CN110499256B - 一种降解有机酸臭物的草酸青霉及其放大培养方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种降解有机酸臭物的草酸青霉及其放大培养方法和应用，其所述的草酸青霉为草酸青霉DH‑1，该霉已于2018年4月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2018201；保藏地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号。本发明从堆积的奶牛养殖粪便采集样本，并将该样本接种于筛选培养基，筛选培养基中加入了多种抗生素、多种有机酸、吲哚和粪臭素对样本中的菌进行诱导驯化培养，并分离纯化，得到草酸青霉DH‑1，该霉的生长适应性强，有机酸、抗生素的耐受度高，且能有效降解有机酸臭物，非常适用于奶牛粪污处理中。

Description

一种降解有机酸臭物的草酸青霉及其放大培养方法和应用
技术领域
本发明属于环境微生物应用技术领域，具体涉及一种降解有机酸臭物的草酸青霉及其放大培养方法和应用。
背景技术
真菌是自然生态系统中重要的组成部分，其独特的细胞结构和生化生理功能赋予它许多优良特性。与细菌相比，真菌在污染物降解、抗逆性、环境修复等方面有较大的优势。其中，青霉的生长需求简单，产生的次生代谢物多，已经在工业酶生产、生物医药等多行业得到广泛应用，其适应性很强，可以利用丰富、廉价的原料或有机污染物作为碳源进行生长，因此近年来在环境污染治理领域得到越来越多的关注。
草酸青霉（拉丁文名：Penicillium oxalicum）是青霉的一种，它可以表达高活性的木糖苷酶、纤维素酶等，因此常被用于生产在制浆造纸和医药等行业所需的β-木糖苷酶，并且在生物质能源等新兴产业中得到应用。草酸青霉还能够促进多种含钾矿物的风化和钾的溶出。一些草酸青霉具有极强的溶磷能力，能够将土壤中难溶性的磷酸盐转化为易于被植物吸收利用的水溶性磷，提高土壤的生物供磷量，土壤中的草酸青霉还能分泌小分子次生代谢物，这些物质能够促进植物根系对锌、铜等其它营养元素的吸收，增强植物抗病能力，因此可用于生物肥的制备。此外，草酸青霉还能够将高毒性的Cr(VI)还原为Cr(III)，其对重金属离子的耐受和还原减毒也使其可被用于重金属污染土壤的生物修复。目前，草酸青霉在粪污处理中的研究主要在于：对粪便中的纤维素、半纤维素进行降解来提高乙醇的产率。
我国畜禽养殖呈现集中式规模化的趋势，动物粪便的处理压力很大，其中奶牛的粪便排泄量尤为如此。奶牛粪便碳水化合物和N、P、S等元素在内的复杂有机物，这些物质的氧化分解会产生大量酸性、恶臭以及刺激性的气体。奶牛粪便降解物中的异味气体达一百多种，主要有挥发性的短链脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸、3-甲基丁酸、戊酸)、甲硫醚、二氧化碳、二甲胺、粪臭素、氨气、二氧化氮、二氧化硫、硫化氢等，其中短链脂肪酸(Short-ChainFatty Acids，SCFA)含量很高。牛粪堆积所带来的臭味，不仅会严重影响养牛场饲养人员及动物的健康，影响奶制品的质量，且会对周边空气及水环境还有居民生活带来很大的环境及心理压力。因此，养殖场除臭措施势在必行，其中利用微生物的特殊生物降解活性发展的原位养殖技术也因此得以开展和应用。例如，授权公告号为CN 101817593 B的中国专利公布了一株从畜禽养殖废水中筛选得到的恶臭假单胞菌LPC24，该菌株能在3-5天内去除畜禽养殖废水中的吲哚1.5mg/L 以上，粪臭素1.0mg/L 以上。但是，现有菌株对禽畜粪便的除臭效果依然有限，因此，本申请人长期以来一直致力于筛选一株对禽畜粪便的除臭效果更优的微生物。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种降解有机酸臭物的草酸青霉。
为实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：
一种降解有机酸臭物的草酸青霉，其为草酸青霉DH-1，该霉已于2018 年4 月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2018201；保藏地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号。
本发明从堆积的奶牛养殖粪便采集样本，并将该样本接种于筛选培养基，筛选培养基中加入了多种抗生素、多种有机酸、吲哚和粪臭素对样本中的菌进行诱导驯化培养，并分离纯化，得到一株真菌。该真菌的生长适应性强，有机酸、抗生素的耐受度高。并且，该真菌经鉴定属于草酸青霉属，因此，本申请人将其命名为：草酸青霉DH-1。本发明首次筛选到了一株能够降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1。并且，草酸青霉对营养素、曝气、PH、温度的变化不敏感，在发酵罐中容易生长，适合大规模生产，并且菌株形成圆润的菌丝体小球，通过过滤可将其从发酵液中轻松分离出来。
