CN111386261B

CN111386261B - 香豆素衍生物、其制备方法及其在癌症治疗中的用途

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Publication number: CN111386261B
Application number: CN201880075095.XA
Authority: CN
Inventors: R·迪卢克雷齐娅; T·贝尔格雷德; P·努斯鲍默; U·科赫; B·克勒贝; A·科德达斯; A·昂格尔; N-G·拉尔森; M·法尔肯贝格-古斯塔夫松; C·M·古斯塔夫松
Original assignee: Lead Discovery Center Co ltd; Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV
Current assignee: Lead Discovery Center Co ltd; Max Planck Gesellschaft zur Foerderung der Wissenschaften eV
Priority date: 2017-09-20
Filing date: 2018-09-20
Publication date: 2024-03-22
Anticipated expiration: 2038-09-20
Also published as: CN111386261A; US20200291011A1; AU2018335838B2; JP2020534368A; EP3684762A1; US11111238B2; WO2019057821A1; AU2018335838A1; EP3684762B1; CA3075985A1; JP7233433B2

Abstract

本发明提供了作为用于治疗癌症的特异性线粒体RNA聚合酶抑制剂的新香豆素衍生物。

Description

香豆素衍生物、其制备方法及其在癌症治疗中的用途

技术领域

本发明涉及通式(I)的化合物

其中W、M、R、R₁和Y具有以下引用的名称，或其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，并且涉及制备通式(I)的化合物或其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的方法。本发明还涉及用作药物的通式(I)的化合物或其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。此外，本发明涉及用于治疗癌症的通式(I)的化合物或其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。此外，本发明涉及通式(I)的化合物或其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其用于与另一种癌症疗法同时、交替或随后组合治疗癌症。

背景技术

尽管在过去几十年中进行了大量的研究工作和先进的癌症治疗，但是癌症仍然是世界范围内的主要公共卫生问题，并且是美国死亡的第二主要原因。在美国人群中，对于几种癌症类型，包括肝癌和胰腺癌——最致命的癌症中的两种，发病率和死亡率甚至在增加(Siegel等人，2016)。因此，除了已建立的化学疗法、放射疗法和即将到来的免疫疗法之外，仍然迫切需要获得用于对抗癌症的另外的和改进的治疗选择。

干扰癌症代谢是解决肿瘤生长的另一个原则。与主要依赖于线粒体氧化磷酸化以产生能量的正常分化细胞相反，大多数癌细胞依赖于有氧糖酵解，这种现象称为“瓦氏效应(Warburg effect)”(Vander Heiden等人，2009)。细胞质中的有氧糖酵解导致由葡萄糖产生的丙酮酸盐不被转运到线粒体中以完全氧化产生更多能量，而是被转化为乳酸盐，最初由Warburg描述(Hsu and Sabatini，2008)。乳酸盐被转移至肝脏，在肝脏中碳骨架被用于合成葡萄糖，称为“肿瘤性或病理性柯里氏循环(neoplastic or pathological Coricycle)”，其有助于恶病质(Cachexia)的临床代谢状态，恶病质是一种存在于肿瘤患者中的病症，当肿瘤继续生长时，该患者遭受正常体重的大量损失(Tisdale，2002)。因此，抑制有氧糖酵解(瓦氏效应)和/或肿瘤合成代谢(病理性柯里氏循环)可能是干扰癌症代谢和有效治疗癌症患者的另一种有效方式。Pelicano,H，等人(2006)和Scatena等人(2008)描述了与癌症治疗的瓦氏效应有关的糖酵解的抑制。

然而，线粒体呼吸在肿瘤中的相关性根据肿瘤类型而变化。氧化性类型的肿瘤和具有糖酵解和氧化代谢双重能力的肿瘤是显而易见的，并且线粒体在肿瘤细胞存活和增殖中的重要性，包括利用替代的可氧化底物，例如谷氨酰胺和脂肪酸，已经日益得到重视。肿瘤中碳底物利用途径的多样性指示代谢异质性，其不仅可能在不同类型的癌症之间相关，而且还可能在以其他方式共享共同诊断的一组肿瘤中显现(Caro等人，2012)。因此，肿瘤甚至在相同的疾病实体内也显示出燃料利用的异质性，其中一些具有显著的线粒体组分，其特点是氧化磷酸化(OXPHOS)升高、线粒体对总细胞能量预算的贡献的增加、脂肪酸和葡萄糖衍生的碳更多地进入TCA循环中以及来自这些碳底物的脂肪生成增加(Caro等人，2012)。

事实上，最近的证据支持这样的假设，即获得性治疗抗性伴随着从有氧糖酵解向呼吸代谢的代谢转变，表明代谢可塑性在负责肿瘤复发的细胞存活中起作用，表明代谢可塑性在负责肿瘤复发的细胞存活中起作用。例如，已经观察到几种耐药性肿瘤细胞显示出比亲本细胞更高的呼吸活性。代谢适应使OXPHOS成瘾的癌细胞易于在药物治疗中存活，但使细胞对OXPHOS抑制剂敏感(Denise等人，2015)。

癌细胞线粒体在结构上和功能上不同于它们的正常对应物。此外，肿瘤细胞表现出广泛的代谢重编程，这使得它们比非永生化细胞更容易受到线粒体扰动的影响。基于这些前提，线粒体靶向制剂作为选择性靶向肿瘤的手段出现。通过诱导或促进线粒体膜透化的药理学试剂来校正癌症相关的线粒体功能障碍和(再)激活细胞死亡程序代表了用于癌症疗法的有吸引力的策略。此外，肿瘤基质中的自噬和癌细胞中的氧化线粒体代谢(OXPHOS)均可显著促进肿瘤生长，而与肿瘤血管生成无关(Salem等人，2012)，并且癌症相关的成纤维细胞经历有氧糖酵解，从而产生乳酸盐，其被相邻癌细胞用作代谢底物。在该模型中，肿瘤基质和上皮癌细胞之间的“能量转移”或“代谢偶联”通过合成代谢癌细胞中的氧化线粒体代谢“促进(fuel)”肿瘤生长和转移，“反向瓦氏效应(reverse Warburg effect)”(Whitaker-Menezes等人，2011)。

因此，这些发现为使用OXPHOS和线粒体功能抑制剂进行抗癌治疗提供了理论基础和新策略。Fulda等人(2010)和Weinberg和Chandel(2015)综述了线粒体靶向抗癌药物，包括线粒体复合物1的抑制剂、电子传递链(ETC)复合物的抑制剂、线粒体核糖体机制的抑制剂、ETC亚基翻译的抑制剂、线粒体伴侣蛋白的抑制剂、谷氨酰胺酶、氨基转移酶或谷氨酸脱氢酶的抑制剂、自噬的短期抑制、线粒体靶向抗氧化剂。

最近，线粒体RNA聚合酶(POLRMT，也称为h-mtRNAP)被认为是急性髓性白血病的新靶点(Bralha等人，2015)。POLRMT负责线粒体翻译所需的OXPHOS复合物的13个亚基、两个rRNA和22个tRNA的转录，并且充当线粒体DNA复制的RNA引发酶(Wanrooij和Falkenberg，2010，Scarpulla，2008)。因此，这种酶对于人线粒体基因组的表达和复制都至关重要(Arnold等人，2012)。

许多用作抗病毒剂以靶向病毒RNA聚合酶的核苷类似物证明了POLRMT的脱靶抑制(Arnold等人，2012)；POLRMT与噬菌体T7类单亚基RNAP密切相关。以下发现证实了这种合理性(Bralha等人，2015)：被鉴定为丙型肝炎病毒的RNA依赖性RNA聚合酶抑制剂的2-C-甲基腺苷治疗(Carroll等人，2003)，据称是通过相当非特异性抑制线粒体转录触发了AML细胞的死亡。

因此，需要替代的新化合物，其特异性抑制POLRMT并适合用作药物。特别地，需要可用于治疗癌症的新化合物，所述癌症优选为黑色素瘤、转移性黑色素瘤、胰腺癌、肝细胞癌、淋巴瘤、急性髓性白血病、乳腺癌、成胶质细胞瘤、宫颈癌、肾癌、结肠直肠癌或卵巢癌。此外，感兴趣的是POLRMT抑制剂，其可用于与另一种癌症疗法同时、交替或随后组合治疗癌症的方法中。

因此，本发明提供了用于治疗癌症的特异性POLRMT抑制剂。

发明内容

一方面，本发明涉及通式(I)的化合物

其中

R是-C₁-C₄-烷基，优选-甲基或-乙基，特别是-甲基；

R₁是-H或-甲基，优选-H；

M是CH或N；

W是其中

R₂是C₁-C₄-烷基、-卤素、-CN、优选-甲基、-乙基、-Cl或-Br；

X是-卤素或-CN，优选-Cl、-Br或-F，特别是-F，其中n＝1或2；

n＝0、1或2，优选0或1；

Y是-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或-甲基，且

R₄是-C₁-C₄-烷基或-C₃-C₆-环烷基，优选-甲基、-乙基、-异丙基或-环丙基；或

未取代或取代的吡啶残基；或

未取代或取代的苯基残基，优选在对位被取代；

Y是-NR₃R₄，其中N、R₃和R₄形成未取代或取代的5元或6元饱和杂环；或

Y是-OR₁₁，其中R₁₁是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H、-甲基、-乙基或-异丙基，

或其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

在一个实施方案中，本发明涉及如上定义的通式(I)的化合物，其中

R是-C₁-C₄-烷基，优选-甲基或-乙基，特别是-甲基；

R₁是-H或-甲基，优选-H；

M是-CH；

W是其中

R₂是甲基、-卤素、-CN，优选-甲基、-Cl或-Br；

X是-卤素或-CN，优选-Cl、-Br或-F，特别是-F，其中n＝1或2；

n＝0、1或2，优选0或1；

Y是-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或-甲基，且

未取代或取代的吡啶残基；或

未取代或取代的苯基残基，优选在对位被取代；

Y是-OR₁₁，其中R₁₁是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H、-甲基、-乙基或异丙基，

或其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的通式(I)的化合物，其中

Y是-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或-甲基，且

R₄是吡啶残基；或各自任选地和独立地被以下取代的苯基残基：-COOH；-COO-C₁-C₄-烷基；

-(CH₂)_pOH，其中p＝1或2；或

-C₁-C₄-烷基或-C₃-C₆-环烷基，优选-甲基、-乙基、-异丙基或-环丙基。

Y是-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或-甲基，且

R₄是吡啶残基；或被以下取代的苯基残基：-(CH₂)_pOH，其中p＝1或2；或

在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的通式(I)的化合物，其中N、R₃和R₄一起形成未取代或取代的哌啶、哌嗪或吡咯烷残基，各自任选地和独立地被一个或多个、优选地被以下残基之一取代：

-C₁-C₄-烷基；

-(CH₂)_m-COOR₅，其中R₅是-H、-C₁-C₈-烷基、-C₂-C₄烷基-N-吗啉或基团优选-H、-甲基、-乙基、-异丙基、-叔丁基、-正庚基、2-吗啉代乙基或-异丙氧基羰基氧基甲基；

-(CH₂)_mCONR₆R₇，其中R₆和R₇独立地是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或-甲基；

-CO-(C₂-C₄-烯基)；-CO-CH₂-Cl；-CO-CH₂-CH₃；

-NH-CO-(C₂-C₄-烯基)；-NH-CO-CH₂-Cl；-NH-CO-CH₂-CH₃；

-F；

-CN；

-SO₃H；

-SO₂NR₈R₉，其中R₈和R₉独立地是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或-甲基；

-SONHR₁₀，其中R₁₀是-C₁-C₄-烷基，优选-甲基；或

且

m＝0、1或2，优选0或1。

在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的通式(I)的化合物，其中N、R₃和R₄一起形成未取代或取代的哌啶或吡咯烷残基，各自任选地和独立地被一个或多个，优选地被以下残基之一取代：

-C₁-C₄-烷基；

-F；

-CN；

-SO₃H；

-SONHR₁₀，其中R₁₀是-C₁-C₄-烷基，优选-甲基；或

且

m＝0、1或2，优选0或1。

R是-甲基，优选(R)-甲基；

R₁是-H；

m＝0或1；

W是其中

R₂是甲基或-Cl；

X是-F，其中n＝1；

Y是-NR₃R₄

其中

R₃是-H；且

R₄是吡啶残基，

在对位被取代、优选被-(CH₂)₂OH取代的苯基残基，或

环丙基或异丙基残基；

或其中

N、R₃和R₄一起形成哌啶残基或吡咯烷残基，其各自任选地和独立地被以下残基之一取代：-COOH、-COOCH₃、-COOC₂H₅、-CH₂COOH、-CH₂COOCH_3、-CH₂COOCH₂CH₃、-CONH₂、-CONHCH₃、-CON(CH₃)₂、-CH₂CONHCH₃、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃或-CN。

R是(R)-甲基；

R₁是-H；

W是其中

R₂是甲基或-Cl，优选-Cl；

X是-F，其中n＝1；

Y是-NR₃R₄

其中

N、R₃和R₄形成哌啶残基或吡咯烷残基，其各自任选地和独立地被以下残基之一取代：-COOH、-CH₂COOH、-CONHCH₃、-CH₂CONHCH₃、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃或-CN，优选-COOH、

-CH₂COOH、-CONHCH₃或-CH₂CONHCH₃，更优选(S)-COOH、(R)-COOH、(S)-CH₂COOH或(R)-CH₂COOH，尤其是被(S)-COOH、(R)-COOH、(S)-CH₂COOH或(R)-CH₂COOH取代的哌啶残基。

在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的通式(I)的化合物，其中哌啶残基或吡咯烷残基在3位被取代。

在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的通式(I)的化合物，其中X在苯环的对位。

在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的通式(I)的化合物，其选自

7-[1-甲基-2-氧代-2-(1-哌啶基)乙氧基]-4-(邻甲苯基)色烯-2-酮、4-(2-氯苯基)-7-[1-甲基-2-氧代-2-(1-哌啶基)乙氧基]色烯-2-酮、

(3S)-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-(2-吡啶基)丙酰胺、

7-(1-甲基-2-氧代-2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-4-(邻甲苯基)色烯-2-酮、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸甲酯、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸甲酯、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酸、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酸、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酰胺、

4-(2-氯苯基)-7-(1-甲基-2-氧代-2-吡咯烷-1-基-乙氧基)色烯-2-酮、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-N-甲基-哌啶-3-甲酰胺、

(3S)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸乙酯、

(3S)-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸乙酯、

N-甲基-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酰胺、

N-[4-(2-羟基乙基)苯基]-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-N-甲基-哌啶-3-磺酰胺、

N-甲基-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲酰胺、

(3S)-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-羧酸、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酰胺、

N-环丙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-环丙基-丙酰胺、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲腈、

(3S)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-羧酸、

7-[(1R)-1-甲基-2-氧代-2-(1-哌啶基)乙氧基]-4-(邻甲苯基)色烯-2-酮、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-(2-吡啶基)丙酰胺、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲腈、

(3S)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

4-(2-氯苯基)-7-[(1R)-1-甲基-2-氧代-2-(1-哌啶基)乙氧基]色烯-2-酮、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-[4-(2-羟基乙基)苯基]丙酰胺、

