苯噁唑酸以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物，从而与未施用安全剂的相同水稻作物相比，有效地降低抑制ACCase的除草剂对抗除草剂的水稻作物的植物毒性作用，其中所述抑制ACCase的除草剂由喹禾灵或喔草酯组成。
16.一种提高抗除草剂的水稻作物对抑制ACCase的除草剂的抗性的方法，其包括将至少一种选自双苯噁唑酸以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物，从而与未施用安全剂的相同水稻作物相比，提高抗除草剂的水稻作物对除草剂的抗性，其中所述抑制ACCase的除草剂由喹禾灵或喔草酯组成。
17.一种在抗除草剂的水稻作物中降低抑制ACCase的除草剂的除草剂作用的方法，其包括将至少一种选自双苯噁唑酸以及其酯、盐及其组合的安全剂施用于抗除草剂的水稻作物的植物和/或种子，从而与未施用安全剂的相同水稻作物中的除草剂作用相比，降低在抗除草剂的水稻作物中的除草剂作用，其中所述抑制ACCase的除草剂由喹禾灵或喔草酯组成。
18.一种除草组合物，其包含(i)由喹禾灵或喔草酯组成的除草剂和选自双苯噁唑酸的除草剂安全剂的混合物，和(ii)至少一种农业上可接受的载体。
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