CN111557911B - 一种天赐霉素脂质体及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
一种天赐霉素脂质体及其制备方法和应用。本发明涉及一种天赐霉素以脂质体和cRGD肽修饰的靶向脂质体的方式进行药物递送以及其制备和应用。本发明可以克服天赐霉素的水溶性差的缺点,可以提高天赐霉素体内抗肿瘤效果、改善治疗恶性肿瘤的效果,同时cRGD肽修饰的靶向脂质体,靶向性好,抗肿瘤效果显著。本发明制备简单,经济成本低,为推进苯并蒽醌类烯二炔天赐霉素等应用于临床提供新途径,也为临床解决肿瘤耐药问题提供多样性解决方案,可广泛应用于新药开发及制药领域。
Description
技术领域
本发明涉及脂质体,具体涉及含有天赐霉素的脂质体及其制备方法,本发明还涉及含有天赐霉素的脂质体在体内抗肿瘤中的应用,属于生物医药领域。
背景技术
癌症是世界上最致命的人类疾病,全世界每年新增癌症病例超过1500万例。化疗是除手术、放疗、免疫治疗等外的主要癌症治疗方法。尽管这些治疗剂表现出了相对令人满意的结果,但它们也有许多缺点,包括药代动力学差、生物分布非特异性和靶向能力低。溶解性和特异性差被认为是治疗药物应用于癌症治疗的主要障碍。因此,迫切需要克服这些缺点,以提高治疗肿瘤的效率。将有毒化疗药物定向递送到癌细胞有望提高药物有效性并减少副作用。临床上迫切需要新的抗肿瘤物质,希望发现特异性较好,抗肿瘤活性强,有新作用机制以及对抗药性肿瘤有效的药物。
烯二炔天然产物具有抗肿瘤效果显著,成药率高等优点,目前临床使用的有聚苯乙烯马来酸共轭新制癌菌素(neocarzinotatin,NCS),在日本主要用于治疗肝癌。卡利奇霉素已作为抗体偶联药物药物Mylotarg和Besponsa的弹头,对抗肿瘤领域的靶向治疗产生了深远影响。它们的细胞毒性归因于(Z)-3-己烯-1,5-二炔(烯二炔)通过Bergman环化,产生细胞毒性的类苯并双基自由基进行环芳构化的能力。天赐霉素(Tiancimycin A,TNM A)是从链霉菌属Streptomyces sp.CB03234中新发现的10元环蒽醌融合二烯炔。TNM A对癌细胞具有出色的抗肿瘤活性,其作用机制与DNA损伤有关。TNM A结构与Uncialamycin和Dynemicin类似,TNM A结构如下式,但抗肿瘤活性相对更优越,与市场上天然药物auristatin和Maytanisine及其类似物相比,TNM A显示出快速而完整的对各种肿瘤细胞系的杀伤作用。
然而,虽然天赐霉素体外细胞毒性较强,但是其溶解度差,在生理盐水中的溶解度小于0.1mg/mL,这对他进行静脉给药具有一定的困难。同时,天赐霉素作为抗肿瘤化疗药物,在体内分布具有非特异性,会造成全身系统性毒性。天赐霉素因为毒性太大的问题,限制了它在临床的使用。因此通过药物递送的方式改善它的物理化学性质和毒性问题,将会有利于天赐霉素在抗肿瘤领域的应用。
用于癌症治疗的纳米药物的主要目标是选择性地靶向癌细胞,减少与健康组织的非特异性相互作用,并通过直接向恶性肿瘤细胞输送药物来提高治疗效率。纳米载体表面的靶向功能化是增加纳米药物向靶向组织区域的累积的途径之一。与传统的小分子药物相比,纳米颗粒具有更长的循环时间和血液中的稳定性,并通过主动和被动靶向增强细胞摄取。以脂质体为基础的纳米递送系统生产了市场上数量最多的抗癌药物。脂质体具有良好的生物相容性、低免疫原性和生物降解性,其水腔可以包裹亲水性有效载荷,并且脂质双层可以容纳疏水分子。
血管生成是肿瘤发展的主要特征之一,为肿瘤细胞的生长、侵袭和转移提供营养。整合素是血管生成的主要调节因子之一,特别是αvβ3整合素在血管生成和肿瘤进展过程中是新生血管内皮细胞表达最丰富的,但在正常内皮细胞中不存在。在RGD肽中,特别是cRGD肽对αvβ3整合素受体具有高度特异性,使其成为药物输送应用中理想的靶向配体。多肽的尺寸小,使得纳米颗粒表面的密度更高,因此对受体的亲和力也更高。目前正在进行临床III期抗胶质母细胞瘤和II期抗血管生成剂治疗其他几种肿瘤的研究。
基于肿瘤细胞在特定肿瘤微环境中过度表达的受体的类型和水平,各种靶向配体纳米药物被设计成具有优异的细胞选择性、细胞摄取或肿瘤穿透能力,在肿瘤靶向治疗中显示出巨大的优势。由配体导向的靶向递送,已被广泛研究作为治疗癌症的卓越平台。目前尚未见有对天赐霉素进行纳米纳米药物递送的研究,运用纳米技术对天赐霉素进行药物递送对发展新型抗肿瘤药物和解决肿瘤多药耐药问题提供一种新途径。
发明内容
本发明旨在提供一种包载天赐霉素的脂质体及其制备方法,及其在制备抗肿瘤靶向递药系统中的应用。
本发明目的之一是提供一种将脂质体载体应用于装载溶解度差的天赐霉素,制备得到天赐霉素脂质体。
本发明目的之二是提供一种靶向型天赐霉素脂质体及其制备方法,在保证抗肿瘤效果的同时,显著降低药物的毒副作用。
为了实现上述目的,本发明的方案如下:
一种天赐霉素脂质体,所述脂质体是以磷脂和胆固醇包载天赐霉素。
优选的,所述磷脂为天然磷脂、合成磷脂和聚乙二醇化的合成磷脂中的任一种或者其组合。
优选的,所述磷脂为天然磷脂、合成磷脂、聚乙二醇化的合成磷脂的组合。
优选的,所述天然磷脂为大豆磷脂;所述合成磷脂是氢化大豆磷脂。
优选的,所述聚乙二醇化的合成磷脂为RGD肽及其类似物修饰的聚乙二醇化的合成磷脂。
优选的,所述RGD肽为以精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)三肽序列为活性中心的线性多肽、环肽或者拟肽化合物。
在RGD肽中,特别是cRGD肽对αvβ3整合素受体具有高度特异性,使其成为药物输送应用中理想的靶向配体。多肽的尺寸小,使得纳米颗粒表面的密度更高,因此对受体的亲和力也更高。
优选的,所述RGD肽为以精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)三肽序列为活性中心环肽化合物。
作为优选,所述RGD环肽具体为DSPE-PEG2000-cRGD;RGD环肽可市售或自制,市售的厂商为西安瑞禧生物科技有限公司。
所述环状RGD多肽化学名如下:环(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-酪氨酸-赖氨酸),其化学结构如下:
优选的,所述聚乙二醇化的合成磷脂为二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-PEG2000)、RGD肽及其类似物修饰的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-PEG2K-cRGD)或二者组合。
优选的,所述脂质体的粒径为1~100nm。
一种制备所述的脂质体的方法,包括以下步骤:
S1、称取磷脂、胆固醇和天赐霉素,加入二氯甲烷溶解,除去有机溶剂,得到脂质薄膜;
S2、向脂质薄膜中加入PBS缓冲液,冰浴下超声处理,超滤离心,得天赐霉素脂质体。
作为优选,磷脂:胆固醇:天赐霉素的摩尔质量比为(55-65):(35-45):(0.5-1.0)。
作为优选,磷脂:胆固醇:天赐霉素的摩尔质量比为61:39:0.82。
进一步优选,大豆磷脂:氢化大豆磷脂:DSPE-PEG2000:胆固醇:天赐霉素的摩尔质量比为(35-45):(10-20):(1-10):(35-45):(0.5-1.0)。
进一步优选,大豆磷脂:氢化大豆磷脂:DSPE-PEG2000:胆固醇:天赐霉素的摩尔质量比为40:16:5:39:0.82。
作为优选,大豆磷脂:氢化大豆磷脂:DSPE-PEG2000:DSPE-PEG2K-cRGD:胆固醇:天赐霉素的摩尔质量比为(35-45):(10-20):(1-10):(1-5):(35-45):(0.5-1.0)。
作为优选,大豆磷脂:氢化大豆磷脂:DSPE-PEG2000:DSPE-PEG2K-cRGD:胆固醇:天赐霉素的摩尔质量比为40:16:5:2:39:0.82。
作为优选,步骤S2中超声处理的参数为:超声时间15min,超声3s,停3s,超声功率150W。
下面对本发明做进一步的解释:
在本发明中,以大豆磷脂、氢化大豆磷脂、胆固醇、DSPE-PEG2000、天赐霉素制备的脂质体称为天赐霉素脂质体,而以大豆磷脂、氢化大豆磷脂、胆固醇、DSPE-PEG2000、DSPE-PEG2K-cRGD、天赐霉素制备的脂质体称为靶向天赐霉素脂质体。靶向天赐霉素脂质体不仅可以改善天赐霉素溶解度差的缺点,可以提高天赐霉素的抗肿瘤效果,同时具有cRGD多肽作为靶头的主动靶向脂质体,在体内具有显著的靶向性,抗肿瘤效果与非靶向制剂具有显著差别。
本发明中,所述的包载药物包括但不限定于:天赐霉素及其衍生物(TNM B,TNMC)、洋浦霉素(Yangpumicin(YPM)A)及其衍生物(YPM F,YPM G)等任何一种苯并蒽醌类烯二炔药物。
本发明的脂质体可分散在可注射的溶媒介质中供静脉内施用。所述的可注射的溶媒介质例如0.9%氯化钠注射液、pH=7.4的PBS缓冲液。
本发明还提供了天赐霉素脂质体的体外释放度数据,实验表明,天赐霉素脂质体具有一定的缓释的作用。
本发明还提供了天赐霉素脂质体的体内毒性试验的数据,实验表明,天赐霉素脂质体可以改变药物在体内的分布,避免游离药物的全身系统性毒性。
本发明还提供了天赐霉素脂质体在体内对黑色素瘤的抗肿瘤效果,实验表明,天赐霉素脂质体表现出比游离药物更好的抗肿瘤效果,而cRGD修饰的靶向脂质体表现出比脂质体更显著的抗肿瘤效果,可作为有效的药物递送方式应用于肿瘤医药领域。
本发明的有益效果是:制备天赐霉素脂质体的材料价格低容易获得,制备方法简单,包封率高。新型天赐霉素脂质体可以改善天赐霉素溶解度差的缺点,可以提高天赐霉素的抗肿瘤效果。同时具有cRGD多肽作为靶头的主动靶向脂质体,在体内具有显著的靶向性,抗肿瘤效果与非靶向制剂具有显著差别。本发明能为天赐霉素抗肿瘤作用提供新途径,对推进天赐霉素的临床应用具有重要的意义。
附图说明
图1是本发明的天赐霉素及天赐霉素脂质体的体外释放度;
图2是本发明的天赐霉素脂质体的溶血率;
图3是游离的天赐霉素TNM A,天赐霉素脂质体Lip-TNM A和靶向天赐霉素脂质体cRGD-Lip-TNM A对KPL-4(A),MDA-MB-231(B和F),4T1(C和E),B16-F10(D)的体外细胞毒性;
图4是天赐霉素TNM A,天赐霉素脂质体Lip-TNMA对KPL-4细胞皮下荷瘤的BALB/c裸鼠的体内抗肿瘤活性;游离TNM A和Lip-TNM A的重量变化(A)和相对重量变化(B),游离TNM A和Lip-TNM A的肿瘤体积变化(C)和相对肿瘤体积变化(D),游离TNM A和Lip-TNM A的存活率(E),在第18天获得的肿瘤解剖图(F),游离TNM A和Lip-TNM A的肿瘤抑制率(G),游离TNM A和Lip-TNM A肿瘤重量(H);
图5是天赐霉素TNM A,天赐霉素脂质体Lip-TNMA和靶向天赐霉素脂质体cRGD-Lip-TNM A对B16-F10细胞皮下荷瘤的ICR小鼠的体内抗肿瘤活性;游离TNM A,Lip-TNM A和cRGD-Lip-TNM A的重量变化(A)和相对重量变化(B),游离TNM A,Lip-TNM A和cRGD-Lip-TNMA的肿瘤体积变化(C)和相对肿瘤体积变化(D),游离TNM A,Lip-TNM A和cRGD-Lip-TNMA的肿瘤重量(E),游离TNM A,Lip-TNM A和cRGD-Lip-TNM A的肿瘤抑制率(F),在第10天获得的肿瘤解剖图(G)。
具体实施方式
