CN111686173A - 沉香萃取物的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及沉香萃取物的新用途。用途是治疗生物体罹患的脑神经疾病、改善该生物体表现的脑神经症状、预防生物体罹患的脑神经疾病、增强或活化生物体的脑神经表现、或增强生物体的神经生长。摄入本发明的沉香萃取物的生物体其记忆力和学习能力皆获得改善。
Description
技术领域
本发明提供沉香萃取物的新用途，尤其是作为保健品或医药品，用于治疗、 改善或预防脑神经相关疾病的用途。
背景技术
根据流行病学的统计，北美地区在西元2040年前，神经退化性疾病将取代癌 症成为第二大死因。神经退化性疾病也被称为「静默的流行病」，通常好发于老 年人，由于患者在发病期间会逐渐与社会隔离，再加上目前相关的医药知识匮乏 不足，所以社会大众很少了解和注意。随着人口结构的老化，神经退化病患也日 益增加，对家属、患者和社会大众而言，无论是经济、心理和生活形态的冲击， 着实是难以估计和承担的。
根据流行病学研究，65岁以上的人有5％有失智症，85岁以上则增加到20％。 而研究也显示100岁以上则89％有失智症，约莫每增加5岁，其罹患失智症的机率 就增加一倍。失智症当中有50％-70％的病患属于阿兹海默症(Alzheimer's disease,AD)患者。阿兹海默症是一种发病进程缓慢、随着时间不断恶化的持续 性神经功能障碍。
阿兹海默症最初的症状常被误认为是老化或是压力所致，但是若进行详细的 神经心理学检查可能可以发现有轻微的认知困难。这些早期症状可以影响大部分 复杂的日常生活活动，最明显的缺陷是失忆，主要是难以记住最近发生的事和无 法吸收新资讯，其他症状包括出现在注意力的管控、计画事情、弹性、和抽象化 的问题，或是语义记忆障碍等。在早期某些病患中，语言障碍、管控功能障碍、 知觉障碍(认识不能，或称失认症)或是行动障碍(运用不能，或称失用症)会 比记忆障碍更明显。
随着病情渐渐恶化将导致病患失去独立性进而无法进行大部分的日常活动， 语言障碍变得明显，导致经常出现错误的字汇替换；复杂的动作变得不协调，记 忆问题会恶化。阿兹海默症末期病患需要完全依赖照护者协助，语言能力退化至 简单的词语甚至完全失去谈话能力，无法独立进行任何事务，肌肉质量和行动能 力退化最终导致长期卧床，也无法自行进食。
神经问题并非仅发生在老年人身上；注意力缺失(attention deficit disorder,ADD)、过度活跃症(Hyperkinetic disorder,HD)或过动疾患(Attention deficienthyperactivity disorder,ADHD)是一个与脑神经发育相 关的心理疾患，好发于儿童青少年阶段。台湾约有二十多万的小朋友符合ADHD 的诊断标准，在男童身上大多表现出冲动与过动的行为，在女童身上则多表现出 不专心的现象。
目前大部分其他的脑神经相关疾病与症状的医疗方法都和阿兹海默症一样， 并无法阻止或逆转病程，只有少数可能可以暂时缓解或改善症状的方法。而ADHD 虽然有机会于成年时恢复，但在儿童时期若无及时治疗，容易造成学习和人际关 系的问题。因此，目前亟需要一种有效滋养退化神经与修复受损神经的物质，以 治疗、预防、改善脑神经疾病。
发明内容
有鉴于此，本发明提出了一种可以用于改善与预防脑神经疾病与症状的沉香 萃取物；甚至，本发明亦提出沉香萃取物用于正常人亦有提升记忆力和专注力， 提升脑神经表现的功效。
本发明所述的「沉香木」泛指所有可产生沉香树脂的树木，而沉香萃取物是 萃取自沉香木的复方成分。阴干的含有树脂的沉香木是一种中药材。中国台湾提 供的有关于沉香药性报导指出，沉香主治：呕吐呃逆，心腹痛，大肠气滞，腰膝 虚冷，胸膈痞塞，气喘等。沉香也是中东和印度的传统医学药材。
