CN111548767A - 一种无醛花生蛋白基胶黏剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种无醛花生蛋白基胶黏剂及其制备方法,属于胶黏剂技术领域。该工艺采用的主要原料为花生蛋白原料、新型蛋白酶、液化助剂、防腐剂、耐水增强剂和缓冲溶液等,制备过程包括用超声波、新型蛋白酶和液化助剂对花生蛋白进行三重联合水解,并加入耐水增强剂进行改性等,所获得的是一种高固含量、高耐水、无醛生物质基花生蛋白胶黏剂。本发明的无醛花生蛋白基胶黏剂具有固含量高、胶合强度和耐水性能好等显著特点,尤其适合于工业上胶合板和颗粒板领域大规模应用。
Description
技术领域
本发明属于胶黏剂技术领域,主要涉及一种无醛花生蛋白基胶黏剂及其制备方法。具体地,主要涉及一种新型、高耐水性、无醛环保型花生蛋白基胶黏剂及其制备方法。
背景技术
中国林业局发布的《2017年中国林业发展报告》数据显示,2016年中国人造板总产量约3亿立方米,比上年增长4.7%。相应的,其人造板工业中甲醛系胶黏剂的消耗量为1611万吨,占木材工业用胶黏剂消耗量约88.4%。众所周知,“三醛胶”均含大量游离甲醛,存在生产及使用过程中污染环境、毒害人体的缺陷。同时随着全国各地对甲醛排放要求越来越严格,国民对环境质量的要求也在逐年增强。因此,环保型胶黏剂的应用越来越受到重视。
与合成高分子类胶黏剂相比,生物质基胶黏剂凭借其天然高分子材料特性,具有来源广泛、价格低廉、胶接性能好、无毒等特点,在工业胶黏剂上有广泛应用前景。但由于该类胶黏剂本身特性,其粘接性能有时还不能达到人造板材所需强度要求,同时其耐水性也不足,严重阻碍了其在木材工业领域中的应用。
目前,生物质基胶黏剂研究最多的是天然豆类蛋白基胶黏剂。豆类蛋白质分子属于球形分子,由于多肽链中的范德华力、氢键力以及憎水性反应,使得易于与蛋白质分子紧密结合。但由于其大部分疏水性侧基位于内部,而亲水性基团则暴露于外,因此,造成天然蛋白的粘接作用很差。只有通过改性,蛋白质分子才会解卷和展开。目前,国内外学者一般采用变性处理、酸碱降解、合成树脂共混、交联、纳米、和接枝改性等多种方法来改善大豆蛋白胶黏剂的性能。迄今各种改性方法均有一定的不足,或是使得胶黏剂的制造成本增加,或是改性过程相对复杂,或是虽能改善初黏性和耐水性,但是胶粘剂的流动性较差,涂覆性能需待改进等。
此外,溶解性也是蛋白质生理特性及其他加工特性的前提和基础,蛋白质的溶解性一般可表示为:蛋白质分散指数(protein dispersion index,PDI)和氮溶解指数(nitrogen dissolution index,NSI)。只有当蛋白质充分溶解时,其功能特性才能表现出来,因此提高蛋白的溶解性对于改善其功能特性具有实际意义。
与大豆相比,我国花生产量一直位居世界首位。而花生粕是花生榨油的副产品,其中含有丰富的蛋白质,比豆粕高10%~15%。因此,采用花生粕为原料制备生物质基胶黏剂能使蛋白资源得到更充分的利用。与大豆蛋白胶黏剂类似,花生蛋白基胶黏剂中起胶接作用的也是含大量活性基团的球蛋白,且花生蛋白中的球蛋白含量要远高于大豆,达70%~87%。因此,理论上花生蛋白基胶黏剂在耐水性和胶结强度方面应具有更好的表现。
然而,目前报道的花生蛋白基胶黏剂往往也还存在固含量较低(不超过15%)、粘结强度差、固化速度慢、成本较高、耐水性差等缺点,限制了植物蛋白基胶黏剂的进一步推广与应用。为此,有必要研发新的花生蛋白基胶黏剂。
发明内容
