CN110627845A

CN110627845A - 一种络塞维的合成方法

Info

Publication number: CN110627845A
Application number: CN201910941049.XA
Authority: CN
Inventors: 李文举; 高健; 唐鹏飞; 庄永忠; 李秀珍
Original assignee: Ji'nan Biological Medicine Technology Co Ltd
Current assignee: Ji'nan Biological Medicine Technology Co Ltd
Priority date: 2019-09-30
Filing date: 2019-09-30
Publication date: 2019-12-31
Also published as: WO2021062882A1

Abstract

本发明提供了一种络塞维的合成方法：在保护气氛中，除水剂存在下，三氟甲磺酸三甲基硅酯催化2,3,4‑三‑O‑乙酰基‑L‑呋喃阿拉伯糖三氯乙酰亚胺酯和乙基2,3,4‑三‑O‑乙酰基‑beta‑D‑硫代吡喃葡萄糖苷在有机溶剂中反应，然后将beta‑(E)‑肉桂醇、NIS和TfOH依次加入继续反应至完全，加入反应猝灭剂，分离获得中间体粗品，然后将中间体粗品与甲醇钠在甲醇中反应，分离纯化获得络塞维。本发明以商品化的L‑阿拉伯糖供体、D‑葡萄糖受体和beta‑(E)‑肉桂醇为原料，经三步反应得到高纯度的络塞维产品，中间体不需要纯化，终产品经析晶获得，总收率70%以上。本发明的方法体系反应干净，产物可以直接从体系中析晶分离，产物收率高、纯度高，有利于洛塞维的大规模产业化制备。

Description

一种络塞维的合成方法

技术领域

本发明涉及糖药物合成领域，具体涉及一种化学方法制备玫瑰红景天活性成分洛塞维的方法。

背景技术

络塞维（Rosavin），β-(E)-肉桂醇基-O-[6’-O-α-L-阿拉伯吡喃糖基]-D-葡萄吡喃糖苷是传统草药玫瑰红景天的主要活性成分，具有抗缺氧、抗疲劳、延缓衰老和治疗抑郁症等功效。目前常用的制备方法为从天然植物中提取，但是植物提取的方法很难得到高纯度的络塞维产品，而且收率低、成本高。

络塞维的化学结构

目前很少有关络塞维的化学合成文献报道，发明专利CN101456885A给出了一种多步合成络塞维的方法，但是路线长，总收率低，更重要的是需要多次对中间体和终产物进行硅胶柱纯化，很难进行大规模产业化生产。

发明内容

针对现有技术中纯化学合成法制备络塞维路线长、收率低的问题，本发明提供一种络塞维的合成方法，原料易得、合成方法简单、收率高。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种络塞维的合成方法，包括以下步骤：

（1）在保护气氛中，除水剂存在下，三氟甲磺酸三甲基硅酯催化2,3,4-三-O-乙酰基-L-呋喃阿拉伯糖三氯乙酰亚胺酯和乙基2, 3, 4-三-O-乙酰基-beta-D-硫代吡喃葡萄糖苷在有机溶剂中反应；

（2）在保护气氛中，将beta-(E)-肉桂醇、NIS（N-碘代丁二酰亚胺）和TfOH（三氟甲磺酸）依次加入步骤（1）的体系中，继续反应，然后加入猝灭剂，分离获得中间体粗品；

（3）中间体的粗品和甲醇钠在甲醇中反应，分离纯化获得络塞维。

步骤（1）中，所述除水剂为4Å分子筛。

步骤（1）中，所述有机溶剂为二氯甲烷、乙腈或二氯甲烷和乙腈的混合。

步骤（1）和（2）中，所述反应温度为-25~-15℃。

步骤（2）中，所述分离步骤为：将反应体系升至室温，过滤后将滤液依次用饱和亚硫酸钠溶液和饱和食盐水洗涤，蒸除有机溶剂即得。

步骤（2）中，所述猝灭剂选自二乙胺、三乙胺或吡啶中的任意一种。

步骤（3）中，所述分离纯化方法为：反应体系中加入酸性阳离子交换树脂，调节pH值至中性，过滤，滤液减压浓缩，搅拌下加入1-1.5体积倍的甲基叔丁基醚（MTBE），析晶后过滤，滤饼用体积比为2:1的甲基叔丁基醚和甲醇溶液淋洗或重结晶，干燥后获得终产品。

合成路线如下：

。

本发明具有以下优点：

本发明以商品化的L-阿拉伯糖供体、D-葡萄糖受体和beta-(E)-肉桂醇为原料，经三步反应得到高纯度的络塞维产品，中间体不需要纯化，终产品经析晶获得，总收率70%以上。本发明的方法体系反应干净，产物可以直接从体系中析晶分离，产物收率高、纯度高，有利于洛塞维的大规模产业化制备。

