CN111419847A - 一种抑制屎肠球菌生长中的药物 - Google Patents
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Abstract
一种抑制屎肠球菌生长中的药物,包括血根碱。本发明从现存的药用植物资源库入手,挖掘潜在的耐药菌抑制剂,基于血根碱对屎肠球菌的作用的研究,发现非抗生素类化合物血根碱可以有效抑制屎肠球菌的生长,为屎肠球菌抑制剂的研究开发和应用提供新的思路和来源,在医药等领域具有广泛的应用价值;本发明明确了血根碱对屎肠球菌的抑制作用,将其作为抗生素替代品,可有效缓解或解决屎肠球菌的耐药及感染问题,降低病死率。
Description
技术领域
本发明属于屎肠球菌抑菌研究领域,具体地说是一种抑制屎肠球菌生长中的药物。
背景技术
屎肠球菌(Enterococcus Faecium)属肠球菌属,属于革兰氏阳性菌,是人及动物肠道中正常菌群的一部分。目前对于屎肠球菌的治疗还没有什么很好的特效药,但可以选用青霉素和链霉素进行治疗。同时,肠球菌还极易形成耐药性,其耐药性包括固有耐药、获得性耐药及耐受性3种。由于其细胞壁坚厚,肠球菌对许多抗生素表现为固有耐药。由于这类细菌所引起的耐药菌感染治疗难度大,加之肠球菌对抗生索的耐药现象比较复杂,目前,在临床分离的肠球菌中有许多是多重耐药菌株。据文献报道,屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、红霉素的平均耐药率均>80%,对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率不同年份呈上升趋势。而且研究表明,肠球菌感染是新生儿败血症的第3位病因,近几年新生儿和儿童肠球菌败血症的发病率增加了6倍。据报道肠球菌是内源性和外源性医院感染的第二大病原菌,检出率仅次于大肠杆菌。有资料统计,在引起尿路感染的致病菌中,肠球菌感染居第2位;腹腔、盆腔感染,肠球菌居第3位;败血症,肠球菌居第3位,病死率12.6%-57%。而屎肠球菌耐药现状严重,给临床治疗带来了很大的挑战。
发明内容
本发明提供一种抑制屎肠球菌生长中的药物,用以解决现有技术中的缺陷。
本发明通过以下技术方案予以实现:
一种抑制屎肠球菌生长中的药物,包括血根碱。
如上所述的一种抑制屎肠球菌生长中的药物,所述的血根碱与蒸馏水溶解混合后得血根碱溶液。
如上所述的一种抑制屎肠球菌生长中的药物。所述的血根碱溶液的浓度为15.6-32.0μg/mL。
如上所述的一种抑制屎肠球菌生长中的药物,所述的血根碱溶液最低杀菌浓度为31.2μg/mL。
如上所述的一种抑制屎肠球菌生长中的药物,所述的血根碱溶液最小抑菌浓度为15.6μg/mL。
如上所述的一种抑制屎肠球菌生长中的药物,所述屎肠球菌为人源屎肠球菌。
如上所述的一种抑制屎肠球菌生长中的药物,所述屎肠球菌选自对青霉素G、氨苄西林、高浓度庆大、左旋氧氟沙星、莫西沙星、红霉素、替考拉宁、万古霉素、利奈唑胺、替加环素、克林霉素、复方新诺明中多种抗生素耐药的屎肠球菌。
如上所述的一种抑制屎肠球菌生长中的药物,所述的屎肠球菌的耐药性是通过微量二倍稀释法确定的。
本发明的优点是:本发明从现存的药用植物资源库入手,挖掘潜在的耐药菌抑制剂,基于血根碱对屎肠球菌的作用的研究,发现非抗生素类化合物血根碱可以有效抑制屎肠球菌的生长,为屎肠球菌抑制剂的研究开发和应用提供新的思路和来源,在医药等领域具有广泛的应用价值;本发明明确了血根碱对屎肠球菌的抑制作用,将其作为抗生素替代品,可有效缓解或解决屎肠球菌的耐药及感染问题,降低病死率。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1屎肠球菌的药敏实验
以人源屎肠球菌(菌株样本取自北京市海淀医院)为出发菌株,选用青霉素G、氨苄西林、左旋氧氟沙星、红霉素、替考拉宁、万古霉素、利奈唑胺进行试验;
挑取培养18-24h的纯菌落均匀溶解于2-5mL无菌生理盐水中,调节其浊度与0.5麦氏比浊管等浊。利用试管二倍稀释法将抗生素、菌液及TSB液体培养基加入96孔培养板中过夜培养,不同浓度的药液组别均为三个平行,确保实验数据的可信度;
利用酶标仪测定血根碱对屎肠球菌的最小抑菌浓度。并将最小抑菌浓度下的培养液置于无菌的LB液体培养基中继续培养,利用酶标仪测定血根碱对屎肠球菌的最低杀菌浓度,抑菌结果根据美国临床试验室国家标准化管理委员会(CLSl2017)标准判定,判定标准见表1。实验结果见表2。由此可知,2#菌株所耐抗生素的种类多,将其作为目标菌株进一步研究抑菌机制。
表1.美国临床试验室国家标准化管理委员会(CLSl2017)标准判定结果
表2.人源屎肠球菌的药敏试验MIC结果
实施例2血根碱对多重耐药菌株的抑制作用
挑取过夜培养的纯菌落均匀溶解于10mL TSB液体培养基中,调节其浊度与0.5麦氏比浊管等浊,并用酶标仪测定其OD600值。用二甲基亚砜配制浓度为1000μg/mL的血根碱作为药液,利用试管二倍稀释法将药液、菌液及TSB液体培养基加入96孔培养板中过夜培养,不同浓度的药液组别均为三个平行,确保实验数据的可信度。
利用酶标仪测定血根碱对屎肠球菌的最小抑菌浓度(MIC),并以MIC 浓度为参照,对进行培养的菌液增加药物稀释梯度,将相应培养液转接于无菌的TSA固体培养基中培养24h,若无单菌落生成,此浓度为血根碱对屎肠球菌的最低杀菌浓度(MBC),实验结果见表3。
表3.血根碱对屎肠球菌的抑制结果
由表3可知,血根碱对耐青霉素G、氨苄西林、高浓度庆大、左旋氧氟沙星、莫西沙星、红霉素、替考拉宁、万古霉素、利奈唑胺、替加环素、克林霉素、复方新诺明的屎肠球菌的抑制作用较好,其MIC为15.6μg/mL, MBC为31.2μg/mL。结果表明血根碱不仅对屎肠球菌参考菌株有抑菌作用,对本发明中的屎肠球菌(例如,1#菌株)也有抑菌作用。
根据以上实验结果,结合中草药来源广泛、不良反应少及不易产生耐药性等特点,可通过获得活性单品成分血根碱,直接针对临床主要的屎肠球菌发挥抑制作用,能够有效缓解或解决屎肠球菌的感染问题,降低病死率,为研究临床分离的屎肠球菌的抑菌剂提供科学依据,为开发抑制屎肠球菌的药物和抗生素替代品提供新思路和来源。
最后应说明的是:以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (5)
1.一种抑制屎肠球菌生长中的药物,其特征在于:包括血根碱。
2.根据权利要求1所述的一种抑制屎肠球菌生长中的药物,其特征在于:所述的血根碱与蒸馏水溶解混合后得血根碱溶液。
3.根据权利要求2所述的一种抑制屎肠球菌生长中的药物,其特征在于:所述的血根碱溶液的浓度为15.6-32.0μg/mL。
4.根据权利要求2或3所述的一种抑制屎肠球菌生长中的药物,其特征在于:所述的血根碱溶液最低杀菌浓度为31.2μg/mL。
5.根据权利要求2或3所述的一种抑制屎肠球菌生长中的药物,其特征在于:所述的血根碱溶液最小抑菌浓度为15.6μg/mL。
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