CN111208304B

CN111208304B - 肿瘤来源IgG在甲状旁腺癌诊断和预后中的用途

Info

Publication number: CN111208304B
Application number: CN202010064262.XA
Authority: CN
Inventors: 崔铭; 廖泉; 邱晓彦; 胡亚; 张生华; 赵玉沛
Original assignee: Peking University; Peking Union Medical College Hospital Chinese Academy of Medical Sciences
Current assignee: Peking University; Peking Union Medical College Hospital Chinese Academy of Medical Sciences
Priority date: 2020-01-20
Filing date: 2020-01-20
Publication date: 2023-06-16
Anticipated expiration: 2040-01-20
Also published as: CN111208304A

Abstract

本申请涉及肿瘤来源IgG在甲状旁腺癌诊断和预后中的用途。本申请公开了一种特异性识别人肿瘤来源免疫球蛋白G(CIgG)或其表位的单克隆抗体的应用，其利用免疫组化或免疫荧光技术，通过抗体染色病理评分来确定甲状旁腺癌的患者诊断和预后、以及用于制备一种用于甲状旁腺癌诊断和预后的试剂盒。本申请的技术方案可为甲状旁腺癌的诊断和预后判断提供参考指标以协助指导临床诊治。

Description

肿瘤来源IgG在甲状旁腺癌诊断和预后中的用途

技术领域

本申请涉及医学领域。具体而言，涉及临床诊断和预后领域。本申请涉及肿瘤来源IgG作为甲状旁腺癌诊断和预后标志物的用途。

背景技术

甲状旁腺癌是一种罕见内分泌恶性肿瘤。甲状旁腺癌是原发性甲状旁腺功能亢进症的病因之一，在西方国家约占1％，在中国约占5％。相比于甲状旁腺良性疾病(如甲状旁腺腺瘤或增生)，甲状旁腺癌由于其恶性生物学行为及严重的临床症状，导致预后较差。

据文献报到，甲状旁腺癌的5年及10年生存率分别为82.3％和66％。早期的精确诊断是改善甲状旁腺癌预后的关键。然而甲状旁腺癌与甲状旁腺良性疾病在临床表现及病理学特征上常常难以区分。因此，寻找有效的鉴别诊断标志物对于甲状旁腺癌的诊治至关重要。

2017年国际癌症研究机构(IARC)出版的第4版《WHO内分泌肿瘤分类》中，甲状旁腺肿瘤从甲状腺肿瘤中分出来而独立成章。

甲状旁腺癌的诊断基于组织学、生物学和放射学的结合，应观察到包膜侵犯和/或血管侵犯、神经周围间隙浸润、肿瘤穿破包膜进入周围组织和/或转移。转移曾经被认为是恶性的唯一标准，但多达90％的癌可见宽的纤维结缔组织从肿瘤向包膜周围扩展，看到明确的血管侵犯则诊断恶性较大，血管侵犯应在肿瘤包膜或周围软组织，而不是在肿瘤的内部，至少部分肿瘤细胞黏附于血管壁，伴或不伴血管内皮细胞的纤维素。另外，Ki-67阳性指数有助于鉴别诊断，一般腺瘤的Ki-67阳性指数低<4％；若Ki-67阳性指数>5％时，则应考虑恶性。80％的癌出现核分裂象，尽管腺瘤也可出现，但病理性核分裂象常提示为恶性。血钙水平也是鉴别点之一，腺瘤的血钙水平一般<30mmol/L，而甲状旁腺癌的血钙水平往往>35mmol/L(方三高等人，《2017WHO甲状旁腺肿瘤新分类介绍》，中华病理学杂志2012Vol：47，p971-974)。

甲状旁腺癌TNM分期可见于2017AJCC第八版，其中：

T原发肿瘤

TX 原发肿瘤无法评估；

T0 无原发肿瘤证据；

Tis 非典型甲状旁腺肿瘤(不能明确恶性潜能的肿瘤)；

T1 肿瘤局限于甲状旁腺，浸润仅限于软组织

T2 肿瘤直接侵犯甲状腺；

T3 肿瘤直接侵犯喉返神经、食管、气管、骨骼肌、淋巴结、胸腺；

T4 肿瘤直接侵犯主要血管或脊椎；

N 区域淋巴结

NX 区域淋巴结无法评估；

N0 无区域淋巴结转移证据；

N1 区域淋巴结转移；

N1a Ⅵ区或上纵膈淋巴结(Ⅶ区)转移；

N1b 单侧、双侧或对侧Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ区或咽后壁淋巴结转移；

M 远处转移

M0 无远处转移；

M1 有远处转移。

免疫球蛋白(Ig)是一类经典的免疫分子，在体液免疫中发挥重要作用。经典免疫学理论认为Ig仅能由B淋巴细胞产生。自1996年以来，邱晓彦等多个课题组的一系列研究表明Ig可由非B细胞产生，尤其是在多种肿瘤细胞中存在高水平的表达。由此，将肿瘤细胞产生的Ig定义为肿瘤来源Ig(称为CIgG，Cancer-IgG)。进一步的研究发现，通过特异性识别CIgG的抗体可以在肿瘤细胞或组织中检测到CIgG的特异性表达，应用Ig特异性的反义寡核苷酸以及抗Ig抗体都可抑制肿瘤细胞生长、诱导其凋亡，说明肿瘤来源Ig可能对恶性肿瘤的发生发展起到重要作用。

中国专利公开108610414A和105467121A中，利用CIgG抗体(RP215株)检测CIgG的表达水平，发现可用于肺癌、肾癌患者的预后判断。然而，目前识别CIgG的抗体在甲状旁腺肿瘤患者的诊断与预后判断中的应用尚无报道。

发明内容

根据本申请的一些实施方案，提供了CIgG作为甲状旁腺癌预后标记物的用途。

根据本申请的另一些实施方案，提供了CIgG作为甲状旁腺癌诊断标记物的用途。

根据本申请的又一些实施方案，提供了CIgG作为标记物用以区分甲状旁腺癌和甲状旁腺良性疾病(甲状旁腺腺瘤或增生)的用途。

根据本申请的一些实施方案，提供了CIgG的定量试剂在制备医疗装置中的用途。

在一些实施方案中，根据本申请的医疗装置用于甲状旁腺癌的预后。在另一些实施方案中，根据本申请的医疗装置用于甲状旁腺癌的诊断。

在一些实施方案中，CIgG的定量试剂识别并结合人CIgG。因此，CIgG的定量试剂能够确定CIgG在样本中的含量(浓度)或表达水平。所述样本源自受试者。

在一些实施方案中，CIgG的定量试剂是CIgG重链或CIgG轻链的定量试剂。

在一些实施方案中，所述CIgG的定量试剂是CIgG重链恒定区的定量试剂。

在一些实施方案中，所述CIgG的定量试剂是CIgG轻链恒定区的定量试剂。

在一些实施方案中，CIgG的定量试剂识别并结合选自以下CIgG表位中的一个或组合：VL、CL、VH、CH1、CH2、CH3、FR框架区。

在具体的实施方案中，CIgG的定量试剂识别并结合CL。

在具体的实施方案中，CIgG的定量试剂识别并结合CH1。

在一些实施方案中，定量试剂确定CIgG的蛋白表达水平。

在一些实施方案中，所述定量试剂选自：抗体或其抗原结合片段、质谱鉴定试剂。

在一些实施方案中，根据本申请的医疗装置体现为以下形式：诊断剂、试剂盒、芯片、试纸、微孔板(例如48、96孔)、磁颗粒、胶乳颗粒。

在具体的实施方案中，将CIgG的定量试剂(例如CIgG单抗)配制在试剂盒中。在另一具体的实施方案中，将CIgG的定量试剂(例如CIgG单抗)包被在96孔板中。在另一具体的实施方案中，将CIgG的定量试剂(例如CIgG单抗)包被在微粒(例如胶乳颗粒或磁珠)上。

在一些实施方案中，预后是指选自以下的一种或组合：预后受试者的结局、预后受试者的治疗效果、预后受试者的生存。

在一些实施方案中，CIgG的表达水平高，指示受试者具有更差的预后，例如更短的生存。在一些具体的实施方案中，CIgG的表达水平高是指：免疫组化或免疫荧光染色强度高(例如但不限于采用H评分系统)、染色呈阳性的细胞比例高、CIgG在样本中的定量水平高、或其组合。

在另一些实施方案中，相较于良性疾病(腺瘤或增生)中的表达水平，受试者中CIgG的表达水平更高，指示该受试者患有甲状旁腺癌。在一些具体的实施方案中，CIgG的表达水平高是指：免疫组化或免疫荧光染色强度高(例如但不限于采用H评分系统)、染色呈阳性的细胞比例高、CIgG在样本中的定量水平高、或其组合。

在一些具体的实施方案中，生存包括但不限于总体生存、无病生存、一年生存、两年生存、五年生存、十年生存。

在一些具体的实施方案中，本申请的技术方案尤其适用于经治疗的甲状旁腺癌患者。在一些具体的实施方案中，本申请的技术方案适用于经外科切除术治疗的甲状旁腺癌患者。

在一些实施方案中，可以采用任何和CIgG结合的化合物作为定量试剂、或者能够确定CIgG水平的试剂(如MS质谱鉴定CIgG的多肽片段序列)。

在一些具体的实施方案中，CIgG的定量试剂是多克隆抗体或单克隆抗体。

在一些具体的实施方案中，多克隆抗体或单克隆抗体不限于特定细胞株所分泌。

在一些具体的实施方案中，抗体源自任何物种，例如鼠、兔、马、禽、羊、骆驼科、犬、牛、灵长类；或者是重组抗体、嵌合抗体。

技术人员知晓，抗体实现对抗原结合的功能，未必采用其完整形式，也可以是抗原结合片段。因而，在一些实施方案中，抗原结合片段可以提及但不限于Fab、Fv、scFv、Fab’、F(ab’)2、结构域抗体、双链抗体、三链抗体(triabody)、四链抗体(tetrabody)。

在本申请的上下文中，在选自以下样本中确定CIgG的表达水平：血液(全血、血浆、血清)、囊液、唾液、脑脊液、腹水、组织活检、消化道液体、尿液、排泄物、肿瘤组织。

在具体的实施方案中，所述样本是肿瘤组织、活检或血液(全血、血浆、血清)。

附图说明

图1A.CIgG在甲状旁腺肿瘤组织(甲状旁腺癌、甲状旁腺腺瘤、增生)中的表达

图1B.CIgG在甲状旁腺肿瘤组织(甲状旁腺癌、甲状旁腺腺瘤、增生)中的表达。

图2.通过Kaplan-Meier生存分析在甲状旁腺癌患者中对CIgG评分高水平组与低水平组的预后情况进行比较。

具体实施方式

术语

“抗原结合片段”，指保留了完整抗体的抗原结合活性的任何片段。

本公开的术语“与CIgG结合”，指能与CIgG或其表位相互作用。

本公开的术语“抗原结合位点”指CIgG抗原上线性的或不连续的，由本公开CIgG定量试剂(如抗体或抗原结合片段)所识别的线性位点或三维空间位点。

术语“表位”是指CIgG上与免疫球蛋白(抗体或抗原结合片段)特异性结合的位点。表位可以由相邻的氨基酸、或通过蛋白质的三级折叠而并列的不相邻的氨基酸形成。由相邻的氨基酸形成的表位通常在暴露于变性溶剂后保持，而通过三级折叠形成的表位通常在变性溶剂处理后丧失。表位通常以独特的空间构象包括至少3-15个氨基酸。确定什么表位由给定的抗体结合的方法在本领域中是熟知的，包括免疫印迹和免疫沉淀检测分析等。确定表位的空间构象的方法包括本领域中的技术和本文所述的技术，例如X晶体分析法或二维核磁共振等。

实施例

以下试验通过中国医学科学院北京协和医院伦理委员会审核，并遵守赫尔辛基宣言，所有患者均被详细告知样本采集及储藏的目的并签署书面同意书。

在以下实施例中，虽然采用了靶向特定表位(重链恒定区)的市售抗体，但是技术人员理解，对CIgG的检测不限于特定抗体株。鉴于可变区的氨基酸序列变化较大，更优先考虑CIgG恒定区中的表位，然而可变区中更为保守的框架区仍可以用作检测的靶点。

1.病例与试验设计

纳入经手术切除的109例病理学检查确诊为甲状旁腺肿瘤患者，包括50例甲状旁腺癌患者、50例甲状旁腺腺瘤患者、及9例甲状旁腺增生患者的肿瘤及癌旁组织标本。所有标本按照2017版WHO标准进行病理诊断。

其中50例甲状旁腺癌患者标本包括：28例原发灶、14例复发灶、8例转移灶。

2.免疫组化染色

2.1抗CIgG单克隆抗体可以实验室自行制备或商售获得，免疫组化二抗购自DAKO公司。

2.2免疫组化染色步骤：

-石蜡切片置于二甲苯中浸泡20分钟，换新鲜二甲苯重复一次；

-将脱腊后的组织切片于100％乙醇中浸泡5分钟2次，95％乙醇、80％乙醇、蒸馏水各浸泡5分钟；

-抗原修复液为Tris-EDTA pH 9.0缓冲液，将抗原修复液用高压锅加热至沸腾，将切片放入，加热至冒气后计时2分钟，自然冷却至室温；

-新鲜配制3％过氧化氢(H₂O₂)，滴片，室温下避光孵育10分钟；

-用正常羊血清工作液室温封闭20分钟；

-抗CIgG单克隆抗体(5μg/ml，市售抗体)用磷酸盐缓冲液(PBS)按1:3500配制，37℃与组织切片孵育1h；PBS洗3次，每次5分钟；

-用DAKO二抗显色试剂(EnVision Detection Kit)，室温与组织切片反应25分钟，PBS洗5分钟×3次；

-DAB显色，滴片，镜下观察反应结果；

-苏木精复染细胞核1分钟，自来水蓝化5分钟；

-乙醇上行脱水：80％乙醇5分钟，95％乙醇5分钟，100％乙醇5分钟，100％乙醇5分钟；中性树胶封片。

-将切片通过匈牙利公司Panoramic MIDI扫描仪进行数字化全景扫描。

3.免疫组化结果判读

免疫组化评分基于H评分系统，即通过染色强度级别(0、1、2、3)与阳性细胞比例(0-100)相乘得出分数。免疫组化评分由两名研究者分别独立判读，最终取平均值。

基于训练集数据，通过X-tile 3.6.1软件得出抗体染色评分的截断值(cut-off)为62.5分。评分小于或等于62.5分判定为：肿瘤来源IgG低表达组，高于62.5分判定为肿瘤来源IgG高表达组。

4.统计学分析

采用统计学软件SPSS 24.0、GraphPad Prism 6进行分析，统计学显著性差异定义为P<0.05。无病生存期定义为手术结束至患者复发或随访截止。

计数资料应用卡方检验、计量资料应用t检验，以评价肿瘤来源IgG表达水平与病例临床病理各变量是否存在相关性。应用Wilcoxon符号秩检验比较CIgG在甲状旁腺癌原发灶与转移灶中表达水平的差异。应用Kaplan-Meier曲线进行生存时间分析并通过log-rank检验进行比较。应用Cox比例风险回归模型进行单因素及多因素生存分析。

5.实验结果

5.1通过CIgG抗体在各甲状旁腺肿瘤组织中检测CIgG的表达

根据评分标准，CIgG抗体检测CgG水平在甲状旁腺癌组织中的表达水平显著高于甲状旁腺良性病变(甲状旁腺腺瘤、增生患者)，P<0.001(图1A、图1B)。

通过ROC曲线分析，CIgG评分用于甲状旁腺癌与良性病变(甲状旁腺腺瘤、增生患者)鉴别诊断的AUC值为0.84(95％置信区间：0.76-0.90,P<0.001)；敏感度与特异度分别为76％(95％置信区间：0.62-0.87)、88％(95％置信区间：0.77-0.95)。提示CIgG对甲状旁腺肿瘤具有很好的辅助诊断价值。

5.2CIgG表达水平用于患者预后的评估

根据评分标准，通过Kaplan-Meier生存分析在甲状旁腺癌患者中对CIgG评分高水平组与低水平组的预后情况进行比较。

结果显示，CIgG评分高水平组的甲状旁腺癌患者的5年无病生存期显著低于CIgG评分低水平组(P＝0.018)，说明CIgG抗体检测肿瘤来源IgG的高水平表达预示甲状旁腺癌患者不良预后(图2)。

综上所述，CIgG在甲状旁腺癌组织中的表达水平显著高表达于甲状旁腺良性病变组织，可用作鉴别诊断分子标志物。CIgG评分高水平预示甲状旁腺癌患者不良预后。CIgG可作为甲状旁腺癌诊断与预后判断的参考指标以协助指导临床诊治。

参考文献

1.Ryhanen EM,Leijon H,Metso S等人A nationwide study on parathyroidcarcinoma.Acta Oncol.2017；56:991-1003.

2.Al-Kurd A,Mekel M,Mazeh H.Parathyroid carcinoma.Surg Oncol.2014；23:107-114.

3.Xue S,Chen H,Lv C等人Preoperative diagnosis and prognosisin40parathyroid carcinoma patients.Clin Endocrinol(Oxf).2016；85:29-36.

4.Asare EA,Sturgeon C,Winchester DJ等人Parathyroid carcinoma:anupdate on treatment outcomes and prognostic factors from the national cancerdata base(NCDB).Ann Surg Oncol.2015；22:3990-3995.

5.Erickson LA,Mete O.Immunohistochemistry in diagnostic parathyroidpathology.Endocr Pathol.2018；29:113-129.

6.Zhang X,Hu Y,Wang M等人Profiling analysis of long non-coding RNAand mRNA in parathyroid carcinoma.Endocr Relat Cancer.2018:ERC-18-0480.R1.doi:10.1530/ERC-18-0480

7.Truran PP,Johnson SJ,Bliss RD,Lennard TW,Aspinall SR.Parafibromin,galectin-3,PGP9.5,Ki67,and cyclin D1:using an immunohistochemical panel toaid in the diagnosis of parathyroid cancer.World J Surg.2014；38:2845-2854.

8.邱晓彦，杨贵贞.恶性肿瘤细胞内呈现Ig样物质的特性及其基因结构分析.中国免疫学杂志.1996；5(12):296.

9.Qiu X,Zhu X,Zhang L等人Human epithelial cancers secreteimmunoglobulin g with unidentified specificity to promote growth and survivalof tumor cells.Cancer Res.2003；63:6488–6495.

10.Babbage G,Ottensmeier CH,Blaydes J等人Immunoglobulin heavy chainlocus events and expression of activation-induced cytidine deaminase inepithelial breast cancer cell lines.Cancer Res.2006；66:3996–4000.

11.Chen Z,Gu J.Immunoglobulin G expression in carcinomas and cancercell lines.FASEB J.2007；21:2931–2938.

12.Lee G,Laflamme E,Chien CH等人Molecular identity of a pan cancermarker,CA215.Cancer Biol Ther.2008；7:2007–2014.

13.Tang J,Zhang J,Liu Y等人Lung squamous cell carcinoma cells expressnon-canonically glycosylated IgG that activates integrin-FAK signaling.CancerLett.2018；430:148–159.

14.Liu Y,Liu D,Wang C等人Binding of the monoclonal antibody RP215 toimmunoglobulin G in metastatic lung adenocarcinomas is correlated with poorprognosis.Histopathology.2015；67:645–653.

15.Sheng Z,Liu Y,Qin C等人IgG is involved in the migration andinvasion of clear cell renal cell carcinoma.J Clin Pathol.2016；69:497–504.

16.McClelland RA,Finlay P,Walker KJ等人Automated quantitation ofimmunocytochemically localized estrogen receptors in human breastcancer.Cancer Res.1990；50:3545–3550.

17.Camp RL,Dolled-Filhart M,Rimm DL.X-tile:a new bio-informatics toolfor biomarker assessment and outcome-based cut-point optimization.Clin CancerRes.2004；10:7252–7259.

18.方三高等人，2017WHO甲状旁腺肿瘤新分类介绍，中华病理学杂志2012Vol：47，p971-974。

Claims

1.CIgG的定量试剂在制备医疗装置中的用途，其中：

所述医疗装置用于甲状旁腺癌受试者的预后；

所述CIgG的定量试剂能够确定CIgG的含量或CIgG的表达水平；

所述CIgG的定量试剂选自以下任一项：抗体或其抗原结合片段、质谱鉴定试剂；

其中所述抗体或其抗原结合片段识别并结合CIgG或其表位；

所述定量是指在蛋白水平的定量；

所述蛋白水平是在肿瘤组织样本中的蛋白水平。

2.根据权利要求1所述的用途，其中：

所述CIgG的定量试剂是CIgG重链的定量试剂或CIgG轻链的定量试剂。

3.根据权利要求1所述的用途，其中：

所述CIgG的定量试剂是CIgG重链恒定区的定量试剂或CIgG轻链恒定区的定量试剂。

4.根据权利要求1所述的用途，其中：

CIgG的表位选自以下的任一项或其组合：VL、CL、VH、CH1、CH2、CH3、FR。

5.根据权利要求1所述的用途，其中所述医疗装置是诊断剂。

6.根据权利要求1所述的用途，其中所述医疗装置是试剂盒。

7.根据权利要求1所述的用途，其中所述医疗装置是芯片。

8.根据权利要求1所述的用途，其中所述医疗装置是试纸。

9.根据权利要求1所述的用途，其中所述医疗装置是孔板。

10.根据权利要求1所述的用途，其中所述医疗装置是胶乳颗粒。

11.根据权利要求1所述的用途，其中所述医疗装置是磁珠。

12.根据权利要求1所述的用途，所述预后是指预后受试者的生存。

13.根据权利要求12所述的用途，受试者中CIgG的表达水平高，指示所述受试者具有更差的预后。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的用途，其中所述受试者是经治疗的甲状旁腺癌患者。

15.根据权利要求14所述的用途，所述治疗是外科切除术。

16.根据权利要求12或13所述的用途，其中所述生存是指无病生存；

所述无病生存选自以下任一项：一年无病生存、两年无病生存、五年无病生存、十年无病生存。

17.根据权利要求1所述的用途，其中：

所述抗体是多克隆抗体或单克隆抗体。

18.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗体源自以下任一项：鼠、兔、马、禽、羊、骆驼科、犬、牛、灵长类。

19.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗体是重组抗体。

20.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗体是嵌合抗体。

21.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗原结合片段是Fab。

22.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗原结合片段是Fv。

23.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗原结合片段是scFv。

24.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗原结合片段是Fab’。

25.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗原结合片段是F(ab’)2。

26.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗原结合片段是双特异性抗体。

27.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗原结合片段是结构域抗体。

28.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗原结合片段是单链抗体。

29.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗原结合片段是双链抗体。

30.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗原结合片段是三链抗体。

31.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗原结合片段是四链抗体。

32.CIgG的定量试剂在制备医疗装置中的用途，其中：

所述医疗装置用于甲状旁腺癌受试者的诊断、或者所述医疗装置用于将甲状旁腺癌区别于甲状旁腺增生或甲状旁腺腺瘤；

所述CIgG的定量试剂能够确定CIgG的含量或CIgG的表达水平；

其中所述抗体或其抗原结合片段识别并结合CIgG或其表位；

所述定量是指在蛋白水平的定量；

所述蛋白水平是在肿瘤组织样本中的蛋白水平。

33.根据权利要求32所述的用途，其中：

相较于甲状旁腺增生或甲状旁腺腺瘤，受试者中CIgG的表达水平更高，指示该受试者患有甲状旁腺癌。

34.根据权利要求32所述的用途，其中：

35.根据权利要求32所述的用途，其中：

36.根据权利要求32所述的用途，其中：

所述CIgG的表位选自以下的任一项或其组合：VL、CL、VH、CH1、CH2、CH3、FR。

37.根据权利要求32所述的用途，其中所述医疗装置是诊断剂。

38.根据权利要求32所述的用途，其中所述医疗装置是试剂盒。

39.根据权利要求32所述的用途，其中所述医疗装置是芯片。

40.根据权利要求32所述的用途，其中所述医疗装置是试纸。

41.根据权利要求32所述的用途，其中所述医疗装置是孔板。

42.根据权利要求32所述的用途，其中所述医疗装置是胶乳颗粒。

43.根据权利要求32所述的用途，其中所述医疗装置是磁珠。

44.根据权利要求32所述的用途，其中：

所述抗体是多克隆抗体或单克隆抗体。

45.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗体源自以下任一项：鼠、兔、马、禽、羊、骆驼科、犬、牛、灵长类。

46.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗体是重组抗体。

47.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗体是嵌合抗体。

48.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗原结合片段是Fab。

49.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗原结合片段是Fv。

50.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗原结合片段是scFv。

51.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗原结合片段是Fab’。

52.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗原结合片段是F(ab’)2。

53.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗原结合片段是双特异性抗体。

54.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗原结合片段是结构域抗体。

55.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗原结合片段是单链抗体。

56.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗原结合片段是双链抗体。

57.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗原结合片段是三链抗体。

58.根据权利要求32所述的用途，其中所述抗原结合片段是四链抗体。