CN111521831A - N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其制备方法 - Google Patents

N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111521831A
CN111521831A CN202010420041.1A CN202010420041A CN111521831A CN 111521831 A CN111521831 A CN 111521831A CN 202010420041 A CN202010420041 A CN 202010420041A CN 111521831 A CN111521831 A CN 111521831A
Authority
CN
China
Prior art keywords
natriuretic peptide
liquid
probe
brain natriuretic
object placing
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010420041.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111521831B (zh
Inventor
李哉珉
李登红
梁健嘉
庄子槟
金永敏
崔义烈
王洪涛
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Boditech Guangxi Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Boditech Guangxi Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boditech Guangxi Biotechnology Co ltd filed Critical Boditech Guangxi Biotechnology Co ltd
Priority to CN202010420041.1A priority Critical patent/CN111521831B/zh
Publication of CN111521831A publication Critical patent/CN111521831A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111521831B publication Critical patent/CN111521831B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/582—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with fluorescent label
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/575—Hormones
    • G01N2333/58—Atrial natriuretic factor complex; Atriopeptin; Atrial natriuretic peptide [ANP]; Brain natriuretic peptide [BNP, proBNP]; Cardionatrin; Cardiodilatin
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明公开了一种N‑端脑利钠肽前体检测试剂盒，包括：反应缓冲液；至少一份探测物；至少一个试剂条；盒体，其内部分隔为第一置物仓和第二置物仓；第一置物单元，其设于第一置物仓上方且下方滑动连接有抽屉；第二置物单元，其设于第二置物仓内；第三置物单元，其滑动设于第二置物单元上；其中，装有反应缓冲液的试剂瓶、装有探测物的离心管、试剂条分别置于第一置物单元、第二置物单元、第三置物单元内；还公开了一种N‑端脑利钠肽前体检测试剂盒的制备方法，包括：制作试剂条，配制反应缓冲液，制备固体探测物。本发明提高了N‑端脑利钠肽前体检测的精密度和灵敏度，改善了检测试剂产品的稳定性，且便于保存和运输。

Description

N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物技术领域。更具体地说，本发明涉及一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其制备方法。
背景技术
目前市面上常见的检测N-端脑利钠肽前体(NT-proBNP)的方法是荧光免疫法，均基于带结合垫的试剂条进行检测，因这种方法直接将与抗原结合的荧光标记的NT-proBNP抗体络合物和质控络合物包被在试剂条的结合垫上，当样本流经结合垫时，样本中的抗原与包被的荧光标记的NT-proBNP抗体络合物和质控络合物反应时间短，可能反应不完全，导致精密度较差。另外，现有试剂盒的盒体相对简单，无法为试剂提供适宜的存储环境，不利于试剂盒的存储和运输。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其制备方法，提高了N-端脑利钠肽前体检测的精密度和灵敏度，改善了检测试剂产品的稳定性，试剂盒为试剂提供了适宜的存储环境，有利于保存和运输。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，包括：
反应缓冲液，其装于至少一个试剂瓶中；
至少一份探测物，至少一份探测物按份数装于离心管中，每份探测物包括固体第一探测物和固体第二探测物，所述第一探测物内含有生物素标记的NT-proBNP抗体络合物和荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物，所述第二探测物内含有荧光标记的NT-proBNP抗体络合物；
至少一个试剂条，其包括垫卡、铺设于所述垫卡上的硝酸纤维素膜、依次间隔设于所述硝酸纤维素膜上的样品垫、质控线、第一检测线、第二检测线以及吸收垫；
盒体，其上可拆卸连接有盒盖，所述盒体内竖直设置有第一隔板以将所述盒体分隔成第一置物仓和第二置物仓，所述第一置物仓的内侧壁覆设有保温层，所述第一置物仓内横向设置有第二隔板，所述第一置物仓位于所述第二隔板下方滑动连接有抽屉；
第一置物单元，其设于所述第一置物仓位于所述第二隔板的上方，所述第一置物单元包括周向于所述第一置物仓内侧壁固接的上筒部、所述上筒部底面间隔向下延伸一体成型设置的多个下筒部，其中，所述第一置物单元内设置第一置物块，所述第一置物块顶面向下凹陷多个第一置物孔，多个第一置物孔与多个下筒部一一对应且相通，所述第一置物孔的直径不大于所述下筒部的直径，一个试剂瓶置于一个第一置物孔内且下端位于所述下筒部内，所述试剂瓶的直径等于所述第一置物孔的直径；
第二置物单元，其设于所述第二置物仓内，所述第二置物单元顶面向下凹陷多个与所述离心管相适配的第二置物孔，其中，一个离心管置于一个第二置物孔内；
第三置物单元，其滑动设于所述第二置物仓内且位于所述第二置物单元上方，所述第三置物单元的下端面设有围板形成一侧面开口的容纳腔，所述容纳腔内设有横板且通过多个弹簧与所述第三置物单元的下端面连接，所述围板与所述横板之间放置干燥板，所述围板上间隔设有多个通孔，所述第三置物单元内设置第二置物块，所述第二置物块上设置多个与所述试剂条相适配的水平的置物槽，其中，一个试剂条置于一个置物槽内。
优选的是，所述反应缓冲液的pH为7.4，组分为：10mM PBS、100-600mM NaCl、0.01-0.5％NaN3、0.1-3％Tween 20、0.01-0.5％IGEPAL CA-630、0.5-3％BSA，其中，每个试剂瓶中所述反应缓冲液体积不小于150μL。
优选的是，所述第一探测物是由pH为7.4的第一液体冷冻干燥制得，所述第一液体的组分为：10mM PBS、0.05-10％BSA、0.05-5％Sucrose、0.1-15μg/mL生物素标记的NT-proBNP抗体络合物、0.1-15μg/mL荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物；
所述第二探测物是由pH为7.4的第二液体冷冻干燥制得，所述第二液体的组分为：10mM PBS、0.05-10％BSA、0.05-5％Sucrose、5-50μg/mL荧光标记的NT-proBNP抗体络合物。
优选的是，所述质控线、所述第一检测线、所述第二检测线依次间隔距离为2-3mm。
优选的是，所述第一探测物和所述第二探测物为球状、粉末状中的一种。
优选的是，所述第二隔板上间隔设有多个微孔且下端覆盖防水透气膜。
优选的是，所述第一置物块、所述第二置物单元、所述第二置物块均为泡沫塑料制成。
优选的是，所述第三置物单元与所述围板的间距为3～5cm。
还提供了一种所述的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将硝酸纤维素膜粘贴在垫卡上，在硝酸纤维素膜上喷涂形成质控线、第一检测线、第二检测线，再将样品垫、吸收垫粘贴在垫卡上，获得试剂条；
S2、配制反应缓冲液；
S3、配制第一液体和第二液体，将第一液体和第二液体进行冷冻干燥，获得第一探测物和第二探测物。
本发明至少包括以下有益效果：
一、本发明将包被在试剂条的结合垫上的荧光标记的NT-proBNP抗体络合物、生物素标记的NT-proBNP抗体络合物和Anti-chicken IgY抗体络合物制作成固体探测物，并去掉试剂条上的结合垫。在检测待测样本中NT-proBNP浓度时，先将反应缓冲液与探测物充分混合获得混合试剂，再将待测样本加入混合试剂中并充分混合获得样本混合液，再将样本混合液加入到试剂条的样品垫上，通过此种方式能够让待测样本与荧光标记的NT-proBNP抗体络合物、生物素标记的NT-proBNP抗体络合物和Anti-chicken IgY抗体络合物充分反应，提高了N-端脑利钠肽前体检测的精密度和灵敏度，改善了检测试剂产品的稳定性；
二、试剂盒的盒体内部集成了三个置物单元，第一置物单元内放置装有反应缓冲液的试剂瓶，第二置物单元内放置装有探测物的离心管，第三置物单元内放置试剂条，第一置物单元处于低温环境，第二置物单元处于干燥环境，充分利用盒体空间的同时分别为反应缓冲液、探测物、试剂条提供了适宜的存储环境，有利于存储和运输。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为本发明的其中一个技术方案的所述探测物质与所述反应缓冲液的示意图；
图2为本发明的其中一个技术方案的所述试纸条的结构示意图；
图3为本发明的其中一个技术方案的所述试剂盒盒体的内部结构剖面图；
图4为本发明的其中一个技术方案的实验系统血清检测值与对照系统血清检测值的相关图；
图5为本发明的其中一个技术方案的实验系统血浆检测值与实验系统血清检测值的相关图；
图6为本发明的其中一个技术方案的实验系统全血检测值与实验系统血清检测值的相关图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得；在本发明的描述中，指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，并不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。
如图1～3所示，本发明提供了一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，包括：
反应缓冲液1，其装于至少一个试剂瓶中；
至少一份探测物，至少一份探测物按份数装于离心管中，每份探测物包括固体第一探测物2和固体第二探测物3，所述第一探测物2内含有生物素标记的NT-proBNP抗体络合物和荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物，所述第二探测物3内含有荧光标记的NT-proBNP抗体络合物；
至少一个试剂条，其包括垫卡4、铺设于所述垫卡4上的硝酸纤维素膜5、依次间隔设于所述硝酸纤维素膜5上的样品垫6、质控线7、第一检测线8、第二检测线9以及吸收垫10；
盒体11，其上可拆卸连接有盒盖12，所述盒体11内竖直设置有第一隔板13以将所述盒体11分隔成第一置物仓和第二置物仓，所述第一置物仓的内侧壁(包括周向侧壁和底面)覆设有保温层15，所述第一置物仓内横向设置有第二隔板14，所述第一置物仓位于所述第二隔板14下方滑动连接有抽屉16，所述抽屉16中可放置冰袋；
第一置物单元17，其设于所述第一置物仓位于所述第二隔板14的上方，所述第一置物单元17包括周向于所述第一置物仓内侧壁固接的上筒部、所述上筒部底面间隔向下延伸一体成型设置的多个下筒部，其中，所述第一置物单元17内设置第一置物块18，所述第一置物块18顶面向下凹陷多个第一置物孔19，多个第一置物孔19与多个下筒部一一对应且相通，所述第一置物孔19的直径不大于所述下筒部的直径，一个试剂瓶置于一个第一置物孔19内且下端位于所述下筒部内，所述试剂瓶的直径等于所述第一置物孔19的直径；
第二置物单元20，其设于所述第二置物仓内，所述第二置物单元20顶面向下凹陷多个与所述离心管相适配的第二置物孔21，其中，一个离心管置于一个第二置物孔21内；
第三置物单元22，其滑动设于所述第二置物仓内且位于所述第二置物单元20上方，所述第二置物仓的侧壁上设有多个竖直的凹槽，所述第三置物单元22的侧壁上设有多个竖直的凸块，一个凸块置于一个凹槽内，所述第三置物单元22的下端面设有围板23形成一侧面开口的容纳腔，所述容纳腔内设有横板24且通过多个弹簧25与所述第三置物单元22的下端面连接，所述围板23与所述横板24之间放置干燥板26，所述围板23上间隔设有多个通孔，所述第三置物单元22内设置第二置物块27，所述第二置物块27上设置多个与所述试剂条相适配的水平的置物槽28，其中，一个试剂条置于一个置物槽28内。
在上述技术方案中，将包被在试剂条的结合垫上的荧光标记的NT-proBNP抗体络合物、生物素标记的NT-proBNP抗体络合物和Anti-chicken IgY抗体络合物制作成固体探测物，并去掉试剂条上的结合垫。在检测待测样本中NT-proBNP浓度时，先将反应缓冲液1与探测物充分混合获得混合试剂，再将待测样本加入混合试剂中并充分混合获得样本混合液，再将样本混合液加入到试剂条的样品垫6上，通过此种方式能够让待测样本与荧光标记的NT-proBNP抗体络合物、生物素标记的NT-proBNP抗体络合物和Anti-chicken IgY抗体络合物充分反应，提高了N-端脑利钠肽前体检测盒的精密度和灵敏度，改善了检测试剂产品的稳定性。
另外，试剂盒的盒体内集成了三个置物单元，第一置物单元17内放置装有反应缓冲液1的试剂瓶，第二置物单元20内放置装有探测物的离心管，第三置物单元22内放置试剂条，第一置物单元17处于低温环境，试剂瓶置于第一置物孔19内且下端位于下筒部内，多个下筒部间隔排列，试剂瓶可与冷空气接触的面积更大且更为均匀，第三置物单元22设于第二置物单元20的上方且下端设有干燥板26，能够保障离心管处于干燥的环境，且第三置物单元22与盒体11滑动连接，第三置物单元22可与盒体11实现可拆卸连接，且干燥板26通过横板24和多个弹簧25固定于容纳腔内，第三置物单元22取出后可实现离心管的取放以及干燥板26的更换，充分利用盒体11空间的同时分别为反应缓冲液1、探测物和试剂条提供适宜的存储环境，有利于保存和运输。
在另一种技术方案中，所述第二隔板14上间隔设有多个微孔且下端覆盖防水透气膜，能够保障第一置物单元17周围的低温效果，同时降低潮湿空气对盒体11的影响，有利于反应缓冲液的保存。
在另一种技术方案中，所述第一置物块18、所述第二置物单元20、所述第二置物块27均为泡沫塑料制成，有利于提高试剂瓶、离心管和试剂条放置的稳固性，能够有效避免晃动。
在另一种技术方案中，所述第三置物单元22与所述围板23的间距为3～5cm，有利于保障离心管的干燥效果，有利于探测物的保存。
<实施例1>
一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，所述反应缓冲液1的pH为7.4，组分为：10mMPBS、100mM NaCl、0.01％NaN3、0.1％Tween 20、0.01％IGEPAL CA-630、0.5％BSA；第一探测物2是由pH为7.4的第一液体冷冻干燥制得，第一液体的组分为：10mM PBS、0.05％BSA、0.05％Sucrose、0.1μg/mL生物素标记的NT-proBNP抗体络合物、0.1μg/mL荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物；第二探测物3是由pH为7.4的第二液体冷冻干燥制得，第二液体的组分为：10mM PBS、0.05％BSA、0.05％Sucrose、5μg/mL荧光标记的NT-proBNP抗体络合物；试剂条包括垫卡4、铺设于垫卡4上的硝酸纤维素膜5、依次间隔设于硝酸纤维素膜5上的样品垫6、质控线7、第一检测线8、第二检测线9以及吸收垫10。
一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备试剂条：
S101、筛选抗体：购买链霉亲和素和chicken IgY并对其进行配对实验，筛选出特异性高、亲和力好的链霉亲和素和chicken IgY，用包被稀释液分别将链霉亲和素和chicken IgY调整至1-10mg/mL和0.01-5mg/mL；
S102、抗体包被：准备好硝酸纤维素膜5并正确置于贴膜设备上，通过贴膜设备将硝酸纤维素膜5粘贴在垫卡4上。用喷涂设备将使用包被稀释液调整后的chicken IgY喷涂在硝酸纤维素膜5上形成质控线7，将使用包被稀释液调整后的链霉亲和素喷涂在硝酸纤维素膜5上形成第一检测线8和第二检测线9，即可获得包被后试剂条，其中，喷涂设备喷涂量为1μL/cm，喷涂速度为9cm/s，质控线7、第一检测线8和第二检测线9依次间隔2mm。然后将包被后试剂条置于烘箱中，在37℃下烘烤30-120min后取出；
S103、试剂条贴膜及切割；样品垫与吸收垫10粘贴在硝酸纤维素膜5上并且设置在质控线7、第一检测线8、第二检测线9和吸收垫10的两侧，样品垫6粘贴在垫卡4较宽的一侧面，并且位于样品垫6下方的硝酸纤维素膜5与垫卡4长边平行的边的长度为1-2mm，吸收垫10粘贴在垫卡4较窄的一侧面，并且位于吸收垫10下方的硝酸纤维素膜5的端部与垫卡4设有吸收垫10一端的距离小于1mm。粘贴好吸收垫10以及样品垫6后，使用切割设备将试剂条切割成宽度为3.9mm，从而获得切割好的试剂条，将切割好的试剂条放置在压壳设备上压牢，获得试剂条。
S2、配制反应缓冲液1：在pH为7.4浓度为10mM的PBS中加入NaCl、NaN3、Tween20、IGEPAL CA-630、BSA，至NaCl浓度为100mM，NaN3百分浓度为0.01％，Tween 20百分浓度为0.1％，IGEPAL CA-630百分浓度为0.01％，BSA百分浓度为0.5％，待以上组分完全溶解后，进行过滤获得反应缓冲液1，将反应缓冲液1在2-8°的温度下保存；
S3、制备第一探测物2和第二探测物3：
S301、配制第一液体：在pH为7.4浓度为10mM的PBS中加入BSA、Sucrose、生物素标记的NT-proBNP抗体络合物、荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物，至BSA百分浓度为0.05％，Sucrose百分浓度为0.05％，生物素标记的NT-proBNP抗体络合物浓度为0.1μg/mL，荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物浓度为0.1μg/mL；
S302、配制第二液体：在pH为7.4浓度为10mM的PBS中加入BSA、Sucrose、荧光标记的NT-proBNP抗体络合物，至BSA百分浓度为0.05％，Sucrose百分浓度为0.05％，荧光标记的NT-proBNP抗体络合物浓度为5μg/mL；
S303、第一液体和第二液体有效性检测：取0.01-2μg第一液体和0.01-3μg第二液体放入同一试管中混合后，再放入适量的反应缓冲液1以及质控品，确认其检测结果是否与预期值相近，若相近则证明制备的第一液体和第二液体有效；
S304、第一液体和第二液体的分装及冻干：在液体分装机上安装20-80μL移液头，在液体分装机上输入分装次数后开始分装，将第一液体和第二液体分别分装至相应的试管中，通过计算分装后的试管重量和分装前空试管重量的差值对分装的第一液体和第二液体体积进行检测。将分装得到的20-80μL第一液体和20-80μL第二液体分别转移至相对应的不锈钢容器中，然后拿至冷冻干燥机中进行冷冻干燥，获得粉末状的第一探测物2和第二探测物3，将第一探测物2和第二探测物3放置在18-28℃，湿度<10％条件下保存。
<实施例2>
一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，所述反应缓冲液1的pH为7.4，组分为：10mMPBS、350mM NaCl、0.25％NaN3、1.5％Tween 20、0.25％IGEPAL CA-630、1.75％BSA；第一探测物2是由pH为7.4的第一液体冷冻干燥制得，第一液体的组分为：10mM PBS、5％BSA、2.5％Sucrose、7.5μg/mL生物素标记的NT-proBNP抗体络合物、7.5μg/mL荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物；第二探测物3是由pH为7.4的第二液体冷冻干燥制得，第二液体的组分为：10mM PBS、5％BSA、2.5％Sucrose、27.5μg/mL荧光标记的NT-proBNP抗体络合物；试剂条包括垫卡4、铺设于垫卡4上的硝酸纤维素膜5、依次间隔设于硝酸纤维素膜5上的样品垫6、质控线7、第一检测线8、第二检测线9以及吸收垫10。
一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备试剂条：
S101、筛选抗体：购买链霉亲和素和chicken IgY并对其进行配对实验，筛选出特异性高、亲和力好的链霉亲和素和chicken IgY，用包被稀释液分别将链霉亲和素和chicken IgY调整至1-10mg/mL和0.01-5mg/mL；
S102、抗体包被：准备好硝酸纤维素膜5并正确置于贴膜设备上，通过贴膜设备将硝酸纤维素膜5粘贴在垫卡4上。用喷涂设备将使用包被稀释液调整后的chicken IgY喷涂在硝酸纤维素膜5上形成质控线7，将使用包被稀释液调整后的链霉亲和素喷涂在硝酸纤维素膜5上形成第一检测线8和第二检测线9，即可获得包被后试剂条，其中，喷涂设备喷涂量为1μL/cm，喷涂速度为9cm/s，质控线7、第一检测线8和第二检测线9依次间隔2.5mm。然后将包被后试剂条置于烘箱中，在37℃下烘烤30-120min后取出；
S103、试剂条贴膜及切割；样品垫与吸收垫10粘贴在硝酸纤维素膜5上并且设置在质控线7、第一检测线8、第二检测线9和吸收垫10的两侧，样品垫6粘贴在垫卡4较宽的一侧面，并且位于样品垫6下方的硝酸纤维素膜5与垫卡4长边平行的边的长度为1-2mm，吸收垫10粘贴在垫卡4较窄的一侧面，并且位于吸收垫10下方的硝酸纤维素膜5的端部与垫卡4设有吸收垫10一端的距离小于1mm。粘贴好吸收垫10以及样品垫6后，使用切割设备将试剂条切割成宽度为3.9mm，从而获得切割好的试剂条，将切割好的试剂条放置在压壳设备上压牢，获得试剂条。
S2、配制反应缓冲液1：在pH为7.4浓度为10mM的PBS中加入NaCl、NaN3、Tween20、IGEPAL CA-630、BSA，至NaCl浓度为350mM，NaN3百分浓度为0.25％，Tween 20百分浓度为1.5％，IGEPAL CA-630百分浓度为0.25％，BSA百分浓度为1.75％，待以上组分完全溶解后，进行过滤获得反应缓冲液1，将反应缓冲液1在2-8°的温度下保存；
S3、制备第一探测物2和第二探测物3：
S301、配制第一液体：在pH为7.4浓度为10mM的PBS中加入BSA、Sucrose、生物素标记的NT-proBNP抗体络合物、荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物，至BSA百分浓度为5％，Sucrose百分浓度为2.5％，生物素标记的NT-proBNP抗体络合物浓度为7.5μg/mL，荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物浓度为7.5μg/mL；
S302、配制第二液体：在pH为7.4浓度为10mM的PBS中加入BSA、Sucrose、荧光标记的NT-proBNP抗体络合物，至BSA百分浓度为5％，Sucrose百分浓度为2.5％，荧光标记的NT-proBNP抗体络合物浓度为27.5μg/mL；
S303、第一液体和第二液体有效性检测：取0.01-2μg第一液体和0.01-3μg第二液体放入同一试管中混合后，再放入适量的反应缓冲液1以及质控品，确认其检测结果是否与预期值相近，若相近则证明制备的第一液体和第二液体有效；
S304、第一液体和第二液体的分装及冻干：在液体分装机上安装20-80μL移液头，在液体分装机上输入分装次数后开始分装，将第一液体和第二液体分别分装至相应的试管中，通过计算分装后的试管重量和分装前空试管重量的差值对分装的第一液体和第二液体体积进行检测。将分装得到的20-80μL第一液体和20-80μL第二液体分别转移至相对应的不锈钢容器中，然后拿至冷冻干燥机中进行冷冻干燥，获得粉末状的第一探测物2和第二探测物3，将第一探测物2和第二探测物3放置在18-28℃，湿度<10％条件下保存。
<实施例3>
一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，所述反应缓冲液1的pH为7.4，组分为：10mMPBS、600mM NaCl、0.5％NaN3、3％Tween 20、0.5％IGEPAL CA-630、3％BSA；第一探测物2是由pH为7.4的第一液体冷冻干燥制得，第一液体的组分为：10mM PBS、10％BSA、5％Sucrose、15μg/mL生物素标记的NT-proBNP抗体络合物、15μg/mL荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物；第二探测物3是由pH为7.4的第二液体冷冻干燥制得，第二液体的组分为：10mMPBS、10％BSA、5％Sucrose、50μg/mL荧光标记的NT-proBNP抗体络合物；试剂条包括垫卡4、铺设于垫卡4一侧面的硝酸纤维素膜5、依次间隔设于硝酸纤维素膜5上的样品垫6、质控线7、第一检测线8、第二检测线9以及吸收垫10。
一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备试剂条：
S101、筛选抗体：购买链霉亲和素和chicken IgY并对其进行配对实验，筛选出特异性高、亲和力好的链霉亲和素和chicken IgY，用包被稀释液分别将链霉亲和素和chicken IgY调整至1-10mg/mL和0.01-5mg/mL；
S102、抗体包被：准备好硝酸纤维素膜5并正确置于贴膜设备上，通过贴膜设备将硝酸纤维素膜5粘贴在垫卡4上。用喷涂设备将使用包被稀释液调整后的chicken IgY喷涂在硝酸纤维素膜5上形成质控线7，将使用包被稀释液调整后的链霉亲和素喷涂在硝酸纤维素膜5上形成第一检测线8和第二检测线9，即可获得包被后试剂条，其中，喷涂设备喷涂量为1μL/cm，喷涂速度为9cm/s，质控线7、第一检测线8和第二检测线9依次间隔3mm。然后将包被后试剂条置于烘箱中，在37℃下烘烤30-120min后取出；
S103、试剂条贴膜及切割；样品垫与吸收垫10粘贴在硝酸纤维素膜5上并且设置在质控线7、第一检测线8、第二检测线9和吸收垫10的两侧，样品垫6粘贴在垫卡4较宽的一侧面，并且位于样品垫6下方的硝酸纤维素膜5与垫卡4长边平行的边的长度为1-2mm，吸收垫10粘贴在垫卡4较窄的一侧面，并且位于吸收垫10下方的硝酸纤维素膜5的端部与垫卡4设有吸收垫10一端的距离小于1mm。粘贴好吸收垫10以及样品垫6后，使用切割设备将试剂条切割成宽度为3.9mm，从而获得切割好的试剂条，将切割好的试剂条放置在压壳设备上压牢，获得试剂条。
S2、配制反应缓冲液1：在pH为7.4浓度为10mM的PBS中加入NaCl、NaN3、Tween20、IGEPAL CA-630、BSA，至NaCl浓度为600mM，NaN3百分浓度为0.5％，Tween 20百分浓度为3％，IGEPAL CA-630百分浓度为0.5％，BSA百分浓度为3％，待以上组分完全溶解后，进行过滤获得反应缓冲液1，将反应缓冲液1在2-8°的温度下保存；
S3、制备第一探测物2和第二探测物3：
S301、配制第一液体：在pH为7.4浓度为10mM的PBS中加入BSA、Sucrose、生物素标记的NT-proBNP抗体络合物、荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物，至BSA百分浓度为10％，Sucrose百分浓度为5％，生物素标记的NT-proBNP抗体络合物浓度为15μg/mL，荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物浓度为15μg/mL；
S302、配制第二液体：在pH为7.4浓度为10mM的PBS中加入BSA、Sucrose、荧光标记的NT-proBNP抗体络合物，至BSA百分浓度为10％，Sucrose百分浓度为5％，荧光标记的NT-proBNP抗体络合物浓度为50μg/mL；
S303、第一液体和第二液体有效性检测：取0.01-2μg第一液体和0.01-3μg第二液体放入同一试管中混合后，再放入适量的反应缓冲液1以及质控品，确认其检测结果是否与预期值相近，若相近则证明制备的第一液体和第二液体有效；
S304、第一液体和第二液体的分装及冻干：在液体分装机上安装20-80μL移液头，在液体分装机上输入分装次数后开始分装，将第一液体和第二液体分别分装至相应的试管中，通过计算分装后的试管重量和分装前空试管重量的差值对分装的第一液体和第二液体体积进行检测。将分装得到的20-80μL第一液体和20-80μL第二液体分别转移至相对应的不锈钢容器中，然后拿至冷冻干燥机中进行冷冻干燥，获得粉末状的第一探测物2和第二探测物3，将第一探测物2和第二探测物3放置在18-28℃，湿度<10％条件下保存。
<实施例4>
一种N-端脑利钠肽前体检测试剂盒对N-端脑利钠肽前体进行检测的使用方法，包括以下步骤：
SA、将试剂条水平放置；
SB、取反应缓冲液150μL与探测物混合，获得混合试剂；
SC、取50μL待测样本与混合试剂均匀混合，获得样本混合液；
SD、取75μL样本混合液加入到试剂条的样品垫6上，在室温下反应12min，获得反应后的试剂条；
SE、使用检测设备对反应后的试剂条上的第一检测线8以及第二检测线9进行检测。
(一)<添加公示及ID芯片的制造>
取制备好的试剂条、反应缓冲液1、NT-proBNP校准品进行测试，其中，每个校准品至少有5个浓度，每个浓度至少测试5次，将不同浓度校准品面积扫描图的平均值与浓度做标准曲线，得到线性方程，将方程式的数值导入专用软件中，将空白的原始芯片连接至电脑，通过专用软件即可将数值代码导入芯片，贴好芯片标签。
(二)<N-端脑利钠肽前体检测试剂盒精密度检测>
检测材料：
N-端脑利钠肽前体检测试剂盒：使用实施例1-3任一实施例中制备出的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒；
荧光免疫分析仪：与本发明N-端脑利钠肽前体检测试剂盒配套的荧光免疫分析仪，型号为A2000或A5000；
检测样本：低浓度的N-端脑利钠肽前体质控品和高浓度的N-端脑利钠肽前体质控品，其中，低浓度为78.2pg/mL，高浓度为2881pg/mL，详细信息见下表：
Figure BDA0002496600280000121
N-端脑利钠肽前体检测试剂盒使用方法：与实施例4中的使用方法相同，分别对低浓度的N-端脑利钠肽前体质控品和高浓度的N-端脑利钠肽前体质控品重复检测20次，结果如表1所示：
表1.NT-proBNP检测结果
Figure BDA0002496600280000122
Figure BDA0002496600280000131
由表1可以看出，通过NT-proBNP检测试剂检测出的低浓度NT-proBNP质控品的平均值为78.51pg/mL，标准差为4.14pg/mL，CV为5.28％，高浓度NT-proBNP质控品的平均值为2865.64pg/mL，标准差为147.59pg/mL，CV为5.15％，高浓度NT-proBNP质控品与低浓度NT-proBNP质控品的检测值的CV均＜10％，表明本发明制备的试剂盒精密度良好，适用于临床检测。
(三)<N-端脑利钠肽前体检测试剂盒准确度检测>
检测材料：
N-端脑利钠肽前体检测试剂盒：使用实施例1-3任一实施例中制备出的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒；
荧光免疫分析仪：与本发明N-端脑利钠肽前体检测试剂盒配套的荧光免疫分析仪，型号为A2000或A5000；
检测样本：NT-proBNP有证标准物质，浓度为1000pg/mL；
N-端脑利钠肽前体检测试剂盒使用方法：与实施例4中的使用方法相同，重复检测3次，结果如表2所示：
表2.NT-proBNP检测相对偏差
Figure BDA0002496600280000141
由表2可以看出，通过NT-proBNP检测试剂盒检测NT-proBNP有证标准物质的相对偏差为3.32-5.02％，相对偏差＜10％，表明本发明制备的试剂盒准确度良好，适用于临床检测。
(四)<N-端脑利钠肽前体检测试剂盒一致性检测>
检测材料：
