CN111601595A - 抗i型变态反应剂、和肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂、以及抗痴呆症剂、和短期记忆障碍改善/抑制剂 - Google Patents

Abstract

本发明在一个方案中提供一种含有对香豆酸作为有效成分的抗I型变态反应剂。此外，本发明在另一个方案中提供一种含有对香豆酸作为有效成分的抗痴呆症剂。

Description

抗I型变态反应剂、和肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制 剂、以及抗痴呆症剂、和短期记忆障碍改善/抑制剂

技术领域

本发明涉及抗I型变态反应剂、和肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂、以及抗痴呆症剂、和短期记忆障碍改善/抑制剂。

背景技术

变态反应(allergy)被定义为“基于免疫反应对生物体造成的全身障碍或局部障碍”。若对变态反应进行分类，则分为I型～IV型。其中，I、II、III型变态反应是血清更替所涉及的体液免疫(humoral immunity)，IV型变态反应是基于致敏淋巴细胞的细胞免疫(Cellular immunity)。

I型变态反应也被称为速发型变态反应、过敏型变态反应。作为I型变态反应的症状，可列举出花粉症、荨麻疹等，具有这些症状的人口较多，因此寻求有效的抗I型变态反应剂。例如，专利文献1中公开了一种通过肉碱衍生物和/或将前述肉碱衍生物与效果促进剂组合使用而具有抗变态反应效果的化妆品或皮肤外用剂。

另一方面，痴呆症是指：由于各种原因导致脑的细胞死亡或思维活动变差，由此发生各种障碍，在生活上出现不便的状态。随着痴呆症的发病，脑整体发生萎缩，由此存在还丧失身体机能的情况。

因而，近年来积极地进行了实现抑制痴呆症这一效果的成分的相关研究。例如，专利文献2中公开了蜂王浆显示出抗痴呆症活性。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2014-114289号公报

专利文献2：国际公开第2017/078175号

非专利文献

非专利文献1：日本药理学杂质，130(2)，pp112～116，2007年

发明内容

发明要解决的问题

本发明的一个目的在于，提供新型的抗I型变态反应剂、以及肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂。此外，本发明的其它目的在于，提供新型的抗痴呆症剂和短期记忆障碍改善/抑制剂。

用于解决问题的方案

本发明在一个方案中提供一种抗I型变态反应剂，其含有对香豆酸作为有效成分。

对香豆酸是分类为多元酚的羟基肉桂酸之一，抗氧化作用等的效果是已知的。本发明人等通过体外试验发现：含有对香豆酸的组合物具有抗I型变态反应作用。即，根据本发明的抗I型变态反应剂，能够抑制(治疗、缓和或预防)I型变态反应的症状。

本发明的抗I型变态反应剂可以基于肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制作用。

本发明的抗I型变态反应剂至少具有抑制肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒的作用。因此，根据本发明的抗I型变态反应剂，能够有效地抑制I型变态反应的症状。

本发明在其它方案中也可以提供一种肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂，其含有对香豆酸作为有效成分。

此外，本发明人等通过体内试验发现：对香豆酸具有改善/抑制由淀粉样蛋白β蛋白的蓄积引起的短期记忆障碍的作用。

即，本发明在其它方案中提供一种抗痴呆症剂，其含有对香豆酸作为有效成分。

本发明还提供一种短期记忆障碍改善/抑制剂，其含有对香豆酸作为有效成分。

发明的效果

根据本发明，可提供新型的抗I型变态反应剂、和肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂。此外，根据本发明，可提供新型的抗痴呆症剂、和短期记忆障碍改善/抑制剂。

附图说明

图1是表示实施例1～3、比较例1和阳性对照的脱颗粒率的图。

图2是表示Y形迷宫测试的评价结果的图。

具体实施方式

以下，针对本发明的实施方式进行说明。但是，本发明不限定于以下的实施方式。

一个实施方式所述的抗I型变态反应剂和一个实施方式所述的抗痴呆症剂分别含有对香豆酸作为有效成分。

对香豆酸是羟基肉桂酸的一种，可以以木质素分解产物或者从天然精油中分离出的物质、合成反应产物等的形式获得。成为木质素分解产物的原料的木质素可以源自禾本科植物，也可以使用来自甘蔗或蔗渣的木质素。对香豆酸可以使用市售品。