下面通过具体实施例,并结合附图,对本发明的技术方案作进一步的具体说明,仅作为本发明的解释,但绝不是对本发明的限制,本发明的保护内容不局限于以下实施例。本发明中,若非特指,所采用的原料和设备等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法,如无特别说明,均为本领域的常规方法。
实施例1
天赐霉素脂质体制备
称取大豆磷脂30mg、氢化大豆磷脂14mg、胆固醇15mg、DSPE-PEG2000 10mg、TNM A400μL(甲醇母液1mg/mL)溶于二氯甲烷5mL中,置于旋转蒸发烧瓶中,减压旋转蒸发均匀成膜。另取5mL PBS水溶液,置于已成膜的圆底烧瓶中,旋转将膜水化下来,冰水浴超声分散15min,超滤离心管(MW 3500)超滤离心(4000rpm)15min,得具乳光的脂质体溶液。测得天赐霉素脂质体粒径93nm,Zeta电位-4.5mV。
实施例2
靶向天赐霉素脂质体制备
称取称取大豆磷脂30mg、氢化大豆磷脂14mg、胆固醇15mg、DSPE-PEG2000 10mg、DSPE-PEG-cRGD 6mg、TNM A 400μL(甲醇母液1mg/mL)溶于二氯甲烷5mL中,置于旋转蒸发烧瓶中,减压旋转蒸发均匀成膜。另取5mL PBS水溶液,置于已成膜的圆底烧瓶中,旋转将膜水化下来,冰水浴超声分散15min,超滤离心管(MW 3500)超滤离心(4000rpm)15min,得具乳光的脂质体溶液。测得靶向天赐霉素脂质体粒径99nm,Zeta电位-5.1mV。
实施例3
天赐霉素脂质体的体外释放度测试
实验方法:分别剪小段透析袋(MW 3500),沸水中煮沸10min后捞出置于纯水溶液中浸泡,分别取天赐霉素溶液和天赐霉素脂质体溶液各1.0ml装入已经预处理透析袋中,两端扎紧,将透析袋置于20mL PBS缓冲溶液(0.5%SDS)于200r/min的37℃恒温摇床中震荡。在指定时间点各取样1ml,HPLC检测天赐霉素含量。每次取样后向透析液补液1ml。体外释放度实验结果如图1所示,结果表明:游离天赐霉素在前60h的累积释放量达到99%,天赐霉素脂质体(Lip-TNM A)在生理条件下(pH 7.4、37℃,0.5%SDS)在48小时内不显示突然释放,释放度少于45%。
实施例4
天赐霉素脂质体的溶血试验。
实验方法:取5mL新鲜的小鼠血液,摇匀,离心(3000rpm,5min),弃去上清液。沉淀的红细胞用等量的0.9%生理盐水重复洗涤3次,直到上清液无颜色。将获得的红细胞制成含0.9%生理盐水的8%(v/v)悬浮液。实验组分为实验组,阴性对照组和阳性对照组,分别为脂质体溶液,0.9%生理盐水和Triton X-100溶液。将150μL的细胞悬液与150μL的脂质体溶液混合,并置于37℃的培养箱中1h。将100μL的上清液加到到96孔板中,在570nm的波长下测量A值,计算溶血率。溶血试验结果如图2所示,结果表明:天赐霉素脂质体(Lip-TNM A)的溶血率小于1%,几乎不会产生溶血毒性。
实施例5
天赐霉素脂质体和靶向天赐霉素脂质体体外细胞毒性数据。
实验过程:测定使用CCK-8法测定游离TNM A,天赐霉素脂质体(Lip-TNMA)和靶向天赐霉素脂质体(cRGD-Lip-TNM A)对肿瘤细胞和正常细胞的抑制率。将MDA-MB-231细胞和NCM460细胞(5x103细胞/100μL)转移到含有RPMI-1640培养基并添加10%FBS的96孔板中。将KPL-4细胞,4T1和B16-F10细胞(3x103细胞/100μL)转移到含有DMEM培养基并添加10%FBS的96孔板中。使细胞静置过夜,并用不同浓度的游离TNM A,天赐霉素脂质体(Lip-TNMA)和靶向天赐霉素脂质体(cRGD-Lip-TNM A)(0.0001、0.01、0.1、0.5、1、5、50、100nM)处理8h,在5%CO2湿度培养箱中,在37℃下48h或72h。将培养基加入没有细胞的空白组,只有细胞的对照组。培养后,将110μL的含有10%CCK-8的培养基溶液加入到每个孔中。然后将细胞在37℃下连续孵育1h,并用酶标仪在450nm的波长下测量光密度(OD)。每组取3个复孔的平均值,绘制细胞生长抑制曲线,计算IC50值。细胞抑制率(%)=[(OD药物–OD空白)/(OD对照-OD空白)]×100%。
