CN111417415A

CN111417415A - 生物处理系统

Info

Publication number: CN111417415A
Application number: CN201880078957.4A
Authority: CN
Inventors: J.卡米萨尼; P.玛图萨巴特
Original assignee: Biosafe SA
Current assignee: Biosafe SA
Priority date: 2017-12-07
Filing date: 2018-12-06
Publication date: 2020-07-14
Anticipated expiration: 2038-12-06
Also published as: CA3084566A1; JP7266932B2; US11766508B2; EP3720519A2; KR102624571B1; WO2019110767A2; US20200368411A1; KR20200097748A; GB201720405D0; CN111417415B; WO2019110767A3; AU2018380880A1; JP2021505161A

Abstract

公开了一种生物处理系统，其包括设备(200)，设备(200)包括离心分离壳体(210)，离心分离壳体(210)具有用于可移除地接纳分离室(50)的温度可控的隔间(215)，该设备进一步包括用于支承一个或多个流体存储器皿(10,20,30,40)的至少一个混合站(250)，该站包括用于提高或降低所支承的该器皿或各个器皿的内含物的温度的温度可控的区域(252)。该系统进一步包括一次性流体装置(100)，一次性流体装置(100)包括离心分离室(50)，离心分离室(50)可以可移除地安装于隔间(215)内，并且具有一个或多个端口(52)，端口(52)在使用中允许流体经由一个或多个端口来进入到该室中或从该室出去，所述端口经由流体导管(12,22,32,42)并且经由一个或多个阀装置来与所述流体存储器皿中的一个或多个流体连通。

Description

生物处理系统

技术领域

本发明涉及一种生物处理系统，特别地涉及一种允许生物处理中的选择性的多功能性的生物处理系统。例如，使流体(诸如，细胞悬浮液)分离成其组成部分，维持或改变细胞悬浮液的温度，使细胞悬浮液或其组成部分混合，将细胞悬浮液存储于存储器皿中，以及准备好细胞悬浮液以用于进一步的处理。

背景技术

已知的是，处理生物流体(诸如，使全血、单采血或骨髓血分离成红血细胞、白血细胞、血小板以及血浆)，以及使例如细胞或通过培养技术而在数量上扩增的干细胞的悬浮液分离，和/或使如造血干细胞那样的某些细胞群体与其它细胞分离。特别地，在过去的20年里，响应于对于高效的血液成分治疗的不断增长的需要，已经出现血液分离系统和方法，高效的血液成分治疗需要使干细胞与剩余的血液成分分离，以用于立即使用，用于基因修饰并且然后使用干细胞，或存储以用于稍后使用(例如，在化疗之后使用)。

在典型的分离过程中，血液成分(即，红血细胞、白血细胞、血小板以及血浆)用于不同的治疗，并且，因此，一定量的血液被处理，以便分离出这些成分。血液被采集到容纳抗凝剂溶液的血液采集袋中。通过在大型制冷离心机中使血液袋自旋达大约10分钟的时段，使所采集的血液分离成其子成分。继离心之后，成分中的各个顺序地从血液采集袋被压出到单独的采集袋中。

已存在对于用于生物流体的采集和分离的更大程度地自动化、紧凑并且便携的系统的期望，该系统甚至适合于处理相对小的体积。

US3737096和US4303193提出了一种附接到可折叠袋的相对小的离心设备。然而，这些装置具有最小固定保持体积，最小固定保持体积通常需要在可采集任何成分之前处理大约250 mL的最小体积。

US5316540公开了一种离心处理，其中，处理室是柔性处理袋，该柔性处理袋可液压变形，以利用生物流体填充该柔性处理袋或将该柔性处理袋清空。

EP0654669-A公开了一种离心处理设备，该离心处理设备具有通过活塞而分离的两个室。在离心之前，少量的待处理的流体经由偏心的入口来吸收，并且在离心处理期间在两个室之间转移。

在US6123655和US6733433中，描述了一种在功能上封闭的用于血液组分分离的系统，这些专利的内容通过引用而并入本文中。US6123655教导了一种带有容积可变的处理室的便携并且一次性的离心设备。因此，该离心设备可处理可变的量(甚至下降至非常少的量)的生物流体。US6733433描述了一种类似的设备。这些文献中的两者都教导了借助于位于室的底部处的气动系统来控制滑动活塞的移动，该气动系统选择性地产生真空或正压，以如期望那样使活塞朝上或朝下移动。

那些专利提出了用于处理生物流体并且使生物流体分离为成分的系统，该系统包括用于接收待分离的生物流体和分离的成分的成组的容器，并且任选地包括用于添加剂溶液的一个或多个额外的容器。空心离心处理室可通过处理室与旋转式驱动单元的接合而围绕旋转轴线旋转。处理室具有用于待处理的生物流体并且用于生物流体的处理的成分的轴向入口/出口。该入口/出口通向容积可变的分离空间中，在该分离空间中进行生物流体的整个离心处理。处理室包括从处理室的端壁延伸的大体上圆柱形的壁，该大体上圆柱形的壁在其中限定空心处理室，该空心处理室占据与旋转轴线同轴的空心开放圆柱形空间，轴向入口/出口与大体上圆柱形的壁同轴而设于所述端壁中，以通往空心处理室中。处理室在大体上圆柱形的壁内容纳可轴向地移动的活塞。容积可变的分离空间由大体上圆柱形的壁并且由处理室中的活塞限定于处理室的上部部分中。分离空间与入口/出口流体连通。可移动部件的轴向移动使分离空间的容积变化，以在离心处理之前、在离心处理期间或在离心处理之后，将所选择的量的待处理的生物流体经由入口/出口来引入到分离空间中或从分离空间排出，并且在离心处理期间或在离心处理之后，经由出口来从分离空间压出所处理的生物流体成分。

活塞可操作成借助于活塞的与分离空间相反的侧部上的气动压差来使分离空间变化，该侧部是大体上封闭的容积。清洁空气被泵送到该封闭容积中或从该封闭容积泵出，以引起活塞的移动以使分离空间容积变化，并且继而引起进入或离开分离空间的流体流。

虽然该机构良好地运作，但本发明人已认识到，治疗知识已提升，使得包括分离室但带有更大的功能性的生物处理设备是合乎期望的。使用不同类型的细胞(例如，造血细胞、间充质间质细胞或祖细胞)来发育的有前途的自体细胞治疗和异基因细胞治疗的增多指示需要更通用的细胞生物处理设备。另外，维持无菌状态(换而言之，将生物负载量保持于可接受的极限内或优良制造规范(GMP)所规定的极限内)是势在必行的。此外，为了成功地采用并且实施在上文中刚刚提到的相对新的治疗，处理的成本和用于该处理的装备的成本也是重要的。本发明的实施例在解决无菌状态和低成本的同时，解决了上文中所提到的现有技术的功能性的缺陷。

发明内容

根据一个方面，本发明提供了一种生物处理系统，该生物处理系统包括设备，该设备包括壳体，该壳体具有用于可移除地接纳分离室的温度可控的隔间，该设备进一步包括用于支承一个或多个流体存储器皿的至少一个站，该站包括温度可控的区域，该温度可控的区域用于提高或降低所支承的该器皿或各个器皿的内含物的温度。

在实施例中，该壳体包括用于离心分离的旋转装置。在实施例中，该站包括用于所述支承的台，该台可在使用中充分地移动，以提供混合作用。在实施例中，所述移动是围绕至少一个旋转轴线并且优选地围绕两个旋转轴线的周期性摇摆运动。在实施例中，所述台包括可铰接并且可封闭的覆盖件。在实施例中，该系统进一步包括用于控制一个或多个阀的操作的阀致动器。在实施例中，该系统进一步包括用于在所述隔间处并且在所述区域处感测温度并且可操作成响应于所述所感测的温度而对该隔间和/或该区域进行加热或冷却的温度传感器和控制器。

根据第二方面，本发明提供了一种根据上文的方面的系统，一次性流体装置包括离心分离室，离心分离室可以可移除地安装于隔间内，并且具有一个或多个端口，该端口在使用中允许流体经由一个或多个端口来进入到该室中或从该室出去，当该系统与一次性流体装置一起使用时，所述端口经由流体导管和一个或多个阀装置来与所述流体存储器皿中的一个或多个流体连通。一次性流体装置可与该系统的剩余部分流体隔离，例如以维持无菌状态。

根据第三方面，本发明提供了一种用于流体的生物处理的方法，该方法包括按任何合适的顺序进行的以下步骤：

a)提供包括与一个或多个流体器皿流体连通的分离室的生物处理系统，

b)将细胞悬浮液(诸如，哺乳动物细胞)引入到该系统的分离室中；

c)控制悬浮液的温度；

d)将另外的一种或多种流体引入到该系统的一个或多个流体器皿中；

e)相对于悬浮液的温度而控制所述(一个或多个)器皿中的另外的(一种或多种)流体的温度；以及

f)将另外的流体的至少部分在与悬浮液相同或类似的温度下引入到分离室中。

根据第四方面，本发明提供了一种用于细胞悬浮液的生物处理的方法，其用以提供下者中的任何一个或多个：细胞清洗；细胞分离和/或浓缩；细胞培育；细胞转导；密度梯度培养基细胞分离；细胞稀释；细胞分配；以及最终调配；该方法包括以下步骤：

a)提供根据前述权利要求中的任一项的生物处理系统；以及

b)根据在本文中所描述的示例1至8中限定的程序中的任何一个或多个而操作该系统。

本发明包含通过上文中所提到的方法中的任一个而获得的细胞。

因而，除了流体的分离或其它生物处理之外，本发明还允许对分离室中的流体(例如，人生物流体)和单独地存储于袋中的生物试剂进行加热、冷却或维持大体上恒定的温度，以减少或排除当两种流体组合时的热冲击。

在该设备用于在多个步骤(例如，诸如沉降、培育以及与试剂混合之类的顺序的步骤)中操纵细胞的情况下，可例如出于质量控制提议而保证温度控制。除了上文的方法步骤之外，在适当的情况下，细胞还可在所述另外的流体的帮助下经受清洗、培育、转导、分离、密度梯度分离、浓度调整或混合中的一个或多个。

在分离室的细胞或其它内含物的处理造成温度的改变(典型地，在使用离心分离原理的情况下，由于通过离心物理原理而生成的在该室内的摩擦而导致的热增益)的情况下，额外的流体可在较低的(或较高的)温度下被引入到该室中，以便迅速地调整该室中的温度。由此，另外的流体可用于调节该室中的流体的温度，而不是在相同温度下被引入。

在权利要求书中叙述了本发明的另外的方面和优选的特征。尽管权利要求书叙述了这样的方面和优选的特征，但本发明不限于权利要求书，并且可扩展到本文中所描述的任何特征，而不论是否以组合方式提到这样的特征。

附图说明

将参考附图而通过示例的方式进一步描述本发明，其中：

图1示意性地示出了用于生物处理的封闭式一次性流体装置；以及

图2示出了图1的流体装置连同用于多个选择性生物处理功能的设备。

具体实施方式

参考图1，示出了一次性流体装置100，一次性流体装置100包括多个存储器皿10、20、30以及40，在此情况下，存储器皿10、20、30以及40呈柔性袋(例如，HDPE塑料袋)的形式，存储器皿10、20、30以及40各自可经由流体联接件14、24、34、44来连接到相应的流体导管12、22、32、42。各个流体导管12、22、32、42可在此情况下通过双通选择阀16、26、36的选择性操作而独立地并且选择性地连接到处理室50，从而提供端口a到c或a到b的选择性连接或未在各个阀的端口a、b以及c之间提供用于流体的通道。以此方式，袋10、20、30或40中的任一个或通过类似装置而连接的任何更少或更多数量的袋都可选择性地经由相应的流体导管来与处理室50流体互连。

处理室50是分离室(在此情况下是离心分离器)，其具有:静态入口端口52，其具有旋转式联接件54，旋转式联接件54在密封地流体连接到固定式入口端口52的同时允许室50旋转；和固定式流体导管51，其对该室进行供给，并且提供与袋10、20、30以及40的流体连通。

室50具有包括滑动密封件的活塞56，活塞56可借助于活塞56的远侧上的容积58与活塞56的近侧上的容积60相比的压差来移动。通过经由控制端口55来将气体或流体(例如，过滤的空气)泵送到远侧容积58中或从远侧容积58吸出，有可能控制活塞56的移动并且由此控制流体进入到处理室容积60中或从处理室容积60出去。阀16、26以及36的进一步的控制允许选择性地将流体引入到室容积60中或反过来。

虽然上文的流体装置将以令人满意的方式执行，例如以用于使血液组分分离，但在需要增加的功能性的情况下，进一步的改进是合乎期望的。

另外参考图2，一次性流体装置100示出为在生物处理设备200中位于原位。当一起采用装置100和设备时，装置100和设备形成生物处理系统。设备200包括温度受控的离心机210和温度受控的混合级250以及控制器280。该设备具有阀致动器18、28以及38，以对上文中所提到的阀进行致动，例如，阀致动器18、28以及38各自呈可旋转凸台的形式，该可旋转凸台连接到相应的阀的转子，以选择性地使转子移动到提供期望的流体路径的位置中。

离心机具有绝缘壳体212，绝缘壳体212包括隔间215，隔间215接纳室50。壳体具有Peltier元件214，Peltier元件214用于对隔间的内部进行加热和冷却，Peltier元件214继而在使用中对室50及其内含物进行加热或冷却。温度由控制器280控制，并且由红外温度传感器216测量，红外温度传感器216向控制器280提供反馈。壳体210进一步在下端处包括可旋转地连接到驱动马达220的驱动卡爪(dog)218和气动地连接到空气泵222的气动供给装置，驱动卡爪218和气动供给装置在使用中一起使室50自旋，以使该室中的流体的组分分离，并且控制活塞56在室50中的移动，以提供进入或离开室容积60的流体流，例如以顺序地移除被导引至袋中的一个或多个的分离的组分，所有这些都处于控制器280的控制下。

混合器站250包括台252，台252可支承柔性袋中的一个或多个(在此情况下是袋10和袋20)，柔性袋保持与装置100的剩余部分流体连通。该台可在混合器马达270及相关的混合机构的影响下摇摆，以促进袋的内含物的混合。在此情况下，该机构包括从台252刚性地悬垂的杆272，杆272在中间部分处由柔性支承件274支承，并且在使用中在远端276处由安装到混合器马达270的轮278以圆周运动驱动。混合器机构允许该台沿各自与混合器马达270的旋转轴线A垂直的两个轴线滚动。可采用其它合适的混合机构。

混合器级还包括铰接盖254，以对袋进行封盖，以减少热损失。还提供了红外温度传感器256和用于对袋10和袋20进行加热或冷却的Peltier元件258，红外温度传感器256和Peltier元件258各自处于控制器280的控制下。

将为显然的是，温度受控的混合器250增加了设备200的功能性，并且，在下文中给出了增加的功能性的具体示例。柔性袋10-40和容积60各自具有大约10 ml至大约1000 ml的容量，这意味着该设备的实施例是便携式的，并且，可容易使得流体装置100(包括分离室50)为一次性或单次使用的。可通过使得被引入到混合器250中的袋10、20、30或40中的任何袋的内含物与容积60中的流体的温度相同或类似(当内含物和流体组合(不一定在容积60中组合)时)而减少或排除热冲击。该功能性对被引入到血液制品中的生物添加剂特别地有用。

该设备具有如下的能力：通过培养技术与利用任何其它生物试剂(诸如清洗溶液、悬浮液培养基、人或胎儿血清、梯度密度溶液、亲和颗粒(诸如，磁珠)、悬浮于培养基溶液或冷冻保护剂溶液(诸如，二甲基亚砜(DMSO))中的病毒等)的添加、混合、稀释或再悬浮组合，控制被处理的哺乳动物(例如，人)生物流体(诸如，全血、单采血、骨髓血或扩增的细胞或干细胞)的温度，所有这些都由上文中所描述的系统操纵。

生物处理示例

通过示例的方式，在下文中给出了可使用上文中所描述的系统来执行的一些生物处理程序。将意识到，程序需要控制混合器装置250、阀16、26和36以及离心分离室210的控制功能，该控制功能实际上由控制器280执行。

示例1-细胞清洗程序：

a)将悬浮于流体中的基于细胞的产物(诸如，所培养的干细胞)引入到袋(例如，袋10)；

b)经由流体联接件14来使袋连接到一次性流体装置100的剩余部分；

c)任选地将所填充的袋10引入到混合装置250中，任选地使产物混合，并且任选地测量产物的温度；

d)以上文中所描述的方式将混合的产物从袋转移到处理室容积60(在此情况下，这借助于使活塞56移动以吸入细胞产物来进行)，并且测量容积60中的产物的温度(典型地，4摄氏度)；

e)将细胞清洗溶液引入到袋(例如，袋20)中；

f)经由流体联接件24来使袋连接到一次性流体装置100的剩余部分；

g)将所填充的袋20引入到混合装置250中，任选地使清洗溶液混合，测量清洗溶液的温度，并且，在袋20位于混合装置250内时，将清洗溶液的温度调整成与容积60中的产物的温度相同或类似；

h)继步骤g)之后，将清洗溶液引入到已经容纳产物的容积60中(在此情况下，这借助于使活塞56进一步移动来进行)；

i)使容积60在足够的时间内并且以足够的旋转速度或加速度自旋，以基本上使产物中的细胞与包括清洗溶液的密度较低的材料分离；

j)将清洗溶液与细胞产物的密度较低的材料一起从容积60转移并且转移到袋(例如，袋30)中(在此情况下，这借助于活塞56的相反的移动来进行)；以及

k)将残余的流体材料(包括清洗的细胞)从该容积转移到袋(例如，袋40)中(在此情况下，这借助于活塞56的进一步的相反的移动来进行)。

示例2-细胞分离和/或浓缩程序：

d)以上文中所描述的方式将混合的产物从袋转移到处理室容积60(在此情况下，这借助于使活塞56移动以吸入细胞产物来进行)，并且测量容积60中的产物的温度(典型地，处于4摄氏度)；

e)使容积60在足够的时间内并且以足够的旋转速度或加速度自旋，以基本上使产物中的大部分的悬浮的细胞与产物中的密度较低的材料分离，并且任选地控制该容积中的细胞的温度，例如，这通过在该步骤中以及任选地前述步骤中的至少一定时段期间维持所述温度(典型地，处于4摄氏度)而进行；

f)将细胞产物的密度较低的材料从容积60转移并且转移到袋(例如，袋30)中(在此情况下，这借助于活塞56的相反的移动来进行)；以及

g)将残余的流体材料(包括现在分离和/或浓缩的细胞)从该容积转移到袋(例如，袋40)中(在此情况下，这借助于活塞56的进一步的相反的移动来进行)。

示例3-细胞培育程序：

a)将悬浮于流体中的基于细胞的产物(诸如，干细胞)引入到袋(例如，袋10)；

d)以上文中所描述的方式将混合的产物从袋转移到处理室容积60(在此情况下，这借助于使活塞56移动以吸入细胞产物来进行)，并且测量容积60中的产物的温度(典型地，初始处于室温)，并且，如果有必要，则将产物的温度调整成大约37摄氏度；

e)将悬浮于溶液中并且适于与所述细胞结合的多个细胞培育珠引入到袋(例如，袋20)中；

g)任选地将所填充的袋20引入到混合装置250中，任选地使培育珠混合，测量珠的温度，并且，在袋20位于混合装置250内时，将珠的温度调整成与容积60中的产物的温度相同或类似；

h)继步骤g)之后，将珠引入到已经容纳产物的容积60中(在此情况下，这借助于使活塞56进一步移动来进行)，或在备选方案中，将容积60中的细胞引入到容纳珠的袋20中；

i)维持例如容积60中或袋20中的细胞产物和珠的组合的悬浮液的温度；

j)将所述悬浮液(包括珠)从该容积或袋20转移并且转移到另一袋(例如，袋30)中(在此情况下，这借助于活塞56的移动来进行)，以便灌注细胞，并且任选地将组合的悬浮液转移回到该容积中；

k)任选地将步骤j)重复一次或多于一次；

l)使容积60在足够的时间内并且以足够的旋转速度或加速度自旋，以基本上使与所述珠结合的大部分的悬浮的细胞与组合的悬浮液中的密度较低的材料分离；

m)将现在分离的悬浮液的密度较低的材料从容积60转移并且转移到袋(例如，袋30)中(在此情况下，这借助于活塞56的相反的移动来进行)；以及

g)将残余的流体材料(包括现在培育的细胞)从该容积转移到袋(例如，袋40)中(在此情况下，这借助于活塞56的进一步的相反的移动来进行)。

示例4-细胞转导程序：

d)以上文中所描述的方式将产物或混合的产物从袋转移到处理室容积60(在此情况下，这借助于使活塞56移动以吸入细胞产物来进行)，测量容积60中的产物的温度(典型地，4摄氏度)，并且任选地将该容积中的悬浮液的温度调整成例如在室温与37摄氏度之间；

e)将转导剂(诸如，病毒)引入到袋(例如，袋20)中；

g)将所填充的袋20引入到混合装置250中，任选地使清洗溶液混合，测量清洗溶液的温度，并且，在袋20位于混合装置250内时，将转导剂的温度调整成与容积60中的产物的温度相同或类似；

h)继步骤g)之后，将转导剂引入到已经容纳产物的容积60中(在此情况下，这借助于使活塞56进一步移动来进行)；

i)使容积60在足够的时间内并且以足够的旋转速度或加速度自旋，以基本上实现将转导剂转导至产物中，并且允许进行转导；

j)进一步使容积60在足够的时间内并且以足够的旋转速度或加速度自旋，以使产物中的转导的细胞与密度较低的材料(包括转导剂悬浮液的剩余部分)分离；

k)将密度较低的材料从容积60转移并且转移到袋(例如，袋30)中(在此情况下，这借助于活塞56的相反的移动来进行)；以及

l)将残余的流体材料(包括转导的细胞)从该容积转移到袋(例如，袋40)中(在此情况下，这借助于活塞56的进一步的相反的移动来进行)。

在上文的示例中，也可在细胞位于袋(例如，袋10)中时进行转导。

示例5-密度梯度分离程序

a)将密度梯度培养基引入到袋(例如，袋10)中；

b)经由流体联接件14来使袋10连接到一次性流体装置100的剩余部分；

c)将袋10的内含物转移到分离室容积60中，并且任选地将该容积中的密度梯度培养基的温度调整成例如在室温与37摄氏度之间；

d)将悬浮于流体中的基于细胞的产物(诸如，所培养的干细胞)引入到袋(例如，袋20)；

e)经由流体联接件24来使袋连接到一次性流体装置100的剩余部分；

f)任选地将所填充的袋20引入到混合装置250中，任选地使产物混合，任选地测量产物的温度，并且任选地将产物的温度调整成与容积60中的密度梯度培养基的温度相同或类似；

g)使容积60自旋，同时以上文中所描述的方式将混合的产物从袋转移到容积60(在此情况下，这借助于使活塞56以比上文中所提到的程序中更慢的速率移动以吸入细胞产物来进行)，并且任选地维持容积60中的培养基和产物的温度；

h)将该容积的自旋的内含物的部分转移到袋(例如，袋30)中(在此情况下，这借助于活塞56的相反的移动来进行)；以及

i)将残余的流体材料(包括在密度梯度培养基内分离的细胞)从该容积转移到袋(例如，袋40)中(在此情况下，这借助于活塞56的进一步的相反的移动来进行)。

示例6-细胞稀释或细胞发育程序：

a)将具有已知的细胞密度的悬浮于流体中的基于细胞的产物(诸如，所培养的干细胞)引入到袋(例如，袋10)；

e)将细胞稀释或细胞发育溶液引入到袋(例如，袋20)中；

g)将所填充的袋20引入到混合装置250中，任选地使稀释或发育溶液混合，测量所述溶液的温度，并且，在袋20位于混合装置250内时，将该溶液的温度调整成与容积60中的产物的温度相同或类似；

h)继步骤g)之后，将该溶液或该溶液的仅部分引入到已经容纳产物的容积60中(在此情况下，这借助于使活塞56进一步移动来进行)，所述部分通过细胞产物的所需的稀释而确定；

i)任选地将该容积的内含物一次或多次转移到另外的袋30并且转移回到该容积，以促进细胞的灌注；

j)将稀释的细胞从该容积转移到袋(例如，袋40)中(在此情况下，这借助于活塞56的进一步的相反的移动来进行)。

示例7-所测量的细胞容积分配程序

d)以上文中所描述的方式将混合的产物从袋转移到处理室容积60(在此情况下，这借助于使活塞56移动以吸入细胞产物来进行)，并且，测量并且控制容积60中的产物的温度(典型地，控制成维持于室温与4摄氏度之间)；

e)将产物从该容积顺序地转移到袋20、30或40中的一个或多个或其它器皿中，以提供所测量的细胞产物等分试样(aliquot)。

示例8-细胞最终调配程序：

d)以上文中所描述的方式将混合的产物从袋转移到处理室容积60(在此情况下，这借助于使活塞56移动以吸入细胞产物来进行)，并且，测量并且调整容积60中的产物的温度(典型地，处于4摄氏度)；

e)将细胞冷冻保护剂(例如，DMSO)引入到袋(例如，袋20)中；

g)将所填充的袋20引入到混合装置250中，任选地使冷冻保护剂混合，测量冷冻保护剂的温度，并且，在袋20位于混合装置250内时，将冷冻保护剂的温度调整成与容积60中的产物的温度相同或类似；

h)继步骤g)之后，将冷冻保护剂或冷冻保护剂的仅部分引入到已经容纳产物的容积60中(在此情况下，这借助于使活塞56进一步移动来进行)，所述部分通过细胞产物的所需的冷冻保护剂稀释而确定；

i)使容积60在足够的时间内并且以足够的旋转速度或加速度自旋，以基本上使产物中的细胞浓缩到该容积的一部分中并且使得剩余部分具有较少的细胞；

j)将该容积的具有较少的细胞的部分从容积60转移并且转移到袋(例如，袋30)中(在此情况下，这借助于活塞56的相反的移动来进行)；以及

k)将残余的流体材料(包括冷冻保护剂中的一定浓度的细胞)从该容积转移到袋(例如，袋40)中(在此情况下，这借助于活塞56的进一步的相反的移动来进行)。

将意识到，可例如单独地或以组合方式采用上文的程序，使得这些程序链接在一起，在此情况下，将为明显的是，不需要重复初始的步骤和/或后面的步骤中的一些。使细胞分离的优选方式是，使该容积自旋并且允许较重的细胞被向外推进到该室的外部环形部分中，然而这不是必需的。细胞相对稀疏的内部容积可首先被活塞从该容积推出，随后，细胞相对丰富的外部容积被活塞从该容积推出，并且，可适当地导引两种不同的浓度，以捕获细胞丰富的部分。虽然压缩的空气是使活塞移动的优选方法，但可使用其它原动力。一次性流体装置示出为仅具有四个袋，但将意识到，可采用带有其它阀装置的更少或更多的袋或流体贮藏器，例如以适合于上文中所提到的链接的程序。

将意识到，上文中所提到的设备提供用以执行上文中所提到的程序的通用平台，这些程序仅仅是有可能利用所描述的设备来进行的生物处理程序的示例。例如，可使得用于混合器250的移动机构更简单，使得可使用单个枢转轴线，或可使用万向接头(gimble)型装置，其中，可采用双轴线摇摆。还可使用其它混合移动(例如，线性移动)。还可使得所使用的阀更简单，例如，可使用夹阀。

本发明的范围由权利要求书限定，并且可包括本领域技术人员想到但未在本文中明确地公开的其它示例。如果这样的其它示例具有不异于权利要求书的字面语言的结构元件，或如果这些示例包括与权利要求书的字面语言无实质性差异的等同的结构元件，则这些示例旨在处于权利要求书的范围内。在共同地描述特征的情况下，那些特征可单独地被要求保护，而不添加到如要求保护的本发明的内容，并且相反地，在单独地描述特征的情况下，权利要求书中的这些特征的组合不旨在将材料添加到如要求保护的本发明的内容。正文中所提到的所有专利和专利申请都如这些专利和专利申请单独地并入那样通过引用而以其整体并入本文。