本草纲目中记载：「沉香，气味辛，微温无毒。主治风水毒肿去恶气；心腹 痛，霍乱中恶，邪鬼疰气，清人神；调中补五脏，益精壮阳，暖腰膝，止转筋吐 泻冷气，破症癖，冷风麻痹，骨节不任，风湿皮肤瘙痒，气痢；补脾胃，益气和 神。治气逆喘急，大肠虚闭，小便气淋，男子精冷。」，但目前并未有古籍或科 学文献证明沉香具有所需求的功效。
本发明系提出用于增强神经突生长、神经修复并改善与预防生物体的脑神经 退化的沉香萃取物的用途，并进一步以实验数据证明功效。
本发明的沉香萃取物系从一沉香木中萃取浓缩而得。进一步，沉香萃取物系 从该沉香木的沉香树脂萃取浓缩而得。萃取方法可以是蒸馏法、超临界二氧化碳 法、溶剂萃取法、冷压法、脂吸法、浸渍法、或二氧化碳萃取法。沉香木的化学 成分包含苯基乙基色烯酮衍生物、萜类化合物、类黄酮化合物等。
本发明系将沉香萃取物投予生物体以治疗生物体罹患的脑神经疾病、改善该 生物体表现的脑神经症状、预防生物体罹患脑神经疾病、增强或活化生物体的一 脑神经表现或增强生物体的神经生长。投予沉香萃取物于生物体的方式，进一步 系将沉香萃取物混合水与乳化剂以形成待雾化精油，再雾化待雾化精油使生物体 自其呼吸道吸收沉香萃取物。
综上所述，本发明的沉香萃取物系提炼自沉香木，并且将沉香萃取物投予生 物体。本发明揭露的沉香萃取物用途系用以增强生物体的神经生长并治疗、改善 与预防生物体的脑神经退化。
附图说明
图1：绘示本发明的一实验中老鼠脑海马回神经细胞的荧光显像图。
图2A：绘示生物体脑神经细胞的各级神经突的示意图。
图2B：绘示本发明的实验中老鼠脑海马回神经细胞的荧光显像图。
图3：绘示本发明的实验中老鼠脑海马回神经细胞的轴突长度柱状图。
图4：绘示本发明的实验中老鼠脑海马回神经细胞的树突数量柱状图。
图5：绘示本发明的实验中老鼠脑神经细胞的损伤修复影像图。
图6：绘示本发明的实验中老鼠进行水迷津实验的游泳耗费时间折线图。
图7：绘示本发明的实验中老鼠进行黑白箱实验的白箱留滞时间柱状图。
图8A与8B：绘示本发明的实验中老鼠脑部核磁共振影像图。
具体实施方式
为了让本发明的优点，精神与特征可以更容易且明确地了解，后续将以实施 例并参照所附图式进行详述与讨论。值得注意的是，这些实施例仅为本发明代表 性的实施例，其中所举例的特定方法，装置，条件，材质等并非用以限定本发明 或对应的实施例。
此外，本发明装置或元件前的不定冠词“一”、“一种”和“一个”对装置 或元件的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一”应被解读为包括一或至少 一，并且单数形式的装置或元件也包括复数形式，除非所述数量明显指单数形式。
本文所述的术语「改善、提升、增强、活化」系相对于未使用本发明沉香萃 取物的细胞样本或动物样本，使用本发明沉香萃取物的细胞或动物样本具有较高 的存活率、神经分化能力、神经滋养能力、认知、学习与记忆能力等；且具有较 多的项目达到正常生理机能与正常行为表现的指标。
本文所述的术语「治疗、预防」系指相对于使用本发明沉香萃取物前的细胞 样本或动物样本，使用本发明沉香萃取物后的细胞样本或动物样本可预防或部分 预防疾病、症状、病况，至少部分治愈或缓解疾病、症状、病况、或因疾病造成 的不利影响。本文所述的术语「病症」系指包含了疾病、遗传病、症状、病灶、 发病机转等。
本发明是提出了一种可以用于滋养神经细胞，增强生物体的脑神经生长，进 而改善与预防脑神经疾病与症状的沉香萃取物；甚至，本发明亦提出沉香萃取物 用于正常人亦有提升记忆力和专注力，提升脑神经表现的功效。增强生物体的脑 神经生长系指增加生物体的树突或轴突的数量以及增长生物体的树突或轴突的 长度。
