CN1117144C - 芽孢乳酸菌粉剂的生产方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种芽孢乳酸菌粉剂的生产方法，将一株芽孢乳酸菌通过含有麸皮水的试管斜面上培养，装有种子培养基的摇瓶培养，边通气边搅拌的种子罐培养，装有发酵培养基的发酵罐培养(通气、搅拌)，添加麦芽糊精，搅拌均匀，喷雾干燥，从而得到含耐热芽孢乳酸菌活菌浓度较高的粉剂。该法工艺简单，设备低廉、能耗小、成本低，成品具有耐热性与耐酸性强、保存期长、应用范围广等优点。

Description

芽孢乳酸菌粉剂的生产方法
本发明涉及一种乳酸菌粉剂的生产方法，特别是涉及一种芽孢乳酸菌粉剂的生产方法。
当前只是将普通乳酸菌制成粉剂，由于普通乳酸菌以不耐热的营养体细胞存在，故其粉状制剂的生产仅限于真空冷冻干燥法，因要抽真空和制冷而导致能耗高、设备昂贵、成本较高；而且制成的乳酸菌粉剂中的细胞存活率低、耐热性及耐酸性差，保存期短、应用范围窄。
本发明的目的是为了克服上述不足而提供一种用通气培养和喷雾干燥法来生产芽孢乳酸菌活菌粉剂。
本发明是这样实现的：该法依次包括如下步骤：
①试管斜面培养：将一株芽孢乳酸菌在含有麸皮水成分的试管斜面
上，温度为37-47℃进行活化培养2-3次；
②摇瓶培养：将菌体接入装有种子培养基的三角瓶中，该种子培养
基是以葡萄糖为主要炭源并加入酸中和剂CaCO3的液体培养
基，温度为37-47℃以140-180转/分的转速摇床培养18-24小时；
③种子罐培养：以5-10％的接种量接于装有种子培养基的种子罐中，
在通气量为1∶0.5-0.7(V.V.m)、搅拌转速为300-400转/分、温
度37-47℃的条件下培养16-24小时；
④发酵罐培养：以5-10％的接种量接入装有发酵培养基的搅拌型发
酵罐中，发酵培养基是一种对芽孢形成有促进作用的含有Mn2+的液
体培养基，发酵条件是：温度40-50℃、通气量1∶0.5-0.7(V.V.m)、
搅拌转速为400-500转/分、培养时间65-75小时；
以上步骤的最佳温度为40-43℃。
⑤喷雾干燥；将发酵液与发酵液量20％的麦芽糊精(DE15-20)放入混
合罐中混合均匀后进行喷雾干燥；
按以上步骤制得的粉状制剂含耐热芽孢乳酸菌体浓度为109个/克。
菌体的培养温度为40-45℃，摇瓶转速140-180转/分、发酵罐通气量1∶0.5-0.7(V.V.m)、搅拌转速为400-500转/分。粉剂的制备采用喷雾干燥的方法获得。
本发明的优点是：由于芽孢乳酸菌能形成耐热性强的芽孢。其粉剂的生产可采用通气培养和喷雾干燥法，该法工艺简单，设备低廉、能耗小、成本低，用此法经过培养形成芽孢而制成粉剂，具有耐热性与耐酸性强、保存期长、应用范围广等优点。
实施例1：摇瓶培养(实验室规模)
将一株芽孢乳酸菌接种于含有麸皮水成分的固体斜面培养基的试管斜面上，温度为40±1℃培养20小时，用5-6ml无菌水洗下菌体，将1ml菌悬液接入装有100ml种子液体培养基的1000ml容量的三角瓶中，然后在温度40℃。转速为150转/分的摇床上培养20小时，再按照10％的接种量，将种子培养液接入装有500ml发酵液体培养基的3000ml容量的三角瓶中，温度40℃，摇瓶转速为160转/分、培养72小时，然后添加发酵液量20％的麦芽糊精(DE20)到培养好的发酵液中搅拌均匀进行喷雾干燥后即可得到含芽孢乳酸菌活菌粉剂，其活菌体浓度为1-2×109个/克干粉。
实施例2：发酵罐培养(生产性规模)
斜面培养和摇瓶培养按实施例1方法进行，其后面工序按以下步骤进行。
①一级种子培养：以10％的接种量接入装有500ml种子培养基的3000ml的三角瓶中，温度42℃，培养24小时；
②二级种子培养：以5％的接种量接种于装有100L种子培养基的200L发酵罐中，42℃，通气量为1∶0.7(V.V.m)，搅拌转速为400转/分、培养时间24小时；
③发酵罐培养：以10％的接种量接入装有1000L发酵培养基的1500L发酵罐中，温度42℃、通气量1∶0.7(V.V.m)、搅拌转速为400转/分、培养60小时；
④喷雾干燥：将发酵液于DE值15的麦芽糊精(用量为发酵液的20％)在混合罐中混合均匀后进行喷雾干燥；得到含芽孢乳酸菌活菌活菌体浓度为1-2×109个/克干粉的活菌粉剂。

Claims (2)

1.一种芽孢乳酸菌粉剂的生产方法，其特征在于采用通气培养和喷雾干燥法，并依次包括如下步骤：
①试管斜面培养：将一株芽孢乳酸菌在含有麸皮水成分的试管斜面上，温度为37-47℃进行活化培养2-3次；
②摇瓶培养：将菌体接入装有种子培养基的三角瓶中，该种子培养基是以葡萄糖为主要碳源并加入酸中和剂CaCO3的液体培养基，温度为37-47℃以140-180转/分的转速摇床培养18-24小时；
③种子罐培养：以5-10％的接种量接于装有种子培养基的种子罐中，在通气量为1∶0.5-0.7(V.V.m)、搅拌转速为300-400转/分、温度37-47℃的条件下培养16-24小时；
④发酵罐培养：以5-10％的接种量接入装有发酵培养基的搅拌型发酵罐中，发酵培养基是一种对芽孢形成有促进作用的含有Mn2+的液体培养基，发酵条件是：温度40-50℃、通气量1∶0.5-0.7(V.V.m)、搅拌转速为400--500转/分、培养时间65--75小时，最佳温度为40-43℃；
⑤喷雾干燥：将发酵液与发酵液量20％的麦芽糊精(DE15-20)放入混合罐中混合均匀后进行喷雾干燥；
按以上步骤可制得含耐热芽孢乳酸菌体的粉状制剂；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：菌体的培养温度为40-45℃，摇瓶转速140-180转/分、发酵罐通气量1∶0.5-0.7(V.V.m)、搅拌转速为400--500转/分。粉剂的制备采用喷雾干燥的方法获得。
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Record date: 2009.3.10

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