附图说明

图1是络塞维标样的HPLC图谱；

图2是络塞维样品的HPLC图谱。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制。

实施例1 络塞维的合成

（1）

搅拌下往10L二氯甲烷中加入1000克L-阿拉伯糖供体2, 3, 4-三-O-乙酰基-L-呋喃阿拉伯糖三氯乙酰亚胺酯、833克D-葡萄糖受体乙基2,3,4-三-O-乙酰基-beta-D-硫代吡喃葡萄糖苷和活化过的500克4Å分子筛，体系在氮气保护和室温条件下搅拌30分钟后降温至-20℃，在氮气保护、低温、搅拌下往体系中滴加5.28克TMSOTf，加料完毕体系在-20℃条件下搅拌30分钟至原料基本无残留（HPLC含量小于1%）；

（2）

往步骤（1）的体系中继续加入319克beta-(E)-肉桂醇和588克NIS。体系在-20℃下搅拌30分钟后滴加100毫升含有7.13克TfOH的二氯甲烷溶液。体系在-20℃搅拌反应1小时，HPLC跟踪反应至中间体产物1消失，往体系中加入12.0克三乙胺结束反应；将体系升温至室温，过滤后将体系用饱和亚硫酸钠溶液洗涤2次，每次10L，再用10L饱和食盐水洗涤，将有机相减压浓缩，得到1800克粗品中间体产物化合物2，不经纯化直接投入下一步；

（3）

将化合物2粗品溶于15L干燥甲醇中，室温下搅拌溶清后加入12克甲醇钠至体系pH值达到9，室温下搅拌2小时，经HPLC检测化合物2反应完全；搅拌下，向体系中加入酸性树脂IR-120，调节体系pH值至7，然后过滤，滤液减压浓缩至5L，搅拌下缓慢加入8L甲基叔丁基醚（MTBE），有白色固体析出，在室温下析晶2小时，然后过滤，滤饼再用10L体积比2:1的甲基叔丁基醚和甲醇溶液重结晶，过滤后的固体在50 ℃下热风烘干，得络塞维723克，三步总收率71.0%。其核磁氢谱 (CD₃OD , 400 MHz): δ:7.42 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 7.30 (t, 2H,J = 7.6 Hz), 7.21 (t, 1H, J = 7.1 Hz), 6.69 (d, 1H, J = 15.9 Hz), 6.36 (td,1H, J = 6.0, 15.9 Hz), 4.51 (dd, 1H, J = 5.6, 13.1 Hz), 4.37 (d, 1H, J = 7.8Hz), 4.33 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 4.35–4.29 (m, 1H), 4.11 (d, 1H, J = 10.9 Hz),3.86 (dd, 1H, J = 3.0, 12.4 Hz), 3.78–3.76 (m, 1H), 3.74 (dd, 1H, J = 5.8,11.4 Hz), 3.61 (t, 1H, J = 7.1 Hz), 3.54–3.50 (m, 2H), 3.46–3.44 (m, 1H),3.37–3.33 (m, 2H), 3.24 (t, 1H, J = 7.6 Hz)；

核磁碳谱 (CD₃OD, 100 MHz): δ:138.2, 133.7, 129.6, 128.7, 127.5, 126.7,105.2, 103.4, 78.0, 76.9, 75.1, 74.2, 72.4, 71.7, 70.9, 69.51, 69.49, 66.7；

质谱 (FAB)-MS m/z: 429.1755；计算值C₂₀H₂₉O₁₀: 429.1761 (M+1)⁺；

与络塞维文献数据一致。

采用高效液相色谱对产品的纯度进行测定，色谱条件如下：

色谱柱：Inertsil ODS-3，4.6×250mm，5μm

柱温：40 ℃

流动相：去离子水:乙腈=30/70

流速：1.0 mL/min

检测器：ELSD

图1中为络塞维标准品（Sigma-Aldrich）的典型HPLC谱图，出峰时间为6.711min，面积积分纯度为98.120%，图2中为制备获得的样品的HPLC谱图，出蜂时间为6.714min，面积积分纯度为99.073%。

实施例2 络塞维的合成

（1）搅拌下往10L乙腈中加入1000克L-阿拉伯糖供体2, 3, 4-三-O-乙酰基-L-呋喃阿拉伯糖三氯乙酰亚胺酯、833克D-葡萄糖受体乙基2,3,4-三-O-乙酰基-beta-D-硫代吡喃葡萄糖苷和活化过的500克4Å分子筛，体系在氮气保护和室温条件下搅拌30分钟后降温至-18℃，在氮气保护、-18℃、搅拌下往体系中滴加5.28克TMSOTf，加料完毕体系在-18℃条件下搅拌30分钟至原料基本无残留；

（2）往步骤（1）的体系中继续加入319克beta-(E)-肉桂醇和588克NIS。体系在-18℃下搅拌30分钟后滴加100毫升含有7.13克TfOH的二氯甲烷溶液。体系在-18℃搅拌反应1小时，HPLC跟踪反应至中间体产物1消失，往体系中加入12.7克吡啶结束反应；将体系升温至室温，过滤后将体系用饱和亚硫酸钠溶液洗涤2次，每次10L，再用10L饱和食盐水洗涤，将有机相减压浓缩，得到1800克粗品中间体产物化合物2，不经纯化直接投入下一步；

（3）将化合物2粗品溶于15L干燥甲醇中，室温下搅拌溶清后加入12克甲醇钠至体系pH值达到9，室温下搅拌2小时，经HPLC检测化合物2反应完全；搅拌下，向体系中加入酸性树脂IR-120，调节体系pH值至7，然后过滤，滤液减压浓缩至5L，搅拌下缓慢加入8L甲基叔丁基醚（MTBE），有白色固体析出，在室温下析晶2小时，然后过滤，滤饼再用体积比2:1的甲基叔丁基醚和甲醇溶液淋洗3次，然后在60 ℃下热风烘干，得络塞维735克，三步总收率72.2%，HPLC检测含量为98.75%。

实施例3 络塞维的合成

（1）搅拌下往10L二氯甲烷与乙腈等体积混合的溶剂中加入1000克L-阿拉伯糖供体2,3, 4-三-O-乙酰基-L-呋喃阿拉伯糖三氯乙酰亚胺酯、833克D-葡萄糖受体乙基2,3,4-三-O-乙酰基-beta-D-硫代吡喃葡萄糖苷和活化过的500克4Å分子筛，体系在氮气保护和室温条件下搅拌30分钟后降温至-25℃，在氮气保护、-25℃、搅拌下往体系中滴加5.28克TMSOTf，加料完毕体系在-25℃条件下搅拌35分钟至原料基本无残留；

（2）往步骤（1）的体系中继续加入319克beta-(E)-肉桂醇和588克NIS。体系在-25℃下搅拌30分钟后滴加100毫升含有7.13克TfOH的二氯甲烷溶液。体系在-25℃搅拌反应1小时，HPLC跟踪反应至中间体产物1消失，往体系中加入12.7克吡啶结束反应；将体系升温至室温，过滤后将体系用饱和亚硫酸钠溶液洗涤2次，每次10L，再用10L饱和食盐水洗涤，将有机相减压浓缩，得到1800克粗品中间体产物化合物2，不经纯化直接投入下一步；

（3）将化合物2粗品溶于15L干燥甲醇中，室温下搅拌溶清后加入12克甲醇钠至体系pH值达到9，室温下搅拌2小时，经HPLC检测化合物2反应完全；搅拌下，向体系中加入酸性树脂IR-120，调节体系pH值至7，然后过滤，滤液减压浓缩至5L，搅拌下缓慢加入8L甲基叔丁基醚（MTBE），有白色固体析出，在室温下析晶2小时，然后过滤，滤饼再用体积比2:1的甲基叔丁基醚和甲醇溶液淋洗5次，然后在80 ℃下热风烘干，得络塞维730克，三步总收率71.6%，HPLC检测含量为98.89%。

Claims

1.一种络塞维的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

（2）在保护气氛中，将beta-(E)-肉桂醇、N-碘代丁二酰亚胺和三氟甲磺酸依次加入步骤（1）的体系中，继续反应，然后加入猝灭剂，分离获得中间体粗品；

（3）中间体粗品和甲醇钠在甲醇中反应，分离纯化获得络塞维。

2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤（1）中，所述除水剂为4Å分子筛。

3.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤（1）中，所述有机溶剂为二氯甲烷、乙腈或二氯甲烷和乙腈的混合。

4.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤（1）和（2）中，所述反应温度为-25~-15℃。

5.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤（2）中，所述猝灭剂选自二乙胺、三乙胺或吡啶中的任意一种。

6.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤（2）中，所述分离步骤为：将反应体系升至室温，过滤后将滤液依次用饱和亚硫酸钠溶液和饱和食盐水洗涤，蒸除有机溶剂即得。

7.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤（3）中，所述分离纯化方法为：反应体系中加入酸性阳离子交换树脂，调节pH值至中性，过滤，滤液减压浓缩，搅拌下加入1-1.5体积倍的甲基叔丁基醚，析晶后过滤，滤饼用体积比为2:1的甲基叔丁基醚和甲醇溶液淋洗或重结晶，干燥后获得终产品。