CN111543638B - 一种具有辅助降血糖功效的海参多糖产品及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有辅助降血糖功效的海参多糖产品的制备方法，属于保健食品领域。本发明以蜂胶提取物、黑果枸杞全粉为复配成分开发的具有辅助降血糖保健功能的粉剂，原料质量比例为：海参多糖7‑15份、蜂胶提取物3‑8份、黑果枸杞2‑8份，其中功效成分涉及海参多糖、黄酮和花青素。通过上述原料之间的协同作用，使得制备得到的海参多糖产品具有显著降血糖活性，且，该食品制备工艺简单、适合工业化生产；原料以食材为主，安全性好，符合现代人的健康理念。

Description

一种具有辅助降血糖功效的海参多糖产品及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种具有辅助降血糖功效的海参多糖产品及其制备方法，属于保健食品领域。

背景技术

糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢性疾病，常见的症状包括多饮、多食、多尿、消瘦等。自2011年以来，中国已经取代印度称为全球糖尿病第一大国。现阶段，糖尿病在我国已经成为多发病和常见病，尤其在40岁以上的中、老年比例更高。糖尿病可分为Ⅰ型糖尿病(胰岛素依赖型糖尿病)、Ⅱ型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病)、妊娠糖尿病以及其他类型糖尿病。Ⅱ型糖尿病是由于胰岛素与受体无法结合或受阻而引起的，90％以上的糖尿病患者的发病机制是归属于这类的胰岛素抵抗。

海参营养丰富，自古以来就是营养佳品，具有“海中人参”的美誉。多糖是海参体壁的主要成分，目前在海参中发现的活性多糖主要有两种，海参硫酸软骨素和海参岩藻多糖。海参多糖具有多种药理学活性，包括抗肿瘤、免疫调节、抗凝血与抗血栓形成、降血脂等功能。蔡彬新(2009)从海地瓜(Acaudina Molpadioide)中提取粗多糖，并建立了高血脂动物模型，研究发现海地瓜多糖(400mg/kg bw.d)能显著抑制高糖脂膳食引起的高血脂症及动脉粥样硬化。田迎樱等(2015)研究了海地瓜盐藻聚糖硫酸酯(Am-FUC)对胰岛素抵抗小鼠肝糖原的影响，实验组小鼠给予(80mg/kg bw.d)Am-FUC，发现Am-FUC显著降低了小鼠空腹血糖及血清胰岛素水平，提高葡萄糖耐受性，促进肝脏中糖原的合成，能够显著改善胰岛素抵抗的作用。

蜂胶是蜜蜂用从植物的嫩芽及树干上采集的树脂并混入自身上颚腺分泌物和蜂蜡混合而成的一种具有芳香气味的胶状固体物。蜂胶的生物学、药理学及医疗功效主要与蜂胶中所含的黄酮成分有关。据文献报道，黄酮能够清除活性自由基，具有降血糖、降血压、降胆固醇等功能。杨明等(2014)研究了蜂胶总黄酮(TFP)对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的降血糖作用，发现TFP高(240mg/kg)、中(120mg/kg)剂量组能够显著降低大鼠体内细胞因子TNF-α和血清FFA水平，具有调节胰岛素水平、抑制胰岛素抵抗的作用。

作为我国西北地区特有的黑果枸杞，富含有天然花青素，是迄今为止发现花青素含量最高的天然野生植物。现代药理研究表明，黑果枸杞提取物具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗衰老等广泛的药理作用，且毒副作用少，药用、保健价值远远高于普通红枸杞，可开发生产食品(保健饮料、果酱等)、保健品、酿酒、食用黑色素等，开发利用前景广阔。

目前市场上的降血糖产品主要由口服降糖西药和胰岛素两大类。但长期服用西药容易产生耐药性，治疗效果会慢慢削弱，且会造成心、脑、肾等器官的损害。而胰岛素一类的药物，短期内疗效尚可，长久使用会加速胰岛功能的老化，损害胰岛组织，还有可能诱发多种并发症。所以需要研发一种对人体无毒副作用且又能够起到降血糖作用的产品。

发明内容

本发明的目的在于提供一种配比简单，组方搭配合理，具有辅助降血糖，增强人体抗氧化能力，同时又克服现有降血糖西药和胰岛素潜在的毒副作用的一种保健食品。本发明提供了一种具有辅助降血糖功效的海参多糖产品及其制备方法。

本发明所用原料海参多糖提取自海参，黑果枸杞属于药食同源，均属于食品范畴，对于人体无毒副作用，可在一定程度上减轻对西药和胰岛素的依赖。本发明产品形式是粉剂，可以保存较长时间，后期可灌装于胶囊中，应用于工业生产。

本发明的第一个目的在于提供一种具有降血糖功能的海参多糖产品，所述海参多糖产品的原料包括：海参多糖、蜂胶提取物、黑果枸杞全粉；

所述海参多糖产品中原料质量比例为：海参多糖7-15份、蜂胶提取物3-8份、黑果枸杞2-8份，其中蜂胶提取物中黄酮含量＞99％。

可选的，所述海参多糖产品中原料质量比例为，海参多糖∶蜂胶提取物∶黑果枸杞＝11∶5∶4。

可选的，所述海参多糖产品为将原料按比例均匀混合后的制成的胶囊形式。

可选的，所述方法包括：

将蜂胶提取物在冷冻条件下储存后粉碎并过筛；

将黑果枸杞粉碎并过筛；

将海参多糖粉、粉碎并过筛蜂胶提取物粉和黑果枸杞粉按比例混合，其中按质量计，将海参多糖粉7-15份、蜂胶提取物3-8份、黑果枸杞2-8份混合均匀，其中蜂胶提取物中黄酮含量＞99％。

可选的，所述将蜂胶提取物在冷冻条件下储存包括：将块状的蜂胶提取物在-18℃条件下冷冻2-8小时。

可选的，所述将蜂胶提取物在冷冻条件下储存后粉碎和将黑果枸杞粉碎，包括：采用间歇式操作进行粉碎。

可选的，所述间歇式操作粉碎一次间歇15～30s；使得操作温度不高于35度。

可选的，所述过筛为过50～80目筛。

可选的，所述过筛为过60目筛。

可选的，所述方法中，将海参多糖粉、粉碎并过筛蜂胶提取物粉和黑果枸杞粉按比例混合为按照海参多糖∶蜂胶提取物∶黑果枸杞＝11∶5∶4的比例进行混合。

本发明有益效果是：

本发明以蜂胶提取物、黑果枸杞全粉为复配成分开发的具有辅助降血糖保健功能的粉剂，原料质量比例为：海参多糖7-15份、蜂胶提取物3-8份、黑果枸杞2-8份，其中功效成分涉及海参多糖、黄酮和花青素。通过上述原料之间的协同作用，使得制备得到的海参多糖产品具有显著降血糖活性，且，该食品制备工艺简单、适合工业化生产；原料以食材为主，安全性好，符合现代人的健康理念。本发明所用原料海参多糖提取自海参，黑果枸杞属于药食同源，均属于食品范畴，对于人体无毒副作用。本发明产品形式是粉剂，可以保存较长时间，后期可灌装于胶囊中，应用于工业生产。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为实施例2中海参多糖产品各组分配伍后的DPPH清除率对比。

图2为动物实验中大鼠在饲喂过程中的体重变化。

图3为动物实验中大鼠在模型建立后第5天的空腹血糖值对比图。

图4为动物实验中大鼠在模型建立后第5天的糖耐量变化图。

图2-图4中：

*表示剂量组与糖尿病模型组有极显著差异(p<0.05)；

##表示糖尿病模型组与对照组存在显著性差异(p<0.01)；

**表示剂量组与糖尿病模型组有极显著差异(p<0.01)。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明实施方式作进一步地详细描述。

本发明提供一种具有降血糖功能的海参多糖产品，所述海参多糖产品的原料包括：海参多糖、蜂胶提取物、黑果枸杞全粉；各原料质量比例为：海参多糖7-15份、蜂胶提取物3-8份、黑果枸杞2-8份，其中蜂胶提取物中黄酮含量＞99％。

实施例1

本实施例提供一种具有降血糖功能的海参多糖产品：

所述食品的原料包括：海参多糖、蜂胶提取物、黑果枸杞全粉；各原料质量比例为：海参多糖11份、蜂胶提取物5份、黑果枸杞4份。

制备方法如下：

将块状的蜂胶提取物在-18℃条件下冷冻2-8小时，粉碎并过筛，得到60目的蜂胶提取物粉末；

将黑果枸杞颗粒粉碎并过筛，得到60目的黑果枸杞粉末；

将11重量份海参多糖提取物粉末、5重量蜂胶提取物粉末、4重量份黑果枸杞粉末充分混匀，得到海参多糖产品。

一、为验证上述实施例1提供的具有辅助降血糖功效的海参多糖产品的降血糖功效，特进行体外抗氧化实验。

研究表明，氧化应激与糖尿病及其并发症的发生和发展密切相关，应用抗氧化治疗可逆转氧化应激对组织的损伤，从而阻止或延缓糖尿病及其并发症的发生、发展。本发明用到海参多糖提取物、蜂胶提取物和黑枸杞粉末，均有较好的抗氧化效果，特别是蜂胶提取物，有着极强的抗氧化能力。故采用DPPH清除实验考察发明所用的三种原料配伍间的抗氧化能力。