本发明的沉香萃取物系从一沉香木萃取浓缩而得。进一步，沉香萃取物系从 该沉香木的沉香树脂萃取浓缩而得。萃取方法可以是蒸馏法、超临界二氧化碳法、 溶剂萃取法冷压法、脂吸法、浸渍法、或二氧化碳萃取法。于一较佳实施例中， 沉香萃取物中含有体积百分比大于1％的α-Agarofuran或其衍生物与体积百分 比大于3％的α-Bulnesene或其衍生物。α-Agarofuran与α-Bulnesene系为沉香 木特有的成分，可作为沉香萃取物的特性指标。α-Agarofuran与α-Bulnesene 存在于沉香木全株，但于沉香树脂较易提炼出高浓度的沉香萃取物。本发明并未 限制α-Agarofuran与α-Bulnesene必须是所述的滋养神经细胞用途中的有效成 分，其有效成分可能是沉香萃取物中的一种化合物或多种化合物协同作用。沉香 萃取物可能还含有下列化合物：α-Copaene、γ-Muurolene、Cypera-2,4-diene、jinkoh-eremol、Kusunol、Dihydrokaranone、β-Patchoulene、 oxo-agarospirol、Prezizaene、Aromandendrene、(-)-selina-3,11-dien-9-one、 dehydrojinkoh-eremol、Agarospirol、10,11-Himachala-3(12),4-diene。
在本发明的多个具体实施例中，沉香萃取物可再经过103～109倍的稀释以用于 实验、保健或是医疗应用。
沉香树原产于亚洲(自印度北部至越南及印度尼西亚)。其尤其出现于印度尼 西亚、泰国、柬埔寨、老挝、越南、马来西亚、印度北部、菲律宾、婆罗洲及新 几内亚岛的雨林中。沉香树为生长至30-40公尺高且直径达60公分的常绿树。严 格而言，沉香树为瑞香科(Aquilaria)沉香属的植物，但是橄榄科(Burseracrae)、 樟树科(Lauraceae)、大戟科(Euphorbiaceae)的部分树种在生长过程中，因植株 受伤且同期受真菌感染而亦可导致结香，且最终可孕育沉香。是以本发明所述的 「沉香木」应涵盖本领域通常知识者或相关业者所认定能结出「沉香」的植物种， 涵盖有瑞香科(Aquilaria)、橄榄科(Burseracrae)、樟树科(Lauraceae)、大戟 科(Euphorbiaceae)的部分树种。
本发明所述的「沉香木」包括但不限于印度沉香属(Aquilaria Agallocha)、 美洲沉香属(Aquilaria Ganadensis)、马来沉香属(Aquilaria Malaccensis)、 野沉香属(Aquilaria Vulgaris)、厚沉香属(Aquilaria Grassna)、马思考沉香 属(AquilariaMoskowskii)、土沉香属(Aquilaria Sinensis)和Aquilaria Kajugaru的植物；「沉香木」也包括但不限于台湾土沉香(Excoecaria formosanaHayata)、青紫木(ExcoecariabicolorHassk)、土沉香(Excoecaria agallochaL.)及兰屿土沉香(ExcoecariakawakamiiHayata)；更进一步地，「沉 香木」也包括但不限于巴氏沉香(A.baillonii)、赫塔沉香(A.hirta)、罗氏沉 香(A.rostrata)、贝氏沉香(A.beccariana)、孜然沉香(A.cummingiana)、费 氏沉香(A.filaria)、卡氏沉香(A.khasiana)、小果沉香(A.microcarpa)、格 氏沉香(A.grandiflora)、白木香(A.sinensis)、婆罗沉香(A.borneensis) 及邦卡沉香(A.bancana)。
本发明投予沉香萃取物于生物体的方式，进一步可以是口服、涂抹、吸入、 注射、舌下给药等方式。于一具体实施例中，本发明投与沉香萃取物的方式系将 沉香萃取物混合水与乳化剂以形成待雾化精油，再雾化待雾化精油使生物体自其 呼吸道吸收沉香萃取物。呼吸道吸收方式较口服、静脉注射等方法而言，更能穿 越血脑屏障(blood-brainbarrier,BBB)到达脑，进而获得更佳的滋养神经效果。
本发明的沉香萃取物主要系具有滋养神经生长的功能，帮助神经突生长与修 复。藉此进一步地可以改善、治疗或预防神经疾病或神经症状，包含但不限于注 意力缺失、过度活跃症或过动疾患、记忆受损、智能衰退、运动协调能力受损、 神经元或胶细胞存活率下降、神经纤维断裂、中枢神经系统病变、巴金森氏症、 阿兹海默症、影响感觉神经元的疾病、皮质边缘系统的疾病、与发育迟缓及学习 障碍相关的病症、唐氏症、氧化压力诱导的神经元死亡、情绪相关的病症、忧郁 症、因老化所产生的病症、因慢性酗酒所产生的病症、因药物滥用所产生的病症、 因局部创伤造成的病理改变，以及因治疗药物及治疗的负面副作用所产生的病 症。上述病症可藉由滋养神经生长所改善与预防，因此具有滋养神经生长功效的 沉香萃取物可以改善与预防上述病症。
于一些具体实施例中，脑神经病症为记忆受损、智能衰退、运动协调能力受 损、神经细胞或胶细胞存活率下降、失眠、睡眠障碍、巴金森氏症或阿兹海默症、 情绪相关的病症、忧郁症。在一些具体实施例中，相较于负对照组，实验鼠施用 本发明一段时间后，上述症状获得了显著地改善。
本文所指称的术语「生物体表现的一脑神经病症」系指因脑神经异常、受损 或退化而显现的表征，例如有脑神经损伤、脑神经退化、运动功能障碍、记忆力 退化、神经元或胶细胞存活率下降、认知能力退化或学习能力退化、情绪相关的 病症、忧郁症等。
本文所指称的术语「生物体罹患的一脑神经病症」系指与神经细胞或胶细胞 受损或退化有关的病症或症状。具体而言可以是指包含导致神经元或胶细胞细胞 死亡及/或尚不致死的神经病变的症状，包括：
中枢神经系统病变，包括影响基底神经节的退化性疾病(例如：杭丁顿氏舞 蹈症、威尔森氏症、纹状体黑质变性、皮质基底神经节退化)、妥瑞氏症、巴金 森氏症、进行性核上眼神经麻痹症、进行性延髓麻痹症、遗传痉挛性麻痹、脊髓 性肌肉萎缩症、肌萎缩脊椎侧索硬化症，及其变体、齿状核红核苍白球丘脑底核 萎缩、橄榄体桥脑小脑萎缩、情绪相关的病症、忧郁症、副肿瘤性小脑变性，和 多巴胺毒性；
影响感觉神经元的疾病，例如弗里德赖希共济失调、糖尿病，周围神经病变、 视网膜神经元退化；皮质边缘系统的疾病，例如，大脑类淀粉血管病变、皮克氏 萎缩症、雷特氏症候群；
涉及神经系统及/或脑干的神经退化性病变，包括阿兹海默症、爱滋病相关 的失智症、童年期脑脊髓病变、扩散性路易氏体症、癫痫、多系统萎缩、格林- 巴利症候群、溶酶体储积病、褐脂素储积病、幼儿海绵状脑病(阿尔珀斯病)、中 枢神经系统退化所造成的晕眩；
与发育迟缓及学习障碍相关的病症、唐氏症，以及氧化压力诱导的神经元死 亡；因老化、慢性酗酒或药物滥用所产生的病症，包括如，因酗酒造成的在蓝斑 核、小脑、胆碱能基底前脑内的神经元的退化、因老化造成的失智、小脑神经元 与皮层神经元的退化而导致的认知与运动损伤、因长期安非他命滥用造成的基底 神经节的神经元的退化而导致的运动损伤、注意力缺失、过度活跃症或过动疾患；
因局部创伤造成的病理改变，例如：中风、局部缺血、血管供血不足、缺氧 缺血性脑病变、高血糖、低血糖、闭锁式头部外伤、或直接外伤、神经纤维受损； 以及因治疗药物及治疗的负面副作用所产生的病症(例如，回应N-甲基-D-天门冬 胺酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)类的麸胺酸受体的拮抗剂的抗痉挛剂量而 造成的扣带皮质与内嗅皮质的退化)。
在部分的医学文献中指称，忧郁症与情绪失调亦属于脑神经病症的一种现 象。
为说明本发明的沉香萃取物具有上述的功效，以下将说明已完成的细胞实验 与动物实验。在体外的细胞实验中，在神经细胞的培养基当中加入不同浓度的沉 香萃取物，于37℃、5％CO2恒温培养箱内培养三天后观察神经细胞的变化。以沉 香萃取物投与细胞实验时，系以沉香萃取物的1/30M、1/10M、1/5M(30,000,000 分之1、10,000,000分之1、5,000,000分之1)比例浓度添加于培养溶液中处理三 天。
实施例一
请参阅图1。图1系绘示本发明的一实验中老鼠脑海马回神经细胞的荧光显像 图。β-Ⅲtubulin是神经细胞特有骨架蛋白，将β-Ⅲtubulin染色后在荧光显 微镜下可以看到神经细胞的神经突呈现绿色。DAPI可以穿透细胞膜与DNA结合， 在荧光显微镜下观察时呈现蓝色，代表神经细胞的细胞核位置。在本实验中将神 经细胞分别染上β-Ⅲtubulin抗体与DAPI，观察到的神经突细胞生长状况如图 1。可见当沉香萃取物(AEO)浓度为1/5M(5,000,000分之1)时，其神经突的生长 状况明显优于未加沉香萃取物(AEO)的控制组(control)的神经突，例如神经突的 长度以及神经突的数量。
实施例二
请参阅图2A。图2A系绘示生物体脑神经细胞的各级神经突的示意图。在此细 胞实验中，分别观察神经细胞2中从细胞体20延伸出的神经突，神经突分成轴突 与树突，轴突又分成一级轴突211、二级轴突212、三级轴突213。树突又分成一 级树突221、二级树突222。轴突与树突负责在不同神经细胞2之间传递及接收电 化学讯号，也是神经细胞2传导最重要的目的。因此神经突数量越多、长度越长， 代表神经细胞2能接触的其他神经细胞的机会越多、越远，且可能形成的突触数 量也越多，当脑组织神经细胞间的网络连结越强时，脑神经的表现亦将获致提升。
上述的脑神经表现包括记忆力、专注力、空间记忆能力、认知能力、学习能 力、情绪平衡、语言能力和运动能力等生物本能性的表现。此外，还可以延缓脑 部萎缩、增加脑细胞量或脑容量。
请参阅图2B。图2B系绘示本发明的另一实验中老鼠脑海马回神经细胞经过染 色后的荧光显像图。进一步地，为了要知道沉香萃取物处理神经细胞的后增加的 神经突长度与数量是作用在轴突或是树突，进行以下实验。将神经细胞分别添加 不同抗体，之后在荧光显微镜下可以藉以分辨神经突种类。利用Tau5蛋白抗体可 以定义轴突，将Tau5抗体加入后再加入能发出绿色荧光的二级抗体，可以分辨出 轴突(绿色)；利用MAP2蛋白抗体可以定义树突，将MAP2抗体加入后再加入能发出 红色荧光的二级抗体，可以分辨出树突(红色)。从此图可以大略分辨轴突与树突 的长度与数量。在加入沉香萃取物的各浓度处理组其轴突与树突的长度与数量皆 大于未加入沉香萃取物的control组。接着，将轴突与树突的长度与数量以电脑 软体(ImageJ)量化并且进行统计分析(One-way ANOVA,followed byPost hoc Newman-Keuls test)。
请参阅图2B、图3与图4。图3系绘示本发明的实验中老鼠脑神经细胞的轴突 长度柱状图。图4系绘示本发明的实验中老鼠脑神经细胞的树突数量柱状图。本 实验每一组的数量大于等于二十(*p<0.05、**p<0.01)。将图2B观察到的神经突 的长度与数量分别统计之后，绘制成图3与图4的柱状图。如图3所示，相较于 control组，在添加沉香萃取物的处理组其一级轴突与二级轴突达到显著水准的 长度增长，且随着沉香萃取物浓度的增加(30,000,000分之1～5,000,000分之1)， 其增长程度有越高的趋势。如图4所示，在添加沉香萃取物的处理组当中，随着 沉香萃取物浓度的增加，其树突数量有逐渐增多的趋势。尤其在5,000,000分之1 的沉香萃取物浓度处理下与control组相比，其一级树突与二级树突的数量都达 到了显著水准的提升。由于轴突的长度增加，意味着轴突上可形成的突触的点可以大幅增加，而树突的数量增加，也意味着可以形成突触的点会增加，此说明了 沉香萃取物作用在脑神经细胞时会使脑神经的连结及突触增加，达到神经滋养效 果，进而提升脑神经的表现。证明沉香萃取物具有神经滋养效果，能改善或调节 神经细胞可塑性，即代表沉香萃取物具有改善、治疗或预防神经疾病或神经症状 的潜力。
实施例三