<抗I型变态反应剂>

本说明书中的抗I型变态反应剂是具备抑制I型变态反应症状的作用的组合物。抑制I型变态反应症状的作用可以是例如缓和、治疗或预防花粉症、荨麻疹、过敏性鼻炎、支气管哮喘等由I型变态反应导致的症状的作用。此外，抑制I型变态反应症状的作用可以是后述I型变态反应的机理中的、抑制肥大细胞或嗜碱性粒细胞脱颗粒的作用。即，本说明书中的抗I型变态反应剂可以是肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂。

I型变态反应的机理如下所示。

(1)若花粉、尘螨等抗原(变应原)侵入至生物体内，则辅助性T细胞(Th2细胞)发出指令，使B细胞分化成免疫球蛋白E(IgE)抗体产生细胞。

(2)由IgE抗体产生细胞产生对该抗原具有特异性的IgE抗体。

(3)通过IgE抗体与肥大细胞或嗜碱性粒细胞结合，其再与抗原结合而分泌(脱颗粒)出组胺、白三烯等化学传导物质，从而表现出变态反应症状。

本实施方式的抗I型变态反应剂具有如下作用(脱颗粒抑制作用)：在I型变态反应中抑制尤其是从肥大细胞或嗜碱性粒细胞向细胞外释放(脱颗粒)出包含组胺、白三烯等化学传导物质的颗粒。因此，根据本实施方式的抗I型变态反应剂，能够有效地抑制、治疗或预防由I型变态反应导致的症状。

抗I型变态反应剂是否具有脱颗粒抑制作用可通过下述方法来确认。例如，使用如大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞(RBL-2H3细胞)等那样地，通过使细胞表面所结合的IgE因抗原而发生交联从而将包含组胺等的粒细胞释放至细胞外的细胞。计算出：利用抗原刺激该细胞时，与未添加抗I型变态反应剂的检体相比，添加了抗I型变态反应剂的检体的脱颗粒被抑制到何种程度。

本实施方式所述的抗I型变态反应剂可以仅包含作为有效成分的对香豆酸，也可以进一步含有能够用于食品、准药物或药品的原材料。作为能够用于食品、准药物或药品的原材料，没有特别限定，可列举出例如氨基酸、蛋白质、碳水化合物、油脂、甜味剂、矿物质、维生素、香料、赋形剂、结合剂、润滑剂、崩解剂、乳化剂、表面活性剂、基剂、溶解辅助剂、悬浮剂等。

作为蛋白质，可列举出例如乳酪蛋白、乳清、大豆蛋白、小麦蛋白、蛋清等。作为碳水化合物，可列举出例如玉米淀粉、纤维素、α化淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉等。作为油脂，可列举出例如色拉油、玉米油、大豆油、红花油、橄榄油、棕榈油等。作为甜味剂，可列举出例如葡萄糖、蔗糖、果糖、葡萄糖果糖糖浆、果糖葡萄糖糖浆等糖类；木糖醇、赤藓醇、麦芽糖醇等糖醇；三氯蔗糖、阿斯巴甜代糖(aspartame)、糖精(sacchrin)、乙酰舒泛等人工甜味剂；甜菊等天然甜味剂等。作为矿物质，可列举出例如钙、钾、磷、钠、锰、铁、锌、镁等和它们的盐类。作为维生素，可列举出例如维生素E、维生素C、维生素A、维生素D、维生素B类、生物素、烟酸等。作为赋形剂，可列举出例如糊精、淀粉、乳糖、结晶纤维素等。作为结合剂，可列举出例如聚乙烯醇、明胶、羟丙甲基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙烯基吡咯烷酮等。作为润滑剂，可列举出例如硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石等。作为崩解剂，可列举出例如结晶纤维素、琼脂、明胶、碳酸钙、碳酸氢钠、糊精等。作为乳化剂或表面活性剂，可列举出例如蔗糖脂肪酸酯、柠檬酸盐、硬脂酰基乳酸盐、甘油脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、脱水山梨糖醇脂肪酸酯、丙二醇脂肪酸酯、卵磷脂等。作为基剂，可列举出例如倍半硬脂醇、羊毛脂、聚乙二醇等。作为溶解辅助剂，可列举出例如聚乙二醇、丙二醇、碳酸钠、柠檬酸钠等。作为悬浮剂，可列举出例如单硬脂酸甘油酯、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、甲基纤维素、羟甲基纤维素、藻酸钠等。它们可以单独使用1种，或者组合使用2种以上。

