CN111235148A - 一种dna探针池、包含其的淋巴瘤检测试剂盒及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种DNA探针池、包含其的淋巴瘤检测试剂盒及其制备方法和应用。所述DNA探针池中的每个探针包括：5'末端生物素化标记和与淋巴瘤相关基因特异性结合的核苷酸序列。通过设计与目的片段互补的带有生物素标记的DNA探针，与靶向基因序列杂交，然后与抗生物素链酶亲和素抗体结合后用磁珠吸附，完成对多个与淋巴瘤相关的基因进行捕获。通过使用的二代测序方法一次便可通过检测多个与淋巴瘤相关的基因重排，成本更低，精度较高，为淋巴瘤的诊断和分型提供了基础。

Description

一种DNA探针池、包含其的淋巴瘤检测试剂盒及其制备方法和 应用

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，涉及一种DNA探针池、包含其的淋巴瘤检测试剂盒及其制备方法和应用。

背景技术

恶性淋巴瘤(Malignant lymphoma，ML)是免疫系统的原发性恶性肿瘤，主要发生于淋巴器官和淋巴组织，其主要临床表现是无痛性淋巴结肿大，全身各组织器官均可受累。淋巴瘤患者在发现淋巴结肿大前或同时可出现发热、盗汗、消瘦、皮肤瘙痒等全身症状。恶性淋巴瘤的诊断方法主要依靠病理学检查，结合临床表现及必要的相关实验检查，以明确病理类型及病变范围。

根据肿瘤的组织结构及细胞学特征可分为何杰金氏病(Hodgkins disease，HD)及非何杰金恶性淋巴瘤(non Hodgkins malignant lymphoma，NHL)两大类，二者在发病率、临床经过、治疗及预后等方面存在明显差异。两大类淋巴瘤进而还可以细分为不同的组织学亚型，每一种病理类型有各自的形态学和免疫学表现、遗传学特征、特殊的临床特点和预后。因此，正确的病理分型是临床诊断、指定治疗方案和判断预后的重要前提。

然而，淋巴瘤的诊断一直是病理诊断中的难点，部分淋巴组织增生性病变单纯通过HE染色和免疫组化很难明确性质，另外NHL由于种类繁多，分类复杂，给临床病理工作者带来了一定的困难。

淋巴细胞从原始的胚系构型到分化成熟，其抗原受体(Ig和TCR)基因通过基因重排而形成有功能的基因。一个T细胞、B细胞或其克隆性后代，均只含一种独特的分子遗传学标记。一旦某一克隆的淋巴细胞发生恶性变化，即可呈现特异的基因重排。因此，对基因重排类型进行检测可用于对淋巴细胞增殖性疾病的诊断。

荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization，FISH)是一种重要的非放射性原位杂交技术，出现于20世纪70年代末的遗传学实验技术。它根据碱基互补配对原则，通过特殊手段使带有荧光物质的探针与目标DNA接合，最后用荧光显微镜即可直接观察目标DNA所在的位置。FISH技术可在组织和细胞原位，对染色体整倍体及结构变异，以及靶基因的定位、扩增、缺失、断裂和融合进行检测。目前该技术已普遍应用于淋巴瘤的诊断与鉴别、预后诊断、用药指导等多个领域，然而该方法的成本较高，且准确度有待进一步提高。

因此，开发一种用于检测精度较高、成本较低，同时能够实现淋巴瘤分型的检测试剂盒是本领域急需解决的问题。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种DNA探针池、包含其的淋巴瘤检测试剂盒及其制备方法和应用，所述DNA探针池能够检测多种淋巴瘤产生的基因重排，为淋巴瘤的诊断和分型提供了基础。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种DNA探针池，所述DNA探针池中的每个探针包括：5'末端生物素化标记和与淋巴瘤相关基因特异性结合的核苷酸序列。

本发明中，通过设计与目的片段互补的带有生物素标记的DNA探针，与靶向基因序列杂交，然后与抗生物素链酶亲和素抗体结合后用磁珠吸附，完成对多个与淋巴瘤相关的基因进行捕获。通过使用的二代测序方法一次便可通过检测多个与淋巴瘤相关的基因重排，较经典的FISH方法来说准确度更高，成本更低，同时相对于全外显子组测序来说，本发明只需对目标基因进行捕获，从而节约成本，也简化了后续数据分析。

作为本发明优选的技术方案，所述淋巴瘤相关基因包括FCRL4、IGH、BCL6、CCND1、BIRC3、MALT1、BCL2、MYC、BCR或ABL1中的任意一种或两种以上的组合。

优选地，所述淋巴瘤相关基因产生的基因重排包括FCRL4/IGH，IGH/BCL6，IGH/CCND1，BIRC3/MALT1，IGH/BCL2，IGH/MYC或BCR/ABL1中的任意一种或两种以上的组合

本发明通过对美国国立综合癌症网络(National Comprehensive CancerNetwork，NCCN)发布的指南进行整理，从中选出最重要的FCRL4/IGH，IGH/BCL6，IGH/CCND1，BIRC3/MALT1，IGH/BCL2，IGH/MYC，BCR/ABL17种基因重排，涉及到的淋巴瘤包括滤泡性淋巴瘤、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤、非胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤、淋巴结边缘区淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫大B淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、艾滋相关B细胞淋巴瘤、淋巴母细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤等多种淋巴瘤。

作为本发明优选的技术方案，所述DNA探针池中共有200～230条(例如可以是200条、205条、210条、215条、220条、225条或230条等)寡核苷酸探针。

优选地，所述DNA探针池中每个所述寡核苷酸探针的浓度均为3～10pmole/μL，例如可以是3pmole/μL、4pmole/μL、5pmole/μL、6pmole/μL、7pmole/μL、8pmole/μL、9pmole/μL或10pmole/μL等。

优选地，所述寡核苷酸探针的GC含量为30-70％，例如可以是30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％或70％等。

优选地，所述寡核苷酸探针的序列长度为110～130bp，例如可以是110bp、112bp、115bp、120bp、125bp、128bp或130bp等。

作为本发明优选的技术方案，所述DNA探针池包含216条寡核苷酸探针，所述216条寡核苷酸探针的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.216所示。

DNA探针池共包括了淋巴瘤相关的10个基因全部外显子区域和UTR区域，共19.9KB。因此，本发明提供的探针池能全面覆盖淋巴瘤的疾病分型诊断、及预后指导。

以SEQ ID NO.1为例，其序列为：

GTTCTGGAAGATCTTGAACCCTCTTCTGGAAAGGGGTACCTATTATTACTTTATGGGGCAGCAGCCTGGAAAAGTACTTGGGGACCAAAGAAGGCCAAGCTTGCCTGCCCTGCATTTTAT

所述核苷酸序列委托IDT公司合成，返回所有寡核苷酸序列的混合液；在该混合液中，每条寡核苷酸序列的浓度均为3pmole。探针采用化学合成方式合成，每根探针浓度均一，准确度高，大大降低了探针池捕获的脱靶率。

第二方面，本发明提供一种如第一方面所述的DNA探针池的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

(1)选择淋巴瘤相关基因的外显子和UTR区域；

(2)获取所述淋巴瘤相关基因的不同转录本，通过位置信息均映射到HG19人类标准参考基因组上，选取能够覆盖所有转录本的序列；

(3)避开突变位点、SNP位点或插入缺失位点；

(4)外显子部分向3'和5'端的内含子中各沿伸15-20bp得到所述寡核苷酸探针的核苷酸序列，合成得到所述探针池。

本发明的探针设计原则具有一定的先进性，在设计时考虑了多种可能存在的脱靶情况，克服了检测精度问题，即使是低频的淋巴瘤变异也能够进行检测。

作为本发明优选的技术方案，步骤(3)中所述突变位点包括RefSeq、Ensembl、dbSNP或ExAC数据库中亚洲人群的高频突变位点。

本发明提供的DNA探针池使用IDT官方网站软件生成，具体的生成方法为：输入每个基因的ID序列(GenBank ID)，选择1X Tile并点击下一步，等待软件自动设计探针序列，若生成的探针序列中存在个别基因不识别的问题，则通过查询GeneCard网站寻找未识别基因的曾用名来解决。

第三方面，本发明还提供如第一方面所述的DNA探针池在制备淋巴瘤检测试剂盒中的应用。

第四方面，本发明提供一种淋巴瘤检测试剂盒，包含第一方面所述的DNA探针池。

作为本发明优选的技术方案，所述淋巴瘤检测试剂盒还包括PCR扩增检测的常规组件。

优选地，所述常规组件包括预混液、引物混合液和无核酸酶超纯水。

第五方面，一种如第四方面所述的淋巴瘤检测试剂盒的使用方法，所述使用方法包括如下步骤：

提取全血样本中的RNA并构建RNA二代测序文库，将所述RNA二代测序文库与DNA探针池杂交，通过二代测序与数据分析获得检测结果。

优选地，所述全血样本的体积为2-10mL，例如可以是2mL、3mL、4mL、5mL、6mL、7mL、8mL、9mL或10mL等。

本发明中，全血样本RNA提取使用的试剂盒是QiaAmp RNeasy Mini Kit或其它任何一种用于提取全血RNA的试剂盒；全血样本RNA二代测序文库构建使用的试剂盒是任何一种用于RNA二代测序文库构建的商品试剂盒；所用杂交试剂盒是rRNA Probe Mix(H/M/R)；所述二代测序所用平台为市面上任一二代测序平台；数据分析所用的软件是任何一款可用于RNA-Fusion/Inv检测的开源软件。

本发明所述的数值范围不仅包括上述列举的点值，还包括没有列举出的上述数值范围之间的任意的点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明通过重点关注淋巴瘤相关基因谱在不同淋巴瘤分型患者中的具体情况，获得多种在疾病分型及疾病预后相关的基因突变和基因重排；通过设计与目的片段互补的带有生物素标记的DNA探针，每根探针浓度均一，大大降低了探针池捕获的脱靶率；

(2)本发明中杂交后的探针与抗生物素链酶亲和素抗体结合后使用磁珠等方式进行吸附，能够完成对多个与淋巴瘤相关的基因进行捕获，检测出基因突变和重排，且检测到的突变率与实际突变率相似，因而能够用于诊断淋巴瘤分型，同时重复试验证明本发明提供的检测探针和试剂盒在多次检测时的结果基本相同，说明其准确度和重复度都较好。

具体实施方式

下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。

在对实施例进行描述前，有必要提供一些备注说明：在采用不同厂家、不同批次的试剂会造成实验结果的差异，属于正常现象。

在进行小规模实验时，为保证平行实验间的重复性，建议配置试剂后，充分混匀并分装，以保证每次实验试剂的均一性。

实施例1

本实施例提供一种DNA探针池，所述探针池中包含216条寡核苷酸探针，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.216所示。

其制备方法包括如下步骤：

(1)根据2019年ASCO淋巴瘤专家共识、2019NCCN淋巴瘤诊疗指南涉及的10个淋巴瘤相关基因外显子及UTR区域；

(2)寡核苷酸设计原则：根据文献整理10个基因的外显子区域及UTR区域，从中选出最重要的FCRL4/IGH，IGH/BCL6，IGH/CCND1，BIRC3/MALT1，IGH/BCL2，IGH/MYC，BCR/ABL1这7种基因重排；

(3)每种基因不同转录本，通过位置信息均映射到HG19人类标准参考基因组上，选取能覆盖所有转录本的序列；

(4)设计探针时，避开RefSeq，Ensembl，dbSNP，ExAC数据库中的亚洲人群高频突变、SNP或插入缺失位点；

(5)外显子部分向3'和5'端的内含子中各沿伸20bp，每条寡核苷酸序列包括两个部分：5'末端生物素化标记120bp能与基因特异性结合的序列，最终得到216条寡核苷酸探针序列；

(6)所得序列委托IDT公司合成，返回所有寡核苷酸序列的混合液；在该混合液中，每条寡核苷酸序列的浓度均为3pmole。

实施例2

本实施例验证实施例1制备的DNA探针池与淋巴瘤相关的重排基因的检测准确度。

具体方法与步骤如下：

1.收集COBIOER的融合标准品BCR/ABL1，IGH/CCND1各1μg RNA；

2.采用KAPA LTP RNA Library Preparation Kit进行二代测序文库构建，文库构建操作完全按照该试剂盒的操作手册进行；

3.将每个文库中分别取单个文库的500ng，混合成共计1μg的混合文库；

4.将混合好的文库分别与淋巴瘤重排探针进行杂交捕获，杂交捕获试剂采用IDTxGen DNA Capture Kit，操作步骤完全按照该试剂盒的操作手册进行；

5.杂交捕获完毕的文库按标准程序进行HiseqX上机测序，产出约500Mb数据量；

6.使用软件STAR-Fusion得到的2例标准品样本重排情况如下表1所示：

表1

检测内容	BCR/ABL1融合	IGH/CCND1融合
			标准品突变率/％	5	5
测到的实际突变频率/％	5.06	4.84
			符合性	一致	一致

通过上表可以得知，本发明提供的DNA探针池得到的检测结果与标准品提供的突变率一致，说明所述DNA探针池能够准确判断出目的基因的突变频率。

实施例3

本实施例验证实施例1制备的DNA探针池与淋巴瘤相关的重排基因的重复度。

具体方法与步骤如下：

1.收集COBIOER的融合标准品BCR/ABL1，IGH/CCND1各3份1μg RNA；

2.采用KAPA LTP RNA Library Preparation Kit进行二代测序文库构建，文库构建操作完全按照该试剂盒的操作手册进行；

3.将每个文库中分别取单个文库的200ng，混合成共计1.2μg的混合文库；

4.将混合好的文库分别与淋巴瘤重排探针进行杂交捕获，杂交捕获试剂采用IDTxGen DNA Capture Kit，操作步骤完全按照该试剂盒的操作手册进行；

5.杂交捕获完毕的文库按标准程序进行HiseqX上机测序，产出约500Mb数据量。

6.使用软件STAR-Fusion得到的2例标准品样本重排情况如下表2所示：

表2

通过上表可以得知，本发明提供的DNA探针池多次检测之后得到的检测结果与标准品提供的突变率一致，说明所述DNA探针池能够准确判断出目的基因的突变频率，且重复度较好。

综上所述，本发明提供的DNA探针池和检测试剂盒使用的二代测序方法一次便可通过检测多个与淋巴瘤相关的基因重排，较经典的FISH方法来说准确度更高，成本更低，同时相对于全外显子组测序来说，本发明只需对目标基因进行捕获，从而节约成本，也简化了后续数据分析。

本发明中筛选10个与淋巴瘤诊断相关的基因外显子区域设计DNA探针，采用外显子捕获方法，开发一种能高通量疾病检测的技术，并开发筛查试剂盒，用以快速、简便的筛查淋巴瘤，实现淋巴瘤的早期诊断和早期治疗。

申请人声明，以上所述仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，所属技术领域的技术人员应该明了，任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

SEQUENCE LISTING

<110> 迈杰转化医学研究（苏州）有限公司

<120> 一种DNA探针池、包含其的淋巴瘤检测试剂盒及其制备方法和应用

<130> 20200303

<160> 216

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 1

gttctggaag atcttgaacc ctcttctgga aaggggtacc tattattact ttatggggca 60

gcagcctgga aaagtacttg gggaccaaag aaggccaagc ttgcctgccc tgcattttat 120

<210> 2

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 2

caaaggagca gggaagaagg aatcatcgag gcatgggggt ccacactgca atgtttttgt 60

ggaacatggt gagtgctttt caaaatttct gctcatggtt ttcctcatgc attcatctta 120

<210> 3

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 3

cccgacgtgc tggcgcggga aaatgttgga gatctgcctg aagctggtgg gctgcaaatc 60

caagaagggg ctgtcctcgt cctccagctg ttatctggaa ggtaagcccg ggccgcacgg 120

<210> 4

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 4

tttctttttt ctgttccccc ctttctcttc cagaagccct tcagcggcca gtagcatctg 60

actttgagcc tcagggtctg agtgaagccg ctcgttggaa ctccaaggaa aaccttctcg 120

<210> 5

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 5

ctggacccag tgaaaatgac cccaaccttt tcgttgcact gtatgatttt gtggccagtg 60

gagataacac tctaagcata actaaaggta aaagggttgt gggcagctag tggtggttgc 120

<210> 6

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 6

tgatatgtct gatttggttc ctttcttctc aggtgaaaag ctccgggtct taggctataa 60

tcacaatggg gaatggtgtg aagcccaaac caaaaatggc caaggctggg tcccaagcaa 120

<210> 7

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 7

ctacatcacg ccagtcaaca gtctggagaa acactcctgg taccatgggc ctgtgtcccg 60

caatgccgct gagtatctgc tgagcagcgg gatcaatggc agcttcttgg tgcgtgagag 120

<210> 8

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 8

tgagagcagt cctggccaga ggtccatctc gctgagatac gaagggaggg tgtaccatta 60

caggatcaac actgcttctg atggcaaggt aggggaccct tggcaggggg cgctgatggg 120

<210> 9

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 9

ttgcctgtct ctgtgggctg aaggctgttc cctgtttcct tcagctctac gtctcctccg 60

agagccgctt caacaccctg gccgagttgg ttcatcatca ttcaacggtg gccgacgggc 120

<210> 10

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 10

tcatcaccac gctccattat ccagccccaa agcgcaacaa gcccactgtc tatggtgtgt 60

cccccaacta cgacaagtgg gagatggaac gcacggacat caccatgaag cacaagctgg 120

<210> 11

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 11

gcgggggcca gtacggggag gtgtacgagg gcgtgtggaa gaaatacagc ctgacggtgg 60

ccgtgaagac cttgaaggta ggctgggact gccgggggtg cccagggtac gtggggcaag 120

<210> 12

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 12

gtttttttcc ttctgcagga ggacaccatg gaggtggaag agttcttgaa agaagctgca 60

gtcatgaaag agatcaaaca ccctaacctg gtgcagctcc ttggtgagta agcccggggc 120

<210> 13

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 13

cgtgttgaag tcctcgttgt cttgttggca ggggtctgca cccgggagcc cccgttctat 60

atcatcactg agttcatgac ctacgggaac ctcctggact acctgaggga gtgcaaccgg 120

<210> 14

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 14

caggaggtga acgccgtggt gctgctgtac atggccactc agatctcgtc agccatggag 60

tacctggaga agaaaaactt catccacagg taggggcctg gccaggcagc ctgcgccatg 120

<210> 15

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 15

ctcatgggtg aacattttcc tttcttagag atcttgctgc ccgaaactgc ctggtagggg 60

agaaccactt ggtgaaggta gctgattttg gcctgagcag gttgatgaca ggggacacct 120

<210> 16

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 16

acacagccca tgctggagcc aagttcccca tcaaatggac tgcacccgag agcctggcct 60

acaacaagtt ctccatcaag tccgacgtct ggggtaaggg ctgctgctgc actgaagtgg 120

<210> 17

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 17

tgctacacat cttgaacagc ctttctcttt cggttttctt tcagcatttg gagtattgct 60

ttgggaaatt gctacctatg gcatgtcccc ttacccggga attgacctgt cccaggtgta 120

<210> 18

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 18

tgagctgcta gagaaggact accgcatgga gcgcccagaa ggctgcccag agaaggtcta 60

tgaactcatg cgagcatgta agccttcctc agcctgttct cacgagtata tgtgggcatt 120

<210> 19

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 19

gtttcatctg tccaggttgg cagtggaatc cctctgaccg gccctccttt gctgaaatcc 60

accaagcctt tgaaacaatg ttccaggaat ccagtatctc agacggtaaa gtacccatcc 120

<210> 20

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 20

ctgctggatt tttgtttctg tccctgtatg attcttagaa gtggaaaagg agctggggaa 60

acaaggcgtc cgtggggctg tgagtacctt gctgcaggcc ccagagctgc ccaccaagac 120

<210> 21

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 21

gaggacctcc aggagagctg cagagcacag agacaccact gacgtgcctg agatgcctca 60

ctccaagggc cagggagaga gcggtaagtc ccccgcttcc cccaacccca ctgctcttcc 120

<210> 22

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 22

tagagttgtc tggagttgtc agctcttccc cttgcgtttc agatcctctg gaccatgagc 60

ctgccgtgtc tccattgctc cctcgaaaag agcgaggtcc cccggagggc ggcctgaatg 120

<210> 23

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 23

ctgcagggaa ggctggagga aagccctcgc agagcccgag ccaggaggcg gccggggagg 60

cagtcctggg cgcaaagaca aaagccacga gtctggttga tgctgtgaac agtgacgctg 120

<210> 24

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 24

ccaagcccag ccagccggga gagggcctca aaaagcccgt gctcccggcc actccaaagc 60

cacagtccgc caagccgtcg gggaccccca tcagcccagc ccccgttccc tccacgttgc 120

<210> 25

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 25

catcagcatc ctcggccctg gcaggggacc agccgtcttc caccgccttc atccctctca 60

tatcaacccg agtgtctctt cggaaaaccc gccagcctcc agagcggatc gccagcggcg 120

<210> 26

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 26

ccatcaccaa gggcgtggtc ctggacagca ccgaggcgct gtgcctcgcc atctctagga 60

actccgagca gatggccagc cacagcgcag tgctggaggc cggcaaaaac ctctacacgt 120

<210> 27

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 27

tctgcgtgag ctatgtggat tccatccagc aaatgaggaa caagtttgcc ttccgagagg 60

ccatcaacaa actggagaat aatctccggg agcttcagat ctgcccggcg acagcaggca 120

<210> 28

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 28

gtggtccagc ggccactcag gacttcagca agctcctcag ttcggtgaag gaaatcagtg 60

acatagtgca gaggtagcag cagtcagggg tcaggtgtca ggcccgtcgg agctgcctgc 120

<210> 29

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 29

aagatgagcg ccttctcccc aaagacaaaa agaccaactt gttcagcgcc ttgatcaaga 60

agaagaagaa gacagcccca acccctccca aacgcagcag ctccttccgg gagatggacg 120

<210> 30

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 30

gccagccgga gcgcagaggg gccggcgagg aagagggccg agacatcagc aacggggcac 60

tggctttcac ccccttggac acagctgacc cagccaagtc cccaaagccc agcaatgggg 120

<210> 31

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 31

ctggggtccc caatggagcc ctccgggagt ccgggggctc aggcttccgg tctccccacc 60

tgtggaagaa gtccagcacg ctgaccagca gccgcctagc caccggcgag gaggagggcg 120

<210> 32

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 32

gtggcagctc cagcaagcgc ttcctgcgct cttgctccgc ctcctgcgtt ccccatgggg 60

ccaaggacac ggagtggagg tcagtcacgc tgcctcggga cttgcagtcc acgggaagac 120

<210> 33

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 33

agtttgactc gtccacattt ggagggcaca aaagtgagaa gccggctctg cctcggaaga 60

gggcagggga gaacaggtct gaccaggtga cccgaggcac agtaacgcct ccccccaggc 120

<210> 34

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 34

tggtgaaaaa gaatgaggaa gctgctgatg aggtcttcaa agacatcatg gagtccagcc 60

cgggctccag cccgcccaac ctgactccaa aacccctccg gcggcaggtc accgtggccc 120

<210> 35

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 35

ctgcctcggg cctcccccac aaggaagaag ctggaaaggg cagtgcctta gggacccctg 60

ctgcagctga gccagtgacc cccaccagca aagcaggctc aggtgcacca gggggcacca 120

<210> 36

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 36

gcaagggccc cgccgaggag tccagagtga ggaggcacaa gcactcctct gagtcgccag 60

ggagggacaa ggggaaattg tccaggctca aacctgcccc gccgccccca ccagcagcct 120

<210> 37

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 37

aaaactacct ccctagagaa aggctagtcc cttttcttcc ccattcattt cattatgaac 60

atagtagaaa acagcatatt cttatcaaat ttgatgaaaa gcgccaacac gtttgaactg 120

<210> 38

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 38

aaatacgact tgtcatgtga actgtaccga atgtctacgt attccacttt tcctgctggg 60

gttcctgtct cagaaaggag tcttgctcgt gctggtttct attacactgg tgtgaatgac 120

<210> 39

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 39

aaggtcaaat gcttctgttg tggcctgatg ctggataact ggaaaagagg agacagtcct 60

actgaaaagc ataaaaagtt gtatcctagc tgcagattcg ttcagagtct aaattccgtt 120

<210> 40

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 40

aacaacttgg aagctacctc tcagcctact tttccttctt cagtaacaaa ttccacacac 60

tcattacttc cgggtacaga aaacagtgga tatttccgtg gctcttattc aaactctcca 120

<210> 41

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 41

tcaaatcctg taaactccag agcaaatcaa gatttttctg ccttgatgag aagttcctac 60

cactgtgcaa tgaataacga aaatgccaga ttacttactt ttcagacatg gccattgact 120

<210> 42

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 42

tttctgtcgc caacagatct ggcaaaagca ggcttttact acataggacc tggagacaga 60

gtggcttgct ttgcctgtgg tggaaaattg agcaattggg aaccgaagga taatgctatg 120

<210> 43

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 43

tcagaacacc tgagacattt tcccaaatgc ccatttatag aaaatcagct tcaagacact 60

tcaagataca cagtttctaa tctgagcatg cagacacatg cagcccgctt taaaacattc 120

<210> 44

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 44

tttaactggc cctctagtgt tctagttaat cctgagcagc ttgcaagtgc gggtttttat 60

tatgtgggta agaaactgaa tctgctaatt aaaaaaaata tatttcattt tatacatttt 120

<210> 45

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 45

ttaattttag gtaacagtga tgatgtcaaa tgcttttgct gtgatggtgg actcaggtgt 60

tgggaatctg gagatgatcc atgggttcaa catgccaagt ggtttccaag gtaattgttt 120

<210> 46

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 46

ttattttctt tacattttag gtgtgagtac ttgataagaa ttaaaggaca ggagttcatc 60

cgtcaagttc aagccagtta ccctcatcta cttgaacagg tagggcaagt tcttttttta 120

<210> 47

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 47

tatatatata tatatatata tttttttttt ctgcagctgc tatccacatc agacagccca 60

ggagatgaaa atgcagagtc atcaagtaag tacaatggat aataatgaat gcatttaaat 120

<210> 48

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 48

caatttttaa gaaatataag gctatcctaa tatgtgttaa attctttgtt ccatatagtt 60

atccattttg aacctggaga agaccattca gaagatgcaa tcatgatgaa tactcctgtg 120

<210> 49

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 49

attaatgctg ccgtggaaat gggctttagt agaagcctgg taaaacagac agttcagaga 60

aaaatcctag caactggaga gaattataga ctagtcaatg atcttgtgtt agacttactc 120

<210> 50

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 50

aatgcagaag atgaaataag ggaagaggag agagaaagag caactgagga aaaagaatca 60

agtatgtaga tttattaata cagtctattt tcataaggat ttgatatcag tctatatgtt 120

<210> 51

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 51

agtttgtgag cagagtttga acatgtttat gcttgttttc ttttttataa agatgattta 60

ttattaatcc ggaagaatag aatggcactt tttcaacatt tgacttgtgt aattccaatc 120

<210> 52

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 52

ctggatagtc tactaactgc cggaattatt aatgaacaag aacatgatgt tattaaacag 60

aagacacaga cgtctttaca agcaagagaa ctgattgata cgattttagt aaaaggaaat 120

<210> 53

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 53

attgcagcca ctgtattcag aaactctctg caagaagctg aagctgtgtt atatgagcat 60

ttatttggtg agtgatagaa aattattttt aaaaattttc taagtcaatt gaaaatacgc 120

<210> 54

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 54

ttatttgtca tagtaatgct ttttcttttt ctcccttagt gcaacaggac ataaaatata 60

ttcccacaga agatgtttca ggtaatagta ctaatatttt aaatcaatag agaacattgt 120

<210> 55

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 55

taaaaattct ttcctctttc tagatctacc agtggaagaa caattgcgga gactacaaga 60

agaaagaaca tgtaaagtgt gtatggacaa agaagtgtcc atagtgttta ttccttgtgg 120

<210> 56

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 56

tcatctagta gtatgcaaag attgtgctcc ttctttaaga aagtgtccta tttgtaggag 60

tacaatcaag ggtacagttc gtacatttct ttcatgaaga agaaccaaaa catcgtctaa 120

<210> 57

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 57

gcagcttaat acattctttt tagccgtgtt acttgtagtg tgtatgccct gctttcactc 60

agtgtgtaca gggaaacgca cctgattttt tacttattag tttgtttttt ctttaacctt 120

<210> 58

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 58

tgggaggctg tggagccggc gaaataaaat cagagttgtt gcttcccggc gtccctacct 60

cctcctctgg acaaagcgtt cactcccaac ctgaccgata acgcctgcca tctaaaagtc 120

<210> 59

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 59

tttaacttgc ttgctagtcg tggagatcca aagatctagc gtttgtaatc cagtaggatg 60

tggtggtaaa tggtacccct tcagtgtttc tcaagctgaa ggtccaggag tccccaggac 120

<210> 60

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 60

caccgtttcc tggcttgagc agcttgttgg aaccggaggg aggtttcagg gactgcttat 60

gaaccagata ccaggttggg tcttgacagt ctgcatccca aacaagctcc cctgaaacaa 120

<210> 61

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 61

gcccgttgta cactaaaatt ggagaacaac ccgattagaa gaatagactc cacagaagac 60

caagggcatc atcaatcggt aaaattttcc aaaagaggaa aaccaatgta agtctttttc 120

<210> 62

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 62

tcagcatcac agaggaagta gactgatatt aacaatactt actaataata acgtgcctca 60

tgaaataaag atccgaaagg aattggaata aaaatttcct gcatctcatg ccaaggggga 120

<210> 63

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 63

aacaccagaa tcaagtgttc cgcgtgattg aagacacccc ctcgtccaag aatgcaaagc 60

acatccaata aaatagctgg attataactc ctcttctttc tctgggggcc gtggggtggg 120

<210> 64

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 64

agctggggcg agaggtgccg ttggcccccg ttgcttttcc tctgggaagg atggcgcacg 60

ctgggagaac agggtacgat aaccgggaga tagtgatgaa gtacatccat tataagctgt 120

<210> 65

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 65

cgcagagggg ctacgagtgg gatgcgggag atgtgggcgc cgcgcccccg ggggccgccc 60

ccgcaccggg catcttctcc tcccagcccg ggcacacgcc ccatccagcc gcatcccggg 120

<210> 66

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 66

acccggtcgc caggacctcg ccgctgcaga ccccggctgc ccccggcgcc gccgcggggc 60

ctgcgctcag cccggtgcca cctgtggtcc acctgaccct ccgccaggcc ggcgacgact 120

<210> 67

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 67

tctcccgccg ctaccgccgc gacttcgccg agatgtccag ccagctgcac ctgacgccct 60

tcaccgcgcg gggacgcttt gccacggtgg tggaggagct cttcagggac ggggtgaact 120

<210> 68

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 68

gggggaggat tgtggccttc tttgagttcg gtggggtcat gtgtgtggag agcgtcaacc 60

gggagatgtc gcccctggtg gacaacatcg ccctgtggat gactgagtac ctgaaccggc 120

<210> 69

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 69

acctgcacac ctggatccag gataacggag gctgggtagg tgcacttggt gatgtgagtc 60

tgggctgagg ccacaggtcc gagatgcggg ggttggagtg cgggtgggct cctggggcaa 120

<210> 70

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 70

ccatccccct cagtttaatt tggatacatt tggcccagaa cagcacagtg tttccataat 60

aacatttgaa caggatgccc ttgtgttatt tgcagggcta agggagtttc agcatgggcc 120

<210> 71

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 71

aggaaactac tttcttaaaa gaaacttaaa cgcgaaattc tgacaagata ggaaactctt 60

actgcatcct tactaaacct ctttttcccc cctactttct catttattta tatatctctt 120

<210> 72

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 72

gtgttatgaa acatatatag gttgaatatt taactcactc tgaattcatg tgcagaataa 60

gtcactcttc agaaggacaa aaataatgtt ttaagtggtt tgtttaataa agcacatatt 120

<210> 73

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 73

aaaaaatttc aattcaacat cttccctggg cacaacatgt tatgactttt tagagtagag 60

cttcgtggta tttcataagg aagccaaaaa ggaagggaaa ttattattcg ggcagaggga 120

<210> 74

<211> 119

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 74

caatagtgac ctttcattaa gcaagacaga gttcaccatc aggctcccca aaccccaggc 60

tctgtgttag ttgaactgaa caagccacca actatttcct ctctctcttt ctctctttc 119

<210> 75

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 75

actaacagga ttttggcctc ttttttcaag tgaagacaaa atggcctcgc cggctgacag 60

ctgtatccag ttcacccgcc atgccagtga tgttcttctc aaccttaatc gtctccggag 120

<210> 76

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 76

tcgagacatc ttgactgatg ttgtcattgt tgtgagccgt gagcagttta gagcccataa 60

aacggtcctc atggcctgca ggtgagggat ctgaaaggaa agggtgggta agtcaaagtg 120

<210> 77

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 77

gttttacagt ggcctgttct atagcatctt tacagaccag ttgaaatgca accttagtgt 60

gatcaatcta gatcctgaga tcaaccctga gggattctgc atcctcctgg acttcatgta 120

<210> 78

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 78

cacatctcgg ctcaatttgc gggagggcaa catcatggct gtgatggcca cggctatgta 60

cctgcagatg gagcatgttg tggacacttg ccggaagttt attaaggcca ggtgagttgc 120

<210> 79

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 79

tatttaacag ttctgatttg gggccggtgt ctttcctctt tttttctttc acagtgaagc 60

agagatggtt tctgccatca agcctcctcg tgaagagttc ctcaacagcc ggatgctgat 120

<210> 80

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 80

gccccaagac atcatggcct atcggggtcg tgaggtggtg gagaacaacc tgccactgag 60

gagcgcccct gggtgtgaga gcagagcctt tgcccccagc ctgtacagtg gcctgtccac 120

<210> 81

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 81

accgccagcc tcttattcca tgtacagcca cctccctgtc agcagcctcc tcttctccga 60

tgaggagttt cgggatgtcc ggatgcctgt ggccaacccc ttccccaagg agcgggcact 120

<210> 82

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 82

cccatgtgat agtgccaggc cagtccctgg tgagtacagc cggccgactt tggaggtgtc 60

ccccaatgtg tgccacagca atatctattc acccaaggaa acaatcccag aagaggcacg 120

<210> 83

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 83

aagtgatatg cactacagtg tggctgaggg cctcaaacct gctgccccct cagcccgaaa 60

tgccccctac ttcccttgtg acaaggccag caaagaagaa gagagaccct cctcggaaga 120

<210> 84

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 84

tgagattgcc ctgcatttcg agccccccaa tgcacccctg aaccggaagg gtctggttag 60

tccacagagc ccccagaaat ctgactgcca gcccaactcg cccacagagt cctgcagcag 120

<210> 85

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 85

taagaatgcc tgcatcctcc aggcttctgg ctcccctcca gccaagagcc ccactgaccc 60

caaagcctgc aactggaaga aatacaagtt catcgtgctc aacagcctca accagaatgc 120

<210> 86

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 86

caaaccagag gggcctgagc aggctgagct gggccgcctt tccccacgag cctacacggc 60

cccacctgcc tgccagccac ccatggagcc tgagaacctt gacctccagt ccccaaccaa 120

<210> 87

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 87

gctgagtgcc agcggggagg actccaccat cccacaagcc agccggctca ataacatcgt 60

taacaggtga tttcagagac tgtctgggtc tgaggtcagg ggttacctgg gcagggttcc 120

<210> 88

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 88

ctgaggctgt ttttactcct gtccataggt ccatgacggg ctctccccgc agcagcagcg 60

agagccactc accactctac atgcaccccc cgaagtgcac gtcctgcggc tctcagtccc 120

<210> 89

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 89

cacagcatgc agagatgtgc ctccacaccg ctggccccac gttccctgag gagatgggag 60

agacccagtc tgagtactca gattctagct gtggtgagtc cttttccctc cctcctcttg 120

<210> 90

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 90

tgctgacttt ggtgtccccc taccaccctc caacagagaa cggggccttc ttctgcaatg 60

agtgtgactg ccgcttctct gaggaggcct cactcaagag gcacacgctg cagacccaca 120

<210> 91

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 91

gtgacaaacc ctacaagtgt gaccgctgcc aggcctcctt ccgctacaag ggcaacctcg 60

ccagccacaa gaccgtccat accggtatgg ccctgcccca cacgacccga actctccaca 120

<210> 92

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 92

agagaccttc cttattgaat atggcttttc tttttccctt tttcttggta ataggtgaga 60

aaccctatcg ttgcaacatc tgtggggccc agttcaaccg gccagccaac ctgaaaaccc 120

<210> 93

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 93

acactcgaat tcactctgga gagaagccct acaaatgcga aacctgcgga gccagatttg 60

tacaggtgag cagagtgggc aggcgagcgg agcgggcagg cgagcggagc gggcaggcga 120

<210> 94

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 94

gaggcctgca gcccacccca gaagacctct catgccttct tcttcgttca ggtggcccac 60

ctccgtgccc atgtgcttat ccacactggt gagaagccct atccctgtga aatctgtggc 120

<210> 95

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 95

acccgtttcc ggcaccttca gactctgaag agccacctgc gaatccacac aggagagaaa 60

ccttaccatg tacgtaagcc tcttgaggcc gctctctgac ctgcggggat gtggagggca 120

<210> 96

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 96

tttcttgggt tgatgacagc taacagtttg cctctgatat ccctgcagtg tgagaagtgt 60

aacctgcatt tccgtcacaa aagccagctg cgacttcact tgcgccagaa gcatggcgcc 120

<210> 97

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 97

atcaccaaca ccaaggtgca ataccgcgtg tcagccactg acctgcctcc ggagctcccc 60

aaagcctgct gaagcatgga gtgttgatgc tttcgtctcc agccccttct cagaatctac 120

<210> 98

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 98

caggtaaggc cggccgcgcc atggtggacc cggtgggctt cgcggaggcg tggaaggcgc 60

agttcccgga ctcagagccc ccgcgcatgg agctgcgctc agtgggcgac atcgagcagg 120

<210> 99

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 99

ccccaagccc caccacctac cgcatgttcc gggacaaaag ccgctctccc tcgcagaact 60

cgcaacagtc cttcgacagc agcagtcccc ccacgccgca gtgccataag cggcaccggc 120

<210> 100

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 100

actgcccggt tgtcgtgtcc gaggccacca tcgtgggcgt ccgcaagacc gggcagatct 60

ggcccaacga tggcgagggc gccttccatg gagacgcagg tgagttcctc acgccacgtg 120

<210> 101

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 101

agctggagcg ctgcaaggcc tccattcggc gcctggagca ggaggtgaac caggagcgct 60

tccgcatgat ctacctgcag acgttgctgg ccaaggaaaa gaagagctat gaccggcagc 120

<210> 102

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 102

gatggggctt ccggcgcgcg gcgcaggccc ccgacggcgc ctccgagccc cgagcgtccg 60

cgtcgcgccc gcagccagcg cccgccgacg gagccgaccc gccgcccgcc gaggagcccg 120

<210> 103

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 103

aggcccggcc cgacggcgag ggttctccgg gtaaggccag gcccgggacc gcccgcaggc 60

ccggggcagc cgcgtcgggg gaacgggacg accggggacc ccccgccagc gtggcggcgc 120

<210> 104

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 104

tcaggtccaa cttcgagcgg atccgcaagg gccatggcca gcccggggcg gacgccgaga 60

agcccttcta cgtgaacgtc gagtttcacc acgagcgcgg cctggtgaag gtcaacgaca 120

<210> 105

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 105

aagaggtgtc ggaccgcatc agctccctgg gcagccaggc catgcagatg gagcgcaaaa 60

agtcccagca cggcgcgggc tcgagcgtgg gggatgcatc caggccccct taccggggac 120

<210> 106

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 106

gctcctcgga gagcagctgc ggcgtcgacg gcgactacga ggacgccgag ttgaaccccc 60

gcttcctgaa ggacaacctg atcgacgcca atggcggtag caggccccct tggccgcccc 120

<210> 107

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 107

tggagtacca gccctaccag agcatctacg tcgggggcat gatggaaggg gagggcaagg 60

gcccgctcct gcgcagccag agcacctctg agcaggagaa gcgccttacc tggccccgca 120

<210> 108

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 108

ggtcctactc cccccggagt tttgaggatt gcggaggcgg ctataccccg gactgcagct 60

ccaatgagaa cctcacctcc agcgaggagg acttctcctc tggccagtcc agccgcgtgt 120

<210> 109

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 109

taacacagga tgcttctttg cacacacaga tggctcgttc ggaacaccac ctggatacgg 60

ctgcgctgca gaccgggcag aggagcagcg ccggcaccaa gatgggctgc cctacattga 120

<210> 110

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 110

tgactcgccc tcctcatcgc cccacctcag cagcaagggc aggggcagcc gggatgcgct 60

ggtctcggga gccctggagt ccactaaagc ggtgagtccc catggtgtac gtgtggcagg 120

<210> 111

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 111

tcctgcagag tgagctggac ttggaaaagg gcttggagat gagaaaatgg gtcctgtcgg 60

gaatcctggc tagcgaggag acttacctga gccacctgga ggcactgctg ctggtgagga 120

<210> 112

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 112

tgctacctca cttgtgccct cttccagccc atgaagcctt tgaaagccgc tgccaccacc 60

tctcagccgg tgctgacgag tcagcagatc gagaccatct tcttcaaagt gcctgagctc 120

<210> 113

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 113

tacgagatcc acaaggagtt ctatgatggg ctcttccccc gcgtgcagca gtggagccac 60

cagcagcggg tgggcgacct cttccagaag ctggtgagta acccagggcc ggtgctggga 120

<210> 114

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 114

cctcaggcca gccagctggg tgtgtaccgg gccttcgtgg acaactacgg agttgccatg 60

gaaatggctg agaagtgctg tcaggccaat gctcagtttg cagaaatctc cgaggtaatg 120

<210> 115

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 115

ctgtgtgaac atgcgctttt ctctctgcag aacctgagag ccagaagcaa caaagatgcc 60

aaggatccaa cgaccaagaa ctctctggaa agtgagttct gcatgctgag gtctctgtgt 120

<210> 116

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 116

tgcaacctct ctcacctccc ctctctctcc acagctctgc tctacaagcc tgtggaccgt 60

gtgacgagga gcacgctggt cctccatgta agtcacagcg cccctctgga ccgggaccaa 120

<210> 117

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 117

aggtgccagt gctcctctgt gtctaactca agtctttctt cctggggcag gacttgctga 60

agcacactcc tgccagccac cctgaccacc ccttgctgca ggacgccctc cgcatctcac 120

<210> 118

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 118

agaacttcct gtccagcatc aatgaggaga tcacaccccg acggcagtcc atgacggtga 60

agaagggaga ggtgagtgtg gcaggggatg gcttgggtcc acccatcctg ctgagctggg 120

<210> 119

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 119

aacacccccc acccatcacc ccaggctggc cctgacccca gccttccctg tgcctgcagc 60

accggcagct gctgaaggac agcttcatgg tggagctggt ggagggggcc cgcaagctgc 120

<210> 120

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 120

gccacgtctt cctgttcacc gacctgcttc tctgcaccaa gctcaagaag cagagcggag 60

ggtgagtgac gatgtggccc ctgtcccagc agtgacccca ccctgactct ccaggtcatg 120

<210> 121

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 121

cggtgcatgt gaacgttctt ctctccccat ccccagcaaa acgcagcagt atgactgcaa 60

atggtacatt ccgctcacgg atctcagctt ccagatggtg gatgaactgg aggcagtgcc 120

<210> 122

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 122

caacatcccc ctggtgcccg atgaggagct ggacgctttg aagatcaaga tctcccagat 60

caagaatgac atccagagag agaaggtgca caccagggga gcaagggccg ggtttggtgt 120

<210> 123

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 123

tgggagtggg ttgtgtggag cgctggaatg ggaaggtgag gctgtggcat ctccccacag 60

agggcgaaca agggcagcaa ggctacggag aggctgaaga agaagctgtc ggagcaggag 120

<210> 124

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 124

tcactgctgc tgcttatgtc tcccagcatg gccttcaggg tgcacagccg caacggcaag 60

gtgagcgcct gctgttccgg cccctcctgc tctcctggcc tgggatgggc tcctggttgc 120

<210> 125

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 125

gtgttcttct tgcccaccct agagttacac gttcctgatc tcctctgact atgagcgtgc 60

agagtggagg gagaacatcc gggagcagca gaagaagtgt gagtatcctc tgtcctgaga 120

<210> 126

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 126

cctcccaggt ttcagaagct tctccctgac atccgtggag ctgcagatgc tgaccaactc 60

gtgtgtgaaa ctccagactg tccacagcat tccgctgacc atcaataagg aaggtgggcc 120

<210> 127

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 127

acctctttga tctcttgcgc agatgatgag tctccggggc tctatgggtt tctgaatgtc 60

atcgtccact cagccactgg atttaagcag agttcaagta agtactggtt tggggaggag 120

<210> 128

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 128

tctccccaca gatctgtact gcaccctgga ggtggattcc tttgggtatt ttgtgaataa 60

agcaaagacg cgcgtctaca gggacacagc tgagccaaac tggaacgagg tgaggaactg 120

<210> 129

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 129

ataacattga cccgtttgtt cacactggac ttcccttctc ccttggggct gcaggaattt 60

gagatagagc tggagggctc ccagaccctg aggatactgt gctatgaaaa gtgttacaac 120

<210> 130

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 130

aagacgaaga tccccaagga ggacggcgag agcacggaca gactcatggg gaagggccag 60

gtccaggtga ggcagccatc cctaccctcc cctgcccgat gcatggcgtc ctttttcatg 120

<210> 131

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 131

cctctgccaa tcatgactcc ttcctttcag ctggacccgc aggccctgca ggacagagac 60

tggcagcgca ccgtcatcgc catgaatggg gtacgtgtcc gtgggactct cctggtgccc 120

<210> 132

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 132

tgtagatcga agtaaagctc tcggtcaagt tcaacagcag ggagttcagc ttgaagagga 60

tgccgtcccg aaaacagaca ggggtcttcg gagtcaagat tgctgtggtc accaagtgag 120

<210> 133

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 133

ctcccgcagg agagagaggt ccaaggtgcc ctacatcgtg cgccagtgcg tggaggagat 60

cgagcgccga ggcatggagg aggtgggcat ctaccgcgtg tccggtgtgg ccacggacat 120

<210> 134

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 134

ccaggcactg aaggcagcct tcgacgtcag tgagtgttgg cctgcgcagg acgggatgga 60

ggtgtgggca atggtgtccg cgatgagatc tcagagtgct ccatggccca ggcatgtcac 120

<210> 135

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 135

agactcactc gggatcctca aggaggccgc tgcatttccg tgctctttcc agataacaag 60

gacgtgtcgg tgatgatgag cgagatggac gtgaacgcca tcgcaggcac gctgaagctg 120

<210> 136

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 136

tacttccgtg agctgcccga gcccctcttc actgacgagt tctaccccaa cttcgcagag 60

ggcatcggtg agcactggag gccttggcct catgggagac gtctcctcca cgtgcactgc 120

<210> 137

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 137

tctgcagctc tttcagaccc ggttgcaaag gagagctgca tgctcaacct gctgctgtcc 60

ctgccggagg ccaacctgct caccttcctt ttccttctgg accacctgaa aaggtagccc 120

<210> 138

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 138

ggcgttgaaa cagcacccgc tgctttggtc ctctacaggg tggcagagaa ggaggcagtc 60

aataagatgt ccctgcacaa cctcgccacg gtctttggcc ccacgctgct ccggccctcc 120

<210> 139

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 139

gagaaggaga gcaagctccc tgccaacccc agccagccta tcaccatgac tgacagctgg 60

tccttggagg tcatgtccca ggtatgggaa gacaggctcc agcccatgca accctgacct 120

<210> 140

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 140

actctgcccg ggcaggtcca ggtgctgctg tacttcctgc agctggaggc catccctgcc 60

ccggacagca agagacagag catcctgttc tccaccgaag tctaaaggtc ccagtccatc 120

<210> 141

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 141

tgcccaggaa gagccccagc catggaacac cagctcctgt gctgcgaagt ggaaaccatc 60

cgccgcgcgt accccgatgc caacctcctc aacgaccggg tgctgcgggc catgctgaag 120

<210> 142

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 142

gcggaggaga cctgcgcgcc ctcggtgtcc tacttcaaat gtgtgcagaa ggaggtcctg 60

ccgtccatgc ggaagatcgt cgccacctgg atgctggagg tgcggggctt cgggcggctc 120

<210> 143

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 143

gtgcctccgt aggtctgcga ggaacagaag tgcgaggagg aggtcttccc gctggccatg 60

aactacctgg accgcttcct gtcgctggag cccgtgaaaa agagccgcct gcagctgctg 120

<210> 144

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 144

ggggccactt gcatgttcgt ggcctctaag atgaaggaga ccatccccct gacggccgag 60

aagctgtgca tctacaccga caactccatc cggcccgagg agctgctggt aaccactgga 120

<210> 145

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 145

cccgcacctc ccctgatggc cgctcaccct gtgttcgcag caaatggagc tgctcctggt 60

gaacaagctc aagtggaacc tggccgcaat gaccccgcac gatttcattg aacacttcct 120

<210> 146

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 146

ctccaaaatg ccagaggcgg aggagaacaa acagatcatc cgcaaacacg cgcagacctt 60

cgttgccctc tgtgccacag gtagggcagg cccggcagcc cccggcctcc ccttgagagc 120

<210> 147

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 147

agggtcccct gctcacagcc tccttccctc tctccttctg cctcagatgt gaagttcatt 60

tccaatccgc cctccatggt ggcagcgggg agcgtggtgg ccgcagtgca aggcctgaac 120

<210> 148

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 148

ctgaggagcc ccaacaactt cctgtcctac taccgcctca cacgcttcct ctccagagtg 60

atcaagtgtg acccggtaag tgagggtgat gtcccaggca gccttgccgg ggcttacagg 120

<210> 149

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 149

ccccctcttc ccacctctcc ccaccctctc tctctcagga ctgcctccgg gcctgccagg 60

agcagatcga agccctgctg gagtcaagcc tgcgccaggc ccagcagaac atggacccca 120

<210> 150

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 150

aggccgccga ggaggaggaa gaggaggagg aggaggtgga cctggcttgc acacccaccg 60

acgtgcggga cgtggacatc tgagggcgcc aggcaggcgg gcgccaccgc cacccgcagc 120

<210> 151

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 151

cttgtctcct cagaactcct tctccaatcc tggagcaggc ttccatgctg ctgtgggcgt 60

ccttgctggc ctttggtaag tgatggggag gagacctttg cttgctgcaa agctgagcct 120

<210> 152

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 152

gttcgggact cttcgcctac gctgatggct ggctctttac tctctttcag ctccagtctg 60

tggacaatct ggtaagtcct tattttcttt gctcctttat gtctctagat accctaataa 120

<210> 153

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 153

agctgggact gcaggcacct ccacctcaga cctattactc tttcctcctc agcagctgca 60

cacaaacctg tgatttccgt ccatcctcca tggaccacat tcttcaaagg agagagagtg 120

<210> 154

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 154

actctgactt gcaatggatt tcagttctat gcaacagaga aaacaacatg gtatcatcgg 60

cactactggg gagaaaagtt gaccctgacc ccaggaaaca ccctcgaggt tcgggaatct 120

<210> 155

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 155

ggactgtaca gatgccaggc ccggggctcc ccacgaagta accctgtgcg cttgctcttt 60

tcttcaggtg agaaagaagg tgaattagtt gaaactttat aaatggtatc agtttatctt 120

<210> 156

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 156

ggagatagca ggaatgcttt gaatgacgat ctcctctctg tgtcttttcc agactcctta 60

atcctgcagg caccatattc tgtgtttgaa ggtgacacat tggttctgag atgccacaga 120

<210> 157

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 157

agaaggaaag agaaattgac tgctgtgaaa tatacttgga atggaaacat tctttccatt 60

tctaataaaa gctgggatct tcttatccca caagcaagtt caaataacaa tggcaattat 120

<210> 158

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 158

cgatgcattg gatatggaga cgagaatgat gtatttagat caaatttcaa aataattaaa 60

attcaaggtg aatctttcag ttcatataga tttgcttagt aatgacaggg ataggaaact 120

<210> 159

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 159

ctctcgtgct cagaacttga cttacctctt ctctctagaa ctatttccac atccagagct 60

gaaagctaca gactctcagc ctacagaggg gaattctgta aacctgagct gtgaaacaca 120

<210> 160

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 160

gcttcctcca gagcggtcag acaccccact tcacttcaac ttcttcagag atggcgaggt 60

catcctgtca gactggagca cgtacccgga actccagctc ccaaccgtct ggagagaaaa 120

<210> 161

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 161

ctcaggatcc tattggtgtg gtgctgaaac agtgaggggt aacatccaca agcacagtcc 60

ctcgctacag atccatgtgc agcgtgagtg ttggagagcc aggcatcttc cctgcctctc 120

<210> 162

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 162

cacccgaccc ccacctgtgg tctcattttc acatagggat ccctgtgtct ggggtgctcc 60

tggagaccca gccctcaggg ggccaggctg ttgaagggga gatgctggtc cttgtctgct 120

<210> 163

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 163

ccgtggctga aggcacaggg gataccacat tctcctggca ccgagaggac atgcaggaga 60

gtctggggag gaaaactcag cgttccctga gagcagagct ggagctccct gccatcagac 120

<210> 164

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 164

agagccatgc agggggatac tactgtacag cagacaacag ctacggccct gtccagagca 60

tggtgctgaa tgtcactgtg agaggtgagt tttaatctct attgacctta tttattctca 120

<210> 165

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 165

tagagacccc aggcaacaga gatggccttg tcgccgcggg agccactgga gggctgctca 60

gtgctcttct cctggctgtg gccctgctgt ttcactgctg gcgtcggagg aagtcaggtt 120

<210> 166

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 166

agagctccct ctgctgacaa aaatgcgtct ttgctttatt ttgcaggagt tggtttcttg 60

ggagacgaaa ccaggtgaga cctcagtttc tgccattcct ttttagtttc ccgagtacac 120

<210> 167

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 167

tgtttctgtg tctcacaggc tccctcccgc tccaggccca ggagagtcct cccattccat 60

ctgccctgcc caggtggagc ttcagtcgtt gtatgttgat ggtgaggatt cccttctagg 120

<210> 168

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 168

gccttgaaaa tgtcttttct ttccagtaca ccccaaaaag ggagatttgg tatactctga 60

gatccagact actcagctgg gagaagaaga ggaaggtacg tctttgggaa gagattctgg 120

<210> 169

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 169

gcatcattat gcccatagtc cagtgattct ctttctgtcc acagctaata cctccaggac 60

acttctagag gataaggtga gtttcatttc cccacagttt tatctccacc attacctgca 120

<210> 170

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 170

ctttcttcca tttcaggatg tctcagttgt ctactctgag gtaaagacac aacacccaga 60

taactcagct ggaaagatca gctctaagga tgaagaaagt taagagaatg aaaagttacg 120

<210> 171

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 171

gtcgccggcg agggccatgt cgctgttggg ggacccgcta caggccctgc cgccctcggc 60

cgcccccacg gggccgctgc tcgcccctcc ggccggcgcg accctcaacc gcctgcggga 120

<210> 172

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 172

gccgctgctg cggaggctca gcgagctcct ggatcaggcg cccgagggcc ggggctggag 60

gagactggcg gagctggcgg ggagtcgcgg gcgcctccgc ctcaggtgag ctcagggccg 120

<210> 173

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 173

aaagctgttg acttgaattc tttctgttgc tttcagttgc ctagacctgg agcagtgttc 60

tcttaaggta ctggagcctg aaggaagccc cagcctgtgt ctgctgaagt taatgggtga 120

<210> 174

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 174

aaaaggttgc acagtcacag aattgagtga tttcctgcag gctatggaac acactgaagt 60

tcttcagctt ctcagccccc caggtaggtt ttgttcttag gattattctc caggagttca 120

<210> 175

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 175

taaacaagga aaatccctct tgtgacttta attttttttt tttttttttt tttttttagg 60

aataaagatt actgtaaacc cagagtcaaa ggcagtcttg gctggacagt ttgtgaaact 120

<210> 176

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 176

gtgttgccgg gcaactggac atccttttgt tcaatatcag tggttcaaaa tgaataaaga 60

ggtaattttt taaatatatc ttttaattct tccaaggaga gagaatgata gagaattaat 120

<210> 177

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 177

tgtttttgat gagtcatcca cttctcttat tgattctttc acagattcca aatggaaata 60

catcagagct tatttttaat gcagtgcatg taaaagatgc aggcttttat gtctgtcgag 120

<210> 178

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 178

ttaataacaa tttcaccttt gaattcagcc agtggtcaca gctggatgtt tgcgacatcc 60

cagagagctt ccagagtaag taacgaaaga agctgaatgt tgggatgggg attccccata 120

<210> 179

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 179

tttatttttt cttttaattt aaggaagtgt tgatggcgtc tctgaatcca agttgcaaat 60

ctgtgttgaa ccaacttccc aaaagctgat gccaggcagc acattggttt tacagtgtgt 120

<210> 180

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 180

tgctgttgga agccctattc ctcactacca gtggttcaaa aatgaattac cattaacaca 60

tgagaccaaa aagctataca tggtaggaag ttgattttgg ggtcttttgg gggagttaac 120

<210> 181

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 181

atattgatat aggtgcctta tgtggatttg gaacaccaag gaacctactg gtgtcatgta 60

tataatgatc gagacagtca agatagcaag aaggtagaaa tcatcatagg taagaagtat 120

<210> 182

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 182

atcatgaatt acaatatatt caaatttgtt ttttctgaaa caaggaagaa cagatgaggc 60

agtggagtgc actgaaggta gtgtaagtct ttggtttgaa accaaatctc ctgcatgcta 120

<210> 183

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 183

attggtgttt agattactta atctattttc tcttactttg ttttagatga attaaataat 60

cttggtcatc ctggtgagta atacaaacat aaaactttag ttttagattt ttaagttgtt 120

<210> 184

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 184

tataccatgg atcttacatg ttttgctttt ttatctttgt atagataata aagagcaaac 60

aactgaccag cctttgggtg agtagaactt taaaatgcat tatcaaagta taattattgt 120

<210> 185

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 185

tttctttttt tttcaaagcg aaggacaagg ttgccctttt gataggaaat atgaattacc 60

gggagcaccc caagctcaaa gctcctttgg tggatgtgta cgaattgact aacttactga 120

<210> 186

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 186

gacagctgga cttcaaagtg gtttcactgt tggatcttac tgaatatgag atgcgtaatg 60

ctgtggatga gtttttactc cttttagaca agggagtata tggtaagata tttataatgt 120

<210> 187

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 187

tctatctctc tcttattttt cctcttttca gggttattat attatgcagg acatggttat 60

gaaaattttg ggaacagctt catggtcccc gttgatgctc caaatccata taggtctgaa 120

<210> 188

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 188

aattgtctgt gtgtacaaaa tatactgaaa ttgatgcaag aaaaagaaac tggacttaat 60

gtgttcttat tggatatgtg taggaaaagg taagttttct aatctttatt aaagaattgt 120

<210> 189

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 189

gactttaata atcactatag ttattccctc aggaattaac aaaaccaaca cccatggagt 60

tgggatctct gctcactagt cagtcctggt cttccagaca tggaatgagt agccgaagca 120

<210> 190

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 190

gatgtttgga ggtttggatc ccatttgtct gccattgcct ttctaaggag tagaaccaat 60

gactgttcct ctagatttac tatttttttg cttgctcagc atttaccaat caaaatccaa 120

<210> 191

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 191

ctcctccgcc tcccttaaat agaaatgact acgatgatac cattccaatc ttggatgcac 60

taaaagtcac cgccaatatt gtgtttggat atgccacgta agaacatttg atgtttacgt 120

<210> 192

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 192

gcctttctgt gcctggctta acttcttttt ctatttttaa ggtgtcaagg agcagaagct 60

tttgaaatcc agcattctgg attggcaaat ggaatcttta tgaaattttt aaaagacaga 120

<210> 193

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 193

ttattagaag ataagaaaat cactgtgtta ctggatgaag ttgcagaagg taaaataaaa 60

aataaagaga aaagtactca gaaaaaggag agcaggggag acacacctat tcagggttcc 120

<210> 194

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 194

agaattggtg gtcttaaaaa taatatttat tttcatatct tttagatatg ggtaagtgtc 60

accttaccaa aggcaaacag gctctagaga ttcgaagtag tttatctgag aagagagcac 120

<210> 195

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 195

ttactgatcc aatacaggga acagaatatt ctgctgaatc tcttgtgcgg aatctacagt 60

gggccaaggc tcatggtacg gtaaagccca ttttttgtta gatctacaat atacttaacg 120

<210> 196

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 196

tcagaaaacc taccaaagtt gttcttattg ttctttttca gaacttccag aaagtatgtg 60

tcttaagttt gactgtggtg ttcagattca attaggattt gcagctgagt tttccaatgt 120

<210> 197

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 197

catgatcatc tatacaagta tagtttacaa accaccggag ataataatgt gtgatgccta 60

cgttactgat tttccacttg tgagtctctt cttttattta aaatacagtg atatattctc 120

<210> 198

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 198

tatattgtgg ctttcattga tttcattatt aacagtccct aatttttttt tttacaggat 60

ctagatattg atccaaaaga tgcaaataaa ggcacacctg aagaaactgg cagctacttg 120

<210> 199

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 199

gtatcaaagg atcttcccaa gcattgcctc tataccagac tcagttcact gcaaaaatta 60

aaggttacta ccttttctgt ttatagctac taatggaaaa ctttatgaaa ctggaaactt 120

<210> 200

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 200

ccagattttt ttccttttca ggaacatcta gtcttcacag tatgtttatc atatcagtac 60

tcaggattgg aagatactgt agaggacaag caggaagtga atgttgggaa acctctcatt 120

<210> 201

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 201

gctaaattag acatgcatcg aggtttggga aggaagactt gctttcaaac ttgtcttatg 60

tctaatggtc cttaccagag ttctgcagcc acctcaggag gagcagggca ttatcactca 120

<210> 202

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 202

ttgcaagacc cattccatgg tgtttaccat tcacatcctg gtaatccaag taatgttaca 60

ccagcagata gctgtcattg cagccggact ccagatgcat ttatttcaag tttcgctcac 120

<210> 203

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 203

catgcttcat gtcattttag tagaagtaat gtgccagtag agacaactga tgaaatacca 60

tttagtttct ctgacaggct cagaatttct gaaaaatgac ctccttgttt ttgaaagtta 120

<210> 204

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 204

caggacccgc ttctctgaaa ggctctcctt gcagctgctt agacgctgga tttttttcgg 60

gtagtggaaa accaggtaag caccgaagtc cacttgcctt ttaatttatt tttttatcac 120

<210> 205

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 205

aagactgcct cccgctttgt gtgccccgct ccagcagcct cccgcgacga tgcccctcaa 60

cgttagcttc accaacagga actatgacct cgactacgac tcggtgcagc cgtatttcta 120

<210> 206

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 206

ctgcgacgag gaggagaact tctaccagca gcagcagcag agcgagctgc agcccccggc 60

gcccagcgag gatatctgga agaaattcga gctgctgccc accccgcccc tgtcccctag 120

<210> 207

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 207

ccgccgctcc gggctctgct cgccctccta cgttgcggtc acacccttct cccttcgggg 60

agacaacgac ggcggtggcg ggagcttctc cacggccgac cagctggaga tggtgaccga 120

<210> 208

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 208

gctgctggga ggagacatgg tgaaccagag tttcatctgc gacccggacg acgagacctt 60

catcaaaaac atcatcatcc aggactgtat gtggagcggc ttctcggccg ccgccaagct 120

<210> 209

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 209

cgtctcagag aagctggcct cctaccaggc tgcgcgcaaa gacagcggca gcccgaaccc 60

cgcccgcggc cacagcgtct gctccacctc cagcttgtac ctgcaggatc tgagcgccgc 120

<210> 210

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 210

cgcctcagag tgcatcgacc cctcggtggt cttcccctac cctctcaacg acagcagctc 60

gcccaagtcc tgcgcctcgc aagactccag cgccttctct ccgtcctcgg attctctgct 120

<210> 211

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 211

ctcctcgacg gagtcctccc cgcagggcag ccccgagccc ctggtgctcc atgaggagac 60

accgcccacc accagcagcg actctggtaa gcgaagcccg cccaggcctg tcaaaagtgg 120

<210> 212

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 212

ctatttcctt tcttaaagag gaggaacaag aagatgagga agaaatcgat gttgtttctg 60

tggaaaagag gcaggctcct ggcaaaaggt cagagtctgg atcaccttct gctggaggcc 120

<210> 213

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 213

acagcaaacc tcctcacagc ccactggtcc tcaagaggtg ccacgtctcc acacatcagc 60

acaactacgc agcgcctccc tccactcgga aggactatcc tgctgccaag agggtcaagt 120

<210> 214

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 214

tggacagtgt cagagtcctg agacagatca gcaacaaccg aaaatgcacc agccccaggt 60

cctcggacac cgaggagaat gtcaagaggc gaacacacaa cgtcttggag cgccagagga 120

<210> 215

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 215

ggaacgagct aaaacggagc ttttttgccc tgcgtgacca gatcccggag ttggaaaaca 60

atgaaaaggc ccccaaggta gttatcctta aaaaagccac agcatacatc ctgtccgtcc 120

<210> 216

<211> 120

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 216

aagcagagga gcaaaagctc atttctgaag aggacttgtt gcggaaacga cgagaacagt 60

tgaaacacaa acttgaacag ctacggaact cttgtgcgta aggaaaagta aggaaaacga 120

Claims (10)

1.一种DNA探针池，其特征在于，所述DNA探针池中的每个探针包括：

5'末端生物素化标记和与淋巴瘤相关基因特异性结合的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的DNA探针池，其特征在于，所述淋巴瘤相关基因包括FCRL4、IGH、BCL6、CCND1、BIRC3、MALT1、BCL2、MYC、BCR或ABL1中的任意一种或两种以上的组合；

优选地，所述淋巴瘤相关基因产生的基因重排包括FCRL4/IGH，IGH/BCL6，IGH/CCND1，BIRC3/MALT1，IGH/BCL2，IGH/MYC或BCR/ABL1中的任意一种或两种以上的组合。

3.根据权利要求1或2所述的DNA探针池，其特征在于，所述DNA探针池中共有200～230条寡核苷酸探针；

优选地，所述DNA探针池中每个所述寡核苷酸探针的浓度均为3-10pmole/μL；

优选地，所述寡核苷酸探针的GC含量为30-70％；

优选地，所述寡核苷酸探针的序列长度为110～130bp。

4.根据权利要求1-3任一项所述的DNA探针池，其特征在于，所述DNA探针池包含216条寡核苷酸探针，所述216条寡核苷酸探针的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1～SEQ IDNO.216所示。

5.一种如权利要求1-4任一项所述的DNA探针池的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

(1)选择淋巴瘤相关基因的外显子和UTR区域；

(2)获取所述淋巴瘤相关基因的不同转录本，通过位置信息均映射到HG19人类标准参考基因组上，选取能够覆盖所有转录本的序列；

(3)避开突变位点、SNP位点或插入缺失位点；

(4)外显子部分向3'和5'端的内含子中各沿伸15-20bp得到所述寡核苷酸探针的核苷酸序列，合成得到所述探针池。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述突变位点包括RefSeq、Ensembl、dbSNP或ExAC数据库中亚洲人群的高频突变位点。

7.如权利要求1-4任一项所述的DNA探针池在制备淋巴瘤检测试剂盒中的应用。

8.一种淋巴瘤检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1-4任一项所述的DNA探针池。

9.根据权利要求7所述的淋巴瘤检测试剂盒，其特征在于，所述淋巴瘤检测试剂盒还包括PCR扩增检测的常规组件；

优选地，所述常规组件包括预混液、引物混合液和无核酸酶超纯水。

10.一种如权利要求8或9所述的淋巴瘤检测试剂盒的使用方法，其特征在于，所述使用方法包括如下步骤：

提取全血样本中的RNA并构建RNA二代测序文库，将所述RNA二代测序文库与DNA探针池杂交，通过二代测序与数据分析获得检测结果；

优选地，所述全血样本的体积为2-10mL。