CN110809715A - 使用组织样本的癌的检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供使用组织样本的癌的检测方法。具体而言，例如提供一种在具有癌的内脏器官或组织中检测癌的方法，其包括：准备从所述内脏器官或组织中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物；以及评价线虫对所述细胞溶解物的趋性行为。

Description

使用组织样本的癌的检测方法
技术领域
本发明提供使用组织样本的癌的检测方法。
背景技术
已知线虫对癌患者的尿样显示出引诱行为、对健康人的尿样显示出回避行为，已开发出基于线虫的趋性行为的癌的诊断方法(专利文献1)。在该评价系统中，将尿样稀释至约10倍，在线虫对稀释后的样品显示出引诱行为的情况下，可以评价为该样品所来源的对象具有癌。另外，在稀释倍率高的情况下，评价的精度当然大幅降低(专利文献1)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：WO2015/088039
发明内容
本发明人认为需要能够进行癌组织与正常组织的鉴别(例如，癌与癌周围的正常组织的鉴别)的技术开发。本发明提供使用组织样本的癌的检测方法。
本发明人使用癌的组织样本，以癌和癌周围的正常组织的细胞溶解物作为被测试样，对线虫的趋性行为进行了确认。其结果是，线虫对癌组织的细胞溶解物显示出引诱行为，另一方面，对癌周围的正常组织的细胞溶解物显示出回避行为。
本发明是基于这样的见解的发明。
即，根据本发明，提供例如以下的发明。
[1]一种在组织样本中检测癌的方法，其包括：
准备上述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物；以及
评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为。
[2]一种在组织样本中检测非癌的部分(非癌部)的方法，其包括：
准备上述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的预测为非癌的区域的细胞溶解物；以及
评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为。
[3]一种在组织样本中对癌的区域与非癌的区域进行鉴别的方法，其包括：
准备从上述组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物和预测为非癌的区域的细胞溶解物；以及
评价线虫对上述各细胞溶解物的趋性行为。
[4]一种鉴别细胞溶解物是由包含癌细胞的组织样本得到、还是由不含癌细胞的组织样本得到的方法，其包括：
准备组织样本的细胞溶解物；以及
评价线虫对上述各细胞溶解物的趋性行为。
[5]一种确定组织样本不含癌的方法，其包括：
准备上述组织样本的细胞溶解物；以及
评价线虫对上述各细胞溶解物的趋性行为。
[6]如上述[1]～[5]中任一项所述的方法，其中，评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为是指：
以相对于10μm的组织切片为1～10mL的比例将组织切片与溶剂混合，得到细胞溶解物；以及
以105～107的范围的稀释倍率对细胞溶解物进行稀释，评价线虫对所得到的各稀释物的趋性行为。
附图说明
图1示出实施例1中实施的使用线虫的引诱行为的评价系统的示意图。在该评价系统中，在含有琼脂培养基的培养皿上评价线虫对尿样的趋性行为。
图2示出实施例1中使用的肿瘤样本的切片。
图3示出癌组织的细胞溶解物对线虫的引诱行为的评价结果。
具体实施方式
本说明书中，“线虫”是指秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)。线虫是在生物研究中作为模型生物在世界范围内广泛饲养、研究的常见生物，具有容易饲养、嗅觉优良的特征。
本说明书中，“癌”是指肾癌、胃癌、子宫癌、肝癌、乳腺癌、直肠结肠癌、食道癌、胰腺癌、前列腺癌、胆管癌、肺癌、血癌、白血病、淋巴瘤等癌种。
本说明书中，“对象”是指哺乳动物、例如人。对象可以是具有癌的对象、或者疑似具有癌的对象(以下有时仅称为“疑似为癌的对象”)。
本发明中，“组织样本”是指从对象获得的内脏器官或组织的全部或一部分、特别是从对象获得的内脏器官或组织的一部分。作为组织样本，可以列举通过活检(例如，内窥镜检查时得到的活检)得到的样本、以及手术时可得到的样本(例如，通过手术被摘除的内脏器官或组织)。组织样本可以为分离出的细胞或细胞团块。多数情况下，“组织样本”可以是疑似为癌的内脏器官或组织的全部或一部分。本说明书中，“组织样本”可以包含由单个的内脏器官或组织分离出的单个或多个部分，也可以包含由多个内脏器官或组织(同一患者或不同患者)分别得到的单个或多个部分。
本说明书中，“约”是指包含其后所接续的数值的上下10％以内的数值、或者上下5％以内的数值。
本说明书中，“趋性行为”是指引诱行为或回避行为。引诱行为是指缩小与某种物质的物理距离的行为，回避行为是指扩大与某种物质的物理距离的行为。将诱发引诱行为的物质称为引诱物质，将诱发回避行为的物质称为回避物质。
线虫(C.elegans)具有通过嗅觉被引诱物质引诱、并避开回避物质的性质。将被引诱物质引诱的行为称为引诱行为，将避开回避物质的行为称为回避行为。另外，将引诱行为和回避行为合称为趋性行为。线虫对癌患者的尿样显示出引诱行为，另一方面，对健康人的尿样显示出回避行为。
本说明书中，“检测癌的方法”或类似的表述可以换称为“用于癌检测的线虫的趋性行为的评价方法”、“得到与癌的有无相关的预备信息的方法”、“得到用于癌的诊断的预备信息的方法”、“癌的诊断的预备方法”、或者“检测癌细胞的方法”。本发明中得到的信息可作为中间信息成为医生的诊断基础。
[1]根据本发明，提供一种在组织样本中检测癌的方法(或者得到与癌的有无相关的预备信息的方法、得到用于癌的诊断的预备信息的方法、癌的诊断的预备方法、检测癌细胞的方法或癌的诊断方法)，其包括：
(1)准备上述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物；以及
(2)评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为。
本发明中，组织样本可以是从对象获得的内脏器官或组织的全部或一部分。在本发明的某一方式中，对象可以设定为人对象。在本发明的某一方式中，对象可以是例如疑似为癌的对象。在本发明的某一方式中，对象可以是例如具有癌的对象。在本发明的某一方式中，可以是需要考察癌的有无的对象。在本发明的特定的对象中，对象可以是手术中的对象、特别是癌摘除手术中的对象。
(1)准备上述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的疑似为癌的区 域的细胞溶解物
上述(1)中，疑似为癌的区域可以由从对象摘除的组织样本中分离。在某一方式中，疑似为癌的区域可以由从对象摘除的疑似具有癌的组织样本中分离得到、或者由从对象摘除的具有癌的组织样本中分离得到。组织样本只要以约(数mm)×(数mm～数10mm)×10μm厚的量存在，就足以进行评价。例如，在厚度为10μm的情况下，切片的面积可以设定为1mm2以上、2mm2以上、3mm2以上、4mm2以上、5mm2以上、6mm2以上、7mm2以上、8mm2以上、9mm2以上、10mm2以上、15mm2以上、20mm2以上、30mm2以上、40mm2以上或50mm2以上，并可以设定为1000mm2以下、900mm2以下、800mm2以下、700mm2以下、600mm2以下、500mm2以下、400mm2以下、300mm2以下、200mm2以下或100mm2以下。
上述(1)中，细胞溶解物可以通过本领域技术人员公知的各种方法而得到。根据上述专利文献1(WO2015/088039)，线虫对癌患者的尿样显示出引诱行为、对健康人的尿样显示出回避行为。由此预测，尿中含有由癌组织或癌细胞分泌的癌特有的分泌因子。考虑到线虫对癌特有的分泌因子显示出趋性行为，认为或许在癌组织或接近癌细胞的正常组织中也含有该分泌因子；以及或许由此线虫对癌组织或接近癌细胞的正常组织显示出引诱行为。但是，根据后述实施例，在同一样本的癌的区域和与之相邻的正常区域(非癌区域)之间，对线虫诱发的趋性行为不同。即，对于癌的区域，线虫显示出引诱行为；对于与癌的区域相邻的正常区域，线虫显示出回避行为。认为这是由于，与由癌产生的分泌因子相比，癌细胞内因子对线虫的趋性行为的影响更强。另外，可通过线虫的嗅觉检测到的癌细胞内因子是可在高稀释倍率下检测到的因子。
因此，本发明中，可以使用组织的细胞溶解物，只要细胞被破碎、能够提取细胞内因子，则可以通过任何方法得到细胞溶解物。作为从组织或细胞获得细胞溶解物的方法，没有特别限定，可以列举例如利用超声波破碎机的方法、施加压力的方法、利用搅拌的方法、磨碎的方法、以及利用水流的方法。获得细胞溶解物时的溶剂例如可以为乙醇、水。
在本发明的某一方式中，可以以相对于样本的10μm厚的组织切片为例如1～10mL、2～8mL、3～7mL、4～6mL或约5mL的比例将组织切片与溶剂混合，从该混合物得到细胞溶解物。
在本发明的某一方式中，作为阳性对照，可以使用已知为癌的组织样本、或者癌患者的尿。在本发明的某一方式中，作为阴性对照，可以使用已知不含癌的组织样本或其一部分、或者已知为非癌的对象(例如健康人)的尿。
上述(1)可以包括：(1-A)准备从上述内脏器官或组织分离出的疑似为癌的区域；以及(1-B)从上述区域得到细胞溶解物。
(2)评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为
上述(2)中，作为细胞溶解物，可以使用利用溶剂进行稀释而得到的稀释物。
本发明中，上述稀释的稀释倍率根据所使用的癌样本而变化，可以考虑利用相对于使用例如1～10mL(例如2～8mL、3～7mL、4～6mL或约5mL)的溶剂从10μm厚的切片得到的细胞溶解物为约10000倍～约1000000倍、约20000倍～约500000倍、约50000倍～约300000倍、或者约100000倍左右的比例的溶剂进行稀释。本领域技术人员可以参照组织样本量而适当调节稀释倍率。另外，为了进行检查，也可以制作细胞溶解物的稀释系列(包含上述倍率的范围的稀释倍率的稀释系列；例如2倍～10倍的稀释系列、例如3～5倍的稀释系列、例如5～15倍的稀释系列)。
本发明中，细胞溶解物的稀释可以利用例如乙醇、水、例如蒸馏水或灭菌水等溶剂来进行。
线虫对细胞溶解物是否显示出引诱行为可以通过观察线虫对于与线虫相隔一定距离(例如，1cm～5cm)地配置的细胞溶解物是接近还是远离来进行评价。在一部分线虫接近细胞溶解物、一部分线虫远离细胞溶解物的情况下，当接近细胞溶解物的线虫的比例高于远离细胞溶解物的线虫的比例时，可以评价为线虫对细胞溶解物显示出引诱行为。另外，当接近细胞溶解物的线虫的比例低于远离细胞溶解物的线虫的比例时，可以评价为线虫对细胞溶解物显示出回避行为。作为线虫，对癌患者的尿或组织显示出引诱行为的线虫株均可以使用，可以使用例如野生型的线虫株、例如Briostol N2株、特别是其雌雄同体。
另外，可以通过例如下式求出趋性指数来评价线虫是显示出引诱行为、还是显示出回避行为。
趋性指数
(趋性指数)＝{(接近细胞溶解物的线虫个体数)-(远离细胞溶解物的线虫个体数)}/全部线虫个体数
趋性指数取-1～+1之间的数值，在显示出引诱行为的情况下取正值，在显示出回避行为的情况下取负值。并且，数值的绝对值越大，可以解释为越强地表现出趋性行为。
在某一方式中，本发明的方法可以进一步包括：
(3)基于线虫对细胞溶解物显示出的趋性行为，评价细胞溶解物是引诱物质或是回避物质。
本发明的方法中，在线虫对细胞溶解物显示出引诱行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的组织样本或疑似为癌的区域具有癌或者存在具有癌的可能性。本发明的方法中，例如，在线虫对细胞溶解物显示出回避行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的组织样本或疑似为癌的区域不具有癌或者存在不具有癌的可能性。在使用细胞溶解物的稀释系列的情况下，在线虫对稀释系列中的任意一者以上显示出引诱行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的组织样本或疑似为癌的区域具有癌或者存在具有癌的可能性。引诱行为可以以上述趋性指数是否大于0为指标来评价其有无，也可以以与阴性对照相比是否诱发了比其更强的引诱行为为指标来评价其有无，或者也可以将它们组合来进行评价。
[2]根据本发明，提供一种在组织样本中检测非癌的部分的方法，其包括：
(1)准备上述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的预测为非癌的区域的细胞溶解物；以及
