CN111869368A - 一种油菜种子耐盐性的苗期快速评价方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种油菜种子耐盐性的苗期快速评价方法，包括步骤：（1）种子制备；（2）发芽盒制备；（3）用NaCl配制出相应盐浓度的NaCl水溶液，每个发芽盒中，当天先加定量mL配制好的相应盐浓度的NaCl溶液，第2、4、6天换发芽床，加入定量相应NaCl浓度的水溶液；（4）第5d，统计发芽势，第7d统计发芽率，第7d测定幼苗鲜重；计算各个指标的相对盐害率，根据相对盐害率将油菜划分为五个耐盐等级。本发明通过在萌发过程中及时更换发芽床，保证了相对恒定的盐胁迫；得到了能准确划分油菜种子耐盐性的五个等级标准。本发明可快速准确地测定出油菜种子的耐盐性，可在高校、科研院所及相关企业推广应用。

Description

一种油菜种子耐盐性的苗期快速评价方法
技术领域
本发明属于农业技术领域。涉及一种油菜种子耐盐性的苗期快速评价方法。
背景技术
我国盐渍化土地面积位居世界第三，天津市盐渍化土地面积约占天津市总土地面积的65.8%，土壤盐渍化对作物的生长、品质和产量有着严重的影响。油菜在中国各地广泛种植，用途广泛，可作为观赏植物、油料作物、饲料作物、绿肥作物和生物燃料等，有利于提高盐渍化土壤质量，促进盐碱荒地生态环境的良性循环。
不同油菜品种的耐盐胁迫的能力不同，油菜能否在盐渍土壤上种植，首先要对油菜的耐盐性进行鉴定和评价，而要对油菜品种耐盐性进行鉴定和评价，科学快速有效的方法是关键。种子发芽与幼苗表现是决定油菜能否进一步在盐渍土壤上生长的关键，快速筛选耐盐油菜品种，充分利用盐渍化土壤，提高油菜的产量具有重要的意义。
关于油菜耐盐性鉴定的报道相对较少, 由于缺乏对油菜耐盐种质资源的研究，严重地限制了油菜耐盐性的遗传研究和耐盐油菜新品种的选育。目前采用的作物耐盐碱鉴定方法主要有实验室、温室、人工田间和自然田间鉴定四种方法。这些方法或耗费资源较多或指标较为单一，或准确性不高、人工误差较大，因此，迫切需要一种快速、准确、简单、易操作的油菜耐盐性的评价方法。采用标准、易操作的油菜发芽试验，结合适当的盐胁迫处理，为解决发芽过程中盐胁迫的变化，在发芽过程中适时置换发芽床，建立一种油菜种子耐盐性的苗期快速评价方法。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是，建立一种油菜种子耐盐性的苗期快速评价方法，为评价油菜耐盐性和筛选耐盐油菜品种奠定基础。
为解决上面技术问题，本发明采用的技术方案是：
一种油菜种子苗期耐盐性快速评价方法，其特征在于按如下的步骤进行：
（1）种子选择与消毒，随机选择饱满、无破损的种子用0.5%（w/w）的次氯酸钠消毒15min，用自来水冲洗2次；
（2）用75%（w/w）的酒精擦洗发芽盒，放置两小时，内放四层发芽纸；
（3）在每个发芽盒的发芽纸上随机均匀摆放100粒处理过的种子；
（4）在每个发芽盒中加入120 mmol/L浓度的NaCl溶液；
（5）发芽盒置于培养箱中20℃下，进行发芽试验，萌发期间在第2、4、6天换发芽床，加入120 mmol/L浓度的NaCl溶液；
（6）在种子萌发处理的第5d，统计油菜种子的发芽势，在第7d统计油菜种子的发芽率，第7d测定每个处理的幼苗鲜重，计算各个指标的相对盐害率，根据相对盐害率划分油菜苗期的耐盐性，分为高度耐盐、较耐盐、一般、不耐盐、极不耐盐五个等级。
本发明所述的方法在油菜发芽试验过程中，发芽基质保持了相对恒定的盐浓度，发芽势、发芽率和幼苗干重三个指标的相对盐害率的计算公式为：
相对盐害率= (对照的测定值 - 胁迫的测定值)/对照的测定值X100%
并以下述标准确定油菜种子的耐盐性等级：
Figure 411018DEST_PATH_IMAGE001
种子在萌发过程中及时更换发芽床，以保持相对恒定的盐胁迫。
本发明进一步公开了油菜种子苗期耐盐性快速评价方法在用于快速准确地确定油菜种子耐盐性等级方面的应用。实验结果显示，依上述方法选取耐盐性不同的5个油菜品种，在相同盐浓度的土壤基质上种植，显示出不同品种的耐盐性明显不同。说明该技术可用于鉴定不同油菜品种的耐盐性。
本发明所公开的油菜种子耐盐性的苗期快速评价方法与现有技术相比所具有的优点和积极效果在于：
（1）试验结果表明，应用本方法能在油菜发芽时快速评价其耐盐性。本发明操作简便，具有结果准确、可靠性高、时间短、易操作、效率高等优点。
（2）本发明应用广，采用不同规格的发芽盒，按其比例可适用于不同大小的作物种子的耐盐性评价。
附图说明
图1是经本方法筛选出的五个不同耐盐性的油菜品种，在相同含盐量土壤中的生长情况；其中（1）为高度耐盐品种；YC2（2）为较耐盐品种；YC4（3）为不耐盐品种；YC6 （4）为一般耐盐性品种；YC8（5）为极不耐盐品种YC3。
具体实施方式
下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。本发明所用原料及试剂均有市售。
实施例1
用75%的酒精擦洗发芽盒，放置两小时，内放四层发芽纸；配制120 mmol/L浓度的NaCl溶液；10个油菜品种由天津农科院资源与环境研究所友情提供（对外有售），分别赋予代号YC1、YC2、YC3、YC4、YC5、YC6、YC7、YC8、YC9、YC10，分别随机选择饱满、无破损的种子用0.5%的次氯酸钠消毒15min，用自来水冲洗2次；在每个发芽盒的发芽纸上随机均匀摆放100粒处理过的种子。
发芽试验分两组，一组发芽盒中加入自来水，一组发芽盒中加入120 mmol/L的NaCl溶液；每个处理4次重复；发芽盒置于培养箱中20℃下，进行发芽试验。加入自来水的一组，萌发期间在第2、4、6天换发芽床，加入定量自来水，加入盐溶液的一组，萌发期间在第2、4、6天换发芽床，加入定量盐溶液。在种子萌发处理的第5d，统计油菜种子的发芽势，在第7d测定油菜种子的发芽率，第7d测定每个处理的幼苗鲜重；
种子发芽势= (第5天所有发芽种子数/供试种子粒数) X 100%;
种子发芽率= (第7天所有发芽的种子粒数/供试种子粒数) X 100%；
相对盐害率= (对照的测定值 - 胁迫的测定值)/对照的测定值X100%。
得到10个油菜品种的三个指标的相对盐害率，如下表所示：
Figure 40714DEST_PATH_IMAGE002
根据相对盐害率划分油菜苗期耐盐性，分为高度耐盐、较耐盐、一般、不耐盐、极不耐盐五个等级。
从以上实例可以看出，根据实际结果，可以区分不同油菜品种的耐盐性。此油菜耐盐筛选方法操作简便，油菜发芽试验的三个指标的相对盐害率均可以评价出油菜的耐盐程度，实际应用中可采用任何一个指标，或三者综合分析更加准确。
实施例2
用75%的酒精擦洗发芽盒，放置两小时，内放四层发芽纸；配制120 mmol/L浓度的NaCl溶液；采用5个油菜品种YC2、YC4、YC8、YC6和YC3，分别随机选择饱满、无破损的种子用0.5%的次氯酸钠消毒15min，用自来水冲洗2次；在每个发芽盒的发芽纸上随机均匀摆放100粒处理过的种子。
常规方法：发芽试验分两组，一组发芽盒中加入自来水，一组发芽盒中加入120mmol/L的NaCl溶液；每个处理4次重复；发芽盒置于培养箱中20℃下，进行发芽试验。萌发期间在第2、4、6天，分别加入定量自来水。在种子萌发处理的第5d，统计油菜种子的发芽势，在第7d测定油菜种子的发芽率，第7d测定每个处理的幼苗鲜重。
常规法得到5个油菜品种的三个指标的相对盐害率，如下表所示：
Figure 653092DEST_PATH_IMAGE003
本发明的方法：发芽试验分两组，一组发芽盒中加入自来水，一组发芽盒中加入120mmol/L的NaCl溶液；每个处理4次重复；发芽盒置于培养箱中20℃下，进行发芽试验。加入自来水的一组，萌发期间在第2、4、6天换发芽床，加入定量自来水，加入盐溶液的一组，萌发期间在第2、4、6天换发芽床，加入定量盐溶液。在种子萌发处理的第5d，统计油菜种子的发芽势，在第7d测定油菜种子的发芽率，第7d测定每个处理的幼苗鲜重；
本发明方法得到5个油菜品种的三个指标的相对盐害率，如下表所示：
Figure 786264DEST_PATH_IMAGE004
从以上实例可以看出，常规耐盐性鉴定法，对5个品种的耐盐性难以准确判定，进一步说明了该技术可用于鉴定油菜种质的耐盐性。此油菜种子耐盐性筛选方法准确，操作简便。为油菜耐盐育种奠定了坚实的基础，应用潜力很大。
上述参照实施例对油菜种子耐盐性的苗期快速评价方法的详细描述，仅用于说明本发明的技术思想和特点，其目的在于使相关研究人员能够理解本发明的内容并据此实施，其描述是说明性的，而不是限定性的，因而在不脱离本发明的构思下的变化和修改，应属于本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种油菜种子苗期耐盐性快速评价方法，其特征在于按如下的步骤进行：
（1）种子选择与消毒，随机选择饱满、无破损的种子用0.5%（w/w）的次氯酸钠消毒15min，用自来水冲洗2次；
（2）用75%（w/w）的酒精擦洗发芽盒，放置两小时，内放四层发芽纸；
（3）在每个发芽盒的发芽纸上随机均匀摆放100粒处理过的种子；
（4）在每个发芽盒中加入120 mmol/L浓度的NaCl溶液；
（5）发芽盒置于培养箱中20℃下，进行发芽试验，萌发期间在第2、4、6天换发芽床，加入120 mmol/L浓度的NaCl溶液；
（6）在种子萌发处理的第5d，统计油菜种子的发芽势，在第7d统计油菜种子的发芽率，第7d测定每个处理的幼苗鲜重，计算各个指标的相对盐害率，根据相对盐害率划分油菜苗期的耐盐性，分为高度耐盐、较耐盐、一般、不耐盐、极不耐盐五个等级。
2.权利要求1所述的方法，其特征在于油菜发芽试验过程中，发芽基质保持了相对恒定的盐浓度，发芽势、发芽率和幼苗干重三个指标的相对盐害率的计算公式为：
相对盐害率= (对照的测定值 - 胁迫的测定值)/对照的测定值X100%；
并以下述标准确定油菜种子的耐盐性等级；
Figure 414878DEST_PATH_IMAGE001
。
3.权利要求1所述的方法，其特征在于：种子在萌发过程中及时更换发芽床，以保持相对恒定的盐胁迫。
4.权利要求1所述的油菜种子苗期耐盐性快速评价方法在用于快速准确地确定油菜种子耐盐性等级方面的应用。
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