CN111855774A - 一种基于普鲁士蓝的智能可穿戴酶基生物传感器及其制备方法和应用 - Google Patents

一种基于普鲁士蓝的智能可穿戴酶基生物传感器及其制备方法和应用 Download PDF

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CN111855774A CN202010427072.XA CN202010427072A CN111855774A CN 111855774 A CN111855774 A CN 111855774A CN 202010427072 A CN202010427072 A CN 202010427072A CN 111855774 A CN111855774 A CN 111855774A
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Abstract

本发明提供一种基于普鲁士蓝的酶基生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、制备丝网印刷三电极传感阵列的网版；S2、制备柏林绿油墨：基于普鲁士蓝纳米晶中的柏林绿和导电碳浆结合制备柏林绿基丝网印刷浆料；S3、使用步骤S2中制备的柏林绿油墨，配合导电银浆和绝缘层油墨，在各类柔性基底上进行丝网印刷，制备过氧化氢传感器电极阵列；S4、在所述过氧化氢传感器阵列的工作电极表面修饰生物酶，获得酶基生物传感器。本发明基于柏林绿油墨制备生物传感器，制备过程简单、高效且成本低，得到的生物传感器表现出优异的基底适用性和稳定性。

Description

一种基于普鲁士蓝的智能可穿戴酶基生物传感器及其制备方 法和应用
技术领域
本发明涉及智能可穿戴的生物传感器技术领域，具体而言，尤其涉及一种基于丝网印刷的过氧化氢和葡萄糖传感器及其制作方法和应用。
背景技术
过氧化氢(H2O2)是一种极其常见的简单化合物，其不仅在临床应用，制药，环境领域，食品制造和疾病诊断中具有重要意义，同时，它还是许多酶生化反应的产物，例如葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖、尿酸氧化酶氧化尿酸等过程均会产生过氧化氢。因此，在酶基生物传感器以及实际领域中，过氧化氢的监测都起着至关重要的作用。就过氧化氢的检测而言，与传统的检测方法如荧光光谱法、分光光度法、化学分析法等相比，电化学检测过氧化氢具有简单、快速、灵敏、经济等优势。氧化还原蛋白、聚合物、过渡金属、金属氧化物等具有电化学活性的材料已经被用于检测过氧化氢。但是，理想情况下，电活性材料应在较低的过电位下表现出良好的催化活性。相较而言，普鲁士蓝纳米晶可以在大约-0.05V(相对于银/氯化银电极)的低电势下对过氧化氢进行安培检测，同时有效避免了尿酸和抗坏血酸等生物分子的干扰。
然而，普鲁士蓝纳米晶体通常通过传统的工艺在电极上进行修饰，例如滴涂、电沉积和喷墨印刷等，这些方式耗时，复杂且可重复性差。对于一步制备的无需进一步修饰普鲁士蓝纳米晶的电极，丝网印刷技术提供了有前景的途径去发展高效、低成本和易于制造的传感方法。
因此，有必要发展一种新型的过氧化氢检测方法，满足经济效益性、重复性以及传感性能等要求。同时，基于对过氧化氢的检测发展制备酶基生物传感器的通用型策略，并以葡萄糖传感器进行佐证。此外，发展可穿戴式生物传感器结合印刷电路板或蓝牙技术实现过氧化氢和葡萄糖等生物分子的远程、实时监控。
发明内容
根据上述提出现有的传感器制作过程复杂且重复性差等技术问题，而提供一种基于普鲁士蓝的酶基生物传感器及其制备方法和应用。本发明采用预先把柏林绿和导电碳浆结合制备柏林绿油墨，然后直接集成过氧化氢传感器，省略了现有技术中的把普鲁士蓝纳米晶溶液滴涂到碳浆电极表面的步骤，从而减少了多步骤带来的传感器性能的差异性。