本发明的目的之二在于提供本发明的目的一所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉的放大培养方法，利用液体放大培养基进行放大培养，所述液体放大培养基的配置步骤为：先制备基础培养基，基础培养基按照葡萄糖5~20g/L，胰蛋白胨5~20g/L，酵母提取物5~15g/L，干牛粪2-10 g/L，调节pH至6.5~7.5，加水定容后，灭菌处理制得；再向基础培养基中分别加入乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸各0.02~0.3 g/L，以及0.02~0.1 g/L 吲哚和0.02~0.1g/L粪臭素，调节pH至6.5~7.5，得到液体放大培养基，其中上述乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸、吲哚、粪臭素的质量浓度均为各组分相对于液体放大培养基的质量浓度；再向该液体放大培养基中接种本发明的目的一所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉（即草酸青霉DH-1），1.0 x 106~5.0 x 106 个/ml草酸青霉孢子悬浮液按孢子悬浮液占孢子悬浮液与液体放大培养基的混合液的体积比0.5~3.0%加入液体培养基中，培养温度为28-35℃。本发明针对上述草酸青霉DH-1进行扩大培养并进行生化功能检测发现：本发明的草酸青霉DH-1对有机酸及粪臭化合物的去除率达90%以上，可作为畜禽养殖固液体废弃物或是其他粪便堆积场生物降解排污的核心微生物之一。
进一步的，利用液体放大培养基进行放大培养后，再利用固体放大培养基进行放大培养，所述固体放大培养基按照各个原料重量比分别为草粉5-10%，麸皮5-15%，豆粕5-15%，玉米粉5-10%，木屑10-20%，干牛粪2-5%，微晶纤维0.5-2%，水40~50%混合制得；并向该固体放大培养基中接种经上述液体放大培养基培养后得到的培养液；该培养液的接种量为其占培养液与固体放大培养基总量的体积百分比为5~10%，培养过程中每10-20分钟搅拌一次，培养温度为28-35℃。
进一步的，利用固体放大培养基进行放大培养后，再利用固体土豆培养基进行分离纯化或菌种保藏鉴定，所述固体土豆培养基按照各个原料的质量浓度分别为土豆10-20g/L，葡萄糖5-20 g/L，琼脂粉1.5-2.5%制得，培养温度为28-35℃。
本发明的目的之三在于提供本发明的目的一所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉的应用，其应用于降解有机酸、吲哚、粪臭素。
进一步的，上述一种降解有机酸臭物的草酸青霉的应用，其应用在奶牛粪污处理中。在具体实施过程中，其应用在奶牛粪污原位处理中，具体为：将上述降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1添加到奶牛养殖床中，所述奶牛养殖床由至少一种生物质垫料堆积而成。
进一步的，所述草酸青霉DH-1的添加量优选为≥1.0x105CFU/g生物质垫料。所述奶牛养殖床的处理温度优选为25~40℃，pH值优选为4.0~9.5。
本发明提供的草酸青霉可以快速降解短链有机脂肪酸及吲哚和粪臭素，在人工调配的奶牛养殖床中，乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸的含量分别为0.1%~0.2%，吲哚和粪臭素的含量分别为0.01~0.02%时，加入的有活性草酸青霉DH-1为1.0x105CFU/g时，25~40℃条件下处理8d以上，完全闻不到酸臭味。
附图说明
图1为本发明的降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1在扫描电子显微镜下放大2000倍的菌丝形态；
图2为本发明的降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1在扫描电子显微镜下放大5000倍的菌丝形态；
图3为本发明的降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1在扫描电子显微镜下放大10000倍的菌丝形态；
图4为本发明的降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1在利用液体培养基进行放大培养过程中乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸的降解效果图；
图5为本发明的降解禽畜粪便酸臭物的草酸青霉DH-1在利用液体培养基进行放大培养过程中对吲哚、粪臭素的降解效果图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
一种降解有机酸臭物的草酸青霉，其为草酸青霉DH-1，该霉已于2018 年4 月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2018201；保藏地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号。
本发明的草酸青霉DH-1从堆积的奶牛养殖粪便分离筛选而来，具体步骤如下：
（1）取0.2 g奶牛粪便堆积物，接种于100 mL液体筛选培养基中，所述液体筛选培养基的配置步骤为：先制备基础培养基，基础培养基按照葡萄糖20g/L，胰蛋白胨20 g/L，酵母提取物10g/L，干牛粪5 g/L，调节pH至6.5~7.5，加水定容后，灭菌处理制得；再分别向基础培养基中加入乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸各为0.1 g/L，以及吲哚0.06g/L和粪臭素0.06 g/L，得到液体筛选培养基，其中上述乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸、吲哚、粪臭素的质量浓度均为各组分相对于液体筛选培养基的质量浓度；再分别按体积比0.1%分别加入氯霉素、卡那霉素、链霉素、红霉素、氨苄等抗生素，得到液体筛选培养基，调节pH至7.0，其中上述氯霉素、卡那霉素、链霉素、红霉素、氨苄等抗生素的体积比均分别为抗生素相对于液体筛选培养基的体积比；将上述液体筛选培养基放置于30℃、200r·min-1摇床培养8d；
（2）取100 μL步骤（1）培养后得到的菌液，接种于另一液体筛选培养基中（该液体筛选培养基的配置方法与步骤（1）中的液体筛选培养基的配置方法完全相同），将该液体筛选培养基放置于30℃、200 r·min-1摇床培养8d；
（3）重复步骤（2）的培养操作2~3次；
（4）再取100 μL最后一次培养后得到的菌液，接种于驯化培养基中进行驯化培养，所述驯化培养基的配置步骤为：先制备基础培养基，基础培养基按照葡萄糖20g/L，胰蛋白胨20 g/L，酵母提取物10g/L，5 g/L 干牛粪，调节pH至6.5~7.5，加水定容后，灭菌处理制得；再分别向基础培养基中加入乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸分别为0.15 g/L，以及0.1 g/L 吲哚和0.1 g/L粪臭素，调节pH至7.0，得到驯化培养基；然后在30℃、200r·min-1摇床培养8d，重复上述驯化培养操作2~3次，其中上述乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸、吲哚、粪臭素的质量浓度均为各组分相对于驯化培养基的质量浓度；在重复驯化培养操作时，逐渐将添加的各种有机酸的浓度分别增加至0.2g/L，吲哚和粪臭素的浓度分别增加至0.15 g/L；
（5）取100 μL最后一次驯化培养后得到的菌液，稀释后在含有10 g/L的琼脂固体筛选培养基上涂布均匀，30℃培养3~8 天；
（6）从步骤（5）培养后的培养基中挑单菌落进行菌落分离步骤，其中菌落分离步骤为：将挑出的单菌落在含有10 g/L的琼脂固体筛选培养基上划线分离，30℃培养菌落；再将长出的单菌落进行菌落分离步骤，重复菌落分离步骤2~3次，得到单克隆菌落。所述琼脂固体筛选培养基是指在上述液体筛选培养基中再添加20 g/L的琼脂粉，其中琼脂粉的质量浓度为琼脂粉相对于琼脂固体筛选培养基的质量浓度，得到的琼脂固体筛选培养基；
（7）经分离纯化的单克隆菌落接种到50 mL液体YPD培养基, 液体YPD培养基的配置步骤为：按照葡萄糖20g/L，胰蛋白胨20g/L，酵母提取物10 g/L，调节pH至6.5~7.5，加水定容后，灭菌制得；取5μL培养液用于制取扫描电子显微镜样本，在放大倍数为2000倍、5000倍、10000倍时该单克隆菌落的菌丝形态分别如图1、图2、图3所示，可以看到其分生孢子梗成扫帚状，顶端排列着分生孢子，形态符合青霉菌的特征。
该单克隆菌落在PDA营养培养板（即现有、常见的马铃薯葡萄糖琼脂培养基）上生长迅速，30℃培养3d即可得到成熟的绒状菌斑，在培养初期，菌斑表面颜色是白色的，随着培养时间的增加，逐渐变成青绿色，且该真菌的菌丝中具有隔膜。
取20mg干燥过的该单克隆菌丝用液氮研磨成粉末，根据试剂盒（购自SangonBiotech公司的Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒）的操作说明进行基因组DNA的提取，最后将DNA沉淀溶于100 μL TE缓冲液（10 mM Tris, 1 mM EDTA, pH8.0），并将该基因组DNA稀释至20 mg/L，取1μL作为模板用于ITS-rDNA的扩增。所用的引物对分别为：ITS1：5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’及ITS4：5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC -3’。PCR的反应混合液配制如下：模板DNA 1 μL，PCR Taq mix 25 μL，上下游引物各1.0 μL（20 μM），加ddH2O至50 μL。PCR程序运行如下： 94℃ 预变性1min；55℃退火1min；72℃延伸51min；32次循环后，72℃反应10min以扩增未完成的序列。PCR 扩增产物由PCR清洁试剂盒纯化，再由专业生物公司测序完成，生工生物科技有限公司进行分析，所获得的序列利用网络工具完成Blastn分析，并由生物信息学软件Mega6完成遗传树分析。其中，测序完成的ITS-rDNA的核苷酸序列为：有效序列长度为564bp，如序列表中SEQ ID NO.1所示。将该序列与NCBI数据库及GenBank中的ITS- rDNA序列进行同源性比对，结果表明其与Penicillium oxalicum clone GDPo03(NCBI登录号为MH766384.1)相似性最高，同源性高达99%，说明该菌为草酸青霉属中的一株菌，因此命名为草酸青霉（Penicillium oxalicum）DH-1。
本发明所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1的放大培养方法，利用液体放大培养基进行放大培养，所述液体放大培养基的配置步骤为：先制备基础培养基，基础培养基按照葡萄糖5~20g/L，胰蛋白胨5~20g/L，酵母提取物5~15g/L，干牛粪2-10 g/L，调节pH至6.5~7.5，加水定容后，灭菌处理制得；再向基础培养基中分别加入乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸各0.02~0.3 g/L，以及0.02~0.1 g/L 吲哚和0.02~0.1 g/L粪臭素，调节pH至6.5~7.5，得到液体放大培养基，其中上述乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸、吲哚、粪臭素的质量浓度均为各组分相对于液体放大培养基的质量浓度；再向该液体放大培养基中接种上述的降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1，1.0 x 106~5.0 x 106 个/ml草酸青霉孢子悬浮液按孢子悬浮液占孢子悬浮液与液体放大培养基的混合液的体积比0.5~3.0%加入液体培养基中，培养温度为28-35℃。本发明的液体放大培养基也称为：液体筛选培养基，经过该液体放大培养基放大培养的同时，也可对本发明所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉进行进一步的筛选。在液体放大培养基摇床培养8d后，再将液体放大培养基培养后得到的全部培养液都接种至1000 ml液体放大培养基中进行放大培养，该液体放大培养基配方与上述液体放大培养基的配方相同，振荡培养24~300h，定期取样1ml，经离心取上清，上清样品以高效效相色谱进行有机酸及其它酸臭物浓度的测定，结果如图4、图5所示。由图5可看出：粪臭素和吲哚在200小时内基本降解；由图4可看出：实验组(DH-1-粪臭素和DH-1-吲哚）有强烈异味的正丁酸在6天内降解完全，其余有机酸在4~8天内均获得完全降解。
进一步的，利用液体放大培养基进行放大培养后，再利用固体放大培养基进行放大培养，所述固体放大培养基按照各个原料重量比分别为草粉5-10%，麸皮5-15%，豆粕5-15%，玉米粉5-10%，木屑10-20%，干牛粪2-5%，微晶纤维0.5-2%，水40~50%混合制得；并向该固体放大培养基中接种经上述液体放大培养基培养后得到的培养液；该培养液的接种量为其占培养液与固体放大培养基总量的体积百分比为5~10%，培养过程中每10-20分钟搅拌一次，培养温度为28-35℃。
进一步的，利用固体放大培养基进行放大培养后，再利用固体土豆培养基进行分离纯化或菌种保藏鉴定，所述固体土豆培养基按照各个原料的质量浓度分别为土豆10-20g/L，葡萄糖5-20 g/L，琼脂粉1.5-2.5%制得，培养温度为28-35℃。固体土豆培养基进行培养时连续发酵10~20天，对固体发酵物进行持续观察，到发酵固体呈黄褐色，酸臭味消失，并呈现微弱的酒香味时可终止发酵，对发酵液中的生物量进行检测，并对菌株进行分离纯化或菌种保藏鉴定。
