CN111423489A - 抗氧化肽、含有该抗氧化肽的大豆蛋白水解物 - Google Patents
抗氧化肽、含有该抗氧化肽的大豆蛋白水解物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111423489A CN111423489A CN202010520655.7A CN202010520655A CN111423489A CN 111423489 A CN111423489 A CN 111423489A CN 202010520655 A CN202010520655 A CN 202010520655A CN 111423489 A CN111423489 A CN 111423489A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- antioxidant
- soybean protein
- protein hydrolysate
- peptide
- antioxidant peptide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0815—Tripeptides with the first amino acid being basic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
提供能用于食品或药品的、显示高抗氧化活性的抗氧化肽、含有该抗氧化肽的大豆蛋白水解物。所述抗氧化肽序列为显示高ORAC值的抗氧化肽序列KYQ、显示高DPPH值的抗氧化肽序列ERQ、显示高ORAC值的抗氧化肽序列KYR、显示高DPPH值的抗氧化肽序列ERL。
Description
技术领域
本发明涉及抗氧化肽、含有该抗氧化肽的大豆蛋白水解物、包含该抗氧化肽或该大豆蛋白水解物的食品或药品、以及该抗氧化肽或该大豆蛋白水解物在抗氧化剂制造中的用途。
背景技术
包括人在内的需氧型生物为了生存而通过呼吸摄入氧,此时摄入体内的氧的一部分在能量代谢时转变为过氧化物自由基、过氧化氢、羟基自由基等活性氧物种。这样的活性氧物种原本参与以细菌或病毒感染时的巨噬细胞的病原体除去机制为代表的生物体防御等,在维持健康方面发挥重要的功能。但是,认为由于大气污染、紫外线等环境因素、或吸烟等生活习惯、精神压力等,生物体内的平衡被破坏,活性氧物种一旦过剩,就会与生物体中的蛋白质、脂质、DNA等发生反应,引起蛋白质变性、脂质过氧化物生成、遗传损伤等,从而导致发生生活习惯病、促进衰老。因此,逐渐认识到除了生物体所具有的机制以外,来自饮食的抗氧化活性成分的摄取对于维持健康也是非常重要的,并推荐积极地摄取抗氧化物质作为第7种营养素。
大豆据报告具有多种生理功能,关于抗氧化活性也有许多报告。例如,大豆异黄酮已被确认具有与其他类黄酮同样高的抗氧化活性。另外,关于大豆蛋白,据报道其水解物具有抗氧化活性,进而对显示抗氧化活性的肽序列也进行了鉴定。
其中,专利文献1中公开了:提供一种大豆蛋白水解方法,其使用了一种兼具内和外肽酶活性的酶来水解大豆蛋白,从而能增加可溶性部分,避免苦味部分,并且增强或提高抗氧化能力。然而,专利文献1中记载的可溶性大豆蛋白部分含有约3kDa~30kDa的肽,基本上不含低分子量的大豆蛋白。如非专利文献1中介绍的那样,大豆蛋白中,二肽和三肽在肠道中的吸收最佳,更大的肽通常难以被直接吸收。因此,可以认为,专利文献1中记载的肽过大,因而不适于吸收,在生物体内无法发挥明显作用,因此不实用。此外,专利文献2中记载的肽的大小也为500~5000,与二肽和三肽相比过大,因此同样被认为不实用。
进而,关于抗氧化能力的测定,开发了多种测定通过自由基等得到的反应产物的方法,但即使是相同的抗氧化物质,根据测定方法的不同,所测得的值也会不同,因此无法将由不同测定方法得到的测定值互相比较。作为代表性的抗氧化活性的测定方法,ORAC法是测定抗氧化物质通过对自由基供给氢原子而抑制底物氧化的功能的方法,另一方面,DPPH法是测定抗氧化物质通过对自由基或氧化物供给电子而抑制底物氧化的功能的方法。
迄今对于大豆蛋白水解物中所含的各种各样的肽,通过各方法评价了抗氧化功能,但尚未报告在各测定方法中显示高的抗氧化功能的二肽或三肽的序列,也尚未报告在ORAC法、DPPH法等各种测定方法中均显示高的抗氧化功能的大豆蛋白水解物。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本特开2005-80668号公报
专利文献2:日本特开平10-203994号公报
非专利文献
非专利文献1:Food Sci. Technol. Res., 13(1), 45-53, 2007
非专利文献2:J. Agric. Food. Chem., 52, 4026-4037, 2004
非专利文献3:J. Agric. Food. Chem., 56, 9246-9251, 2008
发明内容
发明要解决的问题
本发明是鉴于上述技术现状而做出的,其问题在于,提供能用于食品或药品的、显示高抗氧化活性的的抗氧化肽、以及在ORAC法、DPPH法等各种测定方法中均显示高的抗氧化功能的大豆蛋白水解物。
用于解决问题的方案
本发明人对上述问题进行了深入研究,其结果发现,在通过利用适当的蛋白水解酶对大豆蛋白进行分解而得到的大豆蛋白水解物中,具有特定氨基酸序列的三肽在ORAC法或DPPH法中显示高抗氧化活性,从而完成了本发明。
具体而言,本发明提供如下的技术方案。
[1] 一种抗氧化肽,其氨基酸序列为KYQ。
[2] 一种抗氧化肽,其氨基酸序列为ERQ。
[3] 一种大豆蛋白水解物,其包含上述[1]所述的抗氧化肽和/或[2]所述的抗氧化肽。
[4] 一种抗氧化肽,其氨基酸序列为KYR。
[5] 一种抗氧化肽,其氨基酸序列为ERL。
[6] 一种大豆蛋白水解物,其包含[4]所述的抗氧化肽和/或[5]所述的抗氧化肽。
[7] 一种食品,其含有上述[1]、[2]、[4]、[5]中任一项所述的抗氧化肽、或者[3]或[6]所述的大豆蛋白水解物。
[8] 一种抗氧化药品,其含有上述[1]、[2]、[4]、[5]中任一项所述的抗氧化肽、或者[3]或[6]所述的大豆蛋白水解物。
[9] 上述[1]、[2]、[4]、[5]中任一项所述的抗氧化肽、或者[3]或[6]所述的大豆蛋白水解物在抗氧化剂制造中的用途。
[10] 上述[1]、[2]、[4]、[5]中任一项所述的抗氧化肽、或者[3]或[6]所述的大豆蛋白水解物在制造抗氧化药品中的用途。
发明的效果
根据本发明,能够提供分子量足够低而易吸收、且显示高抗氧化活性的抗氧化肽、以及包含抗氧化肽的大豆蛋白水解物,并且能够基于该抗氧化肽提供显示高抗氧化活性的抗氧化剂。
具体实施方式
以下,对本发明的具体实施方式进行详细说明。需要说明的是,本发明并不限定于以下的实施方式,可以在其要旨的范围内进行各种变形来实施。
(抗氧化肽)
本发明的抗氧化肽在ORAC法或DPPH法中显示高抗氧化活性,氨基酸序列为KYQ、ERQ、KYR、ERL。其中,分别地,抗氧化肽序列KYQ显示高ORAC值,抗氧化肽序列ERQ显示高DPPH值,抗氧化肽序列KYR显示高ORAC值,抗氧化肽序列ERL显示高DPPH值。
其中,氨基酸序列KYQ表示赖氨酸-酪氨酸-谷氨酰胺,也可以记载为Lys-Tyr-Gln。氨基酸序列ERQ表示谷氨酸-精氨酸-谷氨酰胺,也可以记载为Glu-Arg-Gln。氨基酸序列KYR表示赖氨酸-酪氨酸-精氨酸,也可以记载为Lys-Tyr-Arg。氨基酸序列ERL表示谷氨酸-精氨酸-亮氨酸,也可以记载为Glu-Arg-Leu。
本发明的抗氧化肽的制造方法没有特别限定,例如可以采用通常用于制造多肽的化学合成法或生物合成法。作为化学合成法,可列举出Boc合成法、Fmoc合成法等。其中,Fmoc合成法由于最终的脱保护反应条件温和,因此避免酸引起的副反应的观点出发是优选的。
作为生物合成法,可列举出发酵法、酶解法、基因工程法。作为典型的例子,可以通过酶解法将后述的大豆蛋白原料分解,来制备包含本发明的抗氧化肽的大豆蛋白水解物。需要说明的是,本发明的抗氧化肽可以从含有其的大豆蛋白水解物中分离后用作抗氧化剂,也可以以含有在大豆蛋白水解物中的形态用作抗氧化剂。
(抗氧化作用:ORAC)