本发明采用的技术手段如下：
一种基于普鲁士蓝的酶基生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、制备丝网印刷三电极传感阵列的网版；
S2、制备柏林绿油墨：基于普鲁士蓝纳米晶中的柏林绿和导电碳浆结合制备柏林绿基丝网印刷浆料；
S3、使用步骤S2中制备的柏林绿油墨，配合导电银浆和绝缘层油墨/绝缘层胶带，在各类柔性基底上进行丝网印刷，制备过氧化氢传感器电极阵列；
S4、在所述过氧化氢传感器阵列的工作电极表面修饰生物酶，获得酶基生物传感器。
进一步地，所述柏林绿油墨的制备具体包括：
S21、预先合成柏林绿纳米粒子，将含有0.1mol/L KCl的30-50mmol/L的FeCl3溶液10-20mL与0.6-1mL的浓HCl混合备用；
S22、将30-50mmol/L的K3[Fe(CN)6]溶液20mL逐滴加入到步骤S21中制备的混合溶液中，在室温下剧烈搅拌40小时后离心收集柏林绿纳米粒子；
S23、将4-20mg的柏林绿纳米粒子分散在120μL去离子水中并置于研钵里，加入0.6-3g导电碳浆并进行充分研磨。
进一步地，所述丝网印刷三电极传感阵列网版满足对电极的电极面积大于等于工作电极的电极面积；三电极之间间距小于等于2mm。
进一步地，所述对电极的电极面积为工作电极的电极面积的1.4倍，三电极之间间距为1mm。
进一步地，所述步骤S3中，柏林绿油墨、导电银浆与绝缘层油墨或者绝缘层胶带配合使用，先印刷导电银浆，然后印刷柏林绿油墨，最后印刷绝缘层油墨后或者使用绝缘层胶带后得到一个完整的过氧化氢传感器。
进一步地，采用丝网印刷印刷柏林绿油墨制作对电极和工作电极，采用导电银浆制作参比电极，绝缘层油墨/绝缘层胶带单独使用，覆盖在三个传感器阵列上用作绝缘。
进一步地，所述生物酶包括但不局限于葡萄糖氧化酶、乳酸氧化酶和尿酸氧化酶。
本发明还公开了一种基于普鲁士蓝的智能可穿戴酶基生物传感器，其特征在于，采用上述的制备方法制备得到酶基生物传感器，其中，柔性基底选取可穿戴材料，将其与具有蓝牙模块、电化学检测模块和信号处理模块的多功能电路板联用，实时获取传感数据。
本发明还公开了一种基于普鲁士蓝的智能可穿戴酶基葡萄糖传感器，其特征在于，采用上述的制备方法制备得到酶基生物传感器，将其与具有蓝牙模块、电化学检测模块和信号处理模块的多功能电路板联用，实时获取传感数据，其中，柔性基底选取可穿戴材料，生物酶采用葡萄糖氧化酶。
进一步地，在步骤S4中，过氧化氢传感器阵列的工作电极表面修饰葡萄糖氧化酶，将15-35mg葡萄糖氧化酶分散在0.5-1mL含5-10mg的牛血清白蛋白的磷酸缓冲液中，再将5-10mg壳聚糖和20μL乙酸溶于磷酸缓冲液中，将它们进行混合后把4μL液体滴涂在工作电极上，并在4℃下保存，获得酶基葡萄糖传感器。
较现有技术相比，本发明具有以下优点：
1、本发明基于柏林绿油墨的制备方法，可以发展一种通用的含活性材料的浆料制备方式。基于柏林绿油墨制备生物传感器的过程简单、高效且成本低，具有高的经济效益。
2、本发明基于该制作过程得到的生物传感器表现出优异的基底适用性和稳定性，作为可穿戴传感器，可以经受一定的拉伸和弯曲。
3、本发明所制备的过氧化氢传感器表现出极宽的线性范围、较低的检测限、良好的稳定性以及重复性。
4、本发明所制备的酶基葡萄糖传感器表现出较宽的线性范围、较低的检测限以及对底物优异的亲和力。
5.本发明所制备的酶基葡萄糖传感器可以与智能手机实时传输，能够实现生物分子的远程监控。
综上，本发明主要采用丝网印刷柏林绿油墨制备技术，将传统的三电极检测系统、丝网印刷技术和物联网技术等结合起来，可广泛应用于远程实时监测的各类传感器。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图做以简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1中柏林绿纳米粒子、柏林绿油墨以及传感器阵列的制备示意图，其中，(a)为柏林绿纳米粒子的制备示意图；(b)为整个实验过程的示意图；(c)为导电碳浆和柏林绿浆料的循环伏安曲线对比图。
图2为本发明实施例1中加入适量导电碳浆(3g)和不足量导电碳浆(0.6g)时柏林绿油墨的电化学性能分析。
图3为本发明实施例2中在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对过氧化氢进行检测的循环伏安测试曲线(a)、还原峰电位下的计时电流测试曲线(b)、电流-浓度线性关系图(c)、传感稳定性测试(d)以及实施例3中在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对葡萄糖进行检测的计时电流测试曲线(e)、电流-浓度线性关系图(f)。
图4为本发明实施例2中在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对不同浓度过氧化氢进行检测的循环伏安测试曲线(a)、由计时电流测试曲线获得的电流-浓度关系图(b)。
图5为本发明实施例2中不同传感器阵列的灵敏度的重复性。
图6为本发明实施例2、3中过氧化氢传感器以及酶基葡萄糖传感器的选择性测试图。
图7为本发明实施例3中的酶动力学方程分析图。
图8为本发明实施例4-6中在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对过氧化氢进行检测的循环伏安测试曲线(a)、还原峰电位下的计时电流测试曲线(b)、电流-浓度线性关系图(c)、传感器的机械性能测试(d)以及智能手机远程监测的计时电流测试曲线(e)、电流-浓度线性关系图(f)。
图9为本发明实施例5中在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对葡萄糖进行检测的计时电流测试曲线、电流-浓度关系图(a)以及酶动力学方程分析图(b)。
图10为本发明实施例3、5和6中检测葡萄糖的机理图以及智能手机远程监测葡萄糖的计时电流测试曲线。
图11为本发明实施例6中智能手机远程监测葡萄糖的还原电流-浓度关系图。
具体实施方式
需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。以下对至少一个示例性实施例的描述实际上仅仅是说明性的，决不作为对本发明及其应用或使用的任何限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
本发明提供了一种基于普鲁士蓝的酶基生物传感器的制备方法，包括如下步骤：
S1、制备丝网印刷三电极传感阵列的网版；所述丝网印刷三电极传感阵列网版满足对电极的电极面积大于等于工作电极的电极面积；三电极之间间距小于等于2mm。所述对电极的电极面积为工作电极的电极面积的1.4倍，三电极之间间距为1mm。
S2、制备柏林绿油墨：基于普鲁士蓝纳米晶中的柏林绿和导电碳浆结合制备柏林绿基丝网印刷浆料；所述柏林绿油墨的制备具体包括：
S21、预先合成柏林绿纳米粒子，将含有0.1mol/L KCl的30-50mmol/L的FeCl3溶液10-20mL与0.6-1mL的浓HCl混合备用；
S22、将30-50mmol/L的K3[Fe(CN)6]溶液20mL逐滴加入到步骤S21中制备的混合溶液中，在室温下剧烈搅拌40小时后离心收集柏林绿纳米粒子；
S23、将4-20mg的柏林绿纳米粒子分散在120μL去离子水中并置于研钵里，加入0.6-3g导电碳浆并进行充分研磨。
