CN111789787A - 一种具有抗衰功效的组合物及其化妆品 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有抗衰功效的组合物及其化妆品，旨在提供一种各成分协同增效，通过抑制MMPs活性，降低MMPs的表达，清除自由基等多种途径，有效阻止胶原蛋白和弹性蛋白降解，减少皮肤皱纹，抵抗皮肤衰老的组合物，该组合物主要包括下述重量份的成分：刺阿干树叶提取物4‑13份、垂盆草提取物2‑9份、山茶花提取物5‑16份、水解石莼提取物1‑7份、多元醇20‑45份、水25‑50份；属于化妆品技术领域。
Description
技术领域
本发明公开了一种组合物，具体地说，是一种具有抗衰功效的组合物，属于化妆品技术领域。
背景技术
衰老又称老化，通常是指在正常状况下生物体发育成熟后，随年龄增长机体发生的功能性和器质性衰退的渐进过程。皮肤老化的主要原因之一是真皮层的结构发生了改变。导致皮肤真皮结构改变的原因有很多种，其中，由于一些外界因素作用，激活体内的基质金属蛋白酶(MMPs)，MMPs可导致皮肤真皮中皮肤结构的胶原蛋白和弹性蛋白被过度降解，肌肤中的胶原蛋白不足以组成完整的架构，肌肤失去支撑，弹性不足，渐渐就会出现皱纹等衰老肌问题。
MMPs是一组由结缔组织细胞分泌并参与细胞外基质降解的蛋白酶，主要分为胶原酶、明胶酶、基质水解酶类、膜型-MMP等，这些蛋白酶在细胞外基质(ECM)降解过程中几乎能降解ECM的所有成分。ECM主要成分包括胶原蛋白、弹性蛋白、非胶原(基质)糖蛋白和蛋白多糖，ECM将影响细胞的存活、死亡、增殖和分化。ECM的降解主要依靠蛋白水解酶，而MMPs家族在四类蛋白水解酶中是其中最为重要的一组蛋白水解酶，主要降解真皮中的胶原蛋白及弹性蛋白，其中MMP-1主要参与I、Ⅲ型胶原蛋白的降解。人类皮肤中各类型的胶原比例会随着年龄的增长而变化，在年轻皮肤中，Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原分别占皮肤总胶原的80％和15％，随着皮肤的老化，Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原会明显丢失，致使皮肤失去弹性，变得松弛，可见MMP-1是导致皮肤出现皱纹、失去弹性等衰老症状最主要的酶。因此，可通过抑制MMP-1活性阻止I、Ⅲ型胶原蛋白降解的途径来延缓皮肤衰老。
目前，市场上延缓皮肤衰老的产品品种繁多，但有些护肤品是通过清除自由基作用起到抗衰功效的，有的是在护肤品中添加能够刺激胶原蛋白合成的活性成分起到抗衰功效的，而抑制体内MMPs活性或其表达的方法可从根本上解决胶原蛋白和弹性蛋白流失的问题，从而达到持久、有效的延缓肌肤衰老的效果，市面上虽有相关产品但效果欠佳。因此，需要开发出一种能够有效抑制MMPs活性或其表达的组合物并可将其应用于抗衰老的产品中。
发明内容
针对上述不足，本发明的目的是提供一种具有抗衰功效的组合物，该组合物各成分协同增效，通过抑制MMPs活性，降低MMPs的表达，清除自由基等多种途径，从根本上解决胶原蛋白和弹性蛋白降解的问题，将其应用于化妆品中，可有效抵抗皮肤衰老，改善皮肤皱纹。
为此，本发明提供的第一个技术方案是这样的：
一种具有抗衰功效的组合物，主要包括下述重量份的成分：刺阿干树叶提取物4-13份、垂盆草提取物2-9份、山茶花提取物5-16份、水解石莼提取物1-7份、多元醇20-45份、水25-50份。