请参阅图5。图5系绘示本发明的实验中老鼠大脑皮质神经细胞的损伤修复影 像图。在第三个细胞实验当中，测定细胞迁移运动与修复的能力，基本原理是： 分离与培养初代大脑皮质细胞后，在长满的单层细胞上人为地制造一个空白区 域，称为「划痕或伤口」，受损边缘的细胞会伸出轴突再生，进入空白区域加速 修复。此方法广泛用于观察药物对细胞迁徙和轴突再生修复的影响。将等量的细 胞种植在培养皿上。贴附后在培养皿上制造划痕(如图5右方的两条虚线的间)， 使神经突细胞之间的连结断裂。再一段时间之后观察培养皿上神经细胞的生长状 况(如图5左方的两条虚线之间)。藉此可以观察在不同浓度的沉香萃取物处理下， 神经细胞的修复情形是否有变化。从图5中可以看到，control组中受损刮痕处只 有少量神经轴突再生；在30,000,000分之1与10,000,000分之1的处理组中可以看 到神经细胞的神经突往受损处生长；在5,000,000分之1的处理组中可以看到虚线 两侧的神经细胞轴突已经彼此相连。这表示沉香萃取物可以滋养神经，并促进断 裂的脑神经突的修复能力。
实施例四
使用APP/PS1基因转殖老鼠作为体内实验的验证。APP/PS1基因转殖老鼠为阿 兹海默症鼠的一种动物模式，因为其基因缺陷导致类淀粉斑块在脑中大量产生及 沈淀，小鼠8周龄时会发生神经胶细胞变性，10周龄时发生突触损伤，在6周龄皮 质和3-4个月龄海马区域开始发生斑块Aβ沉积，进而容易罹患阿兹海默症，故以 此种老鼠适于失智动物模式研究。据报导约4周龄开始斑块周围的树突棘会逐渐 消失并持续数月。据报导此小鼠七月龄时会出现认知功能障碍，尤其表现在水迷 津模式的空间学习和记忆的认知缺陷，此缺陷被视为是阿兹海默症的特有病征。 海马回CA1区域的长期增益现象(long-termpotentiation,LTP)在8和15月龄 时检测到受损。下述的实验中，是将本发明中的沉香萃取物配制成待雾化沉香油 后，以雾化熏香的方式给实验鼠吸入。
在第一个动物实验中，将APP/PS1鼠分成AEO(Agarwood Essential Oil，AEO) 处理组与Control组，并分别进行莫氏水迷津实验(Morris water maze)。AEO处 理组是将四个月大的阿兹海默症鼠关在箱子中每周六次接受雾化沉香油熏疗20 分钟，持续三个月；Control组则是将四个月大的阿兹海默症鼠关在箱子中每日 接受雾化纯水熏疗20分钟，持续三个月。水迷津实验被用来测试空间学习与记忆 能力和认知功能，将实验老鼠放在水池中，水池水面下设置有一隐藏平台，老鼠 会尝试游泳至脚可触底的位置来避免溺毙。一开始，老鼠会漫无目的游泳直至不 小心碰触平台位置后，老鼠便能安全的停留在平台上，并根据周围的环境线索记 忆其所在位置。经过每日三次反复训练之后，空间学习与记忆力好的老鼠将很快 找到水面下隐藏式平台所在的位置。藉此，记录老鼠被放入水池直到找到平台这 段时间，可以被视为空间学习与记忆能及认知功能力判别指标。
请参阅图6。图6系绘示本发明的实验中老鼠进行水迷津实验的老鼠找到水面 下平台所需的时间折线图。以AEO处理的阿兹海默症老鼠组(菱形)和阿兹海默症 老鼠以纯水处理组的Control组(圆形)找到水面下平台所需的时间，连续纪录五 日后，将老鼠抵达平台所耗时间绘成折线图。本实验每一处理的重复数大于等于 三。从图6中可以看到，第一天与第二天的两组老鼠都还在探索阶段，且第二天 两组老鼠找到水面下平台所需的时间都可以从平均55秒降到平均35秒左右。然 而，Control组老鼠在第二天到第五天中每天找到水面下平台的时间相似，皆落 在30秒至40秒之间。另一方面，AEO组老鼠则落在10秒至20秒之间，相较于Control 组老鼠有更佳的表现。藉此可以推测，脑部已发生阿兹海默症病症的老鼠在吸食 沉香萃取物之后，其空间学习与记忆能及认知功能力可以获得改善。
实施例五
在本发明的第二个动物实验中，将老鼠分成Control组、AD处理组与AD+AEO 处理组。AD处理组是指七月龄的APP/PS1基因转殖阿兹海默症鼠，而AD+AEO处理 组是指七月龄的APP/PS1基因转殖鼠且经过三个月的沉香熏香处理。而本实验也 提供仅熏纯水雾的野生型鼠(wild type)作为Control组，且Control组为和AD处 理组与AD+AEO处理组同年龄但基因正常的小鼠。将这三组老鼠分别进行黑白箱实 验(light-dark transition test)，黑白箱实验被用来测试辨别力、记忆力与情 绪稳定性，又称被动单向逃避试验。老鼠被放在明亮的白箱时会有不安焦虑感， 而天性驱使老鼠朝向无光的黑箱中前进。当老鼠进入黑箱中后立刻施以轻微电流 足部电击(0.7mA/sec,for 2sec)使老鼠不适，进而检测小鼠的恐惧记忆。于 电刺激后14天，再度将小鼠放进白箱，纪录小鼠在光亮区停留的时间，停留的 时间越久，代表该小鼠的记忆能力越好，此为长期恐惧记忆测试。藉此，从老鼠 被放入白箱到老鼠钻进黑箱这之间经过的时间，可以被视为记忆力、专注力和学 习能力的判别指标。
请参阅图7。图7系绘示本发明的实验中老鼠进行黑白箱实验的白箱留滞时间 柱状图。第二个动物实验分别在遭受(训练组)或不遭受(未训练组)足部电极 后第14日进行，计时老鼠滞留白箱的时间，再比较未训练与训练后第14日中老鼠 滞留时间并绘成柱状图。本实验每一处理的重复数大于等于三。从图7中可以看 到，不论何组，未受足部电刺激前老鼠皆在极短的时间内即从白箱躲避至黑箱中， 显示各组老鼠驱暗天性不受影响。接受足部电击后的第14天再将各处理组老鼠放 入白箱，计算老鼠滞留于白箱的时间。Control组老鼠平均于白箱约滞留500秒才 进入黑箱；AD组老鼠于白箱平均滞留不到200秒即进入黑箱中；AD老鼠经过AEO 处理后则平均于白箱约滞留600秒才进入黑箱。这表示AD组确实比一般老鼠更有 记忆力和学习力不足的问题；但是AD+AEO组的老鼠经过沉香熏疗后则可回复到与 control组老鼠相当的记忆力水准，甚至有超越control组老鼠记忆力水准的趋 势。藉此可以推测，脑部已发生阿兹海默症病症的老鼠在吸食沉香萃取物之后， 其记忆力和学习能力可以获得改善。
实施例六
请参阅图8A与8B。图8A与8B系绘示本发明的实验中老鼠脑部核磁共振影像 图。将野生型(wild type)小鼠、阿兹海默症鼠(AD组)、阿兹海默症鼠并经沉香 熏疗处理(AD+AEO组)分别进行核磁共振仪检测脑容量变化。图8A分别指示老鼠的 背海马回12、脑壳11与大脑皮质10。脑壳11为骨胳组织，形状不易变动。正常状 况下脑壳11与大脑皮质10之间有着些微的空隙，同年龄的野生型小鼠(control) 的大脑皮质10为光滑饱满的平滑脑组织构造，空隙11在图8A与8B中显示为黑色。 当老鼠的大脑皮质10开始萎缩之后，脑壳11与大脑皮质10之间的空隙会更加明 显。因此，可藉由核磁共振影像图判断老鼠大脑皮质10是否有萎缩的现象。
图8B的左、中、右分别为不同组别的小鼠所摄的影像，每组别由上而下分别 为同一小鼠从脑干处依序往前额叶处侦测的影像切面图，图8B显示AD组老鼠的脑 壳11与大脑皮质10之间的空隙及相较于Control组(野生型)老鼠更为明显；且AD 组老鼠的大脑皮质10边缘较为凹凸皱缩(萎缩现象的表征之一)，Control组老鼠 的大脑皮质10相对较为平滑饱满。而相较于AD组老鼠，AD+AEO组老鼠脑壳11与大 脑皮质10之间的空隙较为狭小，大脑皮质10也更为饱满圆润。AD+AEO组的大脑皮 质10与间隙表征也与Control组相仿，这表示AD组老鼠在摄入沉香萃取物之后， 其脑部萎缩退化的程度会被抑制，脑容量也会增加。此外，经过电脑软体分析后， 接受沉香处理的AD老鼠会比未接受沉香处理的AD老鼠，其背海马回12组织体积会 增加12.5％。换句话说，吸食本发明的沉香萃取物可以预防老鼠发生脑部萎缩或 增加脑细胞容量等进而改善阿兹海默症的表现症状。
综上所述，本发明提出蒸馏法萃取的沉香萃取物具有治疗与预防脑神经疾 病、增强脑神经表现的用途，并且以实验数据证明所述的功效。习知技术中沉香 萃取物运用在治疗与预防脑神经疾病的用途不曾被报导，更未被数据证明过；而 本发明的沉香萃取物已经在细胞实验与动物实验当中被证实具有修复脑神经、提 升记忆力的功效。
藉由以上较佳具体实施例的详述，系希望能更加清楚描述本发明的特征与精 神，而并非以上述所揭露的较佳具体实施例来对本发明的范畴加以限制。相反地， 其目的是希望能涵盖各种改变及具相等性的安排于本发明所欲申请的专利范围 的范畴内。因此，本发明所申请的专利范围的范畴应该根据上述的说明作最宽广 的解释，以致使其涵盖所有可能的改变以及具相等性的安排。
Claims (13)
1.一种沉香萃取物在制备增强脑神经表现的组合物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，系将一沉香萃取物投予一生物体，以增强或活化该生物体的一脑神经表现，其中该沉香萃取物系利用一萃取方法从一沉香树脂萃取浓缩而得，该萃取方法系包含选自于由蒸馏法、超临界二氧化碳法、溶剂萃取法、冷压法、脂吸法、浸渍法和二氧化碳萃取法所组成的群组中之一。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，该脑神经表现系包含选自于由记忆力、专注力、方向感、认知能力、学习能力、语言能力、情绪平衡和运动能力所组成的群组中的至少一者。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，投予该沉香萃取物于该生物体的方式，进一步系将该沉香萃取物混合水与乳化剂以形成一待雾化精油，再雾化该待雾化精油使该生物体自其呼吸道吸收该沉香萃取物。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，增强该生物体的脑神经生长包含有增加该生物体的树突的数量以及增长该生物体的轴突的长度。
6.一种沉香萃取物在制备改善脑神经疾病的组合物中的应用。
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，系将一沉香萃取物投予一生物体，以改善该生物体罹患的一脑神经病症，其中该沉香萃取物系利用一萃取方法从一沉香树脂萃取浓缩而得，该萃取方法系包含选自于由蒸馏法、超临界二氧化碳法、溶剂萃取法、冷压法、脂吸法、浸渍法和二氧化碳萃取法所组成的群组中之一。
8.如权利要求6所述的应用，其特征在于，该脑神经病症系包含选自于由唐氏症、阿兹海默症、巴金森氏症、妥瑞症、癫痫症、失智症、神经退化性疾病、中枢神经系统疾病、感觉神经元疾病、皮质边缘系统疾病、脑神经损伤、脑神经退化、运动功能障碍、记忆力退化、神经元或胶细胞存活率下降、认知能力退化、学习能力退化、情绪相关病症和忧郁症所组成的群组中的至少一者。
9.如权利要求6所述的应用，其特征在于，投予该沉香萃取物于该生物体的方式，进一步系将该沉香萃取物混合水与乳化剂以形成一待雾化精油，再雾化该待雾化精油使该生物体自其呼吸道吸收该沉香萃取物。
10.一种沉香萃取物在制备预防脑神经疾病的组合物中的应用。
11.如权利要求10所述的应用，其特征在于，系将一沉香萃取物投予一生物体，以预防该生物体罹患一脑神经病症，其中该沉香萃取物系利用一萃取方法从一沉香树脂萃取浓缩而得，该萃取方法系包含选自于由蒸馏法、超临界二氧化碳法、溶剂萃取法、冷压法、脂吸法、浸渍法和二氧化碳萃取法所组成的群组中的一者。
12.如权利要求10所述的应用，其特征在于，该脑神经病症系包含选自于由唐氏症、阿兹海默症、巴金森氏症、妥瑞症、癫痫症、失智症、神经退化性疾病、中枢神经系统疾病、感觉神经元疾病、皮质边缘系统疾病、脑神经损伤、脑神经退化、运动功能障碍、记忆力退化、神经元或胶细胞存活率下降、认知能力退化、学习能力退化、情绪相关病症和忧郁症所组成的群组中的至少一者。
13.如权利要求10所述的应用，其特征在于，投予该沉香萃取物于该生物体的方式，进一步系将该沉香萃取物混合水与乳化剂以形成一待雾化精油，再雾化该待雾化精油使该生物体自其呼吸道吸收该沉香萃取物。
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