(2R)-N-异丙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

1-[2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-甲基-哌啶-3-羧酸、

N,N-二甲基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

4-(2-氯苯基)-7-[1-甲基-2-氧代-2-[3-(2H-四唑-5-基)-1-哌啶基]乙氧基]色烯-2-酮、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲腈、

7-[1-甲基-2-氧代-2-[3-(2H-四唑-5-基)-1-哌啶基]乙氧基]-4-(邻甲苯基)色烯-2-酮、

3-甲基-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

(2R)-N,N-二甲基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N,N-二甲基-丙酰胺、

(3R)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

(3S)-1-[2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲腈、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

(3S)-1-[2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-甲基-丙酰胺、

1-[2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酰胺、

(3R)-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-甲基-哌啶-3-羧酸、

(2R)-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸异丙酯、

(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

2-[1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-4-哌啶基]乙酸、

2-[1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-4-哌啶基]乙酸、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-环丙基-丙酰胺、

N-异丙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-磺酰胺、

(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸异丙酯、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

2-[1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸、

(3R)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-N,N-二甲基-哌啶-3-甲酰胺、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-乙基-丙酰胺、

1-[2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酰胺、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

7-[2-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1-甲基-2-氧代-乙氧基]-4-(邻甲苯基)色烯-2-酮、

2-[1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸、

7-[1-甲基-2-[3-(甲基磺亚胺酰基)-1-哌啶基]-2-氧代-乙氧基]-4-(邻甲苯基)色烯-2-酮、

4-(2-氯苯基)-7-[2-(4,4-二氟-1-哌啶基)-1-甲基-2-氧代-乙氧基]色烯-2-酮、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-甲基-哌啶-3-羧酸乙酯、

(3S)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-N,N-二甲基-哌啶-3-甲酰胺、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-磺酰胺、

(3R)-N,N-二甲基-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲酰胺、

4-(2-氯苯基)-7-[1-甲基-2-[3-(甲基磺亚胺酰基)-1-哌啶基]-2-氧代-乙氧基]色烯-2-酮、

2-[1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-4-哌啶基]乙酸甲酯、

2-[4-(2-溴苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

2-[1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-4-哌啶基]乙酸甲酯、

(3S)-N,N-二甲基-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲酰胺、

N-乙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

2-[1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸乙酯、

2-[1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸乙酯、

3-甲基-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸乙酯、

2-[4-(2-溴苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N,N-二甲基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-环丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-乙基-丙酰胺、

2-[4-(2-溴苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸异丙酯、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N,N-二甲基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

1-[2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-甲基-哌啶-3-羧酸乙酯、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-乙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

2-[(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸甲酯、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸甲酯、

2-[(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸甲酯、

2-[(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸甲酯、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸、

2-[(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸、

(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

(3S)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丁酰基]哌啶-3-羧酸乙酯、

(3S)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丁酰基]哌啶-3-羧酸、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸乙酯、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-2-甲基-丙酸、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-2-甲基-丙酸乙酯、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-2-甲基-丙酰胺、

N-异丙基-2-甲基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

(3S)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-2-甲基-丙酰基]哌啶-3-羧酸、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸异丙酯、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸叔丁酯、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸2-吗啉代乙酯、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸庚酯、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸异丙氧基羰基氧基甲酯、

(3S)-N-甲基-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基哌啶-3-甲酰胺、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸异丙酯、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸叔丁酯、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸2-吗啉代乙酯、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸庚酯、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸异丙氧基羰基氧基甲酯、和

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]-N-甲基-乙酰胺、

1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-4-羧酸甲酯、

(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-[4-(羟基甲基)苯基]丙酰胺、

1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-4-羧酸、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲酰胺、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酰胺、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-乙基苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

(2S)-4-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌嗪-2-羧酸甲酯、

(2R)-4-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌嗪-2-羧酸甲酯、

1-甲基-4-[外消旋-(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌嗪-2-羧酸甲酯、

(2S)-4-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌嗪-2-羧酸、

3-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]苯甲酸、

(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-[4-(2-甲氧基乙基)苯基]丙酰胺、

4-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]苯甲酸、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-基]乙酸甲酯、

5-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]吡啶-3-羧酸甲酯、

2-[(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-基]乙酸甲酯、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-基]乙酸、

2-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]吡啶-4-羧酸甲酯、

2-[(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-基]乙酸、

5-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]吡啶-3-羧酸、

6-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]吡啶-2-羧酸甲酯、

(2R)-4-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌嗪-2-羧酸、

6-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]吡啶-2-羧酸、

2-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]吡啶-4-羧酸、

5-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]吡啶-2-羧酸甲酯、

5-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]吡啶-2-羧酸、

6-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]吡啶-3-羧酸、

4-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]吡啶-2-羧酸甲酯、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-羧酸甲酯、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-羧酸、

4-[[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]氨基]吡啶-2-羧酸、

1-甲基-4-[外消旋-(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌嗪-2-羧酸、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氰基苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2,6-二氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

4-(2-氯-4-氟-苯基)-7-[(1R)-1-甲基-2-氧代-2-(4-丙-2-烯酰基哌嗪-1-基)乙氧基]色烯-2-酮、

N-[(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]丙-2-烯酰胺、

7-[(1R)-2-[4-(2-氯乙酰基)哌嗪-1-基]-1-甲基-2-氧代-乙氧基]-4-(2-氯-4-氟-苯基)色烯-2-酮、

2-氯-N-[(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酰胺、

4-(2-氯-4-氟-苯基)-7-[(1R)-1-甲基-2-氧代-2-(4-丙酰基哌嗪-1-基)乙氧基]色烯-2-酮、

N-[(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]丙酰胺、

外消旋-(3S)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-吡喃并[2,3-b]吡啶-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

外消旋-(3S)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-吡喃并[2,3-b]吡啶-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸叔丁酯、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-吡喃并[2,3-b]吡啶-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-吡喃并[2,3-b]吡啶-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(3-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

2-[4-(2-氟苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、和

2-[4-(2,6-二氟苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

7-[(1R)-1-甲基-2-氧代-2-(1-哌啶基)乙氧基]-4-(3-甲基-2-噻吩基)色烯-2-酮、

(2R)-N-异丙基-2-[4-(3-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

(2R)-N,N-二甲基-2-[4-(3-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(3-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸乙酯、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(3-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸、

(3S)-1-[(2R)-2-[4-(4-甲基-3-噻吩基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

7-[(1R)-1-甲基-2-氧代-2-(1-哌啶基)乙氧基]-4-(4-甲基-3-噻吩基)色烯-2-酮、

7-[1-甲基-2-氧代-2-(1-哌啶基)乙氧基]-4-(2-甲基-3-噻吩基)色烯-2-酮、

外消旋-(3S)-1-[2-[4-(2-甲基-3-噻吩基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸，

或其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

另一方面，本发明涉及制备如上定义的通式(I)的化合物的方法，包括以下步骤：

(a)使式(A)化合物

其中W如上所定义，

与间苯二酚或2,6-二羟基吡啶反应，得到式(B)的化合物

/>

其中W和M如上所定义，

或

(a1)使式(K)化合物

其中W和M如上所定义，

与三溴化硼反应，得到式(B)化合物

其中W和M如上所定义，

以及

(b)用烷基化剂、优选用式Z-OH或Z-Br的烷基化剂将如上定义的式(B)的化合物烷基化，其中Z是基团

其中R、R₁和Y如上所定义，

以获得式(C)的化合物

其中W、M和Z如上所定义。

另一方面，本发明涉及制备如上定义的化合物的方法，其中Y是如上定义的-NR₃R₄，所述方法包括以下步骤：

(a)水解式(D)的化合物

其中W、M、R、R₁和R₁₁如上所定义，

以获得式(E)的化合物

其中W、M、R和R₁如上所定义，

以及

(b)将式(E)化合物酰胺化以获得式(F)化合物

其中W、M、R、R₁、R₃和R₄如上所定义。

在另一方面，本发明涉及用作药物的如本文所定义的通式(I)的化合物。

在另一方面，本发明涉及如本文所定义的通式(I)的化合物，其用于治疗癌症、优选黑色素瘤、转移性黑色素瘤、胰腺癌、肝细胞癌、淋巴瘤、急性髓性白血病、乳腺癌、成胶质细胞瘤、宫颈癌、肾癌、结肠直肠癌或卵巢癌。

在另一方面，本发明涉及如本文所定义的通式(I)的化合物，其用于与另一种癌症疗法同时、交替或随后组合治疗癌症的方法中，所述另一种癌症疗法优选选自化学疗法、免疫疗法、激素疗法、干细胞移植疗法、放射疗法或手术。

具体实施方式

定义、缩写和首写字母缩写

“5元或6元饱和杂环(5-or 6–membered saturated heterocycle)”表示未取代或取代的饱和或部分不饱和的环系，其含有5或6个环原子并且除C环原子之外还含有例如1-3个氮原子和/或氧或硫原子。在优选的实施方案中，5元或6元饱和杂环除C环原子外还含有一个N和任选一个另外的杂原子。另外的杂原子优选选自O、N或S。特别优选的是仅具有一个N作为杂原子的杂环。优选地，这些取代的杂环是单重或双重取代的。5元或6元饱和杂环可以在C原子、O原子、N原子或S原子上被取代。5元或6元饱和杂环的实例包括但不限于2-四氢呋喃基、3-四氢呋喃基、2-四氢噻吩基、3-四氢噻吩基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、3-异噁唑烷基、4-异噁唑烷基、5-异噁唑烷基、3-异噻唑烷基、4-异噻唑烷基、5-异噻唑烷基、3-吡唑烷基、4-吡唑烷基、5-吡唑烷基、2-噁唑烷基、4-噁唑烷基、5-噁唑烷基、2-噻唑烷基、4-噻唑烷基、5-噻唑烷基、2-咪唑烷基、4-咪唑烷基、1,2,4-噁二唑烷-3-基、1,2,4-噁二唑烷-5-基、1,2,4-噻二唑烷-3-基、1,2,4-噻二唑烷-5-基、1,2,4-三唑烷-3-基、1,3,4-噁二唑烷-2-基、1,3,4-噻二唑烷-2-基、1,3,4-三唑烷-2-基、2,3-二氢呋喃-2-基、2,3-二氢呋喃-3-基、2,4-二氢呋喃-2-基、2,4-二氢呋喃-3-基、2,3-二氢噻吩-2-基、2,3-二氢噻吩-3-基、2,4-二氢噻吩-2-基、2,4-二氢噻吩-3-基、2,3-吡咯啉-2-基、2,3-吡咯啉-3-基、2,4-吡咯啉-2-基、2,4-吡咯啉-3-基、2,3-异噁唑啉-3-基、3,4-异噁唑啉-3-基、4,5-异噁唑啉-3-基、2,3-异噁唑啉-4-基、3,4-异噁唑啉-4-基、4,5-异噁唑啉-4-基、2,3-异噁唑啉-5-基、3,4-异噁唑啉-5-基、4,5-异噁唑啉-5-基、2,3-异噻唑啉-3-基、3,4-异噻唑啉-3-基、4,5-异噻唑啉-3-基、2,3-异噻唑啉-4-基、3,4-异噻唑啉-4-基、4,5-异噻唑啉-4-基、2,3-异噻唑啉-5-基、3,4-异噻唑啉-5-基、4,5-异噻唑啉-5-基、2,3-二氢吡唑-1-基、2,3-二氢吡唑-2-基、2,3-二氢吡唑-3-基、2,3-二氢吡唑-4-基、2,3-二氢吡唑-5-基、3,4-二氢吡唑-1-基、3,4-二氢吡唑-3-基、3,4-二氢吡唑-4-基、3,4-二氢吡唑-5-基、4,5-二氢吡唑-1-基、4,5-二氢吡唑-3-基、4,5-二氢吡唑-4-基、4,5-二氢吡唑-5-基、2,3-二氢噁唑-2-基、2,3-二氢噁唑-3-基、2,3-二氢噁唑-4-基、2,3-二氢噁唑-5-基、3,4-二氢噁唑-2-基、3,4-二氢噁唑-3-基、3,4-二氢噁唑-4-基、3,4-二氢噁唑-5-基、3,4-二氢噁唑-2-基、3,4-二氢噁唑-3-基、3,4-二氢噁唑-4-基、吗啉基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、1-哌嗪基、2-哌嗪基、1,3-二噁烷-5-基、2-四氢吡喃基、4-四氢吡喃基、2-四氢噻吩基、3-四氢哒嗪基、4-四氢哒嗪基、2-四氢嘧啶基、4-四氢嘧啶基、5-四氢嘧啶基、2-四氢哒嗪基、1,3,5-四氢三嗪-2-基和1,2,4-四氢三嗪-3-基，优选哌啶-1-基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、1-哌嗪基、2-哌嗪基、2-吡咯烷基和3-吡咯烷基。

5元或6元饱和杂环可以各自任选地和独立地被一个或多个、优选地被以下残基之一取代：

-C₁-C₄-烷基；

-CO-(C₂-C₄-烯基)；-CO-CH₂-Cl；-CO-CH₂-CH₃；

-NH-CO-(C₂-C₄-烯基)；-NH-CO-CH₂-Cl；-NH-CO-CH₂-CH₃；

-F；

-CN；

-SO₃H；

-SONHR₁₀，其中R₁₀是-C₁-C₄-烷基，优选-甲基；或者

且

m＝0、1或2，优选0或1。

“C₁-C₄-烷基”表示具有1至4个碳原子的直链或支链烷基。直链和支链基团的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基和叔丁基，优选甲基和乙基，最优选甲基。

“C₃-C₆-环烷基”表示具有3至6个碳原子的碳环饱和环系。C₃-C₆-环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基或环己基，优选环戊基和环己基。

“取代(substitution)”或“取代的(substituted)”表示本领域公知的或如本文具体定义的一个或多个取代基。

“卤素”表示氟、氯、溴或碘，优选表示氟和氯。

当涉及式(I)化合物及其中间体化合物时，“立体异构体(stereoisomer)”表示式(I)化合物及其盐或水合物的任何可能的对映异构体或非对映异构体。特别地，术语“立体异构体”意指单一化合物或两种或更多种化合物的混合物，其中至少一个手性中心主要以一种明确的异构形式存在，特别是式(I)化合物的S-对映异构体、R-对映异构体和外消旋体。还可能的是，两个或更多个立体中心主要存在于如上定义的式(I)的化合物的衍生物的一种明确的异构形式中。在本发明的意义上，“主要(predominantly)”具有至少60％、优选至少70％、特别优选至少80％、最优选至少90％的含义。根据本发明，式(I)化合物的立体异构体也可以作为盐或水合物存在。

术语立体异构体、盐和水合物也可以彼此联合使用。例如，式(I)化合物的立体异构体可以具有盐。这些术语的组合被认为在本发明的范围内。

引用的化合物编号是指如表3中所定义的化合物。

技术术语按其常识使用。如果将特定含义传达给某些术语，则术语的定义将在下文中在使用这些术语的上下文中给出。

以下提及的一般或优选的残基定义既适用于式(I)的终产物，也相应地适用于在每种情况下制备所需的式(A)-(J)的原料或中间体。这些残基定义可以彼此随意组合，即包括给定优选残基之间的组合。此外，个别定义可能不适用。

