CN111329795B - 一种乌发育发组合物及其应用与乌发育发产品的制备方法 - Google Patents

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Abstract

提供一种乌发育发组合物，其特征在于，所述组合物包括：水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠以及欧洲落叶松木提取物；所述水解透明质酸钠、所述乙酰化透明质酸钠、所述欧洲落叶松木提取物三者之间的含量比为0.05‑1：0.01‑1：0.1‑2。还提供一种乌发育发产品，其特征在于，其包括乌发育发组合物和缓冲溶液；所述乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物；以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.05‑1重量％的水解透明质酸钠、0.01‑1重量％的乙酰化透明质酸钠以及0.1‑2重量％的欧洲落叶松木提取物。还提供一种乌发育发组合物在制备乌发育发产品中的应用。本申请的乌发育发组合物具有较为优异的乌发育发功效。

Description

一种乌发育发组合物及其应用与乌发育发产品的制备方法
技术领域
本申请属于化妆品技术领域，具体涉及一种乌发育发组合物及其应用，以及一种乌发育发产品的制备方法。
背景技术
头发是人体组织的一部分，是由细胞所组成的有机体。头发细胞是从毛囊内分裂，以倍数增加，新生头发就会从毛囊推向头皮表面。头发每天脱落30条以下是正常的新陈代谢症状，每个头发毛囊在一年内会生出新头发。有一头乌黑的头发使人显得年轻、健康和精神，因此人们都希望自己拥有一头自然生长的黑发。随着社会的发展，生活节奏的加快，人们的工作、生活压力也越来越大，免疫力也随之下降，头发白和掉头发的也越来越多。头发过多脱落或变白与人体功能减退、遗传、精神紧张、用脑过度、营养不良等密切相关。
毛发的颜色取决于毛干中色素颗粒的数目、大小、分布以及所含色素的性质。白头发是指全部或部分变白的头发，生白发是由于头发髓质和皮质里黑色素颗粒减少或被空气填空的缘故，其原因有先天性和后天性两种。造成后天性白发主要的生理或病理因素包括4大类：(1)过氧化氢累积导致蛋氨酸被氧化，随着年龄的增长，头发中的氧自由基含量逐渐增多，当它在发根中的浓度增加到一定水平的时候，就会导致头发中黑色素细胞酪氨酸酶的活性降低，黑色素的合成减少，从而导致白发的生成。(2)营养缺乏也会导致头发由黑变白；(3)情绪递质引起的P53蛋白基因转录活性下降；(4)疾病、药物和身体机能的改变，疾病、药物都是使头发由黑变白的因素，另外脑垂体机能下降、甲状腺机能亢进等内分泌紊乱，结核、伤寒、恶性贫血等消耗性病症，植物神经功能障碍等，也已被发现是与头发由黑变白有关的疾病。目前在45到65岁之间白发的发生率达到74％，其中男性在45到65岁之间白发风险高于女性；白发发生率因地域和种族而异，亚洲和非洲人群的发病率较低，高加索人最高。
脱发是令人特别烦恼的事情。脱发虽是一种病理现象，发病机理却不完全相同。引起脱发的常见原因有遗传性脱发、精神性脱发、药物性脱发、疾病性脱发、环境性脱发、产后脱发、内分泌失调脱发，此外，频繁使用染发剂以及脱脂性强的洗发剂，也易造成头发脱落。大量吸烟、饮酒等对头发的生长均会造成不良影响。
头发生长循环分为三个步骤：第一，毛发生长期，是头发的活跃期，占到所有头发的80-90％，在此阶段，头发每月生长约1cm，保持2-6年；第二，退化期，这是一个过渡期，所有毛发中有2％处于此阶段，持续大约2-3周时间，此阶段头发停止生长；第三，静止期，是头发的休眠期，占所有毛发的10-15％，这一阶段大约持续3个月左右。
专利文献1公开了一种乌发调理组合物，组合物包括保湿剂、中药乌发剂、抗过敏剂和矿物质混合物4种，其中中药乌发剂包括黑芝麻提取物、何首乌提取物、黑豆提取物、驱虫斑鸠菊提取物中的两种或两种以上，其中驱虫斑鸠菊提取物能够上调黑色素合成关键调控因子MITF及其调控的黑色素合成相关蛋白表达与黑色素细胞的增殖，有效促进头发黑色素合成，黑芝麻提取物可促进黑素瘤细胞酪氨酸酶活性、黑色素的形成和黑素细胞的增殖，从而起到乌发作用，但乌发调理组合物的成分较为复杂。
专利文献2公开了一种生发乌发中药组合物，组合物中的植物成分为墨旱莲，黑芝麻，何首乌，丹参，补骨脂，桑叶和款冬7种，另外还有胡椒碱和薄荷脑2种，成分较为复杂。
专利文献3公开了一种具有乌发增发效果的组合物，药物组合物包含芦荟、荞麦、柠檬酸、何首乌，药物组合物制备方法复杂。