其中，刺阿干树叶提取物含有丰富的刺阿干树叶多酚，具有抗MMPs和抗胶原蛋白酶活性的作用，可紧致皮肤，增加皮肤弹性，还可抵抗紫外线照射引起的活性氧自由基氧化，从而防止肌肤光老化。
垂盆草提取物主要含有黄酮类、甾醇类、生物碱、氰苷类等化合物，可阻断MMP-1酶原活性，从而减少MMP-1的表达，并可清除自由基，减少UV照射引起的细胞凋亡，具有抵抗衰老的功效。
山茶花提取物具有显著的抗皱、抗氧化功效，可清除自由基，抑制弹性蛋白酶活性，降低MMP-1的表达。
水解石莼提取物是海洋来源的独特低聚糖，对细胞外基质具有三重功效，促进胶原蛋白和透明质酸的合成；促进透明质酸与受体的相互作用；抑制MMPs活性，保护ECM，全方位护理使得真皮变得致密，从而丰盈紧致肌肤，重塑面部轮廓。
进一步地，本发明提供的具有抗衰功效的组合物还包括香蜂花叶提取物2-8份。香蜂花叶提取物含有类黄酮、羟基肉桂酸衍生物、蛋白质、糖类等多种活性成分，可清除多种自由基，抑制DNA氧化损伤，具有很好的抗氧化、抗衰功效，还可抑制MMP-1、MMP-2、MMP-9等基质金属蛋白酶和弹性蛋白酶的生物活性，达到抗皱，延缓衰老的功效。
进一步地，本发明提供的具有抗衰功效的组合物所述垂盆草提取物与山茶花提取物的重量比为2:7。
进一步地，本发明提供的具有抗衰功效的组合物中所述刺阿干树叶提取物的制备方法包括如下步骤：
(1)原料预处理：将刺阿干树叶用水洗净、干燥，通过高速粉碎机粉碎后过40-100目筛，得刺阿干树叶粉末；
(2)超声辅助酶解：将步骤(1)中的粉末按固液比1g：(20-35)mL加入水溶液，然后加入粉末重量为0.15-0.4％的复合酶在pH＝4.0-5.5，温度35-45℃恒温条件下酶解，同时使用超声波进行处理，超声功率为100-160W，超声10-30min后停止超声，继续酶解1.5-3h；
(3)粗提物制备：将步骤(2)中制得的提取液在100℃水浴条件下灭酶15min后，抽滤，收集滤液，将滤液减压浓缩并冻干成粉末，得刺阿干树叶粗提物；
(4)双水相萃取：将步骤(3)制备的粗提物按固液比1g：(10-20)mL的比例加入乙醇-硫酸铵双水相萃取体系中，搅拌均匀，在温度为60-80℃条件下，振荡反应1h，静置，分相后回收上相萃取液；
(5)精提物制备：将步骤(4)中的上相萃取液浓缩并真空干燥，即得刺阿干树叶提取物。
进一步地，上述刺阿干树叶提取物的制备方法中步骤(2)中所述的复合酶为酶活力均不小于5000u/g的半纤维素酶和果胶酶，且半纤维素酶和果胶酶的质量比为4:3-7:3。
进一步地，上述刺阿干树叶提取物的制备方法中步骤(4)中所述的乙醇-硫酸铵双水相萃取体系中硫酸铵浓度为0.3-0.4g/mL，乙醇和硫酸铵水溶液的体积比为1:2-1:4。
此外，为了使本发明组合物稳定性更好，上述组合物中还可添加重量份为0.1-1份的防腐剂，防腐剂可为苯甲酸钠、山梨酸钾、苯氧乙醇等常规防腐剂中的一种或几种的组合。
本发明所用的其他提取物可通过本领域常规提取方法自制获得或商业渠道购买。例如，垂盆草提取物可将垂盆草用乙醇浸提或加热回流提取，将提取液浓缩至干即得；山茶花提取物可将山茶花用水或乙醇加热回流提取，将提取液浓缩至干即得；香蜂花叶提取物可将香蜂花叶用水或乙醇加热回流提取，将提取液浓缩至干即得。上述提取物的制备以满足本领域提取物使用标准为限。
其中，水解石莼提取物可通过以下方法制得：
(1)将石莼洗净、干燥后，粉碎并过80目筛，得到石莼粉末；
(2)将步骤(1)中的石莼粉末按料液比1g：20mL加入水溶液，然后加入粉末重量为0.2％，质量比为2:1的纤维素酶和蛋白酶在pH＝6.5，温度45℃恒温条件下酶解2h，酶解结束后灭酶得酶解液；
(3)向步骤(2)的酶解液中加入石莼粉末重量为15倍的无水乙醇搅拌均匀后进行超声提取，超声功率为400W，超声时间为30min，超声温度为60℃，过滤得到上清液，冻干成粉末，即得水解石莼提取物。
本发明提供的第二个技术方案是：
一种化妆品，包含上述具有抗衰功效的组合物和化妆品外用剂型的常用基质和/或去离子水。
具体地，上述化妆品外用剂型的常用基质包含乳化剂、油脂、润肤剂、保湿剂、增稠剂、螯合剂、pH调节剂、多元醇、防腐剂和香精中的一种或多种。
进一步地，上述化妆品为乳液、精华、面霜、化妆水、啫喱、面膜的其中之一。
与现有技术相比，本发明具有的有益效果如下：
(1)本发明组合物通过刺阿干树叶提取物、垂盆草提取物、山茶花提取物、水解石莼提取物的合理组配，实现了通过抑制MMPs活性，降低MMPs的表达，清除自由基等多种途径，从根本上解决胶原蛋白和弹性蛋白流失的问题，维护真皮层的网状结构，可持久、有效的赋予皮肤光泽度和紧致度，延缓皮肤老化。当垂盆草提取物和山茶花提取物在特定比例下复配时，组合物可发挥最佳的生物活性，其抗氧化清除自由基的能力以及降低MMPs表达的能力得到增强，增加皮肤弹性、抵抗皮肤衰老的效果也更加明显。上述组合物中还可添加香蜂花叶提取物，与其他成分协同使其抑制自由基活性以及MMPs活性的能力得到提升，促进胶原蛋白和弹性蛋白的合成，增强皮肤张力和弹性，预防和改善真皮皱纹、衰老等问题。
(2)本发明中刺阿干树叶通过超声辅助酶解并联合双水相萃取技术提取其中的活性成分，反应条件温和，提取的有效成分含量高，尤其在合适的酶解条件及双水相萃取体系中，得到的提取物与其他成分共同作用能更好的发挥抑制MMPs活性以及清除自由基的功能，更好的解决胶原蛋白渐渐流失，弹力纤维失去弹性的问题，维持肌肤细致、有弹性的最佳状态。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何人在本发明权利要求保护范围内所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。
实施例1
本发明提供的一种具有抗衰功效的组合物，由如下重量数的组分组成：刺阿干树叶提取物4g、垂盆草提取物9g、山茶花提取物10g、水解石莼提取物7g、甘油20g、水50g。
实施例2
本发明提供的一种具有抗衰功效的组合物，由如下重量数的组分组成：刺阿干树叶提取物7g、垂盆草提取物6g、山茶花提取物16g、水解石莼提取物1g、甘油15g、1,2-己二醇10g、1,3-丙二醇20g、水25g。
实施例1-2中所述刺阿干树叶提取物是通过下述步骤依次制得：
(1)原料预处理：将刺阿干树叶用水洗净、干燥，通过高速粉碎机粉碎后过40目筛，得刺阿干树叶粉末；
(2)超声辅助酶解：将步骤(1)中的粉末按固液比1g：30mL加入水溶液，然后加入粉末重量为0.3％的复合酶在pH＝4.5，温度40℃恒温条件下酶解，同时使用超声波进行处理，超声功率为100W，超声30min后停止超声，继续酶解2h；
上述复合酶是酶活力均为5000u/g的半纤维素酶和果胶酶，且半纤维素酶和果胶酶的质量比为5:3；
