CN111955386A - 青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法，包括如下步骤：(1)野外亲鱼产前栖息地定位及行为观察；(2)自然产卵场孵化水温监测；(3)亲鱼挑选；(4)雌雄配比；(5)人工采卵采精；(6)人工授精；(7)人工孵化；(8)出膜关键水温控制以及(9)仔鱼转移。本发明提供的青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法，方法易行，操作简便，亲鱼具有稳定的产卵量和排精量，产后亲鱼存活率达到100％，受精率和孵化率高，所得仔鱼发育良好，抗病力强，该方法适用于培育极端条件下的实验动物，重现胚胎发育过程，同时有利于青藏高原小头裸裂尻鱼自然种群恢复以及人工保种。
Description
技术领域
本发明涉及野生动物种质资源保护技术领域，具体是一种青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法。
背景技术
小头裸裂尻鱼(Herzensteinia microcephalus,Herzenstein 1891)，属鲤形目，鲤科，裂腹鱼亚科，裸裂尻鱼属，为我国特有鱼类，别名小头高原鱼、小头赫氏鱼，小头单列齿鱼和小嘴湟鱼。分布在青藏高原唐古拉山南北两侧江河源头及其湖泊，诸如长江源头及其附属水体，奇林湖和纳木湖及其附属河流。分布海拔最低处为青海玉树隆宝滩(4400m)，最高处达唐古拉山主峰格拉丹冬长江发源地附近(5200m)。小头裸裂尻鱼个体大，处于水生食物链的顶端，为这些水域的关键种，也是我国青海和西藏地区颇有开发价值的主要鱼种(任慕莲等,1982；武云飞和吴翠珍,1992；武云飞,1994)，无须，下咽齿多为1行，齿式4/4，背、头部黑褐色，具有圆或点状黑斑，体侧或间有云斑，腹部银白色，背、尾鳍分布有数行小黑点。
由于气候变暖以及人类活动增强，小头裸裂尻鱼栖息地遭受威胁，导致出现资源量下降、个体变小的趋势。另外，小头裸裂尻鱼为冷水性鱼类，雌鱼绝对繁殖力低，在自然环境中，受精率、孵化率以及存活率也面临较低的问题，且该种冷水鱼生长缓慢，生长周期长，性成熟晚，一旦资源遭到较大破坏，长时间内将难以恢复。
青藏高原海拔高，气候条件恶劣，交通艰难，开展针水生态原位研究更加困难(Qiu,2008)。成熟亲鱼栖息地未研究，且自然产卵场水温节律未知等因素增加了人工繁殖的难度。关于小头裸裂尻鱼的基础研究较少，仅有分类、食性以及线粒体序列研究(武云飞和吴翠珍,1992；武云飞等,1994；Liang et al,2016；Shu et al.,2018)。小头裸裂尻鱼人工繁殖技术尚未实现，需要突破小头裸裂尻鱼的人工繁殖技术，为资源修复以及实现极端条件下的实验动物储备打下基础。
发明内容
鉴于上述问题，本发明的目的在于提供一种青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法，方法易行，操作简便，亲鱼具有稳定的产卵量和排精量，产后亲鱼存活率达到100％，受精率和孵化率高，所得仔鱼发育良好，抗病力强，该方法适用于培育极端条件下的实验动物，重现胚胎发育过程，同时有利于青藏高原小头裸裂尻鱼自然种群恢复以及人工保种。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法，包括如下步骤：
(1)野外亲鱼产前栖息地定位及行为观察：在小头裸裂尻鱼的繁殖季节5月底6月初，于长江源源头河流4800-4820m处定位小头裸裂尻鱼亲鱼的产前栖息地分布，摸清亲鱼喜好栖息地类型以及活动范围和游泳行为；
(2)自然产卵场孵化水温监测：通过全自动水温记录仪监测自然产卵场的孵化水温，将全自动水温记录仪埋置在产卵场江段底部，设置每隔1小时整点测量水温并记录水温，监测时间为6-7月，监测结束后，分析水温区间和水温过程特征；
(3)亲鱼挑选：筛选性腺发育成熟，发育期处于V期的小头裸裂尻鱼亲本，该发育时相的亲鱼处于临产状态；
(4)雌雄配比：雌雄按照比例为1:5-1:7配对；
(5)人工采卵采精：将亲本收集并按步骤(4)配比后，按照先采集雌鱼后采集雄鱼的顺序采集卵粒和精液，在天然河道旁完成人工采卵和采精；
(6)人工授精：采用湿法授精，加入1/2盆的澄清天然河水，水温16-22℃，混匀，戴上橡胶手套，轻微、缓慢手动搅动4-6分钟完成受精过程；
(7)人工孵化：开展原位孵化，孵化海拔为4767-4800m a.s.l.，将受精卵静置运回孵化室开展人工孵化，受精卵孵化地所在的海拔高度与该鱼自然生活的海拔高度相同，孵化密度为4-5万/㎡，将海拔4767-4800m的泉水用作孵化用水，以繁殖季节河流自然水温为参考设计孵化温度控制流程，溶氧保持在大于5mg/L，根据野外观察的自然河流水温，设计孵化水温的日节律范围为7.5-19.0℃；
(8)出膜关键水温控制：待胚胎尾部发育充分，环绕伸达头部，长度接近膜内周长的一半时，此时整个胚体运动加快，运动方式为翻转和旋转，此时将孵化水温升至关键水温19℃，受精卵即可出现大规模出膜的现象；
(9)仔鱼转移：日平均水温12.8℃时，大规模仔鱼出苗时间起始为受精后238h，所需积温为3057h·℃，所有受精卵自授精至全部出膜所需时间为13d5h，将孵化出膜的初生仔鱼转移到仔鱼盆或网箱内单独进行培育。
进一步的，步骤(3)中雌雄鱼的筛选标准分别为：轻触雌鱼腹部即可见泄殖腔排出少量卵粒，或者在捕捞过程中雌鱼即可排卵于捕捞网兜中；轻压雄鱼腹部，有少量白色液化精液从泄殖腔流出。
进一步的，步骤(5)人工采卵和采精具体步骤为：采用腹部自头部自尾部周期挤压的方式挤卵和挤精，单尾雌鱼卵粒采集时间为2-3分钟，单尾雄鱼精液采集时间为10-30秒，采集卵粒和精液于干净、底部湿润的塑料盆内，精液覆盖在卵粒表面。
本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果：
本发明通过产前亲鱼关键栖息地的研究，定位亲鱼的位置；按照每小时间隔测量野外自然孵化的水温过程，为室内水温孵化水温提供支撑，实现了较大温差的日节律孵化；人工精准选择性腺发育成熟至V期的亲鱼，按照1:5-1:7雌雄配对，通过亲鱼产前栖息地定位，自然孵化水温监测，设计日孵化水温节律，在4780-4820m青藏高原开展原位孵化，保证人工繁殖的成功，可操作性强，实践应用良好，其受精率高达99％，受精卵发育至尾芽剧烈运动期百分比占比达95％。温度调控到19℃后，出膜率高达80％，仔鱼发育至眼睛明显可见比例达97％。
附图说明
图1为本发明实施例青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法中亲鱼产前栖息地；
图2为本发明实施例中人工采卵示意图；
图3为本发明实施例中人工采精示意图；
图4为本发明实施例中湿法授精示意图；
图5为本发明实施例孵化中的受精卵；
图6为本发明实施例孵化水温过程图；
图7为本发明实施例长出眼睛的仔鱼图。
具体实施方式
下面将结合具体附图和具体实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。
实施例1：
一种青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法，其步骤是：
1)野外亲鱼产前栖息地定位及行为观察：在小头裸裂尻鱼的繁殖季节5月底6月初，于长江源源头河流4800-4804m处定位小头裸裂尻鱼亲鱼的产前栖息地分布(如图1所示)，摸清亲鱼喜好栖息地类型以及活动范围和游泳行为。
2)自然产卵场孵化水温监测：通过全自动水温记录仪监测自然产卵场的孵化水温，将全自动水温记录仪埋置在产卵场江段底部，设置每隔1小时整点测量水温并记录水温。监测时间为6-7月，监测结束后，分析水温区间和水温过程特征。
3)亲鱼挑选：筛选性腺发育成熟，发育期处于V期的小头裸裂尻鱼亲本，该发育时相的亲鱼处于临产状态。雌雄鱼的筛选标准分别为：轻触雌鱼腹部即可见泄殖腔排出少量卵粒，或者在捕捞过程中雌鱼即可排卵于捕捞网兜中；轻压雄鱼腹部，有少量白色液化精液从泄殖腔流出。
