CN111084292B - 一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维饲料添加剂,属于饲料添加剂技术领域。该复合型纤维饲料添加剂按重量百分比计,包括以下原料组分:甜菜粕纤维5%~50%、海藻纤维5%~50%份、笋头纤维10%~19%、笋壳纤维1%‑10%、车前子粉21%~23%、枯草芽孢杆菌1%‑2%、乳酸杆菌1%‑2%。该蛋鸡常规饲料中添加0.8%~1.2%的复合型纤维饲料添加剂,能有效改善蛋鸡肠道菌群,促进有益菌繁殖,提高营养分解吸收利用率,改善粪便质量,提升蛋鸡免疫力,对保证和提高产蛋率具有重要意义。

Description

一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂
技术领域
本发明属于饲料添加剂技术领域,具体涉及一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维饲料添加剂。
背景技术
一直以来我国的蛋鸡饲料配方参照美国(NRC)的营养标准,蛋鸡在育成阶段(7-18周)为了防止蛋鸡在开产阶段过度的肥胖一般日粮中的能量和蛋白相对低。实际生产中通过在日粮中添加一些粗纤维(如糠麸类、酒糟类等)来控制体型和重量。然而蛋鸡在产蛋阶段(19周后)所需的日粮能量和蛋白就相对较高,日粮中的粗纤维(5-8%)被玉米和豆粕等能量和蛋白高的原料所替代。蛋鸡的肠道菌群以及肠道中有益因子未得到及时的改变,极易引发肠道疾病的发生进而影响蛋鸡的生产性能。高能量和高蛋白的饲料也容易导致大量的脂肪在肝脏蓄积引起脂肪肝,进而影响蛋鸡的产蛋率。过去在蛋鸡发生肠道性疾病时选用添加抗生素的方式来治疗肠炎,但是目前根据中华人民共和国农业部第176号公告蛋鸡产蛋期内几乎所有的抗生素都被禁止使用,因而只能通过改善产蛋鸡的肠道健康来提高蛋鸡的抗病能力。另外糠麸类、酒糟类等农副产品在生产加工阶段由于储存不当极易产生霉菌毒素(麸皮中单端孢霉烯族毒素检出率99%、DDGS中单端孢霉烯族毒素检出率98%;百奥明饲料添加剂(中国)公司,2018)对蛋鸡的生理危害极大。蛋鸡采食单端孢霉烯族毒素污染的饲料后几天内产蛋量迅速下降,蛋壳变薄,肝脏呈棕黄色,易碎,肾脏肿大,输卵管内尿酸盐沉积,肌胃壁增厚。在蛋鸡生产中选择无毒、无害、安全的粗纤维饲料原料已然成为蛋鸡产业发展的趋势。
发明内容
本发明提供一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维饲料添加剂,用于解决现有蛋鸡在育雏阶段和育成阶段中纤维霉菌毒素的问题,以及蛋鸡产蛋阶段所需能量蛋白和纤维配比的空间问题;同时,还能有效地改善蛋鸡生产中各阶段的肠道健康,减少抗生素的使用提高食品安全。
为实现上述目的,本发明采用以下技术方案:
一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂,按重百分比计,包括以下原料组分:甜菜粕纤维5%~50%、海藻纤维5%~50%份、笋头纤维10%~19%、笋壳纤维1%-10%、车前子粉21%~23%、枯草芽孢杆菌1%-2%、乳酸杆菌1%-2%。
进一步的,一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂,按重量份计,包括以下原料组分:甜菜粕纤维30%、海藻纤维25%、笋头纤维15%、笋壳纤维5%、车前子粉21%、枯草芽孢杆菌2%、乳酸杆菌2%。
一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂的使用方法:在基础日粮中添加重量百分比为0.8%~1.2%的上述促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂。
进一步的,一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂的使用方法:在基础日粮中添加1.2%的上述促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂。
上述一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂在蛋鸡饲养中的应用。
一种含上述促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂的饲料。
本发明的显著优点在于:
本发明的一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂中纤维含量50%以上,以可溶性纤维为主,直接在复合型纤维内配合添加乳酸菌、枯草芽孢杆菌益生菌,避免由于蛋禽肠道菌群紊乱无法快速利用及发酵纤维。复合型纤维发酵后能使肠道产生短链脂肪酸,降低肠道PH,酸性环境抑制有害菌群生长,促进有益菌繁殖,提高营养分解吸收利用率,改善粪便质量。复合型纤维具有强烈的膨胀性,能够满足家禽一定饱腹感,降低啄癖;复合型纤维特殊的结构促进肠道蠕动,促进食糜和消化液充分混合,提高氮的消化和吸收率;改善肠道环境促进肠道黏膜的修复,保护肠细胞的完整性,提高饲料利用率,降低蛋料比。本发明的复合型纤维,减少麸皮添加量,降低霉菌毒素对畜禽的影响,从源头上杜绝了由于霉菌毒素中毒而造成的经济损失,同时减少霉菌毒素吸附剂的添加。
随着研究的深入,适量复合型纤维,能提高蛋白质及淀粉营养物质在肠道内滞留时间,提高利用率。同时复合型纤维能促进胃肠道发育,增加肠道宽度及长度。更为重要的是复合型纤维能刺激肠绒毛及隐窝发育,肠道黏膜的免疫机能(动物体内总量60%以上的免疫细胞集中在肠道内,70%~80%的免疫球蛋白(尤其是 IgA)合成细胞集中在肠道内),减少肠道疾病。实验表明当饲料中复合型纤维含量达到2.8%~5%时,才会对肠道起到刺激作用。然而现实饲料配方中的复合型纤维很难达到这个数值,特别是纯豆粕型配方,粗纤维含量只在2.4%左右。可见在蛋鸡饲料中配入一定含量的复合型纤维饲料,能提高蛋鸡肠道机能,促进肠黏膜发育,既提高蛋鸡对饲料的消化利用率,也降低了蛋鸡患病几率。对保证和提高产蛋率具有很大的意义。
附图说明
图1蛋鸡肠道细胞爬片图。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解,下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明,但是下述的实例仅仅是本发明其中的例子而已,并不代表本发明所限定的权利保护范围,本发明的权利保护范围以权利要求书为准。
实施例1
编号为1-10的复合型纤维饲料添加剂组分配比如表1所示,分别制成10 种的复合型纤维饲料添加剂,每种添加剂的总量均为50kg,具体是将各组分原料放置于高速混料机中充分混合,得到每种复合型纤维饲料添加剂样品。
表1复合型纤维添加剂各组分的配比
Figure 954016DEST_PATH_IMAGE001
每个编号的添加剂各自按表1的原料配方制备成,复合型纤维添加剂。然后按质量百分比为1%添加至蛋鸡基础日粮中进行饲喂。每一编号组各组选用64只20周龄、体重相近、健康状况良好的成年海兰褐种公鸡,随机分为4组,每组4个重复,每个重复4只鸡。采用全收粪法进行代谢试验。于每重复取出1只体质健康的鸡,单笼饲养,代谢试验开始前均进行三天预饲,之后采用全收粪法进行代谢试验。
蛋鸡基础日粮的原料配方为:
Figure 379312DEST_PATH_IMAGE002
收粪开始前停饲12h,然后自由采食三天,收集三天粪便,再停饲12h,待粪便排空,试验期间鸡饲喂颗粒料,自由饮水。将收集的粪便按100g鲜粪加入10%的盐酸10mL充分混匀后置于样品袋中,在20℃冰箱中存放备用。准确记录采食量、排粪量和取样量,采用四分法采样,在烘箱中以65℃烘干至恒重,经过24h回潮,然后粉碎过0.42mm 孔径的筛子。按《饲料分析及饲料质量检测技术》【7】中的方法测定饲料和粪样中粗蛋白(CP)粗脂肪(EE)、水分的含量,每个指标分析时均做平行。
表2蛋鸡消化性能测定
Figure 664275DEST_PATH_IMAGE003
Figure 98799DEST_PATH_IMAGE004
由表2可以分析各组间粗蛋白、粗脂肪和水分之间编号6与其他各组间存在差异显著,所以编号为6复合型纤维饲料添加剂为最佳配比。
实施例2
试验采用单因子完全随机区组设计,将60日龄体重相近的健康海兰褐产蛋鸡384只,随机分为4个处理(饲粮中分别添加0、0.8% 、1.0%和1.2%的实施例1中编号为6的复合型纤维添加剂),每个处理组24个重复,每个重复4只鸡。每个处理分别采食1种添加复合型纤维试验饲粮,预试期l周,60日龄正式饲喂。
试验饲粮在参照NY/T 33—2004和NRC(1994)的基础上,结合海兰褐产蛋鸡饲养手册配制,试验采用玉米一豆粕 (粉料)型饲粮(表2) 采用半开放式鸡舍3层立体笼养,每排相连的4个鸡笼(50 cm×50 cm×45 cm),每个笼子作为1个重复,每笼4只鸡(共用96个鸡笼),各重复平均分布在上、中、下3排阶梯式笼养架上。采用自然加人工补光,每天恒定光照16 h(自动照明控制系统),强度为14 LX。
饲喂干粉料,自由采食,每天08:00和l4:30各喂料1次,匀料4次;乳头式饮水器,自由饮水。按正常程序防疫,专人管理;每周带鸡消毒和每天清理鸡粪1次,常规免疫;第120日龄08:00空腹称重。每天14:00记录温度和湿度、天气情况;随气候、季节和阳光而变化,试验期间温度变化范围在4.0—15.0℃ ;相对湿度在40% 一70% 。
1. 蛋鸡体重检测
120日龄蛋鸡进行称重并统计(表3),对照组平均体重1613.67g、试验1组平均体重1604.44 g,试验2组体重 1585.11 g以及试验3组体重 1599.33 g,对照组与试验2组体重相差最大28.56 g 。各组体重不存在差异性(P>0.05)。蛋鸡17周龄标准体重为1.46kg,对照组与标准体重偏离最大,试验2组与标准体重差距最小。
表3蛋鸡体重数据对比
Figure 686906DEST_PATH_IMAGE005
通过spss statistics 17 进行差异性分析,同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05
2.脏器相关数据检测
120日龄健康蛋鸡每组随机屠宰3只并收集各脏器相关数据,由表4可看出,肠道重量对照组最重79.46g,试验2组肠道重量最轻为65.13g,二者相差14.33g,各组间差异不显著(P>0.05);肠道指数对照组与试验2组相差0.82%,组间差异不显著著(P>0.05);对照组肠道长度为141cm,试验3组肠道长度为123.11cm 二者相差17.89cm,差异显著(P<0.05),其他组间差异不显著(P>0.05);肠道肠道指数是指蛋鸡肠道长度与蛋鸡体重的比值,对照组肠道长度指数最高 8.74,最低为试验3组肠道肠道指数7.7,二者相差1.04,差异显著(P<0.05),其他组间差异不显著(P>0.05);腺胃重量中对照组腺胃最大,重量8.12g,试验3组腺胃最小,重量7.06g 差异显著(P<0.05),其他组间差异不显著(P>0.05);腺胃指数中同样对照组腺与试验3组差异显著(P<0.05),其他组间差异不显著(P>0.05);肝脏重和肝脏指数各组间均差异不显著(P>0.05);试验3组脾脏最重3.46g,而试验组脾脏最轻2.73g,相差0.73g,差异显著(P<0.05),其他组间差异不显著(P>0.05);脾脏指数试验3组为0.22%,对照组为0.17%,相差0.05%差异显著(P<0.05),其他组间差异不显著(P>0.05);肌胃中对照组34.26g、试验1组26.36g、试验2组25.96g及试验3组23.98g,对照组与试验1组、试验2组和试验3组差异显著(P<0.05),其他组间差异不显著(P>0.05);肌胃指数中对照组最高为2.12%,试验1组为1.64%、试验2组为1.64及试验3组为1.5%,对照组与试验1组、试验2组和试验3组差异显著(P<0.05),其他组间差异不显著(P>0.05)。
表4随机抽样脏器重量及脏器指数对比
Figure 486366DEST_PATH_IMAGE006
通过spss statistics 17 进行差异性分析,同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05
3.蛋鸡生产性能的检测
120日龄开产后蛋鸡采食量、粪便量、产蛋率和破畸蛋率进行统计,由表5可以看出,产蛋率最高为试验3组 50.69%,对照组产蛋率最低仅为41.9%,试验3组和对照组产蛋率差异显著(P<0.05),其他组间差异不显著(P>0.05);各组间平均蛋重在49.51g~50.54g之间,组间差异不显著(P>0.05);破畸蛋率最低为试验3组30.83%,最高为对照组33.84%,组间差异不显著(P>0.05);粪便量对照组最重为9.58kg,试验3组最轻为8.79kg,二者间差异显著(P<0.05),其他组间差异不显著(P>0.05)。
表5添加不同比例复合纤维日粮对蛋鸡生产性能的影响
Figure 792714DEST_PATH_IMAGE007
通过spss statistics 17 进行差异性分析,同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05
实施例3
将384只一日龄海兰褐蛋鸡随机分成4个处理组,每个处理组24个重复,每个重复4只鸡。4个处理组分为试验组1、试验组2、试验组3、对照组,试验组1、试验组2、试验组3中分别添加0.8%、1.0%、1.2%的实施例1中编号为6的复合型纤维添加剂。按照《标准化海兰褐蛋鸡饲养标准》进行饲养管理。
1.蛋鸡的免疫球蛋白含量检测
于120、180日龄每个处理组选5只体重相近的蛋鸡,心脏采血采集血液,分离血清用于IgA、IgG和IgM的测定。
由表7可以看出在120d检测中,试验3组IgA含量最高623.16μg/mL,试验组2次之621.32μg/mL,二者差异不显著,对照组IgA含量最低528.38μg/mL,试验3组和对照相差94.78μg/mL,试验组2、试验组3和试验组1、对照组差异显著(P<0.05),试验组1和对照组差异显著(P<0.05);IgG中,试验组3含量最高1761.56μg/mL,对照组最低1692.73μg/mL,二者相差68.83μg/mL,各试验组间差异显著(P<0.05);IgM中,试验组3含量最高682.30μg/mL,对照组最低620.36μg/mL,二者相差61.94μg/mL,各试验组间差异显著(P<0.05)。
在180d对血清中免疫球蛋白检测中,IgA试验组3最高628.31μg/mL,比120d提升了5.15μg/mL,对照组最低603.31μg/mL,但和120d同组相比提升了20.93μg/mL,试验组1和试验组2 IgA含量较120d均有所提高,各试验组间差异显著(P<0.05);IgG中,试验组3最高1778.75比120d提高了17.79μg/mL,对照组最低 1716.57μg/mL比120d 提高了 23.84μg/mL试验组1和试验组2 IgG含量较120d均有所提高,各试验组间差异显著(P<0.05);IgM中,试验组3最高675.23μg/mL比120d下降了25.47μg/mL,对照组最低637.43μg/mL比120d 提高了17.07μg/mL试验组1和试验组2 IgG含量较120d均有所提高,各试验组间差异显著(P< 0.05)。
本试验可以看出试验组3配方与其它试验组和对照组相比,IgA、IgG、IgM均比其它组高且差异显著,表明试验组3配方最能够有效刺激机体产生免疫球蛋白,提高机体免疫力。
表7添加不同比例复合纤维日粮蛋鸡的免疫球蛋白含量
Figure 33858DEST_PATH_IMAGE008
过spss statistics 17 进行差异性分析,同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05
2.蛋鸡胫骨检测
蛋鸡生产性能的高低与其体型发育和体重直接相关,其中体型标准作为第一限制因素,体重作为第二限制因素,生产中则以胫长和体重作为具体指标。本试验胫骨的骨长和骨围在蛋鸡的第13周龄测定,检测添加复合型纤维对蛋鸡的胫骨长和胫骨围的影响。
表8添加不同比例复合型纤维饲料对蛋鸡胫骨长和胫骨围的影响
Figure 273209DEST_PATH_IMAGE009
过spss statistics 17 进行差异性分析,同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05
由表8可知,胫长试验组3最长 11.05cm,对照组最短9.06cm,二者相差1.99cm,对照组与试验组1、试验组2、试验组3差异显著(P<0.05),其它各组间差异不显著(P>0.05);胫围中,试验组3最大为3.95cm,对照组最小 3.72cm,二者相差0.23cm,各组间差异不显著(P>0.05)。
3.蛋鸡血液激素检测
血液激素指标试验18、22、26、30、34、38周龄时,每组抽取10只鸡,用肝素抗凝管进行心脏采血5 mL,3 000 r/min离心10 min分离血清,-20℃保存待用。测定激素包括促黄体生成素(LH) 、腺垂体释放促卵泡成熟素(FSH),其中LH、FSH采用放射免疫法(PdA)测定。数据处理与分析采用SPSS 12.0统计软件的ANOVA过程对试验数据进行统计分析,采用Duncan法进行多重比较。试验结果数据以平均值±标准差表示。
表9促黄体生成素(LH)
Figure 243570DEST_PATH_IMAGE010
过spss statistics 17 进行差异性分析,同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05
由表9可知,促黄体生成素(LH)在18周龄时,1.2%组最高 1.20%,对照组最低1.03%,二者相差0.17,1.2%组与对照组、0.8%组、1.0%组差异显著(P<0.05);1.0%组与对照组差异显著(P<0.05),其它各组差异不显著(P>0.05)。22周龄时,1.2%组最高为1.33,对照组最低为1.12,二者相差0.21,1.2%组与对照组、0.8%组差异显著(P<0.05),与1.0%组差异不显著(P>0.05);同时对照组与0.8%组、1.0%组差异显著(P<0.05),其它各组差异不显著(P>0.05)。26周龄时1.2%组最高为1.58,对照组最低为0.37,各组间差异显著(P< 0.05);34周龄时1.2%组最高为2.7,对照组最低为2.37,二者相差0.33,对照组与0.8%组、1.0%组、1.2%组差异显著(P<0.05),其它各组间差异不显著(P>0.05);38周龄时1.2%组最高 2.82,对照组最低2.39,二者相差0.43,1.2%组与对照组、0.8%组、1.0%组差异显著(P< 0.05);对照组与0.8%组、1.0%组差异显著(P<0.05),其它组间差异不显著(P>0.05)。
表10腺垂体释放促卵泡成熟素(FSH)
Figure 506056DEST_PATH_IMAGE011
Figure 482714DEST_PATH_IMAGE012
过spss statistics 17 进行差异性分析,同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05
由表10可知,腺垂体释放促卵泡成熟素(FSH)在18周龄时1.2%组最高 0.67,对照组最低0.49,二者相差0.18,对照组与1.0%组、1.2%组差异显著(P<0.05),其余各组间差异不显著(P>0.05);22周龄时,1.2%最高为0.72,对照组最低为0.55,二者相差0.17,对照组与1.0%组、1.2%组差异显著(P<0.05),其余各组间差异不显著(P>0.05);26周龄时,1.2%组最高 0.76,对照组最低为 0.58,对照组与0.8%组、1.0%组、1.2%组差异显著(P<0.05),其它各组间差异不显著(P>0.05);30周龄时,1.2%组最高为2.48,对照组最低为 0.82,二者相差1.66,1.2%组与对照组、0.8%组、1.0%组差异显著(P<0.05),对照组与0.8%组、1.0%组差异显著(P<0.05),其它组间差异不显著(P>0.05);34周龄时,1.2%组最高为2.67,对照组最低为2.42,二者相差 0.25,1.2%组与对照组、0.8%组差异显著(P<0.05),对照组与0.8%组、1.0%组、1.2%组差异显著(P<0.05),其它组间差异不显著(P>0.05);38周龄时,1.2%组最高为2.74,对照组最低为2.47,二者相差0.27,1.2%组与对照组、0.8%组、1.0%组差异显著(P<0.05),对照组与0.8%、1.0%组、1.2%组差异显著(P<0.05),其它组间差异不显著(P>0.05)。
4. 肛温的测定
在加料前测早晚各一次。左手安抚好鸡,右手将消毒过的体温计缓慢插入鸡的肛门,3分钟后读取体温计的读数。环境温度超过一定界限时。机体调动一切体热调节交换能力以维持其体热平衡,直肠温度才出现升高和下降。
表11 蛋鸡不同日龄肛温的情况
Figure 983097DEST_PATH_IMAGE013
Figure 186676DEST_PATH_IMAGE014
复合型纤维在蛋鸡的肠道后段可溶性和部分不可溶性的纤维,在益生菌的作用下发酵成短链的脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸)以及功能性的氨基酸,通过血液循环到鸡的脑部作用于下丘脑到达降低蛋鸡抗热应激的能力。如表11可见各组间的肛温差异性不显著,但从表中可见蛋鸡在不同日龄中各组间的体温,随着复合型纤维的添加量的增加有下降的趋势。
4. 蛋壳指数检测
蛋壳强度使用FGX.5R型蛋壳强度测定仪测定,将蛋垂直放在蛋壳强度测定仪上,钝端朝上,测定蛋壳表面单位面积上承受的压力,单位为kg/c ;蛋壳厚度:使用ETG一1061A型蛋壳厚度测定仪进行测定,分别测定钝端、中端、锐端3点厚度值,求其平均值,单位为mm;蛋形指数:使用游标卡尺测量蛋的纵径和横径,以mE为单位,精确度为0.t mm,蛋形指数=纵径/横径;蛋壳颜色:使用QcR型蛋壳颜色测定仪进行测定,白色为100,黑色为0。
表12 添加不同比例海兰褐蛋鸡22周龄部分蛋壳指数的比较
Figure 670878DEST_PATH_IMAGE015
过spss statistics 17 进行差异性分析,同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05
由表12可知,蛋壳强度中,1.2%组最高 为2.91kg/cm2,对照组最低为2.79kg/cm2,二者相差0.12kg/cm2,1.2%组与对照组差异显著(P<0.05),其它各组间差异不显著(P>0.05);蛋壳厚度中,1%组最后为0.34mm,对照组最薄为0.30mm,二者相差0.04mm,各组间差异不显著(P>0.05);蛋形指数中,1.2%组最高为1.28,对照组最低1.26,二者相差0.02,各组间差异不显著(P>0.05);蛋壳颜色中,0.8%组最高为24.71,对照组最低为24.65,二者相差0.06,各组间差异不显著(P>0.05)。
表13添加不同比例海兰褐蛋鸡30周龄部分蛋壳品质的比较
Figure 250896DEST_PATH_IMAGE016
过spss statistics 17 进行差异性分析,同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05
由表13可知,在30周龄时在蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋形指数及蛋壳颜色上,各组间差异均不显著(P>0.05)。
6.蛋鸡肠道发育检测
各组120日龄的蛋鸡经屠宰后,取十二指肠前端2-3cm的肠道,经固定24小时(4%PA灌注取材的后固定6~8小时)以后,流水冲洗24小时,置于70%~80%乙醇中。对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。吹干或自然晾干细胞 爬片后,中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可。
小肠是消化道内营养物质吸收和转运的主要部位,吸收是小肠绒毛的主要功能,所以动物小肠粘膜结构的良好状态是养分消化吸收和动物正常生长的生理学基础。绒毛高度与隐窝深度反映了肠道的功能状况,绒毛高度与成熟细胞数量呈显著相关,只有成熟的绒毛细胞才具有吸收养分的功能。由图1可见试验组3中绒毛高度比对照组、试验组1、试验组2更高,试验组2的绒毛高度比试验组1和对照组更高,试验组1的绒毛高度比对照组高,所以说添加复合型纤维的各组绒毛高度都高于对照组。从上图可见各组间的十二指肠的隐窝深度和成熟细胞数量与绒毛高度的结果一致,添加复合型纤维的试验组都好于对照组,且随着添加量的增加效果明显。
7.复合纤维对蛋鸡肠道菌群的影响
(1)Alpha多样性分析
用于评估Alpha多样性的指标包括ACE、Chao 1、Shannon、Simpson。ACE 用于估计菌群中含有OTU 数目的指数,Chao 1用于评估菌群丰富度,数值越大代表样本中所含物种越多,Simpson 指数是用于估算样品中微生物多样性指标之一,Simpson 指数值越大,群落多样性越低,Shannon 指数在评估微生物多样性时综合考虑了群落的丰富度和均匀度,Shannon 值越大,群落多样性越高。
由表14可知,T1、T2、T3的Shannon值都显著高于CK(P < 0.05),T1、T2、T3三组间差异不显著(P> 0.05),表明添加复合纤维60d后可显著提高肠道菌群的多样性。添加复合纤维60d后对ACE、Chao1、Simpson指标没有产生明显影响(P> 0.05)。
由表15可知,T1、T2、T3的Chao 1值都显著高于CK(P< 0.05),T1、T2、T3三组间差异不显著(P> 0.05),表明添加复合纤维120d后可显著提高肠道菌群的多样性。添加复合纤维120d后对ACE、Shannon、Simpson指标没有产生明显影响(P> 0.05)。综上所述,添加复合纤维可显著提高蛋鸡肠道菌群的多样性。
表14 添加复合纤维60d后各组样品菌群Alpha多样性指数结果
Figure 924892DEST_PATH_IMAGE017
注:CK代表只饲喂基础日粮,T1、T2、T3分别代表在基础日粮中添加0.8%、1%、1.2%的复合纤维。n= 9,结果以平均值±标准误表示。同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05)。
表15 添加复合纤维120d后各组样品菌群Alpha多样性指数结果
Figure 33793DEST_PATH_IMAGE018
Figure 536450DEST_PATH_IMAGE019
注:CK代表只饲喂基础日粮,T1、T2、T3分别代表在基础日粮中添加0.8%、1%、1.2%的复合纤维。n= 6,结果以平均值±标准误表示。同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05)。
(2)肠道菌群组成分析
由表16和表17知,基础日粮中添加复合型纤维饲料添加剂60d后,肠道菌群在门水平上,主要由Bacteroidetes(拟杆菌门)、Firmicutes(厚壁菌门)、Proteobacteria(变形菌门)和Verrucomicrobia(疣微菌门)组成,其中Bacteroidetes(拟杆菌门)的相对丰度最高;基础日粮中添加复合型纤维饲料添加剂120d后肠道菌群主要由Bacteroidetes (拟杆菌门)、Firmicutes(厚壁菌门)、Proteobacteria(变形菌门)和Synergistetes(互养菌门)组成,其中Bacteroidetes(拟杆菌门)的相对丰度最高。各组间的菌门差异均不显著。
表16在门水平上分析添加复合纤维30d后对肠道菌群相对丰度的影响
Figure 123420DEST_PATH_IMAGE020
表17在门水平上分析添加复合纤维60d后对肠道菌群相对丰度的影响
Figure 129553DEST_PATH_IMAGE021
由表18和表19 知,基础日粮中添加复合型纤维饲料添加剂60d和120d后,在科水平上,4个组的肠道菌群均主要由Bacteroidaceae(拟杆菌科)、Ruminococcaceae(疣微菌科)、Tannerellaceae和Prevotellaceae(普雷沃氏菌科)组成。
表18在科水平上分析添加复合纤维30d后对肠道菌群相对丰度的影响
Figure 609689DEST_PATH_IMAGE022
表19在科水平上分析添加复合纤维60d后对肠道菌群相对丰度的影响
Figure 599641DEST_PATH_IMAGE023
由表20和表21可知,在属水平上,试验组主要由Bacteroides(拟杆菌属), Parabacteroides,Prevotella(普雷沃菌属),Oscillospira(颤螺旋菌属),RuminococcusPhascolarctobacterium, Sutterella(萨特氏菌属Ruminococcus(瘤胃球菌属组成其中Bacteroides(拟杆菌属的相对丰度最高。添加复合纤维60d后,T1组的Parabacteroides,Oscillospira相对丰度明显高于CK组(P<0.05),T1组、T2组和T3组间差异不显著(P>0.05),CK组的Ruminococcus的相对丰度明显高于其它3组(P<0.05),T2组的Phascolarctobacterium相对丰度明显高于其它3组(P<0.05),CK组的Sutterella(萨特氏菌属相对丰度明显低于其它3组(P<0.05)。4组间Bacteroides(拟杆菌属),Prevotella 普雷沃菌属Ruminococcus(瘤胃球菌属的相对丰度差异均不显著(P> 0.05)。
当添加复合纤维120d后,CK组的Phascolarctobacterium的相对丰度明显高于其它3组(P<0.05),而CK组的Ruminococcus的相对丰度显著低于其它3组(P<0.05)。4组间Oscillospira,Parabacteroides,Prevotella,RuminococcusSutterella的相对丰度差异均不显著(P> 0.05)。
表20在属水平上分析添加复合纤维60d后对肠道菌群的影响
Figure 255882DEST_PATH_IMAGE024
注:CK代表只饲喂基础日粮,T1、T2、T3分别代表在基础日粮中添加0.8%、1%、1.2%的复合纤维。n= 9,结果以平均值±标准误表示。同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05)。
表21在属水平上分析添加复合纤维120d后对肠道菌群的影响
Figure 850942DEST_PATH_IMAGE025
注:CK代表只饲喂基础日粮,T1、T2、T3分别代表在基础日粮中添加0.8%、1%、1.2%的复合纤维。n= 6,结果以平均值±标准误表示。同一项目字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05)。
3差异物种分析
采用LEfSe分析各组间的差异菌属,结果见表22和表23 。结果显示,添加复合纤维60d后,T1组的优势菌为Barnesiellaceae、Synergistaceae、Synergistales、Synergistia,T2组的优势菌为Christensenellaceae、Veillonellaceae(韦荣球菌科)、Alcaligenaceae(产碱杆菌科)、Burkholderiales(伯克霍尔德氏菌目)、Betaproteobacteria(β-变形菌)。添加复合纤维120d后,显著提高了Desulfovibrionaceae(脱硫弧菌科)、Desulfovibrionales(脱硫弧菌目)、Deltaproteobacteria(n. δ 变形菌纲)、Verrucomicrobiaceae(疣微菌科)、Verrucomicrobiales(疣微菌目)、Verrucomicrobiae(疣微菌纲)的相对丰度。综上,添加复合纤维可显著提高益生类菌如Alcaligenaceae(产碱杆菌科)和Verrucomicrobiaceae(疣微菌科)的相对丰度。
表22添加复合纤维60d后差异物种分析
Figure 570155DEST_PATH_IMAGE026
Figure 312983DEST_PATH_IMAGE027
Figure 772915DEST_PATH_IMAGE028
Figure 19219DEST_PATH_IMAGE029
表23 添加复合纤维120d后差异物种分析
Figure 437562DEST_PATH_IMAGE030
Figure 870949DEST_PATH_IMAGE031
Figure 131641DEST_PATH_IMAGE032
以上所述仅为本发明的较佳实施例,凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰,皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (4)

1.一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂,其特征在于:按重量百分比计,包括以下原料组分:甜菜粕纤维30%、海藻纤维25%、笋头纤维15%、笋壳纤维5%、车前子粉21%、枯草芽孢杆菌2%、乳酸杆菌2%。
2.如权利要求1所述的一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂在制备蛋鸡基础日粮中的应用,其特征在于:添加0.8%~1.2%的上述促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂。
3.根据权利要求2所述的一种促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂在制备蛋鸡基础日粮中的应用,其特征在于:添加1.2%的上述促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂。
4.一种含如权利要求1所述的促进蛋鸡生长性能的复合型纤维添加剂的饲料。
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Assignor: INSTITUTE OF ANIMAL HUSBANDRY AND VETERINARY, FUJIAN ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES

Contract record no.: X2023350000363

Denomination of invention: A composite fiber additive that promotes the growth performance of laying hens

Granted publication date: 20221209

License type: Common License

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