专利文献4公开了一种具有乌发生发功能的组合物及其制备方法，组合物的成分为：黑豆、黑木耳、黑芝麻、黑米、核桃、花生红衣、红枣、桑果、枸杞、山药、百合、黄精、覆盆子、蛹虫草、阿胶、益智仁、茯苓、西红花、马齿苋、紫草、葡萄糖酸锌，成分繁多，制备方法复杂。
因此，亟需开发一种疗效明确、无刺激、组成简单的乌发育发组合物。
现有技术文献
专利文献1CN107823007A公开文本
专利文献2CN104306464B公告文本
专利文献3CN102119991B公告文本
专利文献4CN107048385B公告文本
发明内容
本申请为了解决现有技术中中药作为乌发功效的成分较多，且效果不明显，很难消除白发的问题，本申请提供了一种乌发育发组合物，具有显著的乌发育发效果，同时该组合物成分简单，来源广泛，效果明显。同时，还提供了一种乌发育发组合物的应用，以及一种乌发育发产品的制备方法。
本申请的具体技术方案如下：
1、一种乌发育发组合物，其特征在于，所述组合物包括：水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠以及欧洲落叶松木提取物；所述水解透明质酸钠、所述乙酰化透明质酸钠、所述欧洲落叶松木提取物三者之间的含量比为0.05-1：0.01-1：0.1-2。
2、根据项1所述的乌发育发组合物，其特征在于，所述水解透明质酸钠、所述乙酰化透明质酸钠、所述欧洲落叶松木提取物三者之间的含量比为0.1-0.6：0.1-0.5：0.5-1。
3、根据项1或2所述的乌发育发组合物，其特征在于，所述水解透明质酸钠的分子量为5kDa-20kDa。
4、根据项1-3中任一项所述的乌发育发组合物，其特征在于，所述组合物以溶解在缓冲溶液中的形式存在。
5、根据项4所述的乌发育发组合物，其特征在于，所述缓冲溶液包含有机酸或其碱金属盐中的至少一种。
6、根据项4或5所述的乌发育发组合物，其特征在于，所述缓冲溶液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。
7、根据项4-6中任一项所述的乌发育发组合物，其特征在于，所述柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中，柠檬酸与柠檬酸钠的比例为0.172-0.275：0.202-0.347。
8、一种乌发育发产品，其特征在于，其包括乌发育发组合物和缓冲溶液；
所述乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物；
以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.05-1重量％的水解透明质酸钠、0.01-1重量％的乙酰化透明质酸钠以及0.1-2重量％的欧洲落叶松木提取物。
9、根据项8所述的乌发育发产品，其特征在于，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.1-0.6重量％的水解透明质酸钠、0.1-0.5重量％的乙酰化透明质酸钠以及0.5-1重量％的欧洲落叶松木提取物。
10、根据项8或9所述的乌发育发产品，其特征在于，所述水解透明质酸钠的分子量为5kDa-20kDa。
11、根据项8-10中任一项所述的乌发育发产品，其特征在于，所述缓冲溶液包含有机酸或其碱金属盐中的至少一种。
12、根据项8-11中任一项所述的乌发育发产品，其特征在于，所述缓冲溶液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。
13、根据项8-12中任一项所述的乌发育发产品，其特征在于，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.172-0.275重量％的柠檬酸和0.202-0.347重量％的柠檬酸钠。
14、根据项8-13中任一项所述的乌发育发产品，其特征在于，所述乌发育发产品的pH介于4-5之间。
15、一种乌发育发产品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
制备基础溶液，其包含缓冲溶液；
将包含水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物的乌发育发组合物加入所述基础溶液中；
搅拌至澄清透明，得乌发育发产品。
16、根据项15所述的制备方法，其特征在于，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.05-1重量％的水解透明质酸钠、0.01-1重量％的乙酰化透明质酸钠以及0.1-2重量％的欧洲落叶松木提取物。
17、根据项15或16所述的制备方法，其特征在于，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.1-0.6重量％的水解透明质酸钠、0.1-0.5重量％的乙酰化透明质酸钠以及0.5-1重量％的欧洲落叶松木提取物。
18、根据项15-17中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述水解透明质酸钠的分子量为5kDa-20kDa。
19、根据项15-18中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲溶液包含有机酸或其碱金属盐中的至少一种。
20、根据项15-19中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲溶液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。
21、根据项15-20中任一项所述的制备方法，其特征在于，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.172-0.275重量％的柠檬酸和0.202-0.347重量％的柠檬酸钠。
22、根据项15-21中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述基础溶液的pH介于4-5之间。
23、一种如项1-7中任一项所述的乌发育发组合物在制备乌发育发产品中的应用。
24、根据项23中所述的应用，所述乌发育发产品为乌发育发喷雾、毛发营养化妆水、乌发育发精华液、洗发水、护发素或睫毛增长液。
申请的效果
本申请提供的乌发育发组合物中的水解透明质酸钠和乙酰化透明质酸钠与欧洲落叶松木提取物的协同作用在乌发方面可以促进凸起部位中的干细胞增殖，增加真皮乳头的黑色素细胞的黑色素生成，通过激活抗氧化防御来减少ROS(活性氧簇)对黑色素细胞的损伤，刺激头发色素沉着的恢复。同时，在育发方面，本发明的乌发育发组合物可以激活突出部分干细胞，并且可以维持毛囊干细胞的表型，避免凋亡，刺激毛囊干细胞启动毛发生长初期阶段，最后还可以刺激真皮乳头细胞代谢。
本申请提供的乌发育发组合物，含有本申请所述配比的水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物，其以溶解在缓冲溶液中的形式存在，制备成乌发育发产品，优选所述基础溶液的pH值介于本申请所述的4-5之间，使得乌发育发组合物及乌发育发产品具有较为优异的乌发育发功效。
具体实施方式
以下将对本申请做以详细说明。
需要说明的是，在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”或“包括”为一开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。说明书后续描述为实施本发明的较佳实施方式，然所述描述乃以说明书的一般原则为目的，并非用以限定本发明的范围。本发明的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。
本申请提供的乌发育发组合物，其中，所述组合物包括：水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠以及欧洲落叶松木提取物；所述水解透明质酸钠、所述乙酰化透明质酸钠、所述欧洲落叶松木提取物三者之间的含量比为0.05-1：0.01-1：0.1-2。
水解透明质酸钠为高活性超小分子透明质酸钠，透皮吸收率比一般大分子的透明质酸钠高，更深层保湿，提高皮肤水分含量，同时可以修复受损肌肤，提高细胞活性，从而减少环境对肌肤细胞的伤害。
乙酰化透明质酸钠是由透明质酸钠经乙酰化反应得到，乙酰基的引入，使透明质酸钠兼具亲水性和亲脂性，可发挥双倍保湿、修复角质层屏障、提高皮肤弹性等生物活性，同时因其亲脂性的特性，使乙酰化透明质酸钠具有靶向性。
欧洲落叶松木提取物含有二氢槲皮素，二氢槲皮素又名花旗松素，是一种重要的生物黄酮，是一种强氧化剂，能有效去除在人体内具有破坏性的自由基和毒素，保护修复细胞。通过生物技术优化可以得到花旗松素葡萄糖苷。研究表明，花旗松素葡萄糖苷可以减少细胞内线粒体产生的自由基，并通过降低黄嘌呤氧化酶的活性发挥抗氧化作用，同时也作为干细胞增殖和保持活力的刺激物，花旗松素在医药上可用于提高红细胞的活性，以延缓人体的衰老。另外，花旗松素可激活突出部分干细胞，同时可以维持毛囊干细胞的表型，避免凋亡，刺激毛囊干细胞启动毛发生长初期阶段，最后还可以刺激真皮乳头细胞代谢。
