CN110663544A - 一种青绿苔草种子辐射诱变育种方法 - Google Patents

一种青绿苔草种子辐射诱变育种方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种青绿苔草种子辐射诱变育种方法，涉及苔草诱变育种技术领域，所述方法包括以下步骤：1)采用60Co‑γ对青绿苔草种子进行辐射处理；2)对辐射处理的种子进行消毒处理后，进行浸种处理；3)将浸种处理的种子进行发芽培养，得到幼苗；4)将幼苗移栽至育苗基质中进行培养，得到4～6叶期的青绿苔草；5)将4～6叶期的青绿苔草移栽至田间进行培养，筛选得到花叶青绿苔草单株；6)将花叶青绿苔草单株进行无性扩繁，得到的花叶青绿苔草株系；7)将花叶青绿苔草株系进行无性扩繁，得到稳定的花叶青绿苔草；将稳定的花叶青绿苔草在田间进行品比，得到花叶性状一致的青绿苔草。本发明的方法操作简便，育种成熟稳定，周期短。

Description

一种青绿苔草种子辐射诱变育种方法
技术领域
本发明涉及苔草诱变育种技术领域，具体涉及一种青绿苔草种子辐射诱变育种方法。
背景技术
苔草属(Carex leucochlora)是莎草科最大的一个属，是多年生丛生性的草本类植物，在我国分布范围较广，内蒙古、黑龙江、吉林、河南、山东、陕西、江苏、四川、浙江、台湾等地均有分布。苔草属植物不仅具有春季返青早、根茎发达、绿期长、形态优美等特点，而且均有耐旱和维护成本低等优点，它既可以作为优良的林下或建筑物背荫处地被植物，也可以作为观赏草与其他植物配置应用。在北方地区，随着低维护、节水园林的发展，市场对苔草的需求逐年增加。然而，我国苔草品种短缺，不能满足市场需求。青绿苔草(C.breviculmis)是目前我国园林绿化中应用最广泛的苔草之一。但现有技术中还未有关于采用60Co-γ辐射青绿苔草种子诱变育种方法的相关报道。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种青绿苔草种子辐射诱变育种方法。本发明提供的方法操作简便，方法成熟、稳定，育种周期短。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了青绿苔草种子辐射诱变育种的方法，包括以下步骤：
1)采用60Co-γ对青绿苔草种子进行辐射处理；所述辐射的强度为1Gy/min，辐射的剂量为75～150Gy；
2)对所述步骤1)辐射处理的种子进行消毒处理后，进行浸种处理；
3)将所述步骤2)浸种处理的种子于光照培养室中进行发芽培养，得到幼苗；
4)将所述步骤3)得到的幼苗移栽至育苗基质中于日光温室中进行培养，得到4～6叶期的青绿苔草；
5)将所述步骤4)得到的4～6叶期的青绿苔草移栽至田间进行培养，筛选得到花叶青绿苔草单株；
6)将所述步骤5)得到的花叶青绿苔草单株进行无性扩繁，得到花叶青绿苔草株系；
7)将所述步骤6)得到的花叶青绿苔草株系进行无性扩繁，得到稳定的花叶青绿苔草；将所述得到的稳定的花叶青绿苔草在田间进行品比，得到花叶性状一致的青绿苔草。
优选地，所述步骤2)中消毒处理使用的消毒液为5％的次氯酸钠溶液。
优选地，所述步骤2)中消毒处理的时间为15～30min。
优选地，所述步骤2)中浸种处理使用的试剂为水，所述浸种处理的时间为6～10h。
优选地，所述步骤3)发芽培养的光照培养条件包括：所述发芽培养的光照强度为2500～3000Lux，光照周期为光照和黑暗交替培养，所述光照的时间为14h；所述黑暗培养的时间为10h。
优选地，所述光照培养的温度为24～26℃；所述黑暗培养的温度为17～19℃。
优选地，所述步骤4)日光温室培养的条件包括：培养的温度为15～28℃，培养的空气相对湿度为70～80％。
优选地，所述步骤5)中花叶青绿苔草为白色和/或黄色条纹青绿苔草。
本发明提供了一种青绿苔草种子辐射诱变育种方法。本发明利用60Co-γ辐射青绿苔草种子，结合田间调查从诱变群体中筛选出具有花叶性状的优良单株，并采用分株法对选定的单株进行无性扩繁，以固定其花叶性状，经过连续无性扩繁和品比试验可育成稳定、一致性的花叶青绿苔草新品系，大大加快了青绿苔草新品种培育进程。
附图说明
图1为青绿苔草图，其中，左侧为对比例1无辐射的对照，右侧为利用实施例1的方法培育的花叶青绿苔草。
具体实施方式
本发明提供了一种青绿苔草种子辐射诱变育种方法，包括以下步骤：
1)采用60Co-γ对青绿苔草种子进行辐射处理；所述辐射的强度为1Gy/min，辐射的剂量为75～150Gy；
2)对所述步骤1)辐射处理的种子进行消毒处理后，进行浸种处理；
3)将所述步骤2)浸种处理的种子于光照培养室中进行发芽培养，得到幼苗；
4)将所述步骤3)得到的幼苗移栽至育苗基质中于日光温室中进行培养，得到4～6叶期的青绿苔草；
5)将所述步骤4)得到的4～6叶期的青绿苔草移栽至田间进行培养，筛选得到花叶青绿苔草单株；
6)将所述步骤5)得到的花叶青绿苔草单株进行无性扩繁，得到花叶青绿苔草株系；
7)将所述步骤6)得到的花叶青绿苔草株系进行无性扩繁，得到稳定的花叶青绿苔草；将所述得到的稳定的花叶青绿苔草在田间进行品比，得到花叶性状一致的青绿苔草。
本发明采用60Co-γ对青绿苔草种子进行辐射处理；所述辐射的强度为1Gy/min；所述辐射的剂量为75～150Gy，优选为100Gy。
本发明对所辐射处理的种子进行消毒处理后，进行浸种处理。本发明述消毒液为5％次氯酸钠溶液。在本发明中，所述消毒的时间优选为15～30min。
在本发明中，所述浸种处理优选采用蒸馏水浸种，所述浸种的时间优选为6～10h。
本发明将所述浸种处理的种子进行发芽培养，得到幼苗。在本发明中，所述发芽培养的条件包括：所述发芽培养的光照强度优选为2500～3000Lux；光照周期为光照和黑暗交替培养，所述光照的时间优选为14h；所述黑暗培养的时间优选为10h。在本发明中，所述光照培养的温度优选为25℃，所述黑暗培养的温度优选为18℃。在本发明中，所述发芽培养的时间优选为14d。
本发明将所述得到的幼苗移栽至育苗基质中于日光温室中进行培养，得到4～6叶期的青绿苔草。本发明对所述育苗基质的种类没有特殊限定，采用本领域常规培养青绿苔草的育苗基质即可。本发明对所述育苗培养的容器没有特殊限定，优选育苗钵进行培养。在本发明中，所述培养温度优选为15～28℃，其中，白天的温度优选为22～28℃，更优选为25℃；黑夜的温度优选为15～21℃，更优选为18℃；所述培养的空气相对湿度优选为70～80％。
本发明将所述得到的4～6叶期的青绿苔草移栽至田间进行培养，筛选得到花叶青绿苔草单株。本发明对所述田间培养的方法没有特殊限定，采用本领域常规的培养方法即可。在本发明中，所述花叶青绿苔草为白色和/或黄色条纹青绿苔草。
本发明将所述得到的花叶青绿苔草单株进行无性扩繁，得到花叶青绿苔草株系。在本发明中，所述无性扩繁的次数优选为1～2代。本发明对所述无性扩繁的方法没有特殊限定，采用本领域常规的方法即可。
本发明将所述得到的花叶青绿苔草株系进行无性扩繁，得到稳定的花叶青绿苔草；将所述得到的稳定的花叶青绿苔草在田间进行品比，得到花叶性状一致的青绿苔草。在本发明中，所述无性扩繁的次数优选为3～4代。本发明对所述无性扩繁的方法没有特殊限定，采用本领域常规的方法即可。本发明对所述品比的试验没有特殊限定，采用本领域常规的品比试验方法即可。
下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
青绿苔草种子辐射诱变育种方法
1)挑选籽粒饱满、一致的青绿苔草种子，采用60Co-γ对青绿苔草种子进行辐射处理，辐射的剂量为75Gy；
2)采用5％NaClO溶液对辐射处理的种子进行消毒处理15min，再用蒸馏水洗涤3次，然后用蒸馏水浸种6h；
3)将三层滤纸铺至培养皿中并用蒸馏水湿透，并将消毒后的种子播至皿中，在光照培养室条件下萌发；其中，光周期为14h光照/10h黑暗，光照强度2500Lux，光照条件下温度为25℃，黑暗条件下温度为18℃；
4)萌发14d后，将生长健壮的幼苗转移至装有育苗基质育苗钵中，在日光温室中培养至4叶期；其中，白天温度为25℃，黑夜温度为18℃，空气相对湿度70％；
5)将培育的幼苗移栽至田间，结合田间调查选择株型美观和叶色丰富的优良单株；
6)在日光温室中，采用分株法将选择的优良单株进行1代无性扩繁，培育成优良的株系；
7)将优良的的株系继续进行3代的无性扩繁，并在田间连续3年开展品比试验，培育得到性状表现稳定、一致性的花叶青绿苔草。
实施例2
青绿苔草种子辐射诱变育种方法中辐射的剂量为100Gy，其它与实施例1完全相同。
实施例3
青绿苔草种子辐射诱变育种方法中辐射的剂量为150Gy，其它与实施例1完全相同。
对比例1
青绿苔草种子辐射诱变育种方法中辐射的剂量分别为0Gy，250Gy和450Gy，其它与实施例1完全相同。
表1 60Co-γ射线不同辐射剂量处理对青绿苔草种子成苗率和幼苗生长的影响
辐射剂量/Gy 成苗率/％ 苗高/cm ‘花叶’变异率/％
对比例10 86.00±4.13a 1.89±0.19a 0
实施例175 80.00±5.29b 1.70±0.24b 2.8±0.45b
实施例2100 27.33±2.31c 1.60±0.30b 5.6±0.55a
实施例3150 21.33±1.15d 1.27±0.12c 3.4±0.55b
对比例1250 3.33±1.15e 0.70±0.10d 0
对比例1450 0 — 0
注：表中每列数据标不同字母表示差异显著；“-”表示数据无法计算得出
由表1可知，辐射剂量在75～150Gy时，成苗率达到21.33％～80％；发芽后10d，幼苗株高1.27～1.7cm；花叶变异率达2.8～5.6％。无辐射剂量或辐射剂量在250Gy时，无法培育出花叶青绿苔草。辐射剂量达到450Gy时，成苗率为0，无法培育出花叶青绿苔草。
实施例4
青绿苔草种子辐射诱变育种方法
1)挑选籽粒饱满、一致的青绿苔草种子，采用60Co-γ对青绿苔草种子进行辐射处理，辐射的剂量为150Gy；
2)采用5％NaClO将辐射处理的种子进行消毒处理20min，再用蒸馏水洗涤5次，然后用蒸馏水浸种10h；
3)将三层滤纸铺至培养皿中并用蒸馏水湿透，并将消毒后的种子播至皿中，在光照培养室条件下萌发；其中，光周期为14h光照/10h黑暗，光照强度3000Lux，光照条件下温度为25℃，黑暗条件下温度为18℃；
4)萌发14d后，将生长健壮的幼苗转移至装有育苗基质育苗钵中，在日光温室中培养至6叶期；其中，白天温度为25℃，黑夜温度为18℃，空气相对湿度80％；
5)将培育的幼苗移栽至田间，结合田间调查选择株型美观和叶色丰富的优良单株；
6)在日光温室中，采用分株法将选择的优良单株进行连续2代无性扩繁，培育成优良的株系；
7)将优良的株系继续进行4代的无性扩繁，并在田间连续3年开展品比试验，以培育性状表现稳定、一致性的花叶青绿苔草。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种青绿苔草种子辐射诱变育种方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)采用60Co-γ对青绿苔草种子进行辐射处理；所述辐射的强度为1Gy/min，辐射的剂量为75～150Gy；
2)对所述步骤1)辐射处理的种子进行消毒处理后，进行浸种处理；
3)将所述步骤2)浸种处理的种子于光照培养室中进行发芽培养，得到幼苗；
4)将所述步骤3)得到的幼苗移栽至育苗基质中于日光温室中进行培养，得到4～6叶期的青绿苔草；
5)将所述步骤4)得到的4～6叶期的青绿苔草移栽至田间进行培养，筛选得到花叶青绿苔草单株；
6)将所述步骤5)得到的花叶青绿苔草单株进行无性扩繁，得到花叶青绿苔草株系；
7)将所述步骤6)得到的花叶青绿苔草株系进行无性扩繁，得到稳定的花叶青绿苔草；将所述得到的稳定的花叶青绿苔草在田间进行品比，得到花叶性状一致的青绿苔草。
2.根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，所述步骤2)中消毒处理使用的消毒液为5％的次氯酸钠溶液。
3.根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，所述步骤2)中消毒处理的时间为15～30min。
4.根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，所述步骤2)中浸种处理使用的试剂为水，所述浸种处理的时间为6～10h。
5.根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，所述步骤3)发芽培养的光照培养条件包括：所述发芽培养的光照强度为2500～3000Lux，光照周期为光照和黑暗交替培养，所述光照的时间为14h；所述黑暗培养的时间为10h。
6.根据权利要求5所述的育种方法，其特征在于，所述光照培养的温度为24～26℃；所述黑暗培养的温度为17～19℃。
7.根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，所述步骤4)日光温室培养的条件包括：培养的温度为15～28℃，培养的空气相对湿度为70～80％。
8.根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，所述步骤5)中花叶青绿苔草为白色和/或黄色条纹青绿苔草。
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