4)雌雄配比：雌雄按照比例为1:5配对。
5)人工采卵采精：将亲本收集并按步骤4)配比后，按照先采集雌鱼后采集雄鱼的顺序采集卵粒和精液。在天然河道旁完成人工采卵和采精。具体的，采用腹部自头部自尾部周期挤压的方式挤卵(如图2所示)和挤精(如图3所示)，单尾雌鱼卵粒采集时间为2分钟，单尾雄鱼精液采集时间为10秒。采集卵粒和精液于干净、底部湿润的塑料盆内，该塑料盆直径20cm，精液覆盖在卵粒表面。任意一尾亲鱼采集结束后，即刻放回天然河流中。
6)人工授精：采用湿法授精，采用湿法授精，采用加入1/2盆的澄清天然河水，水温16℃，混匀。戴上橡胶手套，轻微、缓慢手动搅动5分钟完成受精过程(如图4所示)。
7)人工孵化：开展原位孵化，将受精卵静置运回孵化室开展人工孵化，受精卵孵化地所在的海拔高度与该鱼自然生活的海拔高度相同。孵化密度为4万/㎡。将海拔4800的泉水用作孵化用水，以繁殖季节河流自然水温为参考，加以优化，设计孵化温度控制流程。溶氧保持在大于5mg/L，根据野外观察的自然河流水温，设计孵化水温的日节律范围为7.5-17.5℃，孵化中的受精卵如图5所示。
8)出膜关键水温控制：待胚胎尾部发育充分，环绕伸达头部，长度接近膜内周长的一半时，此时整个胚体运动加快，运动方式为翻转和旋转。此时将孵化水温升至关键水温19℃，受精卵即可出现大规模出膜的现象(如图6所示)。
9)仔鱼转移：日平均水温12.8℃时，大规模仔鱼出苗时间起始为受精后238h，所需积温为3057h·℃，所有受精卵自授精至全部出膜所需时间为13d5h。孵化出膜的初生仔鱼(如图7所示)沉于水底，往往侧卧，向上或者横向挣扎性间隔运动。仔鱼头部、尾部器官较为脆弱，且初生仔鱼喜好周期性运动需要给予较大空间，为防止相互挤压以及和未出膜卵挤压而受伤死亡，需将刚孵出的初生仔鱼转移到仔鱼盆或网箱内单独进行培育。
结果方面，受精率为99.2％，受精卵发育至尾芽剧烈运动期百分比占比达95％。温度调控到19℃后，出膜率高达80％，仔鱼发育至眼睛明显可见比例达97％。
实施例2：
一种青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法，其步骤是：
1)野外亲鱼产前栖息地定位及行为观察：在小头裸裂尻鱼的繁殖季节5月底6月初，于长江源源头河流4804-4810m定位小头裸裂尻鱼亲鱼的产前栖息地分布，摸清亲鱼喜好栖息地类型以及活动范围和游泳行为。
2)自然产卵场孵化水温监测：通过全自动水温记录仪监测自然产卵场的孵化水温，将全自动水温记录仪埋置在产卵场江段底部，设置每隔1小时整点测量水温并记录水温。监测时间为6-7月，监测结束后，分析水温区间和水温过程特征。
3)亲鱼挑选：筛选性腺发育成熟，发育期处于V期的小头裸裂尻鱼亲本，该发育时相的亲鱼处于临产状态。雌雄鱼的筛选标准分别为：轻触雌鱼腹部即可见泄殖腔排出少量卵粒，或者在捕捞过程中雌鱼即可排卵于捕捞网兜中；轻压雄鱼腹部，有少量白色液化精液从泄殖腔流出。
4)雌雄配比：雌雄按照比例为1:6配对。
5)人工采卵采精：将亲本收集并按步骤4)配比后，按照先采集雌鱼后采集雄鱼的顺序采集卵粒和精液。在天然河道旁完成人工采卵和采精。采用腹部自头部自尾部周期挤压的方式挤卵和挤精，单尾雌鱼卵粒采集时间为2.5分钟，单尾雄鱼精液采集时间为12秒。采集卵粒和精液于干净、底部湿润的塑料盆内，该塑料盆直径20cm，精液覆盖在卵粒表面。任意一尾亲鱼采集结束后，即刻放回天然河流中。
6)人工授精：采用湿法授精，采用湿法授精，采用加入1/2盆的澄清天然河水，水温18℃，混匀。戴上橡胶手套，轻微、缓慢手动搅动5分钟完成受精过程。
7)人工孵化：开展原位孵化，将受精卵静置运回孵化室开展人工孵化，受精卵孵化地所在的海拔高度与该鱼自然生活的海拔高度相同。孵化密度为4.5万/㎡。将海拔4800的泉水用作孵化用水，以繁殖季节河流自然水温为参考，加以优化，设计孵化温度控制流程。溶氧保持在大于5mg/L，根据野外观察的自然河流水温，设计孵化水温的日节律范围为8-18℃。
8)出膜关键水温控制：待胚胎尾部发育充分，环绕伸达头部，长度接近膜内周长的一半时，此时整个胚体运动加快，运动方式为翻转和旋转。此时将孵化水温升至关键水温19℃，受精卵即可出现大规模出膜的现象。
9)仔鱼转移：日平均水温12.8℃时，大规模仔鱼出苗时间起始为受精后238h，所需积温为3057h·℃，所有受精卵自授精至全部出膜所需时间为13d5h。孵化出膜的初生仔鱼沉于水底，往往侧卧，向上或者横向挣扎性间隔运动。仔鱼头部、尾部器官较为脆弱，且初生仔鱼喜好周期性运动需要给予较大空间，为防止相互挤压以及和未出膜卵挤压而受伤死亡，需将刚孵出的初生仔鱼转移到仔鱼盆或网箱内单独进行培育。
结果方面，受精率为99.5％，受精卵发育至尾芽剧烈运动期百分比占比达96％。温度调控到19℃后，出膜率高达81％，仔鱼发育至眼睛明显可见比例达97.2％。
实施例3：
一种青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法，其步骤是：
1)野外亲鱼产前栖息地定位及行为观察：在小头裸裂尻鱼的繁殖季节5月底6月初，于长江源源头河流4810-4820m定位小头裸裂尻鱼亲鱼的产前栖息地分布，摸清亲鱼喜好栖息地类型以及活动范围和游泳行为。
2)自然产卵场孵化水温监测：通过全自动水温记录仪监测自然产卵场的孵化水温，将全自动水温记录仪埋置在产卵场江段底部，设置每隔1小时整点测量水温并记录水温。监测时间为6-7月，监测结束后，分析水温区间和水温过程特征。
3)亲鱼挑选：筛选性腺发育成熟，发育期处于V期的小头裸裂尻鱼亲本，该发育时相的亲鱼处于临产状态。雌雄鱼的筛选标准分别为：轻触雌鱼腹部即可见泄殖腔排出少量卵粒，或者在捕捞过程中雌鱼即可排卵于捕捞网兜中；轻压雄鱼腹部，有少量白色液化精液从泄殖腔流出。
4)雌雄配比：雌雄按照比例为1:7配对。
5)人工采卵采精：将亲本收集并按步骤4)配比后，按照先采集雌鱼后采集雄鱼的顺序采集卵粒和精液。在天然河道旁完成人工采卵和采精。采用腹部自头部自尾部周期挤压的方式挤卵和挤精，单尾雌鱼卵粒采集时间为3分钟，单尾雄鱼精液采集时间为30秒。采集卵粒和精液于干净、底部湿润的塑料盆内，该塑料盆直径20cm，精液覆盖在卵粒表面。任意一尾亲鱼采集结束后，即刻放回天然河流中。
6)人工授精：采用湿法授精，采用加入1/2盆的澄清天然河水，水温22℃，混匀。戴上橡胶手套，轻微、缓慢手动搅动5分钟完成受精过程。
7)人工孵化：开展原位孵化，将受精卵静置运回孵化室开展人工孵化，受精卵孵化地所在的海拔高度与该鱼自然生活的海拔高度相同。孵化密度为5万/㎡。将海拔4800的泉水用作孵化用水，以繁殖季节河流自然水温为参考，加以优化，设计孵化温度控制流程。溶氧保持在大于5mg/L，根据野外观察的自然河流水温，设计孵化水温的日节律范围为7.5-18.2℃。
8)出膜关键水温控制：待胚胎尾部发育充分，环绕伸达头部，长度接近膜内周长的一半时，此时整个胚体运动加快，运动方式为翻转和旋转。此时将孵化水温升至关键水温19℃，受精卵即可出现大规模出膜的现象。
9)仔鱼转移：日平均水温12.8℃时，大规模仔鱼出苗时间起始为受精后238h，所需积温为3057h·℃，所有受精卵自授精至全部出膜所需时间为13d5h。孵化出膜的初生仔鱼沉于水底，往往侧卧，向上或者横向挣扎性间隔运动。仔鱼头部、尾部器官较为脆弱，且初生仔鱼喜好周期性运动需要给予较大空间，为防止相互挤压以及和未出膜卵挤压而受伤死亡，需将刚孵出的初生仔鱼转移到仔鱼盆或网箱内单独进行培育。
本发明在海拔4800-4820m的青藏高原定位了小头裸裂尻鱼亲鱼的产前栖息地；孵化日温差达到超过10℃；研究得出自然孵化水温为1.0-19℃，日水温温差较大，6月份最高日水温温差达13.2℃，7月份最高日水温温差达14.3℃，另一方面为使后代保持耐受大温差变化的能力，设计孵化水温7.5-19℃。人工孵化小头裸裂尻鱼受精卵的海拔高度达到4767m，本发明通过开展原位孵化，孵化高度达4767m，孵化用水为海拔4767m的优质泉水。在海拔4800m实现原位孵化，细菌及病毒极少，同时采用优质泉水以及低温孵化温度设计，有效避免了受精卵遭受水霉以及初生仔鱼遭受小瓜虫等疾病的危害，保证了人工繁殖的成功；并且通过设计关键出膜水温19℃，将水温提高至19℃后，发育完备的受精卵即刻实现大规模出膜。
结果方面，受精率为99.4％，受精卵发育至尾芽剧烈运动期百分比占比达95.3％。温度调控到19℃后，出膜率高达85％，仔鱼发育至眼睛明显可见比例达98％。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。
Claims (3)
1.一种青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)野外亲鱼产前栖息地定位及行为观察：在小头裸裂尻鱼的繁殖季节5月底6月初，于长江源源头河流4800-4820m处定位小头裸裂尻鱼亲鱼的产前栖息地分布，摸清亲鱼喜好栖息地类型以及活动范围和游泳行为；
(2)自然产卵场孵化水温监测：通过全自动水温记录仪监测自然产卵场的孵化水温，将全自动水温记录仪埋置在产卵场江段底部，设置每隔1小时整点测量水温并记录水温，监测时间为6-7月，监测结束后，分析水温区间和水温过程特征；
(3)亲鱼挑选：筛选性腺发育成熟，发育期处于V期的小头裸裂尻鱼亲本，该发育时相的亲鱼处于临产状态；
(4)雌雄配比：雌雄按照比例为1:5-1:7配对；
(5)人工采卵采精：将亲本收集并按步骤(4)配比后，按照先采集雌鱼后采集雄鱼的顺序采集卵粒和精液，在天然河道旁完成人工采卵和采精；
(6)人工授精：采用湿法授精，加入1/2盆的澄清天然河水，水温16-22℃，混匀，戴上橡胶手套，轻微、缓慢手动搅动4-6分钟完成受精过程；
(7)人工孵化：开展原位孵化，孵化海拔为4767-4800m a.s.l.，将受精卵静置运回孵化室开展人工孵化，受精卵孵化地所在的海拔高度与该鱼自然生活的海拔高度相同，孵化密度为4-5万/㎡，将海拔4767-4800m的泉水用作孵化用水，以繁殖季节河流自然水温为参考设计孵化温度控制流程，溶氧保持在大于5mg/L，根据野外观察的自然河流水温，设计孵化水温的日节律范围为7.5-19.0℃；
(8)出膜关键水温控制：待胚胎尾部发育充分，环绕伸达头部，长度接近膜内周长的一半时，此时整个胚体运动加快，运动方式为翻转和旋转，此时将孵化水温升至关键水温19℃，受精卵即可出现大规模出膜的现象；
(9)仔鱼转移：日平均水温12.8℃时，大规模仔鱼出苗时间起始为受精后238h，所需积温为3057h·℃，所有受精卵自授精至全部出膜所需时间为13d5h，将孵化出膜的初生仔鱼转移到仔鱼盆或网箱内单独进行培育。
2.如权利要求1所述的青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法，其特征在于：步骤(3)中雌雄鱼的筛选标准分别为：轻触雌鱼腹部即可见泄殖腔排出少量卵粒，或者在捕捞过程中雌鱼即可排卵于捕捞网兜中；轻压雄鱼腹部，有少量白色液化精液从泄殖腔流出。
3.如权利要求1所述的青藏高原小头裸裂尻鱼人工繁殖方法，其特征在于：步骤(5)人工采卵和采精具体步骤为：采用腹部自头部自尾部周期挤压的方式挤卵和挤精，单尾雌鱼卵粒采集时间为2-3分钟，单尾雄鱼精液采集时间为10-30秒，采集卵粒和精液于干净、底部湿润的塑料盆内，精液覆盖在卵粒表面。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116530444A (zh) * | 2023-04-13 | 2023-08-04 | 中国水产科学研究院长江水产研究所 | 天然水域长江鲟野化繁殖方法及应用 |
| CN117958186A (zh) * | 2024-04-01 | 2024-05-03 | 水利部交通运输部国家能源局南京水利科学研究院 | 鱼类全生活史生境需求的生态流量过程水温过程确定方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103461253A (zh) * | 2013-09-29 | 2013-12-25 | 四川省农业科学院水产研究所 | 黄河裸裂尻鱼人工繁殖方法 |
| CN103875572A (zh) * | 2014-04-10 | 2014-06-25 | 中国科学院昆明动物研究所 | 一种软刺裸裂尻鱼人工繁殖和鱼卵孵化方法 |
| CN105794690A (zh) * | 2015-11-05 | 2016-07-27 | 中国海洋大学 | 一种原位利用黄海冷水团低温海水养殖冷水鱼类的方法 |
| WO2019040787A1 (en) * | 2017-08-24 | 2019-02-28 | L&B Patent Inc. | SYSTEM AND METHOD FOR INTEGRATED MULTITROPHIC AQUACULTURE |
| CN209017660U (zh) * | 2018-08-23 | 2019-06-25 | 中国水产科学研究院东海水产研究所 | 海水鱼卵原位孵化实验装置 |
| CN110447577A (zh) * | 2018-11-20 | 2019-11-15 | 安徽省农业科学院水产研究所 | 一种基于适时控温的河川沙塘鳢规模化高效繁殖方法 |
-
2020
- 2020-07-26 CN CN202010727001.1A patent/CN111955386A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103461253A (zh) * | 2013-09-29 | 2013-12-25 | 四川省农业科学院水产研究所 | 黄河裸裂尻鱼人工繁殖方法 |
| CN103875572A (zh) * | 2014-04-10 | 2014-06-25 | 中国科学院昆明动物研究所 | 一种软刺裸裂尻鱼人工繁殖和鱼卵孵化方法 |
| CN105794690A (zh) * | 2015-11-05 | 2016-07-27 | 中国海洋大学 | 一种原位利用黄海冷水团低温海水养殖冷水鱼类的方法 |
| WO2019040787A1 (en) * | 2017-08-24 | 2019-02-28 | L&B Patent Inc. | SYSTEM AND METHOD FOR INTEGRATED MULTITROPHIC AQUACULTURE |
| CN209017660U (zh) * | 2018-08-23 | 2019-06-25 | 中国水产科学研究院东海水产研究所 | 海水鱼卵原位孵化实验装置 |
| CN110447577A (zh) * | 2018-11-20 | 2019-11-15 | 安徽省农业科学院水产研究所 | 一种基于适时控温的河川沙塘鳢规模化高效繁殖方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 周翠萍: "宝兴裸裂尻鱼的繁殖生物学研究", 《中国硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116530444A (zh) * | 2023-04-13 | 2023-08-04 | 中国水产科学研究院长江水产研究所 | 天然水域长江鲟野化繁殖方法及应用 |
| CN116530444B (zh) * | 2023-04-13 | 2023-10-17 | 中国水产科学研究院长江水产研究所 | 天然水域长江鲟野化繁殖方法及应用 |
| CN117958186A (zh) * | 2024-04-01 | 2024-05-03 | 水利部交通运输部国家能源局南京水利科学研究院 | 鱼类全生活史生境需求的生态流量过程水温过程确定方法 |
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