CN110563732B - 一种7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶及其应用 - Google Patents

一种7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种7‑(三甲氧基苯基)‑嘧啶并吡唑，该7‑(三甲氧基苯基)‑嘧啶并吡唑化学结构如下式（I）所示，式（I）中，R1是苯基，4‑甲基苯基，4‑甲氧基苯基，4‑三氟甲氧基苯基，4‑氟苯基，5‑(1‑甲基吲哚基)，4‑吗啡琳基苯基，5‑(1‑甲基吲唑基)。本化合物为抑制肿瘤细胞增殖提供一种新的抑制剂。

Description

一种7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶及其应用
技术领域
本发明涉及有机化合物，具体涉及吡咯并嘧啶类化合物，该化合物能够抑制肿瘤增殖 ，可用于治疗肿瘤。
背景技术
恶性肿瘤是危害人类健康最严重的一类疾病，它的发病率仅次于心脑血管疾病，是人类健康的第二大“杀手”，而其死亡率甚至超过心脑血管疾病，居于所有疾病的首位。因此，寻找和开发治疗肿瘤的新药是当前面临的重大课题。由于微管在肿瘤细胞的增殖 和分裂中起到非常关键的作用，使得微管蛋白成为抗肿瘤药物比较理想的靶标。
微管在各种细胞过程中起重要作用，包括纺锤体形成，细胞形状维持和细胞内运输。微管在细胞有丝分裂中的功能使它们成为抗癌药物有吸引力的靶标，微管靶向剂破坏微管形成从而抑制癌细胞进入G2/M期，最终导致癌细胞凋亡。因此，微管蛋白抑制剂已广泛用于治疗癌症。
目前所有已经上市的微管蛋白抑制剂均与微管蛋白中的紫杉醇或长春碱结合位点结合, 这些化合物的优点是抗肿瘤活性高，对多种癌症有效。而存在的主要问题是：①毒副作用大；②易产生耐药性(多药耐药/MDR)；秋水仙碱结合位点的微管蛋白抑制剂可以克服上述缺点并且具有优于紫杉烷和长春花生物碱结合位点的治疗优势，例如，它们由于有较好的水溶性并且可以口服给药；此外，它们不易发生多药耐药。迄今为止，已发现许多基于秋水仙碱结合位点的微管蛋白抑制剂作为有效的抗癌剂。其中一些已经达到临床试验，这说明基于秋水仙碱结合位点的抗肿瘤药物类似物有很大的发展前景。
基于秋水仙碱为靶点的微管蛋白抑制剂中，考不他汀(Combretastatin)A-4是非洲树南非矮生柳树分离的考不他汀家族中最活跃的成员；CA-4通过结合至秋水仙碱位点展示出很强的抗微管蛋白活性并且已经经历II期和III期临床研究；利用羰基替换了CA-4的烯桥，产生 phenstatin，其具有与CA-4类似的效力和作用机制；SMART和ABI是CA-4的类似物，显示出对微管蛋白聚合很强的抑制活性；Compd.a和Compd.b是通过将SMART和ABI中的羰基和五元环并环得到的微管蛋白抑制剂，其对肿瘤细胞具有纳摩尔级别的IC50活性(上述化合物CA-4、phenstatin、ABI、SMART、Compd.a和Compd.B的结构式如附图1所示)。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶，该化合物能够抑制肿瘤细胞增殖 ，为抑制肿瘤细胞增殖 提供一种新的抑制剂。
本发明解决上述技术问题的方案如下：
一种7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶，该化合物的化学结构如下式(a)所示，
Figure BDA0002190573260000021
(a)式中，R1是3-吲哚基、4-甲基苯基、苯基、4-甲氧基苯基、4-三氟甲氧基苯基、4-氟苯基、5-(1-甲基吲唑基)、6-吲哚基、3-甲基苯基、3,4-二甲基苯基、5-(1-甲基吲哚基)、3-(1-甲基吲哚基)、6-(1-甲基吲哚基)、4-N,N二甲基苯基、4-(1-甲基吡唑基)、4-乙烯基苯基、 3-(1-羟甲基吲哚基)、3-氟-4-甲氧基苯基、3-氨基-4-甲氧基苯基、3-(1-Boc吲哚基)或4-羟甲基苯基。
本发明所述的一种7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶优选下述化合物之一：
当R1是3-吲哚基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000022
当R1是苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000023
当R1是4-甲基苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000024
当R1是4-甲氧基苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000031
当R1是4-三氟甲氧基苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000032
当R1是4-氟苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000033
当R1是5-(1-甲基吲哚基)时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000034
当R1是5-(1-甲基吲唑基)时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000035
当R1是3-甲基苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000036
当R1是3,4-二甲基苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000041
当R1是6-吲哚基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000042
当R1是3-(1-甲基吲哚基)时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000043
当R1是6-(1-甲基吲哚基)时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000044
当R1是4-羟甲基苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000045
当R1是3-(1-羟甲基吲哚基)时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000046
当R1是3-氟-4-甲氧基苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000051
当R1是3-氨基-4-甲氧基苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000052
当R1是3-(1-Boc吲哚基)时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000053
当R1是4-乙烯基苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为
Figure BDA0002190573260000054
当R1是4-N,N二甲基苯基时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000055
当R1是4-(1-甲基吡唑基)时，所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的化学结构为：
Figure BDA0002190573260000056
上述一种7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶的制备方法包括以下步骤：首先将3,4,5- 三甲氧基苯乙酮和N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛反应生成化合物II；再将化合物II和3-溴-1H-吡唑-5-胺在醋酸溶剂中反应生成化合物(III)；然后将化合物(III)与芳香硼酸进行Suzuki 反应生成式(a)所示的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶。
上述方法的反应式如下所示：
Figure BDA0002190573260000061
本发明所述7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶能够抑制肿瘤增殖 ，可用于制备肿瘤增殖 抑制剂，该抑制剂的抗肿瘤效果显著。所述的肿瘤增殖 抑制剂由所述的7-(三甲氧基苯基)- 嘧啶并咪唑和医学上可接受的辅料组成。
以下结合附图和具体实施方式对本发明作进一步说明。
附图说明
图1：列举了几类秋水仙碱结合位点的微管蛋白抑制剂的结构。
图2：化合物1和2抑制微管蛋白体外聚集。
图3：化合物1和2的细胞流式图。
具体实施方式
实施例1(合成化合物1)
步骤1化合物II的合成
Figure BDA0002190573260000071
将1.0g的3,4,5-三甲氧基苯乙酮(化合物I)溶解于15mL乙醇中，再将5.0g的N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛加入上述溶液，加热回流，薄层色谱监测。反应结束后，将反应液旋干，用乙酸乙酯-水萃取，无水硫酸钠干燥乙酸乙酯层，浓缩溶液，二氯甲烷-甲醇100：3柱层析得到固体1.0g。收率79.2％。
将所得到的化合物II采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.80(d,J＝12.3Hz,1H),7.16(s,2H),5.63(d,J＝12.3Hz,1H),3.92(s,6H),3.89 (s,3H),3.05(ss,6H).ESI-MS m/z:265.1[M+H]+266.1.
步骤2化合物III的合成
Figure BDA0002190573260000072
将1.0g的化合物II溶解于15mL醋酸中，再将0.61g的3-溴-1H-吡唑-5-胺加入上述溶液，加热回流，薄层色谱监测。反应结束后，用乙酸乙酯-水萃取，无水硫酸钠干燥乙酸乙酯层，浓缩溶液，二氯甲烷-甲醇100：3柱层析得到1.25g化合物III。收率91.1％。
将所得到的化合物III采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.50(d,J＝4.4Hz,1H),7.30(s,2H),6.90(d,J＝4.4Hz,1H),6.81(s,1H),3.95(s,3H), 3.94(s,6H).ESI-MS m/z:363.0[M+H]+364.0.
化合物1的合成
Figure BDA0002190573260000081
将115mg的化合物III溶解于5mL DMF与0.5mL水的混合溶剂中，再将51.5mg的对甲基苯硼酸，18.2mg的四(三苯基膦)钯和65.5mg的碳酸钠加入上述溶液，加热至95℃反应10h，薄层色谱监测。反应结束后，用乙酸乙酯-水萃取，无水硫酸钠干燥乙酸乙酯层，浓缩溶液，二氯甲烷-甲醇100：3柱层析得到60mg的化合物1，收率50.6％。
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.48(d,J＝4.4Hz,1H),7.92(d,J＝8.1Hz,2H),7.54(s,2H),7.28(d,J＝7.9Hz, 2H),7.06(s,1H),6.91(d,J＝4.4Hz,1H),4.00(s,3H),3.98(s,6H),2.41(s,3H).HRMS:calcd for C22H21N3O3 [M+H]+376.1661,found 376.1676.
实施例2(合成化合物2)
化合物2的合成方法采用3,4,5-三甲氧基苯乙酮和5-(1-甲基吲哚)苯硼酸作为原料，其方法和实施例1相同。
Figure BDA0002190573260000082
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物2，收率为75.3％。
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.43(s,1H),8.31(s,1H),7.94(d,J＝8.5Hz,1H),7.59(s,2H),7.36(d,J＝ 11.5Hz,1H),7.11(s,1H),7.06(s,1H),6.85(s,1H),6.56(s,1H),4.01(s,3H),3.99(s,3H),3.77(s,3H).HRMS: calcd for C24H22N4O3[M+H]+415.1770,found 415.1783.
实施例3(合成化合物3)
化合物3的合成方法采用3,4,5-三甲氧基苯乙酮和对甲氧基苯硼酸作为原料，其方法和实施例1相同。
Figure BDA0002190573260000091
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物3，收率为74.4％。
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(d,J＝3.8Hz,1H),8.00(d,J＝7.9Hz,2H),7.68(s,2H),7.33(s,1H), 7.24(s,1H),7.06(d,J＝8.4Hz,2H),3.92(s,7H),3.82(d,J＝4.7Hz,7H).HRMS:calcd for C22H21N3O4 [M+H]+392.1610,found 392.1622.
实施例4(合成化合物4)
化合物4的合成方法采用3,4,5-三甲氧基苯乙酮和4-三氟甲氧基苯硼酸作为原料，其方法和实施例1相同。
Figure BDA0002190573260000092
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物4，收率为71.4％。
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s,1H),8.15(d,J＝6.4Hz,2H),7.75(t,J＝8.0Hz,2H),7.51(s,2H),7.15(s,1H), 6.99(s,1H),4.01(ss,9H).ESI-MS m/z:429.1[M+H]+430.1.
实施例5(合成化合物5)
化合物5的合成方法采用3,4,5-三甲氧基苯乙酮和对氟苯硼酸作为原料，其方法和实施例1相同。
Figure BDA0002190573260000093
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物5，收率为72.0％。
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.49(d,J＝4.1Hz,1H),7.99(t,J＝6.0Hz,2H),7.50(s,2H),7.15(t,J＝8.4Hz, 2H),7.03(s,1H),6.93(d,J＝3.9Hz,1H),3.98(ss,9H).HRMS:calcd for C21H18FN3O3[M+H]+380.1410,found 380.1430.
实施例6(合成化合物6)
化合物6的合成方法采用3,4,5-三甲氧基苯乙酮和苯硼酸作为原料，其方法和实施例1 相同。
Figure BDA0002190573260000101
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物6，收率为60.0％。
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.49(d,J＝4.4Hz,1H),8.03(d,J＝8.3Hz,2H),7.53(s,2H),7.47(t,J＝7.4Hz, 2H),7.41(d,J＝7.2Hz,1H),7.09(s,1H),6.92(d,J＝4.4Hz,1H),3.99(s,3H),3.98(s,6H).HRMS:calcd for C21H19N3O3[M+H]+362.1505,found 362.1529.
实施例7(合成化合物7)
化合物7的合成方法采用3,4,5-三甲氧基苯乙酮和1-甲基吲唑5-硼酸作为原料，其方法和实施例1相同。
Figure BDA0002190573260000102
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物8，收率为79.1％。
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(d,J＝4.4Hz,1H),8.46(s,1H),8.13–8.16(m,2H),7.77–7.70(m,3H), 7.37–7.34(m,2H),4.08(s,3H),3.94(s,6H),3.82(s,3H).HRMS:calcdfor C23H21N5O3[M+H]+416.1723, found 416.1720.
实施例8(合成化合物8)
化合物8的合成方法采用3,4,5-三甲氧基苯乙酮和6-吲哚硼酸作为原料，其方法和实施例1相同。
Figure BDA0002190573260000111
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物8，收率为77.5％。
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.49(d,J＝4.4Hz,1H),8.40(s,1H),8.09(s,1H),7.84(d,J＝8.2Hz,1H),7.73 (d,J＝8.2Hz,1H),7.56(s,2H),7.13(s,1H),6.91(d,J＝4.4Hz,1H),6.61(s,1H),4.00(s,9H).HRMS:calcd for C23H20N4O3[M+H]+401.1614,found 401.1617.
实施例9(合成化合物9)
化合物9的合成方法采用3,4,5-三甲氧基苯乙酮和3-(1-苯磺酰氯)吲哚硼酸作为原料，其方法和实施例 1相同。收率为72.4％。
Figure BDA0002190573260000112
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.83(s,1H),8.46-8.48(m,2H),7.74(s,1H),7.59(s,2H),7.41(d, J＝7.5Hz,1H),7.28(m,1H),7.02(s,1H),6.89(d,J＝3.9Hz,1H),4.01(ss,9H).HRMS:calcd for C23H20N4O3[M+H]+401.1614,found 401.1620.
实施例10(合成化合物10)
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物10，收率为79.0％。
Figure BDA0002190573260000113
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.47(s,1H),7.89-7.75(m,2H),7.54(s,2H),7.35(s,1H),7.22(d,1H),7.07(s, 1H),6.91(s,1H),3.98(s,9H),2.43(s,3H).HRMS:calcd forC22H21N3O3[M+H]+376.1611,found 376.1673.
实施例11(合成化合物11)
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物11，收率为59.1％。
Figure BDA0002190573260000121
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.48(d,J＝4.3Hz,1H),7.83(s,1H),7.76(d,J＝7.8Hz,1H),7.57(s,2H),7.24 (d,J＝7.8Hz,1H),7.05(s,1H),6.92(d,J＝4.3Hz,1H),4.00(ss,9H),2.36(s,3H),2.33(s,3H).HRMS:calcd for C23H23N3O3[M+H]+390.1818,found390.1829.
实施例12(合成化合物12)
化合物12的合成方法采用合成方法(ii)，将原料化合物10溶于干燥的THF中，加入NaH，2h后，加入CH3I反应4h。收率为78.5％。
Figure BDA0002190573260000122
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.51-8.41(m,2H),7.66(s,1H),7.59(s,2H),7.40(d,J＝8.2Hz,1H),7.33(t,J＝7.2 Hz,1H),7.24(t,J＝7.1Hz,1H),7.00(s,1H),6.88(d,J＝4.4Hz,1H),4.02(ss,9H),3.90(s,3H).HRMS:calcd for C24H22N4O3[M+H]+415.1770,found415.1777.
实施例13(合成化合物13)
化合物13的合成方法采用合成方法(ii)，将原料化合物10溶于干燥的THF中，加入NaH，2h后，加入CH3I反应4h。收率为80.9％。
Figure BDA0002190573260000123
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.50(d,J＝4.3Hz,1H),8.04(s,1H),7.82(d,J＝8.2Hz,1H),7.71(d,J＝8.2Hz,1H), 7.62(s,2H),7.15(s,1H),7.13(d,J＝3.0Hz,1H),6.93(d,J＝3.9Hz,1H),6.53(d,J＝2.8Hz,1H),4.02(ss,9H),3.88 (s,3H).HRMS:calcd for C24H22N4O3[M+H]+415.1770,found 415.1779.
实施例14(合成化合物14)
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物14，收率为83.5％。
Figure BDA0002190573260000131
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.43(d,J＝4.3Hz,1H),7.91(d,J＝8.9Hz,2H),7.56(s,2H),6.96(s,1H),6.85 (d,J＝4.4Hz,1H),6.79(d,J＝8.9Hz,2H),3.99(ss,9H),3.02(s,6H).HRMS:calcd for C23H24N4O3[M+H]+ 405.1927,found 405.1941.
实施例15(合成化合物15)
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物15，收率为68.6％。
Figure BDA0002190573260000132
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.47(s,1H),7.96(s,1H),7.85(s,1H),7.47(s,2H),6.88(s,1H),6.82(s,1H),4.06 -3.92(m,12H).HRMS:calcd for C19H19N5O3[M+H]+366.1566,found 366.1569.
实施例16(合成化合物16)
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物16，收率为63.8％。
Figure BDA0002190573260000133
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.48(d,J＝4.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.2Hz,2H),7.57–7.47(m,4H),7.07(s,1H), 6.91(d,J＝4.4Hz,1H),6.78(dd,J＝18.6,7.7Hz,1H),5.82(d,J＝17.6Hz,1H),5.30(d,J＝10.6Hz,1H),3.99 (ss,9H).HRMS:calcd for C23H21N3O3[M+H]+388.1661,found 388.1676.
实施例17(合成化合物17)
化合物17的合成方法采用合成方法(iii),将原料化合物10溶于乙醇中，加入甲醛水溶液和氢氧化钠溶液，反应5h,用二氯甲烷萃取，得到产物，收率为76.5％。
Figure BDA0002190573260000141
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(dd,J＝4.4Hz,J＝8.0Hz,2H),7.72(s,1H),7.49(m,3H),7.46,7.23(tt,J＝8.0 Hz,J＝8.0Hz,2H),6.90(s,1H),6.82(d,J＝4.4Hz,1H),5.55(s,2H),3.90(s,9H).HRMS:calcd for C24H22N4O4 [M+H]+431.1719,found 431.1719.
实施例18(合成化合物18)
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物18，收率为80.5％。
Figure BDA0002190573260000142
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(d,J＝3.8Hz,1H),8.00(d,J＝7.9Hz,2H),7.68(s,2H),7.33(s,1H), 7.24(s,1H),7.06(d,J＝8.4Hz,2H),3.92(s,7H),3.82(d,J＝4.7Hz,7H).HRMS:calcd for C22H21N3O4 [M+H]+392.1610,found 392.1622.
实施例19(合成化合物19)
化合物19的合成方法采用合成方法(v),将原料化合物23加入甲醇中，然后加入Pd/C，在H2作用下还原得到化合物19，收率为75.7％。
Figure BDA0002190573260000151
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.48(d,J＝4.4Hz,1H),7.52(s,2H),7.43(m,2H),6.99(s,1H),6.88(m,2H),3.99(ss 9H),3.92(s,3H).ESI-MS m/z:406.2[M+H]+407.2.
实施例20(合成化合物20)
除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物20，收率为65.7％。
Figure BDA0002190573260000152
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(d,J＝4.4Hz,1H),8.46(d,J＝7.8Hz,1H),8.24(d,J＝8.0Hz,1H),8.15(s, 1H),7.56(s,2H),7.41(t,J＝7.6Hz,1H),7.33(t,J＝7.6Hz,1H),7.09(s,1H),6.93(d,J＝4.4Hz,1H),4.02(ss, 9H),1.74(s,8H).HRMS:calcd forC28H28N4O5[M+H]+501.2138,found 501.2142.
实施例21(合成化合物21)
化合物21的合成方法采用合成方法(iv),将原料化合物26加入THF中，然后加入LiAlH4，常温下反应5h，收率为74.5％。
Figure BDA0002190573260000153
将所得到的化合物采用核磁共振谱、质谱技术进行鉴定，鉴定结果为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(d,J＝4.4Hz,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,2H),7.46(s,2H),7.41(d,J＝8.0Hz,2H), 7.00(s,1H),6.90(d,J＝4.4Hz,1H),4.66(s,2H),3.92(s,9H).HRMS:calcd for C22H21N3O4[M+H]+392.1610,found 362.1608.
实施例22(对肿瘤细胞抑制效果的研究)
上述实施例1-21的化合物对肿瘤抑制效果采用如下方法测试所证明，结果见下表1。
这些效果表明本发明化合物对肿瘤细胞抑制效果明显，其可用于治疗癌症。具体测试方法如下：
一、实验目的及原理
实验目的：采用MTT法检测合成的一系列7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶类化合物对肿瘤细胞增殖的抑制效果。
实验原理：MTT比色法是一种检测细胞存活和生长的方法，其原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性蓝紫色结晶甲瓒，并沉积在细胞中，而死细胞缺少这一功能。二甲基亚砜(DMSO)可以溶解活细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪检测570nM 下的吸光度值(OD值)，可以根据吸光度值反应活细胞的数量，在一定范围内，OD值越小，则表明细胞活性越弱，药物的抑制增殖效果越好。
二、试剂基本信息
试剂名称 品牌
RPMI-1640培养基粉末 Gibco
胎牛血清 Capricorn Scientific
二甲基亚砜(DMSO) Sigma
四甲基偶氮唑蓝(MTT) Sigma
三、试剂配制
1、RPMI-1640完全培养基
配置1L的RPMI-1 640培养基，取相应量的RPMI-1640粉末，溶于含有800ml三蒸水的烧杯中，搅拌4h，直至粉末完全溶解。加入2g NaHCO3，搅拌至完全溶解。用浓度为1mol/L的盐酸调节PH，使其PH在7.2-7.4范围内，定容至1L。用装有0.22μm孔径的滤膜，并提前高压好的滤器过滤，分装，保存于4℃备用。使用时加入5％的血清，使其成完全培养基，即可用于细胞培养。
2、MTT
将50ml的离心管用锡箔纸包裹避光，精密称取MTT粉末250mg，加入到离心管中，加入50ml的PBS，使MTT粉末完全溶解，用0.22μm孔径的滤膜过滤除菌并分装，在-20℃条件下避光保存。
3、化合物配置
取高压好的EP管用于称取化合物，向EP管中加入对应量的DMSO，使液体成100mM的母液，并分别按比例稀释到30mM，10mM，3mM，1mM。使用时用相应量的培养基稀释 1000倍，即可配成浓度为0.1μM，0.3μM，1μM，10μM，30μM，100μM的工作液。
四、实验过程
(1)取对数生长期的宫颈癌细胞(Hela)、乳腺癌细胞(MCF-7)、结肠癌细胞(HCT116) 肺癌细胞(A549)、黑色素瘤细胞(B16-F10)，消化，调整细胞数浓度为2.5×104/mL，按 100μl/孔接种到96孔板中。在37℃，5％CO2细胞培养箱中培养过夜，待细胞贴壁。
(2)吸出原有培养基，每组加入不同浓度的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶系列化合物，化合物浓度分别为0.1μM，0.3μM，1μM，10μM，30μM，100μM。以0.1％的DMSO 设为对照组，在细胞培养箱中继续培养72h。
(3)每孔加入10μl MTT液，在培养箱中孵育4h。
(4)弃去培养基，每孔加入100μl DMSO，振荡15min充分溶解甲瓒结晶。
(5)用酶联免疫检测仪测定570nm下的吸光度值。
(6)按以下公式计算细胞生长抑制率：
抑制率＝[(As-Ab)/(Ac-Ab)]×100％
As：实验孔的吸光度(含细胞、MTT、化合物)
Ac：对照孔的吸光度(含细胞、MTT，无化合物)
Ab：空白孔的吸光度(不含细胞和化合物，含MTT)
表1化合物对肿瘤细胞生长的半数抑制浓度
Figure BDA0002190573260000171
Figure BDA0002190573260000181
实施例23(体外抑制微管蛋白聚集实验)
使用基于荧光的微管蛋白聚合测定试剂盒(Cat.#BK011P，Cytoskeleton，Inc.，USA)，根据制造商的方案对需要测定化合物测试了对微管蛋白聚合的影响。将微管蛋白悬浮于冰冷的G-PEM缓冲液中(80mM PIPES，2mM MgCl2，0.5mM EGTA，1mM GTP，20％(v/v) 甘油)，并加入到含有指定浓度的药物或空白的96孔板中。用酶标仪(FASCalibur，BDBiosciences，USA)在37℃以1分钟为间隔监测(发射波长：450nm，激发波长：360nm) 90min的微管蛋白的聚合情况，将吸光度值转化为对微管聚合的抑制率，结果见图2。
实施例24
MCF-7细胞流式实验
将MCF-7(8～104个细胞)分别与不同浓度的待测化合物，秋水仙碱或0.05％DMSO一起孵育指定的时间。通过离心收集细胞，用PBS洗涤并在冰冷的70％乙醇中固定过夜。通过离心收集固定的细胞，并将其重新悬浮于含有1mg/mL核糖核酸酶的500μL PBS中。在37℃孵育30分钟后，细胞在4℃，50μL/ml PI下在黑暗中染色30min。最后通过FACScan流式细胞术(Becton-Dickinson，FranklinLakes，NJ，USA)分析样品。实验至少重复三次。使用CELLQUEST软件(BectonDickison)对数据进行处理评估，结果见图3。

Claims (3)

1.一种7-(三甲氧基苯基)- 吡咯并[2, 3-d]嘧啶，该化合物的化学结构如下式（a）所示，
Figure 534231DEST_PATH_IMAGE001
（a）
（a）式中，R1是3-吲哚基、4-甲基苯基、苯基、4-甲氧基苯基、4-三氟甲氧基苯基、4-氟苯基、5-(1-甲基吲唑基)、6-吲哚基、3-甲基苯基、3,4-二甲基苯基、5-(1-甲基吲哚基)、3-(1-甲基吲哚基)、6-(1-甲基吲哚基)、4-N, N二甲基苯基、4-(1-甲基吡唑基)、4-乙烯基苯基、3-(1-羟甲基吲哚基)、3-氟-4-甲氧基苯基、 3-氨基-4-甲氧基苯基、3-(1-Boc吲哚基)或4-羟甲基苯基。
2.权利要求1所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2, 3-d]嘧啶在制备肿瘤细胞增殖抑制剂中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤细胞增殖抑制剂由权利要求1所述的7-(三甲氧基苯基)-吡咯并[2, 3-d]嘧啶和医学上可接受的辅料组成。
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Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112939989B (zh) * 2021-03-03 2021-10-26 广东省科学院动物研究所 7-(3,4-二甲氧基-5-硒甲基苯基)-吡咯并[2,3-d]嘧啶及其应用
CN113105459B (zh) * 2021-03-09 2022-05-03 五邑大学 一种三唑并嘧啶衍生物及其制备方法和应用
CN114751891B (zh) * 2022-04-27 2023-04-07 广东晨康生物科技有限公司 一种(2-(1h-吲哚-3-基)-1h-咪唑-4-基)苯基甲酮类化合物及其应用
CN116514780A (zh) * 2023-04-26 2023-08-01 山东第一医科大学附属省立医院(山东省立医院) 一种吲唑类小分子微管蛋白抑制剂及其制备方法与应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1671710A (zh) * 2002-06-04 2005-09-21 新创世纪药品公司 用作抗病毒药物的吡唑并[1,5－a]嘧啶化合物
WO2010086040A1 (en) * 2009-01-29 2010-08-05 Biomarin Iga, Ltd. Pyrazolo-pyrimidines for treatment of duchenne muscular dystrophy
CN106794174A (zh) * 2014-05-06 2017-05-31 Gtx公司 治疗癌症的化合物

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1671710A (zh) * 2002-06-04 2005-09-21 新创世纪药品公司 用作抗病毒药物的吡唑并[1,5－a]嘧啶化合物
WO2010086040A1 (en) * 2009-01-29 2010-08-05 Biomarin Iga, Ltd. Pyrazolo-pyrimidines for treatment of duchenne muscular dystrophy
CN106794174A (zh) * 2014-05-06 2017-05-31 Gtx公司 治疗癌症的化合物

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Colchicine Binding Site Agent DJ95 Overcomes Drug Resistance and Exhibits Antitumor Efficacy;Kinsie E. Arnst,等;《Molecular Pharmacology》;20190731;第96卷(第1期);73-89 *
Conformation impacts on the bioactivities of SMART analogues;Yue Wu，等;《European Journal of Medicinal Chemistry》;20180915;第158卷;733-742 *
Synthesis and mechanistic aspects of 2-anilinonicotinyl-pyrazolo [1,5-a]pyrimidine conjugates that regulate cell proliferation in MCF-7 cells via estrogen signaling;Ahmed Kamal，等;《Bioorganic & Medicinal Chemistry》;20160226;第26卷(第8期);2077-2083 *
Synthesis, anti-inflammatory and neuroprotective activity of pyrazole and pyrazolo[3,4-d]pyridazine bearing 3,4,5-trimethoxyphenyl;Mashooq A. Bhat，等;《Med Chem Res》;20170321;第26卷(第7期);Scheme 1 *

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