在抗I型变态反应剂配混其它原材料的情况下，作为有效成分的对香豆酸的含量根据后述抗I型变态反应剂的形态、使用目的等来适当设定即可，从更容易抑制脂肪细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒的观点出发，以抗I型变态反应剂总量作为基准，优选为50μg/g以上、更优选为70μg/g以上、进一步优选为100μg/g以上，此外，优选为1000μg/g以下、更优选为800μg/g以下、进一步优选为700μg/g以下。

抗I型变态反应剂可以用作食品、准药物或药品。食品可以以例如健康食品、特定保健食品、功能性食品、营养功能食品、营养辅助食品等的形态来提供。

抗I型变态反应剂可以是固体(粉末、颗粒等)、液体(溶液、悬浮液等)、糊剂等中的任意形状，可以是散剂、丸剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、锭剂、液体制剂、悬浮剂等中的任意剂型。

抗I型变态反应剂可以非口服给药，但优选口服给药。作为给药量，例如，优选以对香豆酸每1次达到20μg以上的方式进行给药，更优选以达到30μg以上的方式进行给药，进一步优选以达到40μg以上的方式进行给药。此外，优选以对香豆酸每1天达到60μg以上的方式进行给药，更优选以达到90μg以上的方式进行给药，进一步优选以达到120μg以上的方式进行给药。此外，优选以对香豆酸每1次达到150mg以下的方式进行给药，更优选以达到100mg以下的方式进行给药，进一步优选以达到80mg以下的方式进行给药。此外，优选以对香豆酸每1天达到450mg以下的方式进行给药，更优选以达到300mg以下的方式进行给药，进一步优选以达到200mg以下的方式进行给药。

本实施方式的抗I型变态反应剂具有上述作用，因此，可用于具有I型变态反应的症状的患者，此外，可用于希望将I型变态反应防范于未然的变态反应未发病者。

一个实施方式所述的肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂的具体方案可以与上述抗I型变态反应剂的方案相同。即，关于一个实施方式所述的肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂，在上述抗I型变态反应剂的相关说明中，可以将“抗I型变态反应剂”理解为“肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂”。

本发明的一个实施方式也可提供一种抑制I型变态反应的方法或者抑制肥大细胞或嗜碱性粒细胞脱颗粒的方法，其包括：将有效量的上述含有对香豆酸作为有效成分的抗I型变态反应剂、或者肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂对需要其的对象进行给药的步骤。此外，本发明的一个实施方式也可提供一种对香豆酸，其用于抑制I型变态反应的方法、或者抑制肥大细胞或嗜碱性粒细胞脱颗粒的方法。上述方法中的对象可以为哺乳动物，优选为人。抗I型变态反应剂、或者肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂的方案、给药方法、给药量等可以与上述相同。

本发明的一个实施方式也可提供一种用于制造抗I型变态反应剂、或者制造肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂的对香豆酸的用途。此外，本发明的一个实施方式也可提供一种对香豆酸的用于抑制I型变态反应、或者抑制肥大细胞或嗜碱性粒细胞脱颗粒的用途。抗I型变态反应剂、或者肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂的方案也可以与上述相同。

<抗痴呆症剂>

本发明的抗痴呆症剂具有抗痴呆症作用。本发明中的“抗痴呆症作用”是指：包括将痴呆症的发病防范于未然的作用、延迟痴呆症发病的作用、使已经发病的痴呆症从发病时的状态恢复的作用在内的概念。本发明的抗痴呆症剂的对象痴呆症可以为阿尔茨海默型痴呆症。阿尔茨海默型痴呆症存在如下病状：因前脑基底部的梅纳德氏基底核中的乙酰胆碱能神经细胞的脱落而引起的病状(胆碱假说)、以及因淀粉样蛋白β蛋白的蓄积而引起的病状(淀粉样蛋白假说)。两者分别显示不同的病状，并非从不同的角度观察相同的病状。本发明的抗痴呆症剂的对象痴呆症可以是基于任意假说的阿尔茨海默型痴呆症，优选为基于淀粉样蛋白假说的阿尔茨海默型痴呆症。本发明的抗痴呆症剂的对象痴呆症可以是由淀粉样蛋白β蛋白的蓄积引起的阿尔茨海默型痴呆症。换言之，本发明也可以提供阿尔茨海默型痴呆症的抗痴呆症剂、基于淀粉样蛋白假说的阿尔茨海默型痴呆症的抗痴呆症剂、或者由淀粉样蛋白β蛋白的蓄积引起的阿尔茨海默型痴呆症的抗痴呆症剂。

