CN111707785B - 一种改善大深厚片型烟叶质量的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种改善大深厚片型烟叶质量的方法，通过测定优质烟叶片型和大深厚片型其内源激素GA、IAA、ABA、CTK含量，进行对比分析，找出差异；对大深厚片型烟叶进行外源激素配施配方组合，通过叶面喷施、茎顶淋浇法或灌根法施加外源激素，调节生长过快，营养积累过多，采用本发明处理后烤烟，降低了烤后烟叶的单叶重和叶厚，改善了组织结构和理化特性和成熟度，通过外观质量和感官评价，筛选最有优质调控方案。通过本调控方案后降低了烤后烟叶的单叶重和叶厚，改善了组织结构和理化特性，同时上等烟比例、橘黄色烟比例明显提高，外观质量和物理特性显著增强，香气透发饱满圆润，口感舒适余味纯净。
Description
技术领域
本发明属于烟草生产技术领域，属于烟草栽培技术，特别是指一种改善大深厚片型烟叶质量的方法。
背景技术
长期以来，烟草栽培受生态环境和品种等因素的影响存在不易烘烤，颜色较深，成熟度不够、叶片厚、组织结构紧密、单叶超重等缺点，采取施肥和耕种方法改良，仍然具有较大局限性。
喷洒不同种类、不同浓度和不同施用时期的外源激素对烟叶生长的调控不同的生长调节剂对烟叶生长的调控效果存在显著的差异。乙烯利抑制生长，促进成熟，外源ABA抑制生长，促进叶片脱落成熟；GA3显著促进生长，其内源激素的含量均可以接近正常类型的株高；IAA也表现出促进茎的生长，但调控效果较小。因此，关于外源激素施用的具体效应、最佳浓度和最适时间，由于受到不同环境条件和品种的制约，仍需要进一步探讨和验证。
植物激素之间是相互作用平衡调控的关系。由于不同生长型的组织和器官的发育及延展速率的种间响应差异,以及同化物分配到器官的方式差异，同时，不同基因型和栽培种也存在这一问题，尽管这些反应的机理量化差异不很明显. 但是，这些差异可以影响生态系统的响应.个体种或基因型的光温度协同作用的反应方式不一致.同时光温条件的改变引起激素水平的变化。
发明内容
本发明的目的是提供一种改善大深厚片型烟叶质量的方法，以解决片型不合理对生长、质量的影响等问题。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种改善大深厚片型烟叶质量的方法，包括以下步骤：
S1、分别检测优质烟叶和大深厚片型烟叶的N种内源激素水平，其中N 为自然数；
S2、通过步骤S1内源激素差异分析，确定优质烟叶M种内源激素水平特征，其中M为自然数，且M≤N；
S3、外源激素喷施配方组合的筛选：
在M种内源激素的范围内，选择与其中任一种与内源激素对应的外源激素，
和/或选择与两种或两种以上内源激素对应的相应数量的外源激素组合，共获得P种外源激素待选配方，其中P为自然数；
分别通过对大深厚片型烟叶喷施外源激素进行调控，使烟叶片型结构正常；
S4、将调控正常的烟叶进行烘烤后，通过物理特性、化学成分及感官质量评价，筛选出最佳烟叶所述对应的外源激素待选配方为最优调控方案。
进一步的，步骤S1的内源激素的检测方法，包括以下步骤：
1)烟叶取样和保存：
分别在移栽0、15、30、45及60天取充分伸展的叶片和茎的生长点，用液氮速冻后于-45℃～65℃温度下保存；
2)烟叶样品的处理：
测定时分别取2.5g样品加入到10ml由80％乙醇内含1mmol/L二叔丁基对甲苯酚的样品提取液中，在冰浴中研磨成浆，于4℃下提取2h后离心20min，取上清液过C18固相萃取柱后于40～45℃水浴中用氮气吹干，再用样品稀释液定容；
3)内源激素的检测：
将步骤2)定容后的样品溶液摇匀后用间接酶联免疫法，测定内源激素GA、 IAA、ABA、CTK及乙烯利含量。
进一步的，步骤S3中对大深厚片型烟叶叶面喷施外源激素进行调控是在烟株打顶后，进行设定量喷施一种外源激素待选配方，并通过对喷施浓度和喷施次数控制片型结构，直至叶型与优质烟叶的片型相似为止。
进一步的，所述外观质量评价的指标，采用目测划分的方式，指标包括颜色、色度和油分进行质量档次划分，其中，颜色分青、正黄、金黄、深黄、浅橘红、橘红、红棕和棕褐，共八档；色度分浓、强、中、弱和淡，共五档；油分分多、有、稍有和少，共四档。
进一步的，所述感官质量评价的指标包括香气质、香气量、浓度、柔细度、余味、杂气、刺激性和劲头；
所述感官质量评价总分计算公式为：
T＝(A+B)×2.0+(C+D)×1.5+E+F+G+H，其中，T为感官质量评价总分， A为香气质得分，B为香气量得分，C为浓度得分，D为柔细度得分，E为余味得分，F为杂气得分，G为刺激性得分，H为劲头得分。
进一步的，所述物理特性的指标包括烟叶的厚度、叶面密度、单叶质量、平衡含水率及填充值。
本发明的有益效果是：
本技术方案通过有效利用外源激素调控内源激素，以实现对大深厚片型烟叶结构的调控方法，是目前烟草香气和质量改良最简便、有效而且切实可行的途径之一。
具体实施方式
以下通过实施例来详细说明本发明的技术方案，以下的实施例仅是示例性的，仅能用来解释和说明本发明的技术方案，而不能解释为是对本发明技术方案的限制。
本申请的各实施例是以正常中烟100品种为基础进行的调控，因为篇幅的原因，不能对其它品种进行一一说明，但并不是说本申请的技术方案仅适用于中烟100品种的调控，为了实际的需要，可以依据本技术方案对其它烤烟品种进行调控。
因为土壤的不同，会导致相同烟草品种生产的烟叶在品质上有较大的差异，特别是针对某些肥力较大、含水量高等的土壤或其它的原因，导致烟叶较优质烟叶的片型大、颜色深并且叶片厚，这种烟叶虽然能够提高产量，但是对烟叶的品质没有好处，这种大深厚片型烟叶在烤后的香气等指标均较差，使用此类烟叶进行卷烟生产，会影响到卷烟的品质。本技术方案是通过前期烟草生长过程中，通过外源激素的干预调控，以实现此类土壤生产的烟叶能够达到优质烟叶或与优质烟叶相似的程度。
本申请的技术方案包括有两个步骤，首先是检测待调控烟叶的内源激素与用于对比的优质烟叶的内源激素水平的差异；其次是根据内源激素水平的差异，采用不同的相对应的外源激素待筛选配方对待调控烟叶处理，然后对处理的烟叶质量进行检测，获得优质烟叶片型的外源激素配方组合为最佳调控方法。
本技术方案是针对优质烟叶的内源激素已经为已知的情况下进行的，即已经有再先技术对优质烟叶的内源激素进行检测。在本申请的其它实施例中，也可以对优质烟叶的内源激素采用与大深厚片型烟叶进行同样的对比检测。
大深厚片型烟叶的内源激素的检测方法，包括以下步骤：
1)烟叶样品取样和保存：
分别在烟株移栽0、15、30、45及60天，选取充分伸展的叶片和茎的生长点，用液氮速冻后于-45℃～65℃温度下保存。
2)烟叶样品的处理：
测定时取2.5g前述低温保存的样品，加入10ml样品提取液，在本申请中，样品提取液是由80％的乙醇中含有1mmol/L的二叔丁基对甲苯酚，在冰浴中研磨成匀浆，再转入20ml试管，再使用5ml上述提取液分次冲净研钵，转入试管中摇匀，于4℃下提取2h，然后以3000转/分离心20min,取上清液过C18 固相萃取柱(此为常规技术，具体步骤为：1mL80％甲醇平衡柱→上样→收集样品→移开样品后用5mL100％甲醇洗柱→5mL100％乙醚洗柱→循环),萃取物放在 40℃～45℃水浴中用氮气吹干，再用样样品稀释液颇高容，待测定，此自找样品稀释剂为常规的蒸馏水或乙醇等，在本申请中，选用的是蒸馏水。
3)内源激素的检测：
将上述处理后的样品溶液摇匀后用间接酶联免疫法(ELJSA)，测定N种内源激素水平，其中N为自然数，在本申请中，测定四种内源激素GA、IAA、ABA、 CTK及乙烯利含量。
间接酶联免疫法(ELISA)测定间接法的原理可用下式表示： Ab+H+HP＝AbH+AbHP
其中Ab表示抗体，H表示游离激素，HP表示吸附在板上的激素－蛋白质复合物。根据质量作用定律，当该反应体系中Ab及HP的量确定时，游离H 越多，结合物AbH形成的就越多，而AbHP形成的就越少，即结合在板上的抗体就越少，通过酶标二抗检测结合物AbHP的多少，就可以确定游离H量的多少。
将上述大深厚片型烟叶检测的内源激素水平与优质烟叶的数据进行比对，获得与优质烟叶的相同内源激素的差异，在申请中，确定优质烟叶与大深厚片型烟叶有M种内源激素存在差异，其中M为自然数，且M≤N。
外源激素喷施配方组合的筛选：
在M种内源激素的范围内，选择与其中任一种与内源激素对应的外源激素，
和/或选择与两种或两种以上内源激素对应的相应数量的外源激素组合，共获得P种外源激素待选配方，其中P为自然数；在本申请中，差异为ABA 及乙烯利的含量不同，为此，在本申请的技术方案中，外源激素待选配方分别为ABA、乙烯利、ABA+乙烯利三种待选配方组合，但是并不代表本申请的技术方案仅适合上述的几种配方组合，根据需要，可以包括更多种配方组合。
在本申请的技术方案中，仅含有ABA的组中，ABA的浓度分别为3mg/L、5mg/L及10mg/L。
单独使用乙烯利的浓度分别为5mg/L、10mg/L及15mg/L。
使用ABA+乙烯利的组分中，ABA的浓度为3-10mg/L，乙烯利的浓度为 1-5mg/L的多种组合。
在进行外源激素喷施实验中，对优质片型烟叶以喷施清水为对照组1，以清水喷施大深厚片型烟叶为对照组2，其余的各待选配方组每组喷施20株待调控烟株，并且每一外源激素待选配方处理三组，即共60株待调控烟株，喷施是在烟株打顶后进行，根据需要可以进行多次喷施，直至叶型与优质烟叶的片型相似为止。
将上述的烟叶进行相同的烤制工艺后，通过对烤后烟叶的物理特性、化学成份及感官质量评价，以筛选出最佳烟叶所对应的外源激素待选配方为最优调控方案。
所述外观质量评价采用目测划分的方式，指标包括颜色、色度和油分，见表1。
表1外观质量评价表
感官质量评价的指标包括香气质、香气量、浓度、柔细度、余味、杂气、刺激性和劲头。
具体的感官质量评价：
由评吸委员会成员采用感官评吸法对喷施处理的感官质量进行评定，各项感官指标项目评价按照9分制，感管总分是各项实际得分乘以权重之和。其中各项指标分别为香气质、香气量、浓度、柔细度、余味、杂气、刺激性和劲头。
感官质量评价总分计算公式为：
T＝(A+B)×2.0+(C+D)×1.5+E+F+G+H，其中，T为感官质量评价总分， A为香气质得分，B为香气量得分，C为浓度得分，D为柔细度得分，E为余味得分，F为杂气得分，G为刺激性得分，H为劲头得分，结果见表2。
表2感官质量评价表
物理指标评价：
物理指标包括：厚度(mm)、叶面密度(g/m2)、单叶质量(g)、平衡含水率(％)和填充值(cm3/g)
通过喷施外源激素进行试验对照的烤后烟叶检测进行对比分析，通过合适外源激素喷施可以调控烟叶质量达到优质水平。
物理特性的指标包括：厚度(mm)、叶面密度(g/m2)、单叶质量(g)、平衡含水率(％)和填充值(cm3/g)，见表3：
根据外源激素喷施筛选最佳配方组合：
第一组：ABA的浓度有5mg/L；
第二组：乙烯利的浓度10mg/L；
第三组：ABA的浓度5mg/L+乙烯利的浓度3mg/L。
采用以上配比浓度处理后烤烟上等烟比例、橘黄色烟比例明显提高，外感质量和物理特性显著增强，香气透发饱满圆润，口感舒适余味纯净。
以上所述，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (4)
1.一种改善大深厚片型烟叶质量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、分别检测优质烟叶和大深厚片型烟叶的N种内源激素水平，其中N为自然数；
S2、通过步骤S1内源激素差异分析，确定优质烟叶M种内源激素水平特征，其中M为自然数，且M≤N；
S3、外源激素喷施配方组合的筛选：
在M种内源激素的范围内，选择与其中任一种与内源激素对应的外源激素，
和/或选择与两种或两种以上内源激素对应的相应数量的外源激素组合，共获得P种外源激素待选配方，其中P为自然数；
分别通过对大深厚片型烟叶喷施外源激素进行调控，使烟叶片型结构正常；
S4、将调控正常的烟叶进行烘烤后，通过物理特性、化学成分及感官质量评价，筛选出最佳烟叶所述对应的外源激素待选配方为最优调控方案；
步骤S3中对大深厚片型烟叶叶面喷施外源激素进行调控是在烟株打顶后，进行设定量喷施一种外源激素待选配方，并通过对喷施浓度和喷施次数控制片型结构，直至叶型与优质烟叶的片型相似为止。
2.根据权利要求1所述的改善大深厚片型烟叶质量的方法，其特征在于，步骤S1的内源激素的检测方法，包括以下步骤：
1)烟叶取样和保存：
分别在移栽0、15、30、45及60天取充分伸展的叶片和茎的生长点，用液氮速冻后于-45℃～65℃温度下保存；
2)烟叶样品的处理：
测定时分别取2.5g样品加入到10ml由80％乙醇内含1mmol/L二叔丁基对甲苯酚的样品提取液中，在冰浴中研磨成浆，于4℃下提取2h后离心20min，取上清液过C18固相萃取柱后于40～45℃水浴中用氮气吹干，再用样品稀释液定容；
3)内源激素的检测：
将步骤2)定容后的样品溶液摇匀后用间接酶联免疫法，测定内源激素GA、IAA、ABA及CTK含量。
3.根据权利要求1所述的改善大深厚片型烟叶质量的方法，其特征在于，所述感官质量评价的指标包括香气质、香气量、浓度、柔细度、余味、杂气、刺激性和劲头；
所述感官质量评价总分计算公式为：
T＝(A+B)×2.0+(C+D)×1.5+E+F+G+H，其中，T为感官质量评价总分，A为香气质得分，B为香气量得分，C为浓度得分，D为柔细度得分，E为余味得分，F为杂气得分，G为刺激性得分，H为劲头得分。
4.根据权利要求1所述的改善大深厚片型烟叶质量的方法，其特征在于，所述物理特性的指标包括烟叶的厚度、叶面密度、单叶质量、平衡含水率及填充值。
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