CN111607653B - 一种蛤蚧种苗质量评价方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种蛤蚧种苗质量评价方法，包括：获取待检测蛤蚧种苗的形态特征，并鉴定待检测蛤蚧种苗形态是否合格；分别提取形态合格的待检测蛤蚧种苗和正品蛤蚧的DNA，进行PCR扩增获得PCR产物并进行电泳检测对比，对PCR扩增条带进行测序然后和正品蛤蚧的序列进行比对，以此鉴定出质量合格的正品蛤蚧种苗。本发明通过体态特征对蛤蚧种苗进行鉴定，挑选符合规格的种苗，然后对种苗进行分子生物学鉴定，判断是否属于蛤蚧品种，有效的减少了分子生物学鉴定的数量，降低了检测成本。同时，分子生物学鉴定使用PCR扩增和检测技术进行鉴定，准确率高，检测速度快。再者，PCR扩增引物使用COI序列通用引物，设计和生产成本低。
Description
技术领域
本发明涉及动物药材养殖和鉴定技术领域，更具体地说，本发明涉及一种蛤蚧种苗质量评价方法。
背景技术
蛤蚧为壁虎科动物蛤蚧(Gekko gecko Linnaeus)的干燥全体。据《中国药典》记载，蛤蚧性味咸平，归肺、肾经。具有补肺益肾，纳气定喘，补肺益肾的功效。临床上主要用于肺肾不足，虚喘气促，劳嗽咳血，阳痿，遗精等。
常见以蛤蚧为主要原料的中成药有蛤蚧定喘丸，蛤蚧补肾丸，蛤蚧定喘胶囊等。随着人们对长期使用抗生素危害意识的提高，越来越多的人更倾向于使用疗效好，安全性高，无毒副作用的中成药用于预防和治疗疾病，导致对蛤蚧这一珍贵药材原料的需求量越来越大，而野生资源已然无法满足日益增长的需要，蛤蚧的人工养殖已然成为趋势。
由于野生资源的锐减，价格逐年攀升，市场上也出现了许多易混淆品，诸如多疣壁虎，无蹼壁虎，红螺疣螈，东方蝾螈，青海沙蜥，变色树蜥等，蛤蚧正品与其混淆品的形态特征差别细微，传统的鉴别方法很难鉴定。DNA条形码是一种可以在DNA分子水平上对药材的真伪进行鉴定的新技术，其采用一个或者一些短的、标准的DNA片段作为物种标记进行鉴定，不受个体形态、大小等特征和完整性的影响，COI基因在不同动物类群中均存在显著差异。能直接从基因水平上提取丰富的鉴别依据，可实现对中药材原动物、细胞、组织等材料来源进行准确快速的鉴定。
俗话说“药材好，药才好”。蛤蚧种苗是人工养殖是否成功的关键环节，种苗的质量关系到药材的质量及养殖户的经济效益。因此，亟需一种用于鉴定和评价蛤蚧种苗的方法用于指导蛤蚧养殖生产。通过对蛤蚧种苗的鉴定及评价，规范种苗的质量标准，筛选合格的种苗，对于指导蛤蚧人工养殖，保障蛤蚧药材质量具有重要的意义。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述缺陷，并提供至少后面将说明的优点。
本发明的另一个目的是提供一种操作简单的蛤蚧种苗质量评价方法。
本发明提供的方案具体如下：
一种蛤蚧种苗质量评价方法，包括：
获取待检测蛤蚧种苗的形态特征，并鉴定待检测蛤蚧种苗形态是否合格；
分别提取形态合格的待检测蛤蚧种苗和正品蛤蚧的DNA，进行PCR扩增获得PCR产物并进行电泳检测对比，对PCR扩增条带进行测序然后和正品蛤蚧的序列进行比对，如和Genbank中的灰斑蛤蚧COI序列进行比对，对比相似度，以此鉴定出质量合格的正品蛤蚧种苗；其中，PCR扩增引物为：
LCO1490：5′-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3′；
HCO2198：5′-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3′。
上述技术方案中，首先通过体态特征对蛤蚧种苗进行鉴定，挑选符合规格的种苗，然后对种苗进行分子生物学鉴定，判断是否属于蛤蚧品种，不但操作简单，且有效的减少了分子生物学鉴定的数量，降低了检测成本。
同时，分子生物学鉴定使用PCR扩增和检测技术进行鉴定，准确率高，检测速度快。
再者，PCR扩增引物使用COI序列通用引物：LCO1490，HCO2198，设计和生产成本低。
优选的是，所述的蛤蚧种苗质量评价方法中，所述形态特征包括：
个体完整度，头部，背部，口腔，体色，脚趾，尾巴，体重，眶间距，头长，体长，尾长，灰白色尾环数。
优选的是，所述的蛤蚧种苗质量评价方法中，所述个体完整度是指：蛤蚧种苗个体具有完整的器官且个体完整无损伤。
优选的是，所述的蛤蚧种苗质量评价方法中，合格的蛤蚧种苗具有以下形态特征：
个体完整度：具有完整的器官且个体完整无损伤；
头部：成三角形，吻端突圆，头背面覆盖细密粒鳞；
背部：体背部覆盖细密粒鳞，鳞片光滑；
口腔：舌尖呈红润色，上下颌排齿整洁，无破损或无白色脓状物附着；
体色：呈灰黑色或墨绿色，夹杂白色、灰黑色或褐色疣粒；
脚趾：四只脚趾膨大，蹼及吸盘无肿胀；
尾巴：尾鳞排列成环状，尾巴呈锥形，向尾端逐渐变细，尾部呈横行节段，尾椎有横生的软骨盘，尾肌束呈V型前后左右规则排列，易断裂；
个体体重≥21.00g；
眶间距≥12.00mm；
头长≥30.00mm；
体长≥71.00mm；
尾长≥83.00mm；
尾巴灰白色环状鳞有7环。
上述方案中，通过上述形态特征能够有效筛选鉴别出蛤蚧种苗的质量，便于进行筛选和评价。
优选的是，所述的蛤蚧种苗质量评价方法中，获取蛤蚧种苗的体重，眶间距，头长，体长和尾长时，蛤蚧种苗处于安静、无身体蜷曲，自然伸直状态。
优选的是，所述的蛤蚧种苗质量评价方法中，所述眶间距是指安静状态下蛤蚧两眼眶内侧的最短距离；
所述头长是指安静状态下蛤蚧吻突到头骨与第1颈椎连接处的距离；
所述体长是指安静状态下蛤蚧第1颈椎到第1荐椎与第13腰椎连接处的距离；
所述尾长是指安静状态下蛤蚧第1荐椎到尾端的距离。
优选的是，所述的蛤蚧种苗质量评价方法中，使用蛤蚧测量装置测量蛤蚧种苗的体重，眶间距，头长，体长和尾长；所述蛤蚧测量装置包括：
底座，其顶部设置有水平的支撑面；
称重模块，其设置在所述支撑面上；
支撑板，其水平设置在称重模块上并被称重模块支撑和感应；所述支撑板的顶面的中位线上设置有凸出部，沿所述凸出部设置有凹槽，所述凹槽沿凸出部的长度方向直线伸延；凸出部凸起的高度优选大于蛤蚧手足的长度，使得蛤蚧放在凸出部上测量时，手足无法接触支撑板而无法挣扎，进而保持安静。
头部夹持件，其下部配合至凹槽并能够沿凹槽滑动，所述头部夹持件包括第一支撑块、吻部适配壳、左定位件和右定位件，所述第一支撑块下端滑动配合至所述凹槽，所述吻部适配壳设置在第一支撑块后侧面上，该侧面与蛤蚧相对应，所述吻部适配壳与蛤蚧的吻部形状适配以套入吻部，所述左定位件和右定位件铰接在支撑块顶部以实现自由左右摆动，且所述左定位件和右定位件为伸缩结构，以使的左定位件和右定位件的前端能够分别调节伸延到蛤蚧的左眼眶和右眼眶的位置，所述左定位件和右定位件的前端还分别设置有测距模块以测量左定位件和右定位件的前端之间的距离；
颈部夹持件，其下部配合至凹槽并能够沿凹槽滑动，所述颈部夹持件包括第二支撑块和颈部夹持环，所述第二支撑块下端滑动配合至所述凹槽，所述颈部夹持环顶部设置有开口以适配到蛤蚧的颈部颈椎位置，且所述颈部夹持环为弹性环使得直径能够增大缩小以对蛤蚧的颈部弹性夹持；
