CN111334537A - 酶催化的达比加群酯中间体的合成方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种酶催化的化合物Ⅴ的合成方法，所述酶的具体定义见说明书。本发明所述的酶催化合成不仅缩短了达比加群酯的合成步骤，而且反应条件温和，后处理简单，收率高。
Description
技术领域
本发明属于化学合成领域，具体涉及酶催化的达比加群酯中间体的合成方法。
背景技术
达比加群酯是由勃林格殷格翰公司开发的一种凝血酶抑制剂类抗凝血药。CN106083822A、CN109836412A与US2011275824披露了如下所示的中间体化合物Ⅴ的合成方法。
酶是一类能够在生物体内进行催化具有特异性反应的具有特殊三维空间构型的蛋白质。近年来，随着生化技术的发展，酶催化反应不仅是生物科学的研究热点，成为了有机合成领域的一个重要的研究方向。
在生物科学方面，酶作为一类专一的有催化活性的蛋白质，几乎参与了体内所有生物分子的转化过程。人们对酶在生物科学方面的研究也取得了很大的研究进展。
酶的催化活性很高，在同等情况下其催化效率能达到无机催化剂的1010倍，而且相对于其他催化剂酶具有高度的专一性，也即每种酶一般情况下只能促进特定的反应。但近来研究发现，酶还具有催化多功能性。鉴于此，将酶催化方法应用于一般的有机合成反应中，是目前最重要的关于酶的研究方向，该方向已然成为合成方法学中的一个新亮点。
杭州师范大学的施巧月在其硕士学位论文《五元含氮杂环的酶催化合成研究》中筛选了多种生物酶对如下所示的苯并咪唑合成的催化活性。
其中，R1＝H或NO2
然而，本发明人将施巧月在其论文中披露的所有受试酶用于如下所示的苯并咪唑合成的催化的效果却不尽如人意，最高收率仅为56.39％。
发明内容
本发明的目的在于提供一种酶催化的达比加群酯中间体的合成方法，所述合成方法条件温和、成本低廉、环境友好。
为了实现上述发明目的，本发明一方面提供了一种如下所示的酶催化的苯并咪唑类化合物Ⅴ的合成方法：
其特征在于，所述酶是作用于羧酸酯键的酶。
一方面优选的，本发明所述的作用于羧酸酯键的酶是选自羧酸酯酶、芳香基酯酶、三酰基甘油脂肪酶、磷脂酶A2、溶血磷酯酶、乙酰酯酶、乙酰胆碱酯酶、胆碱酯酶、托品酯酶、果胶酯酶、固醇酯酶、叶绿素酶、L-阿拉伯糖酸内酯酶、葡萄糖酸内酯酶、鞣酸酶、视黄酰棕榈酸酯酶、羟基丁酸二聚体水解酶、酰基甘油脂肪酶、1，4-内酯酶、半乳糖脂酶、4-吡哆醇内酯酶、酰基肉毒碱水解酶、氨基酰基-tRNA水解酶、D-阿拉伯糖酸内酯酶、6-磷酸葡萄糖酸内酯酶、磷脂酶A、6-乙酰葡糖脱酰酶、脂蛋白脂肪酶、二氢香豆素水解酶、柠檬素-D-环内酯酶、类固醇内酯酶、三乙酸内酯酶、放线菌素内酯酶、苔色酸缩酚酸水解酶、头孢菌素-C-脱乙酰酶、氯原酸水解酶、α-氨基酸酯酶、4-甲基草酰乙酸酯酶、羧甲烯丁烯羟酸内酯酶、1-烷基-2-乙酰甘油磷酸胆碱酯酶、镰孢氨酸-C鸟氨酸酯酶、芥子碱酯酶、蜡酯水解酶、大戟二萜醇二酯水解酶、磷脂酰肌醇脱酰酶、唾液酸-O-乙酰基酯酶、乙酰氧基丁炔基二噻吩脱乙酰酶、乙酰水杨酸脱乙酰酶、甲基伞形酮基-乙酸酯脱乙酰酶、2-吡喃酮-4，6-羧酸内酯酶、N-acetylgalactosaminoglycan脱乙酰酶、幼激素酯酶、蛋白谷氨酸甲基酯酶、11-cis-视黄醇-棕榈酸酯水解酶、视网膜异构酶、L-rhamnono-1，4-内酯酶、木纤维-1，4-内酯酶、西曲酸苄基酯酶、乙酰基烷基甘油乙酰基水解酶、乙酰木聚糖酯酶、阿魏酸酯酶、角质酶、酰氧基酰基水解酶、polyneuridine-醛酯酶、激素敏感型脂肪酶、乙酰阿马灵酯酶、猝灭群体的N-酰基-高丝氨酸内酯酶、pheophorbidase、可卡因酯酶、伏马毒素B、2-氧代-3-(5-氧代-2-亚基)丙酸内酯酶、4-sulfomuconolactone水解酶、霉酚酸酰基-葡萄糖醛酸酯酶、云芝乙酸半缩醛酯酶、D-氨基酰基-tRNA脱酰基酶、甲基化diphthine甲基水解酶、6-脱氧-6-硫酸葡萄糖醛酸内酯酶、叶绿素a水解酶、磷壁酸D-丙氨酸水解酶、5-磷酸-D-木纤维-1，4-内酯酶、3-O-乙酰基papaveroxine羧基酯酶、O-乙酰基-ADP-核糖脱乙酰酶、硫酯水解酶、磷酸-单酯水解酶、磷酸-二酯水解酶、三磷酸-单酯水解酶、硫酸-酯水解酶、二磷酸-单酯水解酶、磷酸-三酯水解酶、单萜ε-内酯水解酶与聚对苯二甲酸乙二醇酯降解酶中的一种。
另一方面优选的，本发明所述的合成方法包括以下步骤：
①取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ，分散于溶剂中；
②加入酶后在特定温度下于特定转速的恒温振荡器内反应一定的时间；
③除去酶与溶剂。
更优选的，所述第①步中化合物Ⅰ与化合物Ⅳ的物质的量的比为1：1；所述溶剂是选自乙醇、甲醇、四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯、1，4-二氧六环、乙腈、异丙醇与水中的一种；化合物Ⅰ与溶剂的物质的量/体积比在1～5mol/L之间。
更优选的，所述第②步中酶与化合物Ⅰ的质量/物质的量的比在5～50g/mol之间；所述温度为20～40℃；所述转速为100～200r/min；所述反应时间为1～2小时。
通过本发明所述的酶催化合成方法仅需要两步即可从化合物Ⅰ制备得到化合物Ⅴ，不仅缩短了反应步骤，而且反应条件温和，后处理简单，收率高。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于此。
本发明采用杭州师范大学的施巧月在其硕士学位论文《五元含氮杂环的酶催化合成研究》中所披露的方法，以产物中化合物Ⅴ的含量为主要指标，对本发明所述酶催化如下所述反应的最佳反应条件进行了筛选，各酶的最佳反应条件如实施例1～实施例91所示。此外，相同方法考察得到的施巧月论文中所提及的相关酶对催化如下反应的最佳条件如对比实施例1～7所示。
实施例1.羧酸酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL甲醇，加入45mg羧酸酯酶，25℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.3mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.98％。
实施例2.芳香基酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL二氯甲烷，加入30mg芳香基酯酶，25℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体498.3mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.21％。
实施例3.三酰基甘油脂肪酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL水，加入35mg三酰基甘油脂肪酶，20℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495.8mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.01％。
实施例4.磷脂酶A2催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL水，加入40mg磷脂酶A2，20℃下于振荡器内(转速200r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500.2mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.87％。
实施例5.溶血磷酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL乙腈，加入5mg溶血磷酯酶，25℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体498.2mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.17％。
实施例6.乙酰酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL乙醇，加入45mg乙酰酯酶，20℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体501.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.53％。
实施例7.乙酰胆碱酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL甲醇，加入10mg乙酰胆碱酯酶，25℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.47％。
实施例8.胆碱酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL水，加入40mg胆碱酯酶，35℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500.2mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.06％。
实施例9.托品酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL甲醇，加入20mg托品酯酶，35℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体498.9mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.89％。
实施例10.果胶酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL乙腈，加入40mg果胶酯酶，25℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体501.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.12％。
实施例11.固醇酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL四氢呋喃，加入10mg固醇酯酶，35℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体493.9mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.05％。
实施例12.叶绿素酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL乙腈，加入40mg叶绿素酶，35℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.4mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.53％。
实施例13.L-阿拉伯糖酸内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL乙腈，加入20mg L-阿拉伯糖酸内酯酶，25℃下于振荡器内(转速200r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500.5mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.05％。
实施例14.葡萄糖酸内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL乙酸乙酯，加入15mg葡萄糖酸内酯酶，20℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.5mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.47％。
实施例15.鞣酸酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL1，4-二氧六环，加入35mg鞣酸酶，35℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体496mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.87％。
实施例16.视黄酰棕榈酸酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL四氢呋喃，加入35mg视黄酰棕榈酸酯酶，40℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体496.8mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.80％。
实施例17.羟基丁酸二聚体水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL二氯甲烷，加入15mg羟基丁酸二聚体水解酶，30℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体493.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.59％。
实施例18.酰基甘油脂肪酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL乙醇，加入50mg酰基甘油脂肪酶，25℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.32％。
实施例19.1,4-内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL1，4-二氧六环，加入5mg 1,4-内酯酶，35℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.8mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.90％。
实施例20.半乳糖脂酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL四氢呋喃，加入30mg半乳糖脂酶，30℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495.7mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.37％。
实施例21.4-吡哆醇内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL乙酸乙酯，加入15mg 4-吡哆醇内酯酶，20℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体498.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.43％。
实施例22.酰基肉毒碱水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL四氢呋喃，加入30mg酰基肉毒碱水解酶，35℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体497.9mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.85％。
实施例23.氨基酰基-tRNA水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL异丙醇，加入35mg氨基酰基-tRNA水解酶，25℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.87％。
实施例24.D-阿拉伯糖酸内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL异丙醇，加入15mg D-阿拉伯糖酸内酯酶，25℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体498mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.36％。
实施例25.6-磷酸葡萄糖酸内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL水，加入20mg 6-磷酸葡萄糖酸内酯酶，20℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体499.9mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.60％。
实施例26.磷脂酶A催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL甲醇，加入25mg磷脂酶A，25℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495.4mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.23％。
实施例27.6-乙酰葡糖脱酰酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL异丙醇，加入50mg 6-乙酰葡糖脱酰酶，35℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495.5mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.48％。
实施例28.脂蛋白脂肪酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL二氯甲烷，加入40mg脂蛋白脂肪酶，35℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.88％。
实施例29.二氢香豆素水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL异丙醇，加入35mg二氢香豆素水解酶，25℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.7mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.15％。
实施例30.柠檬素-D-环内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL水，加入10mg柠檬素-D-环内酯酶，40℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体492.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.75％。
实施例31.类固醇内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL乙腈，加入10mg类固醇内酯酶，30℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体497.2mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.02％。
实施例32.三乙酸内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL异丙醇，加入25mg三乙酸内酯酶，30℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体496mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.97％。
实施例33.放线菌素内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL乙腈，加入30mg放线菌素内酯酶，30℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.58％。
实施例34.苔色酸缩酚酸水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL乙腈，加入20mg苔色酸缩酚酸水解酶，25℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体492.2mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.22％。
实施例35.头孢菌素-C-脱乙酰酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL乙酸乙酯，加入20mg头孢菌素-C-脱乙酰酶，30℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体496.9mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.38％。
实施例36.氯原酸水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL乙腈，加入20mg氯原酸水解酶，25℃下于振荡器内(转速200r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.3mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.06％。
实施例37.α-氨基酸酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL乙腈，加入45mgα-氨基酸酯酶，35℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495.9mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.85％。
实施例38.4-甲基草酰乙酸酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL乙腈，加入40mg 4-甲基草酰乙酸酯酶，40℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.11％。
实施例39.羧甲烯丁烯羟酸内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL四氢呋喃，加入25mg羧甲烯丁烯羟酸内酯酶，25℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500.9mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.85％。
实施例40.1-烷基-2-乙酰甘油磷酸胆碱酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL乙酸乙酯，加入45mg 1-烷基-2-乙酰甘油磷酸胆碱酯酶，20℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体497.4mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.76％。
实施例41.镰孢氨酸-C鸟氨酸酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL异丙醇，加入35mg镰孢氨酸-C鸟氨酸酯酶，35℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495.5mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.41％。
实施例42.芥子碱酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL二氯甲烷，加入50mg芥子碱酯酶，40℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495.5mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.59％。
实施例43.蜡酯水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL乙醇，加入50mg蜡酯水解酶，30℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.2mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.22％。
实施例44.大戟二萜醇二酯水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL四氢呋喃，加入5mg大戟二萜醇二酯水解酶，25℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体498.2mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.05％。
实施例45.磷脂酰肌醇脱酰酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL二氯甲烷，加入35mg磷脂酰肌醇脱酰酶，25℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体498.5mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.49％。
实施例46.唾液酸-O-乙酰基酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL甲醇，加入40mg唾液酸-O-乙酰基酯酶，25℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.4mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.19％。
实施例47.乙酰氧基丁炔基二噻吩脱乙酰酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL水，加入10mg乙酰氧基丁炔基二噻吩脱乙酰酶，25℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体499.2mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.97％。
实施例48.乙酰水杨酸脱乙酰酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL乙醇，加入5mg乙酰水杨酸脱乙酰酶，20℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.90％。
实施例49.甲基伞形酮基-乙酸酯脱乙酰酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL乙腈，加入5mg甲基伞形酮基-乙酸酯脱乙酰酶，20℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体492.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.06％。
实施例50.2-吡喃酮-4,6-羧酸内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL甲醇，加入25mg 2-吡喃酮-4,6-羧酸内酯酶，20℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体499.7mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.51％。
实施例51.N-acetylgalactosaminoglycan脱乙酰酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL水，加入20mg N-acetylgalactosaminoglycan脱乙酰酶，20℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.7mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.37％。
实施例52.幼激素酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL甲醇，加入45mg幼激素酯酶，20℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.3mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.37％。
实施例53.蛋白谷氨酸甲基酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL水，加入10mg蛋白谷氨酸甲基酯酶，40℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.4mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.12％。
实施例54.11-cis-视黄醇-棕榈酸酯水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL二氯甲烷，加入30mg 11-cis-视黄醇-棕榈酸酯水解酶，35℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体493.2mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.31％。
实施例55.视网膜异构酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL水，加入25mg视网膜异构酶，20℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体501.2mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.66％。
实施例56.L-rhamnono-1,4-内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL乙酸乙酯，加入35mg L-rhamnono-1,4-内酯酶，20℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体496.7mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.98％。
实施例57.木纤维-1,4-内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL乙腈，加入45mg木纤维-1,4-内酯酶，35℃下于振荡器内(转速200r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.50％。
实施例58.西曲酸苄基酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL乙腈，加入25mg西曲酸苄基酯酶，40℃下于振荡器内(转速200r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.64％。
实施例59.乙酰基烷基甘油乙酰基水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL异丙醇，加入10mg乙酰基烷基甘油乙酰基水解酶，25℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体492.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.85％。
实施例60.乙酰木聚糖酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL乙醇，加入10mg乙酰木聚糖酯酶，40℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.10％。
实施例61.阿魏酸酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL四氢呋喃，加入35mg阿魏酸酯酶，40℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体501.4mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.71％。
实施例62.角质酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL1，4-二氧六环，加入5mg角质酶，20℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.9mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.89％。
实施例63.酰氧基酰基水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL二氯甲烷，加入20mg酰氧基酰基水解酶，30℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.28％。
实施例64.polyneuridine-醛酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL四氢呋喃，加入15mg polyneuridine-醛酯酶，25℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体498.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.96％。
实施例65.激素敏感型脂肪酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL乙酸乙酯，加入25mg激素敏感型脂肪酶，30℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体492mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.73％。
实施例66.乙酰阿马灵酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL甲醇，加入45mg乙酰阿马灵酯酶，20℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.3mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.27％。
实施例67.猝灭群体的N-酰基-高丝氨酸内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL1，4-二氧六环，加入50mg猝灭群体的N-酰基-高丝氨酸内酯酶，25℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495.4mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.07％。
实施例68.pheophorbidase催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL水，加入5mg pheophorbidase，20℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体496.7mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.80％。
实施例69.可卡因酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL四氢呋喃，加入40mg可卡因酯酶，40℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体498.9mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.26％。
实施例70.伏马毒素B催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL二氯甲烷，加入40mg伏马毒素B，30℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体492.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.32％。
实施例71.2-氧代-3-(5-氧代-2-亚基)丙酸内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL二氯甲烷，加入40mg 2-氧代-3-(5-氧代-2-亚基)丙酸内酯酶，25℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体491.8mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.78％。
实施例72.4-sulfomuconolactone水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL水，加入45mg 4-sulfomuconolactone水解酶，35℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.03％。
实施例73.霉酚酸酰基-葡萄糖醛酸酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL四氢呋喃，加入25mg霉酚酸酰基-葡萄糖醛酸酯酶，30℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体501.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.55％。
实施例74.云芝乙酸半缩醛酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL甲醇，加入15mg云芝乙酸半缩醛酯酶，30℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体493.9mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.95％。
实施例75.D-氨基酰基-tRNA脱酰基酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL四氢呋喃，加入20mg D-氨基酰基-tRNA脱酰基酶，25℃下于振荡器内(转速200r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体492.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.45％。
实施例76.甲基化diphthine甲基水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL四氢呋喃，加入20mg甲基化diphthine甲基水解酶，25℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体496.3mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.37％。
实施例77.6-脱氧-6-硫酸葡萄糖醛酸内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL水，加入15mg 6-脱氧-6-硫酸葡萄糖醛酸内酯酶，35℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体501.5mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.57％。
实施例78.叶绿素a水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL乙醇，加入10mg叶绿素a水解酶，40℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体493.8mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.94％。
实施例79.磷壁酸D-丙氨酸水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL异丙醇，加入10mg磷壁酸D-丙氨酸水解酶，25℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体492.7mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.20％。
实施例80.5-磷酸-D-木纤维-1,4-内酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL乙醇，加入40mg 5-磷酸-D-木纤维-1,4-内酯酶，40℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体493.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.76％。
实施例81.3-O-乙酰基papaveroxine羧基酯酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL四氢呋喃，加入25mg 3-O-乙酰基papaveroxine羧基酯酶，25℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体497.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.09％。
实施例82.O-乙酰基-ADP-核糖脱乙酰酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL乙醇，加入50mg O-乙酰基-ADP-核糖脱乙酰酶，30℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.7mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.10％。
实施例83.硫酯水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于3mL乙醇，加入40mg硫酯水解酶，30℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体497.8mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为97.85％。
实施例84.磷酸-单酯水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL甲醇，加入20mg磷酸-单酯水解酶，20℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体497.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.89％。
实施例85.磷酸-二酯水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL水，加入40mg磷酸-二酯水解酶，20℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体493.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为99.02％。
实施例86.三磷酸-单酯水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL甲醇，加入15mg三磷酸-单酯水解酶，20℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体496mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.54％。
实施例87.硫酸-酯水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL乙酸乙酯，加入30mg硫酸-酯水解酶，35℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.6mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.53％。
实施例88.二磷酸-单酯水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于4mL1，4-二氧六环，加入25mg二磷酸-单酯水解酶，20℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.3mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为98.18％。
实施例89.磷酸-三酯水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL甲醇，加入15mg磷酸-三酯水解酶，40℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体498.1mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.96％。
实施例90.单萜ε-内酯水解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL异丙醇，加入30mg单萜ε-内酯水解酶，40℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体498.4mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为95.05％。
实施例91.聚对苯二甲酸乙二醇酯降解酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL异丙醇，加入30mg聚对苯二甲酸乙二醇酯降解酶，20℃下于振荡器内(转速100r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体493.3mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为96.24％。
对比实施例1.猪胰腺脂肪酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL异丙醇，加入10mg猪胰腺脂肪酶，25℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体500mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为36.04％。
对比实施例2.猪胰腺α-淀粉酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL四氢呋喃，加入35mg猪胰腺α-淀粉酶，30℃下于振荡器内(转速150r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体495.2mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为43.72％。
对比实施例3.Diatase催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL乙酸乙酯，加入5mg Diatase，40℃下于振荡器内(转速100r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体492.7mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为32.48％。
对比实施例4.米曲霉α-淀粉酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于5mL甲醇，加入15mg米曲霉α-淀粉酶，25℃下于振荡器内(转速200r/min)反应2小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体501.4mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为56.39％。
对比实施例5.猪胰腺胰蛋白酶催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于1mL异丙醇，加入20mg猪胰腺胰蛋白酶，20℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体493mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为41.16％。
对比实施例6.爪哇毛霉Amano脂肪酶M催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL水，加入10mg爪哇毛霉Amano脂肪酶M，25℃下于振荡器内(转速150r/min)反应1小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体497.5mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为53.14％。
对比实施例7.牛白蛋白催化化合物Ⅴ的合成
取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ各1mmol，分散于2mL甲醇，加入35mg牛白蛋白，35℃下于振荡器内(转速200r/min)反应1.5小时后去除酶，再减压蒸馏除去溶剂，60℃下干燥至恒重，得类白色固体494.4mg，HPLC测定化合物Ⅴ含量为42.60％。
Claims (10)
1.一种如下所示的酶催化的苯并咪唑类化合物Ⅴ的合成方法：
其特征在于，所述酶是作用于羧酸酯键的酶。
2.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述的作用于羧酸酯键的酶是选自羧酸酯酶、芳香基酯酶、三酰基甘油脂肪酶、磷脂酶A2、溶血磷酯酶、乙酰酯酶、乙酰胆碱酯酶、胆碱酯酶、托品酯酶、果胶酯酶、固醇酯酶、叶绿素酶、L-阿拉伯糖酸内酯酶、葡萄糖酸内酯酶、鞣酸酶、视黄酰棕榈酸酯酶、羟基丁酸二聚体水解酶、酰基甘油脂肪酶、1，4-内酯酶、半乳糖脂酶、4-吡哆醇内酯酶、酰基肉毒碱水解酶、氨基酰基-tRNA水解酶、D-阿拉伯糖酸内酯酶、6-磷酸葡萄糖酸内酯酶、磷脂酶A、6-乙酰葡糖脱酰酶、脂蛋白脂肪酶、二氢香豆素水解酶、柠檬素-D-环内酯酶、类固醇内酯酶、三乙酸内酯酶、放线菌素内酯酶、苔色酸缩酚酸水解酶、头孢菌素-C-脱乙酰酶、氯原酸水解酶、α-氨基酸酯酶、4-甲基草酰乙酸酯酶、羧甲烯丁烯羟酸内酯酶、1-烷基-2-乙酰甘油磷酸胆碱酯酶、镰孢氨酸-C鸟氨酸酯酶、芥子碱酯酶、蜡酯水解酶、大戟二萜醇二酯水解酶、磷脂酰肌醇脱酰酶、唾液酸-O-乙酰基酯酶、乙酰氧基丁炔基二噻吩脱乙酰酶、乙酰水杨酸脱乙酰酶、甲基伞形酮基-乙酸酯脱乙酰酶、2-吡喃酮-4，6-羧酸内酯酶、N-acetylgalactosaminoglycan脱乙酰酶、幼激素酯酶、蛋白谷氨酸甲基酯酶、11-cis-视黄醇-棕榈酸酯水解酶、视网膜异构酶、L-rhamnono-1，4-内酯酶、木纤维-1，4-内酯酶、西曲酸苄基酯酶、乙酰基烷基甘油乙酰基水解酶、乙酰木聚糖酯酶、阿魏酸酯酶、角质酶、酰氧基酰基水解酶、polyneuridine-醛酯酶、激素敏感型脂肪酶、乙酰阿马灵酯酶、猝灭群体的N-酰基-高丝氨酸内酯酶、pheophorbidase、可卡因酯酶、伏马毒素B、2-氧代-3-(5-氧代-2-亚基)丙酸内酯酶、4-sulfomuconolactone水解酶、霉酚酸酰基-葡萄糖醛酸酯酶、云芝乙酸半缩醛酯酶、D-氨基酰基-tRNA脱酰基酶、甲基化diphthine甲基水解酶、6-脱氧-6-硫酸葡萄糖醛酸内酯酶、叶绿素a水解酶、磷壁酸D-丙氨酸水解酶、5-磷酸-D-木纤维-1，4-内酯酶、3-O-乙酰基papaveroxine羧基酯酶、O-乙酰基-ADP-核糖脱乙酰酶、硫酯水解酶、磷酸-单酯水解酶、磷酸-二酯水解酶、三磷酸-单酯水解酶、硫酸-酯水解酶、二磷酸-单酯水解酶、磷酸-三酯水解酶、单萜ε-内酯水解酶与聚对苯二甲酸乙二醇酯降解酶中的一种。
3.根据权利要求1或2的方法，其特征在于，所述的合成方法包括以下步骤：
①取化合物Ⅰ与化合物Ⅳ，分散于溶剂中；
②加入酶后在特定温度下于特定转速的恒温振荡器内反应一定的时间；
③除去酶与溶剂。
4.根据权利要求3的方法，其特征在于，所述第①步中化合物Ⅰ与化合物Ⅳ的物质的量的比为1：1。
5.根据权利要求3的方法，其特征在于，所述第①步中溶剂是选自乙醇、甲醇、四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯、1，4-二氧六环、乙腈、异丙醇与水中的一种。
6.根据权利要求3的方法，其特征在于，所述第①步中化合物Ⅰ与溶剂的物质的量/体积比在1～5mol/L之间。
7.根据权利要求3的方法，其特征在于，所述第②步中酶与化合物Ⅰ的质量/物质的量的比在5～50g/mol之间。
8.根据权利要求3的方法，其特征在于，所述第②步中温度为20～40℃。
9.根据权利要求3的方法，其特征在于，所述转速为100～200r/min。
10.根据权利要求3的方法，其特征在于，所述反应时间为1～2小时。
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