N-端脑利钠肽前体检测试剂盒：使用实施例1-3任一实施例中制备出的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒；
荧光免疫分析仪：与本发明N-端脑利钠肽前体检测试剂盒配套的荧光免疫分析仪，型号为A2000或A5000；
检测样本：临床样本由相关医院提供，共300例电化学发光法定值样本，包含100例血清、100例同源血浆和100例同源全血，NT-proBNP含量分布区间是10-30000pg/mL；
N-端脑利钠肽前体检测试剂盒使用方法：与实施例4中的使用方法相同，分别对所有的血清、同源血浆和同源全血进行检测，每个样本重复检测1次，以血清检测结果为基准，分析各样本类型的相关关系，如图3-5所示；
由图4可知，以对照系统血清检测值为X轴，实验系统血清检测值为Y轴，绘制散点图，进行相关性分析。对100例临床血清样本进行检测，样本平均相对偏差小于10％，R2≧0.98，斜率在0.9-1.1范围内，表明本发明制备的试剂盒与电化学发光法试剂盒在检测NT-proBNP血清时一致性良好，满足临床检测NT-proBNP血清的需要。
由图5可知，以实验系统血清检测值为X轴，实验系统血浆检测值为Y轴，绘制散点图，进行相关性分析。对100例临床血浆样本进行检测，样本平均相对偏差小于10％，R2≧0.98，斜率在0.9-1.1范围内，表明本发明制备的试剂盒在检测NT-proBNP血清和同源血浆样本时一致性良好，满足临床检测NT-proBNP血浆的需要。
由图6可知，以实验系统血清检测值为X轴，实验系统全血检测值为Y轴，绘制散点图，进行相关性分析。对100例临床全血样本进行检测，样本平均相对偏差小于10％，R2≧0.98，斜率在0.9-1.1范围内，表明本发明制备的试剂盒在检测NT-proBNP血清和同源全血样本时一致性良好，满足临床检测NT-proBNP全血的需要。
(五)<N-端脑利钠肽前体检测试剂与现有试剂的对比试验>
检测材料：
N-端脑利钠肽前体检测试剂盒：使用实施例1-3任一实施例中制备出的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，其中，荧光免疫分析仪为与本发明N-端脑利钠肽前体检测试剂盒配套的荧光免疫分析仪，型号为A2000，使用方法与与实施例4中的使用方法相同；
现有N-端脑利钠肽前体检测试剂盒：带结合垫的NT-proBNP试剂盒及配套仪器购自相关代理商，使用方法为常规现有NT-proBNP试剂盒的使用方法；
检测样本：临床样本由相关医院提供，共20例电化学发光法定值血清样本，NT-proBNP含量分布区间是10-30000pg/mL，每个样本重复检测5次，结果如表3所示：
表3.NT-proBNP检测结果对比
Figure BDA0002496600280000151
Figure BDA0002496600280000161
如表3所示，带结合垫试剂盒和本发明试剂盒同时检测20例NT-proBNP血清样本，其中，带结合垫试剂盒在检测NT-proBNP血清样本时，个别样本的精密度CV值≧10％，相对偏差≧10％，而本发明试剂在10-30000pg/mL检测范围内均未出现精密度CV≧10％，相对偏差≧10％的情况，表明本专利试剂盒性能良好，满足临床检测NT-proBNP的需要。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (9)

1.N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，其特征在于，包括：
反应缓冲液，其装于至少一个试剂瓶中；
至少一份探测物，至少一份探测物按份数装于离心管中，每份探测物包括固体第一探测物和固体第二探测物，所述第一探测物内含有生物素标记的NT-proBNP抗体络合物和荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物，所述第二探测物内含有荧光标记的NT-proBNP抗体络合物；
至少一个试剂条，其包括垫卡、铺设于所述垫卡上的硝酸纤维素膜、依次间隔设于所述硝酸纤维素膜上的样品垫、质控线、第一检测线、第二检测线以及吸收垫；
盒体，其上可拆卸连接有盒盖，所述盒体内竖直设置有第一隔板以将所述盒体分隔成第一置物仓和第二置物仓，所述第一置物仓的内侧壁覆设有保温层，所述第一置物仓内横向设置有第二隔板，所述第一置物仓位于所述第二隔板下方滑动连接有抽屉；
第一置物单元，其设于所述第一置物仓位于所述第二隔板的上方，所述第一置物单元包括周向于所述第一置物仓内侧壁固接的上筒部、所述上筒部底面间隔向下延伸一体成型设置的多个下筒部，其中，所述第一置物单元内设置第一置物块，所述第一置物块顶面向下凹陷多个第一置物孔，多个第一置物孔与多个下筒部一一对应且相通，所述第一置物孔的直径不大于所述下筒部的直径，一个试剂瓶置于一个第一置物孔内且下端位于所述下筒部内，所述试剂瓶的直径等于所述第一置物孔的直径；
第二置物单元，其设于所述第二置物仓内，所述第二置物单元顶面向下凹陷多个与所述离心管相适配的第二置物孔，其中，一个离心管置于一个第二置物孔内；
第三置物单元，其滑动设于所述第二置物仓内且位于所述第二置物单元上方，所述第三置物单元的下端面设有围板形成一侧面开口的容纳腔，所述容纳腔内设有横板且通过多个弹簧与所述第三置物单元的下端面连接，所述围板与所述横板之间放置干燥板，所述围板上间隔设有多个通孔，所述第三置物单元内设置第二置物块，所述第二置物块上设置多个与所述试剂条相适配的水平的置物槽，其中，一个试剂条置于一个置物槽内。
2.如权利要求1所述的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，其特征在于，所述反应缓冲液的pH为7.4，组分为：10mM PBS、100-600mM NaCl、0.01-0.5％NaN3、0.1-3％Tween20、0.01-0.5％IGEPAL CA-630、0.5-3％BSA，其中，每个试剂瓶中所述反应缓冲液体积不小于150μL。
3.如权利要求1所述的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，所述第一探测物是由pH为7.4的第一液体冷冻干燥制得，所述第一液体的组分为：10mM PBS、0.05-10％BSA、0.05-5％Sucrose、0.1-15μg/mL生物素标记的NT-proBNP抗体络合物、0.1-15μg/mL荧光标记的Anti-chicken IgY抗体络合物；
所述第二探测物是由pH为7.4的第二液体冷冻干燥制得，所述第二液体的组分为：10mMPBS、0.05-10％BSA、0.05-5％Sucrose、5-50μg/mL荧光标记的NT-proBNP抗体络合物。
4.如权利要求1所述的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，其特征在于，所述质控线、所述第一检测线、所述第二检测线依次间隔距离为2-3mm。
5.如权利要求1所述的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，其特征在于，所述第一探测物和所述第二探测物为球状、粉末状中的一种。
6.如权利要求1所述的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，其特征在于，所述第二隔板上间隔设有多个微孔且下端覆盖防水透气膜。
7.如权利要求1所述的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，其特征在于，所述第一置物块、所述第二置物单元、所述第二置物块均为泡沫塑料制成。
8.如权利要求1所述的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒，其特征在于，所述第三置物单元与所述围板的间距为3～5cm。
9.如权利要求1-8任一项所述的N-端脑利钠肽前体检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将硝酸纤维素膜粘贴在垫卡上，在硝酸纤维素膜上喷涂形成质控线、第一检测线、第二检测线，再将样品垫、吸收垫粘贴在垫卡上，获得试剂条；
S2、配制反应缓冲液；
S3、配制第一液体和第二液体，将第一液体和第二液体进行冷冻干燥，获得第一探测物和第二探测物。
CN202010420041.1A 2020-05-18 2020-05-18 N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其制备方法 Active CN111521831B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010420041.1A CN111521831B (zh) 2020-05-18 2020-05-18 N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010420041.1A CN111521831B (zh) 2020-05-18 2020-05-18 N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111521831A true CN111521831A (zh) 2020-08-11
CN111521831B CN111521831B (zh) 2023-06-09

Family

ID=71908853

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010420041.1A Active CN111521831B (zh) 2020-05-18 2020-05-18 N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111521831B (zh)

Citations (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW213503B (zh) * 1991-05-02 1993-09-21 Fujirebio Kk
CN101261278A (zh) * 2007-03-06 2008-09-10 霍夫曼-拉罗奇有限公司 Bnp型肽用于预测对透析的需要的用途
US20120121594A1 (en) * 2008-11-25 2012-05-17 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Anti-il-6 antibodies for the treatment of arthritis
CN204188616U (zh) * 2014-10-28 2015-03-04 广州天宝颂原生物科技开发有限公司 降钙素原免疫层析定量检测试纸条
CN204228723U (zh) * 2014-11-13 2015-03-25 江苏达骏生物科技有限公司 定量检测n末端脑钠肽前体的试剂条和试剂卡
CN204287206U (zh) * 2014-10-28 2015-04-22 广州天宝颂原生物科技开发有限公司 氨基末端脑钠肽前体免疫层析定量检测试纸条
US20160131650A1 (en) * 2014-10-03 2016-05-12 Emory University Virus-detection kits and methods of making and using the same
CN205470404U (zh) * 2016-04-12 2016-08-17 北京中科圆融生物科技发展有限公司 一种表达展示谷胱甘肽的生物纳米磁珠试剂盒
CN105988008A (zh) * 2015-02-11 2016-10-05 四川迈克生物科技股份有限公司 测定装置、试剂盒及方法
CN106290832A (zh) * 2016-08-12 2017-01-04 上海铭源数康生物芯片有限公司 一种免疫侧向层析定量检测试剂及其制备方法、检测方法
CN206244790U (zh) * 2016-08-29 2017-06-13 郑州点石生物技术有限公司 微生物试剂盒
CN107389950A (zh) * 2017-09-21 2017-11-24 苏州新波生物技术有限公司 一种血液中氨基末端脑利钠肽前体的检测方法及检测试剂盒
CN207036861U (zh) * 2017-03-30 2018-02-23 厦门依柯利斯医疗科技有限公司 一种人全血中n端脑钠肽前体免疫层析定量试剂盒
CN108226468A (zh) * 2017-12-28 2018-06-29 湖北工业大学 一种检测NT-proBNP的试纸条及其制备方法与应用
CN208177489U (zh) * 2018-01-22 2018-12-04 韩国巴迪泰生物科技有限公司 用于自动化检验设备的离心管架
CN209128409U (zh) * 2018-07-13 2019-07-19 南京市儿童医院 一种通过检测尿液miR-214来预测肾脏纤维化程度的试剂盒
CN110346570A (zh) * 2018-04-04 2019-10-18 深圳市贝沃德克生物技术研究院有限公司 检测糖尿病肾病生物标志物的胶体金试剂盒及方法

Patent Citations (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW213503B (zh) * 1991-05-02 1993-09-21 Fujirebio Kk
CN101261278A (zh) * 2007-03-06 2008-09-10 霍夫曼-拉罗奇有限公司 Bnp型肽用于预测对透析的需要的用途
US20120121594A1 (en) * 2008-11-25 2012-05-17 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Anti-il-6 antibodies for the treatment of arthritis
US20160131650A1 (en) * 2014-10-03 2016-05-12 Emory University Virus-detection kits and methods of making and using the same
CN204188616U (zh) * 2014-10-28 2015-03-04 广州天宝颂原生物科技开发有限公司 降钙素原免疫层析定量检测试纸条
CN204287206U (zh) * 2014-10-28 2015-04-22 广州天宝颂原生物科技开发有限公司 氨基末端脑钠肽前体免疫层析定量检测试纸条
CN204228723U (zh) * 2014-11-13 2015-03-25 江苏达骏生物科技有限公司 定量检测n末端脑钠肽前体的试剂条和试剂卡
CN105988008A (zh) * 2015-02-11 2016-10-05 四川迈克生物科技股份有限公司 测定装置、试剂盒及方法
CN205470404U (zh) * 2016-04-12 2016-08-17 北京中科圆融生物科技发展有限公司 一种表达展示谷胱甘肽的生物纳米磁珠试剂盒
CN106290832A (zh) * 2016-08-12 2017-01-04 上海铭源数康生物芯片有限公司 一种免疫侧向层析定量检测试剂及其制备方法、检测方法
CN206244790U (zh) * 2016-08-29 2017-06-13 郑州点石生物技术有限公司 微生物试剂盒
CN207036861U (zh) * 2017-03-30 2018-02-23 厦门依柯利斯医疗科技有限公司 一种人全血中n端脑钠肽前体免疫层析定量试剂盒
CN107389950A (zh) * 2017-09-21 2017-11-24 苏州新波生物技术有限公司 一种血液中氨基末端脑利钠肽前体的检测方法及检测试剂盒
CN108226468A (zh) * 2017-12-28 2018-06-29 湖北工业大学 一种检测NT-proBNP的试纸条及其制备方法与应用
CN208177489U (zh) * 2018-01-22 2018-12-04 韩国巴迪泰生物科技有限公司 用于自动化检验设备的离心管架
CN110346570A (zh) * 2018-04-04 2019-10-18 深圳市贝沃德克生物技术研究院有限公司 检测糖尿病肾病生物标志物的胶体金试剂盒及方法
CN209128409U (zh) * 2018-07-13 2019-07-19 南京市儿童医院 一种通过检测尿液miR-214来预测肾脏纤维化程度的试剂盒

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HUANG BH ET AL: "Surface Labeling of Enveloped Viruses Assisted by Host Cells", 《ACS CHEMICAL BIOLOGY》 *
李登红等: "基于时间分辨免疫荧光法与电化学发光法对降钙素原检测项目的临床一致性评价", 《医疗装备》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111521831B (zh) 2023-06-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0204109B1 (en) A self-contained reagent package device for an assay
AU607570B2 (en) A device for analytical determinations
US4675299A (en) Self-contained reagent package device and an assay using same
CN101720216B (zh) 试剂容器
JPH11316226A (ja) 自動測定用カートリッジ及び自動測定法
WO2003079018A1 (en) Drug test kit
CN105137096B (zh) 一种用于血型抗体检测的试剂盒及其应用
US20140377785A1 (en) Assembly for selectively performing a clinical chemistry test or an elisa assay, use of said reagent cartridge and assembly
US20110151549A1 (en) Device For Carrying Out An Individual Immunoassay In A Fully Automatic Manner
CN104937106A (zh) 用于监测生物流体的系统和方法
JP2004514910A (ja) 自動臨床分析器における患者標本を自動的に保存および再処理する方法
CN111521831A (zh) N-端脑利钠肽前体检测试剂盒及其制备方法
CN111537737B (zh) 降钙素原与c-反应蛋白联合检测试剂盒
CN105891194A (zh) 抗心磷脂抗体IgG化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法
KR940701542A (ko) 특이성 리간드를 검출하기 위한 분석법
CN107102140A (zh) 一种谷氨酸脱羧酶抗体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法
JP2007292718A (ja) 多項目試験紙および検体中の被検物質の検出方法
CN111537752A (zh) 抗缪勒管激素检测试剂盒
CN101216490B (zh) 干化学法torch检测试剂盒及其制造方法
US20140011190A1 (en) Method for performing a rapid test
EP0327395A2 (en) Assay kit and method
JP7357750B2 (ja) 試薬容器
CN210720418U (zh) 一种磁微粒发光微流控芯片
CN209069954U (zh) 一种应用于试剂检测的荧光试剂盒
CN107102133A (zh) 一种胰岛细胞抗体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant