CN110800868A - 一种低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料的制备方法 - Google Patents

一种低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料的制备方法 Download PDF

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董树清
王爱勤
康玉茹
刘红
邵士俊
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Abstract

本发明提供了一种低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料的制备方法，是将甘草先采用常规的水提醇沉或醇提水沉的方式进行粗提，再通过大孔树脂纯化，即得低含量甘草霜；再利用凹凸棒石与低含量甘草霜负载技术制备了低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料完成负载型抗菌材料。本发明不仅充分应用天然产物甘草霜易于降解、绿色环保的优势，而且充分利用凹凸棒石的吸附性和生物兼容性，使得甘草霜与凹凸棒石的优势互补，为天然抗菌饲料的开发提供辅料。实验表明，本发明制备的低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料对大肠杆菌或金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌效果，作为添加辅料添加到饲料基质中，是一种非常有前景的抗菌饲料。

Description

一种低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料的制备方法
技术领域
本发明涉及一种天然抗菌饲料，尤其涉及一种低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料的制备方法，属于复合材料的和纳米抗菌材料及植物源抗菌剂技术领域。
背景技术
近年来，国内外对植物源抗菌剂的研究取得了较大的进展。目前统计，约有2000种左右植物可用作抗菌剂的提取与制备。现已发现的植物源抗菌活性的物质结构主要包括萜稀类、生物碱类、黄酮类、酚类、醌类、醛类、醇类、苯丙素类、香素类、木脂素类、甾体、有机酸类、精油等。甘草为豆科甘草属药食同源植物，在我国资源丰富，具有保肝、抗渍疡、抗肿瘤，保护神经等功效。由于甘草中的活性源物质主要是三萜皂苷和黄酮类化合物，其抗肿瘤及抗氧化活性研究较为广泛。随着天然产物化学的快速发展，对于其化学成分不断深入研究，发现甘草还具有抗渍疡、抗炎、抗菌等活性。有文献报道甘草对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等细菌有较好的抗菌作用。因此，开展甘草中天然抗菌植物源物质的提取制备，亦成为甘草提取物及其相关制品研究的热点。
凹凸棒石是天然绿色纳米抗菌材料，具有特殊的孔道结构，稳定性及生物相容性。采用负载吸附的方式，将甘草提取物负载于凹凸棒石上，可充分利用凹凸棒石的吸附性和生物兼容性，为天然抗菌饲料的开发提供辅料。
发明内容
本发明的目的是提供一种低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料的制备方法；
本发明采用生物合成技术，完成甘草提取物——低含量甘草霜的提取，并利用凹凸棒石与低含量甘草霜负载技术，完成负载型抗菌材料的绿色合成，改善凹凸棒石抗菌吸附性能。具体包括以下工艺步骤：
（1）低含量甘草霜的提取纯化：将甘草先采用常规的水提醇沉或醇提水沉的方式进行粗提，再通过大孔树脂纯化，即得低含量甘草霜。其中提取采用的大孔树脂为D-101，AB-8，LSD-001。该提取物为黄色细粉末，无臭，有特殊甜味；
（2）负载型凹凸棒石抗菌材料的制备：将提纯的凹凸棒石和分散剂加入到蒸馏水中，超声振荡形成凹凸棒石分散液；将上述提取的低含量甘草霜溶解于蒸馏水中，并加入上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌0.5~2 h，再调节体系pH值至8~12，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。
分散剂采用SiO2、甲酸钙、硬脂酸钙；分散剂的加入量为凹凸棒石质量的0.5~5%。凹凸棒石与低含量甘草霜的质量比为1:1~8:1。
本发明制备的低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料，不仅充分应用天然产物甘草霜易于降解、绿色环保的优势，而且充分利用凹凸棒石的吸附性和生物兼容性，使得甘草霜与凹凸棒石的优势互补，为天然抗菌饲料的开发提供辅料。实验表明，本发明制备的低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料对大肠杆菌或金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌效果，作为添加辅料添加到饲料基质中，是一种非常有前景的抗菌饲料。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌材料的制备及抗菌性能做进一步说明。
实施例1
（1）对甘草采用常规的水提醇沉法进行粗提，通过AB-8大孔树脂纯化得到低含量甘草霜；
（2）取80g经提纯的凹凸棒石，分散于有100mL蒸馏水的三颈烧瓶中，加入0.8g分散剂SiO2，超声振荡形成凹凸棒石分散液；
（3）称取10g步骤（1）提取的低含量甘草霜，溶解于10mL蒸馏水中，再加入到上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌2 h；用NaOH溶液调节体系pH值至8，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。抑菌实验表明，该抗菌材料的MIC为1.5mg/mL。
实施例2
（1）对甘草采用常规的水提醇沉法进行粗提，通过D-101大孔树脂纯化得到低含量甘草霜；该提取物为黄褐色细粉末，无臭，有特殊甜味；
（2）取50g经提纯的凹凸棒石，分散于有100mL蒸馏水的三颈烧瓶中，加入2.5g分散剂甲酸钙，超声振荡形成凹凸棒石分散液；
（3）称取10g步骤（1）提取的低含量甘草霜，溶解于20mL蒸馏水中，再加入到上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌2 h；用NaOH溶液调节体系pH值至9，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。抑菌实验表明，该抗菌材料的MIC为1.8mg/mL。
实施例3
（1）对甘草采用常规的水提醇沉法进行粗提，通过LSD-001大孔树脂纯化得到低含量甘草霜；
（2）取10g经提纯的凹凸棒石，分散于有100mL蒸馏水的三颈烧瓶中，加入0.25g分散剂硬脂酸钙，超声振荡形成凹凸棒石分散液；
（3）称取10g步骤（1）提取的低含量甘草霜，溶解于30mL蒸馏水中，再加入到上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌2 h；用NaOH溶液调节体系pH值至10，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。抑菌实验表明，该抗菌材料的MIC为2.0mg/mL。
实施例4
（1）对甘草采用常规的水提醇沉法进行粗提，通过AB-8大孔树脂纯化得到低含量甘草霜；
（2）80g经提纯的凹凸棒石，分散于有100mL蒸馏水的三颈烧瓶中，加入0.8g分散剂SiO2，超声振荡形成凹凸棒石分散液；
（3）称取10g步骤（1）提取的低含量甘草霜，溶解于20mL蒸馏水中，再加入到上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌2 h；用NaOH溶液调节体系pH值至9，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。抑菌实验表明，该抗菌材料的MIC为2.3mg/mL。
实施例5
（1）对甘草采用常规的水提醇沉法进行粗提，通过D-101大孔树脂纯化得到低含量甘草霜；
（2）取50g经提纯的凹凸棒石，分散于有100mL蒸馏水的三颈烧瓶中，加入2.5g分散剂甲酸钙，超声振荡形成凹凸棒石分散液；
（3）称取10g步骤（1）提取的低含量甘草霜，溶解于30mL蒸馏水中，再加入到上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌2 h；用NaOH溶液调节体系pH值至10，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。抑菌实验表明，该抗菌材料的MIC为2.8mg/mL。
实施例6
（1）对甘草采用常规的醇提水沉法进行粗提，通过AB-8大孔树脂纯化得到低含量甘草霜；
（2）取10g经提纯的凹凸棒石，分散于有100mL蒸馏水的三颈烧瓶中，加入0.25g分散剂硬脂酸钙，超声振荡形成凹凸棒石分散液；
（3）称取10g步骤（1）提取的低含量甘草霜，溶解于10mL蒸馏水中，再加入到上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌2 h；用NaOH溶液调节体系pH值至8，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。抑菌实验表明，该抗菌材料的MIC为3.0mg/mL。
实施例7
（1）对甘草采用常规的醇提水沉法进行粗提，通过D-101大孔树脂纯化得到低含量甘草霜；
（2）取80g经提纯的凹凸棒石，分散于有100mL蒸馏水的三颈烧瓶中，加入0.80g分散剂SiO2，超声振荡形成凹凸棒石分散液；
（3）称取10g步骤（1）提取的低含量甘草霜，溶解于20mL蒸馏水中，再加入到上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌2 h；用NaOH溶液调节体系pH值至9，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。抑菌实验表明，该抗菌材料的MIC为1.5mg/mL。
实施例8
（1）对甘草采用常规的醇提水沉法进行粗提，通过LSD-001大孔树脂纯化得到低含量甘草霜；
（2）取50g经提纯的凹凸棒石，分散于有100mL蒸馏水的三颈烧瓶中，加入2.5g分散剂甲酸钙，超声振荡形成凹凸棒石分散液；
（3）称取10g步骤（1）提取的低含量甘草霜，溶解于30mL蒸馏水中，再加入到上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌2 h；用NaOH溶液调节体系pH值至10，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。抑菌实验表明，该抗菌材料的MIC为3.5mg/mL。
实施例9
（1）对甘草采用常规的醇提水沉法进行粗提，通过LSD-001大孔树脂纯化得到低含量甘草霜；
（2）取80g经提纯的凹凸棒石，分散于有100mL蒸馏水的三颈烧瓶中，加入0.8g分散剂硬脂酸钙，超声振荡形成凹凸棒石分散液；
（3）称取10g步骤（1）提取的低含量甘草霜，溶解于20mL蒸馏水中，再加入到上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌2 h；用NaOH溶液调节体系pH值至9，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。抑菌实验表明，该抗菌材料的MIC为3.0mg/mL。
实施例10
（1）对甘草采用常规的醇提水沉法进行粗提，通过D-101大孔树脂纯化得到低含量甘草霜；
（2）取50g经提纯的凹凸棒石，分散于有100mL蒸馏水的三颈烧瓶中，加入2.5g分散剂硬脂酸钙，超声振荡形成凹凸棒石分散液；
（3）称取10g步骤（1）提取的低含量甘草霜，溶解于30mL蒸馏水中，再加入到上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌2 h；用NaOH溶液调节体系pH值至10，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。抑菌实验表明，该抗菌材料的MIC为2.0mg/mL。

Claims (5)

1.一种低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料的制备方法，包括以下工艺步骤：
（1）低含量甘草霜的提取纯化：将甘草先采用常规的水提醇沉或醇提水沉的方式进行粗提，再通过大孔树脂纯化，即得低含量甘草霜；
（2）负载型凹凸棒石抗菌材料的制备：将提纯的凹凸棒石和分散剂加入到蒸馏水中，超声振荡形成凹凸棒石分散液；将上述提取的低含量甘草霜溶解于蒸馏水中，并加入上述凹凸棒石分散液中，常温搅拌0.5h~2 h，再调节体系pH值至8~12，产物经过滤、洗涤、烘干，得到凹凸棒石-低含量甘草霜抗菌材料。
2.如权利要求1所述一种低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料的制备方法，其特征在于：大孔树脂采用D-101，AB-8，LSD-001。
3.如权利要求1所述一种低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料的制备方法，其特征在于：凹凸棒石与低含量甘草霜的质量比为1:1~8:1。
4.如权利要求1所述一种低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料的制备方法，其特征在于：分散剂为SiO2、甲酸钙、硬脂酸钙。
5.如权利要求4所述一种低含量甘草霜负载凹凸棒石抗菌饲料的制备方法，其特征在于分散剂的加入量为凹凸棒石质量的0.5~5%。
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CN113545420A (zh) * 2021-07-28 2021-10-26 中国科学院兰州化学物理研究所 一种党参多糖@凹凸棒石凝胶抗菌材料的制备及应用

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