(2)评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为。
本发明中，组织样本可以是从对象获得的内脏器官或组织的全部或一部分。在本发明的某一方式中，对象可以设定为人对象。在本发明的某一方式中，对象可以是例如疑似为癌的对象。在本发明的某一方式中，对象可以是例如具有癌的对象。在本发明的某一方式中，可以是需要考察癌的有无的对象。在本发明的特定的对象中，对象可以是手术中的对象、特别是癌摘除手术中的对象。
上述[2](1)中，预测为非癌的区域可以由从对象摘除的组织样本中分离。在某一方式中，预测为非癌的区域可以由从对象摘除的疑似具有癌的组织样本(该组织样本包含疑似具有癌的区域和预测为非癌的区域)中分离得到，或者由从对象摘除的具有癌的组织样本中分离得到，或者由预测为不具有癌的组织样本中分离得到，或者由不具有癌的组织样本中分离得到。
上述[2](1)中，细胞溶解物可以通过本领域技术人员公知的各种方法而得到。详细情况如[1](1)中所详述的那样。
上述[2](1)可以包括：(1-A)准备从上述组织样本中分离出的预测为非癌的区域；以及(1-B)由上述区域得到细胞溶解物。
(2)评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为
上述[2](2)如上述[1](2)中所详述的那样。
在某一方式中，本发明的方法可以进一步包括：
(3)基于线虫对细胞溶解物显示出的趋性行为，评价细胞溶解物是引诱物质或是回避物质。
本发明的方法中，在线虫对细胞溶解物显示出引诱行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的组织样本或疑似为癌的区域具有癌或者存在具有癌的可能性。本发明的方法中，例如，在线虫对细胞溶解物显示出回避行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的组织样本或疑似为癌的区域不具有癌或者存在不具有癌的可能性。
[3]根据本发明，提供一种在组织样本中对癌的区域和非癌的区域进行鉴别(识别、区别、分类或癌诊断)的方法，其包括：
(1)准备从上述组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物和预测为非癌的区域的细胞溶解物；以及
(2)评价线虫对上述各细胞溶解物的趋性行为。
本发明中，组织样本可以是从对象获得的内脏器官或组织的全部或一部分。在本发明的某一方式中，对象可以设定为人对象。在本发明的某一方式中，对象可以是例如疑似为癌的对象。在本发明的某一方式中，对象可以是例如具有癌的对象。在本发明的某一方式中，可以是需要考察癌的有无的对象。在本发明的特定的对象中，对象可以是手术中的对象、特别是癌摘除手术中的对象。
上述[3](1)中，关于疑似为癌的区域，如上述[1](1)中所详述的那样，关于预测为非癌的区域，如上述[2](1)所详述的那样。
另外，关于上述[3](2)，如上述[1](2)中所详述的那样。
在某一方式中，本发明的方法可以进一步包括：
(3)基于线虫对细胞溶解物显示出的趋性行为，评价细胞溶解物是引诱物质或是回避物质。
本发明的方法中，在线虫对细胞溶解物显示出引诱行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的组织样本或疑似为癌的区域具有癌或者存在具有癌的可能性。本发明的方法中，例如，在线虫对细胞溶解物显示出回避行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的组织样本或疑似为癌的区域不具有癌或者存在不具有癌的可能性。
[4]根据本发明，提供一种确定细胞溶解物是由包含癌细胞的组织样本得到、还是由不含癌细胞的组织样本得到的方法，其包括：
(1)准备组织样本的细胞溶解物；以及
(2)评价线虫对上述各细胞溶解物的趋性行为。
本发明中，组织样本可以是从对象获得的内脏器官或组织的全部或一部分，例如可以是从不具有癌的内脏器官或组织中得到的组织样本；或者从具有癌的内脏器官或组织中得到的组织样本(例如，癌的边缘部、周围部等)。在本发明的某一方式中，对象可以设定为人对象。在本发明的某一方式中，对象可以是例如疑似为癌的对象。在本发明的某一方式中，对象可以是例如具有癌的对象。在本发明的某一方式中，可以是需要考察癌的有无的对象。在本发明的特定的对象中，对象可以是手术中的对象、特别是癌摘除手术中的对象。
上述[4](1)可以通过上述[1](1)中所详述的方法而得到。
另外，关于上述[4](2)，如上述[1](2)中所详述的那样。
在某一方式中，本发明的方法可以进一步包括：
(3)基于线虫对细胞溶解物显示出的趋性行为，评价细胞溶解物是引诱物质或是回避物质。
本发明的方法中，在线虫对细胞溶解物显示出引诱行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的组织样本为包含癌的组织样本或者存在该可能性。本发明的方法中，例如，在线虫对细胞溶解物显示出回避行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的组织样本为不含癌的组织样本或者存在该可能性。
上述[4]中，样本可以分割为多个部分，由各部分得到细胞溶解物，并分别对其评价线虫的趋性行为。这种情况下，在线虫对分割的部分中的至少一个部分显示出引诱行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的样本为具有癌的样本或者存在该可能性。另外，在线虫对所有部分的细胞溶解物显示出回避行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的样本为不具有癌的样本或者存在该可能性。
[5]根据本发明，提供一种确定组织样本不含癌的方法，其包括：
(1)准备上述组织样本的细胞溶解物；以及
(2)评价线虫对上述各细胞溶解物的趋性行为。
本发明中，样本可以是从对象获得的内脏器官或组织。在本发明的某一方式中，对象可以设定为人对象。在本发明的某一方式中，对象可以是例如疑似为癌的对象。在本发明的某一方式中，对象可以是例如具有癌的对象。在本发明的某一方式中，可以是需要考察癌的有无的对象。在本发明的特定的对象中，对象可以是手术中的对象、特别是癌摘除手术中的对象。
上述[5](1)中，样本可以从例如包含疑似为癌的区域或者预测为非癌的区域的内脏器官或组织中得到。关于疑似为癌的区域或预测为非癌的区域，如上述[1](1)和[2](1)中所详述的那样。
另外，关于上述[5](2)，如上述[1](2)中所详述的那样。
在某一方式中，本发明的方法可以进一步包括：
(3)基于线虫对细胞溶解物显示出的趋性行为，评价细胞溶解物是引诱物质或是回避物质。
本发明的方法中，在线虫对细胞溶解物显示出引诱行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的样本具有癌或者存在该可能性。本发明的方法中，例如，在线虫对细胞溶解物显示出回避行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的样本不具有癌或者存在该可能性。
上述[5]中，样本可以分割为多个部分，由各部分得到细胞溶解物，并分别对其评价线虫的趋性行为。这种情况下，在线虫对分割的部分中的至少一个部分显示出引诱行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的样本包含癌或者存在该可能性。另外，在线虫对所有部分的细胞溶解物显示出回避行为的情况下，表明细胞溶解物所来源的样本不包含癌或者存在该可能性。
根据本发明，提供一种癌组织用的癌的诊断试剂盒，其包含线虫、细胞溶解缓冲液和稀释液。对象、稀释溶剂、稀释倍率、趋性行为的评价方法、癌的检测方法与上述相同。
根据本发明，提供一种包含线虫的、癌组织用的癌的诊断试剂盒，其包含线虫、细胞溶解缓冲液和稀释液，在本发明的方法中使用。对象、稀释溶剂、稀释倍率、趋性行为的评价方法、癌的检测方法与上述相同。
本说明书中，“检测癌的方法”或“治疗癌的方法”除了包括检测癌的上述方法以外，还可以进一步包括通过适当的癌疗法对癌进行治疗。因此，根据本发明，提供一种治疗癌的方法，其包括利用本发明的检测方法对癌进行检测；以及在检测到癌的对象中对癌进行治疗。癌的治疗可以通过与癌相应的癌疗法(例如，针对癌的抗癌剂的给药、放射疗法、免疫疗法)来进行。
特别是在从癌摘除手术中的对象获得的癌组织中，可以从其表层的组织获得细胞溶解物来进行使用线虫的本发明的方法。其结果是，在表明表层部存在癌或者存在该可能性的情况下，可以评价为存在该表层部所接触的患者内脏器官或组织中残留有癌的可能性。并且，在评价为存在该表层部所接触的患者内脏器官或组织中残留有癌的可能性的情况下，可以将该表层部所接触的患者内脏器官或组织更多地摘除。在更多地摘除后也可以进一步进行本发明的方法，在追加摘除的组织的表层部依然检测到癌的情况下，可以进一步更多地摘除该表层部所接触的患者内脏器官或组织。这样，本发明中，可以在手术中进行检查，基于其结果提供用于判断是否应该更多地摘除组织的基础信息。
在本发明的某一方式中，提供一种评价线虫对样本试样的趋性行为的方法，其包括：
准备上述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物；以及
评价线虫对上述细胞溶解物的趋性行为。
细胞溶解物可以进行了稀释，也可以制成稀释系列，线虫的趋性行为可以通过趋性指数进行评价。
以下，利用实施例对本发明进行说明，但实施例为例示，并不作为限定发明范围的示例来进行解释。
实施例
实施例1：以癌的组织样本作为被测试样的使用线虫的癌检查
在同一内脏器官内，难以区分癌组织与非癌组织的情况并不少见。本实施例中，对于线虫是否能够区分同一内脏器官内的癌组织与非癌组织进行了试验。
首先，利用常规方法将从胃癌患者摘除的癌组织(该癌组织在周围具有正常组织)进行福尔马林固定后进行石蜡包埋，制作厚度10μm的组织切片(参考图2)。所使用的组织切片为4mm×28mm×厚度10μm。由病理医生确定癌部和非癌部，将各自的切片各3张放入50mL离心管中。加入99％乙醇5mL，利用超声波匀浆器(Sonifier 250A)得到癌部的匀浆(细胞溶解物)和非癌部的匀浆。癌部、非癌部分别收集各3例的病例，分别得到匀浆。将各匀浆用灭菌水稀释至10倍～106倍。作为阳性对象(阳性对照)，使用癌患者的尿样(100倍稀释)，作为阴性对象(阴性对照)，使用健康人的尿样(100倍稀释)。
如图1所示，将尿样用灭菌水稀释至100倍，涂布至表面平坦的琼脂板10上的边缘部11，将线虫涂布至上述琼脂板的中央部12，观察线虫对尿样是显示出引诱行为还是显示出回避行为。关于线虫是显示出引诱行为还是显示出回避行为，利用下述趋性指数进行评价。作为线虫，使用Briostol N2株的雌雄同体。
趋性指数
(趋性指数)＝{(区域13的线虫个体数)-(区域14的线虫个体数)}/全部线虫个体数
(式中，区域13为用双点划线将琼脂板10分为3个区域时尿样侧的区域，区域14为上述3个区域中的远离尿样的区域。)
结果如图3所示。图3中，在10n倍稀释的情况下，记为“-n”。
如图3所示，对于癌部组织的细胞溶解物，线虫在105倍稀释或106倍稀释的试样中显示出引诱行为，与此相对照，线虫对非癌部组织的细胞溶解物显示出回避行为。对于101～104倍稀释的细胞溶解物，线虫的趋性行为不稳定。可知优选对细胞溶解物进行稀释。
这样，线虫不仅对癌部组织的细胞溶解物显示出引诱行为，而且对同一组织的非癌部组织的细胞溶解物显示出回避行为，能够鉴别出癌部与非癌部。

Claims (6)

1.一种在组织样本中检测癌的方法，其包括：
准备所述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物；以及
评价线虫对所述细胞溶解物的趋性行为。
2.一种在组织样本中检测非癌的部分(非癌部)的方法，其包括：
准备所述组织样本的细胞溶解物、或者从组织样本中分离出的预测为非癌的区域的细胞溶解物；以及
评价线虫对所述细胞溶解物的趋性行为。
3.一种在组织样本中对癌的区域与非癌的区域进行鉴别的方法，其包括：
准备从所述组织样本中分离出的疑似为癌的区域的细胞溶解物和预测为非癌的区域的细胞溶解物；以及
评价线虫对所述各细胞溶解物的趋性行为。
4.一种鉴别细胞溶解物是由包含癌细胞的组织样本得到、还是由不含癌细胞的组织样本得到的方法，其包括：
准备组织样本的细胞溶解物；以及
评价线虫对所述各细胞溶解物的趋性行为。
5.一种确定组织样本不含癌的方法，其包括：
准备所述组织样本的细胞溶解物；以及
评价线虫对所述各细胞溶解物的趋性行为。
6.如权利要求1～5中任一项所述的方法，其中，评价线虫对所述细胞溶解物的趋性行为是指：
以相对于10μm的组织切片为1～10mL的比例将组织切片与溶剂混合，得到细胞溶解物；以及
以105～107的范围的稀释倍率对细胞溶解物进行稀释，评价线虫对所得到的各稀释物的趋性行为。
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