CN110876701A - 一种抑制黑色素生成的美白冻干粉及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种抑制黑色素生成的美白冻干粉及其制备方法，以全蝎提取物、水蛭提取物、烟叶提取物、黄秋葵提取物、蛋清酶解液、山茶籽油、牛唾液提取液等为原料，经两次冷冻干燥得到。本发明所得冻干粉的皮肤吸收性好，可抑制黑色素生成，同时具有良好的保湿效果，从根本上实现皮肤美白，是一种理想的护肤美容产品。本发明的产品主要用于紧急补救性美容(快速美白)，不需要长期使用。

Description

一种抑制黑色素生成的美白冻干粉及其制备方法
技术领域
本发明涉及美容护肤技术领域，特别地，涉及一种抑制黑色素生成的美白冻干粉及其制备方法。
背景技术
随着人们生活水平和审美标准的提高，白皙与洁润的肌肤越来越被大多数女性所推崇，随之而来的是美白产品需求量持续增长。人们希望通过美白护理品的使用而得到白皙、光洁的皮肤。
研究表明，皮肤色素沉着是由于黑色素细胞内黑色素产生过多导致的，倘若能抑制黑色素生成(酪氨酸酶是调控黑色素生成的限速酶)，自然可以从根本上达到美白目的。黑色素是在黑素细胞内生成的，而黑素细胞存在于皮肤表皮的基底层，所以这类功能性成分必须渗透入皮肤，到达基底层才可发挥其功效，这是一个比较难解决的问题，因为角质层的天然屏障是很难透过的，这也是许多美白护肤品作用不理想的一个很重要的原因，因此是否具有良好的渗透性是衡量一款产品是否优秀主要标准。
目前市场上常用的抑制黑色素生成的美白剂主要有AA2G、熊果苷及其衍生物、曲酸及其衍生物、维生素C及其衍生物、内皮素拮抗剂、甘草黄酮、花青素等。不管是哪一种，吸收性都是制约其功效发挥的一大阻碍。
另外，皮肤白皙透亮，除了黑色素含量多少和分布是否均匀，还取决于皮肤的保湿度和皮肤细腻程度，决定眼睛光学视觉效果。阳光照到皮肤上，首先会有一部分光刚照射到皮肤上，会因皮肤的状态，以及看肌肤的角度不同，呈现不同的皮肤暗哑或透亮白皙。如果光接触到的皮肤非常平滑，那这光束整齐的向一个方向反弹走，叫镜面反射。如果眼睛正好在反射的方向上就能接收到这部分光，否则就看不到如果光接触到的皮肤很粗糙，那么光线就会化整为零，向各个方向反射都有，叫做漫反射——眼睛不管在哪个方向总能接收到一部分。剩余的一部分光在皮肤里遇到各种不透光成分又被陆续反弹出来了，光也被散落在各个方向上了，叫做散射，眼睛不管在哪个方向总能接收到一部分。还有一部分光直接就被皮肤里的各种物质吸收掉，消失在皮肤里。因此，所以我们看到的皮肤，其实就是镜面反射(只在特定角度)+漫反射+散射的光的总和。这个总量越高，皮肤就看起来越亮。故皮肤的保湿性也直接影响是否白皙的观感，而现有的美白产品单纯针对美白。在前述的美白过程中促进皮肤的代谢循环，会消耗大量水分，造成皮肤干燥，实际护肤过程中通常需要将美白产品与保湿产品搭配使用，无疑比较繁琐。
冻干粉是一种常见的护肤美容产品，是将需要干燥的物料溶液预先冻结成固体，然后在低温低压条件下，从冻结状态不经过液态而直接升华去除水分。冻干粉很好地保证了原来美容成分的高活性，达到超高的稳定性，与溶酶混合，又快速恢复，方便使用。高活性，保证了产品的营养成分，能够更好地被细胞吸收，从而缩短改善肌肤周期。
发明内容
本发明目的在于提供一种抑制黑色素生成的美白冻干粉及其制备方法，以解决皮肤吸收性欠佳进而影响美白效果、美白产品保湿性不够等技术问题。
为实现上述目的，本发明提供了一种抑制黑色素生成的美白冻干粉的制备方法，以重量份计，先将1份全蝎提取物、0.2～0.3份水蛭提取物、3～5份烟叶提取物和0.2～0.3份黄秋葵提取物加入1.5～2份蛋清酶解液中，超声波振荡30～40分钟，第一次冷冻干燥，取出后加入2～3份山茶籽油中，超声波振荡20～30分钟，得混合液，最后边以300～500r/分钟的搅拌速率搅拌边将混合液缓慢滴加至5～8份牛唾液提取液中，滴加完毕后继续搅拌15～25分钟，第二次冷冻干燥，包装，即得所述的一种抑制黑色素生成的美白冻干粉。