通过以上述重量份数含有水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物，本申请的乌发育发组合物各组分协同发挥作用，可以有效地增加黑色素的生成、促进毛囊及毛发的生长，从根本上改善白发脱发的发质。
本申请的乌发育发组合物中，所述水解透明质酸钠、所述乙酰化透明质酸钠、所述欧洲落叶松木提取物三者之间的含量比可为：0.05：0.01：0.1，0.05：0.01：0.5，0.05：0.01：1，0.05：0.01：1.5，0.05：0.01：2，0.05：0.1：0.1，0.05：0.5：0.1，0.05：1：0.1，0.05：0.1：0.5，0.05：0.5：0.5，0.05：1：0.5，0.5：0.1：0.1，0.5：0.1：0.5，0.5：0.1：1，0.5：0.1：2，1：0.1：0.1，1：0.05：0.1，1：0.1：0.1，1：0.5：0.1，1：1：0.1，1：1：0.5，1：1：1，1：1：1.5，1：1：2等。
根据一个优选的实施方式，本申请的乌发育发组合物中，所述水解透明质酸钠、所述乙酰化透明质酸钠、所述欧洲落叶松木提取物三者之间的含量比为0.1-0.6：0.1-0.5：0.5-1。
根据一个具体实施方式，本申请的乌发育发组合物中，所述水解透明质酸钠、所述乙酰化透明质酸钠、所述欧洲落叶松木提取物三者之间的含量比为0.5-0.6：0.3-0.5：1.1-1.5。
根据一个具体实施方式，本申请的乌发育发组合物中，所述水解透明质酸钠的分子量为5kDa-20kDa，具体可为5kDa、6kDa、7kDa、8kDa、9kDa、10kDa、11kDa、12kDa、13kDa、14kDa、15kDa、16kDa、17kDa、18kDa、kDa、19kDa、20kDa等。分子量在该范围内的水解透明质酸钠，透皮吸收率高，更深层保湿，提高皮肤水分含量，同时可以更好地修复受损肌肤，提高细胞活性，从而减少环境对肌肤细胞的伤害。
根据一个具体实施方式，所述有机酸例如可为柠檬酸、乙酸等。
根据一个具体实施方式，所述碱金属盐可为钾盐、钠盐、锂盐、铯盐。
根据一个具体实施方式，所述缓冲溶液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，其中柠檬酸与柠檬酸钠的比例为0.172-0.275：0.202-0.347，具体可为0.275：0.202，0.258：0.226，0.239：0.252，0.216：0.285，0.193：0.317，0.172：0.347。
本申请还提供一种乌发育发产品，其中所述乌发育发产品包括乌发育发组合物和缓冲溶液；所述乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物；以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.05-1重量％的水解透明质酸钠，具体可为0.05重量％、0.06重量％、0.07重量％、0.08重量％、0.09重量％、0.1重量％、0.15重量％、0.2重量％、0.25重量％、0.3重量％、0.35重量％、0.4重量％、0.45重量％、0.5重量％、0.55重量％、0.6重量％、0.65重量％、0.7重量％、0.75重量％、0.8重量％、0.85重量％、0.9重量％、0.95重量％、1重量％的水解透明质酸钠，0.01-1重量％的乙酰化透明质酸钠，具体可为0.01重量％、0.02重量％、0.03重量％、0.04重量％、0.05重量％、0.06重量％、0.07重量％、0.08重量％、0.09重量％、0.1重量％、0.15重量％、0.2重量％、0.25重量％、0.3重量％、0.35重量％、0.4重量％、0.45重量％、0.5重量％、0.55重量％、0.6重量％、0.65重量％、0.7重量％、0.75重量％、0.8重量％、0.85重量％、0.9重量％、0.95重量％、1重量％的乙酰化透明质酸钠，以及0.1-2重量％的欧洲落叶松木提取物，具体可为0.1重量％、0.15重量％、0.2重量％、0.25重量％、0.3重量％、0.35重量％、0.4重量％、0.45重量％、0.5重量％、0.55重量％、0.6重量％、0.65重量％、0.7重量％、0.75重量％、0.8重量％、0.85重量％、0.9重量％、0.95重量％、1重量％、1.05重量％、1.1重量％、1.15重量％、1.2重量％、1.25重量％、1.3重量％、1.35重量％、1.4重量％、1.45重量％、1.5重量％、1.55重量％、1.6重量％、1.65重量％、1.7重量％、1.75重量％、1.8重量％、1.85重量％、1.9重量％、1.95重量％、2重量％的欧洲落叶松木提取物。
根据一个优选的实施方式，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.1-0.6重量％的水解透明质酸钠、0.1-0.5重量％的乙酰化透明质酸钠以及0.5-1重量％的欧洲落叶松木提取物。
本申请还提供一种乌发育发产品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一，制备基础溶液，其包含缓冲溶液；
步骤二，将包含水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物的乌发育发组合物加入所述基础溶液中；
步骤三，搅拌至澄清透明，得乌发育发产品。
在步骤一中，所述缓冲溶液包含有机酸或其碱金属盐中的至少一种，所述缓冲溶液具体可为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。
根据一个具体实施方式，所述基础溶液的pH值介于4-5之间，具体地，本申请的基础溶液pH值可为4，4.1，4.2，4.3，4.4，4.5，4.6，4.7，4.8，4.9，5。
根据一个具体实施方式，所述缓冲溶液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.172-0.275重量％的柠檬酸和0.202-0.347重量％的柠檬酸钠，具体可为：0.275重量％的柠檬酸与0.202重量％的柠檬酸钠、0.258重量％的柠檬酸与0.226重量％的柠檬酸钠、0.239重量％的柠檬酸与0.252重量％的柠檬酸钠、0.216重量％的柠檬酸与0.285重量％的柠檬酸钠、0.193重量％的柠檬酸与0.317重量％的柠檬酸钠、0.172重量％的柠檬酸与0.347重量％的柠檬酸钠，此时对应的基础溶液pH值分别为4、4.2、4.4、4.6、4.8、5。
根据一个具体实施方式，所述基础溶液还包括将所述乌发育发产品制成各种剂型所必需的基质，所述基质可以选择现有技术中各剂型的常规基质，如甘油等。
在步骤二中，所述水解透明质酸钠的分子量为5kDa-20kDa，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.05-1重量％的水解透明质酸钠、0.01-1重量％的乙酰化透明质酸钠以及0.1-2重量％的欧洲落叶松木提取物。
优选地，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.1-0.6重量％的水解透明质酸钠、0.1-0.5重量％的乙酰化透明质酸钠以及0.5-1重量％的欧洲落叶松木提取物。
通过以本申请的制备方法中限定的比例添加水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物，并以本申请的制备方法中限定的pH值配制基础溶液，能够制备出乌发育发效果更好的乌发育发产品。
此外，本申请还提供一种如前所述的乌发育发组合物在制备乌发育发产品中的应用，其中所述乌法育发产品可为且不限于乌发育发喷雾、毛发营养化妆水、乌发育发精华液、洗发水、护发素或睫毛增长液等。
根据一个具体实施方式，本申请的乌发育发组合物可以应用于化妆品的制备，也可以用于皮肤外用药品。
实施例
为了更好的说明本申请的技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。本发明未详细说明的工艺参数、原料等均按照本领域常规技术手段进行。
下述实施例中，如无特别说明，各原料均为市售原料。
表1
Figure BDA0002437059060000091
Figure BDA0002437059060000101
表2
Figure BDA0002437059060000102
实施例1
本实施例的乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠40g，乙酰化透明质酸钠20g，欧洲落叶松木提取物100g。
上表1为乌发育发精华液的基础配方，根据表1中的配方制备乌发育发精华液，制备方法为：
(1)将A相原料混合搅拌溶解至均一液体；
(2)将B相原料(柠檬酸和柠檬酸钠)加入A相原料中，搅拌溶解至均一液体，得到基础溶液；
(3)测试基础溶液的pH，保证基础溶液pH在4.0-5.0范围内，加入C相原料和D相原料，搅拌溶解至澄清透明，出料，即得10kg的乌发育发精华液。
实施例2
本实施例的乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠5g，乙酰化透明质酸钠30g，欧洲落叶松木提取物80g。
本实施例的乌发育发精华液的制备方法同实施例1。
实施例3
本实施例的乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠20g，乙酰化透明质酸钠5g，欧洲落叶松木提取物120g。
本实施例的乌发育发精华液的制备方法同实施例1。
实施例4
本实施例的乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠100g，乙酰化透明质酸钠1g，欧洲落叶松木提取物10g。
本实施例的乌发育发精华液的制备方法同实施例1。
实施例5
本实施例的乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠60g，乙酰化透明质酸钠50g，欧洲落叶松木提取物150g。
本实施例的乌发育发精华液的制备方法同实施例1。
对比例1
本对比例的乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠40g，欧洲落叶松木提取物100g。
使用本对比例的乌发育发组合物，参照实施例1的方法制备本对比例的乌发育发精华液。
对比例2
本对比例的乌发育发组合物包括：乙酰化透明质酸钠20g，欧洲落叶松木提取物100g。
使用本对比例的乌发育发组合物，参照实施例1的方法制备本对比例的乌发育发精华液。
对比例3
本对比例的乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠40g，乙酰化透明质酸钠20g。
使用本对比例的乌发育发组合物，参照实施例1的方法制备本对比例的乌发育发精华液。
对比例4
本对比例的乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠40g。
使用本对比例的乌发育发组合物，参照实施例1的方法制备本对比例的乌发育发精华液。
对比例5
本对比例的乌发育发组合物包括：乙酰化透明质酸钠20g。
使用本对比例的乌发育发组合物，参照实施例1的方法制备本对比例的乌发育发精华液。
对比例6
本对比例的乌发育发组合物包括：欧洲落叶松木提取物100g。
使用本对比例的乌发育发组合物，参照实施例1的方法制备本对比例的乌发育发精华液。
对比例7
本对比例的乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠40g，乙酰化透明质酸钠20g，何首乌提取物100g。
使用本对比例的乌发育发组合物，参照实施例1的制备方法，适当调整配方中柠檬酸与柠檬酸钠的比例，其中柠檬酸添加量为15.3g，柠檬酸钠添加量为37.4g，使得基础溶液pH为5.2，制备本对比例的乌发育发精华液。
对比例8
本对比例的乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠40g，乙酰化透明质酸钠20g，人参根提取物100g。
使用本对比例的乌发育发组合物，参照实施例1的制备方法，适当调整配方中柠檬酸与柠檬酸钠的比例，其中柠檬酸添加量为15.3g，柠檬酸钠添加量为37.4g，使得基础溶液pH为5.2，制备本对比例的乌发育发精华液。
对比例9
本对比例的乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠40g，乙酰化透明质酸钠20g，欧洲落叶松木提取物100g。
使用本对比例的乌发育发组合物，参照实施例1的制备方法，适当调整配方中柠檬酸与柠檬酸钠的比例，其中柠檬酸添加量为15.3g，柠檬酸钠添加量为37.4g，使得基础溶液pH为5.2，制备本对比例的乌发育发精华液。
对比例10
本对比例的乌发育发组合物包括：透明质酸钠40g(分子量为200kDa-400kDa)，乙酰化透明质酸钠20g，欧洲落叶松木提取物100g。
使用本对比例的乌发育发组合物，参照实施例1的方法制备本对比例的乌发育发精华液。
试验例
试验例1刺激黑色素生成体外试验
用实施例1-5和对比例1-10的乌发育发精华液，处理正常人角质形成细胞(NHK)和正常人黑色素细胞(NHM)的共培养物72h，同时做一组空白(不含组合物的乌发精华液)处理72h，72h后通过比色测定(405nm)细胞上清液中的黑色素含量。
黑色素生成的上调率＝(实施例或对比例72h后测定的黑色素含量-空白组72h后测定的黑色素含量)/空白组72h后测定的黑色素含量*100％
黑色素生成的上调率试验结果见下表3：
表3
黑色素生成的上调率(％)
实施例1 418
实施例2 315
实施例3 333
实施例4 239
实施例5 425
对比例1 193
对比例2 172
对比例3 92
对比例4 48
对比例5 41
对比例6 123
对比例7 146
对比例8 157
对比例9 148
对比例10 201
从表3数据可以看出，实施例1和实施例5的效果优于其它实施例，其中实施例5中的欧洲落叶松木提取物的添加量高于实施例1，但与黑色素生成的上调率增加量不成比例，同时欧洲落叶松木提取物的成本高，因此最终效果并不随活性物的含量增高而成比例增加；实施例1与对比例1-6对比分析可知，水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物有相互协调功效；采用现有技术中报道的何首乌提取物和人参根提取物替换本发明的欧洲落叶松木提取物，黑色素生成的上调率明显降低；实施例1与对比例9对比分析可知，pH对乌发育发组合物的乌发功效影响很大。实施例1与对比例10的分析可知，水解透明质酸钠的分子量对乌发育发组合物的乌发功效具有显著影响。
试验例2毛囊生长试验(Philpott试验)
选用患有脱发的男性的毛囊进行试验，解剖显微镜下选取完整无损伤的生长期毛囊进行培养，游离的毛囊小心移入24孔培养板中，每孔1根毛囊，加入0.5mL Willams E无血清培养基，37℃，50mL·L-1(5％)CO2恒温孵育箱中悬浮培养。24h后选生长明显的毛囊(≥0.1mm)加入乌发育发精华液继续培养，无需换液。一共做16组试验，一组空白组，剩余15组用实施例1-5和对比例1-10制备的乌发育发精华液进行培养，每组随机选取18根毛囊，用目镜测微器测量每个毛囊的初始长度，计算每组的初始长度，然后测量培养10天后的每根毛囊长度，计算每组的最终长度，根据公式：毛囊毛发生长率＝(最终长度-初始长度)/初始长度*100％，计算出每组毛囊毛发生长率，结果见表4。
表4
Figure BDA0002437059060000151
Figure BDA0002437059060000161
从表4数据可以看出，实施例1和实施例5的效果优于其它实施例，其中实施例5中的欧洲落叶松木提取物的添加量高于实施例1，但与毛囊毛发生长率的增加量不成比例，同时活性物欧洲落叶松木提取物、水解透明质酸钠和乙酰化透明质酸钠的成本高，因此毛囊毛发生长率并不随活性物的含量增加而成比例增加；实施例1与对比例1-6对比分析可知，水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物有相互协调功效；采用现有技术中报道的何首乌提取物和人参根提取物替换本发明的欧洲落叶松木提取物，毛囊毛发生长率明显降低；实施例1与对比例9对比分析可知，pH对乌发育发组合物的生发功效影响很大。实施例1与对比例10的分析可知，水解透明质酸钠的分子量对乌发育发组合物的生发功效具有显著影响。
试验例3生发临床试验
志愿者选取：选择25-65之间的男性45名，棕色到深色头发，符合3-4级秃发(参考Norwood量表)，分成三组，分别测试实施例1、对比例7和对比例8制备的乌发生发精华液，测试时间为90天。
患者自我评价评判：通过问卷形式，调查患者对疗效的满意度，分为非常满意(改善≥75％)、满意改善(改善50％～75％)、一般(改善25％～50％)、不满意(改善≤25％)，统计总有效率。
总有效率＝(试验人数-不满意人数)/试验人数。
统计结果如下表5所示，从下表5分析可得，实施例1的总有效率明显高于对比例7和8，同时实施例的非常满意和满意改善的占比也相对于对比例7和8高很多；
表5三组临床试验结果
Figure BDA0002437059060000162
Figure BDA0002437059060000171
注：不同年龄段的人在每组中人数差不多；因临床试验开展的难度比较大，因此选择3组例子进行试验。
虽然本申请已以实施例公开如上，但并非用于限定本申请的保护范围，任何熟悉该项技术的技术人员，在不脱离本申请的构思和范围内所作的更改和润饰，均应属于本申请的保护范围。

Claims (14)

1.一种乌发育发组合物，其特征在于，所述组合物包括：水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠以及欧洲落叶松木提取物；所述水解透明质酸钠、所述乙酰化透明质酸钠、所述欧洲落叶松木提取物三者之间的含量比为0.05-1：0.01-1：0.1-2；所述水解透明质酸钠的分子量为5kDa-20kDa；
所述组合物以溶解在缓冲溶液中的形式存在；
所述缓冲溶液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液；
所述柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中，柠檬酸与柠檬酸钠的比例为0.172-0.275：0.202-0.347。
2.根据权利要求1所述的乌发育发组合物，其特征在于，所述水解透明质酸钠、所述乙酰化透明质酸钠、所述欧洲落叶松木提取物三者之间的含量比为0.1-0.6：0.1-0.5：0.5-1。
3.一种乌发育发产品，其特征在于，其包括乌发育发组合物和缓冲溶液；
所述乌发育发组合物包括：水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物；
以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.05-1重量%的水解透明质酸钠、0.01-1重量%的乙酰化透明质酸钠以及0.1-2重量%的欧洲落叶松木提取物；所述水解透明质酸钠的分子量为5kDa-20kDa；
所述乌发育发产品的pH介于4-5之间。
4.根据权利要求3所述的乌发育发产品，其特征在于，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.1-0.6重量%的水解透明质酸钠、0.1-0.5重量%的乙酰化透明质酸钠以及0.5-1重量%的欧洲落叶松木提取物。
5.根据权利要求3或4所述的乌发育发产品，其特征在于，所述缓冲溶液包含有机酸或其碱金属盐中的至少一种。
6.根据权利要求5所述的乌发育发产品，其特征在于，所述缓冲溶液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。
7.根据权利要求6所述的乌发育发产品，其特征在于，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.172-0.275重量%的柠檬酸和0.202-0.347重量%的柠檬酸钠。
8.一种乌发育发产品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
制备基础溶液，其包含缓冲溶液；
将包含水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠和欧洲落叶松木提取物的乌发育发组合物加入所述基础溶液中；
搅拌至澄清透明，得乌发育发产品；
其中，所述水解透明质酸钠的分子量为5kDa-20kDa；
以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.05-1重量%的水解透明质酸钠、0.01-1重量%的乙酰化透明质酸钠以及0.1-2重量%的欧洲落叶松木提取物；
所述基础溶液的pH介于4-5之间。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.1-0.6重量%的水解透明质酸钠、0.1-0.5重量%的乙酰化透明质酸钠以及0.5-1重量%的欧洲落叶松木提取物。
10.根据权利要求8或9所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲溶液包含有机酸或其碱金属盐中的至少一种。
11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲溶液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。
12.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，以所述乌发育发产品的总重量为基础，所述乌发育发产品包括：0.172-0.275重量%的柠檬酸和0.202-0.347重量%的柠檬酸钠。
13.一种如权利要求1或2所述的乌发育发组合物在制备乌发育发产品中的应用。
14.根据权利要求13中所述的应用，所述乌发育发产品为乌发育发喷雾、毛发营养化妆水、乌发育发精华液、洗发水、护发素或睫毛增长液。
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