CN110804080A - 乙酰氨基阿维菌素晶型a、晶型b、非晶体及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了乙酰氨基阿维菌素多晶型，具体而言，主要涉及乙酰氨基阿维菌素晶型A、晶型B、非晶体及其制备方法。所述晶型物A及非晶体可以通过将乙酰氨基阿维菌素溶解在良性有机溶剂中，再加入不良溶剂析出结晶，降温后，过滤，干燥而得。晶型B可通过将非晶体悬浮于混合液中结晶制备得到。本发明的乙酰氨基阿维菌素多晶型具有以下优良特性：理化性质稳定、流动性好，制备方法简单易操作，适合工业化生产。

Description

乙酰氨基阿维菌素晶型A、晶型B、非晶体及其制备方法

技术领域

本发明属于兽药、化学工程结晶技术领域，具体涉及乙酰氨基阿维菌素晶型A、晶型B、非晶体及其制备方法。

背景技术

乙酰氨基阿维菌素是1996年由美国Merck公司开发的一种大环内酯类抗生素，具有高生物活性及低毒性(对哺乳动物及水生生物)，是一种高效、广谱、低残留的兽用祛虫药物，对绝大多数线虫和节肢昆虫有很强的杀灭作用。由于其对家畜体内外各种寄生虫的极高活性，以及在乳品中极低的分配系数，使其成为第一个可用于各种家畜任何生长期的杀虫剂，是一种防治家畜体内外各种寄生虫的首选药剂。

乙酰氨基阿维菌素易溶于有机溶剂，比如甲醇，乙醇，丙酮、三氯甲烷、乙酸乙酯等，几乎不溶于水。由于乙酰氨基阿维菌素本身化学结构中酰胺键的不稳定特点，致使该产品极易氧化，在水中、光照条件下以及有氧环境中很容易降解，吸湿性强、稳定性差的问题一直存在。

现有技术中乙酰氨基阿维菌素精制方法主要是采用乙腈重结晶，其主要缺陷是溶剂残留量大，不符合兽药典要求，较难配置成注射液剂型。中国专利CN105001289A提供了一种乙酰氨基阿维菌素的精制方法，解决了产品纯度低和溶媒残留量高的问题。然而工艺操作复杂，首先将乙腈结晶的湿粉于溶剂A中打浆处理，再溶于溶剂B中结晶，最后再于溶剂C中打浆处理，几步操作复杂，且最后一步还会采用乙醚作为溶剂，存在较大安全隐患。即便解决了乙腈超标的问题，但仍然没有解决稳定性差，易氧化降解的问题。CN109303049A公开了一种提高稳定性的方法，即在乙酰氨基阿维菌素中加入抗氧化剂，以此来提高药物稳定性，但未明确API中引入抗氧剂给临床用药带来的潜在风险。

目前，市售乙酰氨基阿维菌素主要以外用的浇泼剂及内用的注射剂两种剂型为主，这两种剂型均具有局限性。浇泼剂为体表靶向制剂，由于给药方式的局限性，生物利用度较低。乙酰氨基阿维菌素注射剂为油状澄明液，具有良好的杀虫效果，注射液剂型除对原药的有机溶剂残留有较高要求外，选择非晶体化原药更会缩短制剂溶解配置时间，从而减小降解杂质的产生。所以，开发一种结晶工艺简单、易操作，有机溶剂残留量低、吸湿性弱、晶型稳定的乙酰氨基阿维菌素或非晶体，既可以解决结晶工艺复杂问题，又为将来开发新的制剂剂型提供更多选择，以此来进一步满足兽药市场需求。

发明内容

本发明提供了乙酰氨基阿维菌素的新晶型及其制备方法。该新晶型为多晶型，包括晶型A、晶型B及非晶体，该多晶型的制备方法简单、工艺受热时间短，适合工业化生产，所得晶体中有机溶剂残留量低，不仅克服了现有技术存在的缺陷，也为乙酰氨基阿维菌素在新剂型开发及制备工艺优化上提供了更多选择。

本发明的第一方面，提供了两种乙酰氨基阿维菌素晶型，晶型A和晶型B。

所述晶型A的X射线粉末衍射图(图1)在2θ为6.40°、6.92°、8.30°、9.40°、10.38°、10.74°、11.46°、13.10°、14.12°、14.60°、15.85°、16.88°、17.28°、17.96°、18.30°、21.18°、21.55°、21.91°、23.24°、25.48°、25.75°、27.18°(±0.2)处有专属特征吸收峰。

所述晶型B的X射线粉末衍射图(图4)在2θ为7.5°、7.7°、8.8°、9.3°、10.4°、11.3°、12.0°、13.0°、14.4°、15.2°、15.5°、16.0°、16.6°、18.1°、19.4°、19.8°、21.4°、22.1°、22.8°、23.6°、25.0°、25.5°、26.1°(±0.2)处有专属特征吸收峰。

优选地，本发明提供的乙酰氨基阿维菌素晶型A具有的X-射线粉末衍射图如图1所示。

优选地，本发明提供的乙酰氨基阿维菌素晶型B具有的X-射线粉末衍射图如图4所示。

本发明的第二方面，提供了乙酰氨基阿维菌素晶型A和晶型B的制备方法。

晶型A制备步骤如下：

(1)将乙酰氨基阿维菌素热溶解于有机良溶剂中，过滤。

(2)滤液通过减压浓缩出一部分良溶剂后再加入不良溶剂，继续浓缩至析出晶体，降温后过滤干燥，得到乙酰氨基阿维菌素晶型A。

步骤(1)所述有机良溶剂选自杂环类、卤代烃类、酯类、酮类、醇类等有机溶剂中的一种或几种。优选地，步骤(1)所述良溶剂选自四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丁酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇中的一种或几种。

步骤(1)所述乙酰氨基阿维菌素与良溶剂用量比(m:v)为1:1-5(g:mL)。

步骤(2)所述制备晶型A不良溶剂为脂肪族烃类、醇类、酮类、芳香族烃类中的一种或几种。优选地，步骤(2)所述制备晶型A的不良溶剂选自正己烷、异丙醇、正丁醇、丁酮、甲苯溶剂的一种或几种。更优选地，步骤(2)所述制备晶型A的不良溶剂选自正己烷、异丙醇、正丁醇中的一种或几种。

步骤(2)所述减压浓缩出的良溶剂与乙酰氨基阿维菌素固体的体积重量比为0.5-3:1(ml:g)，优选为1-2:1；加入的不良溶剂与乙酰氨基阿维菌素固体的体积重量比为0.5-3:1(ml:g)，优选为1-2:1。

步骤(1)所述热溶解温度为20-60℃。

步骤(2)所述降温范围为-5-15℃，烘干干燥温度为30-80℃。

晶型B制备步骤如下：

将非晶体置于一定配比量的混悬液中于20-50℃下搅拌5-10h进行结晶。

所述混悬液为丙酮、甲醇、乙醇中的一种或几种有机溶剂和水的混合液，混合液中的有机溶剂与水的体积比为1:8-15；或，所述混悬液为水。

所述混悬液与非晶体的体积重量比为1-10:1(ml:g)。

优选地，所述混悬液与非晶体的体积重量比为2-5:1(ml:g)，混悬液中的有机溶剂与纯化水体积比为1:8-10。

本发明的第三方面，提供了乙酰氨基阿维菌素非晶体的制备方法。

非晶体制备步骤如下：

(1)将乙酰氨基阿维菌素溶解于有机良溶剂中，过滤。

(2)向滤液中缓慢滴加入不良溶剂，搅拌后析出固体，过滤干燥，得到乙酰氨基阿维菌素非晶体。

步骤(1)所述有机良溶剂选自杂环类、卤代烃类、酯类、酮类、醇类等有机溶剂中的一种或几种。优选地，步骤(1)所述有机良溶剂选自四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丁酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇中的一种或几种。

步骤(1)所述乙酰氨基阿维菌素与良溶剂用量比(m:v)为1:0.5-5(g:ml)。

步骤(2)所述制备非晶体的不良溶剂为正己烷、环己烷、正庚烷、二甲基醚、二异丙基醚、石油醚、甲基叔丁基醚的一种或几种。优选地，步骤(2)所述制备非晶体的不良溶剂选自正己烷、正庚烷、石油醚中的一种或几种。

步骤(2)所述不良溶剂与乙酰氨基阿维菌素固体的体积重量比为1-8:1(ml:g)，优选为2-5:1。

步骤(2)所述烘干干燥温度为30-80℃。

所用结晶设备选用本领域具有搅拌效果的常规结晶釜即可。

有益效果：

1、本发明的精制工艺简单、易操作，适合工业化生产，且得到的晶体与非晶体有机溶剂残留量符合VICH要求。

2、该结晶工艺得到的多晶型稳定性好，不会发生晶型转变、不存在吸湿现象。

附图说明

图1是本发明实施例1制备的乙酰氨基阿维菌素晶型A的X射线粉末衍射图；

图2是本发明实施例2制备的乙酰氨基阿维菌素晶型A的X射线粉末衍射图；

图3是本发明实施例3制备的乙酰氨基阿维菌素非晶体的X射线粉末衍射图；

图4是本发明实施例4制备的乙酰氨基阿维菌素晶型B的X射线粉末衍射图；

图5是本发明对比例1制备的乙酰氨基阿维菌素晶型的X射线粉末衍射图；

图6是本发明对比例2制备的乙酰氨基阿维菌素晶型的X射线粉末衍射图。

具体实施方式

为了对本发明进行进一步的说明，下面结合实施例对本发明优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制。

通用测试方法：

X-射线粉末衍射(XRD)仪器：日本Rigaku D/Max-2500型：辐射源：铜靶在室温条件下扫描：扫描范围：2.0～50.0°，扫描速率：8°/min，步长：0.02°。

实施例1

取乙酰氨基阿维菌素10g，加入10ml二氯甲烷，升温至35℃减压浓缩至剩余5ml，加入异丙醇10ml，继续减压浓缩至剩余10ml。降温至0-5℃，过滤，滤饼于40-50℃干燥得乙酰氨基阿维菌素晶体物，进行XRD测试，结果：

图1是实施例1得到的乙酰氨基阿维菌素晶型X-射线粉末衍射图，从图1可以看出，XRD衍射角(2θ)在6.40°、6.92°、8.30°、9.40°、10.38°、10.74°、11.46°、13.10°、14.12°、14.60°、15.85°、16.88°、17.28°、17.96°、18.30°、21.18°、21.55°、21.91°、23.24°、25.48°、25.75°、27.18°处有专属特征吸收峰。可以看出，所得乙酰氨基阿维菌素为晶型A。

实施例2

取乙酰氨基阿维菌素10g，加入乙酸乙酯10ml，升温至40℃溶解，浓缩至剩余5ml，加入10ml正己烷，继续浓缩至剩余10ml，结晶析出，降温至10℃，过滤，滤饼于60-80℃干燥得乙酰氨基阿维菌素晶体。

对所得乙酰氨基阿维菌素晶体物进行XRD测试，结果如图2：

XRD衍射2θ值＝6.46°、6.88°、8.32°、9.26°、10.34°、10.60°、11.48°、13.20°、14.08°、14.88°、15.70°、16.94°、17.52°、18.26°、18.48°、20.02°、20.69°、21.80°、22.18°、23.40°、23.82°、25.27°、25.53°、27.30°处有专属特征吸收峰。可以看出，所得乙酰氨基阿维菌素为晶型A。

实施例3

取乙酰氨基阿维菌素10g，加入乙酸乙酯10ml，溶解，缓慢滴加20ml正庚烷，搅拌至固体析出，过滤，滤饼于50-60℃干燥得乙酰氨基阿维菌素。

对所得乙酰氨基阿维菌素进行XRD测试，结果：

图3是实施例3得到的乙酰氨基阿维菌素的X-射线粉末衍射图。从图3中可以看出，所得乙酰氨基阿维菌素为非晶体。

实施例4

取乙酰氨基阿维菌素10g，加入丙酮5ml，溶解后缓慢滴加10ml石油醚，搅拌至固体析出，过滤，滤饼于50-60℃干燥得乙酰氨基阿维菌素。

对所得乙酰氨基阿维菌素进行XRD测试，结果显示所得乙酰氨基阿维菌素为非晶体。

实施例5

取5g非晶体，置于由1ml丙酮与10ml纯化水组成的混合液中，搅拌7h后过滤，滤饼于45-60℃干燥得到乙酰氨基阿维菌素。

对所得乙酰氨基阿维菌素晶体物进行XRD测试，结果如图4：

XRD衍射角(2θ)在7.5°、7.7°、8.8°、9.3°、10.4°、11.3°、12.0°、13.0°、14.4°、15.2°、15.5°、16.0°、16.6°、18.1°、19.4°、19.8°、21.4°、22.1°、22.8°、23.6°、25.0°、25.5°、26.1°处有衍射峰。可以看出，所得乙酰氨基阿维菌素为晶型B。

对比实施例1

按照CN105968154A结晶方法，取乙酰氨基阿维菌素10g，加入50ml乙腈，加热溶解后降温，析出大量结晶，过滤，滤饼于65℃真空干燥得乙酰氨基阿维菌素晶体。

对所得乙酰氨基阿维菌素晶体物进行XRD测试，结果如图5：

XRD衍射2θ值＝4.38°、5.02°、5.48°、8.98°、9.68°、10.34°、11.12°、12.81°、14.32°、16.80°、19.48°处有专属特征吸收峰。

对比实施例2

按照CN105001289A结晶方法，取乙酰氨基阿维菌素10g，加入乙醇8ml、丙酮10ml、2ml纯化水，搅拌加热溶解，加入晶种后降温至室温，大量结晶析出，过滤。将滤饼加入35ml乙醚与35ml纯化水组成的混合溶剂中，充分搅拌，过滤，滤饼于65℃真空干燥得乙酰氨基阿维菌素晶体物。

对所得乙酰氨基阿维菌素晶体物进行XRD测试，结果如图6：

XRD衍射2θ值＝7.9°、8.7°、8.9°、9.5°、10.7°、11.7°、12.1°、12.8°、13.1°、14.6°、15.4°、15.7°、16.1°、16.8°、17.3°、18.3°、18.7°、19.3°、19.7°、20.1°、21.5°、23.1°、23.7°、25.1°、26.5°处有专属特征吸收峰。

实施例6残留溶剂分析

对本发明实施例1-5与对比实施例得到的晶体进行气相有机溶剂残留检测，结果如下：

表1乙酰氨基阿维菌素晶型残留溶剂分析

实验结果表明：

在上表实验条件下，本发明所得的乙酰氨基阿维菌素晶型A、B以及非晶体，其有机溶剂残留量均符合VICH残留溶剂限度标准，完全可以应用到药物制剂中，且结晶工艺简单，易于工业化生产。

实施例7稳定性研究

对该多晶型进行稳定性研究，结果如下：

表2乙酰氨基阿维菌素晶型稳定性研究

实验结果表明：

在上表实验条件下，本发明所得的乙酰氨基阿维菌素晶型，含量、外观及晶型等均无明显变化，稳定性好。且无吸湿性，可以更好的应用到药物制剂中。

本发明提出的乙酰氨基阿维菌素晶型A、晶型B及非晶体的制备方法已通过实施例进行了描述，相关技术人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的乙酰氨基阿维菌素多晶型及其制备方法进行改动或适当变更与组合，来实现本发明技术。特别需要指出的是，所有相类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明的精神、范围和内容中。

Claims (15)

1.一种乙酰氨基阿维菌素晶型A，其特征在于，所述晶型A使用CuKa射线测量得到的X射线粉末衍射图谱在2θ为6.40±0.2°、6.92±0.2°、8.30±0.2°、9.40±0.2°、10.38±0.2°、10.74±0.2°、11.46±0.2°、13.10±0.2°、14.12±0.2°、14.60±0.2°、15.85±0.2°、16.88±0.2°、17.28±0.2°、17.96±0.2°、18.30±0.2°、21.18±0.2°、21.55±0.2°、21.91±0.2°、23.24±0.2°、25.48±0.2°、25.75±0.2°、27.18±0.2°处具有特征峰。

2.一种乙酰氨基阿维菌素晶型B，其特征在于，所述晶型B使用CuKa射线测量得到的X射线粉末衍射图谱在2θ为7.5±0.2°、7.7±0.2°、8.8±0.2°、9.3±0.2°、10.4±0.2°、11.3±0.2°、12.0±0.2°、13.0±0.2°、14.4±0.2°、15.2±0.2°、15.5±0.2°、16.0±0.2°、16.6±0.2°、18.1±0.2°、19.4±0.2°、19.8±0.2°、21.4±0.2°、22.1±0.2°、22.8±0.2°、23.6±0.2°、25.0±0.2°、25.5±0.2°、26.1±0.2°处具有特征峰。

3.一种乙酰氨基阿维菌素非晶体，其特征在于，所述乙酰氨基阿维菌素非晶体的X射线粉末衍射图谱如图3所示。

4.一种如权利要求1所述的乙酰氨基阿维菌素晶型A的制备方法，其特征在于，所述制备步骤为：

(1)将乙酰氨基阿维菌素热溶解于有机良溶剂中，过滤；

(2)将步骤(1)所得滤液通过减压浓缩出一定体积良溶剂后再加入不良溶剂，继续浓缩至析出晶体，降温后过滤干燥，得到乙酰氨基阿维菌素晶型A。

5.根据权利要求4所述的乙酰氨基阿维菌素晶型A的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述有机良溶剂选自杂环类、卤代烃类、酯类、酮类、醇类中的一种或几种；步骤(2)所述不良溶剂为脂肪族烃类、醇类、酮类、芳香族烃类中的一种或几种。

6.根据权利要求5所述的乙酰氨基阿维菌素晶型A的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述有机良溶剂选自四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丁酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇中的一种或几种；步骤(2)所述不良溶剂为正己烷、异丙醇、正丁醇、丁酮、甲苯的一种或几种。

7.根据权利要求4所述的乙酰氨基阿维菌素晶型A的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述乙酰氨基阿维菌素与良溶剂的重量体积比为1:1-5；所述热溶解温度为20-60℃。

8.根据权利要求4所述的乙酰氨基阿维菌素晶型A的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述减压浓缩出的良溶剂与乙酰氨基阿维菌素固体的体积重量比为0.5-3:1；加入的不良溶剂与乙酰氨基阿维菌素固体的体积重量比为0.5-3:1；所述降温温度为-5-15℃，干燥温度为30-80℃。

9.一种如权利要求2所述的乙酰氨基阿维菌素晶型B的制备方法，其特征在于，其制备步骤为：将权利要求3所述的非晶体置于一定配比量的混悬液中，于20-50℃下搅拌5-10h进行结晶。

10.根据权利要求9所述的乙酰氨基阿维菌素晶型B的制备方法，其特征在于，所述混悬液为丙酮、甲醇、乙醇中的一种或几种与水的混合液，混合液中的有机溶剂与水的体积比为1:8-15；

或，所述混悬液为水。

11.根据权利要求9所述的乙酰氨基阿维菌素晶型B的制备方法，其特征在于，所述混悬液与非晶体的体积重量比为1-10:1。

12.根据权利要求3所述的乙酰氨基阿维菌素非晶体的制备方法，其特征在于，所述制备步骤为：

(1)将乙酰氨基阿维菌素溶解于有机良溶剂中，过滤；

(2)向所得滤液中缓慢滴加入不良溶剂，搅拌后析出固体，过滤干燥，得到乙酰氨基阿维菌素非晶体。

13.根据权利要求12所述的乙酰氨基阿维菌素非晶体制备方法，其特征在于，步骤(1)所述有机良溶剂选自杂环类、卤代烃类、酯类、酮类、醇类中的一种或几种；步骤(2)所述不良溶剂为正己烷、环己烷、正庚烷、二甲基醚、二异丙基醚、石油醚、甲基叔丁基醚的一种或几种。

14.根据权利要求13所述的乙酰氨基阿维菌素非晶体制备方法，其特征在于，步骤(1)所述有机良溶剂选自四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丁酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇中的一种或几种；步骤(2)所述不良溶剂选自正己烷、正庚烷、石油醚中的一种或几种。

15.根据权利要求12所述的乙酰氨基阿维菌素非晶体制备方法，其特征在于，步骤(1)所述乙酰氨基阿维菌素与良溶剂重量体积比为1:0.5-5；步骤(2)中所述不良溶剂与乙酰氨基阿维菌素固体的体积重量比为1-8:1，干燥温度为30-80℃。

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