优选的，所述全蝎提取物的制备方法如下：先将鲜活蝎子全虫微波处理并粉碎成粉末，然后将粉末加入5～8倍重量的甘油-醋酸混合液中，超声波振荡提取5～8小时，过滤取滤液，浓缩至滤液体积的1/15～1/20，接着进行超临界二氧化碳萃取，分离釜压力为7～8MPa，萃取温度为40～42℃，萃取时间为5～6小时，即得所述的全蝎提取物；甘油-醋酸混合液中甘油、醋酸的体积比为1：0.7～0.8。
进一步优选的，微波处理并粉碎成粉末的具体方法为：先将蝎子全虫于300～350W微波处理3～5分钟，然后粉碎至300～400目。
优选的，所述水蛭提取物的制备方法如下：取水蛭鲜活全体，加入3～6倍重量的水，匀浆；取匀浆液，调节pH至7～9，加入0.002～0.005倍重量的胰蛋白酶，40～60℃酶解处理8～12小时，冷却至室温，向所得酶解液中加入3～5倍体积的无水乙醇于0～5℃静置沉淀8～12小时，过滤，滤液减压干燥，得水蛭提取物。
优选的，所述烟叶提取物的制备方法如下：先将烟叶进行杀青、干燥和粉碎处理制成烟叶浆液，然后依次进行复合酶酶解、微波提取，醇沉后离心得到提取物Ⅰ和上清液，所述的提取物Ⅰ加入3～5倍重量的丙酮，超声波振荡20～30分钟，离心所得沉淀为提取物Ⅱ，所述的上清液与等体积的氯仿混合，超声波振荡20～30分钟，离心所得沉淀为提取物Ⅲ，最后将提取物Ⅱ和提取物Ⅲ加入5～8倍总重量的水中，超声波振荡30～40分钟，离心所得沉淀即为所述的烟叶提取物。
进一步优选的，烟叶浆液是将粉碎后所得烟末与8～10倍重量的水混合、磨浆得到；复合酶酶解的具体方法是：将复合酶加入200～250倍重量的烟叶浆液中，50～60℃酶解处理2～3小时，所述复合酶是纤维素酶与果胶酶以质量比0.8～1：1混合得到；微波提取的工艺条件为：300～500W微波处理3～5分钟。
优选的，所述黄秋葵提取物的制备方法如下：将洗净晾干的新鲜黄秋葵横向切片后，加入6～8倍重量的蒸馏水中，加热至沸腾，煎煮30～40分钟，离心取上清液，浓缩至体积减少4/5～9/10，得浓缩液，加入体积浓度92～95％的乙醇水溶液，使得浓缩液中乙醇体积百分数为80～85％，0～5℃静置醇析，离心，收集沉淀，40～50℃烘干5～8小时即得所述的黄秋葵提取物。
优选的，所述蛋清酶解液的制备方法如下：先向蛋清液中加入0.01～0.02倍重量的中性蛋白酶，搅拌均匀，50～53℃酶解3～4小时，柠檬酸调节pH至4～4.2，58～60℃加热搅拌15～20分钟，三乙醇胺调节pH至6.8～7，过滤，即得所述的蛋清酶解液。
优选的，所述山茶籽油的制备方法如下：先将山茶籽粉碎成山茶籽粗粉，然后利用蒸汽爆破技术和超微纳米粉碎制成山茶籽细粉，最后经螺旋榨油机压榨得到山茶籽油。
进一步优选的，蒸汽爆破技术的工艺条件为：将山茶籽粗粉装入蒸汽爆破设备的爆破腔中，在1～2.5MPa条件下保持1～2分钟后迅速释放压力即可；利用气流粉碎机进行超微纳米粉碎，其工作条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为60～80分钟；螺旋榨油机的工作条件为：螺旋榨油机空转3～5分钟后，趁热投料山茶籽细粉，当机体温度达到70～80℃时开始压榨，直至没有油流出。
优选的，所述牛唾液提取液的制备方法如下：收集健康牛的唾液，离心取上清液，即得所述的牛唾液提取液。
优选的，混合液滴加至牛唾液提取液中所需时间为30～40分钟，滴加过程中搅拌速率为300～500r/分钟。
优选的，第一次冷冻干燥的工艺条件为：先于-22～-25℃冷冻8～10小时，然后抽真空至5Pa以下，维持真空度不变，升温至28～32℃，保温3～5小时；第二次冷冻干燥的工艺条件为：先于-25～-30℃冷冻7～9小时，然后抽真空至5Pa以下，维持真空度不变，升温至30～35℃，保温8～10小时。
优选的，包装的具体方法是：利用10mL规格的西林瓶进行分装，压盖密封。
利用上述制备方法得到的一种抑制黑色素生成的美白冻干粉。
本发明具有以下有益效果：
本发明以全蝎提取物、水蛭提取物、烟叶提取物、黄秋葵提取物、蛋清酶解液、山茶籽油、牛唾液提取液等为原料，经两次冷冻干燥得到一种冻干粉产品，其皮肤吸收性好，可抑制黑色素生成，同时具有良好的保湿效果，从根本上实现皮肤美白，是一种理想的护肤美容产品。本发明的产品主要用于紧急补救性美容(快速美白)，不需要长期使用。本发明的优势具体分析如下：
1、本发明先将全蝎提取物、水蛭提取物、烟叶提取物、黄秋葵提取物、蛋清酶解液混合后进行第一次冷冻干燥，然后加入山茶籽油中，生成脂溶性包覆粉末的“小油滴”，缓慢滴加至牛唾液提取液中，微观呈现水包油的状态，充分分散后进行第二次冷冻干燥即可。所得冻干粉产品与溶媒混合时候，仍旧会是水包油，肤感清爽，常规的水包油保湿性会逊于油包水，但在本发明中构建水包油外层结构的牛唾液提取液成分，含有丰富的黏多糖，保湿性好。
2、全蝎提取物中含有丰富的矿物质、甜菜碱、棕榈酸、油酸等，矿物质可以让皮肤更好、更快地吸收水分，增强皮肤的吸收能力；甜菜碱允许水分子完全被全活细胞吸收利用，具有独特的保湿作用，且具有抗过敏作用；棕榈酸是优良的皮肤柔润肌，具有很好的渗透性，可渗透角质细胞，可促进皮肤对其他成分的吸收；油酸可络合铜，而酪氨酸酶的活性需要铜离子，故油酸的存在抑制了酪氨酸酶的活性，抑制黑色素合成，起到美白作用。
3、水蛭提取物中含有水蛭素，是由65个氨基酸组成的多肽，其分子量小，可被皮肤迅速吸收，而且能够快速稀释血液黏稠度、加快血液流通速度和疏通毛细血管，可在全蝎提取物中棕榈酸促进角质层渗透的基础上，促进皮肤角质层以下更深层次的吸收，结合全蝎提取物中矿物质对皮肤吸收能力的改善，协同提高皮肤的吸收性，进而发挥保湿、美白成分的最大效能。问题皮肤的产生根源就在于局部微循环不畅，皮肤营养来自于血液输送，而水蛭提取物除了直接提供营养，还能对皮肤毛细血管起到改善微循环的作用，提高全蝎提取物、烟叶提取物、黄秋葵提取物、鸡蛋蛋清等营养成分的利用率，更好地发挥美白、保湿作用。
4、烟叶提取物中含有辛二酸和多糖类物质，辛二酸与酪氨酸酶的底物酪氨酸具有一定的结构相似性，可以竞争性抑制酪氨酸酶的活性，影响黑色素的形成，起到美白作用；多糖类物质具有保湿、抗氧化等作用。由于烟叶提取物中含有烟碱、茄尼醇等对人体不好的物质，在烟叶提取过程中，分别通过氯仿、丙酮溶解的方法进行去除。
5、黄秋葵提取物中含有丰富的果胶类成分，具有良好的成膜性能，对皮肤形成天然屏障，避免紫外线伤害，防止水分子逸出，强化保湿性成分的保湿性能。
6、鸡蛋蛋清中含有活性巯基，其能抑制酪氨酸酶的活性，从而抑制黑色素的生成，起到美白作用。由于蛋清中多含大分子的蛋白质，并不能被皮肤吸收，本发明通过酶解处理，降解大分子蛋白质，获得能被皮肤吸收的多肽或氨基酸，有利于皮肤吸收。
本发明的美白作用主要依赖于全蝎提取物、烟叶提取物和鸡蛋蛋清三者的协同作用。现有研究已经证实酪氨酸酶是调控黑色素生成的限速酶，故抑制酪氨酸酶的活性可从根本上实现美白。烟叶提取物中的辛二酸由于与酪氨酸结构具有一定的相似性，酪氨酸酶与酪氨酸的结合过程受到干扰，大大抑制了酪氨酸酶作用于底物生成黑色素的活性，但是仍有一部分酪氨酸酶可与酪氨酸结合。酪氨酸酶含有羟基和氨基，鸡蛋蛋清中的巯基可与羟基、氨基等形成氢键，阻止剩余酪氨酸酶与酪氨酸的结合。由于巯基形成的氢键键能较小，为了强化对酪氨酸酶活性的抑制作用，本发明引入全蝎提取物，其中含有的油酸对铜离子具有结合作用，而酪氨酸酶的活性需要铜离子，从而全面抑制酪氨酸酶的活性。
本发明的保湿作用主要依赖于全蝎提取物、烟叶提取物、黄秋葵提取物三者的协同作用。全蝎提取物中的矿物质促进吸收水分，甜菜碱的作用使得这些水分子完全被活细胞吸收利用，烟叶提取物中多糖含有的羟基可与水分子结合形成氢键，借助氢键的作用留住水分子，达到内部保湿作用，来不及形成氢键作用的水分子逸出时会受到黄秋葵提取物中果胶成膜的屏蔽作用，再次返回并被活细胞吸收利用，各部分协同合作，缺一不可，实现良好的保湿作用。7、山茶籽油与皮肤油脂有相近之处，使得本发明的冻干粉产品与皮肤的相容性更好，起到先驱引导作用，为矿物质、水蛭素等的吸收打开吸收通道，促进其他成分的吸收性，另一方面，构建水包油的油性核心，对水不溶性成分起到良好的包裹作用。
8、牛唾液提取液中除了含有大量的黏多糖，提供良好的保湿性，还含有尿素、游离氨基酸、矿物质等，尿素有助于减少皮肤水分流失，锁水能力好，增强保湿性能，氨基酸、矿物质等可为皮肤提供营养支持，改善皮肤状况。
除了上面所描述的目的、特征和优点之外，本发明还有其它的目的、特征和优点。下面将对本发明作进一步详细的说明。
具体实施方式
以下对本发明的实施例进行详细说明，但是本发明可以根据权利要求限定和覆盖的多种不同方式实施。
实施例1：
一种抑制黑色素生成的美白冻干粉的制备方法，以重量份计，先将1份全蝎提取物、0.2份水蛭提取物、5份烟叶提取物和0.2份黄秋葵提取物加入2份蛋清酶解液中，超声波振荡30分钟，第一次冷冻干燥，取出后加入3份山茶籽油中，超声波振荡20分钟，得混合液，最后边以500r/分钟的搅拌速率搅拌边将混合液缓慢滴加至5份牛唾液提取液中，滴加完毕后继续搅拌25分钟，第二次冷冻干燥，包装，即得所述的一种抑制黑色素生成的美白冻干粉。
全蝎提取物的制备方法如下：先将鲜活蝎子全虫微波处理并粉碎成粉末，然后将粉末加入5倍重量的甘油-醋酸混合液中，超声波振荡提取8小时，过滤取滤液，浓缩至滤液体积的1/15，接着进行超临界二氧化碳萃取，分离釜压力为8MPa，萃取温度为40℃，萃取时间为6小时，即得所述的全蝎提取物；甘油-醋酸混合液中甘油、醋酸的体积比为1：0.7。微波处理并粉碎成粉末的具体方法为：先将蝎子全虫于350W微波处理3分钟，然后粉碎至400目。
水蛭提取物的制备方法如下：取水蛭鲜活全体，加入3倍重量的水，匀浆；取匀浆液，调节pH至9，加入0.002倍重量的胰蛋白酶，60℃酶解处理8小时，冷却至室温，向所得酶解液中加入5倍体积的无水乙醇于0℃静置沉淀12小时，过滤，滤液减压干燥，得水蛭提取物。
烟叶提取物的制备方法如下：先将烟叶进行杀青、干燥和粉碎处理制成烟叶浆液，然后依次进行复合酶酶解、微波提取，醇沉后离心得到提取物Ⅰ和上清液，所述的提取物Ⅰ加入3倍重量的丙酮，超声波振荡30分钟，离心所得沉淀为提取物Ⅱ，所述的上清液与等体积的氯仿混合，超声波振荡20分钟，离心所得沉淀为提取物Ⅲ，最后将提取物Ⅱ和提取物Ⅲ加入8倍总重量的水中，超声波振荡30分钟，离心所得沉淀即为所述的烟叶提取物。
烟叶浆液是将粉碎后所得烟末与10倍重量的水混合、磨浆得到；复合酶酶解的具体方法是：将复合酶加入200倍重量的烟叶浆液中，60℃酶解处理2小时，所述复合酶是纤维素酶与果胶酶以质量比1：1混合得到；微波提取的工艺条件为：300W微波处理5分钟。
黄秋葵提取物的制备方法如下：将洗净晾干的新鲜黄秋葵横向切片后，加入6倍重量的蒸馏水中，加热至沸腾，煎煮40分钟，离心取上清液，浓缩至体积减少4/5，得浓缩液，加入体积浓度95％的乙醇水溶液，使得浓缩液中乙醇体积百分数为80％，5℃静置醇析，离心，收集沉淀，40℃烘干8小时即得所述的黄秋葵提取物。
蛋清酶解液的制备方法如下：先向蛋清液中加入0.01倍重量的中性蛋白酶，搅拌均匀，53℃酶解3小时，柠檬酸调节pH至4.2，58℃加热搅拌20分钟，三乙醇胺调节pH至6.8，过滤，即得所述的蛋清酶解液。
山茶籽油的制备方法如下：先将山茶籽粉碎成山茶籽粗粉，然后利用蒸汽爆破技术和超微纳米粉碎制成山茶籽细粉，最后经螺旋榨油机压榨得到山茶籽油。蒸汽爆破技术的工艺条件为：将山茶籽粗粉装入蒸汽爆破设备的爆破腔中，在2.5MPa条件下保持1分钟后迅速释放压力即可；利用气流粉碎机进行超微纳米粉碎，其工作条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为80分钟；螺旋榨油机的工作条件为：螺旋榨油机空转3分钟后，趁热投料山茶籽细粉，当机体温度达到80℃时开始压榨，直至没有油流出。
牛唾液提取液的制备方法如下：收集健康牛的唾液，离心取上清液，即得所述的牛唾液提取液。
混合液滴加至牛唾液提取液中所需时间为30分钟，滴加过程中搅拌速率为500r/分钟。
第一次冷冻干燥的工艺条件为：先于-22℃冷冻10小时，然后抽真空至5Pa以下，维持真空度不变，升温至28℃，保温5小时；第二次冷冻干燥的工艺条件为：先于-25℃冷冻9小时，然后抽真空至5Pa以下，维持真空度不变，升温至30℃，保温10小时。
包装的具体方法是：利用10mL规格的西林瓶进行分装，压盖密封。
利用上述制备方法得到的一种抑制黑色素生成的美白冻干粉。
实施例2：
一种抑制黑色素生成的美白冻干粉的制备方法，以重量份计，先将1份全蝎提取物、0.3份水蛭提取物、3份烟叶提取物和0.3份黄秋葵提取物加入1.5份蛋清酶解液中，超声波振荡40分钟，第一次冷冻干燥，取出后加入2份山茶籽油中，超声波振荡30分钟，得混合液，最后边以300r/分钟的搅拌速率搅拌边将混合液缓慢滴加至8份牛唾液提取液中，滴加完毕后继续搅拌15分钟，第二次冷冻干燥，包装，即得所述的一种抑制黑色素生成的美白冻干粉。
全蝎提取物的制备方法如下：先将鲜活蝎子全虫微波处理并粉碎成粉末，然后将粉末加入8倍重量的甘油-醋酸混合液中，超声波振荡提取5小时，过滤取滤液，浓缩至滤液体积的1/20，接着进行超临界二氧化碳萃取，分离釜压力为7MPa，萃取温度为42℃，萃取时间为5小时，即得所述的全蝎提取物；甘油-醋酸混合液中甘油、醋酸的体积比为1：0.8。微波处理并粉碎成粉末的具体方法为：先将蝎子全虫于300W微波处理5分钟，然后粉碎至300目。
水蛭提取物的制备方法如下：取水蛭鲜活全体，加入6倍重量的水，匀浆；取匀浆液，调节pH至7，加入0.005倍重量的胰蛋白酶，40℃酶解处理12小时，冷却至室温，向所得酶解液中加入3倍体积的无水乙醇于5℃静置沉淀8小时，过滤，滤液减压干燥，得水蛭提取物。
烟叶提取物的制备方法如下：先将烟叶进行杀青、干燥和粉碎处理制成烟叶浆液，然后依次进行复合酶酶解、微波提取，醇沉后离心得到提取物Ⅰ和上清液，所述的提取物Ⅰ加入5倍重量的丙酮，超声波振荡20分钟，离心所得沉淀为提取物Ⅱ，所述的上清液与等体积的氯仿混合，超声波振荡30分钟，离心所得沉淀为提取物Ⅲ，最后将提取物Ⅱ和提取物Ⅲ加入5倍总重量的水中，超声波振荡40分钟，离心所得沉淀即为所述的烟叶提取物。
烟叶浆液是将粉碎后所得烟末与8倍重量的水混合、磨浆得到；复合酶酶解的具体方法是：将复合酶加入250倍重量的烟叶浆液中，50℃酶解处理3小时，所述复合酶是纤维素酶与果胶酶以质量比0.8：1混合得到；微波提取的工艺条件为：500W微波处理3分钟。
黄秋葵提取物的制备方法如下：将洗净晾干的新鲜黄秋葵横向切片后，加入8倍重量的蒸馏水中，加热至沸腾，煎煮30分钟，离心取上清液，浓缩至体积减少9/10，得浓缩液，加入体积浓度92％的乙醇水溶液，使得浓缩液中乙醇体积百分数为85％，0℃静置醇析，离心，收集沉淀，50℃烘干5小时即得所述的黄秋葵提取物。
蛋清酶解液的制备方法如下：先向蛋清液中加入0.02倍重量的中性蛋白酶，搅拌均匀，50℃酶解4小时，柠檬酸调节pH至4，60℃加热搅拌15分钟，三乙醇胺调节pH至7，过滤，即得所述的蛋清酶解液。
山茶籽油的制备方法如下：先将山茶籽粉碎成山茶籽粗粉，然后利用蒸汽爆破技术和超微纳米粉碎制成山茶籽细粉，最后经螺旋榨油机压榨得到山茶籽油。蒸汽爆破技术的工艺条件为：将山茶籽粗粉装入蒸汽爆破设备的爆破腔中，在1MPa条件下保持2分钟后迅速释放压力即可；利用气流粉碎机进行超微纳米粉碎，其工作条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为60分钟；螺旋榨油机的工作条件为：螺旋榨油机空转5分钟后，趁热投料山茶籽细粉，当机体温度达到70℃时开始压榨，直至没有油流出。
牛唾液提取液的制备方法如下：收集健康牛的唾液，离心取上清液，即得所述的牛唾液提取液。
混合液滴加至牛唾液提取液中所需时间为40分钟，滴加过程中搅拌速率为300r/分钟。
第一次冷冻干燥的工艺条件为：先于-25℃冷冻8小时，然后抽真空至5Pa以下，维持真空度不变，升温至32℃，保温3小时；第二次冷冻干燥的工艺条件为：先于-30℃冷冻7小时，然后抽真空至5Pa以下，维持真空度不变，升温至35℃，保温8小时。
包装的具体方法是：利用10mL规格的西林瓶进行分装，压盖密封。
利用上述制备方法得到的一种抑制黑色素生成的美白冻干粉。
实施例3：
一种抑制黑色素生成的美白冻干粉的制备方法，以重量份计，先将1份全蝎提取物、0.25份水蛭提取物、4份烟叶提取物和0.25份黄秋葵提取物加入1.8份蛋清酶解液中，超声波振荡35分钟，第一次冷冻干燥，取出后加入2.5份山茶籽油中，超声波振荡25分钟，得混合液，最后边以400r/分钟的搅拌速率搅拌边将混合液缓慢滴加至6份牛唾液提取液中，滴加完毕后继续搅拌20分钟，第二次冷冻干燥，包装，即得所述的一种抑制黑色素生成的美白冻干粉。
全蝎提取物的制备方法如下：先将鲜活蝎子全虫微波处理并粉碎成粉末，然后将粉末加入6倍重量的甘油-醋酸混合液中，超声波振荡提取7小时，过滤取滤液，浓缩至滤液体积的1/18，接着进行超临界二氧化碳萃取，分离釜压力为7.5MPa，萃取温度为41℃，萃取时间为5.5小时，即得所述的全蝎提取物；甘油-醋酸混合液中甘油、醋酸的体积比为1：0.75。微波处理并粉碎成粉末的具体方法为：先将蝎子全虫于300W微波处理4分钟，然后粉碎至400目。
水蛭提取物的制备方法如下：取水蛭鲜活全体，加入5倍重量的水，匀浆；取匀浆液，调节pH至8，加入0.003倍重量的胰蛋白酶，50℃酶解处理10小时，冷却至室温，向所得酶解液中加入4倍体积的无水乙醇于3℃静置沉淀10小时，过滤，滤液减压干燥，得水蛭提取物。
烟叶提取物的制备方法如下：先将烟叶进行杀青、干燥和粉碎处理制成烟叶浆液，然后依次进行复合酶酶解、微波提取，醇沉后离心得到提取物Ⅰ和上清液，所述的提取物Ⅰ加入4倍重量的丙酮，超声波振荡25分钟，离心所得沉淀为提取物Ⅱ，所述的上清液与等体积的氯仿混合，超声波振荡25分钟，离心所得沉淀为提取物Ⅲ，最后将提取物Ⅱ和提取物Ⅲ加入6倍总重量的水中，超声波振荡35分钟，离心所得沉淀即为所述的烟叶提取物。
烟叶浆液是将粉碎后所得烟末与9倍重量的水混合、磨浆得到；复合酶酶解的具体方法是：将复合酶加入220倍重量的烟叶浆液中，55℃酶解处理2小时，所述复合酶是纤维素酶与果胶酶以质量比0.9：1混合得到；微波提取的工艺条件为：450W微波处理4分钟。
黄秋葵提取物的制备方法如下：将洗净晾干的新鲜黄秋葵横向切片后，加入7倍重量的蒸馏水中，加热至沸腾，煎煮35分钟，离心取上清液，浓缩至体积减少9/10，得浓缩液，加入体积浓度93％的乙醇水溶液，使得浓缩液中乙醇体积百分数为82％，2℃静置醇析，离心，收集沉淀，45℃烘干6小时即得所述的黄秋葵提取物。
蛋清酶解液的制备方法如下：先向蛋清液中加入0.015倍重量的中性蛋白酶，搅拌均匀，52℃酶解3小时，柠檬酸调节pH至4.1，59℃加热搅拌18分钟，三乙醇胺调节pH至6.9，过滤，即得所述的蛋清酶解液。
山茶籽油的制备方法如下：先将山茶籽粉碎成山茶籽粗粉，然后利用蒸汽爆破技术和超微纳米粉碎制成山茶籽细粉，最后经螺旋榨油机压榨得到山茶籽油。蒸汽爆破技术的工艺条件为：将山茶籽粗粉装入蒸汽爆破设备的爆破腔中，在2MPa条件下保持2分钟后迅速释放压力即可；利用气流粉碎机进行超微纳米粉碎，其工作条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为70分钟；螺旋榨油机的工作条件为：螺旋榨油机空转4分钟后，趁热投料山茶籽细粉，当机体温度达到75℃时开始压榨，直至没有油流出。
牛唾液提取液的制备方法如下：收集健康牛的唾液，离心取上清液，即得所述的牛唾液提取液。
混合液滴加至牛唾液提取液中所需时间为35分钟，滴加过程中搅拌速率为400r/分钟。
第一次冷冻干燥的工艺条件为：先于-23℃冷冻9小时，然后抽真空至5Pa以下，维持真空度不变，升温至30℃，保温4小时；第二次冷冻干燥的工艺条件为：先于-28℃冷冻8小时，然后抽真空至5Pa以下，维持真空度不变，升温至32℃，保温9小时。
包装的具体方法是：利用10mL规格的西林瓶进行分装，压盖密封。
利用上述制备方法得到的一种抑制黑色素生成的美白冻干粉。
对比例1
略去全蝎提取物，其余同实施例1。
对比例2
略去水蛭提取物，其余同实施例1。
对比例3
略去烟叶提取物，其余同实施例1。
对比例4
略去黄秋葵提取物，其余同实施例1。
对比例5
略去蛋清酶解液，其余同实施例1。
对比例6
略山茶籽油，其余同实施例1。
对比例7
略去牛唾液提取液，其余同实施例1。
试验例
将实施例1～3或对比例1～7所得冻干粉加入3倍重量的注射用水中，上下振荡混匀，制成样品，进行皮肤测试，具体方法如下：
受试者清洁双手前臂内测，用干的面巾纸擦拭干净。清洁后受试者双手前臂内侧做好测量区域标记。正式测试前应在符合标准房间内静坐至少30分钟，不能喝水，前臂暴露，呈测试状态放置，保持放松。实验中左右手臂内侧标记3*3cm2试验区域，同一手臂可以标记多个区域，区域间隔1cm。测试产品和空白对照(不做任何处理)均随机分布在左右手臂上。使用德国CK公司多功能皮肤测试仪(黑色素和血红素测试探头)进行受试区域和对照区域的黑色素测量，利用德国CK公司多功能皮肤测试仪(水份测试探头)水分含量测量，使用色度仪测试受试区域和对照区域的白度。每个区域依照平行测定15次。先测量各测试区域的空白值，然后按2.0±0.1mg样品/cm2的用量，使用乳胶指套将试验均匀涂布于试验区内。20分钟后测量该区域的黑色素值和水分含量，利用色度仪测量该区域的白度值，记录数据，对比初始值计算黑色素减少量、水分含量增加量和白度增加量。结果见表1。
表1.皮肤测试结果
Figure BDA0002311733100000101
Figure BDA0002311733100000111
由表1可知，实施例1～3所得冻干粉产品可有效减少黑色素生成，皮肤白度增加，同时具有良好的保湿效果。
对比例1略去全蝎提取物，甜菜碱、棕榈酸和油酸成分的减少导致皮肤吸收性变差，保湿和美白效果明显变差；对比例2略去水蛭提取物，没有水蛭素的促进吸收作用，保湿和美白效果明显变差；对比例3略去烟叶提取物，缺少辛二酸对酪氨酸酶活性的竞争性抑制作用，美白效果明显变差，保湿效果也变差；对比例4略去黄秋葵提取物，失去了成膜性，保湿效果明显变差，也影响了美白效果；对比例5略去蛋清酶解液，失去了活性巯基对酪氨酸酶活性的抑制，美白效果明显变差，保湿效果也有变差；对比例6略山茶籽油，与皮肤相容性变差，严重影响了皮肤吸收，保湿和美白效果均明显变差；对比例7略去牛唾液提取液，失去了大量保湿因子，严重影响了皮肤保湿性，美白效果也有所影响。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种抑制黑色素生成的美白冻干粉的制备方法，其特征在于，以重量份计，先将1份全蝎提取物、0.2～0.3份水蛭提取物、3～5份烟叶提取物和0.2～0.3份黄秋葵提取物加入1.5～2份蛋清酶解液中，超声波振荡30～40分钟，第一次冷冻干燥，取出后加入2～3份山茶籽油中，超声波振荡20～30分钟，得混合液，最后边以300～500r/分钟的搅拌速率搅拌边将混合液缓慢滴加至5～8份牛唾液提取液中，滴加完毕后继续搅拌15～25分钟，第二次冷冻干燥，包装，即得所述的一种抑制黑色素生成的美白冻干粉。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述全蝎提取物的制备方法如下：先将鲜活蝎子全虫微波处理并粉碎成粉末，然后将粉末加入5～8倍重量的甘油-醋酸混合液中，超声波振荡提取5～8小时，过滤取滤液，浓缩至滤液体积的1/15～1/20，接着进行超临界二氧化碳萃取，分离釜压力为7～8MPa，萃取温度为40～42℃，萃取时间为5～6小时，即得所述的全蝎提取物；甘油-醋酸混合液中甘油、醋酸的体积比为1：0.7～0.8。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述水蛭提取物的制备方法如下：取水蛭鲜活全体，加入3～6倍重量的水，匀浆；取匀浆液，调节pH至7～9，加入0.002～0.005倍重量的胰蛋白酶，40～60℃酶解处理8～12小时，冷却至室温，向所得酶解液中加入3～5倍体积的无水乙醇于0～5℃静置沉淀8～12小时，过滤，滤液减压干燥，得水蛭提取物。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述烟叶提取物的制备方法如下：先将烟叶进行杀青、干燥和粉碎处理制成烟叶浆液，然后依次进行复合酶酶解、微波提取，醇沉后离心得到提取物Ⅰ和上清液，所述的提取物Ⅰ加入3～5倍重量的丙酮，超声波振荡20～30分钟，离心所得沉淀为提取物Ⅱ，所述的上清液与等体积的氯仿混合，超声波振荡20～30分钟，离心所得沉淀为提取物Ⅲ，最后将提取物Ⅱ和提取物Ⅲ加入5～8倍总重量的水中，超声波振荡30～40分钟，离心所得沉淀即为所述的烟叶提取物。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述黄秋葵提取物的制备方法如下：将洗净晾干的新鲜黄秋葵横向切片后，加入6～8倍重量的蒸馏水中，加热至沸腾，煎煮30～40分钟，离心取上清液，浓缩至体积减少4/5～9/10，得浓缩液，加入体积浓度92～95％的乙醇水溶液，使得浓缩液中乙醇体积百分数为80～85％，0～5℃静置醇析，离心，收集沉淀，40～50℃烘干5～8小时即得所述的黄秋葵提取物。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述蛋清酶解液的制备方法如下：先向蛋清液中加入0.01～0.02倍重量的中性蛋白酶，搅拌均匀，50～53℃酶解3～4小时，柠檬酸调节pH至4～4.2，58～60℃加热搅拌15～20分钟，三乙醇胺调节pH至6.8～7，过滤，即得所述的蛋清酶解液。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述山茶籽油的制备方法如下：先将山茶籽粉碎成山茶籽粗粉，然后利用蒸汽爆破技术和超微纳米粉碎制成山茶籽细粉，最后经螺旋榨油机压榨得到山茶籽油。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，混合液滴加至牛唾液提取液中所需时间为30～40分钟，滴加过程中搅拌速率为300～500r/分钟。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，第一次冷冻干燥的工艺条件为：先于-22～-25℃冷冻8～10小时，然后抽真空至5Pa以下，维持真空度不变，升温至28～32℃，保温3～5小时；第二次冷冻干燥的工艺条件为：先于-25～-30℃冷冻7～9小时，然后抽真空至5Pa以下，维持真空度不变，升温至30～35℃，保温8～10小时。
10.利用权利要求1～9中任一项所述制备方法得到的一种抑制黑色素生成的美白冻干粉。
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