CN110850093A - 快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条及制备方法与试剂盒 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条及制备方法与试剂盒。该快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒包括试纸条以及毛发裂解液，所述试纸条包括PVC底板、硝酸纤维素膜、结合垫、样品垫和吸水纸，所述样品垫、所述结合垫、所述硝酸纤维素膜和所述吸水纸沿着水平方向顺序连接在所述PVC底板上，所述硝酸纤维素膜上设有包被BSA‑KET抗原的检测线和羊抗鼠多克隆抗体构成的质控线，所述检测线与所述质控线沿着层析方向顺序分布，所述毛发裂解液包含裂解所有种类毛发蛋白质的有效成分以及防腐剂，所述结合垫上固定有标记氯胺酮单克隆抗体的时间分辨荧光微球和微球稀释液。该试剂盒精密度高、检测时间短、灵敏度高、线性范围宽、成本低廉。

Description

快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条及制备方法与试剂盒

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别是涉及一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条及制备方法与试剂盒。

背景技术

二十多年来，毒品分析技术飞速发展，体液(主要指尿液和血液)仍是检验毒品较好的生物检材，但体液中毒品的检出时限短，吸毒者吸毒后，一般在3至7天就由于代谢而难以通过尿液、血液、唾液精确检测出毒品成分及含量，导致部分吸毒人员借此规避查处和管理；其次，体液不能探究受检者更长一段时间内的吸毒信息；存在检材不易保存等问题。而毛发检测可以反应吸毒人员的吸毒史，但是传统的毛发检测技术中，高效液相色谱法得到结果需要的时间长，操作复杂，不适用于现场执法工作。

发明内容

基于此，有必要提供一种精密度高、检测时间短、灵敏度高、线性范围宽、成本低廉的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条及制备方法与试剂盒。

一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒，包括试纸条以及毛发裂解液，所述试纸条包括PVC底板、硝酸纤维素膜、结合垫、样品垫和吸水纸，所述样品垫、所述结合垫、所述硝酸纤维素膜和所述吸水纸沿着水平方向顺序连接在所述PVC底板上，所述硝酸纤维素膜上设有包被BSA-KET抗原的检测线和羊抗鼠多克隆抗体构成的质控线，所述检测线与所述质控线沿着层析方向顺序分布，所述毛发裂解液包含裂解所有种类毛发蛋白质的有效成分以及防腐剂，所述结合垫上固定有标记氯胺酮单克隆抗体的时间分辨荧光微球和微球稀释液。

在其中一个实施例中，所述结合垫与所述吸水纸分别位于所述硝酸纤维素膜的两侧且均部分搭接所述硝酸纤维素膜，所述样品垫部分搭接所述结合垫。

在其中一个实施例中，所述时间分辨荧光微球选自修饰过的聚苯乙烯微球。

在其中一个实施例中，所述时间分辨荧光微球的表面修饰的官能团为羧基、羟基或环氧基的一种或几种。

在其中一个实施例中，所述时间分辨荧光微球的粒径为100nm～500nm。

在其中一个实施例中，所述时间分辨荧光微球内填充有镧系元素的螯合物。

在其中一个实施例中，所述镧系元素为铕、钐、鈊、镝中的一种或几种。

一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒，包括毛发裂解液以及所述的试纸条，所述毛发裂解液包含裂解所有种类毛发蛋白质的有效成分以及防腐剂。

一种所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，包括如下步骤：

a)制备检测线和质控线：将BSA-KET抗原稀释后划线于硝酸纤维素膜上形成检测线；将羊抗鼠多克隆抗体稀释后划线于所述硝酸纤维素膜上形成质控线，将划好线的所述硝酸纤维素膜烘干；

b)时间分辨荧光微球标记：将时间分辨荧光微球经活化剂室温活化、离心洗涤、超声重悬，加入氯胺酮单克隆抗体震荡混匀、静置偶联，再加入甘氨酸震荡混匀、静置封闭、离心洗涤，再用硼酸缓冲液及BSA复溶、超声重悬，使时间分辨荧光微球均匀分散在硼酸缓冲液中，得到时间分辨荧光微球标记溶液，并于2～8℃避光保存；

c)结合垫制备：玻璃纤维素膜或聚酯膜使用0.1％～1.0％的BSA溶液浸泡处理，烘干，得到膜垫；采用微球稀释液稀释所述时间分辨荧光微球标记溶液至工作浓度，稀释后的所述时间分辨荧光微球标记溶液均匀地喷在所述膜垫上，干燥得到结合垫；

d)样品垫制作：玻璃纤维素膜或聚酯膜上滴加处理液30～60mL，干燥后得到样品垫，所述处理液含有0.1％～3.0％BSA，0.05％～3.0％吐温-80,5～100mmol/L HEPES，pH值为6～10；

e)试纸条的组装：按照权利要求1或2所述的试纸条的结构组装。

在其中一个实施例中，将BSA-KET抗原使用20mmol/L柠檬酸盐或磷酸缓冲盐、0.5％～4.0％葡聚糖2万的溶液稀释后划线；将羊抗鼠多克隆抗体使用柠檬酸盐或磷酸缓冲盐，0.5％～4.0％葡聚糖2万的溶液稀释后划线。

在其中一个实施例中，步骤a)中，将划线后的所述硝酸纤维素膜置于37～45℃下，烘干12～48小时。

在其中一个实施例中，步骤b)中，所述活化剂为NHS和EDC，所述时间分辨荧光微球与所述活化剂的质量比为1:0.025-0.05，所述时间分辨荧光微球与所述氯胺酮单克隆抗体的质量比为1:0.1-0.2，所述时间分辨荧光微球与所述甘氨酸的质量比为1:0.1-0.2。

在其中一个实施例中，步骤b)中，静置偶联的时间为12h-20h，静置封闭的时间为12h-20h，离心洗涤的转速为15000rpm-18000rpm。

在其中一个实施例中，步骤b)中，时间分辨荧光微球标记时具体包括如下步骤：取1mg时间分辨荧光微球于2mL离心管内，分别加入2μg的NHS和EDC室温活化1小时，15000rpm离心洗涤、超声重悬，加入100μg的氯胺酮单克隆抗体震荡混匀、静置偶联12小时，再加入100μg的甘氨酸震荡混匀、静置封闭12小时，15000rpm离心洗涤，再用pH为8.5的50mmol/L硼酸缓冲液及BSA复溶、超声重悬，使时间分辨荧光微球均匀分散在缓冲液中，得到时间分辨荧光微球标记溶液，置于2～8℃避光保存。

在其中一个实施例中，采用0.5％～4.0％的蔗糖或海藻糖溶液作为所述微球稀释液稀释所述时间分辨荧光微球标记溶液5～10倍。

在其中一个实施例中，裁切所述结合垫的宽度0.5cm～2cm，裁切所述样品垫的宽度1.5cm～4cm，裁切所述吸水纸的宽度1.7cm～2.5cm，裁切所述所述结合垫的长度、所述样品垫的的长度以及所述吸水纸的长度一致。

在其中一个实施例中，步骤e)中的试纸条的组装包括如下步骤：将步骤a)中划线后的所述硝酸纤维素膜贴在PVC底板上，并放在湿度为15％～40％的环境中，在所述PVC底板上按照层析方向依次顺序所述样品垫、所述结合垫以及吸水纸，切割至预定尺寸。

本发明的快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒，解决了毛发检测毒品氯胺酮耗时长和操作复杂的问题，提高了执法人员的检测效率，同时降低了检测成本，得到极大的市场普及。

本发明可以快速检测毛发中氯胺酮的含量，只需要5分钟，相比高效液相色谱法数小时，效率大大提高，且可以现场执法，相比传统技术，本发明的高灵敏度让毒犯无所遁形，避免了体液检测中代谢所掩盖的吸毒信息，取材方便和保存稳定，除了头发之外，胡须、腋毛、腿毛等身上的各种体毛都是可以做检测。

本发明采用时间分辨微球进行标记和优选的抗体抗原配对，保证了毛发中氯胺酮毒品检测的高灵敏度要求,只需要一到两根毛发即可检出，在快速检测毛发毒品的市场中，刚开始普遍灵敏度较低。本发明采用的毛发裂解液能快速释放毛发中的氯胺酮，不影响检测的特异性和灵敏度，并能在室温长期稳定保存。

附图说明

图1为本发明一实施例所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒的试纸条示意图。

附图标记说明

10：试纸条；100：PVC底板；200：硝酸纤维素膜；210：检测线；220：质控线；300：结合垫；400：样品垫；500：吸水纸。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的较佳实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。

需要说明的是，当元件被称为“固定于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

实施例1

参见图1所示，本实施例提供了一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒。

该快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒包括试纸条10以及毛发裂解液。

试纸条10包括PVC底板100、硝酸纤维素膜200、结合垫300、样品垫400和吸水纸500。样品垫400、结合垫300、硝酸纤维素膜200和吸水纸500沿着水平方向顺序连接在PVC底板100上。硝酸纤维素膜200上设有包被BSA-KET抗原的检测线210和羊抗鼠多克隆抗体构成的质控线220。检测线210与质控线220沿着层析方向顺序分布。毛发裂解液包含裂解所有种类毛发蛋白质的有效成分以及防腐剂。结合垫300上固定有标记氯胺酮单克隆抗体的时间分辨荧光微球和微球稀释液。

具体地，结合垫300与吸水纸500分别位于硝酸纤维素膜200的两侧且均部分搭接硝酸纤维素膜200，样品垫400部分搭接结合垫300。

时间分辨荧光微球为时间分辨时间分辨荧光微球。优选地，时间分辨荧光微球选自修饰过的聚苯乙烯微球。时间分辨荧光微球的表面修饰的官能团为羧基、羟基或环氧基的一种或几种。时间分辨荧光微球的粒径为100nm～500nm。时间分辨荧光微球内填充有镧系元素的螯合物。镧系元素为铕、钐、鈊、镝中的一种或几种。

本发明的快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒，解决了毛发检测毒品氯胺酮耗时长和操作复杂的问题，提高了执法人员的检测效率，同时降低了检测成本，得到极大的市场普及。

本发明可以快速检测毛发中氯胺酮的含量，只需要5分钟，相比高效液相色谱法数小时，效率大大提高，且可以现场执法，相比传统技术，本发明的高灵敏度让毒犯无所遁形，避免了体液检测中代谢所掩盖的吸毒信息，取材方便和保存稳定，除了头发之外，胡须、腋毛、腿毛等身上的各种体毛都是可以做检测。

本发明采用时间分辨时间分辨荧光微球进行标记和优选的抗体抗原配对，保证了毛发中氯胺酮毒品检测的高灵敏度要求,只需要一到两根毛发即可检出，在快速检测毛发毒品的市场中，刚开始普遍灵敏度较低。本发明采用的毛发裂解液能快速释放毛发中的氯胺酮，不影响检测的特异性和灵敏度，并能在室温长期稳定保存。

实施例2

本实施例提供了一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒的制备方法，其包括如下步骤：

a)制备检测线210和质控线220：将BSA-KET抗原稀释后划线于硝酸纤维素膜200上形成检测线210；将羊抗鼠多克隆抗体稀释后划线于硝酸纤维素膜200上形成质控线220，将划好线的硝酸纤维素膜200烘干。

b)时间分辨荧光微球标记：将时间分辨荧光微球经活化剂室温活化、离心洗涤、超声重悬，加入氯胺酮单克隆抗体震荡混匀、静置偶联，再加入甘氨酸震荡混匀、静置封闭、离心洗涤，再用硼酸缓冲液及BSA复溶、超声重悬，使时间分辨荧光微球均匀分散在硼酸缓冲液中，得到时间分辨荧光微球标记溶液，并于2～8℃避光保存。

c)结合垫300制备：玻璃纤维素膜或聚酯膜使用0.1％～1.0％的BSA溶液浸泡处理，烘干，得到膜垫；采用微球稀释液稀释时间分辨荧光微球标记溶液至工作浓度，稀释后的时间分辨荧光微球标记溶液均匀地喷在膜垫上，干燥得到结合垫300。

d)样品垫400制作：玻璃纤维素膜或聚酯膜上滴加处理液30～60mL，干燥后得到样品垫400，处理液含有0.1％～3.0％BSA，0.05％～3.0％吐温-80,5～100mmol/L HEPES，pH值为6～10。

e)试纸条10的组装：按照权利要求1或2的试纸条10的结构组装。

实施例3

本实施例提供了一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒的制备方法，其包括如下步骤：

a)制备检测线210和质控线220：将BSA-KET抗原使用20mmol/L柠檬酸盐或磷酸缓冲盐、0.5％～4.0％葡聚糖2万的溶液稀释后划线于硝酸纤维素膜200上形成检测线210；将羊抗鼠多克隆抗体使用柠檬酸盐或磷酸缓冲盐，0.5％～4.0％葡聚糖2万的溶液稀释后划线于硝酸纤维素膜200上形成质控线220，将划好线的硝酸纤维素膜200置于鼓风干燥箱，在37℃～45℃下，烘干12h～48h。

b)时间分辨荧光微球标记：将时间分辨荧光微球经活化剂室温活化、15000rpm-18000rpm离心洗涤、超声重悬，加入氯胺酮单克隆抗体震荡混匀、静置偶联12h-20h，再加入甘氨酸震荡混匀、静置封闭12h-20h、15000rpm-18000rpm离心洗涤，再用硼酸缓冲液及BSA复溶、超声重悬，使时间分辨荧光微球均匀分散在硼酸缓冲液中，得到时间分辨荧光微球标记溶液，并于2℃～8℃避光保存；活化剂为NHS和EDC，时间分辨荧光微球与活化剂的质量比为1:0.025-0.05，时间分辨荧光微球与氯胺酮单克隆抗体的质量比为1:0.1-0.2，时间分辨荧光微球与甘氨酸的质量比为1:0.1-0.2。

c)结合垫300制备：将20cm*30cm的玻璃纤维素膜或聚酯膜使用0.1％～1.0％的BSA溶液浸泡处理，放置在干燥房2h～4h烘干，得到膜垫；采用采用0.5％～4.0％的蔗糖或海藻糖溶液作为微球稀释液稀释时间分辨荧光微球标记溶液至工作浓度，也即稀释5～10倍，使用进口的喷金仪BioDot将稀释后的时间分辨荧光微球标记溶液均匀地喷在膜垫上，放入37℃～45℃的真空干燥箱，烘干1h～8h，切割得到长度30cm、宽度为0.5cm～2cm的结合垫300。

d)样品垫400制作：将20cm*30cm的玻璃纤维素膜或聚酯膜上滴加处理液30～60mL，放入干燥房2～16小时烘干，切割得到长度为30cm、宽度为1.5cm～4cm的样品垫400，处理液含有0.1％～3.0％BSA，0.05％～3.0％吐温-80,5～100mmol/L HEPES，pH值为6～10。

e)试纸条10的组装：按照权利要求1或2的试纸条10的结构组装，具体地，将步骤a)中划线后的硝酸纤维素膜200贴在PVC底板100上，并放在湿度为15％～40％的环境中，在PVC底板100上按照层析方向依次顺序样品垫400、结合垫300以及长度30cm、宽度1.7cm～2.5cm的吸水纸500，使用斩切机切割至预定尺寸的试纸条10。

实施例4

本实施例提供了一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒的制备方法，其包括如下步骤：

a)制备检测线210和质控线220：将BSA-KET抗原使用20mmol/L柠檬酸盐或磷酸缓冲盐、2.0％葡聚糖2万的溶液稀释后划线于硝酸纤维素膜200上形成检测线210；将羊抗鼠多克隆抗体使用柠檬酸盐或磷酸缓冲盐，2.0％葡聚糖2万的溶液稀释后划线于硝酸纤维素膜200上形成质控线220，将划好线的硝酸纤维素膜200置于鼓风干燥箱，在37℃下，烘干20h。

b)时间分辨荧光微球标记：取1mg时间分辨荧光微球于2mL离心管内，分别加入2μg的NHS和EDC室温活化1h，15000rpm离心洗涤、超声重悬，加入100μg的氯胺酮单克隆抗体震荡混匀、静置偶联12h，再加入100μg的甘氨酸震荡混匀、静置封闭12h，15000rpm离心洗涤，再用pH为8.5的50mmol/L硼酸缓冲液及BSA复溶、超声重悬，使时间分辨荧光微球均匀分散在缓冲液中，得到时间分辨荧光微球标记溶液，置于4℃避光保存。

c)结合垫300制备：将20cm*30cm的玻璃纤维素膜或聚酯膜使用0.1％～1.0％的BSA溶液浸泡处理，放置在干燥房2h烘干，得到膜垫；采用采用2.0％的蔗糖或海藻糖溶液作为微球稀释液稀释时间分辨荧光微球标记溶液至工作浓度，也即稀释5倍，使用进口的喷金仪BioDot将稀释后的时间分辨荧光微球标记溶液均匀地喷在膜垫上，放入37℃的真空干燥箱，烘干6小时，切割得到长度30cm、宽度为2cm的结合垫300。

d)样品垫400制作：将20cm*30cm的玻璃纤维素膜或聚酯膜上滴加处理液45mL，放入干燥房10h烘干，切割得到长度为30cm、宽度为2cm的样品垫400，处理液含有2.0％BSA，2.0％吐温-80,50mmol/L HEPES，pH值为8。

e)试纸条10的组装：按照权利要求1或2的试纸条10的结构组装，具体地，将步骤a)中划线后的硝酸纤维素膜200贴在PVC底板100上，并放在湿度为25％的环境中，在PVC底板100上按照层析方向依次顺序样品垫400、结合垫300以及长度30cm、宽度2cm的吸水纸500，使用斩切机切割至需要尺寸的试纸条10。

实施例5

采用实施例4制得的快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒以及市购产品进行对比，对于氯胺酮(KET)浓度的检测结果如表1所示。

表1

由表1可知，实施例4制得的快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒的检测灵敏度更高。利用本发明的快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒检测的灵敏度能完全达到0.5ng/mL，比市面上普遍的快速毛发毒品检测产品的灵敏度5ng/mL高出10倍，检测上限最高可达200ng/mL，比市面上普遍的产品的50ng/mL高，即检测范围较大。

利用本发明的快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒检测了确定为阴性(<0.5ng/mL)的样本30人份，毛发氯胺酮为阳性(>0.5ng/mL)的样品各30份，检测符合率在98％以上。

本发明的快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒，抗干扰能力较强，从学生人群中选取染发案例10个，使用不同品牌洗发水20个，检测阴性(<0.5ng/mL)符合率为97％。

本发明的快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒精密度较好，选取浓度2.0ng/mL、10ng/mL案例各两个，记为案例1、案例2，分别重复检测10次，变异系数(CV)能控制在10％左右，如表2和表3。

表2

表3

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (16)

1.一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述试纸条包括PVC底板、硝酸纤维素膜、结合垫、样品垫和吸水纸，所述样品垫、所述结合垫、所述硝酸纤维素膜和所述吸水纸沿着水平方向顺序连接在所述PVC底板上，所述硝酸纤维素膜上设有包被BSA-KET抗原的检测线和羊抗鼠多克隆抗体构成的质控线，所述检测线与所述质控线沿着层析方向顺序分布，所述结合垫上固定有标记氯胺酮单克隆抗体的时间分辨荧光微球和微球稀释液。

2.根据权利要求1所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述结合垫与所述吸水纸分别位于所述硝酸纤维素膜的两侧且均部分搭接所述硝酸纤维素膜，所述样品垫部分搭接所述结合垫。

3.根据权利要求1所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述时间分辨荧光微球选自修饰过的聚苯乙烯微球。

4.根据权利要求3所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述时间分辨荧光微球的表面修饰的官能团为羧基、羟基或环氧基的一种或几种。

5.根据权利要求3所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述时间分辨荧光微球的粒径为100nm～500nm。

6.根据权利要求3所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述时间分辨荧光微球内填充有镧系元素的螯合物。

7.根据权利要求6所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条，其特征在于，所述镧系元素为铕、钐、鈊、镝中的一种或几种。

8.一种快速定量检测毛发中氯胺酮的试剂盒，包括毛发裂解液以及权利要求1-7任意一项所述的试纸条，所述毛发裂解液包含裂解所有种类毛发蛋白质的有效成分以及防腐剂。

9.一种权利要求1-7任意一项所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

a)制备检测线和质控线：将BSA-KET抗原稀释后划线于硝酸纤维素膜上形成检测线；将羊抗鼠多克隆抗体稀释后划线于所述硝酸纤维素膜上形成质控线，将划好线的所述硝酸纤维素膜烘干；

b)时间分辨荧光微球标记：将时间分辨荧光微球经活化剂室温活化、离心洗涤、超声重悬，加入氯胺酮单克隆抗体震荡混匀、静置偶联，再加入甘氨酸震荡混匀、静置封闭、离心洗涤，再用硼酸缓冲液及BSA复溶、超声重悬，使时间分辨荧光微球均匀分散在硼酸缓冲液中，得到时间分辨荧光微球标记溶液，并于2℃～8℃避光保存；

c)结合垫制备：玻璃纤维素膜或聚酯膜使用0.1％～1.0％的BSA溶液浸泡处理，烘干得到膜垫；采用微球稀释液稀释所述时间分辨荧光微球标记溶液至工作浓度，将稀释后的所述时间分辨荧光微球标记溶液均匀地喷在所述膜垫上，烘干得到结合垫；

d)样品垫制作：玻璃纤维素膜或聚酯膜上滴加处理液30～60mL，干燥后得到样品垫，所述处理液含有0.1％～3.0％BSA，0.05％～3.0％吐温-80,5～100mmol/L HEPES，pH值为6～10；

e)试纸条的组装：按照权利要求1或2所述的试纸条的结构组装。

10.根据权利要求9所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，其特征在于，将BSA-KET抗原使用20mmol/L柠檬酸盐或磷酸缓冲盐、0.5％～4.0％葡聚糖2万的溶液稀释后划线；将羊抗鼠多克隆抗体使用柠檬酸盐或磷酸缓冲盐，0.5％～4.0％葡聚糖2万的溶液稀释后划线。

11.根据权利要求9所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，其特征在于，步骤a)中，将划线后的所述硝酸纤维素膜置于37℃～45℃下，烘干12h～48h。

12.根据权利要求9所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，其特征在于，步骤b)中，所述活化剂为NHS和EDC，所述时间分辨荧光微球与所述活化剂的质量比为1:0.025-0.05，所述时间分辨荧光微球与所述氯胺酮单克隆抗体的质量比为1:0.1-0.2，所述时间分辨荧光微球与所述甘氨酸的质量比为1:0.1-0.2。

13.根据权利要求12所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，其特征在于，步骤b)中，静置偶联的时间为12h-20h，静置封闭的时间为12h-20h，离心洗涤的转速为15000rpm-18000rpm。

14.根据权利要求13所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，其特征在于，采用0.5％～4.0％的蔗糖或海藻糖溶液作为所述微球稀释液稀释所述时间分辨荧光微球标记溶液5～10倍。

15.根据权利要求9所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，其特征在于，裁切所述结合垫的宽度0.5cm～2cm，裁切所述样品垫的宽度1.5cm～4cm，裁切所述吸水纸的宽度1.7cm～2.5cm，裁切所述所述结合垫的长度、所述样品垫的的长度以及所述吸水纸的长度一致。

16.根据权利要求9所述的快速定量检测毛发中氯胺酮的试纸条的制备方法，其特征在于，步骤e)中的试纸条的组装包括如下步骤：将步骤a)中划线后的所述硝酸纤维素膜贴在PVC底板上，并放在湿度为15％～40％的环境中，在所述PVC底板上按照层析方向依次顺序所述样品垫、所述结合垫以及吸水纸，切割至预定尺寸。

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