CN110982863A - 一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法 - Google Patents

一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110982863A
CN110982863A CN201911418365.5A CN201911418365A CN110982863A CN 110982863 A CN110982863 A CN 110982863A CN 201911418365 A CN201911418365 A CN 201911418365A CN 110982863 A CN110982863 A CN 110982863A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fermentation
nucleotide disodium
lactobacillus acidophilus
disodium
flavor nucleotide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201911418365.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110982863B (zh
Inventor
张国立
郭永泽
张国芝
马洪梅
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Shuguo Bio Co ltd
Original Assignee
Guangzhou Shuguo Bio Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangzhou Shuguo Bio Co ltd filed Critical Guangzhou Shuguo Bio Co ltd
Priority to CN201911418365.5A priority Critical patent/CN110982863B/zh
Publication of CN110982863A publication Critical patent/CN110982863A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110982863B publication Critical patent/CN110982863B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
    • C12P19/28—N-glycosides
    • C12P19/30—Nucleotides
    • C12P19/305—Pyrimidine nucleotides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
    • C12P19/28—N-glycosides
    • C12P19/30—Nucleotides
    • C12P19/32—Nucleotides having a condensed ring system containing a six-membered ring having two N-atoms in the same ring, e.g. purine nucleotides, nicotineamide-adenine dinucleotide

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Seasonings (AREA)

Abstract

本发明公开了一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法。它是将Lactobacillus acidophilus zsq11CICC10481进行发酵，从发酵液中获取呈味核苷酸二钠。本发明发现Lactobacillus acidophilus zsq11 CICC10481能够发酵产生呈味核苷酸二钠，因此可以利用发酵法是大量生产呈味核苷酸二钠，应用于调味包、酱料、保健品以及其他相关食品加工中。

Description

一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法
技术领域：
本发明属于微生物领域，具体涉及一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法。
背景技术：
呈味核苷酸二钠(I+G)是由5’－肌苷酸二钠(IMP)和5’－鸟苷酸二钠(GMP)按照1：1比例混合的増鲜产品。由于高强的増鲜特性及消除抑制异味的功效，I+G被广泛应用于调味包、酱料、保健品以及其他相关食品加工中。目前生产呈味核苷酸二钠的主要方法有化学合成法，酶催化法，自溶法和发酵法。其中化学合成法和酶催化方法都需要用到核苷酸为原料，生产利用度较低，成本较高。酶催化法耗能，自溶法对菌株的酶活要求特别高，而且酶效的条件都非常苛刻。所以发酵法是大量生产呈味核苷酸二钠的最有优势的方法，但是此工艺需要有高产的菌株作为依托。越来越多的证据证明细菌的菌株水平上的差异决定了它们的功能，也就是说即使同一种属，不同菌株的功能都是不一样的。所以本发明，从发酵产物中的呈味核苷酸二钠最高为衡量标准，去寻找最佳条件。
发明内容：
本发明的第一个目的是提供一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法。
本发明的产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法，是将Lactobacillusacidophilus zsq11 CICC10481进行发酵，从发酵液中获取呈味核苷酸二钠。
优选，所述的将Lactobacillus acidophilus zsq11 CICC10481进行发酵，其发酵培养基是：
每升水中含玉米粉10.0g、谷氨酸1.0g、新鲜牛肉5.0g、柠檬酸氢二铵2.0g、糖蜜水20.0mL、吐温801.0mL、乙酸钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g、pH 6.2～6.6。
优选，所述的发酵温度为37℃，发酵时间为36h。
本发明的第二个目的是提供Lactobacillus acidophilus zsq11 CICC10481在产呈味核苷酸二钠中的应用。
本发明发现Lactobacillus acidophilus zsq11 CICC10481能够发酵产生呈味核苷酸二钠，因此可以利用发酵法是大量生产呈味核苷酸二钠，应用于调味包、酱料、保健品以及其他相关食品加工中。
本发明的Lactobacillus acidophilus zsq11 CICC10481于2011年8月9日保藏于中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)，其是公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享，任何人都可以去该中国工业微生物菌种保藏管理中心购买到该菌株。
具体实施方式：
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1：
1.Lactobacillus acidophilus zsq11 CICC10481的培养基是改良的MRS固体培养基：
蛋白胨10.0g、谷氨酸1.0g、酵母膏5.0g、柠檬酸氢二铵[(NH4)2HC6H5O7]2.0g、葡萄糖(C6H12O6·H2O)20.0g、吐温801.0mL、乙酸钠(CH3COONa·3H2O)5.0g、磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)2.0g、硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.58g、硫酸锰(MnSO4·H2O)0.25g、琼脂18.0g、蒸馏水1000mL，pH 6.2～6.6。将上述各成分混合均匀，调PH值，灭菌即得。
改良的MRS液体培养基是指改良的MRS固体培养基中去掉琼脂。
2.发酵液的制备
将从15％(v/v)甘油保存的Lactobacillus acidophilus zsq11 CICC10481菌种活化，具体活化方法是接种到3个改良的MRS固体培养基中，等生长出明显的菌落后，用2mLPBS溶液把每个平皿菌洗脱出来，分别加入到3个200mL改良的MRS液体培养基中，37℃静止培养36h后，把3个200mL培养液合在一个1L的三角瓶中，然后接种到5L发酵培养基(每升水中含玉米粉10.0g、谷氨酸1.0g、新鲜牛肉5.0g、柠檬酸氢二铵2.0g、糖蜜水20.0mL、吐温801.0mL、乙酸钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g、pH 6.2～6.6，其配制方法是在每升水中添加玉米粉10.0g、谷氨酸1.0g、新鲜牛肉5.0g、柠檬酸氢二铵2.0g、糖蜜水20.0mL、吐温801.0mL、乙酸钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g，然后调pH值6.2～6.6，灭菌制得)中发酵，,以改良的MRS液体培养基作为对照(蛋白胨10.0g、谷氨酸1.0g、酵母膏5.0g、柠檬酸氢二铵[(NH4)2HC6H5O7]2.0g、葡萄糖(C6H12O6·H2O)20.0g、吐温801.0mL、乙酸钠(CH3COONa·3H2O)5.0g、磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)2.0g、硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.58g、硫酸锰(MnSO4·H2O)0.25g、蒸馏水1000mL，pH 6.2～6.6)发酵温度控制在37℃静止培养，发酵时间为36小时，得到呈味核苷酸二钠发酵液；
3、前处理
把5L呈味核苷酸二钠发酵液，以5000rpm的速度离心后收集菌体，去掉上清，把菌体放入-80℃预冷8h以上，然后放在冷冻干燥机中干燥24h(-65℃)，即可得到菌体的干粉。
4、呈味核苷酸二钠的测定
准确称取菌体的干粉2g、2.5g、4g,用少量0.01mol/L的盐酸溶液溶解,定容于100mL的容量瓶中,混匀,过滤,弃去初滤液,吸取滤液5.00mL于100mL的容量瓶,用0.01mol/L的盐酸溶液定容至100ml,混匀,此溶液即为测试液。将测试液注入10mm的石英比色皿中,以0.01mol/L的盐酸溶液做空白,测量在波长250nm下的吸光度。
呈味核苷酸二钠含量应按下面方程式计算:
Figure BDA0002351749180000041
式中:
X:样品中呈味核苷酸二钠的含量(含7.25分子结晶水),g/100g菌体干粉；
A:样品在波长250nm处的吸光度；
530:含7.25分子结晶水呈味核苷酸二钠的平均分子量；
2000:样品的稀释倍数；
m:样品的质量,g；
11950:呈味核苷酸二钠的平均摩尔吸光系数。
6，结果
Figure BDA0002351749180000042

Claims (7)

1.一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法，其特征在于，是将Lactobacillusacidophilus zsq11 CICC10481进行发酵，从发酵液中获取呈味核苷酸二钠。
2.根据权利要求1所述的微生物发酵方法，其特征在于，所述的将Lactobacillusacidophilus zsq11 CICC10481进行发酵，其发酵培养基是：每升水中含玉米粉10.0g、谷氨酸1.0g、新鲜牛肉5.0g、柠檬酸氢二铵2.0g、糖蜜水20.0mL、吐温80 1.0mL、乙酸钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g、pH 6.2～6.6。
3.根据权利要求1或2所述的微生物发酵方法，其特征在于，所述的发酵，其发酵温度为37℃，发酵时间为36h。
4.Lactobacillus acidophilus zsq11 CICC10481在产呈味核苷酸二钠中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，是将Lactobacillus acidophilus zsq11CICC10481进行发酵，从发酵液中获取呈味核苷酸二钠。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的将Lactobacillus acidophiluszsq11CICC10481进行发酵，其发酵培养基是：每升水中含玉米粉10.0g、谷氨酸1.0g、新鲜牛肉5.0g、柠檬酸氢二铵2.0g、糖蜜水20.0mL、吐温80 1.0mL、乙酸钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g、pH 6.2～6.6。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的发酵，其发酵温度为37℃，发酵时间为36h。
CN201911418365.5A 2019-12-31 2019-12-31 一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法 Active CN110982863B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911418365.5A CN110982863B (zh) 2019-12-31 2019-12-31 一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911418365.5A CN110982863B (zh) 2019-12-31 2019-12-31 一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110982863A true CN110982863A (zh) 2020-04-10
CN110982863B CN110982863B (zh) 2023-02-03

Family

ID=70080155

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911418365.5A Active CN110982863B (zh) 2019-12-31 2019-12-31 一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110982863B (zh)

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004112809A1 (ja) * 2003-06-24 2004-12-29 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. 血清尿酸低減組成物
WO2006104504A2 (en) * 2004-06-24 2006-10-05 Cargill, Incorporated Integrated fermentation product recycling
CN101390581A (zh) * 2008-11-11 2009-03-25 峨眉山市老农民食品有限公司 四川泡菜母水组合物
US20090269812A1 (en) * 2006-02-24 2009-10-29 Toray Industries, Inc , A Corporation Of Japan Method of producing chemical product and continuous fermentation apparatus
US20100086646A1 (en) * 2006-12-08 2010-04-08 Alan Francois Probiotic-containing food product and a protonated weak monoacid
CN101701203A (zh) * 2009-11-27 2010-05-05 南京农业大学 一株植物乳杆菌及其应用
CN101724591A (zh) * 2009-11-27 2010-06-09 南京农业大学 植物乳杆菌菌株及其应用
CN106010997A (zh) * 2016-04-29 2016-10-12 周礼红 一种植物乳杆菌及其培养分离方法、筛选方法和应用
CN109312292A (zh) * 2016-06-16 2019-02-05 株式会社明治 乳酸菌发酵促进剂

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004112809A1 (ja) * 2003-06-24 2004-12-29 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. 血清尿酸低減組成物
WO2006104504A2 (en) * 2004-06-24 2006-10-05 Cargill, Incorporated Integrated fermentation product recycling
US20090269812A1 (en) * 2006-02-24 2009-10-29 Toray Industries, Inc , A Corporation Of Japan Method of producing chemical product and continuous fermentation apparatus
US20100086646A1 (en) * 2006-12-08 2010-04-08 Alan Francois Probiotic-containing food product and a protonated weak monoacid
CN101390581A (zh) * 2008-11-11 2009-03-25 峨眉山市老农民食品有限公司 四川泡菜母水组合物
CN101701203A (zh) * 2009-11-27 2010-05-05 南京农业大学 一株植物乳杆菌及其应用
CN101724591A (zh) * 2009-11-27 2010-06-09 南京农业大学 植物乳杆菌菌株及其应用
CN106010997A (zh) * 2016-04-29 2016-10-12 周礼红 一种植物乳杆菌及其培养分离方法、筛选方法和应用
CN109312292A (zh) * 2016-06-16 2019-02-05 株式会社明治 乳酸菌发酵促进剂

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
叶勋艳: "杆菌JSM1601发酵产核酸的研究", 《中国生物工程杂志》 *
杨斌: "呈味核苷酸的生产和应用", 《中国调味品》 *
陈騊声: "发酵法生产呈味核苷酸", 《化学世界》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN110982863B (zh) 2023-02-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102994395B (zh) 一株出芽短梗霉及其应用
CN110734880B (zh) 源于广西巴马具有高产维生素B能力的植物乳杆菌Bama06及其用途
CN103451133B (zh) 一种环状芽孢杆菌及其在制备阿魏酸脱羧酶中的应用
CN102041264B (zh) 一种氧化葡萄糖酸杆菌(G.oxydans)的基因工程菌及其应用
Saeed et al. Statistical optimization of cultural parameters for the optimized production of alginic acid using apple (Malus domestica) peels through solid-state fermentation
CN101948878B (zh) 一种氧化葡萄糖酸杆菌在制备1,3-二羟基丙酮中的应用
CN115322911A (zh) 一种异常威克汉姆酵母菌及其应用
CN101880699B (zh) 一种用微生物发酵生产甲壳低聚糖的方法
CN102533607B (zh) 一株产β-半乳糖苷酶的菌株及用该酶生产低聚半乳糖的方法
CN100343385C (zh) 一株高产3－羟基丁酮的短小芽孢杆菌
CN110982863B (zh) 一种产呈味核苷酸二钠的微生物发酵方法
CN112522118A (zh) 杂色曲霉在制备单宁酶和降解单宁中的应用
CN111172094A (zh) 酵母浸出物及其制备方法
CN114349806B (zh) 一种应用纳豆芽孢杆菌对岩藻寡糖混合物进行单糖脱除及纯化的方法
CN100526470C (zh) 一种功能性甜味剂d-塔格糖的制备方法
CN105661393A (zh) 一种生物法快速发酵蔬菜的生产方法
CN109112175A (zh) 一种构建微生物共培养体系高产虎奶菇胞外多糖的方法
CN106282145A (zh) 一种腺苷酸脱氨酶的液态发酵方法
CN114561328A (zh) 一种高活力乳酸菌菌剂的制备方法
CN103695407B (zh) 一种提高栖热菌海藻糖合成酶含量的方法
JP3957132B2 (ja) 低濁性醤油乳酸菌の分離用培地、同培地を用いる低濁性醤油乳酸菌の分離法及び同乳酸菌を用いる清澄度の高い醤油の製造法
CN104711208B (zh) 一种具有高的淀粉分解能力的乳酸菌
CN105969811B (zh) 利用植物乳杆菌发酵没食子酸制备焦性没食子酸的方法
CN112662572A (zh) 一种高产壳聚糖酶的菌株及其应用
CN105671104A (zh) 一种固定化右旋糖酐酶降解小分子右旋糖酐的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant