CN111034557B - 一种大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法 - Google Patents

一种大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111034557B
CN111034557B CN201911316869.6A CN201911316869A CN111034557B CN 111034557 B CN111034557 B CN 111034557B CN 201911316869 A CN201911316869 A CN 201911316869A CN 111034557 B CN111034557 B CN 111034557B
Authority
CN
China
Prior art keywords
seedling
barley
seedlings
seeds
inoculation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201911316869.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111034557A (zh
Inventor
潘雨涵
许如根
吕超
郭宝健
王菲菲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yangzhou University
Original Assignee
Yangzhou University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yangzhou University filed Critical Yangzhou University
Priority to CN201911316869.6A priority Critical patent/CN111034557B/zh
Publication of CN111034557A publication Critical patent/CN111034557A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111034557B publication Critical patent/CN111034557B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G22/00—Cultivation of specific crops or plants not otherwise provided for
    • A01G22/20—Cereals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01C—PLANTING; SOWING; FERTILISING
    • A01C1/00—Apparatus, or methods of use thereof, for testing or treating seed, roots, or the like, prior to sowing or planting
    • A01C1/08—Immunising seed
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01C—PLANTING; SOWING; FERTILISING
    • A01C23/00—Distributing devices specially adapted for liquid manure or other fertilising liquid, including ammonia, e.g. transport tanks or sprinkling wagons
    • A01C23/02—Special arrangements for delivering the liquid directly into the soil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
    • A01G24/10—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing inorganic material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
    • A01G24/20—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material
    • A01G24/28—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material containing peat, moss or sphagnum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G27/00—Self-acting watering devices, e.g. for flower-pots
    • A01G27/02—Self-acting watering devices, e.g. for flower-pots having a water reservoir, the main part thereof being located wholly around or directly beside the growth substrate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G7/00—Botany in general
    • A01G7/06—Treatment of growing trees or plants, e.g. for preventing decay of wood, for tingeing flowers or wood, for prolonging the life of plants

Abstract

本发明属于农业技术领域，具体涉及一种大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法，包括以下步骤：将大麦种子休眠破除与消毒后均匀排放于湿润纸床上，置于发芽箱内催芽，出芽后移栽到装有基质的育苗钵中，将育苗钵整齐放置于塑料槽中，将塑料槽放入人工气候箱中培养，在塑料槽中加水，幼苗长至二叶一心期进行大麦黄花叶病病毒接种；将接种后幼苗置于人工气候箱进行遮光处理；遮光处理结束后，置于光照、黑暗交替的光照周期中进行培养；在排放育苗钵的长方形塑料水槽内加入营养液，保证幼苗生长所需要水分和养分的供应。本发明所述方法可以排除非目标病毒的干扰、简化操作流程，保证病毒接种成功率及病毒的均匀扩散。

Description

一种大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法
技术领域
本发明属于农业技术领域，具体涉及一种大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法。
背景技术
大麦黄花叶病是由大麦黄花叶病毒(Barley yellow mosaic virus,BaYMV)与大麦温和花叶病毒(Barley mild mosaic virus,BaMMV)引起的土传性病毒病，主要危害我国冬大麦的生长。病毒于苗期通过土壤禾谷多黏菌(Polymyxa graminis)侵入大麦幼苗根部，再随水分运输至植株的叶片。次年春季的气温回升后，病毒在叶片内快速增殖，破坏大麦叶片的叶绿体，使叶片黄化，影响光合效率，最终影响大麦产量和籽粒品质。严重时，大麦可以减产70％-80％。大麦黄花叶病抗性种质发掘、抗性遗传机理研究及抗病品种选育均依赖抗性表型鉴定，常规大麦黄花叶病的抗性鉴定多采用大田自然诱发病圃鉴定法，其发病程度受年度间气候条件影响较大，且每年只能鉴定一次。室内大麦幼苗叶片接种病毒鉴定可以实现一年多次或多代的抗性鉴定，接种用大麦幼苗及接种后大麦幼苗的培养是接种效果的关键。
大麦幼苗室内培养多以园土为主，其肥力较高，但干时土表层易板结，湿时通气透水性差，不适合大麦黄花叶病室内接种幼苗及接种后病毒扩散的培养要求，急需发明适用于大麦黄花叶病室内接种幼苗及接种后幼苗的培养方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法，排除非目标病毒的干扰、降低培养成本、简化操作流程，保证病毒接种成功率及病毒的均匀扩散。
为了实现上述目的，本发明的技术方案是：
一种大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法，包括以下步骤：将大麦种子休眠破除与消毒后均匀排放于湿润纸床上，置于发芽箱内催芽，出芽后移栽到装有基质的育苗钵中，将育苗钵整齐放置于带排水孔的塑料槽中，将塑料槽放入人工气候箱中培养，在塑料槽中加水，保持塑料槽中的水高为1cm；幼苗长至二叶一心期进行大麦黄花叶病病毒接种；将接种后幼苗置于人工气候箱进行遮光处理；遮光处理结束后，置于光照、黑暗交替的光照周期中进行培养；在排放育苗钵的长方形塑料水槽内加入营养液，保证幼苗生长所需要水分和养分的供应。
进一步的，所述基质的制备方法为：将泥炭土和无病园土按3:1的体积比混匀，在121℃下湿热灭菌15分钟，取出后冷却至室温。
进一步的，所述育苗钵为塑料材质，底部设置有多个网孔，尺寸为上边长7.0cm×下边长6.0cm×高8.0cm。
进一步的，所述塑料槽的尺寸为42.0cm×宽28.0cm×高8.0cm，在距离底部高1cm处设置有一个排水孔，便于水分的控制。
进一步的，所述休眠破除与消毒方法包括：选取当年收获、饱满整齐的大麦品种种子，用30％浓度的双氧水完全浸种，经15分钟后取出晾干。
进一步的，所述催芽方法包括：将消毒处理后大麦种子均匀排放湿润纸床上，置于25℃的发芽箱内催芽约2日-3日后，芽长至2cm后用于移栽。
进一步的，每个育苗钵移栽4株苗，移栽深度为2cm-3cm，并插入标明大麦的品种、移栽时间的塑料签。
进一步的，幼苗移栽后接种前的生长环境为：白天光照模式持续时间14h，光照强度15000lux，环境温度16℃，相对湿度80％；夜晚无光模式持续时间10h，环境温度12℃，相对湿度80％。
进一步的，所述遮光的处理为：接种后将幼苗置于温度18℃，湿度80％的暗环境，处理时间为24h。
进一步的，遮光处理后幼苗的生长环境为光照周期14h，光照强度12000lux，温度16℃，湿度80％、暗周期10h，温度12℃，湿度80％。
本发明提供的技术方案实现了如下有益效果：
(1)本发明旨在幼苗培养技术，提供专门用于病毒病接种的幼苗和接种后幼苗的培养。采用本方法可以获得一致性的被接种材料，接种后的一致性培养有利于病毒的扩散；
(2)本发明结合大麦幼苗生长条件，利用泥炭土与园土的优缺点互补，保持了园土肥力较高的优点，使得幼苗生长过程中不用增施营养液，同时配置成的育苗基质透气性好、保水性佳。既降低了成本，也简化操作流程；
(3)本发明在播种前对育苗基质与大麦种子的消毒，避免了非接种病毒对试验的影响，也确保接种幼苗的健康生长；
(4)本发明利用虹吸原理，在育苗钵底部浸水或营养液，保证水分和养分供应均匀一致。确保大麦黄花叶病接种幼苗生长一致及接种后幼苗的均匀生长，从而保证病毒扩散的均衡性。克服以往通过浇水或营养液方法供水或养分的不均衡性和不稳定性。
(5)本发明中的塑料水槽含有排水孔，方便控制水面高度，克服因供水过多导致的湿害等不利因素。
附图说明
图1为长方形塑料槽的示意图；
图2为方体塑料育苗钵的示意图；
图3为大麦种子的休眠破除与消毒；
图4为大麦种子的催芽；
图5为大麦芽苗的移栽图；
图6为接种用幼苗的培养；
图7为接种后幼苗的培养。
具体实施方式
为了阐明本发明的技术方案，下面结合具体实施方式对本发明做进一步的介绍。
实施例1
(1)育苗基质的制备
将泥炭土和无病园土按3:1的体积比混匀，在121℃下湿热灭菌15分钟，取出后冷却至室温。所述泥炭土为丹麦品氏基质。选用上边长7.0cm×下边长6.0cm×高8.0cm规格的方体塑料育苗钵分装育苗基质，所述育苗钵底部为网状结构，设置有多个网孔，并整齐排放在长42.0cm×宽28.0cm×高8.0cm规格的长方形塑料槽内备用。距离塑料槽底部1cm处设置有排水孔1。
(2)大麦种子精选、休眠破除与消毒
选取对大麦黄花叶病抗感不同当年收获、饱满整齐的大麦品种种子，用30％浓度的双氧水完全浸种，15分钟后取出晾干。
(3)大麦种子的催芽
将(2)处理的大麦种子均匀排放湿润纸床上，置于25℃的发芽箱内催芽。约2日-3日后，芽长至2cm左右，即可用于移栽。
(4)大麦芽苗的移栽
将(3)中生长一致的芽苗，移栽到装有基质的方体塑料育苗钵中，每钵移栽4株苗，移栽深度控制2cm-3cm。并插入标明大麦的品种、移栽时间的塑料签。
(5)接种用幼苗的培养
将(4)中移栽好的大麦幼苗，放入人工气候箱中变温培养，调节培养箱运行模式如下：白天光照模式持续时间14h，光照强度15000lux，环境温度16℃，相对湿度80％；夜晚无光模式持续时间10h，环境温度12℃，相对湿度80％。利用营养土的虹吸原理，在排放育苗钵的长方形塑料水槽内加入高度为1.0cm水，确保发芽所需要水分供应。约3周，幼苗长至二叶一心期进行大麦黄花叶病病毒接种。
(6)接种后幼苗的培养
将接种后幼苗置于人工气候箱进行遮光处理24h(温度18℃，湿度80％)。遮光处理结束，幼苗的生长环境严格控制在光照周期14h(光照强度12000lux，温度16℃，湿度80％)、暗周期10h(温度12℃，湿度80％)。利用营养土的虹吸原理，在排放育苗钵的长方形塑料水槽内加入高度为1.0cm营养液，确保幼苗生长所需要水分和养分的供应，保证接种幼苗的正常生长及病毒的均衡扩散。
实施例2
(1)育苗基质的制备
将丹麦品氏基质和无病园土按3:1的体积比混匀，用牛皮纸袋封装，在121℃下湿热灭菌15分钟，取出冷却至室温。选用12个上边长7.0cm×下边长6.0cm×高8.0cm规格的方体塑料育苗钵分装育苗基质，并整理排放在长42.0cm×宽28.0cm×高8.0cm规格的带孔长方形塑料水槽内备用，如图1-2所示。
(2)大麦种子的精选、休眠破除与消毒
选用当年收获的、饱满整齐的感病品种“单二”的种子100粒，放入玻璃培养皿中。小心加入30％浓度的双氧水至浸没所有大麦种子，处理15分钟，期间用玻璃棒搅拌。处理结束后倒掉残液，取出种子晾干15分钟(图3)。
(3)大麦种子的催芽
将步骤(2)处理的100粒种子，均匀排放湿润纸床上，置于25℃的发芽箱内催芽约2日-3日，期间保持纸床的湿润。芽长至2cm左右，选取48株长势一致的芽苗备用(图4)。
(4)大麦芽苗的移栽
将步骤(3)的芽苗移栽到装有基质的方形塑料育苗钵中。每钵移栽4株苗。在塑料签上注明大麦品种与移栽时间，插入到钵体边缘(图5)。
(5)接种用幼苗的培养
将(4)中移栽好的大麦幼苗，放入人工气候箱中变温培养，调节培养箱运行模式如下：白天光照模式持续时间14h，光照强度15000lux，环境温度16℃，相对湿度80％；夜晚无光模式持续时间10h，环境温度12℃，相对湿度80％。利用营养土的虹吸原理，在排放育苗钵的长方形塑料水槽内加入1.0cm水，确保发芽所需要水分供应(图6)。约3周，幼苗长至二叶一心期进行大麦黄花叶病病毒接种。
(6)接种后幼苗的培养
将接种后幼苗置于人工气候箱遮光24h(温度18℃，湿度80％)。遮光处理结束，幼苗的生长环境严格控制在光照周期14h(光照强度12000lux，温度16℃，湿度80％)、暗周期10h(温度12℃，湿度80％)。利用营养土的虹吸原理，在排放育苗钵的长方形塑料水槽内加入1.0cm营养液，确保幼苗生长所需要水分和养分的供应，保证接种幼苗的正常生长及病毒的均衡扩散(图7)。

Claims (1)

1.一种大麦黄花叶病室内接种后幼苗的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：将大麦种子休眠破除与消毒后均匀排放于湿润纸床上，置于发芽箱内催芽，出芽后移栽到装有基质的育苗钵中，将育苗钵整齐放置于带排水孔的塑料槽中，将塑料槽放入人工气候箱中培养，塑料槽中加水，保持塑料槽中的水高为1cm；幼苗长至二叶一心期进行大麦黄花叶病病毒接种；将接种后幼苗置于人工气候箱进行遮光处理；遮光处理结束后，置于光照、黑暗交替的光照周期中进行培养；在排放育苗钵的长方形塑料水槽内加入营养液，保证幼苗生长所需要水分和养分的供应；
所述基质的制备方法为：将泥炭土和无病园土按3:1的体积比混匀，在121℃下湿热灭菌15分钟，取出后冷却至室温；幼苗移栽后接种前的生长环境为：白天光照模式持续时间14h，光照强度15000lux，环境温度16℃，相对湿度80%；夜晚无光模式持续时间10h，环境温度12℃，相对湿度80%；所述休眠破除与消毒方法包括：选取当年收获、饱满整齐的大麦品种种子，用30%浓度的双氧水完全浸种，经15分钟后取出晾干；所述育苗钵为塑料材质，底部设置有多个网孔，尺寸为上边长7.0cm×下边长6.0cm×高8.0cm；所述塑料槽的尺寸为42.0cm×宽28.0cm×高8.0cm，在距离塑料槽底部1cm处设置一个排水孔；所述催芽方法包括：将消毒处理后大麦种子均匀排放湿润纸床上，置于25℃的发芽箱内催芽2日-3日后，芽长至2cm后用于移栽；每个育苗钵移栽4株苗，移栽深度为2cm -3cm，并插入标明大麦的品种、移栽时间的塑料签；所述遮光的处理为：接种后幼苗置于温度18℃，湿度80%的无光环境，处理时间为24h；遮光处理后幼苗的生长环境为光照周期14h，光照强度12000lux，温度16℃，湿度80%、暗周期10h，温度12℃，湿度80%。
CN201911316869.6A 2019-12-19 2019-12-19 一种大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法 Active CN111034557B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911316869.6A CN111034557B (zh) 2019-12-19 2019-12-19 一种大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911316869.6A CN111034557B (zh) 2019-12-19 2019-12-19 一种大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111034557A CN111034557A (zh) 2020-04-21
CN111034557B true CN111034557B (zh) 2022-04-19

Family

ID=70237746

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911316869.6A Active CN111034557B (zh) 2019-12-19 2019-12-19 一种大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111034557B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115443870A (zh) * 2022-10-25 2022-12-09 东北农业大学 一种抗大豆疫霉根腐病种质资源的鉴定方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1934254A (zh) * 2004-03-25 2007-03-21 独立行政法人科学技术振兴机构 与大麦黄花叶病抵抗性相关的基因位点连锁的遗传标记及其利用
CN108370808A (zh) * 2018-03-27 2018-08-07 贵州大学 一种马尾松菌根化幼苗育苗方法
CN109122116A (zh) * 2018-06-20 2019-01-04 西北农林科技大学 一种小麦幼苗试验材料的高效培养方法
CN109468330A (zh) * 2018-12-25 2019-03-15 中国农业科学院作物科学研究所 大麦黄花叶病抗性基因eIF4EHOR3298及其鉴定方法和应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1934254A (zh) * 2004-03-25 2007-03-21 独立行政法人科学技术振兴机构 与大麦黄花叶病抵抗性相关的基因位点连锁的遗传标记及其利用
CN108370808A (zh) * 2018-03-27 2018-08-07 贵州大学 一种马尾松菌根化幼苗育苗方法
CN109122116A (zh) * 2018-06-20 2019-01-04 西北农林科技大学 一种小麦幼苗试验材料的高效培养方法
CN109468330A (zh) * 2018-12-25 2019-03-15 中国农业科学院作物科学研究所 大麦黄花叶病抗性基因eIF4EHOR3298及其鉴定方法和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
大麦黄花叶病毒(BaYMV)机械接种的初步研究;阮义理等;《植物病理学报》;19900930;第20卷(第03期);第17页 *
禾谷多粘菌分离、培养、接种及用于大麦抗黄花叶病的鉴定;陈剑平;《植物病理学报》;19930930;第23卷(第03期);第237-243页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111034557A (zh) 2020-04-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102119660B (zh) 一种高山杜鹃组培苗温室内生根培养以及炼苗移栽的方法
CN100426952C (zh) 鸟巢蕨植物的组培育苗方法
CN107926715A (zh) 一种茄子或/和辣椒或/和番茄的嫁接培育方法
CN207665720U (zh) 一种海绵板水培育苗装置
CN103190344A (zh) 一种灰楸的组织培养方法
CN104813831B (zh) 一种野大麦的室内快速培育方法
CN112189566A (zh) 一种砧木用樱桃苗的快速繁育方法
CN113243295B (zh) 朱顶红组培繁育方法
CN105010142B (zh) 越南奇楠沉香组织培养的方法
CN111034557B (zh) 一种大麦黄花叶病室内接种用幼苗及接种后幼苗的培养方法
CN109349079A (zh) 一种水生美人蕉播种繁殖方法
CN113068560A (zh) 一种沙冬青的容器育苗方法
CN111034617B (zh) 一种云南大叶种茶树幼胚组织培养繁育茶苗的方法
CN111480578A (zh) 一种箭叶淫羊藿种胚组培快繁方法
CN115250814B (zh) 一种适合河南杜鹃催芽育苗的方法
CN101341847B (zh) 藤本类蔬菜的立地苗持续栽培方法
CN110214641A (zh) 一种提高西红花种球质量的种植方法
CN113331013B (zh) 一种松叶百合播种及促成栽培方法
CN106134565A (zh) 一种马蔺种子即采即播提高种子发芽率的方法
CN113841556B (zh) 一种杉木苗的培育方法
CN108782205B (zh) 一种拟南芥壮苗的培育方法
CN102696438A (zh) 一种用于建立飞虱种群的水稻苗种植方法
CN113197077A (zh) 马铃薯试管苗漂浮练苗方法
CN111264205A (zh) 一种嫁接苗的生产方法
WO2020186705A1 (zh) 一种控根栽培装置

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant