CN110865117A - 激光解吸附离子化质谱分析方法和系统 - Google Patents
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Abstract
本发明提出了激光解吸附离子化质谱分析方法,所述方法包括:(1)在固体材料表面形成聚多巴胺修饰层,以便得到载样基底;(2)将待测样品施加至所述载样基底的聚多巴胺修饰层表面,再使所述待测样品干燥;以及(3)将所述载样基底进行激光解吸附离子化质谱分析。采用聚多巴胺修饰的固体材料作为激光解吸附离子化的载样基底(靶板),只需一步靶板制备过程,无需添加基质,采用其进行质谱检测及质谱成像具有良好的信噪比、重复性及高空间分辨率,可以实现通用、简单、高效、快速、灵敏的质谱软电离检测及质谱成像分析。
Description
技术领域
本发明涉及质谱分析技术领域。具体地,本发明涉及激光解吸附离子化质谱分析方法和系统。
背景技术
质谱成像(mass spectrometry imaging,MSI)是一种基于质谱的分子成像技术,通过对生物组织切片表面进行质谱扫描,可以获得切片表面多种分子(如蛋白质、代谢物、脂类)的空间分布及丰度信息,对于药物代谢分布研究、病理研究以及疾病生物标志物的发现等方面具有重要意义。基质辅助激光解吸附电离(matrix-assisted laser desorption/ionization,MALDI)技术是目前应用最为广泛的质谱成像技术,近年来已广泛应用于多肽、蛋白质、药物及脂类等分子的质谱成像分析。在传统的MALDI成像分析流程中,基本步骤为:制备组织切片并转移至MALDI靶板上,选择合适的有机基质喷涂于组织切片表面并干燥,然后使用激光照射使组织切片表面的分子解吸附并离子化。此流程带来的突出问题在于基质溶液对组织切片上分析物的位移、稀释和基质喷洒不均匀造成的结果不准确、重现性差、空间分辨率差等。一般MALDI成像可达到20~100μm的空间分辨率。无基质LDI质谱分析可消除基质本身带来的背景杂质、化学信息稀释位移、过程繁琐等问题。
多巴胺是一种结合了左旋多巴的邻苯二酚基团和赖氨酸的氨基官能团的儿茶酚胺,能够在温和的水相中在多种材料表面自发氧化聚合形成聚多巴胺复合层。
目前,尚未报道过直接将聚多巴胺修饰到固体材料上用于激光解吸附电离质谱分析的方法。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此,本发明提出了一种激光解吸附离子化质谱检测方法和系统,采用聚多巴胺修饰的固体材料作为激光解吸附离子化的载样基底(靶板),只需一步靶板制备过程,无需添加基质,采用其进行质谱检测及质谱成像具有良好的信噪比、重复性及高空间分辨率,可以实现通用、简单、高效、快速、灵敏的质谱软电离检测及质谱成像分析。
为此,在本发明的一个方面,本发明提出了一种激光解吸附离子化质谱分析方法。根据本发明的实施例,所述方法包括:(1)在固体材料表面形成聚多巴胺修饰层,以便得到载样基底;(2)将待测样品施加至所述载样基底的聚多巴胺修饰层表面,再使所述待测样品干燥;以及(3)将所述载样基底进行激光解吸附离子化质谱分析。
本发明的方法仅需要对固体材料进行一次聚多巴胺修饰,聚多巴胺修饰层能够促使待测样品发生解吸附和电离,无需再添加基质,避免了与基质的不均匀共结晶现象,提高了分析的可重复性;简化了点样的操作过程,无需根据不同的分析物来优化所用的基质,通用性强;基于生物仿生的聚多巴胺化学具有合成方便、稳定、温和、良好的生物相容性等优点,可在各种固体材料表面形成聚多巴胺薄膜,普适性强;聚多巴胺薄膜的多孔结构以及在300nm附近的紫外光吸收特性可有效增强激光解吸电离效率,利于生物组织表面脂质分子的LDI质谱成像;基质喷涂过程的省略可大大简化质谱检测的操作步骤,提高质谱成像的空间分辨率;可以直接对生物样本进行激光解吸附电离分析,无需样品前处理和纯化过程,实现了样品的快速质谱检测。采用该具有聚多巴胺修饰层的固体材料进行质谱检测及质谱成像具有良好的信噪比、重复性及高空间分辨率,可以实现通用、简单、高效、快速、灵敏的质谱软电离检测及质谱成像分析。