体部夹持件，其下部配合至凹槽并能够沿凹槽滑动，所述体部夹持件包括第三支撑块和体部夹持环，所述第三支撑块下端滑动配合至所述凹槽，所述体部夹持环顶部设置有开口以适配到蛤蚧的体部荐椎位置，且所述夹持环为弹性环使得直径能够增大缩小以对蛤蚧的体部荐椎位置弹性夹持；
尾部夹持件，其下部配合至凹槽并能够沿凹槽滑动，所述尾部夹持件包括第四支撑块、左适配件和右适配件，所述第四支撑块下端滑动配合至所述凹槽，所述左适配件和右适配件分别铰接在第四支撑块的前端面并分别从两侧夹持蛤蚧尾部；
其中，第一支撑块、第二支撑块、第三支撑块和第四支撑块之间分别设置有测距模块以分别测量相互之间的距离；
测距模块可以是红外测距模块、激光测距模块或超声波测距模块。
称重模块和每个测距模块分别与控制模块连接，控制模块与显示模块连接，显示模块将重量、左定位件和右定位件的前端之间的距离、第一支撑块和第二支撑块之间的距离、第二支撑块和第三支撑块之间的距离、第三支撑块和第四支撑块之间的距离即时显示；
左定位件和右定位件的前端之间的距离即为眶间距、第一支撑块和第二支撑块之间的距离即为头长、第二支撑块和第三支撑块之间的距离即为体长、第三支撑块和第四支撑块之间的距离即为尾长。
使用时，调节各夹持件的间距以适配蛤蚧的各部位，然后将蛤蚧的吻部套入到头部夹持件，将蛤蚧的颈部卡入到颈部夹持件，将蛤蚧的体部荐椎位置卡入到体部夹持件，将蛤蚧尾部使用尾部夹持件夹持，其中蛤蚧的吻部刚好与第一支撑块接触，蛤蚧的尾端刚好与第四支撑块接触。
固定完成以后，显示模块上就可以直接显示出蛤蚧的重量、眶间距、头长、头体长、尾长。
传统技术使用分别电子天平、游标卡尺和卷尺测量蛤蚧的重量、眶间距、头长、头体长、尾长等数据，存在测量步骤多、测量效率低的问题，特别是在蛤蚧挣扎又不能伤害蛤蚧的情况下，测量更加麻烦。
本案设计了专门为蛤蚧准备的蛤蚧测量装置，用以提高测量的效率，该装置中头部夹持件、颈部夹持件、体部夹持件、尾部夹持件可以沿支撑板的凹槽移动以分别适配到蛤蚧中头部、颈部、体部和尾部的位置，一方面能够有效将蛤蚧固定便于测量，另一方面各夹持件之间的距离分别对应了各部位之间的距离，测量这些距离就能直接得出眶间距、头长、头体长、尾长数据，非常方便快捷，有效提高了测量效率，同时保证测量的准确性。
本发明至少包括以下有益效果：
本发明的方法操作简单，直观明了，一方面可以用于指导养殖户在引种过程中的注意事项，避免引种到蛤蚧混淆品，造成不必要的经济损失；另一方面规范合格种苗的规格，从源头上保障了出苗的质量，促进蛤蚧养殖业的健康可持续发展，对保护蛤蚧的野生资源种群数量起到积极作用。
本发明首先通过体态特征对蛤蚧种苗进行鉴定，挑选符合规格的种苗，然后对种苗进行分子生物学鉴定，判断是否属于蛤蚧品种，有效的减少了分子生物学鉴定的数量，降低了检测成本。同时，分子生物学鉴定使用PCR扩增和检测技术进行鉴定，准确率高，检测速度快。再者，PCR扩增引物使用COI序列通用引物：LCO1490，HCO2198，设计和生产成本低。
本发明设计了专门为蛤蚧准备的蛤蚧测量装置，用以提高测量的效率，该装置中头部夹持件、颈部夹持件、体部夹持件、尾部夹持件可以沿支撑板的凹槽移动以分别适配到蛤蚧中头部、颈部、体部和尾部的位置，一方面能够有效将蛤蚧固定便于测量，另一方面各夹持件之间的距离分别对应了各部位之间的距离，测量这些距离就能直接得出眶间距、头长、头体长、尾长数据，非常方便快捷，有效提高了测量效率，同时保证测量的准确性。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为实施例4中的电泳图；其中，M-分子量标准DL2000，G1，G2，G3为待测样本，G4，G5为正品灰斑蛤蚧；
图2为蛤蚧脊柱阶段分布图；
图3为蛤蚧与蛤蚧测量装置配合测量的结构示意图；
图4为本发明所述蛤蚧测量装置的横截面结构示意图；
图5为本发明所述蛤蚧测量装置侧面剖视图；
图6为本发明所述头部夹持件的结构示意图；
图7为本发明所述颈部夹持件的结构示意图；
图8为本发明实施例4中蛤蚧苗样品图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
需要说明的是，下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1
一种蛤蚧种苗质量评价方法，包括：
获取待检测蛤蚧种苗的形态特征，并鉴定待检测蛤蚧种苗形态是否合格；
分别提取形态合格的待检测蛤蚧种苗和正品蛤蚧的DNA，进行PCR扩增获得PCR产物并进行电泳检测对比，对PCR扩增条带进行测序比对，以此鉴定出质量合格的正品蛤蚧种苗；其中，PCR扩增引物为：
LCO1490：5′-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3′；
HCO2198：5′-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3′。
进一步，所述形态特征包括：
个体完整度，头部，背部，口腔，体色，脚趾，尾巴，体重，眶间距，头长，体长，尾长，灰白色尾环数。
所述个体完整度是指：蛤蚧种苗个体具有完整的器官且个体完整无损伤。
进一步，合格的蛤蚧种苗具有以下形态特征：
个体完整度：具有完整的器官且个体完整无损伤；
头部：成三角形，吻端突圆，头背面覆盖细密粒鳞；
背部：体背部覆盖细密粒鳞，鳞片光滑；
口腔：舌尖呈红润色，上下颌排齿整洁，无破损或无白色脓状物附着；
体色：呈灰黑色或墨绿色，夹杂白色、灰黑色或褐色疣粒；
脚趾：四只脚趾膨大，蹼及吸盘无肿胀；
尾巴：尾鳞排列成环状，尾巴呈锥形，向尾端逐渐变细，尾部呈横行节段，尾椎有横生的软骨盘，尾肌束呈V型前后左右规则排列，易断裂；
个体体重≥21.00g；
眶间距≥12.00mm；
头长≥30.00mm；
体长≥71.00mm；
尾长≥83.00mm；
尾巴灰白色环状鳞有7环。
进一步，获取蛤蚧种苗的体重，眶间距，头长，体长和尾长时，蛤蚧种苗处于安静、无身体蜷曲，自然伸直状态。
进一步，如图2所示，所述眶间距是指安静状态下蛤蚧两眼眶内侧的最短距离；
所述头长是指安静状态下蛤蚧吻突到头骨与第1颈椎连接处的距离；
所述体长是指安静状态下蛤蚧第1颈椎到第1荐椎与第13腰椎连接处的距离；
所述尾长是指安静状态下蛤蚧第1荐椎到尾端的距离。
实施例2
如图3～7所示，一种蛤蚧测量装置，包括：
具体如图4和5所示，底座16，其顶部设置有水平的支撑面；
称重模块15，其设置在所述支撑面上；
支撑板13，其水平设置在称重模块15上并被称重模块15支撑和感应；所述支撑板13的顶面的中位线上设置有凸出部14，沿所述凸出部14设置有凹槽17，所述凹槽17沿凸出部14的长度方向直线伸延；凸出部14凸起的高度优选大于蛤蚧7手足的长度，使得蛤蚧放在凸出部14上测量时，手足无法接触支撑板而无法挣扎，进而保持安静。凹槽17的宽度小于蛤蚧7的宽度，避免蛤蚧陷入凹槽17.
具体如图3和6所示，头部夹持件1，其下部配合至凹槽17并能够沿凹槽17滑动，所述头部夹持件1包括第一支撑块2、吻部适配壳3、左定位件5和右定位件4，所述第一支撑块2下端滑动配合至所述凹槽17，所述吻部适配壳3设置在第一支撑块2与蛤蚧7对应的后侧面上，所述吻部适配壳3与蛤蚧7的吻部形状适配以套入吻部，但是不能盖过蛤蚧的眼睛，所述左定位件5和右定位件4铰接在第一支撑块2顶部以实现自由左右摆动，且所述左定位件5和右定位件4为伸缩结构，以使的左定位件5和右定位件4的前端401能够分别调节伸延到蛤蚧7的左眼眶和右眼眶的位置，所述左定位件5和右定位件4的前端401还分别设置有测距模块以测量左定位件5和右定位件4的前端之间的距离。
具体如图3和7所示，颈部夹持件，其下部配合至凹槽17并能够沿凹槽17滑动，所述颈部夹持件包括第二支撑块6和颈部夹持环601，所述第二支撑块6下端滑动配合至所述凹槽17，所述颈部夹持环601顶部设置有开口以适配到蛤蚧7的颈部颈椎位置，且所述颈部夹持环601为弹性环使得直径能够增大缩小以对蛤蚧7的颈部弹性夹持。
体部夹持件8，其下部配合至凹槽17并能够沿凹槽17滑动，所述体部夹持件8包括第三支撑块和体部夹持环，所述第三支撑块下端滑动配合至所述凹槽17，所述体部夹持环8顶部设置有开口以适配到蛤蚧7的体部荐椎位置，且所述体部夹持环8为弹性环使得直径能够增大缩小以对蛤蚧7的体部荐椎位置弹性夹持；
尾部夹持件，其下部配合至凹槽17并能够沿凹槽17滑动，所述尾部夹持件包括第四支撑块11、左适配件10和右适配件9，所述第四支撑块11下端滑动配合至所述凹槽17，所述左适配件10和右适配件9分别铰接在第四支撑块11的前端面并分别从两侧夹持蛤蚧尾部。
其中，第一支撑块2、第二支撑块6、第三支撑块和第四支撑块11之间分别设置有测距模块以分别测量相互之间的距离。
测距模块可以是红外测距模块、激光测距模块或超声波测距模块。
称重模块15和每个测距模块分别与控制模块连接，控制模块与显示模块连接，显示模块将重量、左定位件5和右定位件4的前端之间的距离、第一支撑块2和第二支撑块6之间的距离、第二支撑块6和第三支撑块之间的距离、第三支撑块和第四支撑块11之间的距离即时显示；
左定位件5和右定位件4的前端之间的距离即为眶间距、第一支撑块2和第二支撑块6之间的距离即为头长、第二支撑块和第三支撑块之间的距离即为体长、第三支撑块和第四支撑块之间的距离即为尾长。
使用时，调节各夹持件的间距以适配蛤蚧的各部位，然后将蛤蚧的吻部套入到头部夹持件，将蛤蚧的颈部卡入到颈部夹持件，将蛤蚧的体部荐椎位置卡入到体部夹持件，将蛤蚧尾部使用尾部夹持件夹持，其中蛤蚧的吻部刚好与第一支撑块接触，蛤蚧的尾端刚好与第四支撑块接触。
固定完成以后，显示模块上就可以直接显示出蛤蚧的重量、眶间距、头长、头体长、尾长。
实施例3
一种蛤蚧种苗质量评价方法，利用实施例1中的方法步骤，结合实施例2的蛤蚧测量装置，测量蛤蚧种苗的体重，眶间距，头长，体长和尾长。
实施例4
蛤蚧及其混淆品的鉴定及种群质量评价
从广西崇左市蛤蚧养殖场随机采集20只1年龄的蛤蚧苗样品，编号1-20号，如图8所示，观察其形态特征及器官完整度，称量体重，测量蛤蚧苗的眶间距，头长，体长，尾长等指标，做好相关的记录。测量各个指标完成后，从20个样品中随机抽取3只蛤蚧苗样品，编号为：G1，G2，G3。从南宁市某养殖场采集2只正品灰斑蛤蚧(已鉴定为正品)，编号为：G4，G5。剪取蛤蚧一小块尾部肌肉约100mg，通过动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒进行DNA提取。
PCR扩增引物为COI序列通用引物：LCO1490，HCO2198。PCR产物电泳检测(如图1)，分析扩增条带并生物公司进行测序。根据Genbank中的灰斑蛤蚧COI序列与测序的序列进行相似度比对，5个样品的基因序列高度相似，最终鉴定为正品灰斑蛤蚧。
体态特征如下表1所示：
表1
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用。它完全可以被适用于各种适合本发明的领域。对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改。
Claims (1)
1.一种蛤蚧种苗质量评价方法，其特征在于，包括：
获取待检测蛤蚧种苗的形态特征，并鉴定待检测蛤蚧种苗形态是否合格；
分别提取形态合格的待检测蛤蚧种苗和正品蛤蚧的DNA，进行PCR扩增获得PCR产物并进行电泳检测对比，对PCR扩增条带进行测序比对，以此鉴定出质量合格的正品蛤蚧种苗；其中，PCR扩增引物为：
LCO1490：5´-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3´ ；
HCO2198：5´-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3´；
所述形态特征包括：个体完整度，头部，背部，口腔，体色，脚趾，尾巴，体重，眶间距，头长，体长，尾长，灰白色尾环数；
所述个体完整度是指：蛤蚧种苗个体具有完整的器官且个体完整无损伤；
合格的蛤蚧种苗具有以下形态特征：
个体完整度：具有完整的器官且个体完整无损伤；
头部：成三角形，吻端突圆，头背面覆盖细密粒鳞；
背部：体背部覆盖细密粒鳞，鳞片光滑；
口腔：舌尖呈红润色，上下颌排齿整洁，无破损或无白色脓状物附着；
体色：呈灰黑色或墨绿色，夹杂白色、灰黑色或褐色疣粒；
脚趾：四只脚趾膨大，蹼及吸盘无肿胀；
尾巴：尾鳞排列成环状，尾巴呈锥形，向尾端逐渐变细，尾部呈横行节段，尾椎有横生的软骨盘，尾肌束呈V型前后左右规则排列，易断裂；
个体体重≥21.00 g；
眶间距≥12.00mm；
头长≥30.00mm；
体长≥71.00mm；
尾长≥83.00 mm；
尾巴灰白色环状鳞有7环；
获取蛤蚧种苗的体重，眶间距，头长，体长和尾长时，蛤蚧种苗处于安静、无身体蜷曲，自然伸直状态；
所述眶间距是指安静状态下蛤蚧两眼眶内侧的最短距离；
所述头长是指安静状态下蛤蚧吻突到头骨与第1颈椎连接处的距离；
所述体长是指安静状态下蛤蚧第1颈椎到第1荐椎与第13腰椎连接处的距离；
所述尾长是指安静状态下蛤蚧第1荐椎到尾端的距离；
使用蛤蚧测量装置测量蛤蚧种苗的体重，眶间距，头长，体长和尾长；所述蛤蚧测量装置包括：
底座，其顶部设置有水平的支撑面；
称重模块，其设置在所述支撑面上；
支撑板，其水平设置在称重模块上并被称重模块支撑和感应；所述支撑板的顶面的中位线上设置有凸出部，沿所述凸出部设置有凹槽，所述凹槽沿凸出部的长度方向直线伸延；
头部夹持件，其下部配合至凹槽并能够沿凹槽滑动，所述头部夹持件包括第一支撑块、吻部适配壳、左定位件和右定位件，所述第一支撑块下端滑动配合至所述凹槽，所述吻部适配壳与蛤蚧的吻部形状适配以套入吻部，所述左定位件和右定位件铰接在支撑块顶部以实现自由左右摆动，且所述左定位件和右定位件为伸缩结构，以使的左定位件和右定位件的前端能够分别调节伸延到蛤蚧的左眼眶和右眼眶的位置，所述左定位件和右定位件的前端还分别设置有测距模块以测量左定位件和右定位件的前端之间的距离；
颈部夹持件，其下部配合至凹槽并能够沿凹槽滑动，所述颈部夹持件包括第二支撑块和颈部夹持环，所述第二支撑块下端滑动配合至所述凹槽，所述颈部夹持环顶部设置有开口以适配到蛤蚧的颈部颈椎位置，且所述颈部夹持环为弹性环使得直径能够增大缩小以对蛤蚧的颈部弹性夹持；
体部夹持件，其下部配合至凹槽并能够沿凹槽滑动，所述体部夹持件包括第三支撑块和体部夹持环，所述第三支撑块下端滑动配合至所述凹槽，所述体部夹持环顶部设置有开口以适配到蛤蚧的体部荐椎位置，且所述体部夹持环为弹性环使得直径能够增大缩小以对蛤蚧的体部荐椎位置弹性夹持；
尾部夹持件，其下部配合至凹槽并能够沿凹槽滑动，所述尾部夹持件包括第四支撑块、左适配件和右适配件，所述第四支撑块下端滑动配合至所述凹槽，所述左适配件和右适配件分别铰接在第四支撑块的前端面并分别从两侧夹持蛤蚧尾部；
其中，第一支撑块、第二支撑块、第三支撑块和第四支撑块之间分别设置有测距模块以分别测量相互之间的距离；
每个测距模块分别与控制模块连接，控制模块与显示模块连接，显示模块将左定位件和右定位件的前端之间的距离、第一支撑块和第二支撑块之间的距离、第二支撑块和第三支撑块之间的距离、第三支撑块和第四支撑块之间的距离即时显示；
左定位件和右定位件的前端之间的距离即为眶间距、第一支撑块和第二支撑块之间的距离即为头长、第二支撑块和第三支撑块之间的距离即为体长、第三支撑块和第四支撑块之间的距离即为尾长。
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| JP2010236903A (ja) * | 2009-03-30 | 2010-10-21 | Fujifilm Corp | 計測対象保持具 |
| CN102871768A (zh) * | 2012-09-25 | 2013-01-16 | 南京航空航天大学 | 大壁虎脊柱立体定位装置及方法 |
| CN105451603A (zh) * | 2013-06-28 | 2016-03-30 | 革新医疗器械有限公司 | 用于麻醉状态下的患者的定位装置和方法 |
| CN109875834A (zh) * | 2019-02-18 | 2019-06-14 | 解国强 | 一种脊柱复健设备及其控制方法 |
-
2020
- 2020-05-29 CN CN202010477914.2A patent/CN111607653B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010236903A (ja) * | 2009-03-30 | 2010-10-21 | Fujifilm Corp | 計測対象保持具 |
| CN102871768A (zh) * | 2012-09-25 | 2013-01-16 | 南京航空航天大学 | 大壁虎脊柱立体定位装置及方法 |
| CN105451603A (zh) * | 2013-06-28 | 2016-03-30 | 革新医疗器械有限公司 | 用于麻醉状态下的患者的定位装置和方法 |
| CN109875834A (zh) * | 2019-02-18 | 2019-06-14 | 解国强 | 一种脊柱复健设备及其控制方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 李力，李敏主编.《中药材养殖技术》.中国医药科技出版社,2007,第208-217页. * |
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