可以认为：在基于淀粉样蛋白假说的阿尔茨海默型痴呆症中，在淀粉样蛋白β蛋白的基础上，TAU蛋白质也在脑内蓄积，由此引发脑神经细胞的死亡，因此认知功能发生障碍。据称：在初期阶段，淀粉样蛋白β蛋白开始蓄积，经过约10年后，TAU蛋白质开始蓄积。其后，因淀粉样蛋白β蛋白和TAU蛋白质持续蓄积而使脑神经细胞死亡，自初始阶段起约25年后，痴呆症发病。本发明的抗痴呆症剂在另一侧面也具有抑制淀粉样蛋白β蛋白向脑内蓄积的作用、使脑内蓄积的淀粉样蛋白β蛋白降低的作用，此外，还可以具有抑制TAU蛋白质向脑内蓄积的作用、使脑内蓄积的TAU蛋白质降低的作用。

本发明也可以提供一种记忆障碍改善/抑制剂。本发明的记忆障碍改善/抑制剂具有改善和/或抑制记忆障碍的作用。本发明中的“记忆障碍的改善/抑制”是指：包括将记忆障碍的发病防范于未然的作用、延迟记忆障碍的发病的作用、使已经发病的记忆障碍从发病时的状态恢复的作用在内的概念。本发明的记忆障碍改善/抑制剂的作为对象的记忆障碍可以是长期记忆障碍，也可以是短期记忆障碍，优选为短期记忆障碍。即，本发明可以提供短期记忆障碍改善/抑制剂，进而，也可以提供由淀粉样蛋白β蛋白的蓄积引起的短期记忆障碍的改善/抑制剂。

本实施方式所述的抗痴呆症剂可以仅包含作为有效成分的对香豆酸，也可以进一步配混能够用于食品、准药物或药品的原材料。作为能够用于食品、准药物或药品的原材料，可以与上述抗I型变态反应剂中能够使用的原材料相同。

抗痴呆症剂可用作食品、准药物或药品。食品可以以例如健康食品、特定保健食品、功能性食品、营养功能食品、营养辅助食品等的形态来提供。

抗痴呆症剂也可用作饲料、饲料添加物。作为饲料，可列举出狗粮、猫粮等伴侣动物用饲料、家畜用饲料、家禽用饲料、养殖鱼贝类用饲料等。“饲料”包括全部出于营养的目的而使动物口服摄取的饲料。更具体而言，若从养分含量的方面进行分类，则包括全部粗饲料、浓缩饲料、无机物饲料、特殊饲料，此外，若从公共标准的方面进行分类，则包括全部配方饲料、混合饲料、单体饲料。此外，若从喂养方法的方面进行分类，则包括全部直接喂养的饲料、与其它饲料混合而进行喂养的饲料、或者添加至饮用水而用于补充营养成分的饲料。

抗痴呆症剂可以是固体(粉末、颗粒等)、液体(溶液、悬浮液等)、糊剂等任意形状，也可以是散剂、丸剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、锭剂、液体制剂、悬浮剂等任意剂型。

集中性地摄取含有抗痴呆症剂的上述制品时，作为上述制品的摄取量(每1天的摄取量或给药量)，优选以对香豆酸达到50mg/kg(体重)以上的方式进行摄取，更优选以达到100mg/kg(体重)以上的方式进行摄取，此外，优选以对香豆酸达到3000mg/kg(体重)以下的方式进行摄取，更优选以达到2000mg/kg(体重)以下的方式进行摄取。即，集中性地摄取含有抗痴呆症剂的上述制品时，作为上述制品的摄取量(每1天的摄取量或给药量)，以对香豆酸达到50～3000mg/kg(体重)、100～3000mg/kg(体重)、100～3000mg/kg(体重)或100～2000mg/kg(体重)的方式进行摄取。

