CN111869359A - 一种适于玉米盐胁迫下生理研究的土壤盐分梯度的调节方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种适于玉米盐胁迫下生理研究的土壤盐分梯度的调节方法，包括步骤：（1）土壤制备；（2）花盆制备；（3）用NaCl配制出相应盐浓度的NaCl水溶液，称取一定量的风干土壤放入花盆中，每个花盆中，当天先加定量mL相应浓度的NaCl水溶液，放1天，施一定量的氮磷钾肥，并进行播种。于播种后的第4、8、12、16、20、24、28天加入定量mL的水；其中在第10、20、30天加入定量mL相应盐浓度的NaCl水溶液。本发明即保证了玉米幼苗及进一步生长所需的水分和营养，又使其生长在相对某一恒定盐浓度下的土壤中。本发明操作简单，可在高校、科研院所及相关企业推广应用。
Description
技术领域
本发明属于玉米苗期耐盐性生理研究的技术领域，特别是一种适于玉米盐胁迫下生理研究的土壤盐分梯度的调节方法。
背景技术
在进行玉米苗期耐盐性指标评价和玉米苗期耐盐生理研究时，通常在实验室进行玉米种子盐胁迫发芽试验，大粒种子发芽试验一般采用砂床(0.05-0.8mm的细砂)或土壤床进行培养，因需高温消毒，要破坏土壤结构，同时试验中建立砂或土壤盐胁迫条件的方法是向砂床或土壤床中加入相应浓度盐溶液，但是随着种子的萌发、出苗、生长以及环境因素的变化，砂或土壤床的盐分浓度会发生改变，致使试验中不能准确得出某恒定盐胁迫浓度的试验数据，所以探究土壤床中含盐量随着种子发芽和幼苗生长的变化规律，从而建立维持盐胁迫浓度条件稳定的一个体系，对于玉米苗期耐盐性鉴定与评价，玉米苗期耐盐机理的深入分析有重大作用。为解决玉米耐盐性筛选及苗期生理生化变化分析的条件，在玉米苗期(或进一步分析整个生长期)生长的盐胁迫条件下，进行盆栽玉米盐胁迫土壤生长试验，根据土壤的盐分含量变化，分析土壤盐浓度的变化规律，建立可使土壤全盐量相对恒定的控制技术就显得十分必要。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足，而提出一种适于玉米盐胁迫下生理研究的土壤盐分梯度的调节方法，为筛选玉米耐盐性及恒定土壤盐浓度下分析玉米苗期及生长期的生理生化变化规律奠定基础。
本发明解决其技术问题是采取以下技术方案实现的：
一种适于玉米盐胁迫下生理研究的土壤盐分梯度调节方法，其特征在于按如下的步骤进行：
（1）取质地和肥力均匀一致的土壤，风干，粉碎，备用；
（2）分别称取一定重量处理后的土壤置于统一规格的花盆中；
（3）根据所需盐浓度的要求，设计5组不同浓度NaCl水溶液，分别为：1.50‰(I)、3.50‰(II)、5.50‰(III)、7.50‰(IV)及9.50‰(V)，5组中的每个花盆均当天先加300mL用NaCl配制好的盐溶液，混匀，放置1天，用做玉米生长的土壤，然后每个花盆中分别施入纯氮0.30g，P2O5 0.16g， K2O 0.1g，
（4）每个花盆中分别播种5穴10粒郑单958玉米种子，播种后的第4、8、12、16、20、24、28天加入100-200 mL水；其中在第10、20、30天加入100-200 mL相应盐浓度的NaCl水溶液，在光照培养箱或室外自然条件下培养，进行玉米发芽和幼苗生长试验的分析。所述步骤（2）中称取处理后的定量土壤置于一定规格的花盆中具体为：称取3000g处理后的土壤，置于上口内径20cm，深15cm规格的圆形花盆中，如需大花盆可按相应土与盐溶液比例置放土壤。
本发明进一步公开了适于玉米盐胁迫下生理研究的土壤盐分梯度调节方法在用于控制恒定的不同盐浓度土壤基质方面的应用。实验结果显示在玉米种子萌发时期及生长期，既保证了玉米所需的水分和营养，又使其一直处在某一恒定土壤盐浓度下。
本发明更加详细的描述如下：
一种适于玉米盐胁迫下生理研究的土壤盐分梯度的调节方法：
（1）取质地肥力均匀的土壤，自然风干，粉碎，备用；
（2）分别称取处理后的定量土壤放置于统一规格的花盆中；
（3）根据土壤原盐浓度和所需盐浓度的要求，用NaCl配制出相应盐浓度的NaCl水溶液，每个花盆中，当天先加定量mL用NaCl配制好的盐溶液，混匀，放置1天，以备种子萌发和生长试验，播种前每个花盆中施入定量的氮磷钾肥料，每个花盆中分别播种等量的玉米种子；
（4）在光照培养箱或室外自然条件下培养，培养条件下进行种子萌发和生长试验；
播种后的第4、8、12、16、20、24、28天加入定量mL的水；其中在第10、20、30天加入定量mL相应盐浓度的NaCl水溶液。
而且，对于典型性玉米发芽和幼苗生长试验，所述步骤（2）中称取处理后的定量土壤置于一定规格的花盆中具体为：称取3000g处理后的土壤，置于上口内径20cm，深15cm规格的圆形花盆中(如需大花盆可按相应土与盐溶液比例置放土壤)。
而且，对于典型性玉米发芽和幼苗生长试验，所述步骤（3）用NaCl配制出相应盐浓度的水溶液，NaCl盐浓度分别为：1.50‰、3.50‰、5.50‰、7.50‰及9.50‰。而且，对于装有3000g处理后的土壤，置于上口内径20cm，深15cm规格的圆形花盆中，加入的用NaCl配制好的相应盐浓度的水溶液为300mL，混匀，放置1天，用做玉米生长的土壤。
本发明所公开的适于玉米盐胁迫下生理研究的土壤盐分梯度的调节方法与现有技术相比所具有的优点和积极效果在于：
1. 本发明控制土壤盐浓度方法，进行玉米苗期耐盐性和苗期(生长期)耐盐生理研究时能使土壤盐浓度处在某一恒定浓度下。本发明操作简便，在玉米种子萌发时期及生长期，既保证了玉米所需的水分和营养，又使其一直处在某一恒定土壤盐浓度下。
2. 本发明应用广，采用不同规格的花盆，按其比例可适用于不同大小的作物种子的苗期、生长期耐盐性分析及耐盐生理生化等分析。
附图说明
图1是玉米种子在不同盐浓度胁迫土壤的萌发和生长试验过程中，只加自来水，各时期的土壤的全盐量；
图2是玉米种子在不同盐浓度胁迫土壤的萌发和生长试验过程中，按本发明加入相应盐溶液和自来水，各时期的土壤的全盐量。
具体实施方式
下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。本发明所用原料及试剂均有市售。
实施例1
一种适于玉米盐胁迫下生理研究的土壤盐分梯度的调节方法，该方法步骤如下：
（1）取质地肥力均匀的土壤，自然风干，粉碎，备用；
（2）分别称取处理后的3000g土壤置于上口内径20cm，深15cm规格的圆形花盆中；
（3）设计5组不同浓度NaCl溶液，分别为1.50‰(I)、3.50‰(II)、5.50‰(III)、7.50‰(IV)及9.50‰(V)，5组中的每个花盆均当天先加300mL用NaCl配制好的盐溶液，混匀，放置1天，每个花盆中分别施入纯氮0.30 g，P2O5 0.16 g， K2O 0.1 g，每个花盆中分别播种5穴10粒郑单958玉米种子；
（4）在光照培养箱或室外自然条件下培养，培养条件下进行种子萌发和生长试验；
（5）发芽和幼苗生长试验，按所述过程加入相应的自来水及盐溶液，即当天先加300mL用NaCl配制好的盐溶液，混匀，放置1天，然后进行种子发芽试验；播种后的第4、8、12、16、20、24、28天加入定量100-200 mL的水；其中在第10、20、30天加入定量100-200 mL相应盐浓度的NaCl水溶液。
（6）在上述发芽试验中，同时在播种当天，每组均取3盆(3次重复)的土壤基质直接风干备用，之后各组每隔96h取3盆(3次重复)的土壤基质风干备用；
（7）发芽和幼苗生长试验土壤基质风干样品按一定的固液比（按1g风干土壤基质加5ml蒸馏水)加适量水，经3min的振荡或搅拌，过滤，吸取一定量的滤液，经蒸干后，称得的重量即为烘干残渣总量，将此烘干残渣总量再用过氧化氢去除有机质后干燥，称其重量即得土壤基质全盐量。
测定各时期的土壤全盐量结果见图2。
实施例2
玉米盐胁迫下土壤盐分的一般调节方法，该方法步骤如下：
（1）取质地肥力均匀的土壤，自然风干，粉碎，备用；
（2）分别称取处理后的3000g土壤置于上口内径20cm，深15cm规格的圆形花盆中；
（3）设计5组不同浓度NaCl溶液，分别为1.50‰(I)、3.50‰(II)、5.50‰(III)、7.50‰(IV)及9.50‰(V)，5组中的每个花盆均当天先加300mL用NaCl配制好的盐溶液，混匀，放置1天，每个花盆中分别施入纯氮0.30 g，P2O5 0.16 g， K2O 0.1 g，每个花盆中分别播种5穴10粒郑单958玉米种子；
（4）在光照培养箱或室外自然条件下培养，培养条件下进行种子萌发和生长试验；
（5）发芽和幼苗生长试验分两组进行，
按上述的实施过程，当天先加300mL用NaCl配制好的盐溶液，混匀，放置1天，然后进行种子发芽试验；播种后的第4、8、12、16、20、24、28天加入定量100-200 mL的水；
（6）在上述发芽试验中，同时在播种当天，每组均取3盆(3次重复)的土壤基质直接风干备用，之后各组每隔96h取3盆(3次重复)的土壤基质风干备用；
（7）发芽和幼苗生长试验土壤基质风干样品按一定的固液比（按1g风干土壤基质加5ml蒸馏水)加适量水，经3min的振荡或搅拌，过滤，吸取一定量的滤液，经蒸干后，称得的重量即为烘干残渣总量，将此烘干残渣总量再用过氧化氢去除有机质后干燥，称其重量即得土壤基质全盐量。
测定各时期的土壤全盐量结果见图１。
常规方法研究盐胁迫的土壤全盐量难以保持稳定，本发明方法保证了玉米种子萌发时期及生长期，处在某一恒定土壤盐浓度下。
图1说明玉米幼苗生长过程中，第一组只加自来水，各时期的土壤基质的全盐量在下降；图2表明按本发明实施过程，在整个玉米盐胁迫萌发和幼苗生长试验中，另一组土壤基质的全盐量与初始时差异不显著，基本没太大差异，达到了控制土壤基质盐浓度恒定的目的。
上述参照实施例对玉米苗期耐盐性分析及幼苗生长期生理生化分析时的盐浓度恒定控制方法的详细描述，仅用于说明本发明的技术思想和特点，其目的在于使相关研究人员能够理解本发明的内容并据此实施，其描述是说明性的，而不是限定性的，因而在不脱离本发明的构思下的变化和修改，应属于本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种适于玉米盐胁迫下生理研究的土壤盐分梯度的调节方法，其特征在于按如下的步骤进行：
（1）取质地和肥力均匀一致的土壤，风干，粉碎，备用；
（2）分别称取一定重量处理后的土壤置于统一规格的花盆中；
（3）根据所需盐浓度的要求，设计5组不同浓度NaCl水溶液，分别为：1.50‰(I)、3.50‰(II)、5.50‰(III)、7.50‰(IV)及9.50‰(V)，5组中的每个花盆均当天先加300mL用NaCl配制好的盐溶液，混匀，放置1天，用做玉米生长的土壤，然后每个花盆中分别施入纯氮0.30g，P2O5 0.16g， K2O 0.1g；
（4）每个花盆中分别播种5穴10粒郑单958玉米种子，播种后的第4、8、12、16、20、24、28天加入100-200 mL水；其中在第10、20、30天加入100-200 mL相应盐浓度的NaCl水溶液，在光照培养箱或室外自然条件下培养，进行玉米发芽和幼苗生长试验的分析。
2.权利要求1所述的调节方法，其特征在于：所述步骤（2）中称取处理后的定量土壤置于一定规格的花盆中具体为：称取3000g处理后的土壤，置于上口内径20cm，深15cm规格的圆形花盆中，如需大花盆可按相应土与盐溶液比例置放土壤。
3.权利要求1所述适于玉米盐胁迫下生理研究的土壤盐分梯度调节方法在用于控制恒定的不同盐浓度土壤基质方面的应用。
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