CN111434759A - 一种含荧光素的多酶清洗剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含荧光素的多酶清洗剂及其制备方法，所述多酶清洗剂包括以下重量份的各组分：去离子水100份、防冻剂10～40份、表面活性剂20～40份、消泡剂0.5～2份、防腐剂0.1～1份、阻垢剂0.5～2份、生物酶10～40份、荧光素20‑40、荧光素酶5～10份。采用本发明技术方案的有益之处在于，所配置的多酶清洗剂，在清洗手术后的器械，即能有效去除器械沾染的污物，同时去除器械取出后水中石灰沉淀物及矿物质所形成的水垢，以及其他无机物形成的污迹和斑点等，并且使未被清洁的污渍可被荧光检测仪探知，为实时在线检测创造了有利条件。

Description

一种含荧光素的多酶清洗剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及清洗剂技术领域，尤其涉及一种医用含荧光素-荧光素酶的多酶清洗剂及其制备方法。

背景技术

随着我国国民经济的发展，我国医疗水平和医疗技术发展迅速，医疗器械的用量也大幅增加。许多医疗器械都是非一次性的重复使用器械，这些器械在与病患接触后通常表面残留大量污物(包扩血液、组织、蛋白质等)及部分微生物，需要通过足够的清洗才能满足其再次使用。目前医疗器械清洗用清洗剂主要有传统的化学清洗剂和医用多酶清洗剂。传统的化学清洗剂用量大、污染大，对金属的医疗器械具有腐蚀作用。而医用多酶清洗剂多由表面活性剂和各种生物酶复配而成，其中的生物酶主要包括蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、淀粉酶等，这些酶能有效地分解和去除粘附在医疗器械上的蛋白、多糖、脂肪和碳水化合物，使残留在医疗器械上的有机物、微生物的数量减至最少。且酶清洗剂的pH值接近中性，基本没有腐蚀性，其抗沉积的作用使经浸泡后的器械更易于清洁，无需反复擦洗，解决了过去因使用化学清洗剂或手工擦洗使器械表面容易出现毛糙、锈蚀，具有高效清洗、省时省力的双重优点，并减少了器械的损耗，提高了使用效率。

市场上通用的酶清洗剂主要依靠表面活性剂与酶的联合作用使污物从器械表面分离，再依靠酶对溶解在清洗液中的污物进行分解。在表面活性剂的选择上常见的包括非离子表面活性剂，如聚氧化乙烯己基醚、聚氧化乙烯辛基醚、聚氧化乙烯癸基醚、聚氧化乙烯月桂基醚、聚氧化乙烯十六烷基醚，吐温系列或AEO系列表面活性剂，这些表面活性剂的应用已经被广泛的在各类技术报告中进行说明，如中国专利CN106010807B，CN104073368A，CN107937156A等。酶清洗剂中常用的生物酶主要包括蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、淀粉酶等，生物酶的活性决定着医用酶清洗剂的清洗效果的好坏及用量。在已有的技术方案中，部分技术方案认为应该将蛋白酶液与其它酶液分开贮存，只在使用时将蛋白酶液和其它酶液按一定比例混合在一起，这样可以抑制蛋白酶对其他酶的分解，导致酶活性低、清洗效果差的问题，如中国专利CN102604754A，但总的来说这样的方法给酶清洗剂的使用和贮存带来不便。大部分的技术方案对几种酶是否需要分开贮存并没有特别说明，如中国专利CN101921671、CN102071113A、CN105385512A、CN104962402A等，显然蛋白酶对其他活性酶的影响可能是有限的，混合使用对酶的活性影响几乎不产生巨大的影响。

根据相关行业标准，清洗是复用医疗器械再处理中的前置步骤，并且已有越来越多的研究表明，清洗效果直接影响消毒灭菌的效果。然而，当前清洗效果检测手段有限，且缺乏实时的、在线的检测。如果在多酶清洗剂中加入标记成分，则可为清洗效果实时在线检测创造条件。

发明内容

本发明的目的是提供一种含有可产生荧光标记物的酶清洗剂，这种酶清洗剂能够快速去除医疗器械上的医疗污染物，不会粘结在器械表面，分解效果好，清洁效果稳定，且能通过特定的生化反应让残留的有机污渍发出荧光，为实现复用医疗器械的清洗效果实时在线检测提供便利。此外，本发明还要提供一种含有可产生荧光标记物的酶清洗剂的制备方法。

为了解决上述问题，本发明采用以下技术方案：

本发明的第一方面，提供一种含荧光素的多酶清洗剂，包括以下重量份的各组分：去离子水100份、防冻剂10～40份、表面活性剂20～40份、消泡剂0.5～2份、防腐剂0.1～1份、阻垢剂0.5～2份、生物酶10～40份、荧光素20-40、荧光素酶5～10份。

其中，所述防冻剂是乙醇、乙二醇、丙醇、正丁醇、甘油、聚乙二醇中的一种或几种，所述聚乙二醇的分子量为800～4000。

其中，所述表面活性剂为非离子型表面活性剂或阴-非离子型表面活性剂。

所述非离子型表面活性剂是碳链长度为C10～C18的脂肪醇聚氧乙烯醚、碳链长度为C10～C18的烷基酚聚氧乙烯醚、聚氧乙烯烷基酰醇胺、脂肪酸聚氧乙烯、聚氧乙烯烷基胺、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚醚中的一种。

