CN111458439A - 共同基团法结合uplc-msms检测植物源农产品中螺虫乙酯及其烯醇代谢物的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种共同基团法结合UPLC‑MSMS检测植物源农产品中螺虫乙酯及其烯醇代谢物的方法，其特征在于包含以下步骤：a、取植物源性农产品，加入提取溶剂，匀浆分散提取，离心分层，取上清液，再次重复提取后，合并上清液；b、a步骤中上清液加入氯化钠，混匀，离心，取上层；c、取b步骤中上清液与PSA、C18和无水硫酸镁混匀，离心，取上清；d、c步骤中上清液与一定体积0.1％甲酸溶液定容，作为待测样品；e、采用共同基团法结合UPLC‑MSMS进行检测。与现有技术相比，本发明的优点在于：采用共同基团法进行检测，降低了驻留时间的不利影响，降低了基质抑制效应，提高了残留分析的稳定性和简便性。

Description

共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源农产品中螺虫乙酯及 其烯醇代谢物的方法
技术领域
本发明涉及一种共同基团检测方法，具体涉及一种共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源农产品中螺虫乙酯及烯醇代谢物的方法。
背景技术
螺虫乙酯(Spirotetramat)，化学名称为4-(乙氧基羰基氧基)-8-甲氧基-3-(2,5-二甲苯基)-1-氮杂螺[4,5]癸-3-烯-2-酮，结构如图1所示。
螺虫乙酯是由Bayer公司研发的一种具备双向内吸性的酮类广谱高效杀虫剂，其可在植物体内向上或向下传导，害虫取食后体内乙酰辅酶A羧化酶被抑制进而导致脂肪合成被中断，从而起到杀虫作用。螺虫乙酯可有效防治各种刺吸式口器害虫，如蚜虫、蓟马、木虱、粉蚧、粉虱和介壳虫等。可应用的主要作物包括棉花、大豆、柑橘、热带果树、坚果、葡萄、啤酒花、土豆和蔬菜等，另据研究表明其对重要益虫如瓢虫、食蚜蝇和寄生蜂具有良好的选择性。螺虫乙酯作为一种较为新颖的杀虫剂具有广阔的未来市场，目前其单剂或复配制剂在我国的登记数量已达近八十种，覆盖番茄、甘蓝、柑橘、柑橘等多种农作物。
研究表明，螺虫乙酯使用后会于植物或环境中发生代谢降解，其于植物上的主要代谢产物有四种，分别是螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷、羟基螺虫乙酯酮、单羟基螺虫乙酯，主要代谢途径如图2所示。其中，根据GB 2763-2019《食品安全国家标准-食品中农药最大残留限量》，螺虫乙酯的残留物为螺虫乙酯及其烯醇类代谢产物之和(以螺虫乙酯表示)，因此为科学监测螺虫乙酯的残留风险，需对螺虫乙酯及其烯醇代谢物进行检测，而相对应的多组分残留分析方法研究是其重要的技术支撑。
目前，螺虫乙酯的残留分析方法主要结合液相色谱串联质谱法(LC-MSMS)、液相色谱法(LC)、气相色谱法(GC)进行，其中液相色谱串联质谱法因具有对多组分分离度要求低、检测通量大等优点而被广泛使用。如钱训等利用QuEChERS方法结合UPLC-MSMS检测梨中的螺虫乙酯及其代谢物、兰丰等利用UPLC-MSMS检测果蔬中的螺虫乙酯及其代谢物残留。然而，在UPLC-MSMS使用中存在着一个不可忽视的问题：分析组分较多时，驻留时间无法满足最低的色谱峰采集点数要求，从而导致目标组分检测重现性低、定量不准确等问题。显然，这对于残留风险监测与评估是不利的。因此，需要发明一种可靠的、抗干扰能力强的、高效的螺虫乙酯及其烯醇代谢物残留分析方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的现状，提供一种共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源农产品中螺虫乙酯及烯醇代谢物的方法，该方法可以通过检测三种组分的共同基团部分分别对其进行定性定量分析，具有可靠性高、抗干扰能力强的、重现性高、高效等特点。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源农产品中螺虫乙酯及其烯醇代谢物的方法，其特征在于包括以下步骤：
a、取均质后的植物源农产品样品，加入提取溶剂乙腈，匀浆分散提取，离心分层，取上清液，剩余残渣按前述步骤重复提取，取上清液，合并两次离心得到的上清液得到上清液A；
其中，所述样品和乙腈的质量体积比为0.25～0.5g/mL；
b、向步骤a得到的上清液A里加入氯化钠，振荡，离心分层，取上清液后得到上清液B；
其中，所述氯化钠和步骤a中所述样品的质量比为0.5～1.0；
c、取一定体积步骤b得到的上清液B与PSA、C18和无水硫酸镁混匀净化后，离心，取上清液后得到上清液C；
其中，所述PSA、C18、无水硫酸镁的质量比为1.5:1:3；
所述PSA和步骤a中样品的质量比为0.02～0.04；
d、取一定体积步骤c得到的上清液C与一定体积的0.1％甲酸溶液混匀后，过0.22μm滤膜，得到待测样品；
其中，上清液C和0.1％甲酸溶液的体积比为1:4；
e、采用共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源中螺虫乙酯及其烯醇代谢物。
优选地，所述烯醇代谢物为螺虫乙酯烯醇和螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷中的至少一种。
优选地，所述植物源农产品为水果、蔬菜、粮食中的一种。
优选地，所述步骤a的离心步骤包括一次离心和二次离心，所述一次离心的离心转速为9000～10000r/min，离心时间为1～3min，所述二次离心的离心转速为9000～10000r/min，离心时间为1～3min。
优选地，：所述步骤b、c中的离心转速为9000～10000r/min，离心时间1～3minmin。
优选地，所述步骤e检测的液相条件为：
色谱柱：Waters Acquity BEH C18,2.1×100mm,1.7μm；
色谱柱柱温：35℃；
流动相：色谱纯0.1％甲酸溶液和色谱纯乙腈，采用梯度洗脱；
流动相比例：0min～0.5min为20％色谱纯乙腈，0.5min～3.5min由20％色谱纯乙腈变至80％色谱纯乙腈，3.5min～5.0min为80％色谱纯乙腈，5.0min～5.1min由80％色谱纯乙腈变至20％色谱纯乙腈，5.1min～7.0min为20％色谱纯乙腈；
流动相流速：0.300mL/min；
进样量：10.0μL。
优选地，所述步骤e检测的质谱条件为：
离子源：电喷雾离子源正源模式；
毛细管电压：2.0KV；
脱溶剂气流速：1000℃；
雾化气温度：500℃；
锥孔气流速：50L/h；
离子源温度：150℃；
离子扫描模式：多重反应监测模式。
检测离子对：302.0/216.0和302.0/270.0。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
(1)采用共同基团法进行检测，降低了多组分分析时对于采集点数的要求，提高了残留分析的可靠性，即针对螺虫乙酯及其两种主要的烯醇代谢物螺虫乙酯烯醇和螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷，以三者共有的基团部分为检测分析时的母离子，因此仅需要扫描一组定性定量离子对即可，无需多次分别扫描不同化合物的特征离子碎片；
(2)本发明将植物源农产品样品中的螺虫乙酯及其烯醇代谢物进行分离提取后，以三者共同基团为检测分析时的母离子，通过UPLC-MSMS检测的液相条件的摸索使不同代谢物母离子在不同时间出峰，从而一次性对螺虫乙酯母体及其多种代谢物进行检测，快速且准确；
(3)PSA、C18、无水硫酸镁这些净化吸附剂的选择亦显著提高了共同基团法检测下的灵敏度，对该方法起重要的辅助作用。
附图说明
图1是本发明提供的螺虫乙酯的化学结构式；
图2是螺虫乙酯植物源产品中的代谢途径表达式及共同基团部分表达式；
图3是比较例A1～A7的螺虫乙酯及其烯醇代谢物测试结果(番茄基质)；
图4是比较例A1～A7的螺虫乙酯及其烯醇代谢物测试结果(柑橘果肉基质)；
图5a是比较例A2的螺虫乙酯及其烯醇代谢物的302.0/216.0离子对色谱图；
图5b是比较例A2的螺虫乙酯及其烯醇代谢物的302.0/270.0离子对色谱图；
图5c是比较例A2的螺虫乙酯及其烯醇代谢物的总离子流图；
图6a是实施例C1的常规多残留分析螺虫乙酯及其烯醇代谢物的特征离子图；
图6b是实施例A13的共同基团法分析螺虫乙酯及其烯醇代谢物的子离子色谱图；
图7a是实施例A13的共同基团法分析螺虫乙酯及其烯醇代谢物的总离子流图；
图7b是实施例D1的螺虫乙酯及其烯醇代谢物的总离子流图；
图7c是实施例D2的螺虫乙酯及其烯醇代谢物的总离子流图。
具体实施方式
以下结合附图实施例对本发明作进一步详细描述。
本发明针对图2中其中一条代谢途径，即螺虫乙酯降解为螺虫乙酯烯醇，进一步代谢为螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷，开发了此三者的残留分析方法。该方法通过检测螺虫乙酯及其二种烯醇代谢物的共同基团(图2框选部分)进行定性定量分析。
比较例A1～A7：
a、标准储备液的配制：称取10.12mg螺虫乙酯标准品于10.00mL容量瓶中，用乙腈定容，混匀得到1002mg/L螺虫乙酯标准储备液；另称取10.00mg螺虫乙酯烯醇标准品于10.00mL容量瓶中，用乙腈定容至10.00mL，混匀得到996mg/L螺虫乙酯烯醇标准储备液；称取10.00mg螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷标准品于10.00mL容量瓶中，用乙腈定容，混匀得到948mg/L螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷标准储备液。
b、标准中间液的配制：准确吸取0.998mL浓度为1002mg/L的螺虫乙酯标准储备液，用乙腈定容至10.00mL，混匀得到100mg/L螺虫乙酯标准中间液；准确吸取1.004mL浓度为996mg/L的螺虫乙酯烯醇标准储备液，用乙腈定容，混匀得到100mg/L螺虫乙酯烯醇标准中间液；准确吸取1.055mL浓度为948mg/L的螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷标准储备液，用乙腈定容至10.00mL，混匀得到100mg/L螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷标准中间液。
c、混合标准中间液的配制：各准确吸取1.000mL浓度为100mg/L螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷标准中间液于10.00mL容量瓶中，用乙腈定容至10.00mL，混匀得到10mg/L螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷混合标准中间液。
d、基质标准工作液的配制：准确移取上述螺虫乙酯及其代谢物的混合标准中间液，用定容溶液(空白上清液/0.1％甲酸溶液＝20/80，V/V)逐级稀释，得到浓度为0.0001mg/L、0.0005mg/L、0.001mg/L、0.005mg/L、0.010mg/L、0.050mg/L、0.10mg/L的系列基质标准工作液。
e、将上述系列基质标准工作液采用共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源中螺虫乙酯及其代谢物(比较例A1～A7所测试的基质标准工作液浓度分别为0.0001mg/L、0.0005mg/L、0.001mg/L、0.005mg/L、0.010mg/L、0.050mg/L、0.10mg/L)，测试条件如下：
液相条件：色谱柱为Waters Acquity BEH C18(2.1×100mm,1.7μm)；色谱柱柱温为35℃；进样量为10.0μL；流动相为0.1％甲酸溶液(A)和色谱纯乙腈(B)，采用梯度洗脱(如表1所示)；流动相流速为0.30mL/min。
表1液相梯度洗脱条件
Figure BDA0002462694090000051
质谱条件：离子源为电喷雾离子源正源模式(ESI+)；毛细管电压为2.0KV；脱溶剂气流速为1000℃；雾化气温度为500℃；锥孔气流速为50L/h；离子源温度为150℃；离子扫描模式为多重反应监测模式(MRM)如表2所示。
表2多重反应监测条件
Figure BDA0002462694090000052
注：*为定量离子
其中，测试时的空白溶液选用番茄或柑橘的空白基质溶液。
比较例A1～A7的螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷的测试结果分别如图3和图4所示，其中图3测试时选用的空白溶液为番茄的空白基质溶液，图4测试时选用的空白溶液为柑橘的空白基质溶液。
比较例A2的螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷的302.0/216.0离子对色谱图如图5a所示，比较例A2的螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷的302.0/270.0离子对色谱图如图5b所示，比较例A2的螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷的总离子流图如图5c所示，测试时选用的空白溶液为番茄的空白基质溶液。
为了衡量分析方法的正确度和精密度，本发明利用添加回收方法来进行试验，分别向空白样品中添加螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷混合标准溶液，添加浓度分别为0.01mg/kg、0.10mg/kg、1.0mg/kg，每个浓度重复5次。
实施例A1～A15：
a、标准储备液的配制：同比较例A1；
b、称取5g均质后的植物源农产品空白样品置于50mL离心管中，分别添加不同量的螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷混合标准溶液；
c、分别向上述步骤b中的离心管中加入15.0mL乙腈，以11000r/min匀浆提取1min后，以9500r/min离心2min，取上清液，剩余残渣加入10.0mL乙腈，以11000r/min匀浆提取1min后，以9500r/min离心2min，合并两次上清液；
d、加入3g氯化钠于上清液中，剧烈震荡1min，再以9500r/min离心2min，待净化；
e、吸取2mL上清液于装有75mg PSA、50mg C18和150mg无水硫酸镁的10mL塑料离心管中，漩涡振摇1min后9500r/min离心2min；
f、吸取0.2mL净化液与0.8mL0.1％甲酸溶液涡旋混匀，过0.22μm滤膜后供UPLC-MS/MS测定；
g、采用UPLC-MSMS检测植物源中螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷，测试条件同比较例A1。
实施例A1～A15的反应条件和测试结果如表3～表5所示。
表3实施例A1～A15不同农产品中螺虫乙酯的添加回收试验结果
Figure BDA0002462694090000061
Figure BDA0002462694090000071
表4实施例A1～A15不同农产品中螺虫乙酯烯醇的添加回收试验结果
Figure BDA0002462694090000072
表5实施例A1～A15不同农产品中螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷的添加回收试验结果
Figure BDA0002462694090000073
Figure BDA0002462694090000081
该方法适用于水果、蔬菜、粮食等产品上螺虫乙酯及其烯醇代谢物的检测分析，为验证该分析方法的实际应用效果，于市场上购买了柑橘、香蕉、黄瓜、番茄、苹果等样品各三份进行试验。
实施例B1～B15：
a、称取均质后的植物源农产品样品5g置于50mL离心管中，加入15.0mL乙腈，以11000r/min匀浆提取1min后，以9500r/min离心2min，取上清液，剩余残渣加入10.0mL乙腈，以11000r/min匀浆提取1min后，以9500r/min离心2min，合并两次上清液；
b、加入3g氯化钠于上清液中，剧烈震荡1min，再以9500r/min离心2min，待净化；
c、吸取2mL上清液于装有75mg PSA、50mg C18和150mg无水硫酸镁的10mL塑料离心管中，漩涡振摇1min后9500r/min离心2min；
d、吸取0.2mL净化液与0.8mL0.1％甲酸溶液涡旋混匀，过0.22μm滤膜后供UPLC-MS/MS测定；
e、采用UPLC-MSMS检测植物源中螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷，测试条件同比较例A1。
实施例B16：
a、称取均质后的植物源农产品样品5g置于50mL离心管中，加入15.0mL乙腈，以9500r/min匀浆提取1min后，以9500r/min离心2min，取上清液，剩余残渣加入10.0mL乙腈，以9500r/min匀浆提取1min后，以9500r/min离心2min，合并两次上清液；
b、加入2g氯化钠于上清液中，剧烈震荡1min，再以9500r/min离心2min，待净化；
c、吸取2mL上清液于装有150mg PSA、100mg C18和300mg无水硫酸镁的10mL塑料离心管中，漩涡振摇1min后9500r/min离心2min；
d、吸取0.2mL净化液与0.8mL0.1％甲酸溶液涡旋混匀，过0.22μm滤膜后供UPLC-MS/MS测定；
e、采用UPLC-MSMS检测植物源中螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷，测试条件同比较例A1。
实施例B17：
a、称取均质后的植物源农产品样品5g置于50mL离心管中，加入15.0mL乙腈，以14000r/min匀浆提取1min后，以9500r/min离心2min，取上清液，剩余残渣加入10.0mL乙腈，以14000r/min匀浆提取1min后，以9500r/min离心2min，合并两次上清液；
b、加入5g氯化钠于上清液中，剧烈震荡1min，再以9500r/min离心2min，待净化；
c、吸取2mL上清液于装有38mg PSA、25mg C18和75mg无水硫酸镁的10mL塑料离心管中，漩涡振摇1min后9500r/min离心2min；
d、吸取0.2mL净化液与0.8mL0.1％甲酸溶液涡旋混匀，过0.22μm滤膜后供UPLC-MS/MS测定；
e、采用UPLC-MSMS检测植物源中螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷，测试条件同比较例A1。
实施例B1～B17的反应条件和测试结果如表6所示。
表6实施例B1～B17部分市售农产品中螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷的残留检测结果
Figure BDA0002462694090000091
Figure BDA0002462694090000101
为了说明本发明的有益效果，本发明提供以下实施例：
实施例C1：
与实施例A13不同之处在于，其检测方式为常规多残留分析方法，即对不同化合物组分分别扫描其特征离子对，螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷的定性定量离子对分别为374>330/302.02、302.04>269.99/215.92和464.17>302.06/215.91。
实施例D1：
与实施例A13不同之处在于，其仅仅采用PSA为净化吸附剂进行净化。
实施例D2：
与实施例A13不同之处在于，其未采用PSA、C18和无水硫酸镁在内的净化吸附剂进行净化。
实施例C1的螺虫乙酯及其烯醇代谢物的特征离子图如图6a所示，实施例A13的螺虫乙酯及其烯醇代谢物子离子色谱图分别如图6b所示，测试时选用的空白溶液为番茄的空白基质溶液。
实施例A13的螺虫乙酯及其烯醇代谢物总离子流图如图7a所示，实施例D1的螺虫乙酯及其烯醇代谢物总离子流图如图7b所示，实施例D2的螺虫乙酯及其烯醇代谢物总离子流图如图7c所示，测试时选用的空白溶液为番茄的空白基质溶液。
注：
所有比较例和实施例中使用的原料、设备等均为已知产品，并可通过购买市售产品获得：
UPLC-MS/MS(Waters Acquity UPLC-XEVO TQ-S Micro,美国Waters)；匀浆机(T25，德国IKA)；高速离心机(3K15，德国Sigma)；旋涡混合器(GENIUS3，德国IKA)；电子天平(Quintix124，瑞士Mettler Toledo)；十万分之一电子天平(XPE205，瑞士MettlerToledo)；
乙腈(色谱纯，德国Merk)；N-丙基乙二胺(PSA)、十八烷基硅烷键合硅胶(C18)、无水硫酸镁(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；氯化钠(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；纯水(娃哈哈集团有限公司)；螺虫乙酯标准品(纯度为99.0％，德国Dr.Ehrenstorfer GmbH)、螺虫乙酯烯醇标准品(纯度为99.6％，德国Dr.EhrenstorferGmbH)、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷标准品(纯度为94.86％，德国Dr.Ehrenstorfer GmbH)。
对实验结果分析如下：
(1)从图3和图4中可以看出，进样浓度与响应值之间的线性关系良好，相关系数r均在0.998以上；
从图5可以看出，螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷三种化合物分离度良好，峰形尖锐对称，螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖、螺虫乙酯三者响应依次增加。整体而言，检测背景较为干净，说明基质干扰较轻；
(2)从表3、表4和表5可以看出，该分析方法螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷的回收率均较高，精密度良好，满足农药残留分析的相关要求；
(3)从表6可以看出，部分样品中有检出螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷，说明本方法能够快速准确地检测出实际样品中螺虫乙酯及其烯醇代谢物的残留量，应用效果良好；
(4)从图6可以看出，常规多残留分析方法下，需要分别扫描螺虫乙酯、螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷三者的不同特征离子碎片，这种情况下容易因为驻留时间的大小影响不同离子的采集点数，进而导致各化合物的定量不准、重现性低等后果。但采用共同基团法进行检测时，仅需要扫描一组离子碎片即可，极大地提高了残留检测的稳定性和简便性；
(5)从图7可以看出，PSA、C18和无水硫酸镁净化后检测灵敏度略有提高，同时净化对于仪器也有一定的保护作用。
综上所述，本发明共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源农产品中螺虫乙酯及其烯醇代谢物(螺虫乙酯烯醇、螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷)，前处理过程安全、简便、高效，共同基团检测方法能有效提高残留检测的稳定性和简便性，PSA、C18和无水硫酸镁净化则在一定程度上提高了灵敏度。分析方法的准确度和精密度等亦均符合农药残留的分析要求，对市售农产品的检测分析则更加快速高效，可以为监测植物源农产品中螺虫乙酯及其烯醇代谢物提供一定的技术支撑。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明保护范围。

Claims (7)

1.一种共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源农产品中螺虫乙酯及其烯醇代谢物的方法，其特征在于包括以下步骤：
a、取均质后的植物源农产品样品，加入提取溶剂乙腈，匀浆分散提取，离心分层，取上清液，剩余残渣按前述步骤重复提取，取上清液，合并两次离心得到的上清液得到上清液A；
其中，所述样品和乙腈的质量体积比为0.25～0.5g/mL；
b、向步骤a得到的上清液A里加入氯化钠，振荡，离心分层，取上清液后得到上清液B；
其中，所述氯化钠和步骤a中所述样品的质量比为0.5～1.0；
c、取一定体积步骤b得到的上清液B与PSA、C18和无水硫酸镁混匀净化后，离心，取上清液后得到上清液C；
其中，所述PSA、C18、无水硫酸镁的质量比为1.5:1:3；
所述PSA和步骤a中样品的质量比为0.02～0.04；
d、取一定体积步骤c得到的上清液C与一定体积的0.1％甲酸溶液混匀后，过0.22μm滤膜，得到待测样品；
其中，上清液C和0.1％甲酸溶液的体积比为1:4；
e、采用共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源中螺虫乙酯及其烯醇代谢物。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述烯醇代谢物为螺虫乙酯烯醇和螺虫乙酯烯醇葡萄糖苷中的至少一种。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述植物源农产品为水果、蔬菜、粮食中的一种。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤a的离心步骤包括一次离心和二次离心，所述一次离心的离心转速为9000～10000r/min，离心时间为1～3min，所述二次离心的离心转速为9000～10000r/min，离心时间为1～3min。
5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤b、c中的离心转速为9000～10000r/min，离心时间1～3min min。
6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤e检测的液相条件为：
色谱柱：Waters Acquity BEH C18,2.1×100mm,1.7μm；
色谱柱柱温：35℃；
流动相：色谱纯0.1％甲酸溶液和色谱纯乙腈，采用梯度洗脱；
流动相比例：0min～0.5min为20％色谱纯乙腈，0.5min～3.5min由20％色谱纯乙腈变至80％色谱纯乙腈，3.5min～5.0min为80％色谱纯乙腈，5.0min～5.1min由80％色谱纯乙腈变至20％色谱纯乙腈，5.1min～7.0min为20％色谱纯乙腈；
流动相流速：0.300mL/min；
进样量：10.0μL。
7.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤e检测的质谱条件为：
离子源：电喷雾离子源正源模式；
毛细管电压：2.0KV；
脱溶剂气流速：1000℃；
雾化气温度：500℃；
锥孔气流速：50L/h；
离子源温度：150℃；
离子扫描模式：多重反应监测模式。
检测离子对：302.0/216.0和302.0/270.0。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104407090A (zh) * 2014-12-30 2015-03-11 郭庆龙 一种gc-nci-ms测定果蔬中螺虫乙酯残留的方法
CN104458968A (zh) * 2014-12-30 2015-03-25 郭庆龙 一种果蔬中螺虫乙酯残留量的gc-ei-ms测定方法
CN108982730A (zh) * 2018-09-29 2018-12-11 宁波市农业科学研究院 共同基团法结合uplc-msms检测植物源农产品中咪鲜胺代谢物的分析方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104407090A (zh) * 2014-12-30 2015-03-11 郭庆龙 一种gc-nci-ms测定果蔬中螺虫乙酯残留的方法
CN104458968A (zh) * 2014-12-30 2015-03-25 郭庆龙 一种果蔬中螺虫乙酯残留量的gc-ei-ms测定方法
CN108982730A (zh) * 2018-09-29 2018-12-11 宁波市农业科学研究院 共同基团法结合uplc-msms检测植物源农产品中咪鲜胺代谢物的分析方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
YONGTAO HAN 等: "The fate of spirotetramat and its metabolite spirotetramat-enol in apple samples during apple cider processing", 《FOOD CONTROL》 *
刘炎 等: "QuEChERS结合超高效液相色谱-串联质谱法同时测定番茄中噻虫嗪、噻虫胺、螺虫乙酯及其代谢物残留", 《分析测试学报》 *
李俞洁 等: "超高效液相色谱-四极杆/飞行时间质谱法快速筛查苹果中的螺虫乙酯及其代谢物", 《食品安全质量检测学报》 *

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