CN110967327A - 一种定量检测双酚a的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种定量检测双酚A的方法,属于环境分析化学领域,具体涉及一种石墨烯‑罗丹明二元体系对双酚A的检测方法。本发明所述方法首先在石墨烯溶液中加入罗丹明B,导致罗丹明B荧光淬灭。然后在该体系中加入双酚A,由于双酚A与石墨烯的结合力较强与罗丹明B发生竞争性吸附,使罗丹明B从石墨烯表面脱附并恢复荧光。通过测定体系的荧光变化即可定量的检测双酚A。该方法具有方法简单,速度快,选择性好,线性范围宽等优点。
Description
技术领域
本发明属于环境分析化学领域,具体涉及一种石墨烯-罗丹明二元体系对双酚A的检测方法。
背景技术
双酚A化学名为2,2-双酚基丙烷,是全球大量合成的重要的化学品之一。它是聚碳酸酯和环氧树脂合成的单体,还可用于合成聚丙烯酸酯,聚磺酸酯,不饱和聚酯树脂,也是一种广泛使用的增塑剂和阻燃剂。作为一种高分子材料添加剂,双酚A广泛地存在于食品包装材料、纸币、热敏打印纸、光盘、粘合剂和粉末涂料中。在这些产品的加工、运输和使用过程中,双酚A会扩散到环境中。据粗略估计,每年有超过2000吨的双酚A及其产品由于家庭和工业活动而排放到环境中。
双酚A的结构类似于内分泌激素,由于其结构中含有苯酚基团,因此与雌激素受体具有亲和力。因此双酚A是一种内分泌干扰化合物,研究已经证明即使是低于ng水平(0.23ng/L)也可以影响人体健康。双酚A可能会对生物体的繁殖和发育产生多种不利影响,在胚胎发育过程中更为显著和不可逆转;双酚A会影响大脑、甲状腺、卵巢和生殖器官的功能;双酚A与心血管疾病、肥胖、致癌性、神经毒性和发育问题也有关系。
因此,监测和控制双酚A的有害影响是至关重要的。目前研究人员已经建立了多种分析双酚A的方法,例如:电化学法、酶联免疫吸附法、石英晶体微量天平法、表面等离子体共振法等等。但大多数分析方法需要繁琐的样品制备和预处理,缺乏现场适用性,而色谱和质谱法需要大量的资金投入,运营成本高,需要熟练的分析人员和技术人员,而且很耗时。为了简便而准确地识别和测量复杂基质中微量水平的双酚A,需要继续开发灵敏的分析方法。
石墨烯是一种具有平面共轭结构的单层碳片,并具有羟基、羧基、环氧基等一系列活性含氧基团。罗丹明类染料具有平面共轭体系和氨基、羧基等极性基团,可以与石墨烯通过π-堆叠、静电作用和氢键等作用力吸附到石墨烯表面,并发生荧光共振能量转移使荧光淬灭。在该体系中若加入一种与石墨烯结合能力更强的物质时,该物质会与罗丹明发生竞争性吸附,从而使罗丹明从石墨烯表面脱附并恢复荧光。利用这一原理可实现对DNA的荧光分析(Wang X, He Y, Song G. A Graphene Oxide–Rhodamine 6G Nanocomposite asTurn-on Fluorescence Probe for Selective Detection of DNA[J]. Anal. Methods,2012, 25: 394-400.)。该方法利用石墨烯-罗丹明二元体系对DNA进行荧光检测,具有快速、简便和高灵敏度的特点,但是利用该方法对双酚A进行检测的研究,尚未见文献报道。
本发明为克服现有方法的缺陷,提供了一种利用石墨烯-罗丹明二元体系对双酚A产生荧光响应,构建对双酚A进行定量检测的方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种定量检测双酚A的方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现,一种定量检测双酚A的方法,其特征在于,步骤如下:
(1)在10 mL血清瓶中加入石墨烯分散液,然后加入罗丹明B水溶液,用Tris-HCl缓存液定容,放置后备用;石墨烯吸附罗丹明B使罗丹明荧光淬灭;
(2)在步骤(1)制备的溶液中分别加入60μL 100μM的双酚A、苯酚、对苯二酚、三溴苯酚、间氨基苯酚、2,4,6-三硝基酚溶液,荧光光谱测定显示,加入双酚A的样品荧光强度有明显增加,而其他酚类化合物样品的荧光没有明显变化;同时裸眼可以看到,双酚A试样的溶液颜色变为粉红色,而其他样品颜色无明显变化;
(3)在步骤(1)制备的溶液中分别加入不同浓度的双酚A,荧光光谱测定显示样品的荧光强度与双酚A的浓度存在线性关系,通过线性关系能定量检测双酚A。
上述步骤(1)中所用石墨烯分散液的浓度为0.4 wt%,罗丹明B浓度为6×10-4 mol/L,石墨烯分散液与罗丹明B溶液的体积比为15:100。
上述步骤(1)中用Tris-HCl缓存液定容后,体系的pH值为7.4。
上述步骤(1)制备的溶液的放置时间为60分钟。
上述步骤(3)中双酚A的浓度线性区间为100~800 nM。
上述步骤(2)和步骤(3)中样品的荧光强度是在激发光波长为554 nm下检测的。
本发明首先在石墨烯溶液中加入罗丹明B,由于罗丹明B具有极性基团和苯环,可以通过π-π堆叠、静电作用和氢键等作用力吸附到石墨烯表面。罗丹明B在石墨烯表面发生能量共振转移导致荧光淬灭。当在该体系中加入双酚A后,由于双酚A与石墨烯的结合力较强,与罗丹明B发生竞争性吸附使罗丹明B从石墨烯表面脱附并恢复荧光。通过测定体系的荧光变化即可定量的检测双酚A。具体步骤如下:
(1)在10 mL血清瓶中加入石墨烯分散液,然后加入罗丹明B水溶液,用Tris-HCl缓存液定容,放置后备用。石墨烯吸附罗丹明B使罗丹明荧光淬灭,此时测试体系荧光呈现“turn-off”状态。
(2)在步骤(1)制备的溶液中分别加入60μL 100μM的双酚A、苯酚、对苯二酚、三溴苯酚、间氨基苯酚、2,4,6-三硝基酚溶液,荧光光谱测定显示,加入双酚A的样品荧光强度有明显增加,此时测试体系荧光呈现“turn-on”状态。而其他酚类化合物样品的荧光没有明显变化。同时裸眼可以看到,双酚A试样的溶液颜色变为粉红色,而其他样品颜色无明显变化。
(3)在步骤(1)制备的溶液中分别加入不同浓度的双酚A,荧光光谱测定显示样品的荧光强度与双酚A的浓度存在线性关系,通过线性关系能定量检测双酚A。
步骤(2)和步骤(3)中荧光检测的激发光波长为554 nm。
本发明所述方法与传统方法相比具有方法简单,速度快,选择性好,线性范围宽等优点。本方法有望应用于人体体液、细胞匀浆液以及食品等样品中双酚A含量的快速检测。
附图说明
图1 为石墨烯-罗丹明体系对不同浓度双酚A的荧光发射光谱及线性范围(光谱曲线从下到上对应的双酚A浓度依次为:100nM,200nM,300nM,400nM,600nM,700nM,800nM)。
具体实施方式
实施例1
本发明所用的石墨烯分散液购自中国科学院成都有机化学研究所,产品编号:TNWRGO,石墨烯厚度在0.55~3.74nm,微片大小在0.5~3μm左右,总氧含量在3%~5%左右。
在10 mL血清瓶中加入15 μL 0.4 wt% 石墨烯分散液,然后加入100 μL 6×10-4M的罗丹明B水溶液,用pH值为7.4的Tris-HCl缓存液定容,溶液放置60分钟后备用。石墨烯吸附罗丹明B使罗丹明荧光淬灭,此时测试体系荧光呈现“turn-off”状态。
实施例2
在实施例1制备的溶液中分别加入60μL 100μM的双酚A、苯酚、对苯二酚、三溴苯酚、间氨基苯酚、2,4,6-三硝基酚,在激发波长为554 nm条件下测试各个样品的荧光,发现加入双酚A的样品荧光强度有明显增加,此时测试体系荧光呈现“turn-on”状态。而其他酚类化合物样品的荧光没有明显变化。同时裸眼可以看到,双酚A试样的溶液颜色变为粉红色,而其他样品颜色无明显变化。说明该检测方法对双酚A具有良好的选择性。
实施例3
在实施例1制备的溶液中分别加入10μL、20μL、30μL、40μL、60μL、70μL、80μL 100μM的双酚A,使样品中双酚A的最终浓度分别为100nM,200nM,300nM,400nM,600nM,700nM,800nM,在激发波长为554 nm条件下进行荧光光谱测定,发现样品的荧光强度与双酚A的浓度存在线性关系,线性区间为100~800 nM,见图1。通过图1的石墨烯-罗丹明体系对不同浓度双酚A的荧光发射光谱及线性范围(光谱曲线从下到上对应的双酚A浓度依次为:100nM,200nM,300nM,400nM,600nM,700nM,800nM),能够获得待测样品的双酚A浓度。
Claims (6)
1.一种定量检测双酚A的方法,其特征在于,步骤如下:
(1)在10 mL血清瓶中加入石墨烯分散液,然后加入罗丹明B水溶液,用Tris-HCl缓存液定容,放置后备用;石墨烯吸附罗丹明B使罗丹明荧光淬灭;
(2)在步骤(1)制备的溶液中分别加入60μL 100μM的双酚A、苯酚、对苯二酚、三溴苯酚、间氨基苯酚、2,4,6-三硝基酚溶液,荧光光谱测定显示,加入双酚A的样品荧光强度有明显增加,而其他酚类化合物样品的荧光没有明显变化;同时裸眼可以看到,双酚A试样的溶液颜色变为粉红色,而其他样品颜色无明显变化;
(3)在步骤(1)制备的溶液中分别加入不同浓度的双酚A,荧光光谱测定显示样品的荧光强度与双酚A的浓度存在线性关系,通过线性关系能定量检测双酚A。
2.根据权利要求1所述的一种定量检测双酚A的方法,其特征在于步骤(1)中所用石墨烯分散液的浓度为0.4 wt%,罗丹明B浓度为6×10-4 mol/L,石墨烯分散液与罗丹明B溶液的体积比为15:100。
3.根据权利要求1所述的一种定量检测双酚A的方法,其特征在于步骤(1)中用Tris-HCl缓存液定容后,体系的pH值为7.4。
4.根据权利要求1所述的一种定量检测双酚A的方法,其特征在于步骤(1)制备的溶液的放置时间为60分钟。
5.根据权利要求1所述的一种定量检测双酚A的方法,其特征在于步骤(3)中双酚A的浓度线性区间为100~800 nM。
6.根据权利要求1所述的一种定量检测双酚A的方法,其特征在于步骤(2)和步骤(3)中样品的荧光强度是在激发光波长为554 nm下检测的。
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