CN111135137B - 一种美洲大蠊冻干粉及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种美洲大蠊冻干粉及其制备方法,以所述美洲大蠊冻干粉的制备原料的重量为100%计,所述制备原料包括如下组分:美洲大蠊提取物0.1‑10wt%;赋形剂5‑20wt%;冻干保护剂0.05‑1wt%;缓冲剂0.02‑2wt%;水63.6‑94.77wt%。本发明提供的美洲大蠊冻干粉中的美洲大蠊提取物具有的有效物质活性较高,可以发挥有效物质的最大功效,具有美白、抗皱、淡斑、消疤、保湿等功效。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域,涉及一种美洲大蠊冻干粉及其制备方法。
背景技术
美洲大蠊为昆虫纲,有翅亚纲,蜚蠊目,蜚蠊科(Blattidae),大蠊属昆虫(PeriplanetaamericanaLinn.),俗称蟑螂。它是世界上生命力最强、最古老、至今繁衍最成功的昆虫类群之一。蟑螂作为室内害虫主要栖息于厨房、食堂、仓库等处损害食物、衣服、书籍等,取食并污染人的食物,传播痢疾、伤寒、蛔虫、蛲虫等多种疾病。蟑螂作为害虫是城市卫生防疫部门和海关检疫部门重点防治对象之一。然而,在科技日新月异的今天,面对成千上万针对它的各种杀灭剂,这一昆虫群体依然十分活跃,这表明其体内必应具有某些特殊的物质和其特有的作用机制,这一现象引起了国内外一些学者的关注。
其为传统的中药材,具有抗炎、消肿、促进伤口愈合,加速病损组织修复,加快坏死组织脱落、促进血管新生、扩张肺血管、改善微循环、抗心律失常、保护心脏、抗病毒、提高机体免疫力和修复损伤肝细胞功能等作用;临床上可用于治疗烫伤、烧伤、褥疮。其有效成分有氨基酸、肽类、蜚蠊酮以及微量元素等。目前,美洲大蠊的提取通常采用浸提法、回流提取法、闪式提取法等,如CN104434987A公开了一种美洲大蠊的超高压提取方法,包括如下步骤:(1)取美洲大蠊粉末,加入水或浓度为50-90%乙醇溶液,超高压提取1-5次,每次5-20min,即得提取液,其中,超高压提取的压强为100-800MPa,温度为20-80℃;(2)过滤步骤(1)的提取液,得上清液,浓缩,得浓缩液;(3)将步骤(2)的浓缩液冷藏24-48h,去除上层油脂,离心,得上清液,浓缩、干燥,粉碎,即可。该专利可以有效提取美洲大蠊的有效成分,将其有效成分用于护肤组合物中。CN104224659A公开了一种含有美洲大蠊美容成分的面膜及其制备方法,:所述功能性美容物质包括防腐剂、香精、美洲大蠊原料和功效原料;所述美洲大蠊原料为美洲大蠊活体制成的浓浆、美洲大蠊干粉、美洲大蠊提取液、美洲大蠊浸膏、美洲大蠊提取粉中的任意一种;所述功效原料为美白功效原料、保湿功效原料、淡斑功效原料、抗皱功效原料、抗敏功效原料、控油功效原料、清洁功效原料或祛痘功效原料中的任意一种,虽然面膜中添加的美洲大蠊提取物发挥了一定的作用,但是类似面膜、乳液、精华液等护肤品无法较长时间保持美洲大蠊提取物的活性,而导致基本上无法发挥美洲大蠊提取物活性成分的功效。
因此,需要开发一种可以尽可能发挥美洲大蠊提取物的有效物质功效的护肤品以满足应用要求。
发明内容
本发明的目的在于提供一种美洲大蠊冻干粉及其制备方法。本发明提供的美洲大蠊冻干粉中的美洲大蠊提取物具有的有效物质活性较高,可以发挥有效物质的最大功效,具有美白、抗皱、淡斑、消疤、保湿等功效。
为达此目的,本发明采用以下技术方案:
第一方面,本发明提供了一种美洲大蠊冻干粉,以所述美洲大蠊冻干粉的制备原料的重量为100%计,所述制备原料包括如下组分:
