CN111096970A - 具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物及制备方法 - Google Patents

具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物及制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111096970A
CN111096970A CN202010101724.0A CN202010101724A CN111096970A CN 111096970 A CN111096970 A CN 111096970A CN 202010101724 A CN202010101724 A CN 202010101724A CN 111096970 A CN111096970 A CN 111096970A
Authority
CN
China
Prior art keywords
composition
broad
chinese herbal
herbal medicine
active ingredients
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010101724.0A
Other languages
English (en)
Inventor
胡鲲
徐汝泽
王雅丽
凌海
陈天南
芦运超
孙晶
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai Ocean University
Original Assignee
Shanghai Ocean University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Ocean University filed Critical Shanghai Ocean University
Priority to CN202010101724.0A priority Critical patent/CN111096970A/zh
Publication of CN111096970A publication Critical patent/CN111096970A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/58—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公布了具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物及制备方法，所述组合物活性成分为黄芩素、土荆皮甲酸、土荆皮乙酸和川谏素，其质量比为2～4：2～4：2～4：1～2。体外抑菌试验证明该组合物对于水霉具有明显的抑制效果，且具有广谱性，与相应药物的水提物相比，其抑菌效果更为显著。本发明的组合物可用作替代化学抗菌药物，且绿色安全，用量小，毒副作用小。在保证养殖水环境和水产品安全的同时，降低了药物残留风险，避免菌株耐药性的产生。

Description

具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物及制备方法
技术领域
本发明属于水产养殖领域，特别涉及具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物及制备方法。
背景技术
水霉病是鱼类养殖中常常碰到的疾病，又称为肤霉病、白毛病。当鱼类表面受损后，水霉孢子迅速侵入伤口，吸取皮肤内的营养而迅速生长，使组织发炎、坏死。且极易感染鱼类受精卵，使活卵缺氧死亡。全国各地均有发病记载。且该病是水产动物病害中危害种类最多、危害最为严重的疾病之一。每年给我国水产养殖业造成重大损失。近年来，水产领域一直用化学药物对该病进行防治，然而频繁使用化学药物不仅容易诱导致病菌变异从而产生耐药菌株，而且过多的化学药物残留还会引起养殖水环境和水产品质量的安全问题。而中草药绿色安全，用量小，毒副作用小，药物残留不仅无毒害，还具备改良水产品品质，增强水产品免疫力等功效。在保证养殖水环境和水产品安全的同时，降低了药物残留风险，避免菌株耐药性的产生。并具有极强的广谱抑菌效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种抗水霉谱广、无毒无残留的具有强于中草药水提物的抗水霉作用的中草药活性成分组合物及其制备方法。
为实现上述技术目的，本发明采用以下技术方案：
具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物，所述组合物活性成分为黄芩素、土荆皮甲酸、土荆皮乙酸和川谏素，其质量比为2～4：2～4：2～4：1～2。
所述组合物的对不同菌株最小抑菌浓度为0.015625～0.0625mg/mL，最小杀菌浓度为0.03125～0.0625mg/mL，有高效光谱抗水霉作用。
进一步的，所述组合物的活性成分质量比为黄芩素：土荆皮甲酸：土荆皮乙酸：川谏素＝2：4：2：2。
进一步的，所述组合物的活性成分质量比为黄芩素：土荆皮甲酸：土荆皮乙酸：川谏素＝2：3：4：1。
本发明的另一目的在于提供上述组合物的制备方法，包括如下步骤：
按质量比称取组合物原料，磨粉并混合。加入有机溶剂超声溶解。将得到的混合液避光静置后，用去离子水定容至所需体积。所得配制液4℃避光保存。
进一步的，将得到的混合液在0-4℃下避光静置2-3d。
进一步的，所述有机溶剂选用二甲基亚砜。
进一步的，用去离子水定容后，二甲基亚砜终浓度≤5％。
本发明的中草药活性成分组合物具有良好的抗菌效果，且对水霉具有极其广谱的抗菌效果。相比于水提物、中草药单组分活性成分其抗菌效果更为显著。本中草药活性成分组合物是针对水霉在水产养殖中的危害，避免化学药物在水产养殖中滥用的替代药物，具有开发成绿色安全的高效抗水霉渔药前景。
具体实施方式
实施例1具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物的配制
取组合物原料黄芩提取物黄芩素，土荆皮提取物土荆皮甲酸、土荆皮乙酸，川谏子提取物川谏素，按照表1进行配比。
表1具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物的配方表
样品配方序号 黄芩素 土荆皮甲酸 土荆皮乙酸 川谏素
1 3mg 3mg 3mg 1mg
2 2mg 3mg 3mg 2mg
3 3mg 3mg 2mg 2mg
4 4mg 2mg 3mg 1mg
5 2mg 4mg 2mg 2mg
6 2mg 3mg 4mg 1mg
配制方法：将各配方原料磨粉并混合。加入适当二甲亚砜(DMSO)超声溶解。将得到混合液0-4℃避光静置2-3d。用去离子水定容至10mL(DMSO终浓度≤5％)，配制得母液，所得母液4℃避光保存备用。
实施例2对照样品的配制
水提物对照
按配方1各原料药重量总和占比，称取黄芩3g、土荆皮6g、川谏子1g，粉碎，混合，按常规中药水提法制得药液，并用蒸馏水定容至1000mL后4℃保存备用。
中草药单组分活性成分对照
称取配方中各中草药单组分活成分10mg，磨粉并混合。加入适当二甲亚砜(DMSO)超声溶解。将得到混合液0-4℃避光静置2-3d。用去离子水定容至10mL(DMSO终浓度≤5％)，所得配制液4℃避光保存备用。
DMSO对照试验
取10mL浓度5％的DMSO稀释液备用。
实施例3具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物的体外抑菌效果测定及对比结果
1.试验材料
取实施例1中配方1的样品和实施例2中的对照样品用于以下试验。
待测菌种分别为：ATCC200013TM(ATCC)、上海鲫(EC)、湖北仙桃鲫卵(02)、广州佛山鲫卵(04)、江西草鱼(C2)、上海斑马鱼(BMY)(下文以编号形式表达)详情见表2。
表2实验所用菌株
菌株编号 采集时间 鉴定时间 地理来源
ATCC 2010/05/19 2019/11/08 美国标准生物品收购中心
EC 2013/03/20 2019/11/08 上海鲫
02 2010/05/19 2014/12/27 湖北仙桃鲫卵
04 2011/03/19 2014/12/27 广州佛山鲫卵
C2 2013/03/20 2014/12/27 江西草鱼
BYM 2014/06/11 2014/12/27 上海斑马鱼
2.体外抑菌效果测定
菌种复活：将附着了水霉菌休眠孢子的油菜籽置于事先配置好的马铃薯葡萄糖琼脂培养基上。20℃恒温培养两到三天，待菌丝铺满整个培养基。
传代纯化：将上述长满菌丝的培养基切成琼脂块(5*5)mm，接入新的培养基中，重复2-3次。
药液浸泡：将实施例1中配方1的样品和实施例2中的对照样品用二倍稀释法稀释药液，设置浓度梯度，将纯化后的菌株切成琼脂块(5*5)mm，在药液中浸泡24小时(4℃恒温)，后将菌片接入新培养基，观察菌株生长情况。
测定方法
药液浸泡后24小时，无菌丝长出最小药液浓度为最小抑菌浓度(MIC)。
药液浸泡后48小时，无菌丝长出最小药液浓度为最小杀菌浓度(MBC)。
抑菌强度判断标准
根据DMSO对照组数据规定：MIC小于0.125mg/mL抑菌效果较强，MIC大于0.125mg/mL抑菌效果较弱，MIC大于等于0.25mg/mL无抑菌效果。且与对应MBC数据无显著差异。
表3实施例1中配方1的样品和实施例2中的各对照样品最小抑菌浓度测定结果
Figure BDA0002387079840000041
表4实施例1中配方1的样品和实施例2中的各对照样品最小杀菌浓度测定结果
Figure BDA0002387079840000042
由上表可知，本中草药活性成分配方作用以上述6株不同菌株的MIC均小于0.125mg/mL，且与对应MBC数据无明显差异。
试验结果表明：本中草药活性成分组合物不仅相对于对应中草药配方水提物来说具有显著抑菌效果，而且相比较活性成分中的单组分活性成分，其抑菌效果也是更优。对于上述6株菌株都有较强的抑菌杀菌作用，说明本中草药活性成分组合物具有广谱的抗水霉效果。且与对应MIC相比并无显著差异，说明本中草药活性成分组合物具有良好的稳定性。
实施例4
取实施例1中其他配方重复上述试验，结果如表5-6所示。
表5不同配方组合物最小抑菌浓度测定结果
Figure BDA0002387079840000043
Figure BDA0002387079840000051
表6不同配方组合物最小杀菌浓度测定结果
Figure BDA0002387079840000052
综上可见，本发明的具有抗菌作用的中草药活性成分对水产养殖业中由不同地区不同种类的水霉引起的水霉病都表现良好的体外抑菌活性，且具有较强的广谱性。

Claims (9)

1.一种具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物，其特征在于，所述组合物活性成分为黄芩素、土荆皮甲酸、土荆皮乙酸和川谏素，其质量比为2～4：2～4：2～4：1～2。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物的最小抑菌浓度为0.015625~0.0625mg/mL。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物的最小杀菌浓度为0.03125~0.0625mg/mL。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物的活性成分质量比为黄芩素：土荆皮甲酸：土荆皮乙酸：川谏素=2：4：2：2。
5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物的活性成分质量比为黄芩素：土荆皮甲酸：土荆皮乙酸：川谏素=2：3：4：1。
6.权利要求1所述的具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
称取组合物原料，磨粉并混合，加入有机溶剂超声溶解；将得到的混合液避光静置后，用去离子水定容至所需体积。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，将得到的混合液在0-4℃下避光静置2-3d。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂选用二甲基亚砜。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，用去离子水定容后，二甲基亚砜终浓度≤5%。
CN202010101724.0A 2020-02-19 2020-02-19 具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物及制备方法 Pending CN111096970A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010101724.0A CN111096970A (zh) 2020-02-19 2020-02-19 具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物及制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010101724.0A CN111096970A (zh) 2020-02-19 2020-02-19 具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物及制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111096970A true CN111096970A (zh) 2020-05-05

Family

ID=70428060

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010101724.0A Pending CN111096970A (zh) 2020-02-19 2020-02-19 具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物及制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111096970A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112691184A (zh) * 2020-12-31 2021-04-23 西藏自治区农牧科学院水产科学研究所 一种用于抑制水霉的抑菌组合物及其制备方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103656505A (zh) * 2013-12-11 2014-03-26 中国水产科学研究院长江水产研究所 一种抗鱼类水霉菌中药提取物水剂及制备方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103656505A (zh) * 2013-12-11 2014-03-26 中国水产科学研究院长江水产研究所 一种抗鱼类水霉菌中药提取物水剂及制备方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘永涛等: "15种中草药超临界CO_2流体萃取物对2种水霉菌的抑制作用研究", 《淡水渔业》 *
喻运珍等: "28种杀菌剂对水霉菌的毒力测定", 《当代水产》 *
张倩等: "草鱼水霉病的防治", 《养殖与饲料》 *
曹海鹏等: "关于水产养殖动物水霉病防治的探讨", 《当代水产》 *
石浩等: "黄芩提取物对鱼类水霉病病原菌的抑制机制", 《江苏农业科学》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112691184A (zh) * 2020-12-31 2021-04-23 西藏自治区农牧科学院水产科学研究所 一种用于抑制水霉的抑菌组合物及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Boyko et al. Changes in the viability of the eggs of Ascaris suum under the influence of flavourings and source materials approved for use in and on foods
Kajaria et al. Evaluation of antimicrobial activity and bronchodialator effect of a polyherbal drug–Shrishadi
Bankole et al. Synergistic antimicrobial activities of phytoestrogens in crude extracts of two sesame species against some common pathogenic microorganisms
CN102920715B (zh) 一种防治水霉病的复方干粉剂及其制备方法
KR101298184B1 (ko) 어류의 세균성 병원균에 대한 항균 조성물
CN111096970A (zh) 具有广谱抗水霉作用的中草药活性成分组合物及制备方法
KR100782500B1 (ko) 천연 식물 추출물을 이용한 수생곰팡이 억제제
Adejumo et al. Control of dermatophyte-causing agents (Trichophyton mentagrophytes and Trichophyton rubrum) using six medicinal plants
CN113274503B (zh) 一种植物多酚类替抗添加剂及其应用
CN106619887B (zh) 抑杀舒伯特单胞菌的复方中药制剂、制备方法及其应用
Ewhea et al. Anti-microbial and anthelminthic activities of Spilanthes filicaulis (Schum. & Thonn.) CD Adams
KR101719669B1 (ko) 아출 추출물을 유효성분으로 포함하는 어류의 스쿠티카충 감염 질환 예방 또는 치료용 조성물
CN108837029B (zh) 一种防治水产动物水霉病的药物组合物及其制备方法
CN104784194B (zh) 纳他霉素在杀灭小瓜虫和刺激隐核虫中的应用
CN108853314B (zh) 防治青蛙歪头病的中药制剂及其制备方法和应用
KR101317477B1 (ko) 어류의 세균성 병원균에 대한 서어나무의 항균 조성물
Najafi et al. Comparative analysis of antifungal properties of Zataria multiflora Boiss, Eucalyptus spp essence and malachite green on eggs of Kutum (Rutilus frisii Kutum)
CN109700858A (zh) 红三七在制备抗真菌药物及其增效剂中的应用
KR20130013965A (ko) 어류 세균성 병원균에 대한 항진균 및 항균 겸용 조성물
Singh et al. In vitro evaluation of antifungal activity of aqueous extract of lemon grass (Cymbopogon citrates) against pathogenic fungi Saprolegnia parasitica isolated from endangered cold water fish Tor putitora
Borisutpeth et al. Effects of Thai herbs on the control of fungal infection in tilapia eggs and the toxicity to the eggs
CN113491740B (zh) 一种防治白色念珠菌病的组合物及含有该组合物的药物和饲料添加剂
CN115281205B (zh) 一种用于防治桃树桃小食心虫的杀虫组合物
Al-Edani et al. Evaluation of the activity of alcoholic extract of Gujarat plant (Hibiscussabdariffa L.) against some dermatophytes
Melanie et al. The influence of Cassia alata L. leaf extract on egg hatchability and survival of larvae silver barb, Barbonymus gonionotus

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20200505

RJ01 Rejection of invention patent application after publication