CN110652610A - 高内聚双重交联人工玻璃体及其制备方法 - Google Patents

高内聚双重交联人工玻璃体及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及高内聚双重交联人工玻璃体及其制备方法。该水凝胶由第一溶液和第二溶液制得，第一溶液含有的第一组分为醛基化透明质酸，第二溶液含有的第二组分为氨基化透明质酸。该制备方法包括将第一溶液和第二溶液共混。本发明的高内聚双重交联人工玻璃体可通过注射的方式在空玻璃体腔内原位成胶，对视网膜进行有效顶压；无毒副作用，生物相容性好且内聚性好，不会引起眼内炎症反应和眼压升高；无需二次取出，在眼内缓慢降解，空余的位置由房水进行替代补充；此外，还能通过粘附作用将局限性脱离的视网膜复位。

Description

高内聚双重交联人工玻璃体及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种高内聚双重交联人工玻璃体及其制备方法，属于医用材料技术领域。
背景技术
据申请人了解，玻璃体为眼部最大的组织，处在晶状体和视网膜之间，是由胶原和透明质酸钠构成的一种凝胶状结构。玻璃体和晶状体、房水、角膜等一同构成了眼部的屈光系统，对视网膜起支撑作用。在临床上，因玻璃体出血、眼球内异物、视网膜脱离、眼内炎、外伤导致晶体掉入玻璃体腔或视网膜上有寄生虫等原因需要进行玻璃体切除手术，为了防止玻璃体切除后视网膜脱落，需要打入气体或硅油。但气体吸收快无法提供足够的顶压时间，硅油易引起乳化、眼压升高、白内障等副作用需要二次手术取出。
针对临床上现有人工玻璃体替代物的缺点，研究者们尝试用新的材料和技术手段来制备更加理想的人工玻璃体。
聚乙烯吡咯烷酮(PVP)注射到眼内不会对视网膜造成损伤，但会引起玻璃体混浊，且在眼内存留时间过短，Dalton等人的实验证明其注射入兔眼模型后1个月仅存留50％，推测与炎性细胞介导的吞噬有关(Hong Y,Chirila T V,Vijayasekaran S,etal.Biodegradation in vitro and retention in the rabbit eye of crosslinkedpoly(1-vinyl-2-pyrrolidone)hydrogel as vitreous substitute[J].Journal ofBiomedical Materials Research,1998,39(4):650-659.)。
Tsujinaka等人以PEG为主体制备出一款温敏水凝胶，无细胞毒性，注射入兔眼模型，其在90天的观察时间内眼压一直维持稳定，未发生急性反应和变浑；但由于PEG不降解，其作为一种永久性替代物的长期安全性仍不确定(Annaka M,Mortensen K,Vigild M E,etal.Design of an Injectable in Situ Gelation Biomaterials for VitreousSubstitute[J].Biomacromolecules,2011,12(11):4011-4021.)。
专利号CN03126845.5、授权公告号CN1212104C的中国发明专利，公开了一种可调眼压的高分子薄膜囊袋式人工玻璃体，其包括囊袋、引流管和弹射手柄，囊袋与人眼玻璃体腔内的形状和体积相适应，囊袋上方连接引流管，引流管上设有引流阀，囊袋和引流管藏于弹射手柄内，弹射手柄的头部夹持囊袋；其囊袋由乙烯和醋酸乙烯共聚物组成，将囊袋推入玻璃体腔后，将水注入囊袋内，囊袋膨胀充满整个玻璃体腔，以此来替代玻璃体。然而，该技术方案需要在眼部切开入口以推注入囊袋，这就不如注射来得安全便捷。
专利号CN201610266469.9、授权公告号CN105833344B的中国发明专利，公开了一种可注射水凝胶在玻璃体切除手术中作为眼内填充物应用，以及作为眼内用药载体应用；该可注射水凝胶由两剂组成，第一剂是含氧化多糖的胶液，第二剂是含甲壳素衍生物和/或胶原蛋白的胶液，两剂分别装入双联注射器的两个注射管中，两剂胶液经双联注射器同时推注，在推注过程中发生混合、交联，即氧化多糖的双醛基与甲壳素衍生物和/或胶原蛋白的氨基发生交联反应，形成具有粘弹性的水凝胶。然而，该技术方案并没有关注水凝胶的内聚性，与本发明并不相同。
发明内容
本发明的主要目的是：克服现有技术存在的问题，提供一种高内聚双重交联人工玻璃体的成套原料，采用该成套原料可以制备高内聚双重交联人工玻璃体；同时，还提供相应的高内聚双重交联人工玻璃体制剂，以及成套原料、制剂的制备方法。
本发明解决其技术问题的技术方案如下：
一种高内聚双重交联人工玻璃体的成套原料，由第一组分和第二组分构成，其特征是，所述第一组分为醛基化透明质酸，所述第二组分为氨基化透明质酸；所述醛基化透明质酸的开环率为10～20％，所述氨基化透明质酸的接枝率为40～80％。
采用该成套原料可以制备出高内聚双重交联人工玻璃体，作为玻璃体替代物。
本发明成套原料进一步完善的技术方案如下：
优选地，所述第一组分由以下方法制得：
F1.将透明质酸溶于纯化水以形成透明质酸溶液，并将高碘酸钠溶于纯化水以形成高碘酸钠溶液；
F2.将高碘酸钠溶液加入透明质酸溶液中，避光反应；反应结束后，将反应液透析或超滤，并将所得产物冻干即得第一组分；
所述第二组分由以下方法制得：
G1.将透明质酸溶于纯化水以形成透明质酸溶液；将活化剂溶于纯化水以形成活化剂溶液，所述活化剂为EDC或DMTMM；将双氨基化合物溶于纯化水以形成双氨基化合物溶液，所述双氨基化合物为胱胺、乙二胺、己二胺、己二酰二胺、或己二酸二酰肼；
G2.将活化剂溶液加入透明质酸溶液中进行活化反应；活化反应结束后，将反应液加入双氨基化合物溶液中进行氨基化反应；氨基化反应结束后，将反应液透析或超滤，并将所得产物冻干即得第二组分。
更优选地，F1中，所述透明质酸溶液的浓度为5～100mg/mL，所述高碘酸钠与透明质酸重复单元的摩尔比为1:10～1:2；
F2中，避光反应时间为1～24小时；反应温度为常温，常温指26℃±5℃；
G1中，所述透明质酸溶液的浓度为5～50mg/mL，所述透明质酸溶液以盐酸调节pH至4.75±0.25；所述双氨基化合物与透明质酸重复单元的摩尔比为1:1～20:1，所述双氨基化合物溶液以盐酸调节pH至与透明质酸溶液相同；所述活化剂占整个体系质量的质量分数为0.1～1％，所述整个体系质量为透明质酸溶液、活化剂溶液、双氨基化合物溶液的总质量，所述活化剂溶液采用0℃-4℃预冷的纯化水配制；
G2中，活化反应时间为0.5～12小时；氨基化反应时间为4～24小时；氨基化反应结束时采用氢氧化钠溶液调节pH值至8.0以上来终止反应；活化反应温度、氨基化反应温度均为常温，常温指26℃±5℃；
F1、G1中，透明质酸重复单元的摩尔量＝透明质酸的质量÷透明质酸重复单元的分子量。
采用以上优选方案的成套原料，可以制备出更好的高内聚双重交联人工玻璃体。
一种高内聚双重交联人工玻璃体成套原料的制备方法，所述成套原料由第一组分和第二组分构成，其特征是，所述第一组分为醛基化透明质酸，所述第二组分为氨基化透明质酸；所述醛基化透明质酸的开环率为10～20％，所述氨基化透明质酸的接枝率为40～80％；
所述制备方法由第一组分的制备方法和第二组分的制备方法构成；
所述第一组分的制备方法包括以下步骤：
F1.将透明质酸溶于纯化水以形成透明质酸溶液，并将高碘酸钠溶于纯化水以形成高碘酸钠溶液；
F2.将高碘酸钠溶液加入透明质酸溶液中，避光反应；反应结束后，将反应液透析或超滤，并将所得产物冻干即得第一组分；
所述第二组分的制备方法包括以下步骤：
G1.将透明质酸溶于纯化水以形成透明质酸溶液；将活化剂溶于纯化水以形成活化剂溶液，所述活化剂为EDC或DMTMM；将双氨基化合物溶于纯化水以形成双氨基化合物溶液，所述双氨基化合物为胱胺、乙二胺、己二胺、己二酰二胺、或己二酸二酰肼；
G2.将活化剂溶液加入透明质酸溶液中进行活化反应；活化反应结束后，将反应液加入双氨基化合物溶液中进行氨基化反应；氨基化反应结束后，将反应液透析或超滤，并将所得产物冻干即得第二组分。
该制备方法能顺利制备出高内聚双重交联人工玻璃体成套原料。
一种高内聚双重交联人工玻璃体，其特征是，由前文所述的高内聚双重交联人工玻璃体成套原料经以下步骤配制获得：
H1.将第一组分溶于含磷盐酸的生理盐水中以形成第一溶液，将第二组分溶于含磷盐酸的生理盐水中以形成第二溶液；
H2.将第一溶液与第二溶液共混；在第一溶液与第二溶液的混合溶液中，所述氨基的摩尔量大于的醛基摩尔量；
H3.所述混合溶液随时间推移固化成胶，最终所得凝胶即为高内聚双重交联人工玻璃体。
该胶可在H2后即通过针头注射到切除玻璃体的玻璃体腔中填满，然后混合溶液即在席夫碱反应下固化成胶，并最终形成人工玻璃体，对视网膜进行有效顶压。由于氨基多于醛基，多余的氨基可与透明质酸分子链上本身的羧基通过正负电荷吸引形成离子键，离子键的形成赋予人工玻璃体以高内聚性，即分子网络在水中的膨胀有限，不易分散；氨基与醛基之间的动态交联赋予人工玻璃体以自愈性，即在眼球的正常运动过程中保证人工玻璃体的完整性。该人工玻璃体在水中的溶胀率仅有40％，远小于一般水凝胶几百甚至上千的溶胀率。
本发明人工玻璃体进一步完善的技术方案如下：
优选地，H1中，所述第一溶液中第一组分的浓度为5～20mg/mL；所述第二溶液中第二组分的浓度为5～20mg/mL；所述含磷盐酸的生理盐水中，磷酸根浓度范围为0.01-0.1M。
注：通过调节磷酸盐含量可控制成胶时间，磷酸根浓度越高，成胶时间越慢(10s-∞)。
更优选地，H1中，所述第一溶液中第一组分的浓度与第二溶液中第二组分的浓度相同；H2中，所述第一溶液与第二溶液的体积比为1:1；共混时采用两注射器以连接头连通后往复互推以混合均匀。
采用以上优选方案，可使该人工玻璃体更易制得。
一种高内聚双重交联人工玻璃体的制备方法，其特征是，采用前文所述的高内聚双重交联人工玻璃体成套原料，所述制备方法包括以下步骤：
H1.将第一组分溶于含磷盐酸的生理盐水中以形成第一溶液，将第二组分溶于含磷盐酸的生理盐水中以形成第二溶液；
H2.将第一溶液与第二溶液共混；在第一溶液与第二溶液的混合溶液中，所述氨基的摩尔量大于的醛基摩尔量；
H3.所述混合溶液随时间推移固化成胶，最终所得凝胶即为高内聚双重交联人工玻璃体。
该制备方法能顺利制备出高内聚双重交联人工玻璃体。
前文所述高内聚双重交联人工玻璃体的用途，其特征是，所述用途为用作眼玻璃体替代物或空玻璃体腔填充剂、或者用于制备眼玻璃体替代物或空玻璃体腔填充剂；或者，所述用途为用作针对局限性视网膜脱离的视网膜粘附复位剂。
本发明的高内聚双重交联人工玻璃体可通过注射的方式在空玻璃体腔内原位成胶，对视网膜进行有效顶压；无毒副作用，生物相容性好且内聚性好，不会引起眼内炎症反应和眼压升高；无需二次取出，在眼内缓慢降解，空余的位置由房水进行替代补充；创口极小，操作简便，利于提高玻璃体手术的成功率，降低患者痛苦。此外，由于具有良好的内聚性和粘附性，本发明的高内聚双重交联人工玻璃体可将局限性脱离的视网膜(如孔源性视网膜脱离)粘附复位。
附图说明
图1为本发明实施例3的溶胀率结果示意图。
图2为本发明实施例3的透光率结果示意图。
图3为本发明实施例6的测试结果示意图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细描述。但是本发明不限于所给出的例子。
实施例1、高内聚双重交联人工玻璃体成套原料
本实施例的高内聚双重交联人工玻璃体成套原料，由第一组分和第二组分构成，第一组分为醛基化透明质酸，第二组分为氨基化透明质酸；醛基化透明质酸的开环率为10～20％，氨基化透明质酸的接枝率为40～80％。注：在各组分的制备方法中，可通过控制投料比和反应时间，分别将醛基化透明质酸的开环率控制为10～20％，将氨基化透明质酸的接枝率控制为40～80％。
本实施例的第一组分由以下方法制得：
F1.将透明质酸溶于纯化水以形成5～100mg/mL的透明质酸溶液(本实施例采用：磁力搅拌溶解过夜)。将高碘酸钠溶于纯化水以形成高碘酸钠溶液(本实施例采用：磁力搅拌溶解，高碘酸钠溶液临用现配)，高碘酸钠与透明质酸重复单元的摩尔比为1:10～1:2。
F2.将高碘酸钠溶液加入透明质酸溶液中(本实施例采用：磁力搅拌混合)，避光反应1～24小时，反应温度为常温，常温指26℃±5℃；反应结束后，将反应液透析或超滤，并将所得产物冻干即得第一组分。
本实施例含有多个实例，各实例中第一组分的具体制备参数如下表所示：
注：关于透明质酸重复单元的摩尔量，以实例3为例，透明质酸重复单元的分子量为401g/mol，因此透明质酸重复单元的摩尔量为透明质酸的质量除以401g/mol，即0.00499mol；高碘酸钠的用量为0.27g，即0.00126mol；高碘酸钠与前者的摩尔比约为1:4。下文不再赘述。
本实施例的第二组分由以下方法制得：
G1.将透明质酸溶于纯化水以形成5～50mg/mL的透明质酸溶液(本实施例采用：磁力搅拌溶解过夜)，以盐酸调节pH至4.75±0.25(本实施例采用：5M盐酸)。将双氨基化合物溶于纯化水以形成双氨基化合物溶液，以盐酸调节pH至与透明质酸溶液相同(本实施例采用：5M盐酸)；双氨基化合物与透明质酸重复单元的摩尔比为1:1～20:1，双氨基化合物为胱胺、乙二胺、己二胺、己二酰二胺、或己二酸二酰肼。
将活化剂溶于0℃-4℃预冷纯化水以形成活化剂溶液(本实施例采用：磁力搅拌溶解，活化剂溶液临用现配)，活化剂占整个体系质量的质量分数为0.1～1％，该整个体系质量为透明质酸溶液、活化剂溶液、双氨基化合物溶液的总质量。活化剂为EDC或DMTMM。注：EDC为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，DMTMM为4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐。
G2.将活化剂溶液加入透明质酸溶液中(本实施例采用：将活化剂溶液迅速加入透明质酸溶液中，以磁力搅拌混合)，进行活化反应0.5～12小时，活化反应温度为常温，常温指26℃±5℃。
活化反应结束后，将反应液加入双氨基化合物溶液中(本实施例采用：将反应液缓慢加入双氨基化合物溶液中，以磁力搅拌混合)，进行氨基化反应4～24小时，氨基化反应温度为常温，常温指26℃±5℃。
氨基化反应结束时，采用氢氧化钠溶液调节pH值至8.0以上来终止反应(本实施例采用：5M氢氧化钠溶液)，然后将反应液透析或超滤，并将所得产物冻干即得第二组分。
各实例中第二组分的具体制备参数如以下各表所示：
Figure BDA0002254876040000081
Figure BDA0002254876040000091
另外，关于F2、G2中的透析或超滤，具体举例如下：
若采用透析，则选用截留分子量为3000的透析袋，透析外液为纯化水，外液体积为1L，每天换2次液，一共透析4天。
若采用超滤，用2％NaOH溶液洗膜30分钟，随后用纯化水洗膜至滤出液pH7.0左右。将反应液进行超滤，纯化水为洗滤液，控制进口端与出口端压力平均值小于0.2MPa，待滤出液体积达到反应液初始体积的20倍时，停止超滤，浓缩，收集。
实施例2、高内聚双重交联人工玻璃体
本实施例的高内聚双重交联人工玻璃体，由实施例1的高内聚双重交联人工玻璃体成套原料经以下步骤配制获得：
H1.将第一组分溶于含磷盐酸的生理盐水中以形成5～20mg/mL的第一溶液，将第二组分溶于含磷盐酸的生理盐水中以形成5～20mg/mL的第二溶液；第一溶液中第一组分的浓度与第二溶液中第二组分的浓度相同。含磷盐酸的生理盐水中，磷酸根浓度范围为0.01-0.1M(本实施例采用0.05M)。
注：在实际使用时，在H1步后先将各溶液过0.22μm滤头除菌，然后在无菌环境下分别灌装于5mL预灌封玻璃注射器中备用。
H2.将第一溶液与第二溶液按体积比1:1共混；共混时采用两注射器以连接头连通后往复互推以混合均匀；在第一溶液与第二溶液的混合溶液中，氨基的摩尔量大于的醛基摩尔量。
注：在实际使用时，在H2步后即将混合溶液通过针头注射到切除玻璃体的玻璃体腔中填满。
H3.混合溶液随时间推移固化成胶，最终所得凝胶即为高内聚双重交联人工玻璃体成品。
注：在实际使用时，在H3步结束后，该凝胶即起到填充玻璃体腔以有效顶压视网膜的作用。
本实施例包含若干实例，且各实例为实施例1各实例的延续。
Figure BDA0002254876040000101
本实施例的人工玻璃体中，同时存在可逆结合的化学交联键和正负电荷吸引形成的离子键，其中，化学键保证凝胶网络的主体结构，离子键赋予凝胶高内聚性。
实施例3、溶胀度测定实验
本实施例用以检测实施例2的实例3所得人工玻璃体的溶胀度。
将实施例2的实例3样品在原位交联后置于PBS溶液中进行溶胀度的测定，胶重0.10g，PBS为10mL。在样品浸入PBS中1、2、3、4、5、6、24h时取出，用滤纸吸去多余水分，称重，计算溶胀率。溶胀率＝(特定时间下样品重量-样品原始重量)/样品原始重×100％，结果如附图1所示。从图中可以看出，本品在6h即已溶胀完全，此后不再变化，且溶胀度只有40％，远小于普通凝胶几百甚至上千的溶胀度。
需要说明的是，本发明实施例2的其余各实例所得人工玻璃体也按照上述方法检测其溶胀度，检测实验数据与实例3基本一致。由这些实验数据可知，实施例2各实例所得人工玻璃体具有低溶胀度的特性，即高内聚性。
实施例4、透光率检测实验
本实施例用以检测实施例2的实例3所得人工玻璃体的透光率。
将实施例2的实例3样品在石英比色皿中原位交联，尽量消去气泡，然后室温下放置4h。于可见光-紫外分光光度计下进行380-780nm范围内的扫描，结果如附图2所示。从图中可以看出，本品在可见光波长满范围内的透光率均在85％以上，在440-780nm范围内透光率超过90％，满足眼内填充物高透光率的要求。
需要说明的是，本发明实施例2的其余各实例所得人工玻璃体也按照上述方法检测其透光率，检测实验数据与实例3基本一致。由这些实验数据可知，实施例2各实例所得人工玻璃体均能满足眼内填充物高透光率的要求。
实施例5、急性全身毒性试验
本实施例用以检测实施例2的实例3所得人工玻璃体的急性全身毒性。
试验方法：
将实施例2的实例3样品于无菌条件下进行混合，待交联后，按0.2g:1mL的比例浸提，浸提条件为37℃，72h，浸提介质为生理盐水注射液。
选取10只雄性成年小鼠(17-23g)，随机分为2组。通过小鼠单次腹腔注射样品浸提液和对照液(0.9％生理盐水)，注射剂量为50mL/kg体重。
注射完毕后，观察动物反应并于4h、24h、48h和72h观察和记录试验组和对照组动物的临床状态、毒性表现，注射前和注射后3天每天称量动物体重。
试验结果：
注射后，所有动物均未发现任何异常临床症状。
注射后，所有动物体重及体重变化均正常，结果如表1所示。
表1动物体重和给药
Figure BDA0002254876040000111
Figure BDA0002254876040000121
结论：
本品对小鼠无急性全身毒性。
需要说明的是，本发明实施例2的其余各实例所得人工玻璃体也按照上述方法检测其急性全身毒性，检测实验数据与实例3基本一致。由这些实验数据可知，实施例2各实例所得人工玻璃体均对小鼠无急性全身毒性。
实施例6、视网膜粘附测试实验
取猪的视网膜，将其用胶水(如502胶水)粘在载玻片上，备用。采用实施例2的实例6，在进行实施例2的H2步，将第一溶液、第二溶液混匀后，取300μL涂覆在一片前述载玻片的视网膜上，再取另一片前述载玻片、并以其粘有视网膜的侧面盖在涂覆区域上。涂覆区域为长20mm、宽25mm的矩型区域。室温下静置30分钟。
以上述方法制作一系列样本以备测试。
(1)将样本于万能试验机上测量拉伸强度。
测量结果如下：
仪器型号：TH-8206S伺服电脑卧式拉力试验机；
测试速度：10mm/min；
测试结果：82±8kPa(实验重复三次)。
该结果表明，实施例2实例6所得人工玻璃体对猪视网膜具有较强的粘附强度。
(2)将样本放置在37℃的0.9％NaCl溶液中，每隔5天取3个样品进行拉伸强度的测量(测量条件同上)。
结果如图3所示。该结果表明，实施例2实例6所得人工玻璃体浸泡在生理盐水中仍可在长达20天的时间里维持粘附效果。
由于实施例2实例6所得人工玻璃体具有以上特性，在临床上即可用于局限性视网膜脱离(如孔源性视网膜脱离)的复位。
需要说明的是，本发明实施例2的其余各实例所得人工玻璃体也按照上述方法进行检测，检测实验数据与实例6基本一致。由这些实验数据可知，实施例2各实例所得人工玻璃体在临床上均可用于局限性视网膜脱离(如孔源性视网膜脱离)的复位。
除上述实施例外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。

Claims (10)

1.一种高内聚双重交联人工玻璃体的成套原料，由第一组分和第二组分构成，其特征是，所述第一组分为醛基化透明质酸，所述第二组分为氨基化透明质酸；所述醛基化透明质酸的开环率为10～20％，所述氨基化透明质酸的接枝率为40～80％。
2.根据权利要求1所述的高内聚双重交联人工玻璃体成套原料，其特征是，所述第一组分由以下方法制得：
F1.将透明质酸溶于纯化水以形成透明质酸溶液，并将高碘酸钠溶于纯化水以形成高碘酸钠溶液；
F2.将高碘酸钠溶液加入透明质酸溶液中，避光反应；反应结束后，将反应液透析或超滤，并将所得产物冻干即得第一组分；
所述第二组分由以下方法制得：
G1.将透明质酸溶于纯化水以形成透明质酸溶液；将活化剂溶于纯化水以形成活化剂溶液，所述活化剂为EDC或DMTMM；将双氨基化合物溶于纯化水以形成双氨基化合物溶液，所述双氨基化合物为胱胺、乙二胺、己二胺、己二酰二胺、或己二酸二酰肼；
G2.将活化剂溶液加入透明质酸溶液中进行活化反应；活化反应结束后，将反应液加入双氨基化合物溶液中进行氨基化反应；氨基化反应结束后，将反应液透析或超滤，并将所得产物冻干即得第二组分。
3.根据权利要求2所述的高内聚双重交联人工玻璃体成套原料，其特征是，F1中，所述透明质酸溶液的浓度为5～100mg/mL，所述高碘酸钠与透明质酸重复单元的摩尔比为1:10～1:2；
F2中，避光反应时间为1～24小时；反应温度为常温，常温指26℃±5℃。
4.根据权利要求3所述的高内聚双重交联人工玻璃体成套原料，其特征是，G1中，所述透明质酸溶液的浓度为5～50mg/mL，所述透明质酸溶液以盐酸调节pH至4.75±0.25；所述双氨基化合物与透明质酸重复单元的摩尔比为1:1～20:1，所述双氨基化合物溶液以盐酸调节pH至与透明质酸溶液相同；所述活化剂占整个体系质量的质量分数为0.1～1％，所述整个体系质量为透明质酸溶液、活化剂溶液、双氨基化合物溶液的总质量，所述活化剂溶液采用0℃-4℃预冷的纯化水配制；
G2中，活化反应时间为0.5～12小时；氨基化反应时间为4～24小时；氨基化反应结束时采用氢氧化钠溶液调节pH值至8.0以上来终止反应；活化反应温度、氨基化反应温度均为常温，常温指26℃±5℃；
F1、G1中，透明质酸重复单元的摩尔量＝透明质酸的质量÷透明质酸重复单元的分子量。
5.一种高内聚双重交联人工玻璃体成套原料的制备方法，所述成套原料由第一组分和第二组分构成，其特征是，所述第一组分为醛基化透明质酸，所述第二组分为氨基化透明质酸；所述醛基化透明质酸的开环率为10～20％，所述氨基化透明质酸的接枝率为40～80％；
所述制备方法由第一组分的制备方法和第二组分的制备方法构成；
所述第一组分的制备方法包括以下步骤：
F1.将透明质酸溶于纯化水以形成透明质酸溶液，并将高碘酸钠溶于纯化水以形成高碘酸钠溶液；
F2.将高碘酸钠溶液加入透明质酸溶液中，避光反应；反应结束后，将反应液透析或超滤，并将所得产物冻干即得第一组分；
所述第二组分的制备方法包括以下步骤：
G1.将透明质酸溶于纯化水以形成透明质酸溶液；将活化剂溶于纯化水以形成活化剂溶液，所述活化剂为EDC或DMTMM；将双氨基化合物溶于纯化水以形成双氨基化合物溶液，所述双氨基化合物为胱胺、乙二胺、己二胺、己二酰二胺、或己二酸二酰肼；
G2.将活化剂溶液加入透明质酸溶液中进行活化反应；活化反应结束后，将反应液加入双氨基化合物溶液中进行氨基化反应；氨基化反应结束后，将反应液透析或超滤，并将所得产物冻干即得第二组分。
6.一种高内聚双重交联人工玻璃体，其特征是，由权利要求1至4任一项所述的高内聚双重交联人工玻璃体成套原料经以下步骤配制获得：
H1.将第一组分溶于含磷盐酸的生理盐水中以形成第一溶液，将第二组分溶于含磷盐酸的生理盐水中以形成第二溶液；
H2.将第一溶液与第二溶液共混；在第一溶液与第二溶液的混合溶液中，所述氨基的摩尔量大于的醛基摩尔量；
H3.所述混合溶液随时间推移固化成胶，最终所得凝胶即为高内聚双重交联人工玻璃体。
7.根据权利要求6所述的高内聚双重交联人工玻璃体，其特征是，H1中，所述第一溶液中第一组分的浓度为5～20mg/mL；所述第二溶液中第二组分的浓度为5～20mg/mL；所述含磷盐酸的生理盐水中，磷酸根浓度范围为0.01-0.1M。
8.根据权利要求7所述的高内聚双重交联人工玻璃体，其特征是，H1中，所述第一溶液中第一组分的浓度与第二溶液中第二组分的浓度相同；H2中，所述第一溶液与第二溶液的体积比为1:1；共混时采用两注射器以连接头连通后往复互推以混合均匀。
9.一种高内聚双重交联人工玻璃体的制备方法，其特征是，采用权利要求1至4任一项所述的高内聚双重交联人工玻璃体成套原料，所述制备方法包括以下步骤：
H1.将第一组分溶于含磷盐酸的生理盐水中以形成第一溶液，将第二组分溶于含磷盐酸的生理盐水中以形成第二溶液；
H2.将第一溶液与第二溶液共混；在第一溶液与第二溶液的混合溶液中，所述氨基的摩尔量大于的醛基摩尔量；
H3.所述混合溶液随时间推移固化成胶，最终所得凝胶即为高内聚双重交联人工玻璃体。
10.权利要求6至8任一项所述高内聚双重交联人工玻璃体的用途，其特征是，所述用途为用作眼玻璃体替代物或空玻璃体腔填充剂、或者用于制备眼玻璃体替代物或空玻璃体腔填充剂；或者，所述用途为用作针对局限性视网膜脱离的视网膜粘附复位剂。
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