S3、使用步骤S2中制备的柏林绿油墨，配合导电银浆和绝缘层油墨，在各类柔性基底(如PET、丁腈手套等)上进行丝网印刷，分别刷涂上述丝网印刷类浆料，制备过氧化氢传感器电极阵列；所述步骤S3中，柏林绿油墨、导电银浆与绝缘层油墨或者绝缘层胶带配合使用；先印刷导电银浆，然后印刷柏林绿油墨，最后印刷绝缘层油墨后或者使用绝缘层胶带后得到一个完整的过氧化氢传感器。优选方案，采用丝网印刷印刷柏林绿油墨制作对电极和工作电极，采用导电银浆制作参比电极，绝缘层油墨/绝缘层胶带单独使用，覆盖在三个传感器阵列上用作绝缘。
S4、在所述过氧化氢传感器阵列的工作电极表面修饰生物酶，获得酶基生物传感器。所述生物酶包括但不局限于葡萄糖氧化酶、乳酸氧化酶和尿酸氧化酶。
本发明还公开了一种基于普鲁士蓝的智能可穿戴酶基生物传感器，采用上述的制备方法制备得到酶基生物传感器，其中，柔性基底选取可穿戴材料，如丁腈手套，在手套表面通过丝网印刷制备酶基生物传感器，将其与具有蓝牙模块、电化学检测模块和信号处理模块的多功能电路板联用，实时获取传感数据。
本发明还公开了一种基于普鲁士蓝的智能可穿戴酶基葡萄糖传感器，采用上述的制备方法制备得到酶基生物传感器，将其与具有蓝牙模块、电化学检测模块和信号处理模块的多功能电路板联用，实时获取传感数据，其中，柔性基底选取可穿戴材料，生物酶采用葡萄糖氧化酶。过氧化氢传感器阵列的工作电极表面修饰葡萄糖氧化酶，将15-35mg葡萄糖氧化酶分散在0.5-1mL含5-10mg的牛血清白蛋白的磷酸缓冲液中，再将5-10mg壳聚糖和20μL乙酸溶于磷酸缓冲液中，将它们进行混合后把4μL液体滴涂在工作电极上，并在4℃下保存，获得酶基葡萄糖传感器。
实施例1
预先合成柏林绿纳米粒子并制备柏林绿油墨，进而对柏林绿浆料的性能进行分析，主要使用电化学工作站，利用循环伏安技术分析柏林绿浆料的电化学性能。也就是所表现出来的隶属于普鲁士蓝纳米晶的氧化还原性能。
柏林绿油墨的制备如下：将含有0.1mol/L KCl的45-50mmol/L的FeCl3溶液15-20mL与1mL的浓HCl混合。随后，45-50mmol/L的K3[Fe(CN)6]溶液20mL逐滴加入混合溶液中。在室温下剧烈搅拌40小时后离心收集柏林绿纳米粒子。随后，将15-20mg的柏林绿纳米粒子分散在120μL去离子水中并置于研钵里，一次性或分次加入0.6-3克导电碳浆进行充分研磨。以聚对苯二甲酸乙二酯(PET)为基底，以柏林绿油墨、导电银浆和绝缘层油墨为丝网印刷浆料制作传感器阵列。待60℃烘干后，在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对柏林绿油墨的电化学性能进行分析。
如图1所示，(a)、(b)是实施例1中柏林绿纳米粒子、柏林绿油墨以及传感器阵列的制备示意图。同时，通过循环伏安法对柏林绿油墨的电化学性能进行了分析，如图1(c)所示，与导电碳浆相比(黑色曲线)，混入柏林绿纳米粒子的碳浆表现出一对明显的属于普鲁士蓝纳米晶的氧化还原峰(灰色曲线)，并且具有较小的峰位差，说明制备的柏林绿墨水具有较为优异的电化学性能。
如图2所示，是实施例1中加入适量碳浆(3g)和不足量碳浆(0.6g)时柏林绿油墨的电化学性能分析。图2(a)表现出比图2(b)更小的峰位差，说明在同样量的柏林绿纳米粒子的存在下，加入适量的碳浆所得到的油墨具有更好的导电性，进而会表现出更好的电化学性能。
实施例2
得到性能最优的柏林绿油墨以后，以PET为基底，以柏林绿油墨、导电银浆和绝缘层油墨为丝网印刷浆料制作过氧化氢传感器阵列。60℃烘干后在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对不同浓度的过氧化氢进行检测。使用这种最优油墨集成过氧化氢传感器，同样利用电化学工作站，然后在PBS里加入不同浓度的过氧化氢去测试循环伏安曲线和时间-电流曲线。分析这种传感器的过氧化氢传感性能。
如图3所示，图3(a)-3(d)反映出了PET基的过氧化氢传感器在0-10mmol/L，且以1mmol/L逐渐增加的过氧化氢浓度范围内具有优异的传感性能：较高的灵敏度，低的检测限以及好的稳定性。图3(e)-3(f)反映出PET基葡萄糖传感器在0-2.1mmol/L，且以0.3mmol/L逐渐增加的葡萄糖浓度范围内具有优异的灵敏度和低的检测限。
如图4所示，体现出了柏林绿纳米粒子在逐渐增加的过氧化氢浓度内具有类似于过氧化氢酶的效果。
如图5所示，是实施例2中不同传感器阵列的灵敏度的重复性，说明了此类过氧化氢传感器具有极好的重复性。
实施例3
以丝网印刷的过氧化氢传感器为基础，在其工作电极表面修饰葡萄糖氧化酶获得酶基葡萄糖传感器。首先将30-35mg葡萄糖氧化酶分散在0.8-1mL含8-10mg的牛血清白蛋白的磷酸缓冲液中。其次，将8-10mg壳聚糖和20μL乙酸溶于1mL磷酸缓冲液。最后，将它们进行混合后把4μL液体在工作电极上，并在4℃下过夜。随后在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对不同浓度的葡萄糖进行检测。
如图6所示，是实施例2、3中过氧化氢传感器以及酶基葡萄糖传感器的选择性测试。说明了两种传感器均不受外界存在的杂质分子的干扰，图6(a)说明过氧化氢传感器仅对过氧化氢产生作用，图6(b)说明葡萄糖传感器仅对葡萄糖产生作用。
如图7所示，是实施例3中的酶动力学方程分析图。电流和葡萄糖浓度的关系符合米氏方程，并且拟合后具有较小的表观米氏常数，说明了酶基葡萄糖传感器对底物葡萄糖具有好的亲和力。
实施例4
以丁腈手套为基底，以柏林绿油墨、导电银浆和绝缘层油墨为丝网印刷浆料制作可穿戴过氧化氢传感器阵列。60℃烘干后在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对不同浓度的过氧化氢进行检测。
实施例5
以可穿戴过氧化氢传感器阵列为基础(丁腈手套上集成传感器)，在其工作电极表面修饰葡萄糖氧化酶获得酶基葡萄糖传感器。首先将35mg葡萄糖氧化酶分散在1mL含10mg的牛血清白蛋白的磷酸缓冲液中。其次，将10mg壳聚糖和20μL乙酸溶于1mL磷酸缓冲液。最后，将它们进行混合后把4μL液体在工作电极上，并在4℃下过夜。随后在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对不同浓度的葡萄糖进行检测。
如图9所示，是实施例5中在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对葡萄糖进行检测的计时电流测试曲线、电流-浓度关系图以及酶动力学方程分析图，图9(a)说明了可穿戴葡萄糖传感器具有优异的灵敏度，图9(b)说明了可穿戴葡萄糖传感器对葡萄糖有好的亲和力。
实施例6
以可穿戴过氧化氢传感器阵列和酶基葡萄糖传感器阵列为基础，使用蓝牙工作站通过蓝牙与智能手机相连，并在pH＝7.4的磷酸缓冲液中对过氧化氢和葡萄糖进行检测。如图11所示，是实施例6中智能手机远程监测葡萄糖的还原电流-浓度关系图，说明了借助手机所获得的葡萄糖的响应信号是可靠的。
如图8所示，图8(a)、(b)说明了可穿戴的过氧化氢传感器同样具有优异的灵敏度，图8(c)、(d)说明了这种传感器还具有好的机械性能，在发生形变的情况下还可以具有稳定的信号响应。图8(e)、(f)则证明了用手机可以成功地对过氧化氢进行检测。
如图10所示，是实施例3、5和6中检测葡萄糖的机理图以及智能手机远程监测葡萄糖的计时电流测试曲线。说明了为何基于过氧化氢传感器能够发展得到葡萄糖传感器，以及证明了借助手机可以实现对葡萄糖分子的检测。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.一种基于普鲁士蓝的酶基生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、制备丝网印刷三电极传感阵列的网版；
S2、制备柏林绿油墨：基于普鲁士蓝纳米晶中的柏林绿和导电碳浆结合制备柏林绿基丝网印刷浆料；
S3、使用步骤S2中制备的柏林绿油墨，配合导电银浆和绝缘层油墨/绝缘层胶带，在各类柔性基底上进行丝网印刷，制备过氧化氢传感器电极阵列；
S4、在所述过氧化氢传感器阵列的工作电极表面修饰生物酶，获得酶基生物传感器。
2.根据权利要求1所述的基于普鲁士蓝的酶基生物传感器的制备方法，其特征在于，所述柏林绿油墨的制备具体包括：
S21、预先合成柏林绿纳米粒子，将含有0.1mol/L KCl的30-50mmol/L的FeCl3溶液10-20mL与0.6-1mL的浓HCl混合备用；
S22、将30-50mmol/L的K3[Fe(CN)6]溶液20mL逐滴加入到步骤S21中制备的混合溶液中，在室温下剧烈搅拌40小时后离心收集柏林绿纳米粒子；
S23、将4-20mg的柏林绿纳米粒子分散在120μL去离子水中并置于研钵里，加入0.6-3g导电碳浆并进行充分研磨。
3.根据权利要求1所述的基于普鲁士蓝的酶基生物传感器的制备方法，其特征在于，所述丝网印刷三电极传感阵列网版满足对电极的电极面积大于等于工作电极的电极面积；三电极之间间距小于等于2mm。
4.根据权利要求3所述的基于普鲁士蓝的酶基生物传感器的制备方法，其特征在于，所述对电极的电极面积为工作电极的电极面积的1.4倍，三电极之间间距为1mm。
5.根据权利要求1所述的基于普鲁士蓝的酶基生物传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，柏林绿油墨、导电银浆与绝缘层油墨或者绝缘层胶带配合使用，先印刷导电银浆，然后印刷柏林绿油墨，最后印刷绝缘层油墨后或者使用绝缘层胶带后得到一个完整的过氧化氢传感器。
6.根据权利要求5所述的基于普鲁士蓝的酶基生物传感器的制备方法，其特征在于，采用丝网印刷印刷柏林绿油墨制作对电极和工作电极，采用导电银浆制作参比电极，绝缘层油墨/绝缘层胶带单独使用，覆盖在三个传感器阵列上用作绝缘。
7.根据权利要求1所述的基于普鲁士蓝的酶基生物传感器的制备方法，其特征在于，所述生物酶包括但不局限于葡萄糖氧化酶、乳酸氧化酶和尿酸氧化酶。
8.一种基于普鲁士蓝的智能可穿戴酶基生物传感器，其特征在于，采用权利要求1-7任意权利要求所述的制备方法制备得到酶基生物传感器，其中，柔性基底选取可穿戴材料，将其与具有蓝牙模块、电化学检测模块和信号处理模块的多功能电路板联用，实时获取传感数据。
9.一种基于普鲁士蓝的智能可穿戴酶基葡萄糖传感器，其特征在于，采用权利要求1-7任意权利要求所述的制备方法制备得到酶基生物传感器，将其与具有蓝牙模块、电化学检测模块和信号处理模块的多功能电路板联用，实时获取传感数据，其中，柔性基底选取可穿戴材料，生物酶采用葡萄糖氧化酶。
10.根据权利要求9所述的基于普鲁士蓝的智能可穿戴酶基葡萄糖传感器，其特征在于，在步骤S4中，过氧化氢传感器阵列的工作电极表面修饰葡萄糖氧化酶，将15-35mg葡萄糖氧化酶分散在0.5-1mL含5-10mg的牛血清白蛋白的磷酸缓冲液中，再将5-10mg壳聚糖和20μL乙酸溶于磷酸缓冲液中，将它们进行混合后把4μL液体滴涂在工作电极上，并在4℃下保存，获得酶基葡萄糖传感器。
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