本发明提供了一种无醛花生蛋白基胶黏剂及其制备方法,开发了一种具有较高固含量、粘结能力强、耐水性超过国家II类板材标准的生物质基无醛木材胶黏剂的方法,克服了目前文献报道的花生蛋白基胶黏剂固含量低、耐水性差、含有少量甲醛等不足。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是:
一种无醛花生蛋白基胶黏剂,所述胶黏剂的原料按质量份数计包括:花生蛋白原料35~50份,蛋白酶0.5~5份,缓冲溶液40~55份,液化助剂1~3份,耐水增强剂1~10份;所述蛋白酶为角蛋白酶(keratinase)、丝氨酸蛋白酶、复合风味酶(Flavourzyme)、alcalase蛋白酶、Validase FP concentrate蛋白酶中的至少一种;所述蛋白酶作为花生蛋白原料的主要酶解改性剂,起到增强水解的作用,从而达到提高产品固含量的目的;所述液化助剂为十二烷基磺酸钠、十二烷基硫酸钠、亚硫酸氢钠、尿素、氢氧化钠中的至少一种。
一实施例中,所述花生蛋白原料为花生蛋白和/或花生粕。其中,花生粕是花生仁经压榨提炼油料后的产品,包括经过初次压榨剩余的一次粕,以及压榨过两次的二次粕等。花生蛋白是指通过醇洗法、水酶法、碱提法等从花生粕中提取得到的蛋白。
优选地,所述蛋白酶为角蛋白酶。蛋白酶能催化蛋白质和多肽水解,广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。角蛋白酶是一种底物非常广的蛋白酶,能够降解多种可溶性及不可溶性蛋白质,如胶原蛋白、纤维蛋白、牛乳清蛋白、血红蛋白、酪蛋白等,最特别的就是它能够降解天然的角蛋白,使其变成可溶的氨基酸和多肽,并且作用条件温和,相比于其他传统的蛋白酶有着明显优势。角蛋白酶能够将不容易降解的蛋白(如豆粕、花生粕等)废弃物充分利用。
优选地,所述液化助剂为质量比0.8~1.2:0.8~1.2的十二烷基硫酸钠和亚硫酸氢钠。
一实施例中,所述耐水增强剂为乙二醇二缩水甘油醚、丙三醇三缩水甘油醚、酸酐-聚乙烯亚胺体系(例如乙酸酐-聚乙烯亚胺)、环氧树脂(例如缩水甘油醚类环氧树脂)中的至少一种。
一实施例中,还包括防腐剂0.1~1份;所述防腐剂为苯甲酸或其盐类、山梨酸或其盐类、脱氢乙酸或其钠盐类、双乙酸钠、乳酸钠、生物食品防腐剂(例如乳酸链球菌素、ε—聚赖氨酸等)中的至少一种。
一实施例中,所述缓冲溶液为pH值为5~7的磷酸缓冲溶液,包括磷酸二氢钾、磷酸二氢钠。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案之二是:
一种无醛花生蛋白基胶黏剂的制备方法,将所述花生蛋白原料加入缓冲溶液,80~90℃溶解,降温到50~65℃后加入所述蛋白酶,酶解1~5h;在超声波功率280~320W、超声波频率25~110kHz、温度85~95℃下进行超声溶解5~15min,然后在85~95℃对蛋白酶进行灭活;降温到50~70℃,再加入液化助剂反应1~3h,反应结束后,冷却至室温,加入其余原料,即得。
花生蛋白基胶黏剂的高固含量主要通过花生蛋白原料经蛋白酶解、超声水解和液化助剂三者协同作用,达到提高产品固含量效果。
一实施例中,将花生蛋白原料粉碎过筛,选取目数为150~200目(优选为200目)作为原料使用;
一实施例中,所述超声波频率为26~30kHz、42~48kHz或95~105kHz。超声波是一种高于人类听觉阈值(>16kHz)的机械波。超声波在介质中传播时,能够使介质之间产生机械振动,从而产生空化效应。而空化过程所产生的瞬时强压和局部高温能对溶液中悬浮的粒子产生强烈的声化学效果。超声波具有剪切和能量双重属性,所产生的空化效应能打开蛋白质的高级结构,破坏蛋白质分子内键,活性亚基或肽被释放出来,因此花生蛋白的溶解性经超声波处理后可以得到显著增加。
一实施例中,所述的酶解方式为单酶水解、双酶水解、双酶分步水解、多酶水解等方式。
优选地,所述胶黏剂的原料按质量份数计包括:花生蛋白原料39~41份,角蛋白酶1~3份,缓冲溶液47~49份,液化助剂1.5~2.5份,耐水增强剂丙三醇三缩水甘油醚7~9份,防腐剂0.2~0.4份;所述液化助剂为质量比0.9~1.1:0.9~1.1的十二烷基硫酸钠和亚硫酸氢钠;所述制备方法包括:将所述花生蛋白原料加入缓冲溶液,84~86℃溶解,降温到58~62℃后加入角蛋白酶,酶解3~5h;在超声波功率295~305W、超声波频率95~105kHz、温度88~92℃下超声溶解8~12min,然后在88~92℃对蛋白酶进行灭活;降温到58~62℃,再加入液化助剂反应1.5~2.5h;反应结束后,冷却至室温,加入耐水增强剂和防腐剂,即得。
本发明的特点是:利用超声波具有剪切和能量双重属性,能较好打开蛋白质的高级结构,破坏蛋白质分子内键,使活性亚基或肽被释放出来,增加花生蛋白的溶解性;利用特定蛋白酶(单一或者多种混合)对花生蛋白原料(花生粕、花生蛋白)进行酶解反应,使相应的蛋白质进行水解,提高产品水溶性,从而达到提高固含量目的。特定蛋白酶反应条件温和,具有对底物广谱适用的特点,可以对原料中可溶性和不可溶性成分协同降解,也可以避免传统强碱或者强酸水解过程破坏花生蛋白的伸展结构,造成胶黏剂的胶接强度和耐水性变差等不足。同时利用液化助剂的协同水解作用进一步提高产品的流动性,通过加入耐水增强剂来提高产品的耐水性和胶结强度,最终制造出一种具有较强耐水性和高固含量的环保型花生蛋白基胶黏剂,满足应用需求。
本发明所涉及的设备、试剂、工艺、参数等,除有特别说明外,均为常规设备、试剂、工艺、参数等,不再作实施例。
本发明所列举的所有范围包括该范围内的所有点值。
本发明中,除有特别说明或在领域内有通用含义外,%均为质量百分比,比例均为质量比,份数均按质量份数计。
本发明中,所述“室温”即常规环境温度,可以为10~30℃。
本技术方案与背景技术相比,它具有如下优点:
1.由于采用特定蛋白酶对花生蛋白原料进行水解,凭借其底物广谱适用的特点,可以对可溶性和不可溶性的成分同步降解,使产品的溶解能力达到显著提高,也避免了采用碱为改性剂的传统法中蛋白质分子易被水解破坏、影响蛋白质胶黏剂的胶合强度和耐水性的不足,同时大大地提高了同黏度下产品对应的固含量。
2.角蛋白酶对比常见木瓜蛋白酶,在对花生蛋白原料降解上能更加充分,所得到的产品的黏度能更小,更有利于产品大批量施胶;同时最终产品的耐水性能也有一定提高。
3.采用超声波高温协同溶解,利用超声波所具有剪切和能量双重属性,其产生的空化效应能打开蛋白质的高级结构,破坏蛋白质分子内键,使活性亚基或肽被释放出来,提高产品在水里的溶解能力,降低产品的黏度。
4.采用超声水解、液化助剂与特定蛋白酶酶解三者结合进行协同水解方式,能较大程度地提高花生蛋白基胶黏剂的相同黏度下的产品固含量,同时也能较大提高产品耐水性能。
5.采用液化助剂,可改善产品的黏度和耐水性;采用新型的耐水增强剂:乙二醇二缩水甘油醚、丙三醇三缩水甘油醚、酸酐-聚乙烯亚胺体系等,可提高胶粘密度,改善胶合强度,同时使耐水性远远超过国家标准中对II类胶合板胶合强度的要求。
6.以花生蛋白为原料,不使用醛类物质,得到的胶黏剂不含游离甲醛等污染物,更为环保。
具体实施方式
下面通过实施例具体说明本发明的内容:
实施例1(无蛋白酶存在条件)
花生蛋白20份;磷酸缓冲溶液48份;液化助剂(十二烷基硫酸钠:亚硫酸氢钠=1:1)2份;耐水增强剂丙三醇三缩水甘油醚8份;防腐剂乳酸链球菌素0.3份。
上述原料按重量份数配比,将花生蛋白粉碎过筛,选取目数为150~200目(优选为200目)作为原料。将调节好pH值为6.5的磷酸缓冲溶液(磷酸二氢钾:磷酸二氢钠体系)加入到装有回流冷凝器、滴液漏斗和搅拌器的反应釜中,在保持搅拌速度200~500转/分下,向磷酸缓冲溶液中分批加入花生蛋白。移入超声波反应器(Xinyi-1D)中,先90℃下恒温降解1h,然后开动超声波,恒定参数(功率300W,超声波频率100kHz)下溶解10分钟,降温到60℃,加入液化助剂,恒温搅拌2h。反应结束后,冷却至室温,加入耐水增强剂和防腐剂,搅拌均匀,出料并静置后密封,即得成品。
实施例2(无液化助剂)
花生蛋白40份;角蛋白酶(Sfase-2)2份;磷酸缓冲溶液48份;耐水增强剂丙三醇三缩水甘油醚8份;防腐剂乳酸链球菌素0.3份。
上述原料按重量份数配比,将花生蛋白粉碎过筛,选取目数为150~200目(优选为200目)作为原料。将调节好pH值为6.5的磷酸缓冲溶液(磷酸二氢钾:磷酸二氢钠体系)加入到装有回流冷凝器、滴液漏斗和搅拌器的反应釜中,在保持搅拌速度200~500转/分下,向磷酸缓冲溶液中分批加入花生蛋白。控制温度85℃,搅拌均匀高温溶解1h。降温至60℃后加入角蛋白酶,控制酶解时间4h。待酶解完成后产品有一定流动性时,移入超声波反应器(Xinyi-1D)中,开动超声波,设置恒定参数(功率300W,超声波频率100kHz,90℃)下溶解10分钟并对蛋白酶进行灭活。然后降温至60℃,加入耐水增强剂和防腐剂,搅拌均匀,出料并静置后密封,即得成品。
实施例3(无耐水增强剂)
花生蛋白40份;角蛋白酶(Sfase-2)2份;磷酸缓冲溶液48份;液化助剂(十二烷基硫酸钠:亚硫酸氢钠=1:1)2份;防腐剂乳酸链球菌素0.3份。
上述原料按重量份数配比,将花生蛋白粉碎过筛,选取目数为150~200目(优选为200目)作为原料。将调节好pH值为6.5的磷酸缓冲溶液(磷酸二氢钾:磷酸二氢钠体系)加入到装有回流冷凝器、滴液漏斗和搅拌器的反应釜中。在保持搅拌速度200~500转/分下,向磷酸缓冲溶液中分批加入花生蛋白,控制温度85℃,搅拌均匀高温溶解1h。降温至60℃后加入角蛋白酶,控制酶解时间4h。待酶解完成后产品有一定流动性时,移入超声波反应器(Xinyi-1D)中,开动超声波,设置恒定参数(功率300W,超声波频率100kHz,90℃)下溶解10分钟并对蛋白酶进行灭活。然后降温至60℃,加入液化助剂,恒温搅拌2h。反应结束后,冷却至室温,加入防腐剂,搅拌均匀,出料并静置后密封,即得成品。
实施例4(无超声降解条件)
花生蛋白40份;角蛋白酶(Sfase-2)2份;磷酸缓冲溶液48份;液化助剂(十二烷基硫酸钠:亚硫酸氢钠=1:1)2份;耐水增强剂丙三醇三缩水甘油醚8份;防腐剂乳酸链球菌素0.3份。
上述原料按重量份数配比,将花生蛋白粉碎过筛,选取目数为150~200目(优选为200目)作为原料。将调节好pH值为6.5的磷酸缓冲溶液(磷酸二氢钾:磷酸二氢钠体系)加入到装有回流冷凝器、滴液漏斗和搅拌器的反应釜中。在保持搅拌速度200~500转/分下,向磷酸缓冲溶液中分批加入花生蛋白,控制温度85℃,搅拌均匀高温溶解1h。降温至60℃后加入角蛋白酶,控制酶解时间4h。待酶解完成后产品有一定流动性时,升高温度至90℃对蛋白酶进行灭活。然后降温至60℃,加入液化助剂,恒温搅拌2h。反应结束后,冷却至室温,加入耐水增强剂和防腐剂,搅拌均匀,出料并静置后密封,即得成品。
实施例5
花生蛋白40份;角蛋白酶(Sfase-2)2份;磷酸缓冲溶液48份;液化助剂(十二烷基硫酸钠:亚硫酸氢钠=1:1)2份;耐水增强剂丙三醇三缩水甘油醚8份;防腐剂乳酸链球菌素0.3份。
上述原料按重量份数配比,将花生蛋白粉碎过筛,选取目数为150~200目(优选为200目)作为原料。将调节好pH值为6.5的磷酸缓冲溶液(磷酸二氢钾:磷酸二氢钠体系)加入到装有回流冷凝器、滴液漏斗和搅拌器的反应釜中。在保持搅拌速度200~500转/分下,向磷酸缓冲溶液中分批加入花生蛋白,控制温度85℃,搅拌均匀高温溶解1h。降温至60℃后加入角蛋白酶,控制酶解时间4h。待酶解完成后产品有一定流动性时,移入超声波反应器(Xinyi-1D)中,开动超声波,设置恒定参数(功率300W,超声波频率100kHz,90℃)下溶解10分钟,然后在90℃对蛋白酶进行灭活。然后降温至60℃,加入液化助剂,恒温搅拌2h。反应结束后,冷却至室温,加入耐水增强剂和防腐剂,搅拌均匀,出料并静置后密封,即得成品。
对比例1
花生蛋白31份;木瓜蛋白酶2份;磷酸缓冲溶液48份;液化助剂(十二烷基硫酸钠:亚硫酸氢钠=1:1)2份;耐水增强剂丙三醇三缩水甘油醚8份;防腐剂乳酸链球菌素0.3份。
上述原料按重量份数配比,将花生蛋白粉碎过筛,选取目数为150~200目(优选为200目)作为原料。将调节好pH值为6.5的磷酸缓冲溶液(磷酸二氢钾:磷酸二氢钠体系)加入到装有回流冷凝器、滴液漏斗和搅拌器的反应釜中。在保持搅拌速度200~500转/分下,向磷酸缓冲溶液中分批加入花生蛋白,控制温度85℃,搅拌均匀高温溶解1h。降温至60℃后加入木瓜蛋白酶,控制酶解时间4h。待酶解完成后产品有一定流动性时,升温至95℃对蛋白酶进行灭活。然后降温至60℃,加入液化助剂,恒温搅拌2h。反应结束后,冷却至室温,加入耐水增强剂和防腐剂,搅拌均匀,出料并静置后密封,即得成品。
对比例2
花生蛋白10份;磷酸缓冲溶液90份;防腐剂0.3份。
上述原料按重量份数配比,将花生蛋白粉碎过筛,选取目数为150~200目(优选为200目)作为原料。将调节好pH值为6.5的磷酸缓冲溶液(磷酸二氢钾:磷酸二氢钠体系)加入到装有回流冷凝器、滴液漏斗和搅拌器的反应釜中。在保持搅拌速度200~500转/分下,向磷酸缓冲溶液中分批加入花生蛋白。控制温度为85℃,搅拌均匀,高温降解1h。然后降温至室温,搅拌均匀,出料即得成品。
以上实施例1~5,以及对比例1~2制得的花生蛋白基胶黏剂的相关性能均采用下面方式测试:
产品黏度测定:参照国家标准GB/T 2794-1995胶粘剂粘度的测定。
固含量测试:参照国家标准GB/T 2794-1995胶粘剂固含量的测定。
耐水性能测定,参照GB/T 9846.3-2004(胶合板第3部分:普通胶合板通用技术条件)中II类胶合板胶合强度进行测定。胶合强度的测定方法,参照GB/T 17657-1999。具体实施方法为:试件放在(63±3)℃的热水中浸泡3h,取出后在室温下冷却10min。然后按照拉伸剪切强度的测定方法进行测试。
实施例1~5与对比例1~2的花生蛋白基胶黏剂的黏度相关测试结果如下表1~3:
表1所制得花生蛋白基胶黏剂样品的黏度比较
表2所制得花生蛋白基胶黏剂样品的固含量比较(以能较好施胶为参考)
表3所制得花生蛋白基胶黏剂样品的耐水性能(湿强度)比较
根据以上表格中的实验结果可以看到,本发明所制得的新型高固含量耐水无醛花生蛋白基胶黏剂,与常见的木瓜蛋白酶水解的同类胶黏剂(对比例1)对比,无论是黏度,还是耐水性能都有很大提高;与常规方法制备的花生蛋白基胶黏剂(对比例2)和未添加蛋白酶的花生蛋白基胶黏剂(实施例1)相比,其同等黏度条件下对应的固含量有着非常明显提高,耐水性能跟黏度也得到非常大的改善,已超过了国家标准中对II类胶合板胶合强度的要求;从5组实施例分析,实施例5中超声、蛋白酶、液化助剂三者协同作用,相对应实施例1、2、4在产品的黏度,耐水性能上都能有比较大改善。
以上所述,仅为本发明较佳实施例而已,故不能依此限定本发明实施的范围,即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰,皆应仍属本发明涵盖的范围内。
Claims (10)
1.一种无醛花生蛋白基胶黏剂,其特征在于:所述胶黏剂的原料按质量份数计包括:花生蛋白原料35~50份,蛋白酶0.5~5份,缓冲溶液40~55份,液化助剂1~3份,耐水增强剂1~10份;所述蛋白酶为角蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、复合风味酶、alcalase蛋白酶、ValidaseFP concentrate蛋白酶中的至少一种;所述液化助剂为十二烷基磺酸钠、十二烷基硫酸钠、亚硫酸氢钠、尿素、氢氧化钠中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的无醛花生蛋白基胶黏剂,其特征在于:所述花生蛋白原料为花生蛋白和/或花生粕。
3.根据权利要求1所述的无醛花生蛋白基胶黏剂,其特征在于:所述蛋白酶为角蛋白酶。
4.根据权利要求1所述的无醛花生蛋白基胶黏剂,其特征在于:所述液化助剂为质量比0.8~1.2:0.8~1.2的十二烷基硫酸钠和亚硫酸氢钠。
5.根据权利要求1所述的无醛花生蛋白基胶黏剂,其特征在于:所述耐水增强剂为乙二醇二缩水甘油醚、丙三醇三缩水甘油醚、酸酐-聚乙烯亚胺体系、环氧树脂中的至少一种。
6.根据权利要求1所述的无醛花生蛋白基胶黏剂,其特征在于:还包括防腐剂0.1~1份;所述防腐剂为苯甲酸或其盐类、山梨酸或其盐类、脱氢乙酸或其钠盐类、双乙酸钠、乳酸钠、生物食品防腐剂中的至少一种。
7.一种权利要求1至6中任一项所述的无醛花生蛋白基胶黏剂的制备方法,其特征在于:将所述花生蛋白原料加入所述缓冲溶液中,80~90℃溶解,降温到50~65℃后加入所述蛋白酶,酶解1~5h;在超声波功率280~320W、超声波频率25~110kHz、温度85~95℃下进行超声溶解5~15min,然后在85~95℃对所述蛋白酶进行灭活;降温到50~70℃,再加入所述液化助剂反应1~3h,反应结束后,冷却至室温,加入其余原料,即得。
8.根据权利要求7所述的无醛花生蛋白基胶黏剂的制备方法,其特征在于:将所述花生蛋白原料粉碎过筛,选取目数为150~200目作为原料使用。
9.根据权利要求7所述的无醛花生蛋白基胶黏剂的制备方法,其特征在于:所述超声波频率为26~30kHz、42~48kHz或95~105kHz。
10.根据权利要求7所述的无醛花生蛋白基胶黏剂的制备方法,其特征在于:所述胶黏剂的原料按质量份数计包括:花生蛋白原料39~41份,角蛋白酶1~3份,缓冲溶液47~49份,液化助剂1.5~2.5份,耐水增强剂丙三醇三缩水甘油醚7~9份,防腐剂0.2~0.4份;所述液化助剂为质量比0.9~1.1:0.9~1.1的十二烷基硫酸钠和亚硫酸氢钠;所述制备方法包括:将所述花生蛋白原料加入所述缓冲溶液中,84~86℃溶解,降温到58~62℃后加入所述角蛋白酶,酶解3~5h;在超声波功率295~305W、超声波频率95~105kHz、温度88~92℃下超声溶解8~12min,然后在88~92℃对所述蛋白酶进行灭活;降温到58~62℃,再加入所述液化助剂反应1.5~2.5h;反应结束后,冷却至室温,加入所述耐水增强剂和所述防腐剂,即得。
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