根据本发明的实施例,上述激光解吸附离子化质谱分析方法还可以具有下列附加技术特征:
根据本发明的实施例,所述聚多巴胺修饰层的厚度为5~50纳米。发明人经过大量实验得到上述较优修饰层厚度,由此,可以有效地促进待测样品的解吸附和电离,并且不影响后续质谱检测的正常进行。
根据本发明的实施例,所述形成聚多巴胺修饰层是通过下列方式进行的:将所述固体材料置于多巴胺溶液中浸泡,再将所述固体材料取出后干燥。在有氧环境下,多巴胺可以自发氧化聚合形成聚多巴胺,修饰在固体材料表面。
根据本发明的实施例,所述多巴胺溶液的浓度为0.25~5mg/ml,其中,溶剂选自pH值为8~9的水溶液。由此,多巴胺在弱碱性的环境下可以在固体材料表面形成厚度适宜(5~50纳米)、膜均一性佳的聚多巴胺修饰层,以便于有效地促使待测样品解吸附和电离。
根据本发明的实施例,所述浸泡的时间为1~24小时。由此,保证在固体材料表面形成厚度适宜(5~50纳米)、膜均一性佳的聚多巴胺修饰层,以便于有效地促使待测样品解吸附和电离。
根据本发明的实施例,所述浸泡过程中,不断以200~500rpm的转速对所述多巴胺溶液进行搅拌。在此条件下可以防止大的聚多巴胺颗粒沉积,有利于形成更均匀的聚多巴胺颗粒,具有更好的膜均一性。
根据本发明的实施例,取出所述固体材料后用去离子水洗涤所述固体材料,然后进行干燥。由此,以去除表面杂质与多巴胺单体。
根据本发明的实施例,在步骤(1)之前可以使用有机溶剂对固体材料表面进行清洗,如使用甲醇、异丙醇和水等,分别超声清洗。
根据本发明的实施例,所述固体材料含有铜、铝、铁、不锈钢、聚丙烯、聚乙烯、聚苯乙烯和硅的至少之一。聚多巴胺可以修饰上述金属材料或者非金属材料,具有广泛的应用性。其中,为了进一步提高所述聚多巴胺修饰材料在质谱检测领域的性能,可在激光刻蚀的金属片表面进行聚多巴胺修饰。该固体材料的制作方法如专利申请CN103627883,由超快脉冲激光加工得到,含有具有高吸光性的微/纳复合结构。
根据本发明的实施例,所述待测样品包括氨基酸、糖类、药物分子、脂类、聚合物以及多肽的至少之一,所述待测样品的分子量为100~3000Da。由此,以便于进行质谱检测。
根据本发明的实施例,所述待测样品为脂类,包括磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、甘油三酯、甘油二酯、胆固醇酯以及溶血磷脂酰胆碱的至少之一。由此,可以对待测样品进行质谱成像分析。
根据本发明的实施例,所述待测样品选自生物组织或生物流体。生物流体主要是指血液、血浆、尿液、汗液等。针对生物流体,可以直接滴加在聚多巴胺修饰层表面;针对生物组织切片(例如小鼠脑组织以及小鼠肝脏组织等),可以将切片转移至聚多巴胺修饰层表面。具体地,组织样本使用冷冻切片机在低温条件下切片,然后将冷冻的组织切片使用纤维毛刷转移至靶板上,并真空干燥30min。利用根据本发明实施例的方法可以广泛地对上述待测样品进行质谱检测。
根据本发明的实施例,所述生物组织的厚度为3~50μm。由此,以便于质谱成像分析。
在本发明的另一方面,本发明提出了一种实施前面所述激光解吸附离子化质谱分析方法的系统。根据本发明的实施例,所述系统包括:配有激光解吸附电离源的质谱仪;以及载样基底,所述载样基底表面形成有聚多巴胺修饰层。利用根据本发明实施例的系统,待测样品可以直接在聚多巴胺修饰层上解吸附和电离,无需添加有机基质,采用其进行质谱检测及质谱成像具有良好的信噪比、重复性及高空间分辨率的优点,可以实现通用、简单、高效、快速、灵敏的质谱软电离检测及质谱成像分析。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解,其中:
图1显示了根据本发明一个实施例的不同修饰时间下,聚多巴胺修饰的不锈钢片的扫描电镜影像;其中a为修饰30min,b为修饰1h,c为修饰2h,d为修饰5h,e为修饰10h,f为修饰15h;
图2显示了根据本发明一个实施例的聚多巴胺修饰的激光刻蚀不锈钢片的扫描电镜影像;其中a为在修饰过程中通入剧烈氧气,b为在修饰过程中以300rpm的转速不断搅拌溶液;
图3显示了根据本发明一个实施例的使用聚多巴胺修饰的不锈钢片做基底分析磷脂酰胆碱PC 16:0/18:1的激光解吸附电离质谱图;
图4显示了根据本发明一个实施例的使用聚多巴胺修饰的激光刻蚀不锈钢片做基底分析不同分析物的激光解吸附电离质谱图;其中a为磷脂酰胆碱PC 16:0/18:1,b为葡萄糖,c为聚乙二醇PEG 600,1000,2000的混合物,d为血管紧张素II;
图5显示了根据本发明一个实施例的使用聚多巴胺修饰的激光刻蚀不锈钢片做基底分析人血浆及血浆提取物的激光解吸附电离质谱图;其中a为人血浆提取物,b为人血浆;
图6显示了根据本发明一个实施例的使用聚多巴胺修饰的不锈钢片做基底检测尿液中的毒品;其中a为一级质谱,b为对所选离子的二级质谱图;
图7显示了根据本发明一个实施例的分别使用聚多巴胺修饰的不锈钢片、激光刻蚀不锈钢片以及聚苯乙烯片做基底分析鼠脑组织的大气压激光解吸附电离质谱图;其中a为使用聚多巴胺修饰的不锈钢片,b为使用聚多巴胺修饰的激光刻蚀不锈钢片,c为使用聚多巴胺修饰的聚苯乙烯片;
图8显示了根据本发明一个实施例的分别使用聚多巴胺修饰的不锈钢片以及激光刻蚀不锈钢片做基底,对鼠脑组织的激光解吸附电离质谱成像图;其中a为使用聚多巴胺修饰的不锈钢片,b为使用聚多巴胺修饰的激光刻蚀不锈钢片。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解,下面的实施例仅用于说明本发明,而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例中使用的激光刻蚀不锈钢片使用飞秒脉冲激光加工方法在不锈钢片(304)上制得。
如无特殊说明,实施例中所有质谱检测均使用Bruker公司的autoflex speed型MALDI-TOF质谱仪,配备的激光器为波长为355nm的Nd:YAG激光器。加速电压设为20kV,工作方式为反射模式,在正离子模式下进行检测,每张质谱图是平均500次激光扫描结果得到的。使用的控制软件为flex Control 3.3,数据分析软件为flex Analysis 3.3。
实施例中所有的质谱成像分析均使用Bruker公司的Ultraflextreme型MALDI-TOF/TOF质谱仪,配备的激光器为波长为355nm的Nd:YAG激光器。加速电压设为20kV,工作方式为反射模式,在正离子模式下进行检测,数据分析软件为flex Imaging 3.3。
实施例1使用聚多巴胺修饰的不锈钢片和聚多巴胺修饰的激光刻蚀不锈钢片做载样基底对不同分析物的激光解吸附离子化质谱分析
分析样品的制备:配置浓度为1mg/ml的葡萄糖溶液,溶剂为水;浓度为10μM的磷脂酰胆碱PC 16:0/18:1溶液,溶剂为甲醇/水1/1;浓度为0.2mg/ml的血管紧张素II溶液,溶剂为甲醇/水3/7;配置聚乙二醇PEG 600(0.1μL/L),PEG 1000(15μL/L),PEG 2000(20μL/L)的混合物溶液,置于4℃冰箱中备用。
激光刻蚀不锈钢片:制作方法如专利申请CN103627883,在不锈钢(304)上制得。
聚多巴胺修饰:配制浓度为2mg/ml的多巴胺溶液,溶剂为10mM的三羟甲基氨基甲烷水溶液(pH为8~9),置于敞口的烧杯中并搅拌;待所得溶液变色后,将不锈钢片和激光刻蚀的不锈钢片直接放入其中浸泡,在室温下反应后取出。使用去离子水充分洗涤所得靶板以去除表面杂质与多巴胺单体,然后置于烘箱中干燥。
LDI质谱分析:
(1)将聚多巴胺修饰的材料固定至商业靶板上并作为载样基底,分别取2μL葡萄糖溶液、磷脂酰胆碱PC 16:0/18:1溶液、聚乙二醇溶液和血管紧张素Ⅱ溶液滴加至材料表面并进行干燥。
(2)将靶板置于MALDI-TOF质谱仪中进行激光解吸附离子化质谱分析。
首先需要对聚多巴胺修饰过程进行优化,通过改变修饰时间、是否通氧、是否搅拌等条件,调控形成的聚多巴胺薄膜的厚度、形貌和均一性,并通过扫描电镜观测其结构。图1为不同修饰时间(室温反应时间)下,聚多巴胺修饰的不锈钢材料的扫描电镜影像。其中,15h的修饰时间会形成具有较好致密性的聚多巴胺纳米膜,膜厚度为35~45nm。图2为分别在修饰(浸泡)过程中以300rpm的转速不断搅拌溶液(利用空气中氧气作为氧化剂)及在修饰(浸泡)过程中通入剧烈氧气(利用纯氧气作为氧化剂),得到的激光刻蚀不锈钢片表面的扫描电镜图。二者比较发现,修饰过程中不断搅拌多巴胺溶液可以有效减少颗粒沉积,有利于形成更均匀的聚多巴胺颗粒,具有更好的膜均一性。然而,通入剧烈氧气,使得氧化聚合效率提高,会形成更大尺寸的聚多巴胺颗粒。
经过优化,本发明中使用的最优修饰条件为多巴胺溶液浓度为2mg/ml,室温下修饰(反应)15h,并以300rpm的转速不断搅拌多巴胺溶液。
使用聚多巴胺修饰的不锈钢片做基底对磷脂酰胆碱的检测结果如图3所示,磷脂酰胆碱主要以碎片离子和[M+H]+离子的形式检测到。使用聚多巴胺修饰的激光刻蚀不锈钢片对磷脂酰胆碱的检测结果如图4中的a所示。比较发现,使用激光刻蚀的不锈钢片可进一步提高待检测的离子强度,同时可减小离子的碎片。使用聚多巴胺修饰的激光刻蚀不锈钢片做基底,四种不同的分析物均得到了有效的解吸和电离,产生[M+H]+,[M+Na]+和[M+K]+的离子峰,具有良好的信噪比(图4中的a~d)。聚多巴胺修饰的固体材料对分子量在100~3000Da之间的多种分子均有良好的解吸附和电离效果。
实施例2使用聚多巴胺修饰的不锈钢片做载样基底的激光解吸附离子化质谱分析
分析样品的制备:配置浓度为1mg/ml的葡萄糖溶液,溶剂为水,置于4℃冰箱中备用。
聚多巴胺修饰不锈钢片:配制浓度为0.25mg/ml的多巴胺溶液,溶剂为10mM的三羟甲基氨基甲烷水溶液(pH为8~9),置于敞口的烧杯中并搅拌;待所得溶液变色后,将待改性的固体材料直接放入其中浸泡并以300rpm的转速不断搅拌,在室温下反应15h后取出。使用去离子水充分洗涤所得靶板以去除表面杂质与多巴胺单体,然后置于烘箱中干燥。
LDI质谱分析:
(1)将聚多巴胺修饰的不锈钢片固定至商业靶板上并作为载样基底,取2μL葡萄糖溶液至材料表面并进行干燥。
(2)将靶板置于MALDI-TOF质谱仪中进行激光解吸附离子化质谱分析。
实施例3使用聚多巴胺修饰的激光刻蚀不锈钢片做载样基底对人血浆及血浆提取物的激光解吸附离子化质谱分析
血浆提取物的制备:取50μL人血浆加入1mL去离子水中,然后再加入1mL甲醇和2mL氯仿。涡旋5分钟后,置于离心机内离心8min(11269×g),收集氯仿相,氮气吹干,然后将沉淀物重新溶解在1mL甲醇中,置于-20℃冰箱中备用。
激光刻蚀不锈钢片:制作方法如专利申请CN103627883,在不锈钢(304)上制得。
聚多巴胺修饰:配制浓度为2mg/ml的多巴胺溶液,溶剂为10mM的三羟甲基氨基甲烷水溶液(pH为8~9),置于敞口的烧杯中并搅拌;待所得溶液变色后,将激光刻蚀的不锈钢片直接放入其中浸泡并以300rpm的转速不断搅拌,在室温下反应15h后取出。使用去离子水充分洗涤所得靶板以去除表面杂质与多巴胺单体,然后置于烘箱中干燥。
LDI质谱分析:
(1)将聚多巴胺修饰的材料固定至商业靶板上并作为载样基底,对于血浆提取物,取2μL提取物溶液滴加至材料表面并进行干燥;对于血浆,取2μL血浆直接滴加至材料表面停留5s后,用移液枪将剩余的血浆吸走,在材料表面留下吸附的分子。
(2)将靶板置于MALDI-TOF质谱仪中进行激光解吸附离子化质谱分析。
检测结果如图5所示,从血浆提取物中可检测到20种甘油三酯(TAG),5种磷脂酰胆碱(PC),4种胆固醇酯(CE),5种甘油二酯(DAG)以及4种溶血磷脂酰胆碱(Lyso PC)。表明聚多巴胺修饰的激光刻蚀不锈钢片对复杂生物样品具有良好的解吸附电离效果,可以实现多类别脂质的高效电离。从未经提取的血浆中也可以检测到大量甘油三酯、甘油二酯和胆固醇酯的离子信号,表明聚多巴胺膜可以有效的吸附脂类分子,并促进其解吸附和电离。
实施例4使用聚多巴胺修饰的不锈钢片做载样基底对尿液中的毒品检测
混合物的制备:在购买的人尿液样本中加入甲基苯丙胺溶液(冰毒),浓度为1ppm,置于4℃冰箱中备用。
聚多巴胺修饰不锈钢片:配制浓度为2mg/ml的多巴胺溶液,溶剂为10mM的三羟甲基氨基甲烷水溶液(pH为8~9),置于敞口的烧杯中并搅拌;待所得溶液变色后,将待改性的固体材料直接放入其中浸泡并以300rpm的转速不断搅拌,在室温下反应5h后取出。使用去离子水充分洗涤所得靶板以去除表面杂质与多巴胺单体,然后置于烘箱中干燥。
LDI质谱分析:
(1)将聚多巴胺修饰的不锈钢片固定至商业靶板上并作为载样基底,取2μL混有甲基苯丙胺的尿液样本滴加至材料表面并进行干燥。
(2)将靶板置于AP-MALDI离子源中进行激光解吸附离子化质谱分析。
本实施例中使用自行搭建的大气压基质辅助激光解吸离子源(AP-MALDI),配备的激光器为波长为355nm的Nd:YAG激光器;后端质谱仪为Bruker公司的Impact型质谱仪。检测结果如图6所示,将尿液样本直接滴加至材料表面通过激光解吸附电离即可检测到其中的甲基苯丙胺,并通过二级质谱进一步确认其分子组成。此结果证明本发明所述方法可用于尿液中的毒品检测,实现便捷、高效、无需样品前处理的快速直接检测。
实施例5使用聚多巴胺修饰的铜片、聚苯乙烯片、不锈钢片及激光刻蚀不锈钢片做载样基底对鼠脑组织切片的大气压激光解吸附离子化质谱分析
鼠脑组织切片的准备:取新鲜的小鼠脑组织,液氮速冻后,使用冷冻切片机切片,厚度为16μm,将冷冻切片用纤维毛刷转移至聚多巴胺修饰的材料表面,然后置于真空干燥器中干燥30min。
聚多巴胺修饰:配制浓度为2mg/ml的多巴胺溶液,溶剂为10mM的三羟甲基氨基甲烷水溶液(pH为8~9),置于敞口的烧杯中并搅拌,待所得溶液变色后,分别将铜片、聚苯乙烯片、不锈钢片及激光刻蚀的不锈钢片放入其中浸泡并以300rpm的转速不断搅拌,在室温下反应15h后取出。使用去离子水充分洗涤所得靶板以去除表面杂质与多巴胺单体,然后置于烘箱中干燥。
LDI质谱分析:
(1)将聚多巴胺修饰的材料固定至商业靶板上并作为载样基底,将冷冻的组织切片转移至材料表面并进行真空干燥。
(2)将靶板置于AP-MALDI离子源中进行激光解吸附离子化质谱分析。
本实施例中使用自行搭建的大气压基质辅助激光解吸离子源(AP-MALDI),配备的激光器为波长为355nm的Nd:YAG激光器;后端质谱仪为Bruker公司的Impact型质谱仪。在正离子模式下进行检测,对组织切片的激光解吸附电离质谱检测结果如图7所示,可以看到使用聚多巴胺修饰的金属材料和非金属材料均可以促进脂类物质的解吸附和电离,可从鼠脑组织切片中检测到多种脂质,包括磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)以及鞘磷脂(SM)等。本发明中聚多巴胺修饰靶板的方法具有普适性和通用性,可以在多种固体材料上修饰并用作激光辅助解吸附电离的载样基底。
实施例6使用聚多巴胺修饰的不锈钢材料和激光刻蚀不锈钢片做载样基底对鼠脑组织切片进行激光解吸附离子化质谱成像分析
鼠脑组织切片的准备:取新鲜的小鼠脑组织,液氮速冻后,使用冷冻切片机切片,厚度为12μm,将冷冻切片用纤维毛刷转移至聚多巴胺修饰的材料表面,然后置于真空干燥器中干燥30min。
聚多巴胺修饰:配制浓度为2mg/ml的多巴胺溶液,溶剂为10mM的三羟甲基氨基甲烷水溶液(pH为8~9),置于敞口的烧杯中并搅拌;待所得溶液变色后,将不锈钢片和激光刻蚀的不锈钢片直接放入其中浸泡并以300rpm的转速不断搅拌,在室温下反应15h后取出。使用去离子水充分洗涤所得靶板以去除表面杂质与多巴胺单体,然后置于烘箱中干燥。
LDI质谱成像分析:
(1)将聚多巴胺修饰的材料固定至商业靶板上并作为载样基底,将冷冻的组织切片转移至材料表面并进行真空干燥。
(2)将靶板置于MALDI-TOF/TOF质谱仪中进行激光解吸附离子化质谱成像分析。
按照标准的质谱成像方法进行分析,在正离子模式下进行检测,激光光斑设为“small”模式,激光能量设为50%,每张质谱图是平均400次激光扫描结果得到的,空间分辨率为50μm,使用flex Imaging 3.3软件分析成像数据结果,检测结果如图8所示。成像检测到超过20种磷脂,在鼠脑的灰质区、白质区和胼胝体等区域呈现不同的区域分布和丰度分布,可达到50μm的成像空间分辨率。该结果说明聚多巴胺修饰的材料作为基底用于质谱成像具有良好的性能,聚多巴胺薄膜具有良好的均一性,成像结果准确且重复性好。由于无需喷涂基质,大大简化了质谱成像的流程,并且可得到更准确的分子分布。
在本说明书的描述中,参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外,在不相互矛盾的情况下,本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例,可以理解的是,上述实施例是示例性的,不能理解为对本发明的限制,本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (10)
1.一种激光解吸附离子化质谱分析方法,其特征在于,包括:
(1)在固体材料表面形成聚多巴胺修饰层,以便得到载样基底;
(2)将待测样品施加至所述载样基底的聚多巴胺修饰层表面,再使所述待测样品干燥;以及
(3)将所述载样基底进行激光解吸附离子化质谱分析。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述聚多巴胺修饰层的厚度为5~50纳米。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述形成聚多巴胺修饰层是通过下列方式进行的:
将所述固体材料置于多巴胺溶液中浸泡,再将所述固体材料取出后干燥。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述多巴胺溶液的浓度为0.25~5mg/ml,其中,溶剂选自pH值为8~9的水溶液。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述浸泡的时间为1~24小时。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述浸泡过程中,不断以200~500rpm的转速对所述多巴胺溶液进行搅拌。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,取出所述固体材料后用去离子水洗涤所述固体材料,然后进行干燥。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述固体材料含有铜、铝、铁、不锈钢、聚丙烯、聚乙烯、聚苯乙烯和硅的至少之一。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述待测样品包括氨基酸、糖类、药物分子、脂类、聚合物以及多肽的至少之一,所述待测样品的分子量为100~3000Da;
任选地,所述待测样品为脂类,包括磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、甘油三酯、甘油二酯、胆固醇酯以及溶血磷脂酰胆碱的至少之一;
任选地,所述待测样品选自生物组织或生物流体;
任选地,所述生物组织的厚度为3~50μm。
10.一种实施权利要求1~9任一项所述激光解吸附离子化质谱分析方法的系统,包括:
配有激光解吸附电离源的质谱仪;以及
载样基底,所述载样基底表面形成有聚多巴胺修饰层。
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