CN110559452A - 叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点及其制备方法和用途 - Google Patents

叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种叶酸‑硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点及其制备方法和用途，叶酸、硝基咪唑与两亲性聚合物偶联在一起，得到叶酸‑硝基咪唑修饰的两亲性聚合物；取所述叶酸‑硝基咪唑修饰的两亲性聚合物溶于有机溶剂后加入水，得到叶酸‑硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液，将油溶性量子点的有机溶液滴加入叶酸‑硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液中，充分搅拌后通过透析除去有机溶剂，得到叶酸‑硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点。通过该方法制得的叶酸‑硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点生物相容性好、安全，无毒；粒径分布较为集中，分散性比较好，水溶性较强，表面修饰情况好；且对肿瘤乏氧区域有良好的靶向、示踪、显像效果。

Description

叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点及其制备方法和 用途
技术领域
本发明属于生物药学领域，具体涉及一种叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点及其制备方法和用途。
背景技术
肿瘤是严重危害人类健康的疾病之一。人体多数恶性肿瘤存在乏氧区及无氧区。肿瘤细胞与正常细胞不同，其肿瘤性脉管多不规则和异常弯曲，还存在血管盲端，管壁也不完整，这一特点导致血液在肿瘤中的流动缓慢和不规则，使得运输至肿瘤细胞的氧气与养分不均匀，而出现肿瘤性乏氧的现象。肿瘤细胞处于乏氧微环境时，可通过多种细胞机制调节使肿瘤细胞适应这种不利的环境，如上调肿瘤细胞内氧调节蛋白、血管内皮生长因子等表达，进而使肿瘤细胞更具有抵抗力和生存的能力，使自身侵袭性增加，容易发生远处转移。乏氧还会增加肿瘤细胞对放化疗的耐受性。这是由于，在放疗过程中，氧气被激发产生自由基，杀死肿瘤细胞。而肿瘤低氧区的细胞由于氧气缺乏，产生的自由基减少，造成辐射对肿瘤的杀伤效应降低；另外，乏氧条件下肿瘤细胞内低氧诱导因子(hypoxia-induciblefactor，HIF)积累，引起放射敏感性下降。乏氧不仅使肿瘤对放疗产生抵抗，同样也会通过直接或间接的复杂作用使肿瘤对化学药物治疗产生抵抗。
肿瘤细胞内乏氧的区域和程度对放化疗效果有重要影响，如何检测肿瘤区域是乏氧研究的另一热点问题。目前为止，检测乏氧的方法有多种，包括氧电极测定、组织形态分析、乏氧标志物测定等方法，但这些方法均具有创伤性。
放射性核素乏氧显像是近年来广受关注的成像技术，可用影像方式实时对肿瘤乏氧区域显像，检测肿瘤乏氧程度的变化，由于其具有无创性、可动态监测等优势，是目前乏氧检测研究最为集中的技术之一。但由于需使用放射性元素，并需要SPECT或PET/CT相关影像设备，使其在研究中的广泛应用受到了一定限制。寻找可替代放射性核素的信号源，构建乏氧靶向显像剂，具有较高的理论意义和应用价值。
量子点(quantum dots,QDs)是由几百到几千个原子组成的具有量子约束效应的发光半导体纳米晶体，由Ⅱ-Ⅵ族或Ⅲ-Ⅴ族元素组成，直径约为2～10nm，其尺寸小于波尔半径时，会展现出显著的量子效应，受激光照射后能发射一定波长的光信号。量子点具有以下优点：光稳定性好、荧光寿命长、吸收光谱宽且连续、发射光谱窄且对称、抗光漂白能力更强，而且具有尺寸依赖效应，量子点的荧光发射波长可通过材料的组成和粒径选择实现有效控制，从而在同一激发光作用下同时得到多种发射波长的荧光。自20世纪90年代量子点开始兴起到现在，这一领域已经发展了20多年，随着研究的不断深入与扩展，量子点材料的制备技术有了很大提高，可以稳定制备出粒径可控的高荧光性能量子点，在免疫荧光诊断、药物筛选、活体成像、生物大分子相互作用等生物医学领域中得到广泛应用。但量子点在实际的合成及应用中仍存在着生物相容性低、水溶性较差、表面修饰困难等缺点。
叶酸受体是一种糖蛋白，分为α、β、γ3个亚型，FRα在肝癌、卵巢癌、脑肿瘤等多数肿瘤细胞表面高表达，且能与叶酸及其衍生物特异性结合，而在正常组织中分布较少，在肿瘤靶向治疗和成像领域备受关注，通过叶酸受体介导可实现抗肿瘤药物及载体的靶向递送。
硝基咪唑类化合物是目前常用的一类乏氧靶向基团，其“乏氧靶向性”主要是基于其在不同氧浓度下的还原敏感性。在正常氧含量的细胞中，该类化合物的硝基在黄嘌呤氧化酶作用下生成自由基阴离子，并迅速再氧化成硝基扩散出细胞；而在乏氧条件下,自由基阴离子被硝基还原酶进一步还原，产物与细胞内组分结合，滞留于细胞内，从而实现对乏氧肿瘤细胞的靶向检测。临床上常硝基咪唑类化合物与放射性核素偶联，运用影像方式对肿瘤乏氧区域显像，但是由于放射性核素半衰期短，无法长时间对乏氧区域显像。
发明内容
针对上述技术问题，本发明的目的在于提供一种叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点，其通过活体成像技术，对肿瘤乏氧区域实时、动态示踪作用，实现对乏氧肿瘤细胞的靶向检测。
本发明的目的还在于提供一种叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点的制备方法，该制备方法操作简单，所制得的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点水溶性好，粒径小且分布较为集中，对肿瘤乏氧区域有良好的靶向和显像作用。
本发明的目的还在于提供一种叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点的用途。
为实现上述目的，本发明提供一种叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点，所述叶酸 -硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点，具有以下结构通式：
其中，a为两亲性聚合物的亲水嵌段，所述亲水嵌段为甲基丙烯酸、聚乙二醇、聚乙二醇单甲醚、甲基丙烯酸羟乙酯、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯，聚乙烯醇、聚乙二醇双丙烯酸酯、聚乙二醇丙烯酸酯中的一种或几种的组合；
b为两亲性聚合物的疏水嵌段，所述疏水嵌段为：苯乙烯、己内酯、聚(β-苄基-L-天冬氨酸)、聚乳酸乙醇酸酯、聚乳酸、聚乙交酯、聚三亚甲基碳酸酯中的一种或几种的组合；
c为含功能性基团的硝基咪唑；
d为油溶性量子点CdS、ZnS、ZnSe、CdSe、CdTe、ZnTe、PbSe、CdS/ZnS、CdS/PbS、 CdS/Ag2S、CdSe/CdS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnSe中的一种或几种的组合；
40<x<100，200≤y≤400。
进一步地，所述含功能性基团的硝基咪唑中的功能性基团为羧基、氨基、羟基和环氧基中的一种或几种的组合。
进一步地，所述含功能性基团的硝基咪唑，具有以下通式：
其中：R1、R2为氢原子、硝基、羧基、氨基或者甲基，R1、R2至少一个为硝基；R3是氢或C1～C4的亚烷基，所述亚烷基是未取代的或被1、2或3个R3′取代，R3′为羟基、烷基、氨基或(C4)环烷基；R4为氨基、羧基、羟基或环氧基。
进一步地，所述含功能性基团的硝基咪唑类化合物选自以下任意一种：
2-甲基-2-(4-硝基-1H-咪唑-1-基)丙-1-醇，
2-(2-甲基-4-硝基-咪唑-1-基)-乙胺，
2-(2-硝基咪唑)乙胺，
1-氨基-2-(2-硝基咪唑-1-基)-乙醇，
1-(2、3-环氧基丙基)-2-甲基-5-硝基咪唑，
4-硝基-1H-咪唑-2-羧酸，
2,4-二硝基咪唑-1-胺，
4-硝基-1H-咪唑-1-乙醇，
1-(3-(顺式)-氨基环丁基)-4-硝基-1H-咪唑，
2-(2-甲基-5-硝基咪唑-1-基)乙酸。
为实现上述目的，本发明提供一种叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点的制备方法，包括以下步骤：
1)两亲性聚合物的制备：将亲水嵌段与疏水嵌段溶于有机溶剂中，制备得到两亲性嵌段聚合物；
2)叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的制备：将所述两亲性聚合物和叶酸及含功能性基团的硝基咪唑类化合物偶联，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物；
3)叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点的制备：取所述叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物溶于有机溶剂后加入水，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液，将油溶性量子点的有机溶液滴加入叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液中，搅拌后除去有机溶剂，得到叶酸-硝基咪唑修饰的肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点。
进一步地，所述步骤1)中亲水嵌段与疏水嵌段的摩尔比为1.3:1～2.6:1。
进一步地，所述步骤2)中两亲性聚合物和含功能性基团的硝基咪唑类化合物偶联的摩尔比为1:5～1:50。
进一步地，所述步骤2)叶酸与两亲性聚合物的摩尔比大于1:1。
进一步地，所述步骤1)的两亲性聚合物的制备优选为：
将亲水嵌段与疏水嵌段溶于有机溶剂中，一定温度下搅拌一定时间；用旋转蒸发仪除去有机溶剂，剩余产物用超纯水洗涤数次，放入真空干燥箱中，于室温下，真空干燥一段时间，便得两亲性聚合物。
进一步地，所述步骤2)的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的制备具体为：
将所述两亲性聚合物、催化剂、叶酸、含功能性基团的硝基咪唑类化合物于有机溶剂中反应后除去有机溶剂，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物。
优选地，将所述两亲性聚合物、催化剂、含功能性基团的硝基咪唑类化合物于有机溶剂中反应后，用旋转蒸发仪除去有机溶剂至粘稠液体状，剩余产物用超纯水洗涤数次，放真空干燥箱，于室温下，真空干燥一段时间，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物。
进一步地，所述步骤2)中两亲性聚合物、叶酸、含功能性基团的硝基咪唑类化合物偶联，反应温度为4～70℃，反应时间为6～12h。
进一步地，所述步骤1)和3)中的有机溶剂是：N，N-二甲基酰胺、四氢呋喃、三氯甲烷、二氯甲烷、1，4-二氧六环中的一种或几种的组合。
进一步地，所述步骤3)中，所述油溶性量子点与叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物质量比为1:1000～1:5000。
进一步地，所述步骤3)中，所述水的用量为1～5mL。
进一步地，所述步骤3)中，超声的功率为100～200W，超声的时间为6～12min。
本发明还提供一种叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点的用途，所述叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点用于检测乏氧肿瘤细胞的靶向区域。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明将叶酸、硝基咪唑与两亲性聚合物偶联在一起，包裹油溶性量子点，构建了一种具有肿瘤乏氧靶向的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点。可通过活体成像技术，发挥动态示踪的作用，对乏氧区域实现动态显像。通过该方法制得的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点生物相容性好、安全，无毒；粒径分布较为集中，分散性比较好，水溶性较强，表面修饰情况好；所述叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点用于检测乏氧肿瘤细胞的靶向区域，对肿瘤乏氧区域有良好的靶向、示踪、显像效果。
附图说明
结合下面的附图，本发明的上述和/或附加的方面和优点从对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
图1为实施例1制得量子点的粒径分布图(注：请确认附图1的横坐标标数是否正确)。
图2为实施例2制得量子点的透射电镜图。
图3为实施例3制得量子点在常氧和乏氧条件下对Skov-3细胞存活率影响图。
图4为实施例3制得量子点在常氧和乏氧条件下对Hep-G2细胞存活率影响图。
图5为Skov-3、Hep-G2细胞对实施例4制得量子点在常氧和乏氧条件下摄取图。
图6为实施例5制得量子点在荷H22肿瘤细胞的ICR小鼠体内的活体成像图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，将更加具体地解释本发明。通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
实施例1：
取甲基丙烯酸86.1mg(1mmol)与偶氮二异丁腈AIBN 39.4mg(0.24mmol)溶于四氢呋喃中，加入苯乙烯52.9μL(0.77mmol)，60℃下搅拌6h；用旋转蒸发仪除去四氢呋喃至粘稠液体状，剩余产物用超纯水洗涤5次，放入真空干燥箱中，于室温下，真空干燥24h，便得两亲性聚合物；取上述两亲性聚合物50mg(5×10-4mmol)与1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐EDC 46mg(0.24mmol)溶于四氢呋喃中，25℃下搅拌30分钟，加入叶酸 1.13mg(2.56×10-3mmol)，25℃下搅拌30分钟，加入2-(2-硝基咪唑)乙胺0.4mg(2.56×10-3mmol)，25℃下搅拌6h；用旋转蒸发仪除去四氢呋喃至粘稠液体状，剩余产物用超纯水洗涤5次，放真空干燥箱于室温下，真空干燥24h，便得叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物；取10mg叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物溶于0.1mL四氢呋喃后加2mL水，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液，取0.1mL浓度为100μg/mL的硫化镉/硫化锌CdS/ZnS量子点四氢呋喃溶液，在超声条件下缓慢滴入2mL浓度为5mg/mL的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液中，超声功率为200W，超声时间6min。超纯水透析除去体系中的四氢呋喃，再用0.45μm水系滤膜过滤，便得具有肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点。
图1为本实施例制得的肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点粒径分布图。从粒径分布图可以看出制得的肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点为76nm，粒径小，为纳米级，粒径分布较为集中，分散性比较好，水溶性较强。
实施例2：
取甲基丙烯酸86.1mg(1mmol)、聚甲基丙烯酸羟乙酯130mg(1mmol)与偶氮二异丁腈 AIBN 39.4mg(0.24mmol)溶于四氢呋喃中，加入苯乙烯52.9μL(0.77mmol)，60℃下搅拌6h；用旋转蒸发仪除去四氢呋喃至粘稠液体状，剩余产物用超纯水洗涤5次，放入真空干燥箱中，于室温下，真空干燥24h，便得两亲性聚合物；取上述两亲性聚合物50mg(5×10-4mmol)与氯化铝31.2mg(0.24mmol)溶于1、4-二氧六环中，加入叶酸1.13mg(2.56×10-3mmol)，25℃下搅拌30分钟，加入1-(2、3-环氧基丙基)-2-甲基-5-硝基咪唑2.35mg(1.28×10-2mmol)，70℃下搅拌10h；用旋转蒸发仪除去1、4-二氧六环至粘稠液体状，剩余产物用超纯水洗涤5次，放真空干燥箱于室温下，真空干燥24h，便得叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物；取10mg叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物溶于0.1mL四氢呋喃后加2mL水，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液，取0.1mL浓度为100μg/mL的CdSe/ZnSe量子点四氢呋喃溶液，在超声条件下缓慢滴入2mL浓度为5mg/mL的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液中，超声功率为100W，超声时间8min，超纯水透析除去体系中的四氢呋喃，再用0.45μm 水系滤膜过滤，便得具有肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点。
图2为本实施例制得的肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点的透射电镜图，从透射电镜图可以看出制得的肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点的包封效果良好，形态呈球形。
实施例3：
取聚甲基丙烯酸羟乙酯130mg(1mmol)与AIBN 39.4mg(0.24mmol)溶于四氢呋喃中，加入苯乙烯52.9μL(0.77mmol)，60℃下搅拌6h；用旋转蒸发仪除去四氢呋喃至粘稠液体状，剩余产物用超纯水洗涤5次，放入真空干燥箱中，于室温下，真空干燥24h，便得两亲性聚合物；取上述两亲性聚合物50mg(5×10-4mmol)与叶酸1.13mg(2.56×10-3mmol)溶于二氯甲烷中，25℃下搅拌30分钟，加入4-硝基-1H-咪唑-2-羧酸4.1mg(2.56×10-2mmol)，溶解，然后加入二环己基碳二亚胺3.4mg(1.6×10-2mmol)、4-二甲氨基吡啶2mg(1.6×10-2mmol)4℃下搅拌12h；用旋转蒸发仪除去二氯甲烷至粘稠液体状，剩余产物用超纯水洗涤5次，放真空干燥箱于室温下，真空干燥24h，便得叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物；取10mg叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物溶于0.1mL四氢呋喃后加2mL水，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液，取0.1mL浓度为100μg/mL的CdSe/ZnSe量子点四氢呋喃溶液，在超声条件下缓慢滴入2mL浓度为5mg/mL的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液中，超声功率为100W，超声时间12min，超纯水透析除去体系中的四氢呋喃，再用0.45μm水系滤膜过滤，便得具有肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点。
图3、4为本实施例制得肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点对肿瘤细胞存活率影响图，制得的肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点对细胞毒性较低，细胞存活率均大于85％以上，说明该肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点生物相容性好，安全，无毒。
实施例4：
取甲基丙烯酸86.1mg(1mmol)与AIBN 39.4mg(0.24mmol)溶于四氢呋喃中，加入苯乙烯 52.9μL(0.77mmol)，60℃下搅拌6h；用旋转蒸发仪除去四氢呋喃至粘稠液体状，剩余产物用超纯水洗涤5次，放入真空干燥箱中，于室温下，真空干燥24h，便得两亲性聚合物；取上述两亲性聚合物50mg(5×10-4mmol)与叶酸1.13mg(2.56×10-3mmol)溶于二氯甲烷中，25℃下搅拌30分钟，加入4-硝基-1H-咪唑-1-乙醇4.1mg(2.56×10-2mmol)，溶解，然后加入二环己基碳二亚胺3.4mg(1.6×10-2mmol)、4-二甲氨基吡啶2mg(1.6×10-2mmol)4℃下搅拌12h；用旋转蒸发仪除去二氯甲烷至粘稠液体状，剩余产物用超纯水洗涤5次，放真空干燥箱于室温下，真空干燥24h，便得叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物；取10mg叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物溶于0.1mL四氢呋喃后加2mL水，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液，取0.1mL浓度为100μg/mL的CdSe/ZnSe量子点四氢呋喃溶液，在超声条件下缓慢滴入2mL浓度为5mg/mL的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液中，超声功率为150 W，超声时间6min，超纯水透析除去体系中的四氢呋喃，再用0.45μm水系滤膜过滤，便得具有肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点。
图5为本实施例肿瘤细胞对所制得肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点的摄取图，图中制得的肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点在乏氧肿瘤细胞中的荧光强度明显强于常氧条件下的肿瘤细胞，说明本量子点对乏氧肿瘤细胞具有良好的靶向性。
实施例5：
取甲基丙烯酸羟乙酯130mg(1mmol)、甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯157mg(1mmol)与适量过硫酸钾(K2S2O8)溶于四氢呋喃中，25℃搅拌，15分钟后，加入己内酯89μL(0.8mmol)，室温下磁力搅拌6h；用旋转蒸发仪除去四氢呋喃至粘稠液体状，剩余产物用超纯水洗涤5次，放入真空干燥箱中，于室温下，真空干燥24h，便得两亲性聚合物；取所得两亲性聚合物50mg (5×10-4mmol)与EDC 46mg(0.24mmol)溶于四氢呋喃THF中，25℃搅拌30分钟后，叶酸1.13mg(2.56×10-3mmol)，25℃下搅拌30分钟，加入2-(2-硝基咪唑)乙胺4mg(2.56×10- 2mmol)， 25℃搅拌8h；用旋转蒸发仪除去四氢呋喃THF至粘稠液体状，剩余产物用超纯水洗涤5次，放真空干燥箱于室温下，真空干燥24h，便得含硝基咪唑的两亲性聚合物；取10mg叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物溶于0.1mL四氢呋喃后加2mL水，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液，取0.1mL浓度为100μg/mL的CdS/Ag2S量子点四氢呋喃溶液，在超声条件下缓慢滴入2mL浓度为5mg/mL的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液中，超声功率为200W，超声时间8min，超纯水透析除去体系中的四氢呋喃，再用0.45μm水系滤膜过滤，便得具有肿瘤乏氧靶向的水溶性量子点。
图6为本实施例制得量子点在荷H22肿瘤细胞的ICR小鼠体内的活体成像图，其中图6 (a)为荷H22肿瘤细胞的ICR小鼠图，图6(b)为本实施例制得量子点经尾静脉注射进图6(a)小鼠的活体成像图，图6(b)中可以观察到，荷瘤区域有明显的荧光信号，荧光信号的强度与量子点的浓度呈正相关，说明本实施例制备的量子点的对肿瘤乏氧区域有良好的靶向、示踪、显像效果。
应当理解，虽然本说明书是按照各个实施例描述的，但并非每个实施例仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点，其特征在于，具有以下结构：
其中，a为两亲性聚合物的亲水嵌段，所述亲水嵌段为：甲基丙烯酸、聚乙二醇、聚乙二醇单甲醚、甲基丙烯酸羟乙酯、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯，聚乙烯醇、聚乙二醇双丙烯酸酯、聚乙二醇丙烯酸酯中的一种或几种的组合；
b为两亲性聚合物的疏水嵌段，所述疏水嵌段为：苯乙烯、己内酯、聚(β-苄基-L-天冬氨酸)、聚乳酸乙醇酸酯、聚乳酸、聚乙交酯、聚三亚甲基碳酸酯中的一种或几种的组合；
c为含功能性基团的硝基咪唑；
d为油溶性量子点，所述油溶性量子点为：CdS、ZnS、ZnSe、CdSe、CdTe、ZnTe、PbSe、CdS/ZnS、CdS/PbS、CdS/Ag2S、CdSe/CdS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnSe中的一种或几种的组合；
40<x<100，200≤y≤400。
2.根据权利要求1所述的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点，其特征在于，所述含功能性基团的硝基咪唑中的功能性基团为羧基、氨基、羟基和环氧基中的一种或几种的组合。
3.根据权利要求2所述的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点，其特征在于，所述含功能性基团的硝基咪唑，具有以下通式：
其中：R1、R2为氢原子、硝基、羧基、氨基或者甲基，R1、R2至少一个为硝基；R3是氢或C1～C4的亚烷基，所述亚烷基是未取代的或被1、2或3个R3′取代，R3′为羟基、烷基、氨基或(C4)环烷基；R4为氨基、羧基、羟基或环氧基。
4.根据权利要求3所述的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点，其特征在于，所述含功能性基团的硝基咪唑为以下任意一种：
5.一种制备权利要求1中所述叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1)两亲性聚合物的制备：将亲水嵌段与疏水嵌段溶于有机溶剂中，制备得到两亲性聚合物；
步骤2)叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的制备：将所述两亲性聚合物与叶酸和含功能性基团的硝基咪唑类化合物偶联，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物；
步骤3)取所述叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物溶于有机溶剂后加入水，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液，将油溶性量子点的有机溶液在超声条件下滴加入叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物的水溶液中，搅拌后除去有机溶剂，得到叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点。
6.根据权利要求5所述的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中亲水嵌段与疏水嵌段的摩尔比为1.3:1～2.6:1。
7.根据权利要求5所述的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中两亲性聚合物和含功能性基团的硝基咪唑类化合物偶联的摩尔比为1:5～1:50；叶酸与两亲性聚合物的摩尔比大于1:1。
8.根据权利要求5所述的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中两亲性聚合物、叶酸、含功能性基团的硝基咪唑类化合物偶联，反应温度为4～70℃，反应时间为6～12h。
9.根据权利要求5所述的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点的制备方法，其特征在于，所述步骤1)和步骤3)中的有机溶剂为：N，N-二甲基酰胺、四氢呋喃、三氯甲烷、二氯甲烷、1，4-二氧六环中的一种或几种的组合；
所述步骤3)中，所述油溶性量子点与叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物质量比为1:1000～1:5000；
所述步骤3)中，所述水的用量为1～5mL；
所述步骤3)中，超声的功率为100～200W，超声的时间为6～12min。
10.一种根据权利要求1所述的叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点的用途，其特征在于，所述叶酸-硝基咪唑修饰的两亲性聚合物量子点用于检测乏氧肿瘤细胞的靶向区域。
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