CN111840545A - 依鲁替尼作为血管抑制剂的作用、降低其副作用的药物及其用途 - Google Patents

Abstract

本申请公开了一种依鲁替尼作为血管抑制剂的用途、降低其副作用的药物及其用途。具体公开了依鲁替尼作为血管抑制剂的用途、抗BMP4抗体在制备降低依鲁替尼副作用的药物中的用途。在MCL或CLL患者接受依鲁替尼用药治疗时，如发现出血、房颤等副反应，与抗BMP4抗体药物联合用药，可以减轻血管损伤，降低出血等副反应。

Description

依鲁替尼作为血管抑制剂的作用、降低其副作用的药物及其 用途

技术领域

本申请涉及降低依鲁替尼副作用的药物组合物及其用途。具体涉及抗BMP4抗体在制备降低依鲁替尼副作用的药物中的用途及包括其的药物组合物，还涉及依鲁替尼作为血管抑制剂的用途。

背景技术

依鲁替尼(Ibrutinib)是全球第一个上市的BTK抑制剂，该药通过与靶蛋白BTK活性位点半胱氨酸残基(Cys-481)选择性地共价结合，不可逆性地抑制BTK，从而有效地阻止肿瘤从B细胞迁移到适应于肿瘤生长环境的淋巴组织。美国FDA分别于2013年11月和2014年2月批准依鲁替尼用于治疗套细胞淋巴瘤(Mantle cell lymphoma，MCL)和慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)患者。2017年8月，杨森公司的依鲁替尼胶囊获CFDA批准上市，为中国的B细胞肿瘤患者带来新的希望。

但是，依鲁替尼药物在患者使用时可能会产生副作用。常见的副作用包括：出血、感染、骨髓抑制、肾毒性、第二原发恶性肿瘤、胚胎-胎儿毒性。在套细胞淋巴瘤(MCL)的患者中最常见不良反应(≥20％)是血小板减少，腹泻，中性粒细胞减少，贫血，疲乏，肌肉骨骼痛，周边水肿，上呼吸道感染，恶心，瘀伤，呼吸困难，便秘，皮疹，腹痛，呕吐和食欲减低。在慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者中最常见不良反应(≥20％)是血小板减少，腹泻，瘀伤，中性粒细胞减少，贫血，上呼吸道感染，疲乏，肌肉骨骼痛，皮疹，发热，便秘，周边水肿，关节痛，恶心，口腔炎，鼻窦炎和眩晕。依鲁替尼的说明书中明确表明：5％的MCL患者有3级或更高级别的出血事件(硬膜下血肿、胃肠道出血和血尿)。对于这些患者，严重的副作用不仅严重影响了生活质量，甚至有可能影响患者对于治疗的信心和治疗的选择，从而影响整体疾病治疗的预后。目前，对于降低依鲁替尼的副反应尚无行之有效的方法。

发明内容

本申请提供了抗BMP4(骨形态发生蛋白-4)抗体在制备降低依鲁替尼副作用的药物中的用途，所述副作用包括出血。本文所述的出血包括由于血管完整性受到破坏而导致的各种症状，包括但不限于瘀伤、硬膜下血肿、胃肠道出血、血尿和出血导致的贫血等。

本申请的发明人研究发现，依鲁替尼给药导致出血副作用的原因是由于依鲁替尼能够杀伤血管内皮细胞，并且该杀伤作用是通过诱导BMP4蛋白的表达从而破坏血管的完整性。在此基础上，发明人进一步发现，通过抗BMP4抗体与依鲁替尼的联合用药，能够减轻血管损伤，从而能够降低出血等副作用。

在本发明中，抗BMP4抗体可以为能够阻断BMP4与其受体结合的任何抗体。由于发明人研究发现的依鲁替尼产生出血副作用的通路是通过诱导BMP4蛋白表达进行的，那么阻断该通路就能够避免出血副作用的产生。发明人另外也通过实验验证了BMP4能够破坏血管的完整性。而BMP4发挥其生理作用是通过与BMP4受体的结合从而激发一系列后续反应产生的。换句话说，该抗BMP4抗体可以为能够阻断BMP4功能，从而保护血管完整性的任何抗BMP4抗体。优选与BMP4受体产生竞争性抑制的抗BMP4抗体。在一个优选的实施方式中，所述抗BMP4抗体识别的抗原表位可以为BMP4的Ser293-Arg408表位。在一个优选的实施方式中，所述抗BMP4抗体为单抗。

本发明还提供了一种用于降低依鲁替尼副作用的药物组合物，所述药物组合物包括如上所述的抗BMP4抗体。该抗BMP4抗体为阻断BMP4功能的抗体，优选阻断BMP4与其受体结合的抗体。在一个优选的实施方式中，用于降低依鲁替尼副作用的药物组合物中包括的所述抗BMP4抗体为与BMP4受体产生竞争性抑制的抗体，优选所述抗体识别的抗原表位为BMP4的Ser293-Arg408表位。该抗BMP4抗体优选为单抗。

本发明还提供了一种药物组合，包括依鲁替尼和抗BMP4抗体。这两种药物联合使用，能够在治疗癌症的同时降低出血的副作用风险。

在一个优选的实施方式中，所述的药物组合中抗BMP4抗体与依鲁替尼的摩尔比大于或等于13.3:2。在此比例范围内，抗BMP4抗体能够有效地降低出血的副作用风险，对于已经给药依鲁替尼的患者，甚至能够治疗该副作用导致的出血。如果抗BMP4抗体的比例过低，则不能起到降低出血的作用。抗BMP4抗体与依鲁替尼的摩尔比优选为13.3：2至66.5:1，更优选摩尔比为13.3：2至33.25：1，更加优选的摩尔比为13.3：2至13.3：1。因为发明人在研究过程中发现，对于1μM依鲁替尼给药的情况，使用1μg/ml的抗BMP4抗体(相当于6.65μM抗体)已经能够实现降低依鲁替尼对于血管生成破坏的影响，而0.5μg/ml的抗BMP4抗体则没有此等效果。使用5μg/ml的抗BMP4抗体(相当于33.25μM抗体)已经能够相当显著地更大程度降低依鲁替尼对于血管生成破坏的影响；使用10μg/ml的抗BMP4抗体(相当于66.5μM抗体)已经能够实现基本上消除依鲁替尼对于血管生成破坏的影响。如果抗BMP4抗体的比例过高，则成本过高而且并不会带来更进一步的效果。因此，高于这个比例不是特别必要。

在所述的药物组合中，抗BMP4抗体可以为冻干粉形式，在使用之前可以溶于药用胃肠外给药载体，例如水、盐水、葡萄糖溶液等，用于静脉注射给药。抗BMP4抗体可以与依鲁替尼分别给药，例如可在依鲁替尼给药的同时或之后通过注射的方式给药。

本发明还提供了一种试剂盒，包括依鲁替尼和上述抗BMP4抗体。该试剂盒中的依鲁替尼和抗BMP4抗体可以联合用药，用于治疗依鲁替尼适应症的同时降低其出血副作用。可以应用于已经发现会产生严重出血副作用的患者做改善性治疗。其比例如上所述，与上述药物组合中的比例相同。

进一步地，在对于依鲁替尼出血的副作用的研究过程中，发明人发现依鲁替尼能够通过杀伤血管内皮细胞，破坏血管网的完整性，从而作为血管抑制剂发挥作用。因此，本发明还提供了依鲁替尼作为血管抑制剂的用途，特别是用于杀伤血管内皮细胞的用途。利用依鲁替尼的血管抑制剂的用途，使得利用依鲁替尼能够在需要抑制血管生成的疾病治疗过程中发挥作用。

附图说明

图1是本发明的实施例得到的结果数据。其中，A：荧光定量PCR检测BMP4的mRNA表达水平。内皮细胞经依鲁替尼(5.0μM)处理48小时后，检测BMP4的mRNA表达，未经依鲁替尼处理的对照值设为1。****P＜0.0001。B：用不同浓度的依鲁替尼(0μM、1μM、2.0μM和5.0μM)处理内皮细胞，48小时后，用免疫印记检测BMP4蛋白的表达量。C：免疫印记BMP4条带的积分光密度(IOD)值，即BMP4相对蛋白表达量。结果表明：依鲁替尼药物处理的血管内皮细胞，能够显著刺激BMP4蛋白的表达。

图2是本发明的实施例得到的结果数据。A：基质凝胶血管形成实验。血管内皮细胞在未处理和用梯度浓度的依鲁替尼处理(0.25μM、0.5μM、1.0μM、2.0μM和5.0μM)预处理12小时后，在基质凝胶上孵育8小时，用Calcein AM活细胞染色观察血管网络。比例尺：500微米。应用Image J软件定量分析图A中内皮细胞血管网的不同参数。B：节点数量；C：交叉点数量；D：血管网总长度。**P＜0.01，***P＜0.001，****P＜0.0001。结果表明：依鲁替尼药物处理血管内皮细胞能够破坏血管网完整性。

图3是本发明的一个实施例。A：体外基质凝胶血管形成实验。血管内皮细胞在基质凝胶上孵育8小时，同时用重组人BMP4蛋白(200ng/ml)处理，未经处理的细胞作为对照。用Calcein AM活细胞染色观察血管网络。比例尺：500微米。应用Image J软件定量分析内皮细胞血管网的不同参数。B：节点数量；C：交叉点数量；D：血管网总长度。****P＜0.0001。结果表明：重组人BMP4蛋白处理血管内皮细胞可以破坏血管网的完整性。

图4是本发明的一个实施例。A：体外基质凝胶血管形成实验。血管内皮细胞经依鲁替尼(1μM)、BMP4抗体(2μg/ml)或依鲁替尼(1μM)与BMP4抗体(2μg/ml)联合预处理12小时后，在基质凝胶上孵育8小时，用Calcein AM活细胞染色观察血管网络。比例尺：500微米。未经处理的细胞作为对照。B：应用Image J软件定量分析A图中内皮细胞血管网的不同参数，包括节点数量、交叉点数量和血管网总长度。**P＜0.01，***P＜0.001。C：体外基质凝胶血管形成实验。血管内皮细胞经依鲁替尼(2μM)、BMP4抗体(2μg/ml)或依鲁替尼(2μM)与BMP4抗体(2μg/ml)联合预处理12小时后，在基质凝胶上孵育8小时，用Calcein AM活细胞染色观察血管网络。比例尺：500微米。未经处理的细胞作为对照。D:应用Image J软件定量分析C图中内皮细胞血管网的不同参数，包括节点数量、交叉点数量和血管网总长度。***P＜0.001，****P＜0.0001。结果表明：依鲁替尼处理可以抑制血管生成，破坏血管网的完整性；而BMP4抗体单独处理对血管生成无明显影响；二者联合用药可以显著抑制依鲁替尼对血管网络的破坏作用。

图5是本发明的一个实施例。A：体外基质凝胶血管形成实验。血管内皮细胞经依鲁替尼(1.0μM)与抗BMP抗体(0.5μg/ml)、依鲁替尼(1.0μM)与抗BMP抗体(5μg/ml)或依鲁替尼(1.0μM)与BMP4抗体(10μg/ml)联合预处理12小时后，在基质凝胶上孵育8小时，用CalceinAM活细胞染色观察血管网络。比例尺：500微米。未经处理的细胞作为对照。B～D：应用ImageJ软件定量分析A图中内皮细胞血管网的不同参数，包括节点数量(B)、交叉点数量(C)和血管网总长度(D)。**P＜0.01，***P＜0.001。结果表明：对于依鲁替尼处理抑制血管生成，破坏血管网的完整性的作用，同时加入抗BMP4抗体0.5μg/ml处理时对血管生成基本无明显影响；同时加入抗BMP4抗体5μg/ml或10μg/ml处理时的二者联合用药可以显著抑制依鲁替尼对血管网络的破坏作用。

具体实施方式

下文中通过具体实施例更详细地说明本申请的实施方式和发明构思，但是应了解，其仅为示例性作用，本发明的保护范围由权利要求书所限定。

依鲁替尼是有效治疗套细胞淋巴瘤(Mantle cell lymphoma，MCL)和慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)的药物，其治疗效果优异，为患者带来了治愈的希望。但是正如其药品说明书中所言，仍然存在各种副作用的风险，特别是出血的副作用可能导致比较严重的后果。为了克服依鲁替尼副作用的危害，本发明提供了一种治疗依鲁替尼副作用的方法，特别是针对出血的副作用提供了有效的治疗手段和药物。本文所用的术语“治疗”应该被理解为抑制、减轻、改善出血。

本发明提供了一种药物组合，或者试剂盒，通过抗BMP4抗体与依鲁替尼的联合给药，显著减轻甚至消除了依鲁替尼的出血副作用。其中所述抗体和依鲁替尼可以分别给药，可以分别保存。但是不排除依鲁替尼同时给药同时保存的情况。依鲁替尼和该抗体也可以以组合物的形式提供，通过胃肠道外的方式给药。也就是说，对于依鲁替尼改进的胃肠道外给药的剂型，抗BMP4抗体可以与其形成药物组合物，用于同时避免出血的副作用。

根据本发明，抗BMP4抗体的给药途径是胃肠道外给药，包括静脉注射、皮下注射或腹腔注射。包括该抗BMP4抗体的药物组合物可以用于治疗由于依鲁替尼用药导致的出血等副作用。

在研究中，发明人验证了BMP4与依鲁替尼出血副作用的关系，从而设计出了利用抗BMP4抗体治疗出血的治疗途径，并且经实验验证了其有效性。同时，还确定了与依鲁替尼联合使用时所需的比例，进一步优化了治疗的效果。

体外基质凝胶血管形成实验的材料及方法

实验材料：

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，取自正常的人脐静脉内皮细胞。

基质胶Matrigel

实验中所用抗BMP4抗体是指鼠抗人BMP4抗体，购自R&D公司(Catalog#:MAB757)

“依鲁替尼”购自MCE公司(Catalog#:HY-10997)。

实验方法：

将基质胶Matrigel溶液铺于24孔板，37摄氏度孵育半小时。随后，将HUVEC细胞悬液置于基质胶上，细胞根据实验需求分为加药和不加药处理，将细胞铺好后放入培养箱培养8小时。在细胞中加入荧光染料Calcein AM观察细胞的荧光影像。

实验过程：

待HUVEC长至80％-90％,弃去10厘米培养皿中的培养基。用PBS清洗HUVEC以去除残留的细胞碎片，摇匀后弃去。加入0.05％胰酶溶液，使皿底细胞都浸入溶液中。待细胞消化完成，在培养皿中加入培养基终止消化，轻柔吹打细胞至脱落。将细胞悬液移至离心管中离心，转速1100rpm，时间5分钟。离心期间，准备6厘米皿并标记，每个6厘米皿中加入2ml培养基。待细胞离心完成后，弃去上清，弹散细胞，加入4ml培养基并重悬细胞。每个6厘米培养皿中加入1毫升细胞悬液(约3×10⁵个细胞)，摇匀放入培养箱。待细胞贴壁后进行药物预处理。

24孔板铺胶：使用预冷的枪头，将基质胶与培养基(无FBS)按照1：1，用预冷枪头吸取基质胶250微升/孔。将24孔板放入37℃培养箱30分钟，使胶凝固。

将药物预处理后的细胞用胰酶消化，并用培养基终止消化待测细胞，放入15毫升离心管中，离心后去上清。每管加入1ml培养基后计数并稀释，将浓度调为1×10⁵个细胞/ml。将细胞缓慢注入预先铺好的基质胶孔里，继续培养。观察8小时的血管荧光影像(Calcein AM)，在倒置显微镜下观察细胞的变化并摄取细胞图像，记录血管的成形情况。

实施例1荧光定量PCR和免疫印迹检测依鲁替尼对BMP4表达量的影响

待HUVEC长至80％-90％,弃去10厘米培养皿中的培养基。用PBS清洗HUVEC以去除残留的细胞碎片，摇匀后弃去。加入0.05％胰酶溶液，使皿底细胞都浸入溶液中。待细胞消化完成，在培养皿中加入培养基终止消化，轻柔吹打细胞至脱落。将细胞悬液移至离心管中离心，转速1100rpm，时间5分钟。离心期间，准备6厘米培养皿并标记，每个6厘米培养皿中加入2ml培养基。待细胞离心完成后，弃去上清，弹散细胞，加入4ml培养基并重悬细胞。每个6厘米培养皿中加入1毫升细胞悬液(约3×10⁵个细胞)，摇匀放入培养箱。待细胞贴壁后进行药物预处理。

将培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)经依鲁替尼(5.0μM)处理48小时后，收获细胞，检测BMP4的mRNA表达，mRNA表达的检测方法为本领域公知，在此不再赘述。

结果参见图1中的A图，其中，未经依鲁替尼处理的对照值设为1。****P＜0.0001。由图1中的A图可见，依鲁替尼处理后的细胞BMP4的表达量显著升高。

实施例2依鲁替尼与BMP4表达的相关性

如实施例1所述培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并用药物处理，不同的是，用不同浓度的依鲁替尼(0μM、1μM、2.0μM和5.0μM)处理内皮细胞，48小时后，用免疫印记检测BMP4蛋白的表达量，免疫印记为本领域公知的技术，此处不再赘述。结果参见图1中的B图。检测免疫印记BMP4条带的积分光密度(IOD)值，即BMP4相对蛋白表达量。结果参见图1中的C图。上述结果表明：依鲁替尼药物处理的血管内皮细胞，能够显著刺激BMP4蛋白的表达。

实施例3检测依鲁替尼对于血管形成的影响

采用如上所述的基质凝胶血管形成实验检测依鲁替尼对于血管形成的影响。结果参见图2：其中，A：基质凝胶血管形成实验。血管内皮细胞在未处理和用梯度浓度的依鲁替尼处理(0.25μM、0.5μM、1.0μM、2.0μM和5.0μM)预处理12小时后，在基质凝胶上孵育8小时，用Calcein AM活细胞染色观察血管网络。比例尺：500微米。应用Image J软件定量分析图A中内皮细胞血管网的不同参数。B：节点数量；C：交叉点数量；D：血管网总长度。**P＜0.01，***P＜0.001，****P＜0.0001。结果表明：依鲁替尼药物处理血管内皮细胞能够破坏血管网完整性。

实施例4BMP4对血管形成的影响

采用如上所述的体外基质凝胶血管形成实验，血管内皮细胞在基质凝胶上孵育8小时，同时用重组人BMP4蛋白(200ng/ml)处理，未经处理的细胞作为对照。用Calcein AM活细胞染色观察血管网络。结果参见图3，其中，A：体外基质凝胶血管形成实验中Calcein AM活细胞染色观察血管网络的照片，比例尺：500微米；同时，应用Image J软件定量分析内皮细胞血管网的不同参数。B：节点数量；C：交叉点数量；D：血管网总长度。****P＜0.0001。结果表明：重组人BMP4蛋白处理血管内皮细胞可以破坏血管网的完整性。

实施例5依鲁替尼和抗BMP4抗体联合用药的效果研究

采用如上所述的体外基质凝胶血管形成实验，血管内皮细胞分别经不同浓度依鲁替尼与不同浓度的抗BMP4抗体联合用药处理，检测对于血管形成的影响。结果参见图4。

图4的A为分别用依鲁替尼(1μM)、抗BMP4抗体(2μg/ml)或依鲁替尼(1μM)与抗BMP4抗体(2μg/ml)联合预处理12小时后，在基质凝胶上孵育8小时，用Calcein AM活细胞染色观察血管网络的照片。比例尺：500微米。未经处理的细胞作为对照。B：应用Image J软件定量分析A图中内皮细胞血管网的不同参数，包括节点数量、交叉点数量和血管网总长度。**P＜0.01，***P＜0.001。C：体外基质凝胶血管形成实验。血管内皮细胞经依鲁替尼(2μM)、BMP4抗体(2μg/ml)或依鲁替尼(2μM)与BMP4抗体(2μg/ml)联合预处理12小时后，在基质凝胶上孵育8小时，用Calcein AM活细胞染色观察血管网络。比例尺：500微米。未经处理的细胞作为对照。D:应用Image J软件定量分析C图中内皮细胞血管网的不同参数，包括节点数量、交叉点数量和血管网总长度。***P＜0.001，****P＜0.0001。结果表明：依鲁替尼处理可以抑制血管生成，破坏血管网的完整性；而抗BMP4抗体单独处理对血管生成无明显影响；二者联合用药可以显著抑制依鲁替尼对血管网络的破坏作用。并且不同浓度比例的依鲁替尼和抗BMP4抗体产生不同的效果，具体而言，使用2μg/ml的抗BMP4抗体时，其对于1μM依鲁替尼给药的情况，产生的降低血管损伤的效果要优于2μg/ml的抗BMP4抗体+2μM依鲁替尼给药的情况，对比图4A的最后一幅图和图4C的最后一幅图，以及图4B的最后一幅图和图4D的最后一幅图可知。

实施例6依鲁替尼和抗BMP4抗体联合用药的效果研究

为了进一步研究依鲁替尼与抗BMP4抗体比例的影响，发明人进一步设计了如下实验：A：体外基质凝胶血管形成实验。血管内皮细胞经依鲁替尼(1.0μM)与抗BMP抗体(0.5μg/ml)、依鲁替尼(1.0μM)与抗BMP抗体(5μg/ml)或依鲁替尼(1.0μM)与BMP4抗体(10μg/ml)联合预处理12小时后，在基质凝胶上孵育8小时，用Calcein AM活细胞染色观察血管网络。比例尺：500微米。未经处理的细胞作为对照。B：应用Image J软件定量分析A图中内皮细胞血管网的不同参数，包括节点数量、交叉点数量和血管网总长度。**P＜0.01，***P＜0.001。结果表明：对于依鲁替尼处理抑制血管生成，破坏血管网的完整性的作用，同时加入抗BMP4抗体0.5μg/ml处理时对血管生成基本无明显影响；同时加入抗BMP4抗体5μg/ml或10μg/ml处理时的二者联合用药可以显著抑制依鲁替尼对血管网络的破坏作用。

由该实验结果可知，使用1μg/ml的抗BMP4抗体(相当于6.65μM抗体)已经能够实现降低依鲁替尼对于血管生成破坏的影响，而0.5μg/ml的抗BMP4抗体则没有此等效果。使用5μg/ml的抗BMP4抗体(相当于33.25μM抗体)已经能够相当显著地更大程度降低依鲁替尼对于血管生成破坏的影响；使用10μg/ml的抗BMP4抗体(相当于66.5μM抗体)已经能够实现基本上消除依鲁替尼对于血管生成破坏的影响。如果抗BMP4抗体的比例过高，则成本过高而且并不会带来更进一步的效果。因此，高于这个比例不是特别必要。

综上，对于1.0μM依鲁替尼的情况，抗BMP4抗体要大于0.5μg/ml,可以等于或大于1μg/ml。换算成摩尔比，为抗BMP4抗体与依鲁替尼的摩尔比大于或等于13.3:2，优选抗BMP4抗体与依鲁替尼的摩尔比优选为13.3：2至66.5:1，更优选摩尔比为13.3：2至33.25：1，更加优选的摩尔比为13.3：2至13.3：1。

综上所述，依鲁替尼可抑制血管生成，破坏血管网的完整性；BMP4抗体单独处理对血管生成无明显影响；其与依鲁替尼联合用药可以显著抑制依鲁替尼对血管网络的破坏作用。

经过反复实验论证，我们发现在血管生成实验中，抑制血管生成、破坏血管网的完整性是依鲁替尼的重要副作用，并且该副作用与用药剂量呈正相关；同时，我们还论证了在血管生成实验中加入依鲁替尼的同时或之后加入BMP4抗体能够使血管完整性得到保护，且BMP4抗体本身不影响血管的生成和血管完整性。因此认为，依鲁替尼能够杀伤血管内皮细胞，并通过诱导BMP4蛋白的表达破坏血管的完整性；而BMP4抗体抑制了BMP4蛋白表达从而降低这一副反应，二者联合用药将对临床用药有重要指导意义。

以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。

Claims (12)

1.抗BMP4抗体在制备降低依鲁替尼副作用的药物中的用途，其中所述副作用包括出血。

2.如权利要求1所述的用途，其中所述抗BMP4抗体为阻断BMP4功能的抗体，优选阻断BMP4与其受体结合的抗体。

3.如权利要求1所述的用途，其中所述抗BMP4抗体为与BMP4受体产生竞争性抑制的抗体，优选所述抗体识别的抗原表位为BMP4的Ser293-Arg408表位。

4.如权利要求1所述的用途，其中所述降低依鲁替尼副作用的药物包括抗BMP4抗体，所述抗BMP4抗体在依鲁替尼给药的同时或之后给药。

5.一种用于降低依鲁替尼副作用的药物组合物，所述药物组合物包括抗BMP4抗体，所述抗BMP4抗体为如权利要求2或3中所定义的抗体，所述副作用包括出血。

6.一种药物组合或试剂盒，所述药物组合或试剂盒包括依鲁替尼和抗BMP4抗体。

7.如权利要求6所述的药物组合或试剂盒，其中抗BMP4抗体与依鲁替尼的摩尔比大于或等于13.3：2。

8.如权利要求6所述的药物组合或试剂盒，其中所述抗BMP4抗体为冻干粉形式，优选其给药方式为胃肠道外给药，包括静脉注射、皮下注射或腹腔注射。

9.如权利要求6所述的药物组合或试剂盒，其中进一步包括可药用的载体或赋形剂。

10.如权利要求6-9中任一项所述的药物组合或试剂盒，其中所述抗BMP4抗体为如权利要求2或3中所定义的抗体。

11.依鲁替尼在制备血管生成抑制剂中的用途。

12.如权利要求11所述的用途，其中依鲁替尼用于制备杀伤血管内皮细胞的制剂。

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