CN111820322A - 一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,涉及饲料加工技术领域。该对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其特征是对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素采用橙色黄杆菌降解、培养基胞外粗提液降解和紫外线处理,所述橙色黄杆菌为一种乳过氧化物酶,且在橙色黄杆菌粗蛋白质提取物在水溶液中占比为10‑40%;所述培养基胞外粗提液为嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液。该对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,通过橙色黄杆菌蛋白质提取物与水溶液混合后对玉米皮中的黄曲霉毒素B1进行降解,并使得初步降解后的黄曲霉毒素含量在玉米皮中的占比被降低至76%,通过胞外粗提液对其中的黄曲霉毒素进行生物酶降解。
Description
技术领域
本发明涉及饲料加工技术领域,具体为一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法。
背景技术
黄曲霉毒素主要由基因同源的黄曲霉和寄生曲霉等真菌在一定的环境条件下发生的复杂酶促反应生物合成的次级代谢产物。目前鉴定出的共有18种,分为B族和G族两大类,在动物体内代谢可产生黄曲霉毒素M1、M2等多种同源衍生物。它给粮食及饲料造成严重污染,其中黄曲霉毒素B1是黄曲霉毒素中毒性最强的物质。黄曲霉毒素主要作用于肝脏,引起肝脏病变。食用了含黄曲霉毒素的食物,可引起人畜急性中毒从而引发疾病,且黄曲霉毒素有强致癌、导致基因突变和畸形作用,严重威胁动物及人类健康,如何除去粮食及饲料中的黄曲霉毒素被人们广泛关注。
生物学方法降解黄曲霉毒素,是近年来研究热门的一种脱毒方法,主要为微生物的降解,包括真菌和细菌两大类。在黄曲霉毒素生物方法降解的研究中,大量的利用筛选得到能够降解黄曲霉毒素的生物菌种,通过自身代谢产生某种胞内酶或者胞外酶将黄曲霉毒素分子的毒性基团降解为无毒害的物质被生物利用或通过代谢排出体外。另一方面通过生物酶的单一活性成分对黄曲霉毒素进行降解为无毒的其他组分,但生物酶的来源、活性以及稳定性需要优化与提高。
目前,生物防治黄曲霉毒素研究取得了一定的进展,但国内外使用生物学方法降解黄曲霉毒素在饲料工业中的应用刚刚起步。黄曲霉毒素虽能被不同的菌株所降解,但目前的防治方法依然还存在着许多问题,一般研究主要侧重于降解黄曲霉毒素菌株的筛选,但对于降解的机理及解毒酶特性需要进一步研究。黄曲霉毒素分解酶相关的基因报道还比较少,且酶的产量和活性不太高,毒素不能被完全降解。因此,需要用到生物化学、分子生物学、基因工程的手段对微生物菌种进行筛选及改造,并获得黄曲霉毒素分解酶的组成基因并进行高效表达,开发出能够高效降解黄曲霉毒素的生物菌种。将生物发酵技术应用于饲料工业,以减少饲料的污染和浪费,降低养殖行业和饲料行业经济成本。
发明内容
本发明的发明目的在于提供一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,该对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法将生物发酵技术用于饲料工业,大大减少了饲料的污染和浪费。
为实现以上目的,本发明通过以下技术方案予以实现:一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其特征是对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素采用橙色黄杆菌降解、培养基胞外粗提液降解和紫外线处理,所述橙色黄杆菌为一种乳过氧化物酶,且在橙色黄杆菌粗蛋白质提取物在水溶液中占比为10-40%;所述培养基胞外粗提液为嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液;所述紫外线的辐射照度为90-350W/m³。
本方法的实施步骤为:
(1)喷浆玉米皮用玉米浸泡液浸泡玉米皮至完全软化;
(2)使用橙色黄杆菌粗蛋白质提取物与水溶液对玉米皮进行黄曲霉毒素降解处理;
(3)使用嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液进一步对玉米皮进行黄曲霉毒素降解处理;
(4)利用紫外线照射处理玉米皮;
(5)烘干喷浆玉米皮得到去除黄曲霉毒素的喷浆玉米皮。
优选的,所述橙色黄杆菌粗蛋白质提取物在水溶液中的占比为10%。
优选的,所述嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液与喷浆玉米皮混合58-72小时,并加热至27-37度保持恒温。
优选的,所述嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液与喷浆玉米皮混合58小时,并加热至27度。
优选的,所述紫外线的辐射照度为90W/m³。
相较于现有技术:
本发明提供了一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法。具备以下有益效果:
通过橙色黄杆菌蛋白质提取物与水溶液混合后对玉米皮中的黄曲霉毒素B1进行降解,并使得初步降解后的黄曲霉毒素含量在玉米皮中的占比被降低至76%,进一步通过嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液在恒温状态下与玉米皮孵育的过程中,通过胞外粗提液对其中的黄曲霉毒素进行生物酶降解,使得喷浆玉米皮中的黄曲霉毒素含量被降低85%,最后通过紫外线照射的方式对呈流动状排入烘干设备中的喷浆玉米皮进行保险降毒处理,在保证饲料充分利用并不浪费的同时解决了玉米皮中常含有超标黄曲霉毒素导致牲畜死亡甚至影响其产物食用安全的问题。
具体实施方式
实施例1
一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其步骤如下:
A.浸泡玉米皮
将经过人眼观察判断未出现霉变情况的玉米皮浸入玉米浸泡液中;
B.生物降解
使用橙色黄杆菌粗蛋白质提取物与水溶液对玉米皮进行黄曲霉毒素降解处理,橙色黄杆菌粗蛋白质提取物在水溶液中的占比为10%,嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液与喷浆玉米皮混合58小时,并加热至27度;
C.紫外线降毒
使用辐射照度为90W/m³的紫外线对流入烘干设备过程中的玉米皮进行照射降毒;
D.成品
采用现有烘干设备进行喷浆玉米皮的烘干并形成固态成品。
通过上述方法加工后的喷浆玉米皮经实验室抽样检测已完全将黄曲霉毒素含量降低至产生威胁的含量之下,同时残留的少量黄曲霉毒素菌已完全破坏。
实施例2
一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其步骤如下:
A.浸泡玉米皮
将经过人眼观察判断出现部分霉变情况的玉米皮浸入玉米浸泡液中;
B.生物降解
使用橙色黄杆菌粗蛋白质提取物与水溶液对玉米皮进行黄曲霉毒素降解处理,橙色黄杆菌粗蛋白质提取物在水溶液中的占比为20%,嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液与喷浆玉米皮混合60小时,并加热至30度;
C.紫外线降毒
使用辐射照度为100W/m³的紫外线对流入烘干设备过程中的玉米皮进行照射降毒;
D.成品
采用现有烘干设备进行喷浆玉米皮的烘干并形成固态成品。
通过上述方法加工后的喷浆玉米皮已完全将黄曲霉毒素含量降低至产生威胁的含量之下,同时残留的少量黄曲霉毒素菌已完全破坏,最大程度上降低饲料被浪费的情况。
实施例3
一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其步骤如下:
A.浸泡玉米皮
将经过人眼观察判断出现半数霉变情况的玉米皮经过辐射照度为100W/m³的紫外线照射后浸入玉米浸泡液中;
B.生物降解
使用橙色黄杆菌粗蛋白质提取物与水溶液对玉米皮进行黄曲霉毒素降解处理,橙色黄杆菌粗蛋白质提取物在水溶液中的占比为25%,嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液与喷浆玉米皮混合65小时,并加热至35度进行孵育;
C.紫外线降毒
使用辐射照度为120W/m³的紫外线对流入烘干设备过程中的玉米皮进行照射降毒;
D.成品
采用现有烘干设备进行喷浆玉米皮的烘干并形成固态成品。
通过上述方法加工后的喷浆玉米皮已完全将黄曲霉毒素含量降低至产生威胁的含量之下,同时残留的少量黄曲霉毒素菌已完全破坏,最大程度上降低饲料被浪费的情况,同时满足牲畜食用安全标准。
实施例4
一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其步骤如下:
A.浸泡玉米皮
将经过人眼观察判断出现多数霉变情况的玉米皮经过辐射照度为150W/m³的紫外线照射后浸入玉米浸泡液中;
B.生物降解
使用橙色黄杆菌粗蛋白质提取物与水溶液对玉米皮进行黄曲霉毒素降解处理,橙色黄杆菌粗蛋白质提取物在水溶液中的占比为25%,嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液与喷浆玉米皮混合72小时,并加热至37度进行孵育;
C.紫外线降毒
使用辐射照度为350W/m³的紫外线对流入烘干设备过程中的玉米皮进行照射降毒;
D.成品
采用现有烘干设备进行喷浆玉米皮的烘干并形成固态成品。
外环境分离物可在37℃生长。在固体培养基上生长,产生典型的色素,但有些菌株不产色素。菌落半透明,圆形,隆起或微隆起,光滑且有光泽,全缘。接触酶、氧化酶、磷酸酶均阳性。不消化琼脂。有机化能营养。在低浓度蛋白胨培养基中由碳水化合物产酸不产气。DNA的G+C mol%为31~45。广泛分布在土壤和水中,在生肉、乳类和其他食物以及医院环境和人类的临床标本中均可取得,通过上述方法加工后的喷浆玉米皮已完全将黄曲霉毒素含量降低至产生威胁的含量之下,同时残留的少量黄曲霉毒素菌已完全破坏,最大程度上降低饲料被浪费的情况,同时满足牲畜食用安全标准。目前,生物防治黄曲霉毒素研究取得了一定的进展,但国内外使用生物学方法降解黄曲霉毒素在饲料工业中的应用刚刚起步。黄曲霉毒素虽能被不同的菌株所降解,但目前的防治方法依然还存在着许多问题,一般研究主要侧重于降解黄曲霉毒素菌株的筛选,但对于降解的机理及解毒酶特性需要进一步研究。黄曲霉毒素分解酶相关的基因报道还比较少,且酶的产量和活性不太高,毒素不能被完全降解。因此,需要用到生物化学、分子生物学、基因工程的手段对微生物菌种进行筛选及改造,并获得黄曲霉毒素分解酶的组成基因并进行高效表达,开发出能够高效降解黄曲霉毒素的生物菌种。将生物发酵技术应用于饲料工业,以减少饲料的污染和浪费,降低养殖行业和饲料行业经济成本。在此基础上,本方法采用两种细菌对喷浆玉米皮中的黄曲霉毒素进行降解处理,同时配合紫外线照射的方式进一步促进整个降解过程成为一个系统化的操作方式。
Claims (6)
1.一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其特征是对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素采用橙色黄杆菌降解、培养基胞外粗提液降解和紫外线处理,所述橙色黄杆菌为一种乳过氧化物酶,且在橙色黄杆菌粗蛋白质提取物在水溶液中占比为10-40%;所述培养基胞外粗提液为嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液;所述紫外线的辐射照度为90-350W/m³。
2.根据权利要求1所述的一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其特征在于该方法实施步骤为:
(1)喷浆玉米皮用玉米浸泡液浸泡玉米皮至完全软化;
(2)使用橙色黄杆菌粗蛋白质提取物与水溶液对玉米皮进行黄曲霉毒素降解处理;
(3)使用嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液进一步对玉米皮进行黄曲霉毒素降解处理;
(4)利用紫外线照射处理玉米皮;
(5)烘干喷浆玉米皮得到去除黄曲霉毒素的喷浆玉米皮。
3.根据权利要求1所述的一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其特征在于:所述橙色黄杆菌粗蛋白质提取物在水溶液中的占比为10%。
4.根据权利要求1所述的一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其特征在于:所述嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液与喷浆玉米皮混合58-72小时,并加热至27-37度保持恒温。
5.根据权利要求4所述的一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其特征在于:所述嗜麦芽窄食单胞菌培养基胞外粗提液与喷浆玉米皮混合58小时,并加热至27度。
6.根据权利要求1所述的一种对喷浆玉米皮中黄曲霉毒素的生物降解方法,其特征在于:所述紫外线的辐射照度为90W/m³。
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