CN110923282A - 采用超声波辅助淀粉酶制备抗性淀粉的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了采用超声波辅助淀粉酶制备抗性淀粉的方法，属于抗性淀粉制备技术领域。按照下述步骤进行：(1)慈姑的清洗与整理；(2)慈姑淀粉的超声波提取；(3)抗性淀粉的制备；(4)超声场下酶解，冷冻干燥后即得慈姑抗性淀粉。本发明通过超声波的空化作用和机械振动作用使溶剂分子的运动加快，提升目标产物的提取率。(1)利用多频超声模式，减少了反应体系的升温，更加节能。该方法操作工艺简单易行，可大大提高慈姑淀粉的提取率，能耗较低，克服了传统慈姑淀粉提取过程中使用大量碱液的不足。(2)利用超声波可加速酶解反应，增加反应产物的得率，能够减少酶的使用量，缩短反应时间，提高慈姑抗性淀粉的得率。
Description
技术领域
本发明属于抗性淀粉制备技术领域，具体涉及一种利用超声波协同α-淀粉酶制备慈姑抗性淀粉的方法。
背景技术
慈姑原产于中国，主要分布在长江流域及南方各省、太湖及珠江三角洲地区生产，常年在水中生长，植株粗壮高大。叶丛生，基部有许多根须。根附近长有纤细的纤维状匍匐茎，在秋末有球根，球茎直径可达3cm。叶片箭状，宽，长20-30cm，裂片在基部的左右两侧长于中央裂片。叶柄粗壮，长50-80厘米。花序圆锥。华东各地都有栽培，地下的球茎可以食用。慈姑可以当作蔬菜来食用，春夏适合种植，因为慈姑喜光，每年的1-3月适合采摘，此时慈姑原料不仅质量好，而且价格相对便宜。
慈姑有很好的药用价值，它具有凉血止血、止咳、清热解毒的功效。可以将生慈姑洗干净捣碎，将生姜榨成只汁液，敷在患处，可有效治疗红肿热痛。慈姑中淀粉、蛋白质比例分别为24％和4％，还包括少量的脂肪及维生素、胆碱、甜菜碱等，慈姑淀粉是制备抗性淀粉的优质原料。抗性淀粉是一种能在结肠中部分或者完全发酵的纤维组分，经过结肠微生物的利用，能够形成短链脂肪酸等代谢产物，降低产物，有利于肠道健康。在小肠内，胰腺分泌的唾液淀粉酶能够将普通的淀粉分解成葡萄糖，为人体提供能量。摄入过多的淀粉糖会导致肥胖。而抗性淀粉能够降低淀粉酶的水解反应，释放葡萄糖缓慢，控制血糖平衡，适宜糖尿病患者。抗性淀粉可进一步制成功能食品，有一定的市场发展前景。
目前采用玉米、绿豆、板栗、马铃薯、香蕉、银杏、稻米等含淀粉量较高的植物的原料制备抗性淀粉的研究比较多。制备抗性淀粉的方法有：压热处理法在一定的压热处理能够提高抗性淀粉含量。在高温，高压下的条件下处理水和淀粉的混合物,保持温度不变0.5-6h,进行冷却，恒温储藏12h之上，然后烘干，粉碎。朱旻鹏等人对水分含量、压热温度与压热时间进行了研究，在水分含量为75％，温度为120℃下处理30min,抗性淀粉产率为10.47％。；微波辐射处理法是水和淀粉混匀，进行微波处理，冷却，干燥、粉碎；脱支法是用酶进行分解物质，比如普鲁兰酶可以将淀粉的1-6糖苷键水解，脱支法常常用来制备RS3，对淀粉进行脱支处理，有利于提高抗性淀粉含量(朱旻鹏,李新华,刘爱华.压热-酶解法制备玉米抗性淀粉的研究[J].粮食与饲料工业,2005(06):28-29)。