(3)粗提物制备：将步骤(2)中制得的提取液在100℃水浴条件下灭酶15min后，抽滤，收集滤液，将滤液减压浓缩并冻干成粉末，得刺阿干树叶粗提物；
(4)双水相萃取：将步骤(3)制备的粗提物按固液比1g：15mL的比例加入乙醇-硫酸铵双水相萃取体系中，搅拌均匀，在温度为80℃条件下，振荡反应1h，静置，分相后回收上相萃取液；
上述乙醇-硫酸铵双水相萃取体系中硫酸铵浓度为0.3g/mL，乙醇和硫酸铵水溶液的体积比为1:4；
(5)精提物制备：将步骤(4)中的上相萃取液浓缩并真空干燥，即得刺阿干树叶提取物。
实施例3
本发明提供的一种具有抗衰功效的组合物，由如下重量数的组分组成：刺阿干树叶提取物13g、垂盆草提取物3g、山茶花提取物6g、水解石莼提取物6g、香蜂花叶提取物2g、甘油16g、1,2-己二醇10g、苯甲酸钠0.1g、山梨酸钾0.1g、水43.8g。
实施例3中所述刺阿干树叶提取物是通过下述步骤依次制得：
(1)原料预处理：将刺阿干树叶用水洗净、干燥，通过高速粉碎机粉碎后过80目筛，得刺阿干树叶粉末；
(2)超声辅助酶解：将步骤(1)中的粉末按固液比1g：20mL加入水溶液，然后加入粉末重量为0.4％的复合酶在pH＝5.5，温度35℃恒温条件下酶解，同时使用超声波进行处理，超声功率为160W，超声10min后停止超声，继续酶解1.5h；
上述复合酶是酶活力均为12000u/g的半纤维素酶和果胶酶，且半纤维素酶和果胶酶的质量比为7:3；
(3)粗提物制备：将步骤(2)中制得的提取液在100℃水浴条件下灭酶15min后，抽滤，收集滤液，将滤液减压浓缩并冻干成粉末，得刺阿干树叶粗提物；
(4)双水相萃取：将步骤(3)制备的粗提物按固液比1g：10mL的比例加入乙醇-硫酸铵双水相萃取体系中，搅拌均匀，在温度为75℃条件下，振荡反应1h，静置，分相后回收上相萃取液；
上述乙醇-硫酸铵双水相萃取体系中硫酸铵浓度为0.4g/mL，乙醇和硫酸铵水溶液的体积比为1:2；
(5)精提物制备：将步骤(4)中的上相萃取液浓缩并真空干燥，即得刺阿干树叶提取物。
实施例4
本发明提供的一种具有抗衰功效的组合物，由如下重量数的组分组成：刺阿干树叶提取物10g、垂盆草提取物4g、山茶花提取物5g、水解石莼提取物3g、香蜂花叶提取物8g、甘油22g、1,3-丙二醇13g、水35g。
实施例5
本发明提供的一种具有抗衰功效的组合物，由如下重量数的组分组成：刺阿干树叶提取物10g、垂盆草提取物2g、山茶花提取物7g、水解石莼提取物3g、香蜂花叶提取物8g、1,2-己二醇10g、1,3-丙二醇25g、水35g。
实施例4-5中所述刺阿干树叶提取物是通过下述步骤依次制得：
(1)原料预处理：将刺阿干树叶用水洗净、干燥，通过高速粉碎机粉碎后过100目筛，得刺阿干树叶粉末；
(2)超声辅助酶解：将步骤(1)中的粉末按固液比1g：35mL加入水溶液，然后加入粉末重量为0.15％的复合酶在pH＝4.0，温度45℃恒温条件下酶解，同时使用超声波进行处理，超声功率为140W，超声15min后停止超声，继续酶解3h；
上述复合酶是酶活力均为10000u/g的半纤维素酶和果胶酶，且半纤维素酶和果胶酶的质量比为4:3；
(3)粗提物制备：将步骤(2)中制得的提取液在100℃水浴条件下灭酶15min后，抽滤，收集滤液，将滤液减压浓缩并冻干成粉末，得刺阿干树叶粗提物；
(4)双水相萃取：将步骤(3)制备的粗提物按固液比1g：20mL的比例加入乙醇-硫酸铵双水相萃取体系中，搅拌均匀，在温度为60℃条件下，振荡反应1h，静置，分相后回收上相萃取液；
上述乙醇-硫酸铵双水相萃取体系中硫酸铵浓度为0.32g/mL，乙醇和硫酸铵水溶液的体积比为1:3；
(5)精提物制备：将步骤(4)中的上相萃取液浓缩并真空干燥，即得刺阿干树叶提取物。
上述实施例1-5中，垂盆草提取物是将垂盆草清洗干燥粉碎后，按料液比1g：30mL加入70％乙醇加热回流提取3h，将提取液冷却、过滤后，冻干成粉末即得。
山茶花提取物是将山茶花清洗干燥粉碎后，按料液比1g：25mL加入50％乙醇加热回流提取4h，将提取液冷却、过滤后，冻干成粉末即得。
香蜂花叶提取物是将香蜂花叶清洗干燥粉碎后，按料液比1g：30mL加入50％乙醇加热回流提取2h，将提取液冷却、过滤后，冻干成粉末即得。
水解石莼提取物是通过以下方法制得的：
(1)将石莼洗净、干燥后，粉碎并过80目筛，得到石莼粉末；
(2)将步骤(1)中的石莼粉末按料液比1g：20mL加入水溶液，然后加入粉末重量为0.2％，质量比为2:1的纤维素酶和蛋白酶在pH＝6.5，温度45℃恒温条件下酶解2h，酶解结束后灭酶得酶解液；
(3)向步骤(2)的酶解液中加入石莼粉末重量为15倍的无水乙醇搅拌均匀后进行超声提取，超声功率为400W，超声时间为30min，超声温度为60℃，过滤得到上清液，冻干成粉末，即得水解石莼提取物。
为了证明本发明的效果，下面给出本申请的对比实验例：
对比例1
一种组合物，由如下重量数的组分组成：刺阿干树叶提取物30g、甘油20g、水50g。
其中刺阿干树叶提取物的制备方法同实施例1。
对比例2
一种组合物，由如下重量数的组分组成：垂盆草提取物30g、甘油20g、水50g。
其中，垂盆草提取物的制备方法同实施例1。
对比例3
一种组合物，由如下重量数的组分组成：山茶花提取物30g、甘油20g、水50g。
其中，山茶花提取物的制备方法同实施例1。
对比例4
一种组合物，由如下重量数的组分组成：水解石莼提取物30g、甘油20g、水50g。
其中，水解石莼提取物的制备方法同实施例1。
对比例5
一种组合物，由如下重量数的组分组成：刺阿干树叶提取物11g、垂盆草提取物19g、甘油20g、水50g。
其中刺阿干树叶提取物和垂盆草提取物的制备方法同实施例1。
对比例6
一种组合物，由如下重量数的组分组成：山茶花提取物19g、水解石莼提取物11g、甘油20g、水50g。
其中，山茶花提取物和水解石莼提取物的制备方法同实施例1。
对比例7
一种组合物，由如下重量数的组分组成：刺阿干树叶提取物10g、垂盆草提取物4g、山茶花提取物5g、水解石莼提取物3g、香蜂花叶提取物8g、甘油22g、1,3-丙二醇13g、水35g。
对比例7中所述刺阿干树叶提取物是通过下述步骤依次制得：
(1)原料预处理：将刺阿干树叶用水洗净、干燥，通过高速粉碎机粉碎后过100目筛，得刺阿干树叶粉末；
(2)超声辅助酶解：将步骤(1)中的粉末按固液比1g：35mL加入水溶液，然后加入粉末重量为0.15％的复合酶在pH＝4.0，温度45℃恒温条件下酶解，同时使用超声波进行处理，超声功率为140W，超声15min后停止超声，继续酶解3h；
上述复合酶是酶活力均为10000u/g的半纤维素酶和果胶酶，且半纤维素酶和果胶酶的质量比为4:3；
(3)粗提物制备：将步骤(2)中制得的提取液在100℃水浴条件下灭酶15min后，抽滤，收集滤液，将滤液减压浓缩并冻干成粉末，得刺阿干树叶粗提物；
(4)乙醇回流提取：将步骤(3)制备的粗提物按固液比1g：20mL的比例加入60％的乙醇溶液回流提取1h，过滤得滤液；
(5)精提物制备：将步骤(4)中的滤液浓缩并真空干燥，即得刺阿干树叶提取物。
其中，垂盆草提取物、山茶花提取物、水解石莼提取物、香蜂花叶提取物的制备方法同实施例4。
上述具有抗衰功效的组合物可作为活性成分用于制备抵抗皮肤衰老的化妆品。所述化妆品中还可由化妆品外用剂型的常用基质和/或去离子水组成，主要包括乳化剂、油脂、润肤剂、保湿剂、增稠剂、螯合剂、pH调节剂、多元醇、防腐剂和香精等。具体使用时，将本发明制备的组合物直接添加至化妆品基质中，添加量为0.3wt％-8wt％。
为了更好的说明本发明的优点，下面给出本发明提供组合物的功效实验：
测试1：对MMP-1抑制作用的功效测试
(1)测试样品：实施例1-5，对比例1-7的组合物。
(2)测试方法：在40mM的细胞培养皿中放入2mL的DMEM培养液，并约以1.2×105的浓度接种人体成纤维细胞之后，在37℃恒温条件，浓度为5％的CO2环境下培养24小时。接着用UV-B以144mJ/cm2条件照射细胞来诱导MMP-1的表达，然后用包含上述测试样品的培养基(质量浓度1％)培养3天，回收培养液，在温度为4℃，7500rpm环境下离心分离5分钟，利用ELISA方法来确认MMP-1的表达量，并按下式计算出MMP-1的变化率，其中，用不经过任何测试样品处理的实验组为对照组。测试结果如表1所示。
MMP-1的变化率(％)＝[(测试样品数据-对照组数据)/对照组数据]×100％
表1对MMP-1抑制作用的测试结果
| 样品 | MMP-1的表达量(pg/mL) | MMP-1的变化率(％) |
| 对照组 | 13621.07 | — |
| 实施例1 | 3424.34 | -74.86％ |
| 实施例2 | 3185.97 | -75.61％ |
| 实施例3 | 2687.44 | -78.27％ |
| 实施例4 | 2390.50 | -79.45％ |
| 实施例5 | 1179.58 | -85.34％ |
| 对比例1 | 5716.76 | -58.03％ |
| 对比例2 | 6652.53 | -53.16％ |
| 对比例3 | 6728.81 | -52.60％ |
| 对比例4 | 6213.93 | -55.38％ |
| 对比例5 | 4602.56 | -66.21％ |
| 对比例6 | 5218.23 | -62.69％ |
| 对比例7 | 4041.37 | -70.33％ |
从表1的实验结果可以看出，使用本发明组合物处理过的细胞，MMP-1的表达量可减少74％以上，效果明显优于对比例，说明本发明组合物协同对MMP-1的抑制作用更佳。由实施例4与实施例5对比可知，垂盆草提取物和山茶花提取物在特定比例下复配时，组合物可发挥最佳的生物活性，其降低MMPs表达的能力得到增强。由实施例4和对比例7对比可知，刺阿干树叶在合适的酶解和双水相萃取条件下提取后与其他成分组合能更好的发挥作用，使本发明组合物抵抗皮肤衰老的效果也更加明显。
测试2：清除自由基能力测试
本实验通过测定组合物对DPPH自由基的清除率来评价本发明组合物清除自由基的性能。DPPH自由基是一种稳定的氮中心有机自由基，在517nm处有强吸收，其乙醇溶液呈紫色，当遇到自由基清除剂时，DPPH的单电子被配对而使溶液颜色变浅，其褪色程度与其接受电子的数量成定量关系，因而可用分光光度计进行定量分析来检测对自由基清除的情况，清除率越大，表明其抗氧化、抗衰老能力越强。
(1)测试样品：实施例1-5，对比例1-7制备的组合物，用去离子水稀释成质量分数为1％的测试溶液。
(2)测试方法：取4mL浓度为0.1mmol/L的DPPH-无水乙醇溶液于容器中，再加入2mL测试样品，混匀，室温避光30min，在517nm波长处测吸光度，吸光度值记为A1；取4mL无水乙醇溶液和2mL测试样品溶液在上述同样条件下测吸光度值记为A2；取4mL DPPH-无水乙醇溶液和2mL无水乙醇溶液在上述同样条件下测吸光度值记为A3。按下式计算DPPH自由基清除率：DPPH自由基清除率(％)＝[1-(A1-A2)/A3]×100％，取三次测量的平均值。测试结果如表2所示。
表2清除DPPH自由基能力测试结果
由表2的实验结果可知，本发明组合物对DPPH自由基有较强的清除能力，且与对比例相比其清除效果更佳，说明本发明组合物协同增效，可提高组合物清除自由基的能力，增加抗氧化性能，达到抵抗衰老的效果。尤其实施例5组合物对DPPH自由基的清除率达到最大值，说明垂盆草提取物和山茶花提取物在特定比例下复配时，可使组合物的效果发挥至最佳。
测试3：改善皮肤皱纹功效测试
(1)测试样品：将实施例1、4、5和对比例1、3、5、7制备的组合物分别添加至下面的膏霜基质中，添加量为1wt％，得到含实施例1、4、5和对比例1、3、5、7组合物的化妆品，依次命名为膏霜1-3、对比膏霜1-4，并以膏霜基质作为对照。
A相：鲸蜡硬脂醇4g，氢化聚异丁烯4g，山嵛醇//甘油硬脂酸酯//甘油硬脂酸酯柠檬酸酯//二椰油酰乙二胺PEG-15二硫酸酯二钠3g，聚二甲基硅氧烷1.5g，甘油硬脂酸酯//PEG-100硬脂酸酯1g，羟苯丙酯0.1g；
B相：水加至100g，EDTA二钠0.05g；
C相：甘油2g，黄原胶0.3g，；
D相：聚丙烯酸酯-13//聚异丁烯//聚山梨醇酯-200.8g；
E相：双丙甘醇5g，苯氧乙醇//乙基己基甘油0.5g，羟苯甲酯0.2g；
F相：水5g，柠檬酸钠0.08g，柠檬酸0.04g；
G相：实施例1、4、5或对比例1、3、5、7制备的组合物1g。
上述膏霜1-3、对比膏霜1-4的制备方法如下：
①C相原料混合搅拌分散均匀，备用；E相中双丙甘醇与羟苯甲酯混匀，搅拌加热溶解至透明，降温至50℃后再加入苯氧乙醇//乙基己基甘油搅拌均匀，备用；F相原料混合搅拌溶解至透明，备用；
②A相原料加入搅拌锅中，混合搅拌加热至80℃，搅拌分散均匀，备用；
③B相原料加入真空乳化锅中，搅拌加热至85℃，加入预制好的C相，混合搅拌分散均匀，高速均质，将A相过滤抽入真空乳化锅中，混合搅拌分散均匀后，再加入D相原料，均质乳化，保温搅拌20分钟，开始降温；
④降温至50℃，加入E相，搅拌均匀；
⑤降温至45℃，依次加入F、G相，搅拌均匀；
⑥降温至40℃，对板，合格后出料，即可。
(2)测试方法：选取平均年龄为25-45岁有皱纹、皮肤健康无损伤的志愿者40名，随机分成8组，每组5名，分别使用上述测试样品。每组受试者每次取0.8g膏霜在脸部涂抹，每天早晚各涂抹一次，连续使用8周。实验期间，受试者在实验部位不能涂抹任何其它化妆品。
使用德国CK公司的Visia 3D皮肤成像测试仪分别于使用前、连续使用4周后进行数据采集，测定受试者前额皮肤的皱纹面积，每个部位测试三次，取平均值，分析皱纹变化率。皱纹变化率(％)＝[(Sh-S0)/S0]×100％，其中S0代表使用前皮肤皱纹初始面积；Sh代表使用4周后的皮肤皱纹面积。测试结果如表3所示。
表3改善皮肤皱纹测试结果
从表3的实验结果可以看出，持续使用本发明组合物制成的膏霜8周后，皮肤皱纹可减少9.45％以上，明显优于对比例膏霜改善皮肤皱纹的效果，说明本发明通过合理复配，可有效去除皮肤皱纹，紧致肌肤，达到抵抗皮肤衰老的效果。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种具有抗衰功效的组合物，其特征在于，主要包括下述重量份的成分：刺阿干树叶提取物4-13份、垂盆草提取物2-9份、山茶花提取物5-16份、水解石莼提取物1-7份、多元醇20-45份、水25-50份。
2.根据权利要求1所述的一种具有抗衰功效的组合物，其特征在于，还包括香蜂花叶提取物2-8份。
3.根据权利要求1所述的一种具有抗衰功效的组合物，其特征在于，所述垂盆草提取物与山茶花提取物的重量比为2:7。
4.根据权利要求1所述的一种具有抗衰功效的组合物，其特征在于，所述刺阿干树叶提取物的制备方法包括如下步骤：
(1)原料预处理：将刺阿干树叶用水洗净、干燥，通过高速粉碎机粉碎后过40-100目筛，得刺阿干树叶粉末；
(2)超声辅助酶解：将步骤(1)中的粉末按料液比1g：(20-35)mL加入水溶液，然后加入粉末重量为0.15-0.4％的复合酶在pH＝4.0-5.5，温度35-45℃恒温条件下酶解，同时使用超声波进行处理，超声功率为100-160W，超声10-30min后停止超声，继续酶解1.5-3h；
(3)粗提物制备：将步骤(2)中制得的提取液在100℃水浴条件下灭酶15min后，抽滤，收集滤液，将滤液减压浓缩并冻干成粉末，得刺阿干树叶粗提物；
(4)双水相萃取：将步骤(3)制备的粗提物按固液比1g：(10-20)mL的比例加入乙醇-硫酸铵双水相萃取体系中，搅拌均匀，在温度为60-80℃条件下，振荡反应1h，静置，分相后回收上相萃取液；
(5)精提物制备：将步骤(4)中的上相萃取液浓缩并真空干燥，即得刺阿干树叶提取物。
5.根据权利要求4所述的一种具有抗衰功效的组合物，其特征在于，步骤(2)中所述的复合酶为酶活力均不小于5000u/g的半纤维素酶和果胶酶，且半纤维素酶和果胶酶的质量比为4:3-7:3。
6.根据权利要求4所述的一种具有抗衰功效的组合物，其特征在于，步骤(4)中所述的乙醇-硫酸铵双水相萃取体系中硫酸铵浓度为0.3-0.4g/mL，乙醇和硫酸铵水溶液的体积比为1:2-1:4。
7.一种化妆品，其特征在于，所述化妆品包含如权利要求1-6任一项所述的具有抗衰功效的组合物和化妆品外用剂型的常用基质和/或去离子水。
8.根据权利要求7所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品外用剂型的常用基质包含乳化剂、油脂、润肤剂、保湿剂、增稠剂、螯合剂、pH调节剂、多元醇、防腐剂和香精中的一种或多种。
9.根据权利要求7所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品为乳液、精华、面霜、化妆水、啫喱、面膜的其中之一。
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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