本发明以冻干粉作为包含美洲大蠊提取物的护肤组合物的存在形式,可以将美洲大蠊提取物中的有效成分的活性得到最大程度的保存,同时添加赋形剂、冻干保护剂和缓冲剂作为辅料组分,一方面可以改善皮肤的作用,另一方面稳定了美洲大蠊提取物中的有效成分,使其不失活。本发明所包括的各组分的使用量需要在本发明的限定范围内,当美洲大蠊提取物的添加量过低时,其中的有效成分含量较低,对皮肤的作用几乎没有;当美洲大蠊提取物的添加量过多时,则会有影响产品冻干过程中晶体结构;当赋形剂、冻干保护剂和缓冲剂任一组分的添加量过低时,会有影响冻干粉结构,同时影响冻干保护剂起到的作用;当赋形剂、冻干保护剂和缓冲剂任一组分的添加量过高时,不但会影响冻干粉外观,且会影响使用时使用者的肤感。
在本发明中,所述美洲大蠊提取物0.1-10wt%,例如1wt%、2wt%、3wt%、4wt%、5wt%、6wt%、7wt%、8wt%、9wt%等。
在本发明中,所述赋形剂5-20wt%,例如6wt%、8wt%、10wt%、12wt%、14wt%、15wt%、16wt%、18wt%、20wt%、22wt%等。
在本发明中,所述冻干保护剂0.05-1wt%,例如0.1wt%、0.3wt%、0.5wt%、0.7wt%、0.9wt%等。
在本发明中,所述缓冲剂0.02-2wt%,例如0.05wt%、0.1wt%、0.2wt%、0.5wt%、0.8wt%、1wt%、1.5wt%、1.8wt%等。
在本发明中,所述水63.6-94.77wt%,例如64wt%、70wt%、75wt%、80wt%、85wt%、90wt%等。
优选地,所述制备原料还包括乙酰基六肽-8和类蛇毒肽。
乙酰基六肽-8和类蛇毒肽具有协同作用,二者协同增效,使冻干粉具有平滑肌肤,抗皱效果。
美洲大蠊中的活性物质的抗衰机理为抗氧化作用,清除自由基,可以在3个活性部位清除DPPH*自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基。同时乙酰基六肽-8与类蛇毒肽的作用机理为神经递质抑制剂。因此在本发明中,三者叠加使用,祛皱抗衰效果会更明显。
优选地,以所述制备原料的总质量为100%计,所述乙酰基六肽-8的含量为0.001-0.2%,例如0.0052%、0.0082%、0.012%、0.052%、0.12%、0.152%等。
优选地,以所述制备原料的总质量为100%计,所述类蛇毒肽的含量为0.001-0.2%,例如0.0052%、0.0082%、0.012%、0.052%、0.12%、0.152%等。
优选地,所述制备原料还包括寡肽-1。
在本发明的冻干粉中还包括寡肽-1,其提供皮肤免疫功能,调节皮肤水分、酸碱、平衡油脂,可以改善敏感性皮肤的抗敏能力,同时还可以防止皱纹的发生。
优选地,以所述制备原料的总质量为100%计,所述寡肽-1的含量为0.01-1%,例如0.05%、0.08%、0.1%、0.2%、0.5%、0.8%等。
优选地,所述制备原料还包括葡聚糖。
在本发明的葡聚糖中还包括葡聚糖,其具有刺激皮肤细胞活性,增强皮肤自身的免疫保护功能,高效修护皮肤,保湿的功效。
优选地,以所述制备原料的总质量为100%计,所述葡聚糖的含量为0.05-2%,例如0.06%、0.08%、0.1%、0.2%、0.5%、0.8%等。
优选地,所述赋形剂选自甘露醇、乳糖或蔗糖中的任意一种或至少两种的组合。
优选地,所述冻干保护剂选自甘油、甘氨酸、海藻糖或二甲基亚砜中的任意一种或至少两种的组合。
优选地,所述缓冲剂选自磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液或磷酸盐缓冲液中的任意一种。
作为优选技术方案,本发明提供的美洲大蠊冻干粉以其制备原料的总重量为100%计,包括如下组分:
作为最优选技术方案,本发明提供的美洲大蠊冻干粉以其制备原料的总重量为100%计,包括如下组分:
第二方面,本发明提供了一种根据第一方面所述的美洲大蠊冻干粉的制备方法,所述制备方法包括如下步骤:
(1)将配方量的水、缓冲剂、冻干保护剂、赋形剂和美洲大蠊提取物混合,得到料体;
(2)将料体过滤除菌、冷冻干燥,得到所述美洲大蠊冻干粉。
优选地,步骤(1)所述混合的温度为25-40℃,例如28℃、30℃、32℃、35℃、38℃等,搅拌速度为200-500r/min,例如250r/min、300r/min、350r/min、400r/min、450r/min等。
优选地,料体在无菌环境下利用0.22μm的滤芯除菌过滤。
优选地,步骤(1)为将配方量的水、缓冲剂、冻干保护剂、赋形剂、类蛇毒肽、乙酰基六肽-8、任选的寡肽-1、任选的葡聚糖和美洲大蠊提取物混合,得到料体。
相对于现有技术,本发明具有以下有益效果:
(1)本发明以冻干粉作为包含美洲大蠊提取物的护肤组合物的存在形式,可以将美洲大蠊提取物中的有效成分的活性得到最大程度的保存,同时添加赋形剂、冻干保护剂和缓冲剂作为辅料组分,一方面可以改善皮肤的作用,另一方面稳定了美洲大蠊提取物中的有效成分,使其不失活;
(2)本发明提供的美洲大蠊冻干粉中的美洲大蠊提取物具有的有效物质活性较高,可以发挥有效物质的最大功效,具有美白、抗皱、淡斑、消疤、保湿等功效,并且储存稳定性好;其中,在4周后皮肤弹性提高约30-45%,自使用后第1周,皮肤水含水量即有细微提升,测试期间水合度呈上升趋势,在第4周时皮肤水合度提升约25%,自使用后第1周,皮肤皱纹改善明显,在第4周时皱纹减少了约50%。
附图说明
图1是步骤①中经胰酶消化后的细胞悬液显微镜图。
图2是阴性对照组培养三天后的细胞显微镜图。
图3是滴加了美洲大蠊冻干粉培养三天后的细胞显微镜图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了,所述实施例仅仅是帮助理解本发明,不应视为对本发明的具体限制。
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了,所述实施例仅仅是帮助理解本发明,不应视为对本发明的具体限制。
实施例1
一种美洲大蠊冻干粉,以其制备原料的总重量为100%计,由如下组分组成:
制备方法如下:
(1)取配方量水,依次投入甘露糖醇、甘氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、葡聚糖、寡肽-1、乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、美洲大蠊提取物,加入温度为40℃,搅拌速度为300r/min,得到料体;
(2)料体无菌环境下利用0.22μm的滤芯,筒式装置过滤除菌,确保无菌操作,料体过滤至无菌桶中;
(3)进行无菌灌装至存储容器中,半加塞,然后冷冻干燥,最后轧盖,得到美洲大蠊冻干粉。
实施例2
与实施例1的区别在于,在本实施例中,不添加葡聚糖,用水补足。
实施例3
与实施例1的区别在于,在本实施例中,不添加寡肽-1,用水补足。
实施例4
与实施例1的区别在于,在本实施例中,不添加类蛇毒肽,其中,乙酰基六肽-8的添加量为0.2wt%。
实施例5
与实施例1的区别在于,在本实施例中,不添加乙酰基六肽-8,其中,类蛇毒肽的添加量为0.2wt%。
实施例6
与实施例1的区别在于,在本实施例中,不添加乙酰基六肽-8和类蛇毒肽,用水补足。
实施例7
与实施例1的区别在于,在本实施例中,不添加乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、寡肽-1和葡聚糖,用水补足。
实施例8
一种美洲大蠊冻干粉,以其制备原料的总重量为100%计,由如下组分组成:
制备方法与实施例1相同。
实施例9
一种美洲大蠊冻干粉,以其制备原料的总重量为100%计,由如下组分组成:
制备方法与实施例1相同。
对比例1
与实施例8的区别在于,本对比例中,美洲大蠊提取物的添加量为0.05wt%,相应地增加水的用量。
对比例2
与实施例9的区别在于,本对比例中,美洲大蠊提取物的添加量为15wt%,相应地减少水的用量。
对比例3
与实施例8的区别在于,本对比例中,甘露糖醇的添加量为2wt%,相应地增加水的用量。
对比例4
与实施例9的区别在于,本对比例中,甘氨酸的添加量为3wt%,相应地减少水的用量。
性能测试1
对实施例1-9和对比例1-4提供的美洲大蠊冻干粉进行性能表征,方法如下:
(1)表观形貌:取样品在室温且非阳光直射的条件下目测观察,取各样品放置12个月的数据进行对比;
(2)气味:取等量的样品放在相同的容器中,用宽1.0cm,长12cm的吸水纸作为评香纸,分别蘸取样品1.5±0.5cm,用嗅觉鉴别,取各样品放置12个月的数据进行对比;
(3)溶解性:将50mg样品利用2.8mL水溶解,加塞摇晃,观察其是否溶解,取各样品放置12个月的数据进行对比;
(4)水分测定项:按2015年中国药典水分测定法第一法费休氏法中库伦滴定法测定;
(5)贴斑实验:选用合格的斑贴器,以封闭式斑贴试验方法,将样品按使用浓度水溶后量取约0.225±0.025mL滴于斑贴器内,外用专用胶带贴覆于受试者背部,24小时后去除试验品,分别去除后0.5h、6h、12h、24h、48h小时观察皮肤反应,按照《化妆品卫生规范》中皮肤反应分级标准记录其结果;
对实施例1的测试结果见表1,对实施例1-9和对比例1-6的测试结果见表2:
表1
其中,特殊原料味指的是美洲大蠊提取液自带气味。
由表1数据可知,本发明提供的美洲大蠊冻干粉具有良好的稳定性。
表2
由实施例和性能测试可知,本发明提供的美洲大蠊冻干粉具有良好的储存稳定性。由实施例1和对比例2和4的对比可知,当美洲大蠊提取物或甘氨酸的添加量不在本发明的限定范围内时,储存稳定性稍差。
性能测试2(临床试验)
对实施例1-9和对比例1-4提供的美洲大蠊冻干粉进行性能表征,方法如下:
(1)测试对象:选取志愿者140名,年龄在40-50岁,男女各半,随机分成2组,每组5名男性、5名女性,共14组。
(2)使用方法:清洁面部后,用对应溶媒液(保湿溶媒,成分水、透明质酸钠和甘油的混合液)兑溶样品,倒于手心,轻拍至脸上,1-13组分别使用实施例1-9和对比例1-4提供的美洲大蠊冻干粉,第14组使用保湿溶媒,每天早晚各使用1次,每周测试一次,连续测试4周,测试期间不得更换或合用其他同类产品。
(3)测试仪器:利用用ANTSCI Skin-SP皮肤测试仪对志愿者进行测试;
(4)测试方法:测试者每周测试一次,测试前保证皮肤清洁,在室内静坐10min,进行仪器测试。
(5)测试注意事项:每次测试,保证同一个人操纵此仪器,保证探头与皮肤接触,力量恒定;保持环境温度、湿度一致(湿度50±10%和温度恒定20℃)。
测试结果见表3-5:
表3
由实施例和性能测试可知,本发明提供的美洲大蠊冻干粉可以增加皮肤弹性,在4周后皮肤弹性提高约30-45%。
由实施例1和实施例2的对比可知,葡聚糖的添加可以进一步提高皮肤弹性;由实施例1和实施例3-6的对比可知,乙酰基六肽-8和类蛇毒肽具有协同作用,可共同增加皮肤弹性,而其与美洲大蠊提取物配合,可以在进一步增加皮肤弹性。由实施例8-9和对比例1、3的对比可知,美洲大蠊提取物和甘露糖醇的添加量需要在本发明的限定范围内才能达到本发明的技术效果。
表4
由实施例和性能测试可知,本发明提供的美洲大蠊冻干粉具有保湿功效,可以增加皮肤含水量,自使用后第1周,皮肤水含水量即有细微提升,测试期间水合度呈上升趋势,在第4周时皮肤水合度提升约25%。
由实施例1和实施例2的对比可知,葡聚糖的添加可以极大地增加皮肤水分含量;由实施例1和实施例3-6的对比可知,乙酰基六肽-8和类蛇毒肽具有协同作用,可共同增加皮肤水分含量,而其与美洲大蠊提取物配合,可以在进一步增加皮肤水分含量。由实施例8-9和对比例1、3的对比可知,美洲大蠊提取物、甘露糖醇的添加量需要在本发明的限定范围内才能达到本发明的技术效果。
表5
由实施例和性能测试可知,本发明提供的美洲大蠊冻干粉具有抗皱功效,可以改善皱纹,自使用后第1周,皮肤皱纹改善明显,在第4周时皱纹减少了约50%。
由实施例1和实施例2的对比可知,葡聚糖的添加可以进一步减少皱纹;由实施例1和实施例3-6的对比可知,乙酰基六肽-8和类蛇毒肽具有协同作用,可共同减少皱纹。由实施例8-9和对比例1、3的对比可知,美洲大蠊提取物、甘露糖醇和甘氨酸的添加量需要在本发明的限定范围内才能达到本发明的技术效果。
性能测试3
对实施例1-9和对比例1-4提供的美洲大蠊冻干粉进行性能表征,方法如下:
(1)抗自由基测试:
A、对超氧阴离子自由基清除能力评价:
取0.05mol/L pH=8.2的Tris-HCl缓冲液4.5mL,于25℃水浴锅中预热20min。再加入1mL试样和0.4mL 25mmol/L的邻苯三酚溶液,混匀后,于25℃水浴中反应5min,加入8mol/L的HCl 1.0mL终止反应;以Tris-HCl缓冲液作参比,在299nm处测吸光度值;空白对照用1mL试样的溶剂来替代样品。
超氧阴离子自由基清除率(%)=[1-(A2/A1)]×100%;
其中,A1为空白对照的吸光度值;A2为样品的吸光度值。
B、对羟自由基的清除能力评价
在25mL比色管中依次加入2mmol/L FeSO4 3mL,1mmol/L H2O2 3mL,摇匀,接着加入6mmol/L水杨酸3mL,摇匀,于37℃水浴加热15min后取出,测其吸光度;分别加入一定浓度的待测液,摇匀,继续水浴加热15min,取出测其吸光度。
羟自由基清除率(%)=[B1-B2-(B1-B3)]/B1×100%;
其中,B1为未加药品前反应体系的吸光度值;B2为加入样品后清除羟自由基后体系的吸光度值;B3为空白对照清除羟自由基后体系的吸光度值。
C、对DPPH自由基清除能力评价
采用清除DPPH自由基的方法评价样品的体外抗氧化性能,DPPH自由基清除实验的具体实验步骤为:
取三支PE管,一支加入2mL的去离子水,另两支各加入2mL的待测液,分别标记为i、j、k,向i和j管中依次加入2mL的DPPH溶液,k管中加入2mL无水乙醇,混合均匀避光静置30min,用紫外分光光度计于517nm波长处,依次测定其吸光度;
DPPH自由基清除率(%)=[1-(Aj-Ak)/Ai]×100%;
其中,Ai为DPPH乙醇溶液的吸光度;Aj为待测液清除自由基的吸光度;Ak为待测液的吸光度。
测试结果见表6:
表6
由实施例和性能测试可知,本发明具有抗氧化的有益效果,其中,超氧自由基清除率在10%以上,最高可达83.5%以上;羟自由基清除率在88%以上,最高可达90%以上;DPPH自由基清除率在84%以上。
由实施例1和对比例1、3的对比可知,当美洲大蠊提取物或甘露糖醇的含量过低时,对自由基的清除效率较低。由实施例1和对比例2、4的对比可知,当美洲大蠊提取物或者甘氨酸的添加量过多时,对自由基的综合清除效率较差。
(2)调节细胞增长、分化试验
a、细胞培养器材:CO2培养箱、超净工作台、倒置显微镜、离心机、水浴锅、高压灭菌锅、试管架、25m培养瓶、5mL移液管、1mL枪头、镊子、酒精灯、移液管、枪头、医用棉花、离心管;
b、细胞工作种子:Vero细胞;
细胞培养溶液:小牛血清、配制好的PBS液、DMEM培养液(10%血清)、Vero工作细胞种子、胰酶溶液、美洲大蠊冻干粉水溶液。(均已过滤灭菌,37℃预热)。
c、其他器材及灭菌用品:计时器、无菌手套、75%酒精、镊子、棉球、废液缸。
d、实验操作:
①将长成单层的Vero细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中吸出瓶内的培养液,加入3~5mL的PBS溶液洗涤一次后吸出,加入1mL胰酶溶液,左右晃动培养瓶使胰酶溶液平铺在细胞表面;放入37℃,5%二氧化碳培养箱中放置3min。
②在倒置显微镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液吸出,加入2mL新鲜培养液,反复吹打,制成细胞悬液。
③准备10个添加5mL DMEM培养液(含小牛血清)的25mL培养瓶,其中5个培养瓶中滴加5mL美洲大蠊冻干粉(实施例1提供)水溶液,另外5个培养瓶做阴性对照,盖好瓶盖,送回37℃,5%二氧化碳培养箱中进行培养。
④培养三天之后在显微镜下观察细胞生长情况。
图1为步骤①中经胰酶消化后的细胞悬液显微镜图,细胞呈圆形,图2为阴性对照组培养三天后的细胞显微镜图,图3为滴加了美洲大蠊冻干粉培养三天后的细胞显微镜图,由图2和图3中的细胞密度的对比可知,本申请的美洲大蠊冻干粉对细胞的增殖、分化有积极的促进作用。
申请人声明,本发明通过上述实施例来说明本发明的美洲大蠊冻干粉及其制备方法,但本发明并不局限于上述工艺步骤,即不意味着本发明必须依赖上述工艺步骤才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了,对本发明的任何改进,对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等,均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (6)
1.一种美洲大蠊冻干粉,其特征在于,以所述美洲大蠊冻干粉的制备原料的重量为100%计,所述制备原料包括如下组分:
美洲大蠊提取物 0.1-10 wt%;
赋形剂 5-20 wt%;
冻干保护剂 0.05-1 wt%;
缓冲剂 0.02-2 wt%;
水 63.6-94.77 wt%;
寡肽-1 0.01-1 wt%;
所述制备原料还包括乙酰基六肽-8和类蛇毒肽,以所述制备原料的总质量为100%计,所述乙酰基六肽-8的含量为0.001-0.2%,所述类蛇毒肽的含量为0.001-0.2%;
所述制备原料还包括葡聚糖;
所述赋形剂选自甘露醇、乳糖或蔗糖中的任意一种或至少两种的组合,所述冻干保护剂选自甘油、甘氨酸、海藻糖或二甲基亚砜中的任意一种或至少两种的组合。
2.根据权利要求1所述的美洲大蠊冻干粉,其特征在于,以所述制备原料的总质量为100%计,所述葡聚糖的含量为0.05-2%。
3.根据权利要求1所述的美洲大蠊冻干粉,其特征在于,所述缓冲剂选自磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液或磷酸盐缓冲液中的任意一种。
4.根据权利要求1-3中的任一项所述的美洲大蠊冻干粉的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:
(1)将配方量的水、缓冲剂、冻干保护剂、赋形剂、美洲大蠊提取物、乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、寡肽-1和葡聚糖混合,得到料体;
(2)将料体过滤除菌、冷冻干燥,得到所述美洲大蠊冻干粉。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述混合的温度为25-40℃,搅拌速度为200-500 r/min。
6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述料体在无菌环境下利用0.22 μm的滤芯除菌过滤。
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