CN111494255A - 含人参虫草发酵提取物的组合物及其在化妆品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种含人参虫草发酵提取物的组合物及其在化妆品中的应用，主要包含：人参虫草发酵提取物、春榆提取物、玫瑰茄提取物。其中，人参虫草发酵提取物为蛹虫草在人参根上通过固体发酵制得。本发明组合物合理组配，协同增效，具有优异的抗氧化性，进而改善皮肤皱纹状态。本发明公开的技术方案属于化妆品技术领域。

Description

含人参虫草发酵提取物的组合物及其在化妆品中的应用
技术领域
本发明公开了一种含人参虫草发酵提取物的组合物，具体地说，是包含一种蛹虫草与人参的固体发酵产物提取物的组合物以及该组合物在化妆品领域中的应用。
背景技术
人参在植物分类学上属于五加科人参属，为多年生寄根植物。人参作为营养价值很高的天然物，在中医学上作为医药品使用，很多医学书中记载有人参的药效。人参的主要功能性成分是人参皂苷，人参皂苷是众多植物皂苷中特殊命名。人参成分中的皂苷有抗癌、抗糖尿病、抗抑郁、抗老化等药理性能。
蛹虫草是一种寄生真菌，其含有多种营养成分，如蛋白质及氨基酸、虫草多糖、虫草酸、虫草素和超氧化物岐化酶等。蛹虫草是我国历史上十分珍稀、营养、滋补、保健及药用真菌，具有抗肿瘤、降血糖、免疫调节和抑菌消炎等生理功能。
目前已有通过药食真菌在人参上进行固体发酵对人参底物中的有效活性成分进行转换，从而开发出药用价值更高的活性成分。但是，通过人参固体发酵得到的产物目前主要是应用于食品或药品领域，其对于人体皮肤的影响以及在化妆品领域的应用研究目前相对较少。
因此，开发含有人参虫草发酵提取物的组合物以及其在化妆品领域的应用，对于拓展人参产品应用途径以及开发新的化妆品功效原料非常有必要。
发明内容
本发明的目的是提供一种含人参虫草发酵提取物的组合物以及该组合物在化妆品领域的应用。该组合物通过合理组配具有较好的抗氧化性，并且，将该组合物应用在化妆品中显示出很好的改善皱纹效果。
为此，本发明提供的第一个技术方案是这样的：
一种含人参虫草发酵提取物的组合物，该组合物包含：人参虫草发酵提取物、春榆提取物、玫瑰茄提取物。
上述人参虫草发酵提取物主要是蛹虫草在人参根上通过固体发酵制得，为人参根提取物和蛹虫草提取物的混合物。
春榆又名白榆、家榆、榆钱等，是榆科榆属植物，以果实(榆钱)、树皮、叶、根入药。榆钱用于安神健脾、神经衰弱、失眠、食欲不振。皮、叶用于安神、利小便。
玫瑰茄，中药名，为锦葵科木槿属植物，其入药部位为植物的根、种子。中药中用于敛肺止咳，降血压，解酒。其花也可以入药，有利尿、促进胆汁分泌、降低血液粘度、降低血压和刺激肠壁蠕动的功效。本发明中的玫瑰茄提取物是将玫瑰茄经过脱色处理，并在酸液中浓缩制得，具有高含量果酸，其中丙酮酸含量达到5％以上。
本发明将人参虫草发酵提取物、春榆提取物、玫瑰茄提取物合理组配，充分利用各组分中活性成分的协同作用，发挥出优异的抗氧化效果。
本发明中，上述人参虫草发酵提取物的制备方法如下：
(1)制备人参固体发酵基质：将人参按照料液比1:2-1:3(g/ml)加入去离子水充分润湿5h，在110-120℃下灭菌30min后制得人参固体发酵基质；
(2)粗糙脉孢霉发酵人参：将粗糙脉孢霉菌液活化、扩增培养后得粗糙脉孢霉种子液，将种子液加入到步骤(1)中的人参固体发酵基质，在35-37℃下暗光发酵5天，粗糙脉孢霉菌灭活；
(3)蛹虫草菌发酵人参：将蛹虫草菌株经复合PDA培养基平板活化后加入复合PDA液体培养基摇床培养，制备蛹虫草液体菌种；液体菌种接种到步骤(2)的人参固体发酵基质中，在20-25℃暗光培养20天即得人参虫草发酵产物；
(4)将步骤(3)中的人参虫草发酵产物清洗干燥后粉碎，加入料液比为1:10-1:15(g/ml)的50％乙醇，在50-60℃下提取8h后，将提取液通过大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，洗脱至流出液近无色，再用70-95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干后再冷冻干燥，即得人参虫草发酵提取物，该提取物为人参和蛹虫草提取物的混合物。
优选地，上述步骤(3)中蛹虫草液体菌种与人参固体发酵基质的液料比为2:5-3:5(ml/g)。
上述制备方法中，所述人参可以为生晒参或者红参。可选整根人参作为发酵基质，也可以将人参切片或者粉碎作为固体发酵基质。
本发明中，粗糙脉孢霉的活化方法为从原始菌种斜面上挑取一环，划线法接种于培养基斜面上，置于30℃培养箱中，培养3-4天，得到粗糙脉孢霉菌活化液。其中，斜面培养基为蔗糖25g，NaNO3 2g，MgSO4 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4 0.01g，K2HPO4 1g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。培养基pH 4.5，且在120℃灭菌20min。
接着，将粗糙脉孢霉菌活化液接入如下培养基：葡萄糖20g，酵母粉1.5g，KH2PO41.5g，CaCl2 0.05g，蒸馏水1000mL。培养基pH 4.5，且在120℃灭菌30-35min。在恒温30-35℃、转速300-500r/min下培养48h制得粗糙脉孢霉种子液。
优选地，粗糙脉孢霉种子液与人参固体发酵基质的液料比为1:5-1:10(ml/g)。其中，粗糙脉孢霉种子液中的活菌数为1×106-1×107个孢子/ml。
本发明中，蛹虫草菌的复合PDA培养基配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨2g，MgSO4 2g，K2HPO4 1.5g，KH2PO4 1.5g，琼脂18g，水1000mL；复合PDA液体培养基为不加琼脂的复合PDA培养基配方。
将经复合PDA培养基培养的活化蛹虫草菌经打孔器打孔(直径4mm)，取3块菌块接种于复合PDA液体培养基中。在温度20-25℃，转速150-180r/min条件下摇床暗光培养5天得蛹虫草液体菌种。
本发明中的组合物按质量百分数计，包含人参虫草发酵提取物8-15％，春榆提取物5-9％，玫瑰茄提取物7-10％。
优选地，春榆提取物选自春榆根提取物，玫瑰茄提取物选自玫瑰茄花提取物。
本发明中，组合物还可以包含多元醇35-54％，水19-38％。
上述多元醇可以为乙二醇、甘油、1,2-戊二醇、1,3-丙二醇、丁二醇中的一种或组合。
此外，本发明组合物还可以包含0.01-0.2％的防腐剂，防腐剂可以为苯氧乙醇、苯钾酸钠等。
本发明中组合物的制备方法为将各种成分在常温下混合搅拌均匀即得。
本发明提供的另一个技术方案为上述组合物在化妆品领域的应用。可将上述组合物作为功效性成分按照质量比为0.01-5％添加至化妆品中。
与现有技术相比，本发明提供的技术方案具有如下技术优点：
本发明提供的组合物通过人参虫草发酵提取物、春榆提取物、玫瑰茄提取物合理组配，协同增效，能够发挥出更好的抗氧化效果。该组合物通过抗氧化作用能够有效清除细胞内自由基，从而增强细胞增生能力，减缓皮肤衰老。当其添加至化妆品中，能够明显改善肌肤皱纹，使肌肤保持紧致状态，显示出更好的护肤功效。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例。对于未特别注明的工艺参数或者条件，可参照常规技术进行。本发明所用的原料可通过自制获得或商业渠道购买。其中，春榆根提取物、玫瑰茄花提取物、人参根提取物、蛹虫草提取物采购自广州市百好博有限公司；生晒参、红参采购自吉林加一土产有限公司；粗糙脉孢霉菌种采购自中国普通微生物菌种保藏管理中心；蛹虫草菌种采购自四川省岷源高新所菌种生产中心。
实施例1
一种含人参虫草发酵提取物的组合物，按总重量100g计，包括人参虫草发酵提取物8g，春榆根提取物6g，玫瑰茄花提取物10g，甘油45g，水31g。
其中，人参虫草发酵提取物通过如下步骤制得：
粗糙脉孢霉种子液制作：将粗糙脉孢霉从原始菌种斜面上挑取一环，划线法接种于培养基斜面上，置于30℃培养箱中，培养3天，得到粗糙脉孢霉菌活化液。其中，斜面培养基为蔗糖25g，NaNO3 2g，MgSO4 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4 0.01g，K2HPO4 1g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。培养基pH 4.5，且在120℃，灭菌20min。接着，将粗糙脉孢霉菌活化液接入如下培养基：葡萄糖20g，酵母粉1.5g，KH2PO4 1.5g，CaCl2 0.05g，蒸馏水1000mL。培养基pH 4.5，且在120℃灭菌30min。在恒温30℃、转速300r/min下培养48h制得粗糙脉孢霉种子液。
蛹虫草液体菌种制作：将蛹虫草菌株经复合PDA培养基平板活化后加入复合PDA液体培养基。其中，复合PDA培养基配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨2g，MgSO4 2g，K2HPO4 1.5g，KH2PO4 1.5g，琼脂18g，水1000mL。复合PDA液体培养基为不加琼脂的复合PDA培养基配方。经复合PDA培养基培养的活化蛹虫草菌经打孔器打孔(直径4mm)，取3块菌块接种于复合PDA液体培养基中。在温度20℃，转速150r/min条件下摇床暗光培养5天得液体菌种。
按照如下方法制备人参虫草发酵提取物：
(1)制备人参固体发酵基质：将整根生晒参按照料液比1:2(g/ml)加入去离子水充分润湿5h，在110℃下灭菌30min后制得人参固体发酵基质；
(2)粗糙脉孢霉发酵人参：粗糙脉孢霉种子液加入人参固体发酵基质，其与人参固体发酵基质的液料比为1:10(ml/g)，粗糙脉孢霉种子液中的活菌数为1×107个孢子/ml。粗糙脉孢霉种子液与人参固体发酵基质在35℃下暗光发酵5天后，粗糙脉孢霉菌灭活；
(3)蛹虫草菌发酵人参：将蛹虫草液体菌种接种到步骤(2)的人参固体发酵基质中，在20℃暗光培养20天即得人参虫草发酵产物；其中，液体菌种与人参固体发酵基质的液料比为1:5(ml/g)；
(4)将步骤(3)中的人参虫草发酵产物清洗干燥后粉碎，加入料液比为1:10(g/ml)的50％乙醇，在50℃下提取8h后，将提取液通过大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，洗脱至流出液近无色，再用95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干后再冷冻干燥，即得人参虫草发酵提取物，该提取物为人参和蛹虫草提取物的混合物。
实施例2
一种含人参虫草发酵提取物的组合物，按总重量100g计，包括人参虫草发酵提取物13g，春榆根提取物5g，玫瑰茄花提取物8g，丁二醇50g，水23.8g，苯氧乙醇0.2g。
其中，人参虫草发酵提取物通过如下步骤制得：
粗糙脉孢霉种子液制作：将粗糙脉孢霉从原始菌种斜面上挑取一环，划线法接种于培养基斜面上，置于30℃培养箱中，培养4天，得到粗糙脉孢霉菌活化液。其中，斜面培养基为蔗糖25g，NaNO3 2g，MgSO4 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4 0.01g，K2HPO4 1g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。培养基pH 4.5，且在120℃灭菌20min。接着，将粗糙脉孢霉菌活化液接入如下培养基：葡萄糖20g，酵母粉1.5g，KH2PO4 1.5g，CaCl2 0.05g，蒸馏水1000mL。培养基pH 4.5，且在120℃灭菌35min。在恒温35℃、转速500r/min下培养48h制得粗糙脉孢霉种子液。
蛹虫草液体菌种制作：将蛹虫草菌株经复合PDA培养基平板活化后加入复合PDA液体培养基；其中，复合PDA培养基配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨2g，MgSO4 2g，K2HPO4 1.5g，KH2PO4 1.5g，琼脂18g，水1000mL。复合PDA液体培养基为不加琼脂的复合PDA培养基配方。经复合PDA培养基培养的活化蛹虫草菌经打孔器打孔(直径4mm)，取3块菌块接种于复合PDA液体培养基中。在温度25℃，转速180r/min条件下摇床暗光培养5天得蛹虫草液体菌种。
按照如下方法制备人参虫草发酵提取物：
(1)制备人参固体发酵基质：将红参切片按照料液比1:3(g/ml)加入去离子水充分润湿5h，在120℃下灭菌30min后制得人参固体发酵基质；
(2)粗糙脉孢霉发酵人参：粗糙脉孢霉种子液加入人参固体发酵基质，其与人参固体发酵基质的液料比为1:5(ml/g)，粗糙脉孢霉种子液中的活菌数为1×106个孢子/ml。粗糙脉孢霉种子液与人参固体发酵基质在37℃下暗光发酵5天后，粗糙脉孢霉菌灭活；
(3)蛹虫草菌发酵人参：将蛹虫草液体菌种接种到步骤(2)的人参固体发酵基质中，在25℃暗光培养20天即得人参虫草发酵产物。其中，液体菌种与人参固体发酵基质的液料比为1:1(ml/g)；
(4)将步骤(3)中的人参虫草发酵产物清洗干燥后粉碎，加入料液比为1:15(g/ml)的50％乙醇，在60℃下提取8h后，将提取液通过大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，洗脱至流出液近无色，再用70％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干后再冷冻干燥，即得人参虫草发酵提取物，该提取物为人参和蛹虫草提取物的混合物。
实施例3
一种含人参虫草发酵提取物的组合物，按总重量100g计，包括人参虫草发酵提取物10g，春榆根提取物9g，玫瑰茄花提取物7g，乙二醇24g，1,2-戊二醇30g，水19.9g，苯氧乙醇0.1g。
其中，人参虫草发酵提取物的制备方法与实施例2中相同。
实施例4
一种含人参虫草发酵提取物的组合物，按总重量100g计，包括人参虫草发酵提取物15g，春榆根提取物5g，玫瑰茄花提取物7g，乙二醇10g，甘油20g，1,3-丙二醇5g，水37.99g、苯钾酸钠0.01g。
其中，人参虫草发酵提取物的制备方法与实施例2中相同。
实施例5
一种含人参虫草发酵提取物的组合物，按总重量100g计，包括人参虫草发酵提取物13g，春榆根提取物5g，玫瑰茄花提取物8g，丁二醇50g，水23.8g，苯氧乙醇0.2g。
其中，人参虫草发酵提取物的制备方法与实施例2基本相同，区别在于制备方法的步骤(3)中蛹虫草液体菌种与人参固体发酵基质的液料比为2:5(ml/g)。
实施例6
一种含人参虫草发酵提取物的组合物，按总重量100g计，包括人参虫草发酵提取物13g，春榆根提取物5g，玫瑰茄花提取物8g，丁二醇50g，水23.8g，苯氧乙醇0.2g。
其中，人参虫草发酵提取物的制备方法与实施例2基本相同，区别在于制备方法的步骤(3)中蛹虫草液体菌种与人参固体发酵基质的液料比为3:5(ml/g)。
对比例1
一种组合物，按总重量100g计，包括人参虫草发酵提取物14g，玫瑰茄花提取物10g，甘油45g，水31g。
其中，人参虫草发酵提取物的制备方法跟实施例1中相同。
对比例2
一种组合物，按总重量100g计，包括春榆根提取物5g，玫瑰茄花提取物21g，丁二醇50g，水23.8g，苯氧乙醇0.2g。
对比例3
一种组合物，按总重量100g计，包括人参虫草发酵提取物17g，春榆根提取物9g，乙二醇24g，1,2-戊二醇30g，水19.9g，苯氧乙醇0.1g。
其中，人参虫草发酵提取物的制备方法跟实施例3中相同。
对比例4
一种组合物，按总重量100g计，包括人参虫草发酵提取物13g，丁二醇63g，水23.8g，苯氧乙醇0.2g。
其中，人参虫草发酵提取物的制备方法跟实施例2中相同。
对比例5
一种组合物，按总重量100g计，包括春榆根提取物5g，丁二醇71g，水23.8g，苯氧乙醇0.2g。
对比例6
一种组合物，按总重量100g计，包括玫瑰茄花提取物8g，丁二醇68g，水23.8g，苯氧乙醇0.2g。
对比例7
一种组合物，按总重量100g计，包括人参根提取物8g，蛹虫草提取物5g，春榆根提取物5g，玫瑰茄花提取物8g，丁二醇50g，水23.8g，苯氧乙醇0.2g。
实施例1-6，对比例1-7中所述组合物的制备方法为将各种成分在常温下混合搅拌均匀即得。
1.组合物的体外抗氧化效果研究
1.1ABTS自由基清除作用
用蒸馏水配制7mmol/L的ABTS+溶液和2.45mmol/L的过硫酸钾溶液(使用前室温放置16h)，分别将ABTS+和过硫酸钾溶液按1：1体积比混合，使用前用pH7.4，5mmol/L的磷酸盐缓冲溶液将混合液稀释至734nm时的吸光值A为0.70±0.02。用蒸馏水将实施例1-6、对比例1-7中的组合物配置成浓度为1mg/mL待测样品。取0.5mL待测样品和0.5mL的ABTS+溶液混合静置10min后于734nm下测其吸光值。用去离子水和1mg/mL的VC水溶液替代样品分别作空白对照和阳性对照。ABTS自由基清除率按下式计算：
ABTS自由基清除率/％＝(A0-AS)/A0×100
式中，A0空白对照组吸光值；AS样品组吸光值。
1.2超氧阴离子自由基清除作用
用蒸馏水将实施例1-6、对比例1-7中的组合物配置成浓度为1mg/mL待测样品。取0.4mL样品溶液加入50mmol/L的Tris-HCl缓冲溶液(pH8.3)0.4mL，以蒸馏水代替样品做空白对照组。震荡混匀，25℃水浴中保温10min后加入1.5mmol/L的邻苯三酚盐酸溶液0.1mL(25℃水浴预热)，迅速混匀反应5min，每隔30s在320nm处测定吸光度值。用去离子水和1mg/mL的VC水溶液替代样品分别作空白对照和阳性对照。作吸光值随时间变化的回归方程，曲线斜率为邻苯三酚自氧化速率，样品对超氧阴离子的清除能力按下式计算：
超氧阴离子自由基清除率/％＝(ΔA0/min-ΔAs/min)/ΔA0/min×100
式中，ΔA0/min：空白对照组吸光值曲线斜率；ΔAs/min：样品组吸光值曲线斜率。
1.3组合物抗氧化能力测试结果
本发明组合物对于ABTS自由基清除作用、超氧阴离子自由基清除作用如表1所示。从结果可以看出，本发明组合物对于上述两种自由基的清除率可达80％以上。对于ABTS自由基的清除作用最高可达93.47％，对于超氧阴离子自由基清除作用最高可达91.85％，基本上与VC接近，说明本发明组合物抗氧化效果优异。
表1组合物抗氧化效果测试
ABTS自由基清除作用 超氧阴离子自由基清除作用
实施例1 82.45％ 83.61％
实施例2 80.36％ 81.36％
实施例3 84.21％ 82.54％
实施例4 86.24％ 85.42％
实施例5 92.21％ 91.85％
实施例6 93.47％ 90.76％
对比例1 74.34％ 72.62％
对比例2 65.48％ 68.25％
对比例3 70.26％ 73.14％
对比例4 25.38％ 27.36％
对比例5 19.87％ 17.69％
对比例6 20.19％ 23.57％
对比例7 72.38％ 69.24％
VC对照组 95.36％ 93.45％
2.皮肤皱纹改善效果评价
取本发明实施例2、3、5、6，对比例2、3中的组合物按照质量比1％分别添加至下述常规化妆品膏霜基质中：C12-15烷醇苯甲酸酯25％，丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物0.25％，1,3-丁二醇1.5％，甘油1.5％，聚二甲基硅氧烷PEG-7异硬脂酸酯0.5％，三乙醇胺0.25％，DMDM乙内酰脲0.4％，测试组合物1％，余量为水。
选取年龄为40-50岁的志愿者35名(其中，男性10名，女性25名)，志愿者排除条件符合《化妆品接触性皮炎诊断标准及处理原则》中的排除标准。将志愿者分为7组，每组5人，其中一组使用不添加测试样品的常规化妆品基质。测试期间，受试者每天早晚分别取1g等量测试膏霜在脸部涂抹充分吸收，连续使用8周。与此同时，志愿者脸部的实验部位在测试期间不能涂抹其他化妆品。
利用ANTERA 3D(Miravex，Ireland)对皱纹改善效果进行评价，并在上述样品使用前和使用后分别测定志愿者左侧睚部位。为了测试的重现性，与样品使用前测定的图像进行重叠来测定相同部位。利用ANTERA 3D配套软件ANTERApro software对拍摄图形进行匹配后，对相同的测定部位进行分析。利用凹痕指数(Indentation index)表示皮肤的皱纹值。表2罗列出志愿者在试用实施例和对比例的化妆品前后的皱纹值变化率。变化率越大，说明皱纹改善效果更优，皱纹的变化量也越大。测定结果为除去最大值和最小值的3次测量平均值。
表2皮肤皱纹值变化率
皱纹值变化率
实施例2 8.67％
实施例3 9.46％
实施例5 12.31％
实施例6 13.15％
对比例2 4.26％
对比例3 5.74％
化妆品基质 0.36％
从表2可以看出，本发明组合物对于皮肤皱纹值的改善效果比较明显，皱纹值变化率达8.67％以上，特别是当人参虫草发酵提取物通过合理的提取方法制备时，得到的组合物皱纹值变化率可达13.15％。本实验说明本发明中的组合物人参虫草发酵提取物、春榆提取物、玫瑰茄提取物通过合理组配，具有优异的抗氧化作用，进而明显改善皮肤皱纹状态。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.含人参虫草发酵提取物的组合物，其特征在于，该组合物包含：人参虫草发酵提取物、春榆提取物、玫瑰茄提取物。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述人参虫草发酵提取物是提取自蛹虫草与人参的固体发酵产物。
3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述人参虫草发酵提取物的制备方法如下：
(1)制备人参固体发酵基质：将人参按照料液比1:2-1:3(g/ml)加入去离子水充分润湿5h，在110-120℃下灭菌30min后制得人参固体发酵基质；
(2)粗糙脉孢霉发酵人参：将粗糙脉孢霉菌液活化、扩增培养后得粗糙脉孢霉种子液，将种子液加入到步骤(1)中的人参固体发酵基质，在35-37℃下暗光发酵5天，粗糙脉孢霉菌灭活；
(3)蛹虫草菌发酵人参：将蛹虫草菌株经复合PDA培养基平板活化后加入复合PDA液体培养基摇床培养，制备蛹虫草液体菌种；液体菌种接种到步骤(2)的人参固体发酵基质中，在20-25℃暗光培养20天即得人参虫草发酵产物；
(4)将步骤(3)中的人参虫草发酵产物清洗干燥后粉碎，加入料液比为1:10-1:15(g/ml)的50％乙醇，在50-60℃下提取8h后，将提取液通过大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，洗脱至流出液近无色，再用70-95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干后再冷冻干燥，即得人参虫草发酵提取物，该提取物为人参和蛹虫草提取物的混合物。
4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于所述步骤(3)中蛹虫草液体菌种与人参固体发酵基质的液料比为2:5-3:5(ml/g)。
5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，按质量百分数计，所述人参虫草发酵提取物8-15％，春榆提取物5-9％，玫瑰茄提取物7-10％。
6.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的人参虫草发酵提取物为人参根的蛹虫草发酵提取物。
7.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述春榆提取物为春榆根提取物，玫瑰茄提取物为玫瑰茄花提取物。
8.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含多元醇35-54％，水19-38％。
9.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述多元醇可以为乙二醇、甘油、1,2-戊二醇、1,3-丙二醇、丁二醇中的一种或组合。
10.根据权利要求1-9任一所述的组合物，其特征在于，所述组合物在化妆品中的应用。
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