酶解法具有的优点包括反应条件温和、可以控制，对设备没有耐高压、耐酸的要求；螺杆挤压法是指在高温、高压和高剪切力等物理方法下使得淀粉糖苷键断裂，导致分子大小和分子量分布变化；蒸汽加热法是指经过蒸汽处理、加热处理、纯化淀粉后的豆类抗性淀粉的含量变为19％-31％，是生豆的3-5倍，说明蒸汽加热是一种有效的抗性淀粉生产加热方法；酸解法是指用盐酸酸解淀粉，然后加稀碱调pH为中性。淀粉经过糊化和老化后，进行干燥获得抗性淀粉。刘亚伟等人采用酸变性-沸水浴法制备甘薯抗性淀粉产率为13.91％，以及其他方法，包括挤压处理和微波膨化以及超声波处理等(刘亚伟,张杰.酸解-水热处理对甘薯抗性淀粉形成的影响研究[J].食品科学,2003(06):41-45)。
近年来，超声波逐渐被应用到食品行业中，包括油脂浸取、蛋白质提取、多糖提取以及其他有效物质的提取，超声波都能有效的提高被提取物的产率。超声波作为一种物理方法用于提取抗性淀粉有利于提高产率。超声波频率高，能量大，产生声效应，增加传质速率。超声波可加速酶解反应，增加反应产物的得率，能够减少酶的使用量，在一定程度上能够节约企业的操作成本。而超声波用来提取和制备慈姑抗性淀粉研究较少。
发明内容
本发明的目的是提供一种利用超声波协同α-淀粉酶制备慈姑抗性淀粉的方法，通过调整超声波处理的频率、功率、处理时间等参数，提供了一种能够提高慈姑抗性淀粉含量的方法，可为慈姑的深加工用提高生产效率、降低成本。
一种利用超声波协同α-淀粉酶制备慈姑抗性淀粉的方法，按照下述步骤进行：
(1)慈姑的清洗与整理
首先挑选新鲜的慈姑、果实大的慈姑，然后进行清理，接着去皮、切块；
(2)慈姑淀粉的超声波提取
按照水和慈姑质量比为1:1的方式打浆，将淀粉匀浆放入不同的多模式超声条件下进行超声波辅助提取慈姑淀粉；然后依次用纱布、100目和200目筛进行多次过滤，得到淀粉悬浮物；静置24h滤掉上清液，得到沉淀即为粗淀粉，加入氢氧化钠溶液用磁力搅拌器搅拌2h混匀，去掉淀粉中的蛋白，用盐酸调节pH至7.0，离心分离；倒掉上清液，得到白色沉淀物，刮掉沉淀物表面黄色物质，然后将白色沉淀物刮至培养皿中研磨后，烘箱内50℃放置2天烘干淀粉水分，即为慈姑淀粉。
其中步骤(2)所述的不同的多模式超声条件下进行超声波预处理是指：三频超声处理，超声频率组合为：28/35/60kHz。
其中步骤(2)所述的不同的多模式超声条件下进行超声波预处理是指：超声时间为5-30min；最优的超声时间为10min。
其中步骤(2)所述的不同的超声条件下进行超声波预处理是指：最优的超声功率密度为250W/100mL。
其中步骤(2)所述的离心条件为离心20min，转速4000r/min。
(3)抗性淀粉的制备
将步骤(2)得到的慈姑淀粉加水制成5％的淀粉糊，70℃完全糊化；在pH6.0的条件下进行用α-淀粉酶酶解慈姑淀粉，加酶量为0.05U/g；温度50℃；酶解的时间为20min；在4℃进行老化24h。
(4)超声场下酶解：
步骤(2)中α-淀粉酶的酶活为10000U/g。
步骤(3)酶解慈姑淀粉的同时施加一定的超声处理，然后超声辅助酶解过后迅速放入4℃的冰箱里进行老化24h，冷冻干燥后即得慈姑抗性淀粉。
其中步骤(4)超声处理条件为：超声时间5-20min；超声功率为126-632w/100mL；超声频率为60kHz；超声间歇比为5s/5s-30s/5s。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
本发明多频超声辅助提取慈姑淀粉和超声场辅助酶解制备慈姑抗性淀粉，通过超声波的空化作用和机械振动作用使溶剂分子的运动加快，提升目标产物的提取率。(1)利用多频超声模式，减少了反应体系的升温，更加节能。该方法操作工艺简单易行，可大大提高慈姑淀粉的提取率，能耗较低，克服了传统慈姑淀粉提取过程中使用大量碱液的不足。(2)利用超声波可加速酶解反应，增加反应产物的得率，能够减少酶的使用量，缩短反应时间，提高慈姑抗性淀粉的得率。
附图说明
图1为超声时间对α-淀粉酶酶解淀粉制备慈姑抗性淀粉的影响；
图2为超声功率对α-淀粉酶酶解淀粉制备慈姑抗性淀粉的影响；
图3为超声间隙比对α-淀粉酶酶解淀粉制备慈姑抗性淀粉的影响；
图4为慈姑淀粉以及慈姑抗性淀粉的吸水量；
图5为慈姑淀粉以及慈姑抗性淀粉的扫描电镜图；其中原淀粉(A,B)、酶解抗性淀粉(C,D)、超声波辅助酶抗性淀粉(E,F)，分别为放大500、5000倍。
具体实施方式
下面结合附图，进一步阐释本发明，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明范围；实施例中未注明具体条件的实验方法，均按照常规条件；所述试剂和生物材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1-4(超声辅助酶解中超声时间的优化)
(1)慈姑的清洗与整理
首先挑选新鲜的慈姑、果实大的慈姑，然后进行清理，接着去皮、切块；
(2)慈姑淀粉的超声波提取
按照水和慈姑质量比为1:1的方式打浆，将淀粉匀浆放入不同的多模式超声条件下进行超声波辅助提取慈姑淀粉；超声辅助提取条件为：三频超声处理，超声频率组合为：28/35/60kHz；超声时间为10min；超声功率密度为250W/100mL。然后依次用纱布、100目和200目筛进行多次过滤，得到淀粉悬浮物；静置24h滤掉上清液，得到沉淀即为粗淀粉，加入氢氧化钠溶液用磁力搅拌器搅拌2h混匀，去掉淀粉中的蛋白，用盐酸调节pH至7.0，离心(20min 4000r/min)分离；倒掉上清液，得到白色沉淀物，刮掉沉淀物表面黄色物质，然后将白色沉淀物刮至培养皿中研磨后，烘箱内50℃放置2天烘干淀粉水分，即为慈姑淀粉。
(3)超声辅助酶解制备慈姑抗性淀粉
称量2.5克淀粉加入47.5ml的蒸馏水形成5％的淀粉糊。酶加量0.05U/g(酶活10000U/g)；在50℃的条件下进行酶解20min；超声功率为180w；超声频率为60kHz，超声间歇比为30s/5s，然后超声辅助酶解过后迅速放入4℃的冰箱里进行老化24h，冷冻干燥后即得慈姑抗性淀粉。根据国标NY/T2638-2014的方法进行测定抗性淀粉含量。设置不同的超声辅助酶解时间进行优化，其中超声时间对α-淀粉酶水解淀粉产生抗性淀粉的影响结果如图1所示。不超声辅助酶解的时候制备得到的抗性淀粉含量为6.93％，超声时间为5min的时候抗性淀粉含量为7.78％，效果最好，超声时间为10min的时候抗性淀粉含量为7.30％，超声时间为15min的时候抗性淀粉含量为7.32％，超声时间为20min的时候抗性淀粉含量为7.00％，由此选取5min作为超声时间最优条件，并进行下一步实验。
实施例5-9(超声辅助酶解中超声功率的优化)
