CN111411129A

CN111411129A - 添加可分解性铵盐提高酶促油脂制备生物柴油的工艺

Info

Publication number: CN111411129A
Application number: CN201910006818.7A
Authority: CN
Inventors: 杜伟; 戴玲妹; 刘德华
Original assignee: Tsinghua University
Current assignee: Tsinghua University
Priority date: 2019-01-04
Filing date: 2019-01-04
Publication date: 2020-07-14
Anticipated expiration: 2039-01-04
Also published as: CN111411129B

Abstract

本发明公开了添加可分解性铵盐提高酶促油脂制备生物柴油的工艺，包括步骤：a)将油脂与可分解性铵盐接触；以及b)使油脂与脂肪酶和短链醇反应。本发明首次采用可分解性铵盐处理非食用油脂里影响酶催化活性的无机酸或短链有机酸，消除其对酶促油脂酰基化反应制备生物柴油的负面影响。这种可分解性铵盐取代常规的强碱中和，整个过程无需水洗，而且，铵盐也不会与油脂中的脂肪酸发生皂化反应，能最大限度地减少油脂的损失。该工艺在酶促非食用油脂转化制备生物柴油领域具有非常重要的实际应用价值。

Description

添加可分解性铵盐提高酶促油脂制备生物柴油的工艺

技术领域

本发明属于生物化工领域，具体地说，涉及通过添加可分解性铵盐提高酶促油脂制备生物柴油的工艺。

背景技术

生物柴油是由生物油脂原料通过转酯或酯化反应生成的长链脂肪酸酯类物质。生物柴油在闪点、燃烧功效、含硫量、含氧量、芳烃含量、燃烧耗氧量方面均优于石化柴油，而其它指标与石化柴油相当。燃烧尾气中悬浮颗粒、CO、硫化物以及碳氢化合物都大幅度降低，具备环境友好性，已在欧美国家广泛使用。

生物柴油的可持续发展，必须以非食用油脂为原料，包括地沟油、潲水油以及酸化油等在内的低品质非食用油脂通常都含有较多的杂质，包括有机脂肪酸、磷脂、水分以及无机酸等。鉴于这些低品质的油脂原料的组成以及特点，目前在欧美国家广泛使用的均相碱催化工艺不能直接用于这些低品质油脂的催化。国内企业一般采用酸法或酸-碱法工艺。酸法催化是目前国内绝大多少中小型生物柴油企业采用的技术路线，存在“三废”多，设备腐蚀严重、能耗高、工艺安全隐患较重等问题。也有一些企业采用酸-碱两步催化工艺。这种酸碱两步催化流程更长、操作更为复杂、大量三废排放导致严重的环境问题等。因此，迫切需要开发环境友好的先进生产工艺以促进生物柴油产业在广东地区的可持续发展。

环境友好的生物酶法工艺具有反应条件温和、油脂原料适用性广、过程中不引入金属离子、反应产物无需水洗，后续产物分离方便，整个生产过程绿色环保等优点，在转化非食用油脂上显示出很好的应用前景。但是，地沟油、潲水油、酸化油、微生物油脂等非食用油脂组成复杂，常常含有导致酶快速失活的强酸性杂质，如无机硫酸、盐酸、磷酸以及一些有机强酸性物质甲酸或乙酸，这些残存在油脂里的酸性物质检测非常困难，而且，大量水洗不仅导致大量油脂损失，也难以彻底去除这些酸性物质。这些低品质油脂里存在的强酸性物质已成为影响酶法工艺制备生物柴油的主要技术障碍。

为了解除非食用油脂里的强酸性物质对酶催化活性的负面影响，科研人员尝试采用氢氧化钠中和处理，发现这种利用强碱中和的工艺不仅操作繁琐，过程中需要大量水洗，而且，几乎所有非精制油脂里都含有一定量的脂肪酸，氢氧化钠的引入会导致油脂里的脂肪酸发生皂化，严重导致油脂原料的损失，而且，形成的皂使得体系乳化现象极为严重，使得后续处理过程非常麻烦。也有报道采用碳酸钠或碳酸氢钠等碱性物质，这些碱性较强的可溶性盐的加入同样存在上述皂化、乳化从而导致原料损失严重，过程难以控制等问题，难以用于实际的工业化生产应用。而且，这些碱性较强的物质会导致酶严重失活。因此，迫切需要开发新工艺，能够有效地消除非食用油脂里存在的无机酸或短链有机酸对酶催化活性的负面影响，从而促进酶法工艺在转化酸化油、微生物油脂、地沟油等非食用油脂在内的高效转化。

发明内容

本发明的目的是提供一种通过添加可分解性铵盐提高酶促油脂(特别是非食用油脂)制备生物柴油的工艺。

本发明构思如下：通过在酶促油脂转化制备生物柴油之前或在酶法反应过程中，引入可分解性铵盐，利用其处理非食用油脂里影响酶催化活性的无机酸或短链有机酸，这些铵盐不影响脂肪酶的酶活性，又不会与其它长链脂肪酸或甘油酯发生皂化反应导致油脂原料的损失，可以最大限度地提高油脂原料的利用率和酶促转化效率。

为了实现本发明目的，第一方面，本发明提供一种添加可分解性铵盐提高酶促油脂制备生物柴油的工艺，包括步骤：a)将油脂与可分解性铵盐接触；以及b)使油脂与脂肪酶和短链醇反应。

前述的工艺，步骤a)和b)可依次进行或同时进行。

前述的工艺，所述可分解性铵盐选自碳酸铵、碳酸氢铵中的至少一种。碳酸铵、碳酸氢铵可组合使用。

当步骤a)和b)依次进行时，所述工艺包括步骤：

i)向油脂中加入基于油脂质量0.05％-40％的可分解性铵盐，基于油脂质量5％-40％的水，在20℃-70℃，搅拌1-10h；

ii)将i)所得上层油相转移至一级或多级酶反应器中，加入油脂摩尔数4-8倍的短链醇、油脂质量2％-20％的水和基于油脂质量200-2000个标准酶活单位的脂肪酶，在30℃-55℃反应3-8h。

当步骤a)和b)同时进行时，所述工艺具体为：向一级或多级酶反应器中加入油脂、基于油脂质量0.05％-40％的可分解性铵盐、基于油脂摩尔数4-8倍的短链醇、基于油脂质量2％-20％的水和基于油脂质量200-2000个标准酶活单位的脂肪酶，在30℃-55℃反应3-8h。

本发明中，所述短链醇选自甲醇、乙醇、丙醇、丁醇中的至少一种，优选甲醇和/或乙醇。

所述脂肪酶包括来源于酵母细胞、霉菌细胞、细菌或其它微生物的脂肪酶。

所述油脂为生物油脂，所述生物油脂选自植物油脂、动物油脂、废食用油、油脂精练下脚料(酸化油)、微生物油脂中的至少一种。

所述植物油脂包括但不限于蓖麻油、菜籽油、大豆油、花生油、玉米油、棉子油、米糠油、麻风树油，文冠果油、小桐子油。

所述油脂是指非食用油脂，所述非食用油脂中包含甘油二酯0-10％wt、甘油三酯0-100％wt、甘油一酯0-10％wt、金属离子50-500ppm、游离脂肪酸0-90％wt、酸性物质(包括无机酸或短链有机酸)0.5-5％wt和水2-10％wt。

第二方面，本发明提供与在线脱水工艺耦合使用的通过添加可分解性铵盐提高酶促油脂制备生物柴油的工艺，包括步骤：

第一阶段酶反应：a)将油脂与可分解性铵盐接触；以及b)使油脂与脂肪酶和短链醇反应；

第二阶段酶反应：将第一阶段酶反应中得到的轻相(粗生物柴油相)和基于油脂质量200-1000个酶活单位的脂肪酶装入一级或多级环流反应器中，反应器温度控制在20-50℃。

借由上述技术方案，本发明至少具有下列优点及有益效果：

本发明首次采用可分解性铵盐处理非食用油脂里影响酶催化活性的无机酸或短链有机酸，消除其对酶促油脂酰基化反应制备生物柴油的负面影响。未经碳酸铵处理的油脂，生物柴油转化率只有70％左右，酶活保持率仅为50％左右，相比之下，经碳酸铵预处理的酶促反应中，脂肪酶的酶活保持率高达95％以上，生物柴油转化率高达90％以上。另外，这种可分解性铵盐取代常规的强碱中和，整个过程无需水洗，而且，铵盐也不会与油脂中的脂肪酸发生皂化反应，能最大限度地减少油脂的损失。与常规的强碱性预处理工艺相比,，本发明铵盐预处理工艺使得最终产物(脂肪酸单酯)得率提高了8％以上。该工艺在酶促非食用油脂转化制备生物柴油领域具有重要的实际应用价值。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。

实施例1

将10g潲水油(酸价为20mg KOH/g油)基于油脂质量10％的水、基于油脂质量40％的碳酸铵以及基于单位油脂质量200个标准酶活(200U/g大豆油)的来源于南极假丝酵母(Candida antarctica)的脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温35℃，然后将基于油脂摩尔比为4.5：1的甲醇在3h内匀速加入。反应6h后，有效油脂到生物柴油的转化率为90％，酸价为8mg KOH/g油

实施例2

将10g酸化油(酸价为180mg KOH/g油)，基于油脂质量20％的水、基于油脂质量0.05％的碳酸氢铵及入基于单位油脂质量200个标准酶活的来源于米曲霉(Aspergillusoryzae)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温40℃，然后将基于油脂摩尔比为6：1的甲醇在4h内匀速加入。反应8h后，有效油脂到生物柴油的转化率为92％，酸价为6mg KOH/g油。

实施例3

将10g棕榈油(酸价为30mg KOH/g油)，基于油脂质量2％的水、基于油脂质量1％的碳酸氢铵以及基于单位油脂质量200个标准酶活的来源于嗜热丝孢菌(Thermomyceslanuginosus)的液体脂肪酶以及基于单位油脂质量200个标准酶活的来源于米曲霉(Aspergillus oryzae)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温45℃，然后将基于油脂摩尔比为6：1的乙醇在2h内匀速加入。反应5h，有效油脂到生物柴油的转化率为90％，酸价为8.5mg KOH/g油。

实施例4

将10g潲水油脂(酸价为60mg KOH/g油)、基于油脂质量8％的水、基于油脂质量2％的碳酸铵和基于油脂质量3％的碳酸氢铵，以及基于单位油脂质量100个标准酶活的来源于南极假丝酵母(Candida antarctica)的液体脂肪酶以及基于单位油脂质量400个标准酶活的来源于嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温50℃，然后将基于油脂摩尔比为4：1的甲醇在2h内匀速加入。反应5h，有效油脂到生物柴油的转化率为93％，酸价为5.5mg KOH/g油。

实施例5

将10g酵母油脂(酸价为10mg KOH/g油)、基于油脂质量8％的水、基于油脂质量0.1％的碳酸铵以及基于单位油脂质量800个标准酶活的来源于南极假丝酵母(Candidaantarctica)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温40℃，然后将基于油脂摩尔比为6：1的乙醇在2h内匀速加入。反应5h，有效油脂到生物柴油的转化率为91％，酸价为8mg KOH/g油。

实施例6

将10g地沟油(酸价为8mg KOH/g油)、基于油脂质量20％的水、基于油脂质量5％的碳酸氢铵和10％的碳酸铵，以及基于单位油脂质量500个标准酶活的来源于米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温55℃，然后将基于油脂摩尔比为6：1的乙醇在3h内匀速加入。反应8h，有效油脂到生物柴油的转化率为91％，然后对反应液进行离心分离。分离出来的粗生物柴油相再进入固定化酶反应器(装有基于单位油脂质量400个标准酶活的来源于米曲霉Aspergillus oryzae的固定化脂肪酶)，固酶反应器温度为40℃，反应1h，体系中有效油脂到生物柴油的转化率为99％，酸价为0.2mg KOH/g油。

实施例7

将10g酸化油(酸价为190mg KOH/g油)、基于油脂质量20％的水、基于油脂质量20％的碳酸铵以及基于单位油脂质量500个标准酶活的来源于米黑根毛霉(Rhizomucormiehei)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温35℃，然后将基于油脂摩尔比为5：1的乙醇在4h内匀速加入。反应8h，有效油脂到生物柴油的转化率为92％。然后对反应液进行离心分离，分离出含酶的重相和含粗生物柴油的轻相。分离出来的粗生物柴油相再进入固定化酶反应器(装有基于单位油脂质量100个标准酶活的来源于米曲霉Aspergillus oryzae的固定化脂肪酶以及基于单位油脂质量100个标准酶活的来源于南极假丝酵母Candida antarctica的固定化脂肪酶)，固酶反应器温度为40℃，反应1h，体系中有效油脂到生物柴油的转化率为99％，酸价为0.4mg KOH/g油。

实施例8

在10g潲水油(酸价为120mg KOH/g油)里加入基于油脂质量40％的碳酸铵，基于油脂质量10％的水以及基于单位油脂质量200个标准酶活(200U/g大豆油)的来源于南极假丝酵母(Candida antarctica)的脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温35℃，然后将基于油脂摩尔比为4.5：1的甲醇在3h内匀速加入。反应6h后，有效油脂到生物柴油的转化率为90％。

实施例9

在10g酸化油(酸价为160mg KOH/g油)里加入基于油脂质量0.05％的碳酸铵和基于油脂质量10％的碳酸氢铵，基于油脂质量20％的水以及基于单位油脂质量200个标准酶活的来源于米曲霉(Aspergillus oryzae)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温40℃，然后将基于油脂摩尔比为6：1的甲醇在4h内匀速加入。反应8h后，有效油脂到生物柴油的转化率为92％，酸价为8mg KOH/g油。

实施例10

在10g棕榈油酸(酸价为180mg KOH/g油)里加入基于油脂质量20％的碳酸铵，基于油脂质量2％的水以及基于单位油脂质量200个标准酶活的来源于嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)的液体脂肪酶以及基于单位油脂质量200个标准酶活的来源于米曲霉(Aspergillus oryzae)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温45℃，然后将基于油脂摩尔比为6：1的乙醇在2h内匀速加入。反应2h，有效油脂到生物柴油的转化率为92％，酸价为9mg KOH/g油。

实施例11

在10g微藻油脂(酸价为50mg KOH/g油)里加入基于油脂质量10％的碳酸氢铵，基于油脂质量8％的水以及基于单位油脂质量100个标准酶活的来源于南极假丝酵母(Candida antarctica)的液体脂肪酶以及基于单位油脂质量500个标准酶活的来源于嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温55℃，然后将基于油脂摩尔比为4：1的甲醇在2h内匀速加入。反应4h，有效油脂到生物柴油的转化率为92％，酸价为8.5mg KOH/g油。

实施例12

在10g酵母油脂(酸价为20mg KOH/g油)里加入基于油脂质量5％的碳酸氢铵和基于油脂质量0.05％的碳酸铵，基于油脂质量8％的水以及基于单位油脂质量800个标准酶活的来源于南极假丝酵母(Candida antarctica)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温40℃，然后将基于油脂摩尔比为6：1的乙醇在2h内匀速加入。反应5h，有效油脂到生物柴油的转化率为94％，酸价为7.8mg KOH/g油。

实施例13

在10g地沟油(酸价为90mg KOH/g油)里加入基于油脂质量20％的碳酸铵和基于油脂质量5％的碳酸氢铵，基于油脂质量20％的水以及基于单位油脂质量500个标准酶活的来源于米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温55℃，然后将基于油脂摩尔比为6：1的乙醇在3h内匀速加入。反应8h，有效油脂到生物柴油的转化率为91％，然后对反应液进行离心分离。分离出来的粗生物柴油相再进入固定化酶反应器(装有基于单位油脂质量400个标准酶活的来源于米曲霉Aspergillusoryzae的固定化脂肪酶)，酶反应器温度25℃，反应1h，体系中有效油脂到生物柴油的转化率为99％，酸价为0.2mg KOH/g油。

实施例14

在酸化油里加入基于油脂质量10％的碳酸铵和基于油脂质量0.05％的碳酸氢铵，基于油脂质量10％的水以及基于单位油脂质量500个标准酶活的来源于米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温35℃，然后将基于油脂摩尔比为5：1的乙醇在4h内匀速加入。反应8h，有效油脂到生物柴油的转化率为92％。然后对反应液进行离心分离，分离出含酶的重相和含粗生物柴油的轻相。分离出来的粗生物柴油相再进入固定化酶反应器(装有基于单位油脂质量100个标准酶活的来源于米曲霉Aspergillus oryzae的固定化脂肪酶以及基于单位油脂质量100个标准酶活的来源于南极假丝酵母Candida antarctica的固定化脂肪酶)，酶反应器温度25℃，反应1h，体系中有效油脂到生物柴油的转化率为99％，酸价为0.4mg KOH/g油。

实施例15

向20g酸化油(酸价为170mg KOH/g油)中加入基于油质量40％的碳酸氢铵，基于油质量40％的水，70℃，搅拌10h，分相获得上层油相，进一步取上层油相10g，加入基于油脂质量10％的水以及基于单位油脂质量500个标准酶活的来源于米黑根毛霉(Aspergillusoryzae)的脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温45℃，然后将基于油脂摩尔比为4：1的甲醇在4h内匀速加入。反应7h，有效油脂到生物柴油的转化率为90％。然后对反应液进行离心分离，分离出含酶的重相和含粗生物柴油的轻相。分离出来的粗生物柴油相再进入固定化酶反应器(装有基于单位油脂质量200个标准酶活的来源于米曲霉的固定化脂肪酶以及基于单位油脂质量150个标准酶活的来源于南极假丝酵母Candidaantarctica的固定化脂肪酶)，酶反应器温度20℃，反应5h，体系中有效油脂到生物柴油的转化率为99％，酸价为0.3mg KOH/g油。

实施例16

向20g潲水油(酸价为40mg KOH/g油)中加入基于油质量0.05％的碳酸氢铵，基于油质量5％的水，20℃，搅拌1h，分相获得上层油相，进一步取上层油相10g，加入基于油脂质量3％的水以及基于单位油脂质量500个标准酶活的来源于米黑根毛霉(Candidaantarctica)的脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温30℃，然后将基于油脂摩尔比为5：1的乙醇在6h内匀速加入，反应10h，有效油脂到生物柴油的转化率为92％。然后对反应液进行离心分离，分离出含酶的重相和含粗生物柴油的轻相。分离出来的粗生物柴油相再进入固定化酶反应器(装有基于单位油脂质量50个标准酶活的来源于米曲霉的固定化脂肪酶以及基于单位油脂质量200个标准酶活的来源于南极假丝酵母Candidaantarctica的固定化脂肪酶)，酶反应器温度50℃，反应3h，体系中有效油脂到生物柴油的转化率为99％，酸价为0.5mg KOH/g油。

对比例

本发明提出采用可分解性铵盐处理油脂，与现有技术中利用其它盐类预处理相比，具有明显的技术优势：

1、碳酸钠处理：向20g棕榈油酸中加入基于棕榈油酸质量20％的碳酸钠，基于棕榈油酸质量40％的水，60℃，搅拌8h，静置发现难以自然分层，下层水相混浊(皂的生成所致)，离心分离后获得上层油相质量为12.5g左右(油脂与碳酸钠发生皂化反应导致了油脂明显损失)。上层油相中存有相当量的可溶性钠离子(超过500ppm)，若需进一步用脂肪酶催化油相进行生物柴油的制备，反应结束后需要大量水洗(每100克原料油产生含金属离子废水超过100克)。同时，浑浊的水相中除了生成的皂外，还有未利用完的残留可溶性碱性物质碳酸钠(进一步研究发现，这些残存的碳酸钠严重影响脂肪酶活性，在第二批次回用过程中，脂肪酶活降低30％以上)。

2、碳酸钙处理：向20g棕榈油酸中加入基于棕榈油酸质量20％的碳酸钙，基于棕榈油酸质量40％的水，60℃，搅拌8h，稍静置油水两相就可自然分层。获得上层油相质量为19.5g左右，下层水相较为清澈，未反应完的碳酸钙存在于下层水相，以不溶性盐的形式存在，便于回收再利用。该工艺与前述碳酸钠(碳酸氢钠)处理工艺相比，具有不形成乳化以及金属离子不超标等优势，但利用碳酸钙处理，需要将预处理的油相单独分离出来，然后将处理过的油相用于后续的酶促反应。如果不将油相与未溶的碳酸钙分离，而直接用于后续的酶促反应，则会导致碳酸钙在水相中累积，影响后续反应传质、从而显著影响酶促反应效率。

具体对比实例：

对照组：向20g棕榈油酸中加入基于棕榈油酸质量20％的碳酸钙，基于棕榈油酸质量10％的水以及基于单位油脂质量500个标准酶活的来源于米黑根毛霉(Rhizomucormiehei)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温55℃，然后将基于油脂摩尔比为6：1的甲醇在3h内匀速加入。反应8h，有效油脂到生物柴油的转化率为90％，然后对反应液进行离心分离。下层水相中含有脂肪酶和未溶的碳酸钙，进一步研究发现，尽管碳酸钙在酶促反应中并不影响酶活性，但其在体系中的不断累积会严重影响酶与底物的有效接触，从而影响酶的表观反应酶活。将水相里的酶反应回用3次，结果发现由于未溶的碳酸钙的累积使得在后续酶反应中，同样条件下，反应8h，有效油脂到生物柴油的转化率降至82％左右。

实验组：向20g棕榈油酸中加入基于棕榈油酸质量20％的碳酸铵，基于棕榈油酸质量10％的水以及基于单位油脂质量500个标准酶活的来源于米黑根毛霉(Rhizomucormiehei)的液体脂肪酶，置于适于酶催化的一级或多级酶反应器中。控温55℃，然后将基于油脂摩尔比为6：1的甲醇在3h内匀速加入。反应8h，有效油脂到生物柴油的转化率为91％(未用碳酸铵处理的对照组，生物柴油转化率只有70％左右，酶活保持率仅为50％，相比之下，经碳酸铵预处理的酶促反应中，脂肪酶的酶活保持率高达95％以上)。然后对反应液进行离心分离。将水相中的酶反应回用3次，结果发现由于未反应完的可分解性铵盐并不影响后续酶反应活性，同样条件下，反应8h，有效油脂到生物柴油的转化率仍保持在88％以上。

与对照组相比，添加了可分解性铵盐的酶促反应体系，由于可分解铵盐在水相的溶解性好，脂肪酶在回用过程中仍然表现出良好的催化活性。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之做一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.添加可分解性铵盐提高酶促油脂制备生物柴油的工艺，其特征在于，包括步骤：a)将油脂与可分解性铵盐接触；以及b)使油脂与脂肪酶和短链醇反应。

2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，步骤a)和b)可依次进行或同时进行。

3.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述可分解性铵盐选自碳酸铵、碳酸氢铵中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，包括步骤：

5.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，向一级或多级酶反应器中加入油脂、基于油脂质量0.05％-40％的可分解性铵盐、基于油脂摩尔数4-8倍的短链醇、基于油脂质量2％-20％的水和基于油脂质量200-2000个标准酶活单位的脂肪酶，在30℃-55℃反应3-8h。

6.根据权利要求1-5任一项所述的工艺，其特征在于，所述短链醇选自甲醇、乙醇、丙醇、丁醇中的至少一种。

7.根据权利要求6所述的工艺，其特征在于，所述短链醇为甲醇和/或乙醇。

8.根据权利要求1-5任一项所述的工艺，其特征在于，所述油脂为生物油脂，所述生物油脂选自植物油脂、动物油脂、废食用油、油脂精练下脚料、微生物油脂中的至少一种。

9.根据权利要求1-5任一项所述的工艺，其特征在于，所述脂肪酶包括来源于酵母细胞、霉菌细胞、细菌或其它微生物的脂肪酶。

10.根据权利要求1-5任一项所述的工艺，其特征在于，包括步骤：

第二阶段酶反应：将第一阶段酶反应中得到的轻相和基于油脂质量200-1000个酶活单位的脂肪酶装入一级或多级环流反应器中，反应器温度控制在20-50℃。