CN110934803B - 一种具有美白淡斑功能的植物发酵组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种应用于化妆品的，具有美白淡斑功能的植物发酵组合物，其特征在于：将沙棘果油、芦荟提取液、丹参提取液、巴戟天糖链溶液作为底物，用格氏乳杆菌ATCC19992和黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998进行发酵获得。近年来通过大量的研究发现，选择特定的菌株对植物进行发酵后可以显著提升其美容功效，而本公司研发团队经过多年的研究和实践，发现一种来源于纯天然植物，通过益生菌剂发酵后可以起到非常显著的美白祛斑效果，其祛斑脱色效果极佳，尤其是对黄褐斑和顽固性色素沉着效果十分显著。

Description

一种具有美白淡斑功能的植物发酵组合物

技术领域

本发明涉及一种具有美白淡斑功能的植物发酵组合物，属于生物化妆品技术领域。

背景技术

人的肤色受遗传和环境的影响，其中最主要的影响因素为表皮组织中黑色素含量。黑色素细胞通过一系列生物化学过程合成黑色素，酪氨酸酶在黑色素形成过程中起重要作用，通过抑制酪氨酸酶活性减少黑色素生成是皮肤科学研究热点。紫外线诱导黑色素生成作用机理在于紫外线诱导产生自由基改变细胞的代谢过程，因此清除自由基也是抑制黑色素生成的方法之一。

人体皮肤的色素沉着过程十分重要，它不仅决定皮肤、眼睛和头发的颜色，还是保护皮肤免受紫外线辐射损伤的首要屏障。但黑色素代谢障碍可引起如色斑、雀斑、黄褐斑和黑色素瘤等色素沉着症。因此，抑制黑素合成和促进皮肤黑素颗粒的溶解是美白的两个主要途径。斑点的形成目前机制还不十分明确，如：黄褐斑是一种好发于颜面等暴露部位的色素增加性皮肤病，不仅影响外观，对工作生活也带来一定困拢。黄褐斑确切发病机制尚不完全明确。近年研究结果表明，表皮屏障破坏、炎症反应、血管改变、光老化、细胞自噬、非紫外线光热源及氧化应激因素在黄褐斑发病过程中也有重要意义。市面上真正对祛斑有效的产品非常少。

近年来，随着人们生活水平的提高，越来越多的人选择使用含有中草药成分的护肤品进行美容。我国居民使用中草药进行美容的历史有几千年。《黄帝内经》、《太平圣惠方》及《药性论》中都介绍了一些具有美白作用的方剂。这些中医典籍为开发和应用具有美白功效的中草药开拓了广阔的前景。现有技术已经有人开始通过生物转化(发酵)提高植物的功能，但是研究得还很少。

本发明旨在提供一种具有美白淡斑功能的植物发酵组合物及其在化妆品上的应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有美白淡斑功能的植物发酵组合物及其在化妆品上的应用。

发酵过程已被证明可以改善植物，蔬菜和草药的生物学特性。更具体地，发酵通过生物转化将复杂底物分解成较单一组分，从而调节产物性质或改变某些生物活性化合物的量。越来越多的证据表明益生菌及其发酵食品对健康的宝贵贡献。微生物发酵的基本原理可概括为以下几个方面：(1)微生物可以产生多种生物活性大分子，如蛋白酶，淀粉酶，纤维素酶，酯酶和酰胺酶，它们是合成酶和分解酶家族的成员。这些酶是发酵过程中涉及的化学反应的关键参与者；(2)许多微生物可以利用发酵底物来产生新的化学物质，同时这些微生物和草药的次生代谢产物也可以相互作用形成新的化合物；(3)发酵底物中的的某些物质可以改变微生物的代谢途径，从而可以产生新的成分。最近几年，全世界的发酵技术受到了相当大的关注，发酵过程通过产生和富集具有药用价值的次级代谢物来改善草药的生物利用度。在发酵过程中，微生物除了通常的发酵产物之外还释放其他化合物，例如糖苷被转化为低分子量的糖苷配基，从而大大增加了含糖苷类物质的中药的生物利用率。此外有证据表明，发酵通过促进中药的药理活性可以改善其预防和治疗疾病的作用。研究表明，使用嗜酸乳杆菌发酵金线莲可以通过增加总酚含量来增强其抗氧化活性，乳酸菌发酵三七的发酵液以500ug/ml的浓度干预时，在体外对肝癌Hep3B细胞发挥抗增殖活性。在另一项研究中发现由短乳杆菌发酵后的的红参，不仅抗皱和增白功效增强，而且毒性效力降低。此外，发酵提高了人参皂苷代谢物的含量，例如Rg3和Rk1。黑豆的总酚和花色素苷含量在丝状真菌发酵后增加，抗氧化活性增强。

但是大自然微生物菌株浩如烟海，选择合适的底物和菌株进行有显著意义的发酵，难度非常之大，需要付出大量的时间和精力，甚至是运气。本公司长期致力于祛斑美白产品的深度研发，近年来通过大量的研究发现，选择特定的菌株对植物进行发酵后可以显著提升其美容功效，而本公司研发团队经过多年的研究和实践，发现一种来源于纯天然植物，通过益生菌剂发酵后可以起到非常显著的美白祛斑效果，其祛斑脱色效果极佳，尤其是对黄褐斑和顽固性色素沉着效果十分显著。

沙棘(拉丁学名：Hippophae rhamnoides Linn.)是一种落叶性灌木，沙棘果实中维生素C含量高，素有维生素C之王的美称。沙棘是植物和其果实的统称。植物沙棘为胡颓子科沙棘属，是一种落叶性灌木。国内分布于华北、西北、西南等地。沙棘为药食同源植物。沙棘的根、茎、叶、花、果，特别是沙棘果实含有丰富的营养物质和生物活性物质，可以广泛应用于食品、医药、轻工、航天、农牧鱼业等国民经济的许多领域。沙棘果实入药具有止咳化痰、健胃消食、活血散瘀之功效。现代医学研究，沙棘可降低胆固醇，缓解心绞痛发作，还有防治冠状动脉粥样硬化性心脏病的作用。

芦荟，杀菌作用，抗炎作用，湿润美容作用，健胃下泄作用，强心活血作用，免疫和再生作用，免疫与抗肿瘤作用，解毒作用，抗衰老作用，镇痛、镇静作用，防晒作用。

丹参，该种根入药，含丹参酮，为强壮性通经剂，有祛瘀、生新、活血、调经等效用，为妇科要药，主治子宫出血，月经不调，血瘀，腹痛，经痛，经闭，庙痛。对治疗冠心病有良好效果。此外亦治神经性衰弱失眠，关节痛，贫血，乳腺炎，淋巴腺炎，关节炎，疮疖痛肿，丹毒，急慢性肝炎，肾孟肾炎，跌打损伤，晚期血吸虫病肝脾肿大，癫癎。外用又可洗漆疮。

巴戟天是一种茜草科植物，主要出产于中国的广东、广西和部分东南亚国家，是中国的“四大南药”之一。该药最早记载出现在《神农本草经》中，有研究表明巴戟天能增加缺血心肌血管内皮生长因子的表达、促进鸡胚绒毛尿囊膜毛细血管生成等，对缺血区组织的血管新生能产生促进作用，对脐静脉缺氧/复氧模型具有明确的保护作用，而巴戟天发挥作用的有效成分被认为是一类寡糖类化合物——巴戟天糖链。这种寡糖类化合物具有促进男性精子发育成熟、调节人体免疫功能、促进血管生长和减轻氧化应激对心肌损伤的作用。

中国专利CN101643717B公开过一种黄色柠檬酸菌及其应用，目前该专利已失效，该菌株已于申请日前保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。保藏日期是2009年3月30日，保藏号是CGMCC.No 2998。本发明用到的黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998获赠于新疆农业科学院微生物应用研究所成员。

本发明用到的格氏乳杆菌ATCC19992购买获得。本发明用到的沙棘果油、芦荟提取液、丹参提取液也是通过购买获得。

本发明用到的巴戟天糖链的制备：参照现有技术的方法，取250g巴戟天在1L蒸馏水中煮沸2h，将上清过滤后采用低压干燥法获得干燥粉末。取15g粉末，分次用体积分数为70％乙醇在90℃水浴中煮60min，通过旋蒸仪回收乙醇后，获取浓缩液。用适量的蒸馏水稀释后，分别用乙醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，弃去上述溶剂中可溶性部分，将剩余的水溶部分用层析柱方法分离收集巴戟天糖链，经鉴定纯度为98.2％。将提纯的巴戟天糖链用水溶解后配置成质量浓度为0.2g/L的巴戟天糖链溶液，经0.22μm滤膜过滤除菌后备用。

本发明所需要解决的技术问题可以通过以下技术方案来实现。

一种具有美白淡斑功能的植物发酵组合物，其特征在于：

将沙棘果油、芦荟提取液、丹参提取液、巴戟天糖链溶液作为底物，用格氏乳杆菌ATCC19992和黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998进行发酵获得。

上述发酵的具体步骤为：

(1)配置培养基：

按照重量份数，将5份芦荟提取液、10份丹参提取液、2份巴戟天糖链溶液混合均匀，再加入2份沙棘果油，2份甘油和适量吐温80，加热搅拌乳化均匀后，紫外线灭菌备用；

(2)黄色柠檬酸菌好氧发酵：

黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998活化：取一环黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998接种到高氏培养基中划线，37℃好氧培养24h。挑取平板中长势较好的单菌落接种至高氏液体培养基中活化，好氧培养成10⁸cfu/ml的种子液。

按照1％的接种量，将黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998接种于步骤(1)获得的培养基中，37℃好氧培养24h。

(3)格氏乳杆菌厌氧发酵：

格氏乳杆菌ATCC19992活化：取一环格氏乳杆菌ATCC19992接种到MRS固体培养基中划线，37℃厌氧培养24h。挑取平板中长势较好的单菌落接种至MRS液体培养基中活化，厌氧培养成10⁸cfu/ml的种子液。

按照1％的接种量，将格氏乳杆菌ATCC19992接种于步骤(2)获得的培养基中，37℃厌氧培养12h。

(4)紫外线灭菌，经0.22μm滤膜过滤除菌后备用。

本发明的优点：

本公司长期致力于祛斑美白化妆品的深度研发，近年来通过大量的研究发现，选择特定的菌株对植物进行发酵后可以显著提升其美容功效，而本公司研发团队经过多年的研究和实践，发现一种来源于纯天然植物，通过益生菌剂发酵后可以起到非常显著的美白祛斑效果，其祛斑脱色效果极佳，尤其是对黄褐斑和顽固性色素沉着效果十分显著。

附图说明

图1为志愿者使用前面部的色素沉着明显，图2为8周使用后色素几乎完全消失。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例，所述实施例仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。

本发明的具体实施例如以下说明。

实施例1

一种具有美白淡斑功能的植物发酵组合物，其特征在于：

将沙棘果油、芦荟提取液、丹参提取液、巴戟天糖链溶液作为底物，用格氏乳杆菌ATCC19992和黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998进行发酵获得。

上述发酵的具体步骤为：

(1)配置培养基：

按照重量份数，将5份芦荟提取液、10份丹参提取液、2份巴戟天糖链溶液混合均匀，再加入2份沙棘果油，2份甘油和适量吐温80，加热搅拌乳化均匀后，紫外线灭菌备用；

(2)黄色柠檬酸菌好氧发酵：

黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998活化：取一环黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998接种到高氏培养基中划线，37℃好氧培养24h。挑取平板中长势较好的单菌落接种至高氏液体培养基中活化，好氧培养成10⁸cfu/ml的种子液。

按照1％的接种量，将黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998接种于步骤(1)获得的培养基中，37℃好氧培养24h。

(3)格氏乳杆菌厌氧发酵：

格氏乳杆菌ATCC19992活化：取一环格氏乳杆菌ATCC19992接种到MRS固体培养基中划线，37℃厌氧培养24h。挑取平板中长势较好的单菌落接种至MRS液体培养基中活化，厌氧培养成10⁸cfu/ml的种子液。

按照1％的接种量，将格氏乳杆菌ATCC19992接种于步骤(2)获得的培养基中，37℃厌氧培养12h。

(4)紫外线灭菌，经0.22μm滤膜过滤除菌后备用。

实施例2

细胞毒性测试：

实验分组：实施例1过滤后的发酵组合物溶于无血清DMEM培养液中，配制5个样品，质量分数分别为0.05％，0.10％，0.25％，0.50％，1.00％，以无血清DMEM培养液为阴性对照样组，每个样品设置3个重复。

MTT检测：将生长良好的L929细胞调整浓度为1×10⁵个/mL，按照100μL/孔接种至96孔板，在37℃，5％CO2环境中，无血清DMEM培养液培养24h。贴壁生长后，吸弃有培养液，按照实验分组方案每孔加入100μL不同质量分数的样品溶液，阴性对照样组继续无血清DMEM培养，常规培养48h。向细胞培养板中每孔加入5mg/mL MTT溶液20μL，置培养箱内避光孵育4h。吸弃上清，每孔加入DMSO100μL。细胞培养板用铝箔纸包裹，置于摇床低速振荡20min，在570nm波长处测定吸光度。按下式计算其他各组细胞相对存活率(β)。结果如表一所示。

β＝A_n/A₀

式中，A_n为实验组吸光度，A₀为阴性对照组吸光度。

表一 不同发酵浓度的对细胞存活率的影响

根据ISO 10993-5:2009所述的毒性分级评价方法，细胞存活率大于70％，可视为无毒性。由此可见，本发明的发酵组合物在所选取质量浓度下细胞存活率较高(0.05％-1.00％)，且均高于70％，无毒。

实施例3

对比例1：单纯黄色柠檬酸菌好氧发酵，不进行格氏乳杆菌厌氧发酵，其他步骤同实施例1。

对比例2：单纯格氏乳杆菌厌氧发酵，不进行黄色柠檬酸菌好氧发酵，其他步骤同实施例1。

对比例3：配置发酵底物时，不添加巴戟天糖链溶液，其他步骤同实施例1。

DPPH自由基的清除作用试验：

设置5组，分别为阳性对照组(Vc组)，实施例1组、对比例1-3组。选用维生素C作为阳性对照组用药，无水乙醇为溶剂，将维生素C配成一系列待测溶液(浓度分别为10、20、40、80、160μg/ml)。同样按此方法，将实施例1和对比例1-3所得到的发酵组合物，按照重量来配置出不同浓度的实验组溶液(浓度分别为10、20、40、80、160μg/ml)。

新鲜配制200umol/L DPPH乙醇溶液。将待检测溶液(1ml)+DPPH乙醇溶液(5ml)混匀，在37℃避光孵育30min后在517nm处测吸光度(A1)；将待检测溶液(1ml)+无水乙醇(5ml)混匀，在37℃避光孵育30min测吸光度(A2)；空白对照组为无水乙醇(1ml)+DPPH乙醇溶液(5ml)，在37℃避光孵育30min测吸光度记为A0。按下式计算样品对DPPH自由基的相对清除率(γ)，清除率越大表示抗氧化能力越强。每个受试物设置5个平行重复。结果如表2所示。

统计学处理：使用SPSS16.0,进行统计学分析，计量资料的结果表示为均值±标准差,采用组间t检验。

表2各组不同浓度对DPPH自由基的相对清除率

浓度	10ug/ml	20ug/ml	40ug/ml	80ug/ml	160ug/ml
						阳性对照组(％)	10.90±0.82	30.22±5.14	50.24±4.75	80.61±6.45<sup>*</sup>	88.61±9.77
实施例1组(％)	11.06±1.44	32.76±4.89	56.55±7.65	87.65±7.67	97.61±9.45
						对比例1组(％)	1.77±0.21<sup>*</sup>	10.31±1.29<sup>*</sup>	14.05±3.22<sup>*</sup>	21.96±5.70<sup>*</sup>	26.06±4.81<sup>*</sup>
对比例2组(％)	1.00±0.12<sup>*</sup>	5.81±0.65<sup>*</sup>	7.72±1.45<sup>*</sup>	8.51±1.99<sup>*</sup>	10.51±1.42<sup>*</sup>
						对比例3组(％)	1.30±0.39<sup>*</sup>	6.93±0.65<sup>*</sup>	10.22±3.15<sup>*</sup>	11.51±2.90<sup>*</sup>	13.01±2.99<sup>*</sup>

注：t检验,*：P<0.05(与阳性实验组比较)

可见，实施例1和使用Vc的阳性实验组相比较，其对DPPH自由基的相对清除率更高；而单独只用一种菌株发酵得到的发酵组合物，以及不加巴戟天糖链溶液得到的发酵组合物，和阳性组以及实施例1组比较，对DPPH自由基的相对清除率有统计学差异(P＜0.05)，清除自由基的效果都要差。说明其相互之间有协同作用，能够加强自由基清除效果。

实施例4

体外抑制酪氨酸酶实验：

溶液配制：配制包含0.025mol/L Na₂HPO₄和0.02mol/L KH₂PO₄的PBS溶液(pH＝6.8)；用PBS配制1mg/ml的酪氨酸溶液和200U/ml的酪氨酸酶溶液。

将实施例1、对比例1-3做为处理组，维生素C乙基醚溶液为阳性对照组。PBS配制维生素C乙基醚溶液，质量分数分别为0.05％，0.10％，0.25％，0.50％，1.00％；PBS配制实施例1组、对比例1-3组溶液，质量分数分别为0.05％，0.10％，0.25％，0.50％，1.00％。

酶活检测：使用微量移液器分别按照表3移取a、b、c、d四组样液置于1.5mlEP管(配制反应体系为1000ul)，35℃水浴10min；加入酪氨酸酶溶液200ul，35℃水浴30min，各反应管分别取150ul加入96孔板，酶标仪测定475nm吸光度A值。每组重复试验3次。

表3各组反应液的组成(ml)

注：a组：无底物，不含抑制剂；b组：有底物，不含抑制剂；c组：无底物，含抑制剂；d组：有底物，含络氨酸酶抑制剂。

计算各处理组的酪氨酸酶抑制率(I)，I＝[1-(A_d-A_c)/(A_b-A_a)]*100％。试验结果如表4所示。

统计学处理：使用SPSS16.0,进行统计学分析，计量资料的结果表示为均值±标准差,采用组间t检验。

表4各组不同浓度其酪氨酸酶抑制率

相对抑制率	0.05％	0.10％	0.25％	0.50％	1.00％
						阳性对照组(％)	18.42±4.42	30.29±3.50	38.20±7.72	52.04±8.86	67.08±9.01
实施例1组(％)	20.28±5.14	42.32±4.66	65.52±8.61	77.23±9.02	86.44±8.08
						对比例1组(％)	10.37±2.99<sup>*</sup>	13.48±2.85<sup>*</sup>	20.72±4.86<sup>*</sup>	23.12±5.32<sup>*</sup>	25.97±4.54<sup>*</sup>
对比例2组(％)	2.36±0.41<sup>*</sup>	5.71±1.37<sup>*</sup>	6.26±1.63<sup>*</sup>	7.81±2.82<sup>*</sup>	7.54±3.53<sup>*</sup>
						对比例3组(％)	4.62±0.34<sup>*</sup>	7.33±1.35<sup>*</sup>	9.42±2.85<sup>*</sup>	12.48±2.24<sup>*</sup>	13.22±3.76<sup>*</sup>

注：t检验,*：P<0.05(与阳性实验组比较)

从表4可见，随着浓度的增加，酪氨酸酶抑制率均逐渐升高。在相同浓度下，实施例1组和阳性对照组比较，实施例1组的酪氨酸酶抑制率更好，有统计学差异(P＜0.05)。对比例1-3组和阳性对照组比较，其酪氨酸酶抑制率低，有统计学差异(P＜0.05)；可见，单独只用一种菌株发酵得到的发酵组合物，以及不加巴戟天糖链溶液得到的发酵组合物，其酪氨酸酶抑制的效果欠佳。

实施例5

临床疗效评估：

选取2018年2月至2019年12月于本公司接受美白祛斑美容的66例黄褐斑、炎症后色素沉着斑患者作为研究对象。随机分为治疗组与对照组，每组33例。治疗组男8例，女25例。对照组男7，女26例。入选本研究的两组志愿者的性别、年龄、疾病类型、严重程度、病程等资料之间的差异，经过统计学分析不存在统计学差异(P>0.05)，具有可比性。入选患者中排除患者慢性肝肾疾病、内分泌系统疾病的患者；处于妊娠期或哺乳期的女性患者；1个月内使用其他外用药物治疗的患者。

治疗前两组志愿者均使用温水清洁面部，治疗组全脸外用3ml的1％(质量百分比)浓度的本发明实施例1的植物发酵组合物纯净水溶液，一日3次。对照组用3ml的0.1％浓度的透明质酸溶液，一日3次。使用8周后立即观察疗效，对比两组患者的治疗效果。

叮嘱所有患者治疗期间均禁酒，多吃蔬菜、水果、微量元素多的食品，少吃辛辣食品，避免阳光照射。保持正常休息，多增加锻炼，保持愉快的情绪。

基本治愈：色斑面积在肉眼观察下消退>90％，颜色基本消失；显效：色斑面积在肉眼观察下消退>60％，颜色变淡情况明显，色素沉着区域皮肤图像测量疗效评定单位ID值≥15；好转：色斑面积在肉眼观察下消退>30％，颜色有一定程度变淡；无效：色斑面积在肉眼观察下消退<30％，颜色变化不明显。其中基本治愈率与显效率之和视为总有效率。

统计学处理：使用SPSS16.0,进行统计学分析，计数资料采用构成比(％)表示，卡方检验P<0.05时为差异有统计学意义。

对比接受8周治疗后，治疗组33例中基本治愈23例(69.7％)，显效10例(30.3％)，好转0例，无效0例，总有效率高达100％。对照组33例中基本治愈0例，显效0例，好转8例(24.2％)，无效25例(75.8％)，总有效率仅为24.2％。两组比较有统计学差异(P＜0.05)，治疗组总有效率显著优于对照组。

典型受试者治疗前后照片见图1-2。图1为使用前面部的色素沉着明显，图2为8周使用后色素几乎完全消失。

需要说明的是，以上所述仅为本发明的优选具体的实施例，若依本发明的构想所作变动，其产生的功能作用，仍未超出说明书所涵盖的精神时，均应在本发明的范围内。

实施例6

进一步采用皮肤斑贴试验对本发明的植物发酵组合物进行人体安全性研究，选用1％浓度的本发明实施例1的植物发酵组合物纯净水溶液进行测试。根据《化妆品卫生规范》(2007年版)中的规定，30位受试者中出现“++”级皮肤不良反应的人数多于2位或出现任何1位“+++”级或“+++”级以上皮肤不良反应时，判定受试物对人体有不良反应。

皮肤斑贴试验结果显示:在去除斑试器0.5，24和48h后，30名受试者中蒸馏水对照区均未观察到皮肤不良反应，植物发酵组合物受试区无1例出现“++”反应，该结果表明本发明植物发酵组合物的安全性很高，对人体皮肤未引起不良反应。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，本领域的普通技术人员可以理解：在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由权利要求及其等同物限定。

Claims (3)

1.一种具有美白淡斑功能的植物发酵组合物，其特征在于：

将沙棘果油、芦荟提取液、丹参提取液、巴戟天糖链溶液作为底物，用格氏乳杆菌ATCC19992和黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998进行发酵获得；

所述巴戟天糖链溶液的制备方法为：将提纯的巴戟天糖链用水溶解后，配置成质量浓度为0.2g/L的巴戟天糖链溶液，经0.22μm滤膜过滤除菌后备用；

所述发酵的具体步骤为：

（1）配置培养基：

按照重量份数，将5份芦荟提取液、10份丹参提取液、2份巴戟天糖链溶液混合均匀，再加入2份沙棘果油，2份甘油和适量吐温80，加热搅拌乳化均匀后，紫外线灭菌备用；

（2）黄色柠檬酸菌好氧发酵：

黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998活化：取一环黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998接种到高氏培养基中划线，37℃好氧培养24h；挑取平板中长势较好的单菌落接种至高氏液体培养基中活化，好氧培养成10⁸cfu/ml的种子液；

按照1%的接种量，将黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998接种于步骤（1）获得的培养基中，37℃好氧培养24h；

（3）格氏乳杆菌厌氧发酵：

格氏乳杆菌ATCC19992活化：取一环格氏乳杆菌ATCC19992接种到 MRS 固体培养基中划线，37℃厌氧培养24h；挑取平板中长势较好的单菌落接种至 MRS 液体培养基中活化，厌氧培养成10⁸cfu/ml的种子液；

按照1%的接种量，将格氏乳杆菌ATCC19992接种于步骤（2）获得的培养基中，37℃厌氧培养12h；

（4）紫外线灭菌，经0.22μm滤膜过滤除菌后备用。

2.权利要求1所述的具有美白淡斑功能的植物发酵组合物的制备方法，其特征在于，

步骤为：

（1）配置培养基：

按照重量份数，将5份芦荟提取液、10份丹参提取液、2份巴戟天糖链溶液混合均匀，再加入2份沙棘果油，2份甘油和适量吐温80，加热搅拌乳化均匀后，紫外线灭菌备用；

（2）黄色柠檬酸菌好氧发酵：

黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998活化：取一环黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998接种到高氏培养基中划线，37℃好氧培养24h；挑取平板中长势较好的单菌落接种至高氏液体培养基中活化，好氧培养成10⁸cfu/ml的种子液；

按照1%的接种量，将黄色柠檬酸菌CGMCC.No 2998接种于步骤（1）获得的培养基中，37℃好氧培养24h；

（3）格氏乳杆菌厌氧发酵：

格氏乳杆菌ATCC19992活化：取一环格氏乳杆菌ATCC19992接种到 MRS 固体培养基中划线，37℃厌氧培养24h；挑取平板中长势较好的单菌落接种至 MRS 液体培养基中活化，厌氧培养成10⁸cfu/ml的种子液；

按照1%的接种量，将格氏乳杆菌ATCC19992接种于步骤（2）获得的培养基中，37℃厌氧培养12h；

（4）紫外线灭菌，经0.22μm滤膜过滤除菌后备用。

3.权利要求1所述的发酵组合物在美白淡斑化妆品上的应用。

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