本发明的抗氧化肽显示高的抗氧化活性。对于该抗氧化肽所具有的抗氧化活性,可以采用通过非专利文献2中记载的方法测定的“ORAC”(Oxygen Radical AbsorbanceCapacity:氧自由基吸收能力)的值(单位:μmol TE/mmol)作为指标。需要说明的是,单位中的“TE”为“Trolox equivalent(Trolox当量)”的简称,“Trolox”为标准物质“6-羟基-2,5,7,8-四甲基色满-2-羧酸”的注册商标。ORAC值越高,表示氧自由基吸收能力即抗氧化活性越高。
(抗氧化作用:DPPH)
本发明的抗氧化肽显示高的抗氧化活性。对于该抗氧化肽所具有的抗氧化活性,可以采用通过非专利文献3中记载的方法测定的“DPPH”(1,1-二苯基-2-苦基肼)自由基消除活性的值(单位:μmol TE/mmol)作为指标。需要说明的是,单位中的“TE”为“Troloxequivalent(Trolox当量)”的简称,“Trolox”为标准物质“6-羟基-2,5,7,8-四甲基色满-2-羧酸”的注册商标。DPPH自由基消除能力值(DPPH值)越高,表示自由基消除能力即抗氧化活性越高。
(大豆蛋白原料)
本发明中的大豆蛋白水解物是利用蛋白酶将大豆蛋白原料水解而得到的。此处,作为大豆蛋白原料的一个例子,可列举出:用水从全大豆、脱脂大豆等中提取蛋白质成分,并除去豆渣成分而得到的全脂豆浆、脱脂豆浆。作为大豆蛋白原料的另一个例子,可列举出:通过利用超滤膜的处理或使用酸的等电点沉淀等,从这些豆浆中将蛋白质浓缩而得到的分离大豆蛋白。作为大豆蛋白原料的再一个例子,可列举出包含纤维的浓缩蛋白、大豆粉的分解物。这些大豆蛋白原料也可以是经杀菌/干燥的物质。另外,最终得到的大豆蛋白原料优选以干燥重量计含有80重量%以上的蛋白质,例如优选分离大豆蛋白等。
分离大豆蛋白通常是如下制备的。即,在脱脂大豆中加入水,在中性附近进行提取,将豆渣分离而得到豆浆。接着,将豆浆调整到pH4.5附近,回收等电点沉淀物。在沉淀物中加入水和碱剂,从而得到固体成分浓度为5~15重量%、pH为5.7~8.0、优选pH为6.8~7.5附近的水溶液。作为所述碱剂,可以使用氢氧化钠、氢氧化钾等。对于如此得到的分离大豆蛋白,可以将溶液直接用于以下工序,也可以在未经杀菌的情况下或在杀菌后使其干燥,然后重新溶解来使用。不过,分离大豆蛋白并不仅限定于上述制备方法,当然也可以是对该制备方法进行各种改变而获得的制备方法。
(大豆蛋白水解物)
本发明中,大豆蛋白水解物包含选自显示高ORAC值的抗氧化肽序列KYQ和抗氧化肽序列KYR中的至少一者、和/或选自显示高DPPH值的抗氧化肽序列ERQ和抗氧化肽序列ERL中的至少一者。从全面显示更高的抗氧化活性的方面出发,优选的是,本发明的大豆蛋白水解物同时包含选自显示高ORAC值的抗氧化肽序列KYQ和抗氧化肽序列KYR中的至少一者、以及选自显示高DPPH值的抗氧化肽序列ERQ和抗氧化肽序列ERL中的至少一者。尤其,从显示高抗氧化活性、且方便制造的方面考虑,本发明的大豆蛋白水解物优选包含抗氧化肽序列KYQ和抗氧化肽序列ERQ、或者包含抗氧化肽序列KYR和抗氧化肽序列ERL;更优选包含抗氧化肽序列KYQ、抗氧化肽序列KYR和抗氧化肽序列ERL;进一步优选包含抗氧化肽序列KYQ、抗氧化肽序列KYR、抗氧化肽序列ERQ和抗氧化肽序列ERL。
本发明的大豆蛋白水解物只要包含上述抗氧化肽序列即可,对上述抗氧化肽各自的含量没有特别限定。例如分别可以为3重量%以上、优选5重量%以上、更优选8重量%以上、进一步优选10重量%以上。
关于本发明的大豆蛋白水解物中所含的选自显示高ORAC值的抗氧化肽序列KYQ和抗氧化肽序列KYR中的至少一者、与选自显示高DPPH值的抗氧化肽序列ERQ和抗氧化肽序列ERL中的至少一者之间的含有比例,没有特别限定,例如以重量比计,可以为1:9~9:1、优选为2:8~8:2、更优选为3:7~7:3、进一步优选为4:6~6:4。
本发明的大豆蛋白水解物,除了含有上述抗氧化肽之外,还可以含有不满足上述抗氧化肽序列的其他三肽。作为该其他三肽,没有特别限定,可以显示较高ORAC值的三肽、以及显示较高DPPH值的三肽。
关于上述显示较高ORAC值的三肽,例如可以采用ORAC值为350μmol TE/mmol以上、优选为450μmol TE/mmol以上、进一步优选为500μmol TE/mmol以上的三肽序列。对于这种三肽的ORAC值的上限值,没有特别限定,通常低于抗氧化肽序列KYQ和抗氧化肽序列KYR所具有的ORAC值,例如可以为1000μmol TE/mmol以下。作为这种显示较高ORAC值的三肽,例如可列举出KLQ、MPR等。这些三肽可以在大豆蛋白水解物中含有1种或两种以上。
此外,关于上述显示较高DPPH值的三肽,例如可以采用DPPH值优选为100μmol TE/mmol以上、更优选为200μmol TE/mmol以上、进一步优选为300μmol TE/mmol以上的三肽序列。对于这种三肽的DPPH值的上限值,没有特别限定,通常低于抗氧化肽序列ERQ和抗氧化肽序列ERL所具有的DPPH值,例如可以为420μmol TE/mmol以下。作为这种显示较高DPPH值的三肽,例如可列举出RAE、RVT、IRL、ARQ、GER、KQR等。这些三肽可以在大豆蛋白水解物中含有1种或两种以上。
本发明的大豆蛋白水解物代表性地是通过对上述大豆蛋白原料进行蛋白酶处理而得到的肽混合物。该蛋白水解物优选分解度更高,特别优选的是,在水解物中的肽与游离氨基酸的总量中,二肽和三肽(以下,有时统称为二肽/三肽)所占的比例高。具体而言,例如从在生物体中容易吸收而有效地发挥抗氧化活性的观点出发,相对于肽与游离氨基酸的总量,二肽/三肽的总含量优选为50重量%以上、进一步优选为60重量%以上、特别优选为70重量%以上。
二肽/三肽的含量如下算出:通过肽用凝胶过滤色谱法测定蛋白水解物中的二肽/三肽、以及游离氨基酸级分的比例,然后减去通过氨基酸分析算出的蛋白水解物中的游离氨基酸含量。
此外,从在生物体中容易吸收且发挥高抗氧化活性的观点出发,本发明的大豆蛋白水解物优选尽可能减少除二肽/三肽以外的肽和游离氨基酸的比例。即,蛋白水解物中的游离氨基酸含量相对于肽与游离氨基酸的总量优选为12重量%以下、更优选为5重量%以下、进一步优选为3重量%以下。此外,由于该蛋白水解物中的肽体优选为更低分子的肽,因此蛋白水解物中的二肽/三肽的级分比例相对于肽与游离氨基酸的总量优选为40重量%以下、更优选为38重量%以下、进一步优选为35重量%以下。
(蛋白酶)
用于获得本发明的大豆蛋白水解物的蛋白酶无论是动物来源、植物来源还是微生物来源均可,可以从蛋白酶的分类中被分类为“金属蛋白酶”、“酸性蛋白酶”、“硫醇蛋白酶”、“丝氨酸蛋白酶”的蛋白酶中适当选择,优选从被分类为“金属蛋白酶”、“硫醇蛋白酶”、“丝氨酸蛋白酶”的蛋白酶中适当选择。尤其,使属于2种以上或3种以上的不同分类的酶依次或同时发挥作用的分解方法能够增加二肽、三肽等分子量较低的肽的比例,因此特别优选。
该蛋白酶的分类为酶学领域中通常采用的根据活性中心的氨基酸种类而进行的分类方法。作为各自的代表,“金属蛋白酶”中可列举出杆菌属(Bacillus)来源的中性蛋白酶、链霉菌属(Streptomyces)来源的中性蛋白酶、曲霉属(Aspergillus)来源的中性蛋白酶、“Thermoase”等,“酸性蛋白酶”中可列举出胃蛋白酶、曲霉属(Aspergillus)来源的酸性蛋白酶、“Sumizyme FP”等,“硫醇蛋白酶”中可列举出菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶等,“丝氨酸蛋白酶”中可列举出胰蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、链霉菌属(Streptomyces)来源的碱性蛋白酶、“Alcalase”、“Bioprase”等。即使是除这些酶以外的酶,也能够根据作用pH或与抑制剂的反应性来确认其分类。活性中心不同的酶之间由于对底物的作用部位有很大不同,因此能够减少“剪切残留物”、高效地获得酶分解物。另外,通过组合使用不同来源的(来源生物)的酶,能够进一步高效地制造酶分解物。即使分类相同但只要来源不同,对底物蛋白质的作用部位也就会不同,结果能够增加二肽、三肽的比例。这些蛋白酶优选外切酶活性小的蛋白酶。
蛋白酶处理的反应pH或反应温度根据所使用的蛋白酶的特性进行设定即可,通常,反应pH设定为最佳pH附近,反应温度设定为最佳温度附近即可。大体上,反应温度为20~80℃、优选为40~60℃。反应后加热到足以使酶失活的温度(60~170℃左右),使残留酶活性失活。
蛋白酶处理后的反应液可以直接使用或浓缩后使用,但通常进行杀菌、并进行喷雾干燥、冷冻干燥等而以干燥粉末的状态使用。杀菌优选加热杀菌、加热温度优选为110~170℃、进一步优选为130~170℃。加热时间优选为3~20秒钟。另外,可以将反应液调整到任意的pH。可以将蛋白酶处理时或pH调整时产生的不溶物(沉淀物、悬浮物)通过离心分离、过滤等除去。除去不溶物能够提高大豆蛋白水解物的抗氧化活性,因此优选。还可以进一步利用活性炭、吸附树脂进行纯化。
(作为抗氧化剂的应用)
本发明的抗氧化肽以及含有其大豆蛋白水解物可以单独用作抗氧化剂,但与1种以上的其他显示抗氧化活性的物质或含有这些物质的提取物组合使用时,能够协同地提高抗氧化活性,因此是优选的。
作为其他的抗氧化物质,可列举出例如维生素类、多酚类、类胡萝卜素类、皂苷类、大蒜素等。作为维生素类,可列举出维生素C、维生素A、维生素E等。作为多酚类,除了异黄酮、槲皮素、杨梅素、山奈酚、橙皮甙、柚皮苷、花青素、儿茶素、白杨素、芹菜素、木犀草素等类黄酮类、芝麻素、芝麻素酚、芝麻素酚、细辛脂素、芝麻酚、芝麻酚林等木脂素类之外,还可列举出碧萝芷、姜黄素、绿原酸、没食子酸、迷迭香酸、鞣花酸、香豆素、阿魏酸、姜烯酚、可可多酚等。作为类胡萝卜素类,可列举出胡萝卜素(α-,β-,γ-,δ-)、番茄红素等胡萝卜素类、或者叶黄素、虾青素、玉米黄素、角黄素、岩藻黄素、花药黄质、紫黄质、辣椒素等叶黄素类等。作为皂苷类,可列举出皂树属皂苷等原料药来源的皂苷、大豆皂苷、茶皂苷等。当使用这些抗氧化物质时,可以替代地使用含有这些抗氧化物质的植物提取物,例如当使用花青素时,可以使用蓝莓提取物、黑醋栗提取物、巴西莓果提取物、接骨木果提取物等。上述显示抗氧化活性的物质或提取物中,特别是与维生素C、碧萝芷、巴西莓果提取物、姜黄素或芝麻素组合使用时,协同效果更强,因此优选。
(食品中的利用)
本发明的抗氧化肽以及含有其的大豆蛋白水解物可以以将其作为有效成分的抗氧化剂的形式用于各种食品中。例如,可以以防止食品自身的氧化为目的而添加到食品中。另外,通过添加本发明的抗氧化肽、或者含有其的大豆蛋白水解物,能够得到对摄取者发挥作为生理功能的抗氧化能力的饮料、片剂、食品块(压成块的精加工食品)、沙拉用调味酱、肉制品、零食点心、甜点、点心类和营养助剂等。
(药品中的利用)
本发明的抗氧化肽以及含有其的大豆蛋白水解物还可用作药品,典型地,可用作抗氧化药品。作为生物体的氧化所导致的疾病,可列举出动脉硬化、心肌梗塞、癌、糖尿病、阿耳茨海默病、花粉病等。本发明的抗氧化肽以及含有其的大豆蛋白水解物能够用作用于预防和治疗这些疾病的药品。当以药品的形态供给时,可以以液体、散药、片剂、胶囊等各种形态使用。
实施例
以下,通过实施例更具体地说明本发明。
(测定方法)
首先,将实施例中使用的各种测定方法汇总如下。
<肽序列分析>
将制备的大豆蛋白水解物用超纯水稀释至0.1重量%,通过0.22μm的过滤器,作为肽序列分析用的样品。肽序列分析通过LC-MS/MS分析进行。LC-MS/MS分析使用Agilent 1200series(Agilent Technologies公司制造)、LTQ Orbitrap XL(Thermo Fisher Scientific公司制造)、TOSHO TSKgel ODS-100V色谱柱(4.6mm×250㎜, 5μm)来实施。MS条件为:ESI+、喷雾电压4kV、毛细管温度300℃、对质量范围100-2000实施扫描分析。
<ORAC值的测定>
将得到的样品分别称量100mg,使其溶解到50%乙醇中,定容到100ml,按照非专利文献2记载的方法进行测定。定量使用“Trolox”(注册商标、从Kishida化学株式会社购得)作为标准物质,用各测定值算出。
<DPPH值的测定>
将得到的样品分别称量100mg,使其溶解到50%乙醇中,定容到100ml,按照非专利文献3记载的方法进行测定。定量使用1,1-二苯基-2-苦基肼作为标准物质,用各测定值算出。
(制造例1) 分离大豆蛋白的制备
从低改性脱脂大豆如下制备分离大豆蛋白。
(1)在低改性脱脂大豆1kg中加水,将其热水提取浆料用离心分离机除去豆渣级分,得到脱脂豆浆。
(2)将得到的脱脂豆浆的pH调整为4.5,进行等电点沉淀,用离心分离机得到酸沉淀酪状物,进行中和。
(3)将所得的各级分中和,在120℃下进行10秒钟加热杀菌。
(制造例2) 大豆蛋白水解物A的制备
制作由制造例1得到的分离大豆蛋白的3%溶液,添加相对于蛋白质为1%或2%的金属蛋白酶“Thermoase”(起源:Bacillus thermoproteolyticus Rokko,大和化成株式会社),在pH9.0、58℃下进行60分钟酶反应。
接着,添加相对于蛋白质为0.5%或1%的丝氨酸蛋白酶“Bioprase”(起源:Bacillussp.,Nagase ChemteX Corporation),在pH7.5、58℃下进行60分钟酶反应。
接着,添加相对于蛋白质为0.5%或1%的金属蛋白酶“Sumizyme FP”(起源;Aspergillus oryzae、新日本化学工业株式会社),在pH7.5、58℃下进行60分钟酶反应。
以上的酶反应后,将酶反应液通过90℃、20分钟的加热处理使反应停止后,进行冷冻干燥,得到大豆蛋白水解物A。
(制造例3) 大豆蛋白水解物B的制备
制作由制造例1得到的分离大豆蛋白的10%溶液,添加0.5%的“Alcalase”(NovozymesJapan Co., Ltd.制),在55℃下进行15分钟酶反应。在酶反应后通过90℃、20分钟的加热处理使反应停止后,进行冷冻干燥,得到大豆蛋白水解物B。
(试验例1)
对于由制造例2、3得到的大豆蛋白水解物A、B,分析其包含的三肽,对于检测出的三肽,使用通常的肽的化学合成方法即Fmoc固相合成法来合成,作为抗氧化活性测定用的样品。
(试验例2)
对于由试验例1得到的合成三肽,测定ORAC值(μmol TE/mmol)DPPH值(μmol TE/mmol)。将各肽序列的分析结果汇总于表1、2。
【表1】
大豆蛋白水解物A中所含的抗氧化肽序列
【表2】
大豆蛋白水解物B中所含的抗氧化肽序列
由表1的结果确认到,未观察到ORAC值及DPPH值均显示高的数值的三肽序列,但由制造例2得到的大豆蛋白水解物A中所含的三肽序列之中,赖氨酸-酪氨酸-谷氨酰胺(KYQ)表现出高ORAC值,谷氨酸-精氨酸-谷氨酰胺(ERQ)表现出高DPPH值,这些三肽具有显著高的抗氧化性能。另外,由表2的结果确认到,由制造例3得到的大豆蛋白水解物B中所含的三肽序列之中,赖氨酸-酪氨酸-精氨酸(KYR)显示高ORAC值,谷氨酸-精氨酸-亮氨酸(ERL)显示高DPPH值,这些三肽具有显著高的抗氧化性能。此外,大豆蛋白水解物A和大豆蛋白水解物B通过同时包含表现出高ORAC值的三肽和表现出高DPPH值的三肽,从而抗氧化性能全面优异。
产业上的可利用性
本发明提供能用于食品或药品的、显示高抗氧化活性的抗氧化肽、含有该抗氧化肽的大豆蛋白水解物,它们作为抗氧化剂是有用的。
Claims (10)
1.一种抗氧化肽,其氨基酸序列为KYQ。
2.一种大豆蛋白水解物,其包含权利要求1所述的抗氧化肽。
3.根据权利要求2所述的大豆蛋白水解物,其还包含氨基酸序列为ERQ的抗氧化肽。
4.一种抗氧化肽,其氨基酸序列为ERL。
5.一种大豆蛋白水解物,其包含权利要求4所述的抗氧化肽。
6.根据权利要求5所述的大豆蛋白水解物,其还包含氨基酸序列为KYR的抗氧化肽。
7.一种食品,其含有权利要求1或4所述的抗氧化肽、或者权利要求2、3、5、6中任一项所述的大豆蛋白水解物。
8.一种抗氧化药品,其含有权利要求1或4所述的抗氧化肽、或者权利要求2、3、5、6中任一项所述的大豆蛋白水解物。
9.权利要求1或4所述的抗氧化肽在抗氧化剂制造中的用途、或者权利要求2、3、5、6中任一项所述的大豆蛋白水解物在抗氧化剂制造中的用途。
10.权利要求1或4所述的抗氧化肽在制造抗氧化药品中的用途、或者权利要求2、3、5、6中任一项所述的大豆蛋白水解物在制造抗氧化药品中的用途。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010520655.7A CN111423489B (zh) | 2020-06-10 | 2020-06-10 | 抗氧化肽、含有该抗氧化肽的大豆蛋白水解物 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010520655.7A CN111423489B (zh) | 2020-06-10 | 2020-06-10 | 抗氧化肽、含有该抗氧化肽的大豆蛋白水解物 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN111423489A true CN111423489A (zh) | 2020-07-17 |
CN111423489B CN111423489B (zh) | 2020-09-29 |
Family
ID=71551241
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202010520655.7A Active CN111423489B (zh) | 2020-06-10 | 2020-06-10 | 抗氧化肽、含有该抗氧化肽的大豆蛋白水解物 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN111423489B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112675290A (zh) * | 2020-12-22 | 2021-04-20 | 吉林省特医食品生物科技有限公司 | 一种除湿的发酵型小分子肽及其制备方法和应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102796795A (zh) * | 2012-09-13 | 2012-11-28 | 吉林大学 | 一种快速制备大豆抗氧化肽的工艺方法 |
CN108384824A (zh) * | 2018-04-28 | 2018-08-10 | 平顶山天晶植物蛋白有限责任公司 | 一种抗氧化大豆多肽的制备方法 |
-
2020
- 2020-06-10 CN CN202010520655.7A patent/CN111423489B/zh active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102796795A (zh) * | 2012-09-13 | 2012-11-28 | 吉林大学 | 一种快速制备大豆抗氧化肽的工艺方法 |
CN108384824A (zh) * | 2018-04-28 | 2018-08-10 | 平顶山天晶植物蛋白有限责任公司 | 一种抗氧化大豆多肽的制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
J. FRED DICE等: "Regulation of Catabolism of Microinjected Ribonuclease A", 《THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112675290A (zh) * | 2020-12-22 | 2021-04-20 | 吉林省特医食品生物科技有限公司 | 一种除湿的发酵型小分子肽及其制备方法和应用 |
CN112675290B (zh) * | 2020-12-22 | 2021-07-27 | 吉林省特医食品生物科技有限公司 | 一种除湿的发酵型小分子肽及其制备方法和应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN111423489B (zh) | 2020-09-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Sánchez et al. | Bioactive peptides: A review | |
Segura Campos et al. | Angiotensin I‐converting enzyme inhibitory peptides of chia (Salvia hispanica) produced by enzymatic hydrolysis | |
CA2508219C (en) | Ace inhibitory peptides from plant materials | |
JP5341300B2 (ja) | アンジオテンシン変換酵素阻害活性又は血圧降下作用を有する剤 | |
Najafian et al. | Production of bioactive peptides using enzymatic hydrolysis and identification antioxidative peptides from patin (Pangasius sutchi) sarcoplasmic protein hydolysate | |
WO2011152330A1 (ja) | 大豆蛋白質加水分解物含有抗酸化剤及びその利用 | |
Samarakoon et al. | Bio-functionalities of proteins derived from marine algae—A review | |
KR20160018722A (ko) | 디케토피페라진을 함유하는 식물 엑기스 및 그 제조 방법 | |
Chirinos et al. | Obtaining of peptides with in vitro antioxidant and angiotensin I converting enzyme inhibitory activities from cañihua protein (Chenopodium pallidicaule Aellen) | |
US20140011742A1 (en) | Bioactive Peptides and Proteins Containing Bioactive Peptides, their Uses and Processes for Making the Same | |
WO2016153363A1 (en) | Water-soluble mussel extract | |
Noh et al. | Preparation of egg white liquid hydrolysate (ELH) and its radical-scavenging activity | |
JPWO2006134752A1 (ja) | 大豆ペプチド組成物 | |
WO2018021471A1 (ja) | 脳機能改善するための食品組成物 | |
JP2009091305A (ja) | 新規ペプチド、新規ペプチドの製造方法、及び抗酸化剤 | |
CN111423489B (zh) | 抗氧化肽、含有该抗氧化肽的大豆蛋白水解物 | |
KR101647558B1 (ko) | 참치심장으로부터 분리한 항산화 펩타이드의 제조방법 | |
US11477999B2 (en) | Method for producing whey protein hydrolysate | |
JP2003210138A (ja) | 機能性食品、その製造方法及び医薬 | |
WO2013073648A1 (ja) | 経口性抗炎症機能剤 | |
Pasarin et al. | Chemical analysis and protein enzymatic hydrolysis of poly-floral bee pollen | |
KR100580332B1 (ko) | 민태 껍질로부터 유래한 항산화 펩티드를 유효성분으로함유하는 항산화제 조성물 | |
JP2012116817A (ja) | 蛋白質組成物の加水分解物を含有する抗酸化剤 | |
KR20120049045A (ko) | 바지락 가수분해물을 유효성분으로 함유하는 항산화제 조성물 | |
KR20190060256A (ko) | 연산 오계란 펩타이드 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물 및 이의 제조방법 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |