CN110531017A - 一种分子网络化分析地骨皮化合物结构的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种分子网络化分析地骨皮化合物结构的方法，包括化学试剂和材料的选择，药材的选择，样品前处理和HPLC‑MS/MS网络化分析等步骤。本发明还包括借助于液质联用方法发现地骨皮中五个新化合物结构及其质谱裂解规律。本发明便于发掘地骨皮中的新结构类似物，解析新结构，发掘传统中药中微量成分，从分子水平理解中药药效机制，并加快中药现代化的发展。

Description

一种分子网络化分析地骨皮化合物结构的方法
技术领域
本发明属于化工领域，具体涉及一种分子网络化分析地骨皮化合物结构的方法。
背景技术
《中国药典》2015版，将来源于宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)或L.ChinenseMill. (Solanaceae)的根皮均称为地骨皮。地骨皮是传统中药中重要的草药，味苦、寒，在中医临床 中被用于治虚劳潮热盗汗，肺热咳喘，吐血，衄血，血淋，消渴，痈肿，恶疮等疾病。前期 植物化学研究已经从地骨皮中发现了七十余种化合物包括生物碱，酚酰胺，环肽类，二肽， 环二萜和五环三萜等。地骨皮的提取物和单体化合物在抗氧化、抗肿瘤、抗细菌和真菌、抗 病毒、抗糖尿病和降血压等模型上具有多方面的活性。
为了更加深入从分子水平理解中药药效机制，并加快中药现代化的发展，对传统中药的 化学成分的研究再次成为热门的学科方向之一。早期的研究表明，环肽类化合物lyciumins A 和B具有抗血管紧张素转换酶的活性，被认为可能用于临床降血压。该类环肽类物质具有独 特的化学骨架，结构中含有一个由色氨酸吲哚N1和甘氨酸Cα关环结构，一直吸引着化学家 和药理学家的关注。
天然产物由于它们复杂的化学结构和多样性生物活性一致是临床药物开发的重要资源。 从自然界发现新的化学结构不仅能丰富天然产物结构库，同时也将为化学合成设计新结构药 物提供基本骨架。在过去的几十年里，随着质谱的快速发展，特别是串联质谱的快速发展和 应用，大量新化学结构被发现。在我们早期的研究工作中，我们利用分子网络化方法对菌株 Streptomyces sp.SS的发酵上清液的LC-MS/MS进行重分析，发现了20个新结构三三霉素类 似物。
发明内容
本发明的目的是提出一种利用HPLC-Q-TOF MS方法对地骨皮50％乙醇水提取物进行 分析，发掘新结构类似物，解析新结构，发掘传统中药中微量成分，从分子水平理解中药药 效机制，并加快中药现代化的发展。
为了达到上述目的，本发明提出一种分子网络化分析地骨皮化合物结构的方法，包括以 下步骤：
(1)化学试剂和材料
色谱甲醇购自上海泰坦试剂有限公司；屈臣氏纯净水被用于HPLC；乙酸和氨水均为分 析纯，购自北京化学试剂厂；
固相萃取柱，型号为Sep-Pack C18；色谱柱型号CAPCELL PAK C18 AQ；液质联用仪器 为Agilent 1100-Agilent 6510Q-TOF质谱；
(2)药材
实验用地骨皮，购于北京同仁堂；
(3)样品前处理
干燥地骨皮100g使用100ml 50％乙醇在室温下超声提取3遍，每次2小时；乙醇提取 液减压条件下蒸馏回收，得到2.0ml水溶液；残留液上样至Sep-Pack C18固相萃取柱，后依次使用纯水、50％甲醇和HPLC级别甲醇得到样品1-3，所有样品在12000转下离心10分钟，上清液用于HPLC-Q-TOF测试；
(4)HPLC-MS/MS分析
两项梯度洗脱用于HPLC-Q-TOF系统，A相为色谱级甲醇，B相为0.1％醋酸氨水溶液； 70分钟内从A相10％梯度增加到90％，流速为0.8ml/min，流出液通过一个三通装置等量分 配至DAD和Q-TOF检测系统；DAD设置为254nm，柱温设定为25℃，每次进样20微升；
质谱使用的离子源为电喷雾离子源，毛细管电压为4kV，毛细管出口电压为135V，锥 孔电压为65V，脱溶剂温度为350℃，干燥气流速度为10L/min，雾化器压力40psi，碰撞能量为8～45V，扫描分子量区间为m/z 100～2000，检测模式为负离子模式。
(5)分子网络化方法
HPLC-MS/MS数据集经相关软件转换成mzXML格式后，上传至massive.ucsd.edu进行数据 处理和整合。GNPS参数设计分子量范围(～1m/z),容忍度60％，进行类似物搜索。GNPS数 据以cytoscape软件图形化。
与现有技术相比，本发明便于发掘地骨皮中的新结构类似物，解析新结构，发掘传统中 药中微量成分，从分子水平理解中药药效机制，并加快中药现代化的发展。
附图说明
图1为GNPS网络化分析地骨皮中复杂化学成分；
图2为新化合物(1-5)化学结构；
图3为地骨皮中已知化合物结构；
图4为已知化合物提取离子图；
图5为m/z 300.1(KN1,A1)和312.1(KN2,B1)的二级质谱图及其在负离子模式下裂解方式；
图6为m/z 634.2(KN5,A1)和641.3(KN7,B1)的MS/MS图谱及其在负离子模式下的裂解规律；
图7为环肽类化合物二级质谱图及其裂解规律；
图8为提取离子片段发掘酚酰胺和环肽类结构类似物；
图9为新化合物1和2的二级质谱图及其在负离子模式下裂解规律；
图10为已知化合物在网络化图上的位置(A)以及本专利涉及化合物的网络化放大图 (B)；
图11为新化合物3的二级质谱及其裂解方法；
图12为新化合物4的二级图谱及其负离子模式下裂解规律；
图13为新化合物5的二级质谱图及其裂解规律。
具体实施方式
为了使本领域的技术人员可以更好地理解本发明，下面结合附图和实施例对本发明技术 方案进一步说明。
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭 露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。
一种分子网络化分析地骨皮化合物结构的方法，包括以下步骤：
(1)化学试剂和材料
色谱甲醇购自上海泰坦试剂有限公司；屈臣氏纯净水被用于HPLC；乙酸和氨水均为分 析纯，购自北京化学试剂厂；
固相萃取柱，型号为Sep-Pack C18；色谱柱型号CAPCELL PAK C18 AQ；液质联用仪器 为Agilent 1100-Agilent 6510 Q-TOF质谱；
(2)药材
实验用地骨皮，购于北京同仁堂；
(3)样品前处理
干燥地骨皮100g使用100ml 50％乙醇在室温下超声提取3遍，每次2小时；乙醇提取 液减压条件下蒸馏回收，得到2.0ml水溶液；残留液上样至Sep-Pack C18固相萃取柱，后依次使用纯水、50％甲醇和HPLC级别甲醇得到样品1-3，所有样品在12000转下离心10分钟，上清液用于HPLC-Q-TOF测试；
(4)HPLC-MS/MS分析
两项梯度洗脱用于HPLC-Q-TOF系统，A相为色谱级甲醇，B相为0.1％醋酸氨水溶液； 70分钟内从A相10％梯度增加到90％，流速为0.8ml/min，流出液通过一个三通装置等量分 配至DAD和Q-TOF检测系统；DAD设置为254nm，柱温设定为25℃，每次进样20微升；
质谱使用的离子源为电喷雾离子源，毛细管电压为4kV，毛细管出口电压为135V，锥 孔电压为65V，脱溶剂温度为350℃，干燥气流速度为10L/min，雾化器压力40psi，碰撞能量为8～45V，扫描分子量区间为m/z 100～2000，检测模式为负离子模式。
(5)分子网络化方法
HPLC-MS/MS数据集经相关软件转换成mzXML格式后，上传至massive.ucsd.edu进行 数据处理和整合。GNPS参数设计分子量范围(～1m/z),容忍度60％，进行类似物搜索。GNPS 数据以cytoscape软件图形化。
(6)提取已知化合物分子离子峰
为了手动分析新结构类似物，以往文献报道的化合物包括酚酰胺(KN1-KN9，图3)和 环肽类化合物(KN10-KN13，图3)在样品1-3的负离子总离子图中得到了提取。负离子提取图(图3)表明除了KN3和KN4之外，几乎所有的离子都能被提取出来，且丰度高于105. KN1和KN9的离子丰度明显高于其他离子，提示酚酰胺类化合物应该是浸膏中主要物质(图4A)。
图4B提取了属于四个环肽类化合物的离子峰，不同丰度的离子峰，表明lyciuminA (KN10)的含量远高于其它三个化合物。而图4A(<3.0×106)和图4B(<1.0×106)纵坐标 的差别提示环肽类物质的含量要低于酚酰胺类。另外一个化合物二肽lyciumamide(KN14) 的提取峰，显示二肽类物质在样品中含量极其微小。
图4是已知化合物提取离子图，已知化合物分子量包括：m/z 300.1(KN1),312.1(KN2), 632.2(KN3),639.2(KN4),634.2(KN5),618.2(KN6),641.2(KN7),609.2(KN8),476.1(KN9)(A) 和874.3(KN10),895.3(KN11),898.3(KN12),962.3(KN13),443.2(KN14)(B)。
(7)酚酰胺和环肽类化合物裂解规律
酚酰胺和环肽类化合物在正离子模式下的裂解规律在文献中早有报道，裂解位点主要集 中在酰胺键附近。在这篇文章中我们报到了两类化合物在负离子模式下的裂解规律，特别是 基于化合物KN1,KN2,KN7,KN9,和KN10的二级质谱。
(8)化合物KN1和KN2的裂解行为
化合物KN1和KN2的化学结构非常相似，除了一个甲氧基和一一对与酰胺相连接的双 键(图3)。母离子m/z 300.1(KN1)and 312.1(KN2)的二级质谱被分别提取(图5-A1 anB1)， 并且根据合理的中性丢失确定了两个化合物裂解规律(图5-A2和B2)。对于KN1丰度较高 的子离子m/z 178.1和121.1表明在负离子模式下丢失主要由3,4-二羟基苯基负电荷中心诱 导而成。而对于KN2中3-甲氧基-4-羟基由于分子间氢键降低了该位置的负电荷中心，即便 如此，一个由失去CH3 +碎片而得到了的子离子m/z 197.1提示该处产生的负电荷中心仍然是 一个诱发分子内部断裂失去中性片段的重要因素。而且子离子m/z 190.1和135.1能够从分 别丢失中性碎片3-甲氧基-4-羟基苯基和3-甲氧基-4-羟基-苯乙酰基(图5-B2)推测出来。而 碎片离子m/z 178.1和148.1可能有4-羟基苯基负电中心诱导而来。
(9)化合物KN5和KN7的裂解行为
化合物KN5和KN7的二级质谱图见图5-A1和B1，而它们的裂解规律见图6-A2和B2。KN5含有一个乙酰丁氨片段，可能会降低在末端的断裂概率，从而产生m/z 427,442,455和471的丰度均较低。碎片离子m/z 478,463和299为KN5和KN7的共同离子，表明这些离 子可能作为判断酚酰胺类化合物类似物中带有二苯乙烯结构的特征离子。
(10)环肽类化合物裂解规律
在负离子模式下，地骨皮中的环肽类结构之前从未被讨论过，本文对KN10,KN11和KN13的准分子离子峰m/z 872.4,895.4和962.4，分别进行了提取见图7-A1,B1和C1。由 于KN12(<10-4)丰度很低，该离子的二级质谱在仪器中未被检测到。基于合理的丢失，化合 物KN10,KN11和KN13的裂解规律见图6-A2(KN10),B2(KN10)和C2(KN13)。一个甲 醛分子，来源于环肽骨架上的苏氨酸残基，是该类化合物主要中性丢失。中性丢失208Da， 如KN10中的M-664,KN11中的M-687和KN13中的M-754能够作为支链中是否含有脯氨 酸二肽的重要证据。化合物KN13中的离子m/z 591和574，与KN10/KN11中的离子m/z 501 和484，分别差90Da，可能是由环肽骨架上的氨基酸残基差别引起的，在KN13中有一个蹦 丙氨酸，被KN10和KN11中的甘氨酸所取代。同样，一个23Da分子量差别来源于支链残 基，如KN10中的371Da(M-501)和KN11中的394Da(M-501)，恰好与两个支链上的两个 氨基酸残基的分子量差值相吻合。化合物KN10中为色氨酸(Try,204Da)而在化合物KN 11 中为酪氨酸(Tyr,181Da)。
(11)手动发掘新结构成分
特征离子m/z 478.1,463.2和299.1被用于从样品中发掘新结构酚酰胺类似物图8-A。而 保留时间23.5和29.9分钟的离子分别为化合物KN1和KN7相对应。而三个新峰位于22.5,26.0 和30.0对应离子峰为m/z 472.1,314.1和445.2显示出与已知酚酰胺类似的二级碎片。进一 步详细分析三者的二级碎片，特别是他们的中性丢失和和特征离子，发现只有母离子分子量 为m/z 314.1的离子可以解析，结构如图9-A。而其它两个离子没有办法得到结构。
特征离子m/z 501.2,471.2,387.1和410.1被用于作为共同离子来手动寻找环肽类化合物 的新结构(图8-B)。化合物KN10,KN11和KN13对应的分子离子峰分别出现在22.5,24.1和 27.3min。另外，一个新的离子m/z 856.2对应于25.5的峰(P4用*表示)显示出与环肽类(图 7)已知化合物相同的裂解碎片离子。尤其是也出现了m/z 501.2,484.2,471.2和454.2等碎片 离子，表明该化合物也含有一个环四肽骨架图9-B。但是碎片离子m/z 371.1对应于支链比 KN10的相同位置少16Da，表明该化合物在支链上缺少一个氧原子。相同的中性丢失208Da (M-648)提示新化合物同样也含有一个脯氨酸二肽结构，因此，新化合物应该为一个苯丙 氨酸取代了KN10中的酪氨酸的化合物。
(12)分子网络化方法自动发掘新结构化合物
HPLC-MS/MS数据在GNPS平台上进行了重分析，结果如图1。总共527个节点分成33组分子网络子集。在这个网络化图上，分子离子KN1-KN5,KN7,KN10,KN11,KN13和KN14 出现在几个不同的子集中。而且，复合离子KN10-Cl-(m/z 908.4),KN11-Cl-(m/z 931.4)和KN13-Cl-(m/z 998.4)同样也被检测到.而且化合物1与KN1有关联，而2在图中与环肽有关联。除此之外，还有其它三个母离子m/z 604.3(3),597.3(4)和611.3(5)在以往的工作中从未报 道过的，也显示出与化合物KN5和KN7有相关(图10)。新化合物3-5的结构分别通过它们 的二级质谱与已知化合物的二级质谱比较得以解析，解析过程如图11-图13。
以上所述实施例仅表达了本发明的优选实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因 此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在 不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形、改进及替代，这些都属于本发明的保护 范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (1)

1.一种分子网络化分析地骨皮化合物结构的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)化学试剂和材料
色谱甲醇购自上海泰坦试剂有限公司；屈臣氏纯净水被用于HPLC；乙酸和氨水均为分析纯，购自北京化学试剂厂；
固相萃取柱，型号为Sep-Pack C18；色谱柱型号CAPCELL PAK C18 AQ；液质联用仪器为Agilent 1100-Agilent 6510Q-TOF质谱；
(2)药材
实验用地骨皮，购于北京同仁堂；
(3)样品前处理
干燥地骨皮100g使用100ml 50％乙醇在室温下超声提取3遍，每次2小时；乙醇提取液减压条件下蒸馏回收，得到2.0ml水溶液；残留液上样至Sep-Pack C18固相萃取柱，后依次使用纯水、50％甲醇和HPLC级别甲醇得到样品1-3，所有样品在12000转下离心10分钟，上清液用于HPLC-Q-TOF测试；
(4)HPLC-MS/MS分析
两项梯度洗脱用于HPLC-Q-TOF系统，A相为色谱级甲醇，B相为0.1％醋酸氨水溶液；70分钟内从A相10％梯度增加到90％，流速为0.8ml/min，流出液通过一个三通装置等量分配至DAD和Q-TOF检测系统；DAD设置为254nm，柱温设定为25℃，每次进样20微升；
质谱使用的离子源为电喷雾离子源，毛细管电压为4kV，毛细管出口电压为135V，锥孔电压为65V，脱溶剂温度为350℃，干燥气流速度为10L/min，雾化器压力40psi，碰撞能量为8～45V，扫描分子量区间为m/z 100～2000，检测模式为负离子模式；
(5)分子网络化方法
HPLC-MS/MS数据集经相关软件转换成mzXML格式后，上传至massive.ucsd.edu进行数据处理和整合，GNPS参数设计分子量范围，容忍度60％，进行类似物搜索，GNPS数据以cytoscape软件图形化。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111413423A (zh) * 2020-03-19 2020-07-14 广东一方制药有限公司 地骨皮uplc特征图谱的构建方法及地骨皮的检测方法
CN111707741A (zh) * 2020-06-02 2020-09-25 南京大学 环境介质中微量有机污染物转化产物的非靶向识别方法
WO2021047394A1 (zh) * 2019-09-12 2021-03-18 北方民族大学 一种分子网络化分析地骨皮化合物结构的方法
CN114878724A (zh) * 2022-07-12 2022-08-09 中国农业科学院蜜蜂研究所 一种区分不同品种中蜂蜂蜜的方法与应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103012560A (zh) * 2012-12-24 2013-04-03 中南林业科技大学 一种地骨皮中环肽类化合物的制备方法
CN103735728A (zh) * 2013-10-28 2014-04-23 赵庆春 地骨皮醇提物、地骨皮甲素及乙素具有神经保护的新用途
CN104418761A (zh) * 2013-09-03 2015-03-18 香港城市大学 苦可胺的分离方法
CN105963419A (zh) * 2016-05-11 2016-09-28 天津大学 一种桃仁减毒的药物组合物
CN109439705A (zh) * 2018-12-05 2019-03-08 广州中医药大学(广州中医药研究院) 一种柳珊瑚酸的微生物制备方法
CN110157724A (zh) * 2019-05-31 2019-08-23 中国医学科学院医药生物技术研究所 Herbicidin生物合成基因簇及其应用

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006294014A (ja) * 2005-03-16 2006-10-26 Kumamoto Technology & Industry Foundation 解析プログラム、プロテインチップ、プロテインチップの製造方法、および、抗体カクテル
CN102749299A (zh) * 2012-07-13 2012-10-24 山东阿如拉药物研究开发有限公司 一种中药组合物枸杞消渴制剂的质量检测方法
CN105758977A (zh) * 2016-03-09 2016-07-13 西华大学 一种检测黑枸杞果或黑枸杞果提取物品质的方法
CN108484428B (zh) * 2018-04-16 2021-03-19 中国科学院兰州化学物理研究所 一种枸杞中的酰胺类化合物及酰胺类化合物组分及其制备方法
CN109932446A (zh) * 2019-03-21 2019-06-25 苏州大学 一种枸杞多糖提取物的检测方法
CN110531017A (zh) * 2019-09-12 2019-12-03 北方民族大学 一种分子网络化分析地骨皮化合物结构的方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103012560A (zh) * 2012-12-24 2013-04-03 中南林业科技大学 一种地骨皮中环肽类化合物的制备方法
CN104418761A (zh) * 2013-09-03 2015-03-18 香港城市大学 苦可胺的分离方法
CN103735728A (zh) * 2013-10-28 2014-04-23 赵庆春 地骨皮醇提物、地骨皮甲素及乙素具有神经保护的新用途
CN105963419A (zh) * 2016-05-11 2016-09-28 天津大学 一种桃仁减毒的药物组合物
CN109439705A (zh) * 2018-12-05 2019-03-08 广州中医药大学(广州中医药研究院) 一种柳珊瑚酸的微生物制备方法
CN110157724A (zh) * 2019-05-31 2019-08-23 中国医学科学院医药生物技术研究所 Herbicidin生物合成基因簇及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ZHI-BO JIANG等: "Structure-based manual screening and automatic networking forsystematically exploring sansanmycin analogues using highperformance liquid chromatography tandem mass spectroscopy", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》 *
李行诺等: "地骨皮化学成分研究", 《中国现代应用药学》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021047394A1 (zh) * 2019-09-12 2021-03-18 北方民族大学 一种分子网络化分析地骨皮化合物结构的方法
CN111413423A (zh) * 2020-03-19 2020-07-14 广东一方制药有限公司 地骨皮uplc特征图谱的构建方法及地骨皮的检测方法
CN111707741A (zh) * 2020-06-02 2020-09-25 南京大学 环境介质中微量有机污染物转化产物的非靶向识别方法
CN114878724A (zh) * 2022-07-12 2022-08-09 中国农业科学院蜜蜂研究所 一种区分不同品种中蜂蜂蜜的方法与应用

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