具体过程如下：

1.实验试剂

1.1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、抗坏血酸、海参多糖提取物、蜂胶提取物、黑果枸杞。

2.实验方法

2.1配制0.2mM的DPPH无水乙醇溶液和溶于50％乙醇的一系列抗坏血酸溶液，浓度分别为：0.0125、0.0100、0.0075、0.0050、0.0025、0.00125mg/mL。

2.2取3mL浓度梯度的抗坏血酸溶液与等体积的DPPH溶液混合，避光反应30min后在517nm波长下测定紫外吸收，计算抗坏血酸的DPPH清除率。

2.3绘制抗坏血酸浓度与DPPH清除率的标准曲线。

2.4用三种原料按照实施例1中的配比配制成三者的混合溶液、两两配伍的混合溶液以及单一物质的溶液，按照2.2的方法测定不同浓度样品溶液的DPPH清除率后，得到当DPPH清除率达到80％时，各溶液中海参多糖提取物、蜂胶醇提物、黑果枸杞粉末的浓度。

3.实验结果

用不同浓度抗坏血酸得到的DPPH清除率标准曲线具有很好的线性相关性(R²＝0.999)，且实验测得的所有样品的DPPH清除率均在线性范围内。

实验结果如图1所示，从图1可以看到，达到相同的自由基清除效果，如果仅以海参多糖提取物作为原料，需要约3.28mg/ml；添加0.52mg/ml黑果枸杞粉后，海参多糖提取物浓度降为1.44mg/ml；添加0.15mg/ml蜂胶醇提物后，海参多糖提取物浓度降为0.33mg/ml；同时添加0.14mg/ml蜂胶醇提物和0.11mg/ml黑果枸杞粉后，海参多糖提取物浓度降为0.30mg/ml。

也即，以达到相同的自由基清除效果为标准，仅采用海参多糖提取物需要的海参多糖提取物浓度约为3.28mg/ml，而采用本申请设定三者比例的海参多糖产品，海参多糖提取物浓度降为0.30mg/ml，也即海参多糖提取物的用量降低约这对于生产企业来说，大大增加了生产成本。

因此，三种原料的合理配伍使海参多糖提取物的用量大大减少，节约了成本，它们各自对糖尿病症状缓解作用的组合也产生了更好的辅助降低血糖功效。

二、为进一步验证上述实施例1提供的具有辅助降血糖功效的海参多糖产品的降血糖功效，特进行动物实验。

根据CFDA于2012年发布的107号文件《关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健食品功能评价方法的通知》中的附件6《辅助降血糖功能评价方法》，评价本发明海参多糖产品辅助降血糖的功能。

1、受试样品：本发明实施例1制备的海参多糖产品。

2、实验动物：SPF级健康雄性SD大鼠，购于上海斯莱克实验动物责任有限公司。

3、试验方法

3.1、实验分组

68只健康雄性SD大鼠(150g±30g)进入动物房后以基础饲料适应性喂养一周，禁食4h，取尾血，测定空腹血糖和糖耐量作为该批次动物基础值。

之后根据体重将大鼠随机分成5组，分别是对照组(8只)、糖尿病模型组(12只)、样品低剂量组(12只)、高剂量组(12只)、海参低剂量组(12只)，海参高剂量组(12只)。

实验期间，对照组继续饲喂基础饲料，其他组饲喂高脂饲料。每周称量空腹体重一次并记录采食量，根据体重调整灌胃剂量。保健品低剂量组和高剂量组动物按体重每天经口灌胃受试样品，灌胃量相当于人体每天推荐摄入剂量的1倍和30倍，即0.03和1.00g/kgBW.；海参低剂量组和高剂量组动物按体重每天经口灌胃海参多糖样品。以保健品高剂量组为参照，海参低剂量组是其中的海参多糖添加量，海参高剂量组是当配方中所有其他物质均已海参多糖替代时的海参多糖灌胃量，即0.55和1.00g/kg BW.。

3.2模型建立

灌胃5周后，除对照组外其余组动物腹腔注射1％链脲菌素(STZ，溶于0.1M的柠檬酸缓冲液，pH4.4；注射剂量：55mg/kgBW)诱导Ⅱ型糖尿病，对照组同时注射缓冲液，观察大鼠饮食、饮水、排尿量，毛色变化。

3.3样本收集及指标检测

3.3.1空腹血糖及糖耐量

模型建立后第5天对各组动物禁食12h，测定空腹血糖即给葡萄糖前(0小时)血糖值，剂量组给予受试样品，模型对照组给予同体积溶剂，对照组不做处理，15－20分钟后各组经口给予葡萄糖2.5g/kg BW，测定给葡萄糖后各组0.5、1、2小时的血糖值。

3.3.2空腹胰岛素

造模后继续饲养一周，各组动物禁食12h，腹腔注射戊巴比妥钠麻醉并心脏取血，颈椎脱臼法处死。血液分离后得到血清，使用Insulin ELISA试剂盒测定其中的胰岛素含量。并通过公式计算得到胰岛素抵抗指数。

4.实验结果

各组在饲喂过程中的体重变化如图2所示，高脂日粮饲喂大鼠的平均体重均明显高于对照组，而在35天后，高脂日粮饲喂大鼠的体重均出现减轻现象，这是糖尿病的典型症状之一，而对照组的正常老鼠体重在饲喂过程中一直处于增长状态。

模型建立后第5天各组老鼠的空腹血糖和糖耐量如图3、4所示，糖尿病模型组及三个剂量组0.5h的血糖值均≥10mmol/L，且灌胃葡萄糖后各时间点血糖水平及糖耐量曲线下面积均显著高于对照组(P<0.05)，表明模型成功建立。与模型组相比，灌胃高剂量受试样品可显著降低空腹血糖水平，并且在灌胃葡萄糖2h后血糖值显著低于模型组，可以表明高剂量的保健品可以减轻大鼠的糖尿病症状，提高大鼠葡萄糖耐受能力(P<0.05)。海参剂量组出现1h血糖值显著下降，2h血糖值异常上升可能是因为在进行糖耐量测试前灌胃的海参多糖样品导致大鼠提前分泌胰岛素降低了血糖，而无法在灌胃葡萄糖时释放更多胰岛素进行血糖调控造成的。

各组在模型建立后第7天的空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数如表1所示，高剂量组可以显著促进胰岛素的分泌，并在一定程度上降低胰岛素抵抗指数，而海参剂量组的胰岛素分泌量相比于糖尿病模型组出现降低，并且个体间波动较大。总体上看，低剂量的保健品和低剂量的海参样品都显著降低了糖尿病大鼠的空腹胰岛素水平，而保健品高剂量组的糖尿病大鼠胰岛素水平显著提高，维持空腹血糖在一个较低值。

表1：大鼠在模型建立一周后的空腹胰岛素及胰岛素抵抗情况

注：数据表示为means±SD

#表示糖尿病模型组与对照组有极显著差异(p<0.05)

*表示剂量组与糖尿病模型组有极显著差异(p<0.05)

以上结果满足对于受试物辅助降血糖功能的效果评价标准，可以判定受试样品的辅助降血糖结果为阳性，即说明本发明提供的具有降血糖功能的海参多糖产品对应降血糖具有显著效果。

实施例2

本实施例提供一种具有降血糖功能的海参多糖产品，与实施例1相比，本实施例仅各原料质量比例略微不同，具体各原料质量比例为：海参多糖9、蜂胶提取物4份、黑果枸杞7份。

制备方法同实施例1。

实施例3

本实施例提供一种具有降血糖功能的海参多糖产品，与实施例1相比，本实施例仅各原料质量比例略微不同，具体各原料质量比例为：海参多糖15份、蜂胶提取物3份、黑果枸杞2份。

制备方法同实施例1。

实施例1～3所给出的各原料质量比例下DPPH清除率的结果如下表2所示：

表2

对照例1

本对照例提供一种具有降血糖功能的海参多糖产品，与实施例1相比，本实施例可以达到相同的DPPH清除率，但各原料质量比例为：海参多糖5份、蜂胶提取物5份、黑果枸杞12份。

制备方法同实施例1。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种具有降血糖功能的海参多糖产品，其特征在于，所述海参多糖产品的原料由海参多糖、蜂胶提取物、黑果枸杞全粉组成；

所述海参多糖产品中原料质量比例为：海参多糖11份、蜂胶提取物5份、黑果枸杞全粉4份，其中蜂胶提取物中黄酮含量＞99％。

2.根据权利要求1所述的海参多糖产品，其特征在于，所述海参多糖产品为将原料按比例均匀混合后制成的胶囊形式。

3.一种具有降血糖功能的海参多糖产品的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

将蜂胶提取物在冷冻条件下储存后粉碎并过筛；

将黑果枸杞粉碎并过筛；

将海参多糖粉、粉碎并过筛的蜂胶提取物粉和黑果枸杞粉按比例混合，其中按质量计，将海参多糖粉11份、蜂胶提取物粉5份、黑果枸杞粉4份混合均匀，其中蜂胶提取物中黄酮含量＞99％。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述将蜂胶提取物在冷冻条件下储存包括：将块状的蜂胶提取物在-18℃条件下冷冻2-8小时。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述将蜂胶提取物在冷冻条件下储存后粉碎和将黑果枸杞粉碎，包括：采用间歇式操作进行粉碎。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述间歇式操作粉碎一次间歇15～30s，使得操作温度不高于35度。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述过筛为过50～80目筛。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述过筛为过60目筛。