表1.TNM A,Lip-TNMA和cRGD-Lip-TNMA的体外抗肿瘤活性
结果表明:在Lip-TNM A表面修饰cRGD多肽可提高TNM A的靶向效率。在4T1细胞中,cRGD-Lip-TNM A表现出更明显的细胞毒性。与游离TNM A相比,Lip-TNM A毒性的减小可能归因于纳米粒的内吞作用需要更多的能量。
实施例6
天赐霉素脂质体体内抗乳腺癌活性评价
实验过程:向BALB/c裸鼠的右腋下皮下注射KPL-4细胞(在50μL PBS和50μLmatrigel中5×106个细胞)以建立皮下荷瘤模型。当每个BALB/c裸鼠模型的肿瘤体积达到约100mm3时,将它们随机分为8组(n=5):未处理的对照组(0.9%生理盐水),阳性对照组的Herceptin(10mg/kg),游离的TNM A(0.10mg/kg,0.05mg/kg),Lip-TNM A(0.05mg/kg,0.02mg/kg),每7天经尾静脉给药一次,共18天。
从给药时间开始每天测量肿瘤的长度(a)和宽度(b)。通过以下公式计算肿瘤体积V:V=1/2ab2。最后,在实验的最后一天,处死所有BALB/c裸鼠,剥离出实体肿瘤,称重并照相记录。分离心,肝,脾,肺,肾、收集血液,取材后观察脏器的大体情况,如表面色泽,硬度,弹性,表面有无变化,有无出血等,然后置于10%中性甲醛固定制备石蜡切片供组织学检查(HE染色、Masson染色),其余组织放入-80℃冷冻冰箱中保存备用。并将血液用于炎性分析。
结果表明:通过皮下KPL-4人乳腺肿瘤异种移植研究Lip-TNM A的抗肿瘤活性。注射剂量为0.05或0.02mg TNM A当量/千克。考虑到其较低的MTD,游离的TNM A的剂量为0.1mg/kg。结果表明,与0.10mg/kg的游离TNM A相比,以0.02mg TNM A当量/kg的Lip-TNMA诱导的肿瘤抑制作用明显更好(图4C和4D)。将Lip-TNM A剂量增加至0.05mg TNM A当量/kg,几乎完全抑制了肿瘤的进展。除0.05mg TNM A当量/千克组的Lip-TNM A外,其他治疗组均未观察到明显的体重减轻,这表明这些治疗方案具有良好的耐受性(图4A和4B)。对肿瘤抑制率(TIR)的进一步分析表明,以0.05mg TNM A当量/kg的剂量使用Lip-TNM A可获得97%的高肿瘤抑制率(图4G)。Lip-TNM A组的肿瘤阻滞最小,证实了Lip-TNM A诱导出最佳的抗肿瘤作用(图4F)。
实施例7
天赐霉素脂质体和靶向天赐霉素脂质体体内抗黑色素瘤活性评价
实验过程:向ICR小鼠的右腋下皮下注射B16-F10细胞(在100μL PBS中5×105细胞),以建立皮下荷瘤模型。当每个荷瘤ICR小鼠模型的肿瘤体积达到约100mm3时,将它们随机分为11组(n=6):未处理的对照组(0.9%生理盐水),阳性对照组的盐酸阿霉素(5mg/kg),游离TNM A(0.10mg/kg,0.05mg/kg,0.02mg/kg),Lip-TNM A(0.10mg/kg,0.05mg/kg,0.02mg/kg),cRGD-Lip-TNM A(0.10mg/kg,0.05mg/kg,0.02mg/kg),每4天一次通过尾静脉给药,共10天。
从给药时间开始每天测量肿瘤的长度(a)和宽度(b)。通过以下公式计算肿瘤体积V:V=1/2ab2。最后,在实验的最后一天,处死所有ICR小鼠,剥离出实体肿瘤,称重并照相记录。分离心,肝,脾,肺,肾、收集血液,取材后观察脏器的大体情况,如表面色泽,硬度,弹性,表面有无变化,有无出血等,然后置于10%中性甲醛固定制备石蜡切片供组织学检查(HE染色、Masson染色),其余组织放入-80℃冷冻冰箱中保存备用。并将血液用于炎性分析。
结果表明:通过皮下B16-F10黑色素瘤异种移植研究Lip-TNM A和cRGD-Lip-TNM A的抗肿瘤活性,注射剂量为0.05和0.02mg TNM A当量/千克。考虑到其较低的MTD,游离TNMA以0.10mg/kg的剂量给予。结果表明,0.02或0.05mg TNM A当量/千克时,Lip-TNMA和cRGD-Lip-TNMA诱导的肿瘤抑制作用明显优于0.02、0.05和0.10mg/kg的游离TNM A(图5C和5D)。将Lip-TNM A和cRGD-Lip-TNM A剂量增加至0.05mg TNM A当量/kg,几乎可以完全抑制肿瘤的进展。结果表明,所有治疗组均未观察到明显的体重减轻,这表明这些治疗方案具有良好的耐受性(图5A和5B)。在0.02mg TNM A当量/千克的剂量下,cRGD-Lip-TNM A的肿瘤重量显着低于Lip-TNM A或游离TNM A的肿瘤重量(图5E)。对肿瘤抑制率(TIR)的进一步分析表明,以0.02mg TNM A当量/kg的剂量使用cRGD-Lip-TNM A可获得93%的高肿瘤抑制率(图5F)。cRGD-Lip-TNM A组的肿瘤体积最小,证实cRGD-Lip-TNM A诱导了最佳的抗肿瘤作用(图5G)。靶向脂质体优于未靶向的脂质体,证实了靶向的作用更加明显。与非靶向药物相比,主动靶向方法可能导致血管中纳米药物的局部浓度更高,并增加非泄漏肿瘤组织中的保留时间。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例,凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (5)
1.一种天赐霉素脂质体,其特征在于,所述脂质体是以磷脂、胆固醇包载天赐霉素;
所述磷脂为天然磷脂、合成磷脂和聚乙二醇化的合成磷脂的组合;
所述天然磷脂为大豆磷脂;所述合成磷脂是氢化大豆磷脂;所述聚乙二醇化的合成磷脂为二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、RGD 肽修饰的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000二者的组合;所述RGD 肽为以精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽序列为活性中心的环肽化合物;
大豆磷脂 :氢化大豆磷脂 : DSPE-PEG2000 : DSPE-PEG2000-cRGD : 胆固醇 : 天赐霉素的摩尔质量比为(35-45) : (10-20) : (1-10): (1-5) :(35-45) :(0.5-1.0)。
2.根据权利要求1所述的脂质体,其特征在于,所述脂质体的粒径为1~100nm。
3.一种制备如权利要求 1或2所述的脂质体的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、称取磷脂、胆固醇和天赐霉素,加入二氯甲烷溶解,除去有机溶剂,得到脂质薄膜;
S2、向脂质薄膜中加入PBS缓冲液,冰浴下超声处理,超滤离心,得天赐霉素脂质体。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,磷脂 : 胆固醇: 天赐霉素的摩尔质
量比为(55-65) : (35-45) : (0.5-1.0)。
5.如权利要求1或2所述的脂质体在制备治疗癌症的纳米药物中的应用。
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