所述阴-非离子型表面活性剂是聚壬基酚聚氧乙烯醚硫酸钠、十二醇聚氧乙烯醚硫酸钠，十二烷基硫酸钠、正辛醇聚氧乙烯醚羧酸盐、十二烷基醇聚氧乙烯醚羧酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚磺酸盐、烷基酚聚氧乙烯醚磺酸盐、乙二酰胺十二醇聚氧乙烯(12)酯磺酸钠中的一种。

其中，所述消泡剂是高碳醇脂肪酸酯复合物、聚氧乙烯聚氧丙烯季戊四醇醚、聚氧乙烯聚氧丙醇胺醚、聚氧丙烯甘油醚和聚氧丙烯聚氧乙烯甘油醚中的一种。

其中，所述防腐剂是5-氯-2甲基-4异噻唑啉-3酮、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、甲基异塞唑啉酮中的一种。

其中，所述阻垢剂是苯骈三氮唑钠，巯基苯骈噻唑钠，甲基苯骈三氮唑中的一种。

其中，所述生物酶包括纤维素酶、中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、木聚糖酶，纤维素酶、中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、木聚糖酶的重量比例为1:3:1:4:1。

其中，所述的荧光素是：D-虫荧光素游离酸，异硫氰酸荧光素，羧基荧光素，四氯荧光素，羧基-4',5'-二氯-2',7'-二甲氧基荧光素，羧基四甲基罗丹明中的一种。

其中，所述荧光素酶是可以催化三磷酸腺苷与荧光素反应的生物酶。

本发明的第二方面，提供一种含荧光素的多酶清洗剂的制备方法，用于制备上述的多酶清洗剂，包括以下步骤：

步骤一、称取相应重量份的各组份；

步骤二、在去离子水中加入防冻剂、表面活性剂，搅拌溶解后加入消泡剂、防腐剂、阻垢剂搅拌至完全溶解；

步骤三、向溶液中加入生物酶及荧光素酶，前一种酶溶解后再加入后一种酶，搅拌2h；

步骤四、加入荧光素，搅拌2小时，再用盐酸调整pH到7，混合均匀即得多酶清洗剂。

采用本发明技术方案的有益之处在于，所配置的多酶清洗剂，在清洗手术后的器械，即能有效去除器械沾染的污物，同时去除器械取出后水中石灰沉淀物及矿物质所形成的水垢，以及其他无机物形成的污迹和斑点等，并且使未被清洁的污渍可被荧光检测仪探知，为实时在线检测创造了有利条件。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明。

实施例1

步骤一、称取相应重量份的各组分。

步骤二、在100份去离子水中加入10份乙醇、20份脂肪醇聚氧乙烯醚(碳链长度C₁₀)，搅拌溶解后加入0.5份高碳醇脂肪酸酯复合物，1份2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮，2份巯基苯骈噻唑钠搅拌至完全溶解。

步骤三、依次加入纤维素酶、中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、木聚糖酶和荧光素酶，前一种酶溶解后再加入后一种酶，搅拌2h，所述生物酶中几种酶的重量例为1:3:1:4:1，生物酶的总重量份为40份，所述荧光素酶的重量份为5份。

步骤四、加入20分荧光素，搅拌2h，再用盐酸调整pH到7，混合均匀即得所述多酶清洗剂。

实施例2

步骤一、称取相应重量份的各组分。

步骤二、在100份去离子水中加入40份丙醇、40份烷基酚聚氧乙烯醚(碳链长度C₁₈)，搅拌溶解后加入2份聚氧乙烯聚氧丙烯季戊四醇醚，0.1份5-氯-2甲基-4异噻唑啉-3酮，0.5份苯骈三氮唑钠搅拌至完全溶解。

步骤三、依次加入纤维素酶、中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、木聚糖酶和荧光素酶，前一种酶溶解后再加入后一种酶，搅拌2h，所述生物酶中几种酶的重量例为1:3:1:4:1，生物酶的总重量份为10份，所述荧光素酶的重量份为10份。

步骤四、加入40份荧光素，搅拌2h，再用盐酸调整pH到7，混合均匀即得所述多酶清洗剂。

实施例3

步骤一、称取相应重量份的各组分。

步骤二、在100份去离子水中加入30份聚乙二醇800、30份聚氧乙烯烷基酰醇胺，搅拌溶解后加入1份聚氧乙烯聚氧丙醇胺醚，0.8份对羟基苯甲酸丙酯，0.8份甲基苯骈三氮唑搅拌至完全溶解。

步骤三、依次加入纤维素酶、中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、木聚糖酶和荧光素酶，前一种酶溶解后再加入后一种酶，搅拌2h，所述生物酶中几种酶的重量例为1:3:1:4:1，生物酶的总重量份为30份，所述荧光素酶的重量份为8份。