新型POLRMT抑制剂

如上所述，需要抑制POLRMT并适合用作药物的替代的新化合物。特别地，需要新化合物，其可用于治疗癌症、优选黑色素瘤、转移性黑色素瘤、胰腺癌、肝细胞癌、淋巴瘤、急性髓性白血病、乳腺癌、成胶质细胞瘤、宫颈癌、肾癌、结肠直肠癌或卵巢癌。此外，感兴趣的是POLRMT抑制剂，其可用于与另一种癌症疗法同时、交替或随后组合治疗癌症的方法中。

因此，本发明的一个问题是提供具有上述所需特性的新的替代化合物。

在一个方面，根据本发明，提供了通式(I)的化合物。

/>

其中

R是-C₁-C₄-烷基，优选-甲基或-乙基，特别是-甲基；

R₁是-H或-甲基，优选-H；

M是CH或N；

W是其中

X是-卤素或-CN，优选-Cl、-Br或-F，特别是-F，其中n＝1或2；

n＝0、1或2，优选0或1；

Y是-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或-甲基，且

R₄是-C₁-C₄-烷基或-C₃-C₆-环烷基，优选-甲基、-乙基、-异丙基或-环丙基；或者

未取代或取代的吡啶残基；或者

未取代或取代的苯基残基，优选在对位被取代；

Y是-NR₃R₄，其中N、R₃和R₄形成未取代或取代的5元或6元饱和杂环；或者

或其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

在优选的实施方案中，通式(I)的化合物是香豆素衍生物，其中M是CH。

优选的化合物组是其中Y是OR₁₁，其中R₁₁是乙基残基(特别是化合物40、57、58、81、82和113)、异丙基残基(化合物55、64、92)或-H(特别是化合物94、96、97、99、112)的化合物。

还包括本文公开的式(I)化合物或其中间体化合物的药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。药学上或兽医学上可接受的盐可以是阴离子抗衡离子，例如乙酸根、溴离子、樟脑磺酸根、氯离子、柠檬酸根、甲酸根、富马酸根、乳酸根、马来酸根、甲磺酸根、硝酸根、草酸根、磷酸根、硫酸根、酒石酸根、硫氰酸根或甲苯磺酸根，或优选阳离子抗衡离子，例如铵、精氨酸、二乙胺、乙二胺、哌嗪、钾、钠，或Haynes等人(2005)公开的任何其它抗衡离子。由于存在不对称碳原子，本发明的一些化合物含有一个或多个手性中心，这产生立体异构体，例如在每个手性中心具有R或S立体化学的非对映异构体。本发明包括所有这些立体异构体和非对映异构体及其混合物。

如实例中所示，本发明人现已令人惊讶且出乎意料地发现通式(I)的化合物或其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物可用作线粒体RNA聚合酶(POLRMT)抑制剂，并由此抑制线粒体DNA复制和/或线粒体转录。

在下文中，描述了本发明通式(I)优选的化合物组。优选组构成通式(I)化合物的优选实施方案。本文所述的本发明通式(I)化合物的实施方案的许多组合被认为在本发明的范围内。

在优选的实施方案中，本发明涉及如上定义的通式(I)的化合物，其中

R是-C₁-C₄-烷基，优选-甲基或-乙基，特别是-甲基；

R₁是-H或-甲基，优选-H；

M是-CH；

W是其中

R₂是甲基、-卤素、-CN，优选-甲基、-Cl或-Br；

X是-卤素或-CN，优选-Cl、-Br或-F，特别是-F，其中n＝1或2；

n＝0、1或2，优选0或1；

Y是-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或-甲基，且

未取代或取代的吡啶残基；或者

未取代或取代的苯基残基，优选在对位被取代；

Y是-OR₁₁，其中R₁₁是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H、-甲基、-乙基，或-异丙基。

该优选的化合物组对应于式(IA)的化合物

其中R、R₁、R₂、X、n和Y如上述优选组中所定义。

R是-C₁-C₄-烷基，优选-甲基或-乙基，特别是-甲基；

R₁是-H或-甲基，优选-H；

M是-CH；

W是其中

R₂是甲基、-卤素、-CN，优选-甲基、-Cl或-Br；

X是-卤素或-CN，优选-Cl、-Br或-F，特别是-F，其中n＝1或2；

n＝0、1或2，优选0或1；

Y是-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或-甲基，且

未取代或取代的吡啶残基；或

未取代或取代的苯基残基，优选在对位被取代；

Y是-OR₁₁，其中R₁₁是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H、-甲基、-乙基，或

-异丙基。

在一个实施方案中，本发明涉及如上定义的基团的通式(I)的化合物，其中

W是其中R₂、X和n如上所定义，特别是化合物174、177、178、179、180和181。

W是其中R₂、X和n如上所定义，特别是化合物182和183。

W是其中R₂、X和n如上所定义，特别是化合物184和185。

Y是-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或-甲基，且

R₄为吡啶残基；或各自任选地和独立地被以下取代的苯基残基：-COOH；-COO-(C₁-C₄-烷基)；

-(CH₂)_pOH，其中p＝1或2；或

一组优选的化合物具有任选取代的苯基残基(特别是化合物(130、139、140和141))。另一组优选的化合物具有被-COOH取代的吡啶残基(特别是化合物139、141、148、151、152、154、155和160)。另一组优选的化合物具有被-COO-(C₁-C₄-烷基)取代的吡啶残基(特别是化合物143、146、149、153、156)。

如上定义的本发明化合物的特定子集(subset)是通式(I)的化合物，其中Y是

-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或-甲基，且

R₄为吡啶残基；或被以下取代的苯基残基：-(CH₂)_pOH，其中p＝1或2；或-C₁-C₄-烷基或-C₃-C₆-环烷基，优选-甲基、-乙基、-异丙基或-环丙基。

优选的化合物是其中R₃是H且R₄是吡啶残基(特别是化合物4和31)或具有2-羟乙基取代，即p＝2的取代的苯基残基(特别是化合物19和35)的化合物。其它优选的化合物是其中R₃是H且R₄是环丙基残基的化合物(特别是化合物25、26、61和90)。进一步优选R₃为H且R₄为-C₁-C₄-烷基的化合物(特别是化合物36、38、44、45、49、51、56、62、65、68、70、85、89、91、93、98、114和115)。

本发明化合物的另一个特定子集是通式(I)的化合物，其中N、R₃和R₄一起形成未取代或取代的哌啶、哌嗪或吡咯烷残基，各自任选地和独立地被一个或多个，优选地被以下残基之一取代：

-C₁-C₄-烷基；

-CO-(C₂-C₄-烯基)；-CO-CH₂-Cl；-CO-CH₂-CH₃；

-NH-CO-(C₂-C₄-烯基)；-NH-CO-CH₂-Cl；-NH-CO-CH₂-CH₃；

-F；

-CN；

-SO₃H；

-SONHR₁₀，其中R₁₀是-C₁-C₄-烷基，优选-甲基；或

且

m＝0、1或2，优选0或1。

本发明化合物的另一个特定子集是通式(I)的化合物，其中N、R₃和R₄一起形成未取代或取代的哌啶或吡咯烷残基，各自任选地和独立地被一个或多个，优选地被以下残基之一取代：

-C₁-C₄-烷基；

-(CH₂)_mCONR₆R₇，其中R₆和R₇独立地是-H或-C₁-C₄-烷基，优选-H或

-甲基；

-F；

-CN；

-SO₃H；

-SONHR₁₀，其中R₁₀是-C₁-C₄-烷基，优选-甲基；或

且

m＝0、1或2，优选0或1。

一组优选的化合物具有未取代的哌啶(特别是化合物1、2、30和34)。特别优选的是具有取代哌啶残基的化合物(特别是化合物3、6、7、8、9、10、11、12、14、15、16、17、18、20、21、23、24、27、28、32、33、37、39、41、42、43、46、47、48、50、52、53、54、59、60、66、67、69、71、72、73、74、75、76、78、79、80、83、84、86、87、88、95、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127和128)。

更优选的子组(subgroup)是具有被-COOH(特别是化合物3、8、9、14、23、27、33、37、43、46、47、50、53、54、108、110、116)或被-CH₂COOH(特别是化合物59、60、66、72、102、103、106和107)取代的取代哌啶残基的化合物。

另一个更优选的子组是具有被以下取代的取代哌啶残基的化合物：-COOR₅或-CH₂COOR₅，其中R₅是2-吗啉代乙基(特别是化合物119和125)或R₅是-异丙基(特别是化合物117和123)、-叔丁基(特别是化合物118和124)、-正庚基(特别是化合物120和126)、-异丙氧基羰基氧基甲基(特别是化合物121和127)，或-CONHCH₃、-CH₂CONHCH₃(特别是化合物15、21、122和128)或-CON(CH₃)₂(特别是化合物67、76和78)。

另一组优选的化合物具有被-SO₂NR₈R₉取代的取代哌啶残基，其中R₈是-H，R₉是-H或-甲基(特别是化合物12、18、20、24、52和69)。

另一组优选的化合物是具有未取代的吡咯烷残基的化合物(特别是化合物5和13)和具有取代的吡咯烷残基的化合物(特别是化合物22、29、63和77)。

所述化合物的另一个特定子集是通式(I)的化合物，其中

R是-甲基，优选(R)-甲基；

R₁是-H；

m＝0或1；

W是优选地/>其中

R₂是甲基或-Cl；

X是-F，其中n＝1；

Y是-NR₃R₄

其中

R₃是-H；且

R₄是吡啶残基，

在对位被取代、优选被-(CH₂)₂OH取代的苯基残基，或

环丙基或异丙基残基；

或其中

N、R₃和R₄一起为哌啶残基或吡咯烷残基，其各自任选地和独立地被以下残基之一取代：-COOH、-COOCH₃、-COOC₂H₅、-CH₂COOH、-CH₂COOCH₃、-CH₂COOCH₂CH₃、-CONH₂、-CONHCH₃、-CON(CH₃)₂、-CH₂CONHCH₃、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃或-CN。

更优选的化合物组是具有取代哌啶残基的化合物，其中R是甲基，R₁是-H，R₂是-甲基或-Cl，n，m＝0或1，X是-F，n＝1，并且其中哌啶被以下取代：-COOH、-COOCH₃、-COOC₂H₅、-CH₂COOH、-CH₂COOCH₃、-CH₂COOCH₂CH₃、-CONH₂、-CONHCH₃、-CON(CH₃)₂、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃、-CH₂CONHCH₃或-CN(特别是化合物3、6、7、8、9、12、14、15、16、17、18、20、21、23、24、27、28、32、33、41、46、47、48、50、52、53、59、60、66、67、69、72、76、78、80、83、84、86、87、100、101、102、103、104、105、106、107、108、111、122和128)。该组的甚至更优选的子组是其中R是(R)-甲基的化合物(特别是化合物14、23、27、28、32、100、101、102、103、104、105、106、107、108、111、122和128)。

该特定子集的更优选子组是其中R是(R)-甲基，具有被-COOH(特别是化合物14、23、27和108)或-CH₂COOH(特别是化合物102、103、106和107)取代的取代哌啶残基的化合物。

该特定子集的另一个更优选子组是其中R是(R)-甲基，具有被以下取代的取代哌啶残基的化合物：-COOR₅或-CH₂COOR₅，其中R₅是2-吗啉代乙基(特别是化合物119和125)，或其中R₅是-异丙基(特别是化合物117和123)、-叔丁基(化合物118和124)、-正庚基(特别是化合物120和126)、-异丙氧基羰基氧基甲基(特别是化合物121和127)，或-CONHCH₃或-CH₂CONHCH₃(特别是化合物122和128)。

另一个更优选的子组是具有取代的吡咯烷残基的化合物，其中R是甲基，R₁是-H，R₂是-甲基或-Cl，n，m＝0或1，X是-F，n＝1，并且其中吡咯烷被-COOH(特别是化合物22和29)或-SO₂NH₂(特别是化合物63和77)取代。

化合物的另一个特定子集是化合物，其中

R是(R)-甲基；

R₁是-H；

W是优选地/>其中

R₂是-甲基或-Cl，优选-Cl；

X是-F，其中n＝1；

Y是-NR₃R₄

其中

N、R₃和R₄形成哌啶残基或吡咯烷残基，其各自任选地和独立地被以下残基之一取代：

-COOH、-CH₂COOH、-CONHCH₃、-CH₂CONHCH₃、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃或-CN，

优选-COOH、-CH₂COOH、-CONHCH₃或-CH₂CONHCH₃，

更优选(S)-COOH、(R)-COOH、(S)-CH₂COOH或(R)-CH₂COOH，

特别是被(S)-COOH、(R)-COOH、(S)-CH₂COOH或(R)-CH₂COOH取代的哌啶残基。

更优选的化合物组是具有取代哌啶残基的化合物，其中R是(R)-甲基，R₁是-H，R₂是-甲基或-Cl，优选-Cl，X是-F，n＝1，并且其中哌啶被-COOH、-CH₂COOH、-CONHCH₃、-CH₂CONHCH₃、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃或-CN取代(特别是化合物14、106、107、108、122和128)。

化合物的另一个特定子集是其中哌啶残基或吡咯烷残基在3位被取代的化合物。

该子集的更优选的化合物组是在3位具有如上定义的任何取代的哌啶或吡咯烷残基的化合物(特别是化合物3、6、7、8、9、10、11、12、14、15、16、17、18、20、21、22、23、24、27、28、29、32、33、37、39、41、42、43、46、47、48、50、52、53、54、63、66、67、69、72、73、75、76、77、78、79、84、86、87、88、95、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127和128)。该组中更优选具有被以下取代的取代哌啶残基的化合物：在3位被-COOH取代(特别是化合物3、8、9、14、23、27、33、37、43、46、47、50、53、108、110、116)、在3位被-CH₂COOH取代(特别是化合物66、72、102、103、106和107)、在3位被-COOR₅或-CH₂COOR₅取代，其中R₅是2-吗啉代乙基(特别是化合物119和125)，或其中R₅是-异丙基(化合物117和123)、-叔丁基(特别是化合物118和124)、-正庚基(特别是化合物120和126)、-异丙氧基羰基氧基甲基(化合物121和127)，或在3位被-CONHCH₃或-CH₂CONHCH₃取代(化合物122和128)。

该子集的另一组优选的化合物具有在3位被-SO₂NR₈R₉取代的取代哌啶残基，其中R₈是-H，R₉是-H或-甲基(特别是化合物12、18、20、24、52和69)。

另一组优选的具有取代的吡咯烷残基的化合物是在3位被-COOH(特别是化合物22、29)或-SO₂NH₂(特别是化合物63和77)取代的化合物。

更优选的化合物组是具有取代哌啶残基的化合物，其中取代在3位，其中R是甲基，R₁是-H，R₂是-甲基或-Cl，n，m＝0或1，X是-F，n＝1，并且其中哌啶被以下残基之一取代：-COOH、-COOCH₃、-COOC₂H₅、-CH₂COOH、-CH₂COOCH₃、-CH₂COOCH₂CH₃、-CONH₂、-CONHCH₃、-CON(CH₃)₂、-CH₂CONHCH₃、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃或-CN(特别是化合物3、6、7、8、9、12、14、15、16、17、18、20、21、23、24、27、28、32、33、41、46、47、48、50、52、53、66、67、69、72、76、78、84、86、87、100、101、102、103、104、105、106、107、108、111、122和128)。该组的甚至更优选的子组是其中R是(R)-甲基的化合物(特别是化合物14、23、27、28、32、100、101、102、103、104、105、106、107、108、111、122和128)。

更优选的子组是具有取代哌啶残基的化合物，所述取代哌啶残基在3位被-COOH取代并且其中R是(R)-甲基(特别是化合物14、23、27和108)，或在3位被-CH₂COOH取代并且其中R是(R)-甲基(特别是化合物102、103、106和107)。

另一个更优选的子组是化合物，其中R是(R)-甲基并且具有取代的哌啶残基，其中取代在3位，被-COOR₅或-CH₂COOR₅取代，其中R₅是2-吗啉代乙基(特别是化合物119和125)，或其中R₅是-异丙基(化合物117和123)、-叔丁基(特别是化合物118和124)、-正庚基(特别是化合物120和126)、-异丙氧基羰基氧基甲基(特别是化合物121和127)，或被-CONHCH₃或-CH₂CONHCH₃取代(特别是化合物122和128)。

特别优选的化合物组是具有取代哌啶残基的化合物，其中R是(R)-甲基，R₁是-H，R₂是-甲基或-Cl，优选-Cl，X是-F，n＝1，并且其中哌啶被-COOH、-CH₂COOH、-CONHCH₃、-CH₂CONHCH₃、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃或-CN在3位取代(特别是化合物14、104、105、106、107、108、122和128)。该组中特别优选的子组是R₂是-Cl，X是-F且n＝1的化合物(特别是化合物14、104、105、106、107、108、122和128)。

更优选的子组是其中X在对位，具有在3位被-COOH取代并且其中R是(R)-甲基(特别是化合物14和108)或在3位被-CH₂COOH取代并且其中R是(R)-甲基(特别是化合物106和107)的取代哌啶残基的化合物。

另一个更优选的子组是其中X在对位，其中R是(R)-甲基并且具有被以下取代的取代哌啶残基的化合物：在3位被-COOR₅或-CH₂COOR₅取代，其中R₅是2-吗啉代乙基(特别是化合物119和125)，或其中R₅是-异丙基(化合物117和123)、-叔丁基(特别是化合物118和124)、-正庚基(特别是化合物120和126)、-异丙氧基羰基氧基甲基(特别是化合物121和127)，或在3位被-CONHCH₃或-CH₂CONHCH₃取代(特别是化合物122和128)。

特别优选的化合物组是其中X在对位，具有取代的哌啶残基的化合物，其中R是(R)-甲基，R₁是-H，R₂是-甲基或-Cl，优选-Cl，X是-F，n＝1，并且其中哌啶在3位被-COOH、-CH₂COOH、-CONHCH₃、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃或-CN取代(特别是化合物14、106、107、108、122和128)。该组中特别优选的子组涉及R₂是-Cl，X是-F且n＝1的化合物(特别是化合物14、106、107、108、122和128)。

化合物的另一个特定子集涉及选自以下的化合物：

2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-(2-吡啶基)丙酰胺、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酸、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酸、

N-环丙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-环丙基-丙酰胺、

(3S)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-羧酸

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-(2-吡啶基)丙酰胺、

(2R)-N-异丙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

N,N-二甲基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲腈、

(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N,N-二甲基-丙酰胺、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲腈、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-甲基-丙酰胺、

(2R)-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸异丙酯、

(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-环丙基-丙酰胺、

N-异丙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸异丙酯、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-乙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-溴苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

N-乙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

2-[4-(2-溴苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N,N-二甲基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-环丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-乙基-丙酰胺、

2-[4-(2-溴苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸异丙酯、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N,N-二甲基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-乙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-2-甲基-丙酸、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-2-甲基-丙酸乙酯、

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸异丙氧基羰氧基甲酯、

2-[4-(2-氟苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

2-[4-(2,6-二氟苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

7-[(1R)-1-甲基-2-氧代-2-(1-哌啶基)乙氧基]-4-(3-甲基-2-噻吩基)色烯-2-酮

(2R)-N-异丙基-2-[4-(3-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺

(2R)-N,N-二甲基-2-[4-(3-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺

2-[(3R)-1-[(2R)-2-[4-(3-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-哌啶基]乙酸乙酯、和

外消旋-(3S)-1-[2-[4-(2-甲基-3-噻吩基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸

或其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

制备通式(I)化合物的方法

另一方面，本发明提供制备通式(I)化合物的新方法。

一方面，本发明涉及制备通式(I)化合物的方法，包括以下步骤：

(a)使式(A)化合物

其中W如上所定义，

与间苯二酚或2,6-二羟基吡啶反应，得到式(B)的化合物

其中W和M如上所定义，

或

(a1)使式(K)化合物

其中W和M如上所定义，

与三溴化硼反应，得到式(B)化合物

其中W和M如上所定义，

以及

(b)用烷基化剂，优选用式Z-OH或Z-Br的烷基化剂将如上定义的式(B)的化合物烷基化，其中Z是基团

其中R、R₁和Y如上所定义，

以获得式(C)的化合物

其中W、M和Z如上所定义。

式(C)化合物对应于如上定义的式(I)化合物

在方法步骤(a)和(a1)中用作原料的式(A)和(K)化合物可商购获得，或者可以按照文献方法或具体实施例中所述的类似方式制备。例如，式(K)化合物可如实施例中方案1所示通过使可商购获得的香豆素衍生物与式W-B(OH)₂化合物反应获得，其中W和M如上所定义。在一个实施方案中，M为CH，如下所示。

式W-B(OH)₂化合物可如文献方法中所述制备。

在方法步骤(a)和(a1)中用作原料的间苯二酚、2,6-二羟基吡啶和三溴化硼分别可商购获得或可通过本领域技术人员已知的标准方法获得。

所需的式(B)的香豆素和8-氮杂-香豆素化合物可以根据方法步骤(a)由相应的式(A)的β-酮酯和所需的间苯二酚通过Pechmann环化制备，例如Leonetti等人(2004)或Gosselin等人(2010)描述的方法。其它文献实例包括诸如Tasler等人，WO2016/146583A1，p.49-方案1或Sharma等人(2013)的出版物。

在方法步骤(b)中，式(B)化合物的烷基化可以根据Mitsunobu反应在标准烷基化条件下用任何合适的烷基化剂，例如用烷基溴(Z-Br)或醇(Z-OH)进行(Mitsunobu等人，1967)。

方法步骤(a)、(a1)和(b)可以根据本领域已知的标准方法进行，而进一步的指导可以在下面公开的反应方案和实施例中找到。

在一个方面，本发明涉及如上定义的式(B)的中间体化合物或式(K)的化合物。

在优选的实施方案中，本发明涉及制备如上定义的式(IA)的本发明化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)使式(A)化合物

其中R₂和X如上所定义；

与间苯二酚反应，得到式(B)的化合物。

其中R₂和X如上所定义，

以及

(b)将式(B)的化合物烷基化以获得式(C)的化合物

其中R₂和X如上所定义，且

Z是基团

其中R、R₁和Y如上所定义。

在方法步骤(a)中用作原料的式(A)化合物可商购获得，或者可以按照文献方法或具体实施例中所述的类似方式制备。在方法步骤(a)中用作原料的间苯二酚是可商购获得的或可以通过本领域技术人员已知的标准方法获得。

式(B)化合物的烷基化可以根据Mitsunobu反应用任何合适的烷基化剂，例如用烷基溴(Z-Br)或用醇(Z-OH)进行(Mitsunobu和Yamada，1967)。两个反应步骤都可以根据本领域已知的标准方法进行，而进一步的指导可以在下面公开的反应方案和实施例中找到。

另一方面，本发明涉及制备本发明的式(I)化合物的方法，其中Y是对应于式(F)化合物的如上定义的-NR₃R₄，所述方法包括以下步骤：

(a)水解式(D)的化合物

其中W、M、R、R₁和R₁₁如上所定义，

以获得式(E)的化合物

其中W、M、R和R1如上所定义，

以及

(b)将式(E)化合物酰胺化以获得式(F)化合物

其中W、M、R、R₁、R₃和R₄如上所定义。

在方法步骤(a)中用作原料的式(D)化合物对应于式(I)化合物，其中Y＝-OR₁₁，并且可以例如通过如上所述的制备式(I)化合物的方法获得。

在方法步骤(b)中用作原料的任选取代的胺是可商购获得的或可以通过标准方法制备。

在一个方面，本发明涉及如上文所定义的式(D)中间体化合物或式(E)中间体化合物。

同样，两个反应步骤可以根据本领域已知的标准方法进行，而进一步的指导可以在下面公开的反应方案和实施例中找到。例如，步骤(b)可以根据已知的标准方法用任选取代的胺进行。

在另一个优选的实施方案中，本发明涉及制备本发明的式(IA)化合物的方法，其中Y是如上定义的-NR₃R₄，所述方法包括以下步骤：

(a)水解式(D)的化合物

其中R、R₁、R₂、R₅和X如上所定义，

以获得式(E)的化合物

其中X、R、R₁和R₂如上所定义，

以及

(b)将式(E)化合物酰胺化以获得式(F)化合物

其中X、R、R₁、R₂、R₃和R₄如上所定义。

在另一方面，本发明涉及制备本发明化合物的方法，其中Y是-NR₃R₄且N、R₃和R₄形成如本文所定义的取代的5元或6元饱和杂环，其包括以下步骤：

(a)水解式(G)的化合物

其中W、M、R、R₁和m如上所定义，k＝1或2，R₁₂定义为-H或-C₁-C₄-烷基，R₁₃定义为-C₁-C₄-烷基，

以获得式(H)的化合物

其中W、M、R、R₁和m如上所定义，k＝1或2，R₁₂定义为H或-C₁-C₄-烷基，

以及

(b)酯化式(H)的化合物以获得式(J)的化合物

其中W、M、R、R₁和m如上所定义，k＝1或2，R₁₂定义为-H或-C₁-C₄-烷基，且

R₅如上所定义，条件是R₅不是氢。

在另一个优选的实施方案中，本发明涉及制备本发明的式(IA)化合物的方法，其中Y是-NR₃R₄且N、R₃和R₄形成如本文所定义的取代的5元或6元饱和杂环，其包括以下步骤：

(a)水解式(G)的化合物

其中R、R₁、R₂、X和m如上所定义，k＝1或2，R₁₂定义为-H或-C₁-C₄-烷基且R₁₃定义为-C₁-C₄-烷基，

以获得式(H)的化合物

其中R、R₁、R₂、X和m如上所定义，k＝1或2，R₁₂定义为-H或-C₁-C₄-烷基，

以及

(b)酯化式(H)的化合物以获得式(J)的化合物

其中R、R₁、R₂、X和m如上所定义，k＝1或2，R₁₂定义为-H或-C₁-C₄-烷基，R₅如上所定义，条件是R₅不为氢。

式(C)化合物、式(F)化合物、式(H)化合物和式(J)化合物是通式(I)化合物。

这些反应步骤也可以根据本领域已知的标准方法进行，而进一步的指导可以在下面公开的反应方案和实施例中找到。

方案1.1显示了对应于如上定义的式(I)化合物的式(C)化合物的制备。如上所述，原料可商购获得，或者可以按照文献方法或具体实施例中所述的类似方式制备。所需的式(B)香豆素可商购获得或由相应的式(A)的β-酮酯(其中X如上所定义)和所需的间苯二酚通过Pechmann环化制备，如Leonetti等人(2004)或Gosselin等人(2010)之一所述。其它文献实例包括诸如Tasler等人，WO2016/146583A1，p.49-方案1或Sharma等人(2013)的出版物。

式(B)的香豆素可以进一步用商业烷基溴(Z-Br)烷基化或与商业醇进行Mitsunobu(Z-OH)反应以产生式(C)的化合物。

对本领域技术人员显而易见的是，合成步骤的顺序取决于原料的可用性和官能团相容性，并且可以随化合物而变化。

方案1.1：式(C)化合物的示例性制备

方案1.2显示了对应于如上定义的式(I)化合物的式(C)化合物的优选实施方案的制备。

方案1.2：式(C)化合物的示例性制备

新型式(I)化合物作为药物的用途

此外，已经发现式(I)化合物适合用作药物。具体地，已经发现式(I)化合物可用于治疗癌症，优选黑色素瘤、转移性黑色素瘤、胰腺癌、肝细胞癌、淋巴瘤、急性髓性白血病、乳腺癌、成胶质细胞瘤、宫颈癌、肾癌、结肠直肠癌或卵巢癌。

以前已经描述了POLRMT抑制剂据称通过相当非特异性抑制线粒体转录来触发AML细胞的死亡，证实了这种合理性(Bralha等人，2015)。如以下实施例所述，本发明化合物在体外和体内对许多肿瘤细胞和肿瘤模型具有令人惊讶和出乎意料的细胞抑制活性。

因此，本发明的式(I)化合物及其药学上或兽医学上可接受的盐、水合物或溶剂化物表现有价值的药理学性质，因此可用作药物或医药。药物或医药可以进一步与另外的药学上或兽医学上可接受的载体和/或赋形剂一起配制，例如用于以片剂形式口服施用。片剂可以含有本领域公知的合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂、流动诱导剂和/或熔化剂。

因此，一方面，本发明涉及用作药物的如本文所定义的通式(I)的化合物。

本发明化合物对POLRMT表现出显著的和选择性的抑制作用。这可以例如在均相TR-FRET测定(参见实施例4)或定量实时PCR测定(参见实施例5)中确定。然而，本领域技术人员可以使用不同的测定来确定POLRMT的直接或间接抑制。

如上所述，已经发现本发明的化合物可用于治疗癌症。有证据表明，在黑色素瘤中，特别是在转移性黑色素瘤中，OXPHOS在癌细胞中起主要作用，并且线粒体的抑制通常可以导致优异的治疗成功率。例如，显示H3K4-脱甲基酶(JARID1B)和OXPHOS依赖性耐药性在转移性黑色素瘤中起作用(Roesch等人，2013)。Haq等人(2013)描述了在黑色素瘤中用MEK抑制剂的护理标准(SoC)治疗导致PGC1-α依赖性OXPHOS增加，作为耐药性逃逸途径。还显示了维莫非尼对突变BRAF的抑制增加了BRAF突变黑色素瘤细胞的OXPHOS依赖性(等人，2015)。此外，增强的OXPHOS、谷氨酰胺分解和β-氧化构成黑色素瘤细胞的转移表型(Rodrigues等人，2016)。

对于胰腺癌，已经描述了选择性杀伤OXPHOS依赖性Panc-1细胞以用牛蒡子苷元治疗(Brecht等人，2017)。在肝细胞癌中，用MEK抑制剂的护理标准(SoC)治疗导致PGC1-α依赖性OXPHOS增加，作为耐药性逃逸途径(Bhat等人，2013，Ling等人，2017)。对于淋巴瘤，已经证明OXPHOS依赖于mt-复合物III抑制剂抗霉素A(等人，2013)。如上所述急性髓性白血病，POLRMT抑制剂先前已经被描述为通过相当非特异性地抑制线粒体转录而触发AML细胞的死亡(Bralha等人，2015)。

乳腺癌也应该是合适的癌症适应症，因为孕酮受体的过量表达存在于所有乳腺癌患者的50％以上，而孕酮刺激线粒体活性，随后抑制细胞凋亡(Nadji等人，2005，Behera等人，2009)。此外，mTOR的抑制导致向OXPHOS依赖性的转变，并且mTOR抑制剂与二甲双胍组合存在葡萄糖依赖性效应(Pelicano等人，2014，Ariaans等人，2017)。此外，还描述了由二甲双胍引起的线粒体功能障碍预防乳腺癌中的肿瘤生长(Sanchez-Alvarez等人，2013)。

对于成胶质细胞瘤，已知恶性种群恢复(malignant repopulation)依赖于OXPHOS(Yeung等人，2014)。关于宫颈癌，POLRTM抑制剂抑制游离脂肪酸氧化(数据未显示)，否则其促进宫颈癌细胞增殖(Rodriguez-Enriquez等人，2015)。在肾癌中，有证据表明Birt-Hogg-Dubé肾肿瘤与线粒体基因表达上调有关(Klomp等人，2010)。在结肠癌中，合理性是基于以下发现：对5-氟尿嘧啶耐药的结肠直肠/结肠癌细胞对OXPHOS成瘾以存活并增强干细胞样特性(Denise等人，2015)。此外，在DLD-1肿瘤模型(参见实施例8)中证明的体内功效支持这种合理性。在卵巢癌模型中在单次治疗中进一步证明了体内功效(参见实施例7)。

因此，在另一方面，本发明涉及如本文所定义的本发明的式(I)的化合物，其用于治疗癌症、优选黑色素瘤、转移性黑色素瘤、胰腺癌、肝细胞癌、淋巴瘤、急性髓性白血病、乳腺癌、成胶质细胞瘤、宫颈癌、肾癌、结肠直肠癌或卵巢癌。

本发明的化合物优选用于与另一种癌症疗法同时、交替或随后组合治疗癌症的方法中，所述另一种癌症疗法优选选自化学疗法、免疫疗法、激素疗法、干细胞移植疗法、放射疗法或手术。很可能POLRMT抑制剂对肿瘤细胞的细胞抑制活性可以通过将治疗与各自的护理标准组合而进一步增强，以便获得改善的/相加的治疗结果。在本文中，设想同时、交替或随后施用各种治疗。许多标准类别的癌症疗法，化学疗法、免疫疗法、激素疗法、干细胞移植疗法、放射疗法或手术，似乎可与本发明的POLRMT抑制剂组合。

因此，在另一方面，本发明涉及如本文所定义的通式(I)的化合物，其用于与另一种癌症疗法同时、交替或随后组合治疗癌症的方法中，所述另一种癌症疗法优选选自化学疗法、免疫疗法、激素疗法、干细胞移植疗法、放射疗法或手术。

本发明还涉及治疗患有癌症的患者的方法，其包括给予治疗有效量的如上所述的化合物的步骤，优选同时、交替或随后与例如上文公开的另一种癌症疗法组合。

附图说明

图1：化合物14对人A2780卵巢癌裸鼠移植瘤的治疗效果。

菱形＝载体对照直到移植后第28天；

正方形＝30mg/kg化合物14直到移植后第21天；

三角形＝100mg/kg化合物14直到移植后第28天；

圆圈＝200mg/kg化合物14直到移植后第28天。

A：平均肿瘤体积±标准偏差(cm³)与移植后时间(天数)的关系。

B：平均体重±标准偏差(g)与移植后时间(天数)的关系。

图2：化合物14对人DLD-1结肠癌裸鼠移植瘤的治疗效果。

菱形＝1组：对照直到移植后第28天；

X＝2组：30mg/kg索拉非尼直到第28天正方形

三角形＝3组：30mg/kg化合物14直到移植后第28天；

圆圈＝4组：100mg/kg化合物14直到移植后第28天；

正方形＝5组：200mg/kg化合物14直到移植后第28天。

A：肿瘤生长(％)与肿瘤接种后时间(天数)的关系。

B：平均身体变化(％)与肿瘤接种后时间(天数)的关系。

实施例

缩写和首字母缩写

用于化学描述和以下实施例中的缩写和首写字母缩写为：

Abs绝对构型(至少一个立构中心)

aq.水性

BB结构单元

BBr₃三溴化硼

br.宽峰

Bu₃SnN₃三丁基叠氮化锡

CDCl₃氘代氯仿

CD₃OD氘代甲醇

CHCl₃氯仿

cHex环己烷

Cs₂CO₃碳酸铯

CuI碘化铜(I)

d双峰

DCM二氯甲烷

DIAD偶氮二羧酸二异丙酯

DIPEA二异丙基乙胺

DMAP 4-N,N-二甲氨基吡啶

DMF二甲基甲酰胺

DMSO二甲基亚砜

DMSO-d₆氘代二甲基亚砜

EDC 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺

ES电喷雾

Et₃N三乙胺

Et₂NH二乙胺

Et₂O乙醚

EtOAc乙酸乙酯

EtOH乙醇

h小时

HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲六氟磷酸盐

HBTU 3-[双(二甲基氨基)甲基脲]-3H-苯并三唑-1-氧化物六氟磷酸盐

HCl盐酸

H₂O水

HOBt 1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇

K₂CO₃碳酸钾

m多重峰

MeCN乙腈

MeOH甲醇

MeI碘甲烷

min分钟

MS质谱分析法

NaHCO₃碳酸氢钠

NaCl氯化钠

NaH氢化钠

NH₄Cl氯化铵

NMR核磁共振

Pd(PPh₃)₄四(三苯基膦)钯(0)

PPh₃三苯基膦

PBu₃三丁基膦

p.o.口服施用

q四重峰

QD每日一次

quint五重峰

rt室温

s单峰

sat.饱和的

sept七重峰

S.D.标准偏差

SPhos 2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基联苯

t三重峰

THF四氢呋喃

1.制备本发明式(I)化合物的方法

通常，本发明所用的式(I)化合物可以通过本领域已知的标准技术，通过与其类似的已知方法和/或通过本文所述的方法，使用可商购获得的或可根据常规化学方法生产的原料来制备。用于制备本发明式(I)化合物的具体方法取决于所需的具体化合物。这些因素如分子不同位置的取代类型和原料的商业可获得性在所遵循的途径中和在用于制备本发明的式(I)的具体化合物的所选反应条件中起作用。本领域普通技术人员容易认识到这些因素。

提供以下制备方法以帮助读者合成本发明的化合物。

2.实验方法

LC-MS方法

HPLC-电喷雾质谱(HPLC ES-MS)使用配备SQ 3100质谱检测器光谱仪的WatersAcquity超高效液相色谱(UPLC)获得。

柱：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm，2.1x 50mm

流：0.500mL/min

洗脱液：A：含0.05％甲酸的H₂O和B：含0.05％甲酸的MeCN。

梯度：在3.5min内从5％B洗脱至100％B，初始保持0.5min，最终在100％B保持0.5min。总运行时间：5min。

所描述的梯度可以根据所分析的化合物的物理化学性质而改变，并且决不是限制性的。

制备型HPLC方法

使用由Waters 2767样品管理器、Waters 2545二元梯度模块、Waters SFO(SystemFluidics Organizer)、Waters 3100质量检测器和Waters 2498 UV/可见光检测器组成的Waters系统进行制备型HPLC。

柱：Prep C18 5μm OBD^TM，19x 150mm

流：20mL/min

洗脱液：A：含0.1％TFA的H₂O和B：含0.1％TFA的MeCN。

一般梯度：在20min内从X％B洗脱至Y％B，初始保持2min，最终在2min内增加至100％B，在100％B保持2min，随后1min梯度回到初始组成。总运行时间：26min。X＝Y-30％，其中Y＝上述LC-MS方法的洗脱浓度。

手性LC-MS方法

手性HPLC-电喷雾质谱(HPLC ES-MS)使用配备SQ 3100质谱检测器光谱仪的Waters Acquity超高效液相色谱(UPLC)获得。

柱：Lux 5u纤维素-2；150x 4.6mm

流：0.500mL/min-1.000mL/min

洗脱液：A：含0.05％甲酸的H₂O和B：含0.05％甲酸的MeCN。

梯度：在15min内从X％B洗脱至Y％B，初始保持0.5min并返回至100％B，最终保持2.5min。总运行时间：18min。化合物47的实例：X＝55％；Y＝65％

梯度可以根据所分析的化合物的物理化学性质而改变，并且决不是限制性的。

手性制备型HPLC方法

使用由Waters 2767样品管理器、Waters 2545二元梯度模块、Waters SFO(系统流体组织器，System Fluidics Organizer)、Waters 3100质量检测器和Waters 2498UV/可见光检测器组成的Waters系统进行制备型HPLC。

柱：Lux 5u纤维素-2，150x 21.2mm(Phenomenex)

流：20mL/min-30mL/min

洗脱液：A：含0.1％TFA的H₂O和B：含0.1％TFA的MeCN。

化合物108的梯度实例：在30min内从30％B洗脱至50％B，初始保持3min，最终在100％B保持6min。总运行时间：39min。

GC-MS方法

使用具有5977E MSD的Agilent 7820AGC获得气相色谱-质谱

柱：HP-5MS 30m，0.25mm ID，0.25μm

流：2mL/min。He

注射：100μl/s，250℃；分流：20mL/min。分流比：10

检测：Agilent 5977E

梯度：0min 50℃；0.5min 50℃；7.6min 300℃；9.6min 300℃。

NMR方法

质子(¹H)核磁共振(NMR)光谱用Oxford Varian 400/54(400MHz)光谱仪或BrukerAvance II(300MHz)光谱仪以残余质子化溶剂(CHCl₃δ7.26；MeOHδ3.30；DMSOδ2.49)作为标准进行测量。合成实施例的NMR数据与它们相应的结构归属一致。

合成方法

本发明化合物的一般合成描述于以下方案1-3中。原料可商购获得或具体实施例中所述的类似方式制备。所需的香豆素由相应的β-酮酯和所需的间苯二酚间苯二酚或2,6-二羟基吡啶通过Pechmann环化反应制备，如Leonetti等人(2004)或Gosselin等人(2010)之一所述。或者，苯基香豆素B是由4-氯-7-甲氧基-2H-色烯-2-酮通过Suzuki偶联得到化合物K，然后用BBr₃脱甲基化而合成的。

当不能购买β-酮酯时，它们由所需的苯甲酰氯和碳酸二乙酯或苯乙酮和丙二酸乙基钾在碱性条件下以方案1中所示的类似方式合成。

对于本领域技术人员显而易见的是，合成步骤的顺序取决于原料可用性和官能团相容性，并且可以随化合物而变化。

方案1：式(C)化合物的示例性制备

对于本领域技术人员显而易见的是，合成步骤的顺序取决于原料可用性和官能团相容性，并且可以随化合物而变化。特别地，为了快速多样化的目的，Mitsunobu/烷基化反应步骤(B至C)和Suzuki偶联步骤(K至B)可以颠倒。这适用于例如合成不同的含噻吩的中间体((R)-16D、(R)-16E、17D和17E)。中间体Q的Suzuki偶联的条件描述于方法M3d中。

香豆素可进一步用商业烷基溴(Z-Br)烷基化或与商业醇进行Mitsunobu(Z-OH)反应以产生式C化合物。

对于该专利中描述的实施例，Z是可能取代的乙酸烷基酯基团；这通常根据本领域已知的标准方法，如方案2中所述，进一步通过水解成相应的羧酸(E)，然后与可商购获得的任选取代的胺偶联来改性，以产生结构F。或者，可以用合适的、合成的或可商购获得的2-羟基乙酰胺L进行Mitsunobu反应，以直接获得结构F的化合物。下面列出了具体方法。

方案2：式(F)化合物的示例性制备

/>

当R₃和R₄形成任选取代的环状酰胺时，该酰胺可以带有酯部分或氨基甲酸酯部分，如式G和M所示，其可以进一步水解以获得亚结构H或N的化合物。实例概述于方案3中。当可商购获得的酯结构单元是外消旋的，或中间体D是根据方法M4制备的，偶联反应有时伴随手性制备型HPLC以允许分离非对映体。

在非可商购获得的酯结构单元的情况下，化合物J的合成需要以方法10或11中所述的方式进一步衍生化合物H。胺N还可以使用本领域已知的方法进一步改性，以获得式P的酰胺。此类改性的实例在化合物166的方法M12中描述。

方案3：式(H)、(J)、(N)和(P)化合物的示例性制备

式(C)化合物、式(F)化合物、式(H)化合物、式(J)化合物和式(P)化合物是本发明通式(I)化合物。

3.本发明的实验实施例

提供以下具体实施例以说明本发明，但不应将其解释为以任何方式限制本发明的范围。在列出中间体的表中，化合物可以具有表征例如(M+H)⁺质谱数据、HPLC纯度和/或NMR。没有表征的那些是可商购的，并且给出了CAS号。

3.1用于制备式(I)化合物的中间体的制备

3.1.1式(A)的取代的β-酮酯的合成

Pechmann缩合反应所需的非可商购获得的取代的β-酮酯A中间体由相应的苯乙酮或由相应的酰基氯制备，如E.J.Hanan等人(2012)所述，如方案1所示。该方法通过中间体1A和2A举例说明。

每个方法的至少一个中间体实施例描述如下：

中间体1A-根据方法1(M1)的合成

3-(2-氯-4-氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯

用戊烷洗涤在矿物油中的60％NaH(4.86g，121.7mmol)，并在氮气流下干燥。加入无水甲苯(350mL)并将悬浮液冷却至0℃。在25min内滴加碳酸二乙酯(27.4g，231.8mmol)，然后在20min内滴加2-氯-4-氟苯乙酮(10g，57.9mmol)。除去冷却浴，将反应加热至50℃并搅拌18h。将反应混合物冷却至室温并倒入冰冷水(500mL)中。水层用10％HCL水溶液酸化至pH 2并用Et₂O萃取。将合并的有机相用MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发，得到所需产物1A(6.0g，42％)，作为互变异构体的混合物，将其不经进一步纯化用于下一步骤。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.63(dd,1H),7.14-6.93(m,2H),4.12(q,2H),3.96(s,2H),1.18(t,3H)-互变异构体1，3-(2-氯-4-氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ12.43(s,1H),7.52(dd,1H),7.14-6.93(m,2H),5.48(s,1H),4.21(q,2H),1.27(t,3H)-互变异构体2，(Z)-3-(2-氯-4-氟苯基)-3-羟基丙烯酸乙酯

MS(ES)C₁₁H₁₀ClFO₃理论值：244/246，实测值：245/247(M+H)⁺，65％

中间体2A-根据方法2(M2)合成

3-(2-溴苯基)-3-氧代丙酸乙酯

在氮气流下将丙二酸乙基钾(1.39g，8.2mmol)悬浮于无水MeCN(22mL)中，并将混合物冷却至10℃。加入Et₃N(1.2mL，8.6mmol)和MgCl₂(935mg，9.84mmol)，将反应在室温搅拌2h 30min。将反应再次冷却至10℃，加入2-溴苯甲酰氯(900mg，4.1mmol)，然后再加入Et₃N(114μl，0.82mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。将反应用饱和NH₄Cl溶液淬灭并用EtOAc萃取。合并的有机层经MgSO₄干燥、过滤并真空蒸发。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过硅胶快速硅胶色谱法纯化，得到所需产物2A(379mg，34％)，为互变异构体混合物，其不经进一步纯化即用于下一步骤。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.63-7.58(m,1H),7.39-7.21(m,2H),4.16(q,2H),3.99(s,2H),1.22(t,3H)-互变异构体1，3-(2-溴苯基)-3-氧代丙酸乙酯

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ12.40(s,1H),7.52-7.45(m,1H),7.39-7.21(m,2H),5.43(s,1H),4.25(q,2H),3.99(s,1H),1.31(t,3H)-互变异构体2，(Z)-3-(2-溴苯基)-3-羟基丙烯酸乙酯

MS(ES)C₁₁H₁₁BrO₃理论值：270/272，实测值：271/273(M+H)⁺，～100％

3.1.2式(B)中间体化合物的制备

中间体1B-根据方法3a(M3a)的合成

4-(2-氯-4-氟苯基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮(1B)

将中间体1A(2g，8.18mmol)溶于甲磺酸(12.41g，25mL，129.1mmol)中并加入间苯二酚(851mg，7.72mmol)。将混合物在45℃搅拌2h，然后使反应冷却至室温。滴加EtOH(30mL)，然后加入水(100mL)。将悬浮液用EtOAc萃取并用盐水洗涤。合并的有机层用MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过柱色谱法纯化，得到所需产物1B(1.896g，80％)，为粉红色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ10.70(br.s,1H),7.69(dd,1H),7.50-7.53(m,1H),7.42(td,1H),6.87(d,1H),6.81(d,1H),6.74(dd,1H),6.21(s,1H)。

MS(ES)C₁₅H₈ClFO₃理论值：290/292，实测值：291/293(M+H)⁺，95％

3.1.3式(K)中间体化合物的制备

中间体8B-根据方法3b(M3b)的合成

2-(7-甲氧基-2-氧代-2H-色烯-4-基)苄腈(1K)

4-氯-7-甲氧基-2H-色烯-2-酮(500mg，2.37mmol)、2-氰基苯基硼酸(384mg，2.61mmol)、Pd₂(dba)₃(109mg，0.12mmol)、SPhos(146mg，0.36mmol)和K₃PO₄ (1.01g，4.76mmol)置于20mL微波小瓶中，将小瓶用3个循环真空/N₂调节，然后添加无水THF(10mL)并将反应加热至60℃并搅拌20h。使混合物冷却至室温，过滤出固体并用丙酮洗涤。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过柱色谱法纯化，得到所需产物1K(336mg，56％)，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.79(d,1H),7.75-7.63(m,1H),7.57(t,1H),7.41(d,1H),6.97-6.81(m,2H),6.72(dd,1H),6.20(s,1H),3.82(s,3H)。

MS(ES)C₁₇H₁₁NO₃理论值：277，实测值：278(M+H)⁺，100％

2-(7-羟基-2-氧代-2H-色烯-4-基)苄腈(8B)

将化合物1K(150mg，0.541mol)溶解在DCM(9mL)中，并且然后将混合物冷却至-20℃并且将BBr₃(150mg，58μL)添加在DCM(5mL)中。使反应缓慢升温至室温过夜。加入少量BBr₃的DCM溶液等分试样直至原料完全消耗。将反应倾倒在冰水(20mL)上并用DCM(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)和盐水(5mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发，得到所需产物8B(68mg，48％)，为粉红色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.84-7.75(m,1H),7.70(td,1H),7.57(td,1H),7.47-7.38(m,1H),6.91(d,1H),6.82(d,1H),6.68(dd,1H),6.20(s,1H)。

MS(ES)C₁₆H₉NO₃理论值：263，实测值：264(M+H)⁺，100％

中间体11B-根据方法3c(M3c)的合成

4-(2-氯-4-氟苯基)-7-羟基-2H-吡喃并[2,3-b]吡啶-2-酮(11B)

将中间体1A(1.211g，5mmol)溶于NMP(0.5mL)中并加入2,6-二羟基吡啶(500mg，4.5mmol)。将混合物在密封管中在170℃搅拌3h，然后将反应冷却至90℃并用二噁烷(50ml)稀释。将粗产物转移到含有水基质的烧瓶中，除去二烷。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过柱色谱法纯化，得到所需产物11B(224mg，17％)，为红色砖状固体。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.30(s,1H),7.68(dd,1H),7.53(dd,1H),7.42(td,1H),7.32(d,1H),6.58(d,1H),6.30(s,1H)。

MS(ES)C₁₄H₇ClFNO₃理论值：291/293，实测值：292/294(M+H)⁺，～92％

以与中间体1B、8B或11B类似方式合成以下香豆素中间体(参见表1)。

表1-式(B)的羟基香豆素

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3.1.4式(D)中间体化合物的制备

中间体1D-根据方法4(M4)的合成

2-((4-(2-氯-4-氟苯基)-2-氧代-2H-色烯-7-基)氧基)丙酸乙酯(1D-82)

将中间体1B(3.8g，13.1mmol)溶于DMF(18mL)，并加入Cs₂CO₃(11g，33.8mmol)，随后加入2-溴丙酸乙酯(3.5g，19.5mmol)。将反应在室温搅拌3h。将混合物用水稀释并用EtOAc萃取。有机层用水和盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。用Et₂O进一步研磨固体，得到所需产物1D(3.00g，59％)，为灰白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.26-7.16(m,2H),7.12-7.01(m,1H),6.94-6.86(m,1H),6.79-6.63(m,2H),6.13(s,1H),4.73(q,1H),4.17(q,2H),1.59(d,3H),1.22(t,3H)。

MS(ES)C₂₀H₁₆ClFO₅理论值：390/392，实测值：391/393(M+H)⁺，95％

中间体(R)-1D-根据方法5(M5)的合成

(R)-2-((4-(2-氯-4-氟苯基)-2-氧代-2H-色烯-7-基)氧基)丙酸乙酯((R)-1D)

将中间体1B(200mg，0.69mmol)和PPh₃(198mg，0.76mmol)溶于THF(7mL)中，并且加入(-)-(S)-2-羟基丙酸乙酯(117μl，1.03mmol)。将反应冷却至0℃，滴加DIAD(149μl，0.76mmol)。然后将反应在室温搅拌4h。将混合物用EtOAc稀释并用饱和NaHCO₃溶液、饱和NH₄Cl溶液和水洗涤。有机层经MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过硅胶快速色谱法纯化，得到所需产物(R)-1D(203mg，75％)，为无色胶状物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.73-7.67(m,1H),7.60-7.54(m,1H),7.47-7.40(m,1H),7.02(dd,1H),6.98-6.93(m,1H),6.90-6.85(m,1H),6.33(s,1H),5.18(q,1H),4.16(q,2H),1.54(d,3H),1.19(t,3H)。

MS(ES)C₂₀H₁₆ClFO₅理论值：390/392，实测值：391/393(M+H)⁺，100％

3.1.4.1通过中间体(Q)的式(D)的中间体化合物的制备

中间体1Q-根据方法5(M5)的合成

(R)-2-((4-氯-2-氧代-2H-色烯-7-基)氧基)丙酸叔丁酯1Q

将4-氯-7-甲氧基-2H-色烯-2-酮(72mg，0.37mmol)和PPh₃(119mg，0.40mmol)溶于无水THF(3mL)中，并加入(2S)-2-羟基丙酸叔丁酯(80mg，0.55mmol)。将反应冷却至0℃，并将DIAD(79μl，0.40mmol)滴加到无水THF(1mL)中。然后将反应在室温搅拌2h。将混合物用EtOAc稀释并用饱和NaHCO₃溶液、饱和NH₄Cl溶液和水洗涤。有机层经MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过硅胶快速色谱法纯化，得到所需产物1Q(33mg，28％)，为无色胶状物。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.76(d,1H),6.92(dd,1H),6.75(d,1H),6.44(s,1H),4.69(q,1H),1.64(d,3H),1.46(s,9H)。

MS(ES)C₁₆H₁₇ClO₅理论值：324/326，实测值：325/327(M+H)⁺，95％

中间体(R)-16D-根据方法3d(M3d)的合成

(R-)2-((4-(4-甲基噻吩-3-基)-2-氧代-2H-色烯-7-基)氧基)丙酸叔丁酯((R)-16D)

将中间体1C¹(31mg，0.095mmol)、4-甲基-3-噻吩硼酸(18mg，0.123mmol)、Pd(PPh)₃(4.4mg，0.004mmol)和K₂CO₃ (26mg，0.191mmol)置于4mL微波小瓶中，将小瓶用3个循环真空/N₂调节，然后加入DME：H₂O(2mL)的2：1混合物并将反应加热至100℃并搅拌2h。将混合物用EtOAc稀释并用水和盐水洗涤。有机层经MgSO₄干燥，经硅藻土过滤，并真空蒸发滤液。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过柱色谱法纯化，得到所需产物(R)-16D(30mg，81％)，为白色固体。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.69(dt,1H),7.43(ddt,1H),7.16(d,1H),6.95(d,1H),6.89(ddd,1H),6.21(d,1H),5.01(q,1H),2.07(dt,3H),1.52(dd,3H),1.40(d,9H)。

MS(ES)C₂₁H₂₂O₅S理论值：386，实测值：387(M+H)⁺，100％

3.1.5式(E)中间体化合物的制备

中间体1E-根据方法6a(M6a)的合成

2-((4-(2-氯-4-氟苯基)-2-氧代-2H-色烯-7-基)氧基)丙酸(1E-99)

将中间体1D(3g，7.67mmol)溶于THF(53mL)中并加入0.5M NaOH水溶液(32mL)。将反应在室温搅拌3h，然后再加入0.5M NaOH水溶液(7mL)，将反应搅拌3h 30min。将混合物用EtOAc萃取，然后将水相用10％HCl水溶液酸化至pH2，并用DCM萃取。合并的DCM层经MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发，得到所需产物1E(2.8g，100％)，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.27-7.19(m,2H),7.08(td,1H),7.93(d,1H),6.82-6.69(m,2H),6.15(s,1H),4.80(q,1H),1.66(d,3H)。

MS(ES)C₁₈H₁₂ClFO₅理论值：362/364，实测值：363/365(M+H)⁺，98％

中间体14E-根据方法6c(M6c)的合成

2-((4-(2-氯-4-氟苯基)-2-氧代-2H-吡喃并[2,3-b]吡啶-7-基)氧基)丙酸(14E)

将中间体14D(200mg，0.5mmol)溶于4：1的DCM：TFA溶液(5ml)中并将反应在室温搅拌2h。真空蒸发溶剂，得到所需产物14E(213mg，93％)，为棕色泡沫状物(TFA盐)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.69(ddd,1H),7.55(td,1H),7.43(tt,2H),6.87(d,1H),6.43(d,1H),5.25(qd,1H),1.53(d,3H)。

MS(ES)C₁₇H₁₁ClFNO₅理论值：365/367，实测值：364/366(M-H)⁺，94％

以与中间体1D、(R)-1D、1E、14E或(R)-16D类似的方式合成表2所示的乙酯和羧酸中间体。

表2-乙酯和羧酸中间体

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3.1.6式(G)中间体化合物的制备

中间体1G-根据方法7a(M7a)的合成

(3S)-1-(2-((4-(2-氯-4-氟苯基)-2-氧代-2H-色烯-7-基)氧基)丙酰基)哌啶-3-羧酸乙酯(1G)

将中间体1E(1.37g，3.78mmol)、EDC.HCl(1.09g，5.67mmol)和HOBt.xH₂O(765mg，5.67mmol)溶于DMF(57mL)和(S)-哌啶-3-羧酸乙酯中；缓慢加入(2R,3R)-2,3-二羟基丁二酸酯(1：1)(3.48g，11.33mmol)。加入Et₃N(1.6mL，11.33mmol)，并将混合物在40℃搅拌2h30min。将反应物用EtOAc稀释并用水、饱和NaHCO₃溶液、饱和NaH₄Cl溶液洗涤，再用水洗涤。有机相用MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过硅胶快速色谱法纯化，得到所需产物1G(806mg，42％)，为无色胶状物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.73-7.67(m,1H),7.58-7.51(m,1H),7.49-7.38(m,1H),7.08-6.73(m,3H),6.31(s,1H),5.63-5.35(m,1H),4.26-3.89(m,3H),3.88-3.53(m,1H),3.28-2.91(m,1H),2.50-2.30(m,1H),2.08-1.83(m,1H),1.83-1.00(m,10H)。

MS(ES)C₂₆H₂₅ClFNO₆理论值：501/503，实测值：502/504(M+H)⁺，100％

3.1.6.1用于直接合成式(G)中间体的中间体化合物(S,S)-1L的制备

中间体(S,S)-1L-根据方法7c(M7c)的合成

(S)-1-((S)-2-羟基丙酰基)哌啶-3-羧酸乙酯((S,S)-1L)

将L-(+)-乳酸(10g，111mmol)和(S)-(+)-烟酸乙酯(17.5g，111mmol)溶于无水DMF(15mL)中，用3个真空/N₂循环调节烧瓶。加入干燥DIPEA(14.35g，19.3mL)，然后分批加入HATU(50.6g，133mmol)(放热反应)。将反应在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(500mL)中并用EtOAc萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤。有机层经MgSO₄干燥，真空蒸发。粗化合物通过快速色谱法纯化，使用MeOH/DCM梯度，得到所需产物(S,S)-1L(12.7g，50％，灰白色固体)。

¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ4.59-4.40(m,2H),4.20-4.09(m,2H),3.84-3.62(m,2H),3.15-2.70(m,2H),2.50-2.40(m,1H),2.21-2.08(m,1H),1.80-1.51(m,3H),1.32-1.25(m,6H)。

GC-MS C₁₁H₁₉NO₄理论值：229，实测值：229(M⁺)，93％。

3.1.7式(M)中间体化合物的制备

中间体1M-根据方法7b(M7b)的合成

(R)-4-(2-((4-(2-氯-4-氟苯基)-2-氧代-2H-色烯-7-基)氧基)丙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1M)

将中间体(R)-1E(150.0mg，0.414mmol)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(154.0mg，0.827mmol)和DIPEA(141μL，0.827mmol)溶于无水DMF(2mL)中并在环境温度下添加HATU(235.8mg，0.620mmol)。将所得反应混合物搅拌过夜。然后将反应用EtOAc稀释并用水、饱和NaHCO₃溶液和盐水洗涤。有机相用MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过硅胶快速色谱法纯化，冻干后得到所需产物1M(171.8mg，78％)，为白色蓬松固体。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.73-7.67(m,1H),7.58-7.53(m,1H),7.46-7.40(m,1H),6.98-6.94(m,2H),6.85-6.78(m,1H),6.31(s,1H),5.51-5.40(m,1H),3.68-3.57(m,1H),3.56-3.45(m,2H),3.43-3.20(m,5H),1.46(d,3H),1.41(s,9H)。

MS(ES)C₂₇H₂₈ClFN₂O₆理论值：530/532，实测值：531/533(M+H)⁺，100％

3.1.8式(N)中间体化合物的制备

中间体1N-根据方法6c(M6c)的合成

(R)-4-(2-氯-4-氟苯基)-7-((1-氧代-1-(哌嗪-1-基)丙烷-2-基)氧基)-2H-色烯-2-酮TFA盐(1N)

中间体1M(162.5mg，0.306mmol)根据方法6c反应，冻干后得到所需产物1N(162.5mg，97％)，为白色蓬松固体。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.96(br.s,2H),7.73-7.67(m,1H),7.59-7.52(m,1H),7.47-7.40(m,1H),7.02(d,1H),6.95(d,1H),6.88-6.81(m,1H),6.33(s,1H),5.54-5.44(m,1H),3.89-3.58(m,4H),3.25-3.04(m,4H),1.47(d,3H)。

MS(ES)C₂₂H₂₀ClFN₂O₄理论值：430/432，实测值：431/433(M+H)⁺，100％

3.2.本发明式(I)化合物的制备

化合物47-根据方法6b(M6b)的合成

(3S)-1-(2-((4-(2-氯-4-氟苯基)-2-氧代-2H-色烯-7-基)氧基)丙酰基)哌啶-3-羧酸(47)

将中间体1G(805mg，1.60mmol)溶于THF(24mL)中并加入2M NaOH水溶液(12mL)。加入几滴MeOH直至混合物均匀。将反应在室温搅拌1h，用2M HCl中和，并再搅拌30min。混合物用EtOAc萃取，合并的有机相用水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。粗产物通过硅胶上快速色谱法纯化，使用MeOH/DCM梯度，得到所需产物47(726mg，95％)，为白色固体。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.41(1H,m),7.68(dd,1H),7.58-7.51(m,1H),7.42(td,1H),6.99-6.87(m,2H),6.87-6.74(m,1H),6.29(s,1H),5.55-5.36(m,1H),4.34-3.90(m,1H),3.89-3.46(m,1H),3.23-3.06(m,1H),2.92-2.70(m,1H),2.33-2.19(m,1H),2.04-1.84(m,1H),1.81-1.67(m,1H),1.66-1.48(m,1H),1.47-1.39(m,3H),1.39-1.26(m,1H)。

MS(ES)C₂₄H₂₁ClFNO₆理论值：473/475，实测值：474/476(M+H)⁺，100％

表3中所述四唑衍生物39和42根据方法8由相应的腈合成：

化合物42-根据方法8(M8)的合成

7-((1-(3-(2H-四唑-5-基)1-哌啶基)-1-氧代丙-2-基)氧基)-4-(邻甲苯基)-2H-色烯-2-酮(42)

将化合物41(26mg，0.063mmol)溶于邻二氯苯(600μl)中并在密封管中加入Bu₃SnN₃。将反应物在125℃搅拌1h 30min。将混合物冷却至室温，通过二氧化硅塞过滤并用DCM(40mL)和20％MeOH/DCM(400mL)洗涤。真空蒸发最新的级分，重悬浮在EtOAc中，用20：1的饱和NaHCO₃/1M NaOH溶液萃取。将合并的水相再酸化至pH 1并用EtOAc萃取。合并的有机相用MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。粗产物通过硅胶上快速色谱法纯化，使用MeOH/EtOAc梯度，得到所需产物42(12mg，42％)，为灰白色固体。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.45-7.29(m,3H),7.26-7.19(m,1H),6.98-6.70(m,3H),6.17(s,1H),5.55-5.38(m,1H),4.52-3.87(m,2H),3.65-2.92(m,2H),2.23-2.05(m,4H),1.91-1.60(m,3H),1.55-1.38(m,4H)。

MS(ES)C₂₅H₂₅N₅O₄理论值：459，实测值：460(M+H)⁺，99％

如下所述由前体(R)-3E合成异丙酯55：

化合物55-根据方法9(M9)的合成

(R)-2-((2-氧代-4-(邻甲苯基)-2H-色烯-7-基)氧基)丙酸异丙酯(55)

将中间体(R)-3E(10mg，0.031mmol)溶于含5M HCl的异丙醇(2mL)中，并将混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc稀释，并用水、1：1的饱和NaHCO₃/H₂O溶液洗涤，再用水洗涤。合并的有机相用MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过硅胶快速色谱法纯化，得到所需产物55(9.4mg，83％)，为无色胶状物。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.41-7.36(m,1H),7.34-7.27(m,2H),7.16(d,1H),6.95(d,1H),6.80(d,1H),6.74(dt,1H),6.16(s,1H),5.08(sept,1H),4.75(q,1H),2.15(s,3H),1.64(d,3H),1.30(dd,3H),1.22(dd,3H)。

MS(ES)C₂₂H₂₂O₅理论值：366，实测值：367(M+H)⁺，95％

化合物125-根据方法10(M10)的合成

2-((R)-1-((R)-2-((4-(2-氯-4-氟苯基)-2-氧代-2H-色烯-7-基)氧基)丙酰基)哌啶-3-基)乙酸2-吗啉代乙酯(125)

将化合物106(40mg，0.082mmol)溶于DMF(0.8mL)中并加入EDC·HCl(24mg，0.123mmol)、DMAP(1mg，0.008mmol)和4-(2-羟乙基)吗啉(54mg，0.410mmol)。将混合物在室温搅拌4h。将反应混合物用EtOAc稀释，并先后用饱和NaHCO₃溶液和水洗涤。有机相用MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。粗产物通过硅胶上快速色谱法纯化，使用MeOH/DCM梯度，得到所需产物125(37mg，75％)，为白色粉末。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.70(dd,1H),7.59-7.52(m,1H),7.46-7.40(m,1H),6.98-6.89(m,2H),6.85-6.79(m,1H),6.31(s,1H),5.51-5.35(m,1H),4.20-4.05(m,3H),3.99-3.77(m,1H),3.57-3.44(m,4H),3.15-3.04(m,1H),2.99-2.88(m,1H),2.71-2.53(m,1H),2.42-2.13(m,6H),1.88-1.71(m,2H),1.71-1.58(m,1H),1.55-1.40(m,4H),1.33-1.19(m,2H)。

MS(ES)C₃₁H₃₄ClFN₂O₇理论值：600/601，实测值：601/602(M+H)⁺，98％

化合物121-根据方法11(M11)的合成

(S)-1-((R)-2-((4-(2-氯-4-氟苯基)-2-氧代-2H-色烯-7-基)氧基)丙酰基)哌啶-3-羧酸((异丙氧基羰基)氧基)甲酯(121)

将化合物14(50mg，0.106mmol)溶于DMF(1mL)中并加入异丙基氯甲基碳酸酯(24mg，0.158mmol)和K₂CO₃(22mg，0.158mmol)。将混合物在50℃搅拌30min。将反应混合物用EtOAc稀释并用水洗涤。合并的有机相用MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过硅胶快速色谱法纯化，得到所需产物121(58mg，93％)，为白色粉末。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.70(dd,1H),7.59-7.52(m,1H),7.46-7.40(m,1H),7.01-6.90(m,2H),6.87-6.75(m,1H),6.31(s,1H),5.82-5.64(m,2H),5.52-5.42(m,1H),4.84-4.73(m,1H),4.20-3.50(m,2H),3.28-3.02(m,2H),2.72-2.53(m,1H),2.02-1.88(m,1H),1.82-1.36(m,6H),1.28-1.20(m,6H)。

MS(ES)C₂₉H₂₉ClFNO₉理论值：589/591，实测值：590/592(M+H)⁺，99％

化合物166-根据方法12(M12)的合成

(R)-4-(2-氯-4-氟苯基)-7-((1-(4-(2-氯乙酰基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基)氧基)-2H-色烯-2-酮(166)

向含氯乙酰氯(6.4μL，80.8μmol)的无水DCM(1mL)的冰冷溶液中逐滴加入含中间体1N(40.0mg，73.4μmol)和Et₃N(24.4μL，176.2μmol)的无水DCM(1mL)的溶液。将所得混合物在0℃搅拌30min，然后在室温搅拌1h。然后将反应用EtOAc稀释并用水、饱和NaHCO₃溶液和盐水洗涤。有机相用MgSO₄干燥，过滤并真空蒸发。粗产物使用EtOAc/cHex梯度通过硅胶快速色谱法纯化，冻干后得到所需产物166(25.5mg，68％)，为白色蓬松固体。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.32-7.26(m,2H),7.18-7.12(m,1H),7.02-6.96(m,1H),6.89-6.83(m,1H),6.82-6.76(m,1H),6.22(s,1H),5.04(q,1H),4.06(s,2H),3.84-3.29(m,8H),1.67(d,3H)。

MS(ES)C₂₄H₂₁Cl₂FN₂O₅理论值：506/508，实测值：507/509(M+H)⁺，100％

表3中描述了举例说明本发明的化合物。

当没有另外说明时，应假设方法7a、7b或7c，任选地接着方法6a、6b、6c或8，用于产生目标化合物。化合物44和45以与中间体(R)-1D(方法5)类似方式合成，不同之处在于使用PBu₃代替PPh₃。有时，使用方法7b的变型，其中使用偶联剂HBTU代替HATU。该方法用于例如获得化合物129、130和139，以及化合物135/138和136/150的前体(式M)。当哌啶环携带酯部分(化合物J)时，酯有时可以根据方法9、10或11由羧酸前体H合成。哌嗪或哌啶-胺氨基甲酸酯M也可以根据方法6c进一步改性以获得胺N，随后通过方法7a、7b、7c或12得到式P的酰胺。对本领域技术人员显而易见的是，反应条件如温度、稀释、反应时间或后处理方法(包括pH调节)取决于反应配偶体和官能团相容性，并且可以随化合物而变化。

通常，不测量中间体(酯(D)和(G)、酸(H))的对映体过量(ee)，并且假定其等于通过手性HPLC确定的最终化合物(酰胺(F)、酸(H)或酯(J))的值。有时需要非对映体混合物的手性分离以改善ee，特别是当任何羟基香豆素通过方法4烷基化时。

表3-本发明的式(I)化合物

/>

下表4中提供了表3中所示化合物的IUPAC化学名称。

4.用于HTS的均相TR-FRET测定和活性确定

TR-FRET测定基本上如WO2016/193231A1中所述进行，尤其如实施例1中所述(通过引用并入本文)。关于线粒体转录的背景，参见Falkenberg等人(2002)和Posse等人(Posse等人，2015)。该方法通过检测其产物(407bp长的RNA序列)的形成来监测线粒体RNA聚合酶的活性。通过两个DNA寡核苷酸探针与RNA产物序列内的特异性和相邻序列的杂交促进产物的检测。在探针退火时，使直接偶联于受体核苷酸探针(ATT0647，5')或经由偶联的链霉抗生物素蛋白引入的两种荧光团与另一侧的生物素化供体核苷酸探针(铕穴合物，3')相互作用，充分接近以用作荧光-供体-受体对，如Walters和Namchuk(2003)中总体描述。因此，在340nm激发时产生665nm的FRET信号。

简言之，本文所述的方案用于在具有非结合表面的低体积384孔微量滴定板中进行筛选和活性确定。对于1536孔微量滴定板形式的高通量应用，调节试剂混合物的体积，保持体积比。在含有100mM Tris-HCl pH 8.0、200mM NaCl、10％(v/v)甘油、2mM谷胱甘肽(GSH)、0.5mM EDTA和0.1mg/mL BSA的稀释缓冲液中，将蛋白质POLRMT(NM_172551.3)、TFAM(NM_009360.4)和TFB2M(NM_008249.4)从其原液分别稀释至150nM、1.8μM和330nM的工作浓度。将蛋白质稀释液和模板DNA以两倍的最终测定浓度混合在反应缓冲液中，所述模板DNA包含编码线粒体轻链启动子的pUC18质粒，其在启动子3'-端附近被限制线性化(pUC-LSP)，所述反应缓冲液含有10mM Tris-HCl pH 7.5、10mM MgCl₂、40mM NaCl、2mM GSH、0.01％(w/v)Tween-20和0.1mg/mL BSA。

根据所选择的微量滴定板形式，使用多通道移液管或分配器(ThermoFisher Scientific,Waltham Ma)将5μL该混合物分配到微量滴定板的孔中，并在室温(RT)温育10min。使用无接触声学液滴分配器(/>Labcyte Inc.,Sunnyvale CA)将测定中被仔细检查的化学化合物从100％DMSO中的10mM化合物原液至10μM的终浓度或以所需浓度范围连续稀释系列施加。向阳性对照样品中加入等量的不含任何化合物的DMSO，然后在室温温育10min。

通过加入5μL的含dNTPs的反应缓冲液的混合物至各自最终浓度为500μM来开始酶促反应。不向阴性对照样品中加入核苷酸混合物。使用VarioTeleshaker^TM(Thermo FisherScientific,Waltham Ma)以1500rpm混合孔的内容物45秒，之后将微量滴定板以500g离心1min。将样品在室温和湿度控制下温育2h以避免蒸发。在包含50mM Tris-HCl pH 7.5、700mM NaCl、20mM EDTA和0.01％(w/v)Tween-20的缓冲液中制备检测试剂，使得酶反应由于Mg离子的螯合和增加的离子强度而终止。重要的是Eu穴合物(cryptate)偶联的链霉抗生物素蛋白必须与100倍摩尔过量的随机序列寡核苷酸在室温黑暗中预温育10min以阻断单链RNA与蛋白质的非特异性结合。随后，将封闭的链霉抗生物素蛋白(-Eu)与DNA探针在冰上混合并避光直到使用。

在酶促反应时间结束时，添加10μL检测试剂混合物，使得每个测定孔中荧光供体探针(bio-5'-AACACATCTCT(-bio)GCCAAACCCCA-bio-3')、荧光受体探针(ATTO647N-5'-ACAAAGAACCCTAACACCAG-3')和链霉抗生物素蛋白(-Eu)的最终浓度分别为1nM、3nM和1nM。如上所述再次混合和离心测定板，并在室温保存，避光至少2h或直到DNA探针与RNA产物的结合和链霉抗生物素蛋白(-Eu)与生物素化DNA探针的结合导致最大FRET信号的发展。在620nm和665nm检测之前，使用EnVision读板器，包括TRF光单元(Perkin Elmer,WalthamMA)，使用320nm的激发，200μs的积分时间和100μs的延迟时间测量产生的信号。供体-和受体-荧光的比用于评估特异性FRET信号，作为产生的产物含量(即酶活性)的量度。

5.实时定量PCR评估细胞活性

基于TaqMan^TM(Thermo Fisher Scientific,Waltham MA)技术的实时定量PCR(qRT-PCR)基本上如(Heid等人，1996)中所述进行。HeLa细胞在化合物处理前一天铺板在补充有10％胎牛血清和2mM L-谷氨酰胺的RPMI培养基中。将细胞与稀释系列的化合物或载体(DMSO)一起温育4h，然后收获并使用RNeasy迷你试剂盒(Qiagen，Hilden D)根据制造商的说明书提取RNA。使用NanoDrop-2000(Thermo Fisher Scientific,Waltham MA)光谱测量RNA浓度，并在cDNA合成之前使用“高容量cDNA逆转录试剂盒”(Thermo FisherScientific,Waltham MA)标准化。使用“TaqMan Fast Advance Master Mix”(ThermoFisher Scientific，Waltham MA)在7500快速实时PCR机器(Applied Biosystems，FosterCity CA)上进行qRT-PCR。

对于这些测量，使用三个基因来比较被仔细检查的化合物对其浓度的影响。POLRMT基因用于检测对核转录的可能影响。通过测量7S RNA监测体内线粒体转录。在qRT-PCR过程中，以TBP(TATA-box结合蛋白)基因作为对照(管家基因)。在转录后不稳定的短寿命线粒体7S RNA允许我们监测添加化合物后线粒体转录活性的快速变化。使用比较CT方法(ΔΔCt)方法(Bubner和Baldwin，2004)分析三份生物样品并报告为Rq％值(Rq＝相对定量＝2-ΔΔCt)。

6.化合物生物活性

表1列出了化合物的活性以及根据实施例4的通过线粒体转录活性的均相TR-FRET测定法和根据实施例5的抑制线粒体转录的实时定量PCR测定法确定的化合物编号和IUPAC名称，按照以下方案分组：

表4-IUPAC化学名称和生物活性

/>

7.人A2780卵巢癌裸鼠移植瘤的治疗效果

在第0天，将在指数生长期从体外细胞培养物中分离的A2780卵巢癌细胞(在100μLPBS/Matrigel中有1x10⁷细胞)皮下移植到每个雌性裸鼠中。将小鼠在IVC中保持在严格控制和标准化屏障条件下，如表5中所述。

表5-标准化屏障条件

/>

除了建立实验所需的组所需的小鼠数目之外，移植另外8只小鼠以具有足够数目的卫星动物以改善分层。当平均肿瘤体积(TV)为0.213±0.061cm³(中位数TV＝0.206cm³)时，在第7天将小鼠分成A-D组，每组8只小鼠。8小鼠由于其肿瘤大小而被排除。

将测试化合物14和载体在室温和黑暗中储存直至使用。临用前，溶解化合物14以获得足以处理一周的注射溶液。如表6中所述指示处理。每周2-3次监测体重(BWC)和肿瘤体积(TV)。计算平均肿瘤重量±S.D.(RTV)。在研究结束时再次处理B、C和D组小鼠，在处理前1h和处理后1h取血样以产生血浆。此外，从A、C和D组小鼠中分离肿瘤和组织样品，分成两部分并在液氮中快速冷冻。B组小鼠必须在第27天(QDx21)处死，因为它们的肿瘤尺寸太大。在第34天处死A、C和D组小鼠(QD x 28次，共28次。对所有小鼠进行整个尸体解剖。

表6-组和处理

*第27天的平均体重±S.D.和体重变化最低点(在括号中，与测量日一起)。

**肿瘤体积±S.D.与D7(处理开始)相比，第27天的相对肿瘤体积以及平均肿瘤重量+/-S.D.

^#使用Windows程序STATISTICA6，用Mann和Whitney的U检验进行统计学评价。p<0.05的显著性水平用于鉴定显著不同的数据。

结果

耐受性：化合物14的处理具有良好的耐受性，在用较高剂量处理后的第18天，体重仅有轻度和短暂的最低点下降(参见图1B)，但未观察到毒性迹象。最后尸体解剖未发现异常观察。

治疗效果：如通过88.3％(50mg/kg)、59.2％(100mg/kg)和24.9％(200mg/kg)的最佳T/C值所示，用化合物14处理的所有小鼠显示剂量依赖性肿瘤生长抑制。虽然最低剂量(50mg/kg)没有显著作用，但较高剂量(100和200mg/kg)在肿瘤生长抑制方面明显更有活性(参见图1A)。

8.人DLD-1结肠癌裸鼠移植瘤的治疗效果

在第0天，将在指数生长期从体外细胞培养物中分离的DLD-1结肠癌细胞(在100μLPBS/Matrigel中有5x10⁶细胞)皮下移植到每个雌性BALB/c裸鼠中。将小鼠在IVC中保持在严格控制和标准化屏障条件下。

将测试化合物14和载体在室温和黑暗中储存直至使用。临用前，溶解化合物14以获得足以处理一周的溶液。如表7中所述指示处理。将来自Bayer AG的批准的多激酶抑制剂/细胞抑制剂索拉非尼用作阳性对照。每周2-3次监测体重和肿瘤体积(TV)。

在研究期结束时再次处理3、4和5组的小鼠，在处理前1h和处理后1h取血样以产生血浆。此外，分离肿瘤和组织样品，分成两部分并在液氮中快速冷冻。在第39天处死1-5组的小鼠。对所有小鼠进行整个尸体解剖。

表7-组和处理

结果

耐受性：在DLD-1结肠癌肿瘤模型中，化合物14的治疗也被很好地耐受，对于低剂量和中等剂量的化合物14，体重减轻与对照小鼠相似，而对于高剂量的化合物14，体重下降适中，但未观察到毒性迹象。最后尸体解剖未发现异常观察。用索拉非尼处理的小鼠在治疗过程中显示严重的体重下降(参见图2B)。

治疗效果：同样在DLD-1结肠癌肿瘤模型中，用化合物14治疗的所有小鼠显示剂量依赖性肿瘤生长抑制。最低剂量(50mg/kg)具有较小的作用，较高剂量(100mg/kg和200mg/kg)在肿瘤生长抑制方面明显更有活性，并且显示与阳性对照索拉非尼相似的细胞抑制作用(参见图2A)。

考虑到索拉非尼组显著更高的体重下降，化合物14似乎具有比索拉非尼更宽的治疗指数，即在更好的耐受性下具有相似的细胞抑制作用。

9.体外抑制多种癌细胞系

CellTiter-Glo发光细胞活性测定(Promega)是确定培养物中活细胞数量的均相方法。它基于ATP的定量，表明存在代谢活性细胞。

在第1天以确保测定线性和最佳信号强度的细胞数目接种细胞。在37℃/5％CO₂的加湿室中温育3h后，加入不同浓度的化合物/DMSO。细胞在37℃和5％CO₂下进一步温育72h。将用化合物载体DMSO处理的细胞用作阳性对照，并且将用10μM星形孢菌素处理的细胞用作阴性对照。在第4天，根据试剂盒(Promega Inc.)的说明书制备CellTiter Glo试剂：试剂与细胞培养基以1：1混合。就此，将混合物和测定板在室温平衡20min。将等体积的试剂-培养基-混合物加入到存在于各孔中的培养基体积中。

将板在定轨振荡器上以～200rpm混合2min。然后将微孔板在室温温育10min以稳定发光信号。温育后，使用200ms积分时间在Victor微孔板读数器(Perkin Elmer)上记录发光。然后用Excel分析数据，使用XLFIT Plugin(dose response Fit 205)进行IC₅₀确定。作为质量控制，由16个阳性和阴性对照值计算Z′-因子。仅显示Z′-因子≥0.5的测定结果用于进一步分析。

表8-CellTiter GLO活性测定

(-)＝低敏感性/低抗性：x>10μM

(+)＝中等敏感性：10μM≥x>1μM

(++)＝良好敏感性：1μM≥x>0.1μM

(+++)＝非常好敏感性：0.1μM≥x

结果：

来自细胞组的测试细胞系显示经测试的POLRMT抑制剂(化合物38、47和14)的不同IC50值，参见表8。HEC-59细胞系对所有三种抑制剂都有抗性，NCI-H23对化合物47有抗性。NCI-H23细胞系对化合物14和38显示中等敏感性。NCI-H596细胞系相对于所有三种化合物显示中等敏感性。所有其它测试细胞系相对于所有三种化合物显示出良好或非常好的敏感性。该测定中最敏感的细胞系是HRT-18。

比较上述化合物，化合物14在三种细胞系(CA-46、HRT-18、SW403)上活性最高，而化合物38和47在一种细胞系(HRT-18)上活性最高。除了化合物38在NCI-H23细胞上更有活性，而化合物47在SW48细胞上更有活性之外，化合物38和47大部分具有可比性。

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WO 2016/146583 A1

WO 2016/193231 A1

Claims

1.一种通式(I)的化合物

其中

R是-C₁-C₄-烷基；

R₁是-H或-甲基；

M是CH或N；

W是其中

R₂是C₁-C₄-烷基、-卤素、-CN；

X是-卤素或-CN；

n＝0、1或2；

Y是-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，且

R₄是-C₁-C₄-烷基或-C₃-C₆-环烷基；或

未取代或取代的吡啶残基；或

未取代或取代的苯基残基；

Y是-OR₁₁，其中R₁₁是-H或-C₁-C₄-烷基，

或其药学上或兽医学上可接受的盐。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中

R是-C₁-C₄-烷基；

R₁是-H或-甲基；

M是-CH；

W是其中

R₂是甲基、-卤素或-CN；

X是-卤素或-CN；

n＝0、1或2；

Y是-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，且

R₄是-C₁-C₄-烷基或-C₃-C₆-环烷基；或

未取代或取代的吡啶残基；或

未取代或取代的苯基残基；

Y是-OR₁₁，其中R₁₁是-H或-C₁-C₄-烷基，

或其药学上或兽医学上可接受的盐。

3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中Y是-NR₃R₄，其中

R₃是-H或-C₁-C₄-烷基，且

-C₁-C₄-烷基或-C₃-C₆-环烷基。

4.根据权利要求1或2所述的化合物，其中N、R₃和R₄一起形成未取代或取代的哌啶、哌嗪或吡咯烷残基，其各自任选地和独立地被一个或多个以下残基取代：

-C₁-C₄-烷基；

-(CH₂)_m-COOR₅，其中R₅是-H、-C₁-C₈-烷基、-C₂-C₄烷基-N-吗啉或基团

-(CH₂)_mCONR₆R₇，其中R₆和R₇独立地是-H或-C₁-C₄-烷基；

-CO-(C₂-C₄-烯基)；-CO-CH₂-Cl；-CO-CH₂-CH₃；

-NH-CO-(C₂-C₄-烯基)；-NH-CO-CH₂-Cl；-NH-CO-CH₂-CH₃；

-F；

-CN；

-SO₃H；

-SO₂NR₈R₉，其中R₈和R₉独立地是-H或-C₁-C₄-烷基；

-SONHR₁₀，其中R₁₀是-C₁-C₄-烷基；或

且

m＝0、1或2。

5.根据权利要求1或2所述的化合物，其中N、R₃和R₄一起形成未取代或取代的哌啶或吡咯烷残基，其各自任选地和独立地被一个或多个以下残基取代：

-C₁-C₄-烷基；

-(CH₂)_mCONR₆R₇，其中R₆和R₇独立地是-H或-C₁-C₄-烷基；

-F；

-CN；

-SO₃H；

-SO₂NR₈R₉，其中R₈和R₉独立地是-H或-C₁-C₄-烷基；

-SONHR₁₀，其中R₁₀是-C₁-C₄-烷基；或

且

m＝0、1或2。

6.根据权利要求1或2所述的化合物，其中

R是-甲基；

R₁是-H；

m＝0或1；

W是其中

R₂是甲基或-Cl；

X是-F，其中n＝1；

Y是-NR₃R₄

其中

R₃是-H；且

R₄是吡啶残基，

在对位被取代的苯基残基，或

环丙基或异丙基残基；

或其中

N、R₃和R₄一起形成哌啶残基或吡咯烷残基，其各自任选地和独立地被以下残基之一取代：-COOH、-COOCH₃、-COOC₂H₅、-CH₂COOH、-CH₂COOCH₃、-CH₂COOCH₂CH₃、-CONH₂、-CONHCH₃、-CON(CH₃)₂、-CH₂CONHCH₃、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃或-CN。

7.根据权利要求1或2所述的化合物，其中

R是(R)-甲基；

R₁是-H；

W是其中

R₂是甲基或-Cl；

X是-F，其中n＝1；

Y是-NR₃R₄

其中

N、R₃和R₄形成哌啶残基或吡咯烷残基，其各自任选地和独立地被以下残基之一取代：-COOH、-CH₂COOH、-CONHCH₃、-CH₂CONHCH₃、-SO₂NH₂、-SO₂NHCH₃或-CN。

8.根据权利要求4所述的化合物，其中所述哌啶残基或吡咯烷残基在3位被取代。

9.根据权利要求1或2所述的化合物，其中X位于苯环的对位。

10.根据权利要求1所述的式(I)的化合物，其选自

2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-(2-吡啶基)丙酰胺、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酸、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酸、

N-环丙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-环丙基-丙酰胺、

(3S)-1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]吡咯烷-3-羧酸、7-[(1R)-1-甲基-2-氧代-2-(1-哌啶基)乙氧基]-4-(邻甲苯基)色烯-2-酮、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-(2-吡啶基)丙酰胺、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-[4-(2-羟基乙基)苯基]丙酰胺、(2R)-N-异丙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

N,N-二甲基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲腈、

3-甲基-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、(2R)-N,N-二甲基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N,N-二甲基-丙酰胺、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-甲腈、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-甲基-丙酰胺、

1-[2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酰胺、(3R)-1-[2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-羧酸、

1-[2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]-3-甲基-哌啶-3-羧酸、(2R)-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸异丙酯、

(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-环丙基-丙酰胺、

N-异丙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

(2R)-2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸异丙酯、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-乙基-丙酰胺、

1-[2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酰基]哌啶-3-磺酰胺、2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-溴苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

N-乙基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

2-[4-(2-溴苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N,N-二甲基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-环丙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-乙基-丙酰胺、

2-[4-(2-溴苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸异丙酯、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N,N-二甲基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-乙基-丙酰胺、

2-[4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-2-甲基-丙酸、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-2-甲基-丙酸乙酯、

2-[4-(2-氯苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-N-异丙基-2-甲基-丙酰胺、N-异丙基-2-甲基-2-[4-(邻甲苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基-丙酰胺、

2-[4-(2-氟苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、和

2-[4-(2,6-二氟苯基)-2-氧代-色烯-7-基]氧基丙酸乙酯、

或其药学上或兽医学上可接受的盐。

11.一种用于制造根据权利要求1至10中任一项所述的化合物的方法，包括以下步骤：

(a)使式(A)化合物

其中W如权利要求1至9中任一项所定义，

与间苯二酚或2,6-二羟基吡啶反应，得到式(B)的化合物

其中W和M如权利要求1至9中任一项所定义，

或

(a1)使式(K)化合物

其中W和M如权利要求1至9中任一项所定义，

与三溴化硼反应，得到式(B)化合物

其中W和M如权利要求1至9中任一项所定义，

以及

(b)用烷基化剂将如上定义的式(B)的化合物烷基化，其中Z是基团

其中R、R₁和Y如权利要求1至9中任一项所定义，

以获得式(C)的化合物

其中W、M和Z如上所定义。

12.一种用于制造根据权利要求1至9中任一项所述的化合物的方法，其中Y是如权利要求1至9中任一项所定义的-NR₃R₄，所述方法包括以下步骤：

(a)水解式(D)的化合物

其中W、M、R、R₁和R₁₁如权利要求1至9中任一项所定义

以获得式(E)的化合物

其中W、M、R和R₁如权利要求1至9中任一项所定义，

以及

(b)将式(E)化合物酰胺化以获得式(F)化合物

其中W、M、R、R₁、R₃和R₄如权利要求1至9中任一项所定义。

13.权利要求1至10中任一项所述的化合物在制备药物中的用途。

14.权利要求1至10中任一项所述的化合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。

15.权利要求1至10中任一项所述的化合物在制备用于与另一种癌症疗法同时、交替或随后组合治疗癌症的药物中的用途。