(1)慈姑的清洗与整理
首先挑选新鲜的慈姑、果实大的慈姑，然后进行清理，接着去皮、切块；
(2)慈姑淀粉的超声波提取
按照水和慈姑质量比为1:1的方式打浆，将淀粉匀浆放入不同的多模式超声条件下进行超声波辅助提取慈姑淀粉；超声辅助提取条件为：三频超声处理，超声频率组合为：28/35/60kHz；超声时间为10min；超声功率密度为250W/100mL。然后依次用纱布、100目和200目筛进行多次过滤，得到淀粉悬浮物；静置24h滤掉上清液，得到沉淀即为粗淀粉，加入氢氧化钠溶液用磁力搅拌器搅拌2h混匀，去掉淀粉中的蛋白，用盐酸调节pH至7.0，离心(20min 4000r/min)分离；倒掉上清液，得到白色沉淀物，刮掉沉淀物表面黄色物质，然后将白色沉淀物刮至培养皿中研磨后，烘箱内50℃放置2天烘干淀粉水分，即为慈姑淀粉。
(3)超声辅助酶解制备慈姑抗性淀粉
称量2.5克淀粉加入47.5ml的蒸馏水形成5％的淀粉糊。酶加量0.05U/g(酶活10000U/g)；在50℃的条件下进行酶解20min；超声时间为5min，超声频率为60KHz，超声间歇比为30s/5s。然后超声辅助酶解过后迅速放入4℃的冰箱里进行老化24h，冷冻干燥后即得慈姑抗性淀粉。根据国标NY/T2638-2014的方法进行测定抗性淀粉含量。设置不同的超声功率进行超声辅助酶解并进行优化，其中超声功率对α-淀粉酶水解淀粉产生抗性淀粉的影响结果如图2所示。
由图2所示，超声功率对酶解产生抗性淀粉的含量有较大的影响，不同超声功率对α-淀粉酶水解产生抗性淀粉的含量也不同。不超声的时候抗性淀粉含量为7.40％，超声功率为60w的时候抗性淀粉含量为8.80％，产生效果最好，超声时间为120wn的时候抗性淀粉含量为8.12％，超声功率为300w的时候抗性淀粉含量为6.74％，超声功率为240w的时候抗性淀粉含量为7.00％，由此选取60w作为超声功率为最优条件，并进行下一步实验。
实施例10-15(超声辅助酶解中超声间歇比的优化)
(1)慈姑的清洗与整理
首先挑选新鲜的慈姑、果实大的慈姑，然后进行清理，接着去皮、切块；
(2)慈姑淀粉的超声波提取
按照水和慈姑质量比为1:1的方式打浆，将淀粉匀浆放入不同的多模式超声条件下进行超声波辅助提取慈姑淀粉；超声辅助提取条件为：三频超声处理，超声频率组合为：28/35/60kHz；超声时间为10min；超声功率密度为250W/100mL。然后依次用纱布、100目和200目筛进行多次过滤，得到淀粉悬浮物；静置24h滤掉上清液，得到沉淀即为粗淀粉，加入氢氧化钠溶液用磁力搅拌器搅拌2h混匀，去掉淀粉中的蛋白，用盐酸调节pH至7.0，离心(20min 4000r/min)分离；倒掉上清液，得到白色沉淀物，刮掉沉淀物表面黄色物质，然后将白色沉淀物刮至培养皿中研磨后，烘箱内50℃放置2天烘干淀粉水分，即为慈姑淀粉。
(3)超声辅助酶解制备慈姑抗性淀粉
称量2.5克淀粉加入47.5ml的蒸馏水形成5％的淀粉糊；酶加量0.05U/g(酶活10000U/g)；在50℃的条件下进行酶解20min；超声时间为5min，超声功率为60w，超声频率为60KHz。然后超声辅助酶解过后迅速放入4℃的冰箱里进行老化24h，冷冻干燥后即得慈姑抗性淀粉。根据国标NY/T2638-2014的方法进行测定抗性淀粉含量。设置不同的超声间歇比进行超声辅助酶解并进行优化，其中超声间歇比对α-淀粉酶水解淀粉产生抗性淀粉的影响结果如图3所示。超声间歇比分别为0、5s/5s、10s/5s、15s/5s、20s/5s、25s/5s、30s/5s。由图3所示，超声间歇比对酶解产生抗性淀粉的含量影响很小，不同超声间歇比对α-淀粉酶水解产生抗性淀粉的含量不同。不超声的时候抗性淀粉含量为7.42％，超声间歇比为20s/5s的时候抗性淀粉含量为9.03％，产生效果最好，超声间歇比为5s/5s的时候抗性淀粉含量为8.70％，超声间歇比为10s/5s的时候抗性淀粉含量为8.79％，超声间歇比为15s/5s的时候抗性淀粉含量为8.69％，超声间歇比为25s/5s的时候抗性淀粉含量为8.90％，超声间歇比为30s/5s的时候抗性淀粉含量为8.82％。
实验例
抗性淀粉的制备
(1)慈姑的清洗与整理
首先挑选新鲜的慈姑、果实大的慈姑，然后进行清理，接着去皮、切块；
(2)慈姑淀粉的超声波提取
按照水和慈姑质量比为1:1的方式打浆，将淀粉匀浆放入不同的多模式超声条件下进行超声波辅助提取慈姑淀粉；超声辅助提取条件为：三频超声处理，超声频率组合为：28/35/60kHz；超声时间为10min；超声功率密度为250W/100mL。然后依次用纱布、100目和200目筛进行多次过滤，得到淀粉悬浮物；静置24h滤掉上清液，得到沉淀即为粗淀粉，加入氢氧化钠溶液用磁力搅拌器搅拌2h混匀，去掉淀粉中的蛋白，用盐酸调节pH至7.0，离心(20min 4000r/min)分离；倒掉上清液，得到白色沉淀物，刮掉沉淀物表面黄色物质，然后将白色沉淀物刮至培养皿中研磨后，烘箱内50℃放置2天烘干淀粉水分，即为慈姑淀粉。
(3)超声辅助酶解制备慈姑抗性淀粉
称量2.5克淀粉加入47.5ml的蒸馏水形成5％的淀粉糊。酶加量0.05U/g(酶活10000U/g)；在50℃的条件下进行酶解20min；pH为6.0、超声频率为60KHz，超声时间为5min、超声功率为60w、超声间歇比为20s/5s，然后超声辅助酶解过后迅速放入4℃的冰箱里进行老化24h，冷冻干燥后即得慈姑抗性淀粉。根据国标NY/T2638-2014的方法进行测定抗性淀粉含量，制得抗性淀粉的含量达到9.03％。
本发明中后续表1-3，以及图4和图5中所指的抗性淀粉(酶解)指的是实验例抗性淀粉的制备中步骤(3)中不采用超声辅助酶解制备的样品；而抗性淀粉(超声波+酶解)指的是实验例抗性淀粉的制备中步骤(3)中采用超声辅助酶解制备的样品；用以对比说明超声辅助酶解的效果，特此说明。
抗性淀粉的性能及结构分析
(1)溶解度和膨胀度
称取1.000g慈姑淀粉和慈姑抗性淀粉于离心管中，并放入20mL蒸馏水溶解，然后在80℃、90℃、100℃的水浴中加热40min。每5分钟用涡旋震荡器震荡1次，将其冷却到室温后，在3000r/min的条件下离心15min。将上清液倒入称量恒重的称量瓶中，在105℃烘干至恒重，称取上清液干燥后的质量和离心管沉淀的质量，计算出淀粉的溶解性和膨胀性。
淀粉的溶解性(S)(％)以下的方程式计算：
式中：A—上清液干燥后的质量单位为g；
W—淀粉的质量，单位为g；
D—离心后沉淀的质量，单位为g。
表1慈姑抗性淀粉的溶解度
由上述由表1可以知道随着温度的上升，各种样品溶解度都会提高，而且随着抗性淀粉含量的增高各个样品的溶解度也在增高。酶解抗性淀粉、超声波辅助酶解抗性淀粉都明显高于原淀粉的溶解度，原因可能是酶解的淀粉，生成许多直链淀粉，直链淀粉溶解度好于支链淀粉，从而原淀粉溶解度较低。随着酶解，脱支程度变大，部分直链淀粉形成具有双螺旋结构的抗酶解淀粉，即抗性淀粉。而超声波辅助酶解制备的慈姑抗性淀粉的溶解度大于单一酶解的抗性淀粉。
表2慈姑抗性淀粉的膨胀率
由上述表2可以知道慈姑抗性的膨胀率总体趋势随着温度的上升膨胀率下降，本实验设置的3个温度均比较高，淀粉中的微晶容易松动，极性基团容易和水发生结合，所以能够充分吸水膨胀。并且原料的膨胀率大于两种抗性淀粉，而两种抗性淀粉的膨胀率相差不大。
(2)透明度
称取样品，配制质量分数1％的淀粉乳，100℃水浴加热并搅拌20min。然后冷却至室温，以蒸馏水为空白，在620nm处用紫外分光光度计测量透光度。
表3慈姑抗性淀粉的透明度
淀粉在沸水中发生糊化，水分一开始进入非结晶部位，随着内部温度渐渐高，水分就进入淀粉粒的结晶区。淀粉发生不可逆地溶胀，最后淀粉分子全部进入溶液。导致淀粉体积变大，质地变黏稠。研究表明，透明度与很多因素有关，一方面可能由于颗粒小，不容易吸水膨胀，不容易反射和折射光，使得透明度高，还可能与单磷酸酯含量有关(曾绍校.莲子淀粉品质特性的研究与应用[D].福建农林大学,2007.)。另外，淀粉的透明度与淀粉的直链淀粉和支链淀粉的含量有关，而直链淀粉的增多会导致透光率的下降，主要原因是直链淀粉容易使淀粉糊形成老化回生，会阻碍光的照射，形成折射，造成透光率降低。由上述的结果可以知道透光率前面作用大于后面作用，造成各种抗性淀粉样品透光率较高。
(3)吸水性能
为保证样品颗粒大小影响实验结果，统一将样品过筛。然后将样品全部放烘箱干燥至恒重，取出后迅速放入干燥器中冷却。然后称取适量淀粉均匀铺散在称量瓶中，然后放入底部放有蒸馏水的干燥器中，确保干燥器的气密型后将干燥器移至恒温培养箱中，35℃恒温环境中下静置50h，取出重复3次称样品的量，取平均值。
式中：m1—干燥样品的质量，单位为g；m2—吸水后样品的质量，单位为g。
由图4可以知道慈姑淀粉以及慈姑抗性淀粉的吸水量的大小关系：原淀粉>抗性淀粉(超声)>抗性淀粉(酶解)。淀粉吸水性能不仅与物质的颗粒大小有关，在实验之前经过目筛处理，所以颗粒大小基本一致，影响不是很大。干燥慈姑原料淀粉在常温下不溶于水，有很强的吸湿性，也容易吸收味道。而抗性淀粉本身具有持水性低的特点，所以吸收水分能力弱。而经过超声的抗性淀粉的含水量高于酶解淀粉，可能是经过超声的淀粉形成很多的碎块，并且表面形成很多的气孔，增大了与水分子接触面积，进而同样的环境下吸收较多的水分。
通过上述实验可以发现，酶解抗性淀粉和超声辅助酶解样品溶解度高于原料淀粉，原因可能是超声辅助酶解抗性淀粉和酶解抗性淀粉受到α-淀粉酶和超声的影响生成更多的直链淀粉。抗性淀粉膨胀度总体上呈现下降趋势。处理过样品的吸水量较原料有所降低，提高了淀粉的耐水性，有效缓解淀粉吸潮结块进而发霉的缺点。抗性淀粉的透过率提高，原因可能是抗性淀粉很难吸水膨胀，不容易折射和反射光，所以透明度高。
(4)扫描电镜
由图5慈姑淀粉以及慈姑抗性淀粉的扫描电镜图，可以发现原淀粉在经过酶解和超声辅助酶解过后有明显的变化。由图5A、B两张电镜图原料淀粉分子在电镜扫描下是个椭圆形状，密度较大，相互连接在一起，而且表面光滑，没有褶皱。并且表面带有少量的水分子。由图5C、D两张图可以知道α-淀粉酶起到了作用，淀粉分子表面出现了明显的褶皱，并且出现断裂的效果，表面凹凸不平，主要原因是α-淀粉酶可以水解淀粉内部的α-1,4糖苷键，将淀粉链切断，以至于上述图片撕裂成大的碎块，并且表面出现微小的小孔。再看图5E、F两张图片较图5C、D两张图有着明显的变化，图5E淀粉状态由图5C、D的撕裂大碎块状态变成更多的小碎块，再由图5F图片可以知道每一个小块上出现了更多的小孔。除了酶的作用外，主要就是因为超声的作用，声波产生速度极高、强烈的空化效应和搅拌作用，能够破坏植物细胞，超声波处理能够使淀粉颗粒更加均匀，更有利于淀粉酶的水解。
Claims (5)
1.一种利用超声波协同α-淀粉酶制备慈姑抗性淀粉的方法，其特征在于按照下述步骤进行：
(1)慈姑的清洗与整理
首先挑选新鲜的慈姑、果实大的慈姑，然后进行清理，接着去皮、切块；
(2)慈姑淀粉的超声波提取
按照水和慈姑质量比为1:1的方式打浆，将淀粉匀浆放入不同的多模式超声条件下进行超声波辅助提取慈姑淀粉；然后依次用纱布、100目和200目筛进行多次过滤，得到淀粉悬浮物；静置24h滤掉上清液，得到沉淀即为粗淀粉，加入氢氧化钠溶液用磁力搅拌器搅拌2h混匀，去掉淀粉中的蛋白，用盐酸调节pH至7.0，离心分离；倒掉上清液，得到白色沉淀物，刮掉沉淀物表面黄色物质，然后将白色沉淀物刮至培养皿中研磨后，烘箱内50℃放置2天烘干淀粉水分，即为慈姑淀粉；
(3)抗性淀粉的制备
将步骤(2)得到的慈姑淀粉加水制成5％的淀粉糊，70℃完全糊化；在pH6.0的条件下进行用α-淀粉酶酶解慈姑淀粉，加酶量为0.05U/g；温度50℃；酶解的时间为20min；在4℃进行老化24h；
(4)超声场下酶解：
将步骤(3)酶解慈姑淀粉的同时施加一定的超声处理，然后超声辅助酶解过后迅速放入4℃的冰箱里进行老化24h，冷冻干燥后即得慈姑抗性淀粉。
2.根据权利要求1所述的一种利用超声波协同α-淀粉酶制备慈姑抗性淀粉的方法，其特征在于其中步骤(2)所述的不同的多模式超声条件下进行超声波预处理是指：三频超声处理，超声频率组合为：28/35/60kHz。
3.根据权利要求1所述的一种利用超声波协同α-淀粉酶制备慈姑抗性淀粉的方法，其特征在于其中步骤(2)所述的不同的多模式超声条件下进行超声波预处理是指：超声时间为5-30min；最优的超声时间为10min。
4.根据权利要求1所述的一种利用超声波协同α-淀粉酶制备慈姑抗性淀粉的方法，其特征在于其中步骤(2)所述的不同的超声条件下进行超声波预处理的超声功率密度为250W/100mL。
5.根据权利要求1所述的一种利用超声波协同α-淀粉酶制备慈姑抗性淀粉的方法，其特征在于其中步骤(4)超声处理条件为：超声时间5-20min；超声功率为126-632w/100mL；超声频率为60kHz；超声间歇比为5s/5s-30s/5s。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20200327 |
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