Claims

1. 一种生物处理系统，包括设备(200)，所述设备(200)包括壳体(210)，所述壳体(210)具有用于可移除地接纳分离室(50)的温度可控的隔间(215)，所述设备进一步包括用于支承一个或多个流体存储器皿(10, 20, 30, 40)的至少一个站(250)，所述站包括温度可控的区域(252)，所述温度可控的区域(252)用于提高或降低所支承的所述器皿或各个器皿的内含物的温度。

2.根据权利要求1所述的系统，其特征在于，所述壳体包括用于离心分离的旋转装置。

3.根据权利要求1或2所述的系统，其特征在于，所述站包括用于所述支承的台，所述台可在使用中充分地移动以提供混合作用。

4.根据权利要求3所述的系统，其特征在于，所述移动是围绕至少一个旋转轴线并且优选地围绕两个旋转轴线的周期性摇摆运动。

5.根据权利要求2或3所述的系统，其特征在于，所述台包括可封闭的覆盖件。

6.根据前述权利要求中的任一项所述的系统，其特征在于，所述系统进一步包括用于控制一个或多个阀的操作的阀致动器。

7.根据前述权利要求中的任一项所述的系统，其特征在于，所述系统进一步包括用于在所述隔间处并且在所述区域处感测温度并且可操作成响应于所述所感测的温度而对所述隔间和/或所述区域进行加热或冷却的温度传感器和控制器。

8.根据权利要求7所述的系统，其特征在于，所述温度传感器为非接触式温度传感器，优选地为用于感测所发射的红外辐射的非接触式温度传感器。

9. 根据前述权利要求中的任一项所述的系统，其特征在于，所述系统进一步包括一次性流体装置，所述一次性流体装置包括分离室(50)和与所述分离室流体连通的一个或多个流体存储器皿(10, 20, 30, 40)，所述流体装置是可分离的，并且与剩余的系统流体隔离。

10. 根据前述权利要求中的任一项所述的系统，其特征在于，一次性流体装置(100)包括离心分离室(50)，所述离心分离室(50)可以可移除地安装于所述隔间(215)内，并且具有一个或多个端口(52)，所述一个或多个端口(52)在使用中允许流体经由所述一个或多个端口来进入到所述室中或从所述室出去，当所述系统与所述一次性流体装置(100)一起使用时，所述端口经由流体导管(12, 22, 32, 42)和一个或多个阀装置来与所述流体存储器皿中的一个或多个流体连通。

11.一种用于流体的生物处理的方法，所述方法包括按任何合适的顺序进行的以下步骤：

a)提供包括与一个或多个流体器皿(10, 20, 30, 40)流体连通的分离室(50)的生物处理系统，

b)将诸如哺乳动物细胞之类的细胞悬浮液引入到所述系统的所述分离室中；

c)控制所述悬浮液的温度；

d)将另外的一种或多种流体引入到所述系统的一个或多个流体器皿中；

e)相对于所述悬浮液的温度而控制所述一个或多个器皿中的所述另外的一种或多种流体的温度；以及

f)将所述另外的流体的至少部分在与所述悬浮液相同或类似的温度下引入到所述分离室中。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述生物处理系统进一步包括用于使容纳于所述器皿中的一个或多个中的所述另外的一种或多种流体混合的站(250)，其中，所述方法进一步包括在所述混合站处使容纳于所述一个或多个器皿中的所述一种或多种流体混合的步骤，并且其中，权利要求11的步骤f)包括将所述另外的流体的至少部分在与所述悬浮液相同或类似的温度下引入到所述混合站处的器皿中，以及将所述另外的流体的至少部分引入到所述分离室中，或代替将所述另外的流体的至少部分引入到所述分离室中。

13. 一种用于细胞悬浮液的生物处理的方法，其用以提供下者中的任何一个或多个：细胞清洗；细胞分离和/或浓缩；细胞培育；细胞转导；密度梯度培养基细胞分离；细胞稀释；细胞分配；以及最终调配；所述方法包括以下步骤：

a)提供根据前述权利要求中的任一项所述的生物处理系统；以及

b)根据在本文中所描述的示例1至8中限定的程序中的任何一个或多个而操作所述系统。

14.细胞，其通过根据权利要求11、12和/或13所述的方法中的任何一个或多个而获得。