步骤四、加入30份荧光素，搅拌2h，再用盐酸调整pH到7，混合均匀即得所述多酶清洗剂。

对比例

购买市售的两款多酶清洗剂，编号为S1、S2。实施例1、实施例2、实施例3的多酶清洗剂，编号分别为D1、D2、D3。

性能测试：

将使用后的药碗、镊子、止血钳和髋臼锉各30个，放入多酶清洗剂和水质量比为1：500的溶液中浸泡30min，流动水下冲洗，然后放入称有多酶清洗剂和水质量比为1：500溶液的超声清洗机中超声10min，取出用刷子清洗并用流动清水反复冲洗，确定无污物后擦拭干净，放入烘干槽内烘干。采用目测和放大镜检查的方法对清洗效果进行检查，以水垢斑、锈斑、污迹无残留为合格。

准备使用后的重污染药碗、镊子、止血钳和髋臼锉各30个，清洗程序如上所述，清洗时间为上述三分之一，采样荧光光度检测仪采样检测，荧光强度大于100的为合格。

实验结果

使用的D1、D2、D3的清洗合格率为100％，使用S1、S2清洗合格率为100％。

荧光检测情况：使用D1、D2、D3均有荧光强度显示，且荧光强度均高于100，合格率为100％，使用S1、S2合格率为0％。

以上应用了具体个例对本发明进行阐述，只是用于帮助理解本发明，并不用以限制本发明。对于本发明所属技术领域的技术人员，依据本发明的思想，还可以做出若干简单推演、变形或替换。

Claims (10)

1.一种含荧光素的多酶清洗剂，其特征在于，包括以下重量份的各组分：去离子水100份、防冻剂10～40份、表面活性剂20～40份、消泡剂0.5～2份、防腐剂0.1～1份、阻垢剂0.5～2份、生物酶10～40份、荧光素20-40、荧光素酶5～10份。

2.如权利要求1所述的一种含荧光素的多酶清洗剂，其特征在于：所述防冻剂是乙醇、乙二醇、丙醇、正丁醇、甘油、聚乙二醇中的一种或几种，所述聚乙二醇的分子量为800～4000。

3.如权利要求1所述的一种含荧光素的多酶清洗剂，其特征在于：所述表面活性剂为非离子型表面活性剂或阴-非离子型表面活性剂。

4.如权利要求3所述的一种含荧光素的多酶清洗剂，其特征在于：所述非离子型表面活性剂是碳链长度为C10～C18的脂肪醇聚氧乙烯醚、碳链长度为C10～C18的烷基酚聚氧乙烯醚、聚氧乙烯烷基酰醇胺、脂肪酸聚氧乙烯、聚氧乙烯烷基胺、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚醚中的一种。

5.如权利要求3所述的一种含荧光素的多酶清洗剂，其特征在于：所述阴-非离子型表面活性剂是聚壬基酚聚氧乙烯醚硫酸钠、十二醇聚氧乙烯醚硫酸钠，十二烷基硫酸钠、正辛醇聚氧乙烯醚羧酸盐、十二烷基醇聚氧乙烯醚羧酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚磺酸盐、烷基酚聚氧乙烯醚磺酸盐、乙二酰胺十二醇聚氧乙烯(12)酯磺酸钠中的一种。

6.如权利要求1所述的一种含有含荧光素的多酶清洗剂，其特征在于：所述消泡剂是高碳醇脂肪酸酯复合物、聚氧乙烯聚氧丙烯季戊四醇醚、聚氧乙烯聚氧丙醇胺醚、聚氧丙烯甘油醚和聚氧丙烯聚氧乙烯甘油醚中的一种。

7.如权利要求1所述的一种含荧光素的多酶清洗剂，其特征在于：所述防腐剂是5-氯-2甲基-4异噻唑啉-3酮、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、甲基异塞唑啉酮中的一种；所述阻垢剂是苯骈三氮唑钠，巯基苯骈噻唑钠，甲基苯骈三氮唑中的一种。

8.如权利要求1所述的一种含荧光素的多酶清洗剂，其特征在于：所述生物酶包括纤维素酶、中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、木聚糖酶，纤维素酶、中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、木聚糖酶的重量比例为1:3:1:4:1。

9.如权利要求1所述的一种含荧光素的多酶清洗剂，其特征在于：所述的荧光素是：D-虫荧光素游离酸，异硫氰酸荧光素，羧基荧光素，四氯荧光素，羧基-4',5'-二氯-2',7'-二甲氧基荧光素，羧基四甲基罗丹明中的一种。

10.一种含荧光素的多酶清洗剂的制备方法，用于制备权利要求1-9任一项所述的多酶清洗剂，包括以下步骤：

步骤一、称取相应重量份的各组份；

步骤二、在去离子水中加入防冻剂、表面活性剂，搅拌溶解后加入消泡剂、防腐剂、阻垢剂搅拌至完全溶解；

步骤三、向溶液中加入生物酶及荧光素酶，前一种酶溶解后再加入后一种酶，搅拌2h；

步骤四、加入荧光素，搅拌2h，再用盐酸调整pH到7，混合均匀即得多酶清洗剂。