日常性地长期摄取抗痴呆症剂时，作为上述制品的摄取量(每1天的摄取量或给药量)，优选以对香豆酸达到1mg/kg(体重)以上的方式进行摄取，此外，优选以对香豆酸达到500mg/kg(体重)以下的方式进行摄取。

本实施方式的抗痴呆症剂可以对淀粉样蛋白β蛋白发生了蓄积的人或动物使用。此外，本实施方式的抗痴呆症剂可以对患有痴呆症(或阿尔茨海默型痴呆症)的人或动物、患有记忆障碍(或短期记忆障碍)的人或动物使用，该痴呆症和记忆障碍可以起因于淀粉样蛋白β蛋白的蓄积。本实施方式的抗痴呆症剂对于痴呆症(或阿尔茨海默型痴呆症)未发病的人或动物、记忆障碍(或短期记忆障碍)未发病的人或动物而言，可以用于将痴呆症或记忆障碍的发病防范于未然，此外，也可以用于延迟痴呆症或记忆障碍的发病。

一个实施方式所述的短期记忆障碍改善/抑制剂的具体方案可以与上述抗痴呆症剂的方案相同。即，关于一个实施方式所述的短期记忆障碍改善/抑制剂，在上述抗痴呆症剂的相关说明中，可以将“抗痴呆症剂”理解为“短期记忆障碍改善/抑制剂”。

本发明的一个实施方式也可以提供一种改善/抑制痴呆症或短期记忆障碍的方法，其包括：将有效量的上述含有对香豆酸作为有效成分的抗痴呆症剂、或者短期记忆障碍改善/抑制剂对需要其的对象进行给药的步骤。此外，本发明的一个实施方式可提供一种对香豆酸，其用于改善/抑制痴呆症或短期记忆障碍的方法。上述方法中的对象可以为哺乳动物，优选为人。抗痴呆症剂或短期记忆障碍改善/抑制剂的方案、给药方法、给药量(摄取量)等可以与上述相同。

本发明的另一个实施方式也可提供一种用于制造抗痴呆症剂或短期记忆障碍改善/抑制剂的对香豆素的用途。此外，本发明的一个实施方式也可提供一种对香豆素的用于改善/抑制痴呆症或短期记忆障碍的用途。抗痴呆症剂或短期记忆障碍改善/抑制剂的方案可以与上述相同。

实施例

以下，通过实施例来说明本发明，但本发明不限定于这些实施例。

<试验1：作为抗I型变态反应剂的评价>

[试验液的制备]

使对香豆酸溶解于乙醇中，制备50mg/mL的试验液原液。将该试验液原液用下述表1所示的缓冲溶液进行稀释，分别制备检体浓度为1000、500和250μg/mL的试验液。

[RBL-2H3细胞脱颗粒抑制试验]

(试验操作)

将作为大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞的RBL-2H3细胞(国立研究开发法人医药基础·健康·营养研究所)接种至96孔板后培养一夜。添加具有表1所示的组成且进而包含抗DNP-IgE抗体的培养基，在37℃下使其反应2小时后，将细胞用缓冲溶液进行清洗。进而，以最终浓度分别达到500μg/mL(实施例1)、250μg/mL(实施例2)和125μg/mL(实施例3)的方式，添加所制备的1000、500和250μg/mL的试验液。其后，在37℃下使其反应10分钟后，添加DNP标记人血清白蛋白，在37℃下进一步使其反应3小时。此外，将未添加试验液而仅添加缓冲溶液的试验液作为未处置对照(比较例1)，将以最终浓度达到25nmol/L的方式添加有渥曼青霉素(和光纯药株式会社)的试验液作为阳性对照，同样地进行试验。此外，添加不含抗DNP-IgE抗体的培养基后，依次添加缓冲溶液和DNP标记人血清白蛋白，并同样使其反应而得的产物作为抗原未刺激对照。

将全部量的细胞上清液分取至空孔后，向细胞内添加细胞溶解缓冲液(Lysisbuffer)，在室温下静置10分钟而得到细胞溶解液。向细胞上清液和细胞溶解液中分别添加对硝基苯基-2-乙酰胺-2-脱氧基-β-D-呋喃糖苷溶液(以下称为底物溶液)，在37℃下使其反应25分钟后，添加甘氨酸缓冲液而使反应停止。此外，向细胞上清液和细胞溶解液中分别添加甘氨酸缓冲液，在37℃下使其反应25分钟后，再添加底物溶液而得的产物作为样品空白。

[表1]

[脱颗粒率的计算]

针对实施例1～3、比较例1、阳性对照、抗原未刺激对照和样品空白的各样品，使用酶标仪(Spectra Max M2e、Molecular Devices,LLC.)，测定因颗粒中存在的β-氨基己糖苷酶与底物的反应而生成的对硝基苯酚的吸光度(测定波长：405nm、对照波长：650nm)。

通过下式由各样品的吸光度相对于比较例1的吸光度求出释放率，进而由释放率算出脱颗粒率。需要说明的是，式中，“细胞上清液侧的吸光度”和“细胞溶液侧的吸光度”是减去样品空白而得的值。

释放率(％)＝细胞上清液侧的吸光度/(细胞上清液侧的吸光度+细胞溶液侧的吸光度)

脱颗粒率(％)＝{(试验液的释放率-抗原未刺激对照的释放率)/(未处置对照的释放率-抗原未刺激对照的释放率)的平均值}×100

将脱颗粒率的计算结果示于图1。关于脱颗粒率，比较例1为100±8.8，与此相对，阳性对照为39±6.4、实施例1为12±3.0、实施例2为46±8.0、实施例3为78±8.1。

<试验2：作为抗痴呆症剂的评价>

以下，针对对香豆酸的给药量的相关记载，例如，“100mg/kg”是指每1kg体重给药100mg。“淀粉样蛋白β蛋白”有时简称为“淀粉样蛋白β”。

[试验溶液的制备]

对香豆酸(trans-p-Coumaric Acid、东京化成工业株式会社)在供于试验为止在室温(管理温度：18.0～28.0℃)下保管。作为溶解对香豆酸的介质，准备了注射用水(大塚蒸馏水、大塚制药工厂株式会社)。称量所需量的对香豆酸，用注射用水溶解后，以达到规定浓度的方式进行稀释，将其作为试验溶液。

[淀粉样蛋白β溶液的制备]

淀粉样蛋白β溶液中使用的淀粉样蛋白β(Amyloid-βProtein(25-35、PolypeptideLaboratories)在供于试验为止在冷冻(管理温度：-30℃～-20℃)下保管。用注射用水以达到2mM的方式溶解淀粉样蛋白β，制备淀粉样蛋白β溶液。

[试验动物]

作为试验动物，使用了雄性Slc：ddY小鼠(SPF、Japan SLC,Inc.)。作为该小鼠，获得5周龄的小鼠。该小鼠是在行动药理试验中通常使用的动物种，其系统维持是明确的。获得1天后的小鼠的体重范围为23.8～30.0g。针对所获得的小鼠，设置了5天的预备饲养期间。

(饲养条件)

小鼠在管理温度维持至20.0～26.0℃、管理湿度维持至40.0～70.0％、明暗维持至各12小时(照明：上午6点～下午6点)、换气次数维持至12次/小时(经过滤器过滤的新鲜空气)的动物饲养室进行饲养。

自预备饲养期间中起至分组日为止，使用塑料制箱(W：310×D：360×H：175mm)，每1个箱子设为饲养10只为止的组，分组后，每1个箱子设为饲养5只为止的组。作为饲料，分别使其自由摄取固体饲料(MF、Oriental Yeast Co.,ltd.)，作为饮用水，分别使其自由摄取自来水。

[试验操作]

(组构成和给药液量)

通过随机抽取法，以各组的平均体重基本均一的方式在试验溶液的给药开始日进行分组。作为组构成，设为假手术组、介质对照组和对香豆酸给药组这三组。对香豆酸给药组中，作为给药液量，以对香豆酸的给药量达到每1只小鼠为100mg/kg的方式，以给药日的体重作为基准，利用10mL/kg来计算。假手术组和介质对照组中，给药了0.5％(w/v)甲基纤维素溶液10mL/kg。

(实验时间表)

将试验溶液的给药开始日设为给药第1天，针对试验溶液，1天给药1次，在给药第8天对小鼠注入淀粉样蛋白β溶液。其后，在给药第14天实施Y形迷宫测试。针对各步骤如后所述。

(试验溶液的给药途径和给药方法)

给药途径设为口服给药。作为给药方法，按照试验设施中使用的通常方法，使用安装有小鼠用一次性口服探针(有限会社FUCHIGAMI机械)的聚丙烯制一次性注射筒(TerumoCorporation)，口服给药试验溶液。在给药操作时，对每1只进行给药时，将试验溶液颠倒混合后抽吸至注射筒中。需要说明的是，在淀粉样蛋白β溶液注入日，在注入淀粉样蛋白β溶液后给药试验溶液，在Y形迷宫测试日，在测定的30分钟前给药试验溶液。

(淀粉样蛋白β的注入方法)

通过对小鼠腹腔给药40mg/kg(给药液量：10mL/kg)的戊巴比妥钠(东京化成工业株式会社)而将小鼠麻醉。麻醉后，对头皮皮下给药(0.1mL)盐酸左布比卡因(POPSCAINE(注册商标)0.25％注、丸石制药株式会社)。切开头皮而使头盖骨露出，使用齿科用钻头对前囟的侧部1mm(右侧)、后部0.2mm的头盖骨钻开不锈钢管刺入用的孔。将外径0.5mm的硅胶管和连接至微注射器的不锈钢管从骨表面垂直地刺入2.5mm的深度为止。对香豆酸给药组和介质对照组中，利用微注射泵用时3分钟向脑室内注入淀粉样蛋白β溶液3μL(6nmol/3μL)。另一方面，假手术组中，利用相同的方法注入注射用水3μL。注入后，在插入不锈钢管的状态下静置3分钟，缓慢地拔出不锈钢管。其后，将头盖孔用非吸收性骨髓止血剂(NESTOP(注册商标)、Alfresa Pharma Corporation)堵住，将头皮缝合。

(基于Y形迷宫测试的评价)

实施了作为学习/记忆行动的评价方法、尤其是作为短期记忆的评价方法而已知的Y形迷宫测试(例如非专利文献1)。试验使用了1根臂长为39.5cm、基板宽度为4.5cm、壁面高度为12cm且3个臂分别分支成120度的塑料制Y形型迷宫(有限会社UNICOM)。

在评价前，以装置的基板面的照度达到10～40勒克斯的方式进行调节。评价在给予试验溶液30分钟后实施。将小鼠放置在Y形迷宫的任意臂中，使其在迷宫内自由探索8分钟。记录小鼠在测定时间内移动的臂的顺序，计数其在臂中移动的次数，将其记作总进入数。接着，调查其中的连续选择3个不同的臂的组合，将其数量设为自主交替行为数。并且，使用下式算出自主交替行为率。

自主交替行为率(％)＝[自主交替行为数/(总进入数-2)]×100

针对各组的小鼠进行Y形迷宫测试，算出总进入数、自主交替行为数、自主交替行为率的平均值和标准误差。需要说明的是，明显差异的检验在假手术组与介质对照组、以及介质对照组与对香豆酸给药组这两组之间进行对比。两组间对比检验中进行基于F检验的同方差性检验，在同方差性的情况下进行Student的t检验，在异方差性的情况下进行Aspin-Welch检验。显著水平设为风险率1％。显著差异检验中使用了市售的统计程序(SAS系统、SAS Institute Japan公司)。将结果示于表2和图2。如表2和图2所示那样，针对自主交替行为率，与假手术组相比，介质对照组呈现低值，观察到显著差异(p<0.01)。此外，与介质对照组相比，对香豆酸给药组的自主交替行为率呈现高值，观察到显著差异(p<0.01)。

[表2]

	假手术组	介质对照组	对香豆酸给药组
				总进入数	34.2±1.6	36.4±2.0	34.2±2.1
自主交替行为数	23.1±1.1	18.6±1.0	21.3±1.5
				自主交替行为率(％)	72.3±2.8	54.6±2.0	66.0±1.4

Claims (5)

1.一种抗I型变态反应剂，其含有对香豆酸作为有效成分。

2.根据权利要求1所述的抗I型变态反应剂，其基于肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制作用。

3.一种肥大细胞或嗜碱性粒细胞的脱颗粒抑制剂，其含有对香豆酸作为有效成分。

4.一种抗痴呆症剂，其含有对香豆酸作为有效成分。

5.一种短期记忆障碍改善/抑制剂，其含有对香豆酸作为有效成分。

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