本发明的上述一种降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1的应用，其应用于降解短链脂肪酸、吲哚、粪臭素。
进一步的，上述一种降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1的应用，其应用在奶牛粪污处理中。在具体实施过程中，其应用在奶牛粪污原位处理中，具体为：将上述降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1添加到奶牛养殖床中，所述奶牛养殖床由至少一种生物质垫料堆积而成。具体步骤为：采用木屑铺设高５０厘米的奶牛养殖床，向奶牛养殖床中拌入乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸分别为0.1%~0.2%，吲哚和粪臭素的含量分别为0.01~0.02%时，每平方米施加菌种０.５公斤，所述草酸青霉DH-1的添加量为1.0x105CFU/g生物质垫料，所述奶牛养殖床的处理温度为25~40℃，pH值为4.0~9.5，处理8d后，奶牛养殖床的酸臭味基本完全去除。
当然，本发明的奶牛养殖床并不限于纯木屑堆积而成的养殖床，其为现有的、常见的由生物质垫料（例如纯秸秆或秸秆与麸皮等等）堆积而成养殖床均可。另外，所述草酸青霉DH-1的添加量也不限于1.0x105CFU/g生物质垫料，其≥1.0x105CFU/g生物质垫料均可，草酸青霉DH-1的添加量越大越好，但添加量越大，成本也越高。另，本发明的草酸青霉DH-1的优选处理温度为25~40℃，pH值为4.0~9.5，在此温度和pH值条件下，草酸青霉DH-1的生长速度最快，降解效率最高。
上述仅为本发明的部分优选实施例，本发明并不仅限于实施例的内容。对于本领域中的技术人员来说，在本发明技术方案的构思范围内可以有各种变化和更改，所作的任何变化和更改，均在本发明保护范围之内。
序列表
<110> 南平市建阳区吉翔牧业有限公司
<120> 一种降解有机酸臭物的草酸青霉及其放大培养方法和应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 564
<212> DNA
<213> 草酸青霉DH-1(Penicillium oxalicum DH-1)
<400> 1
aacgagtgag ggctctgggt ccacctccca cccgtgttta tcgtaccttg ttgcttcggc 60
gggcccgcct cacggccgcc ggggggcatc cgcccccggg cccgcgcccg ccgaagacac 120
acaaacgaac tcttgtctga agattgcagt ctgagtactt gactaaatca gttaaaactt 180
tcaacaacgg atctcttggt tccggcatcg atgaagaacg cagcgaaatg cgataagtaa 240
tgtgaattgc agaattcagt gaatcatcga gtctttgaac gcacattgcg ccccctggta 300
ttccgggggg catgcctgtc cgagcgtcat tgctgccctc aagcacggct tgtgtgttgg 360
gctctcgccc cccgcttccg gggggcgggc ccgaaaggca gcggcggcac cgcgtccggt 420
cctcgagcgt atggggcttc gtcacccgct ctgtaggccc ggccggcgcc cgccggcgaa 480
caccatcaat cttaaccagg ttgacctcgg atcaggtagg gatacccgct gaacttaagc 540
atatcaataa gaaggaggaa tacc 564

Claims (9)

1.一种降解有机酸臭物的草酸青霉，其特征在于：其为草酸青霉（Penicillium oxalicum）DH-1，该霉已于2018 年4 月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2018201；保藏地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号。
2.权利要求1所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉的放大培养方法，其特征在于，液体放大培养基的配置步骤为：先制备基础培养基，基础培养基按照葡萄糖5~20g/L，胰蛋白胨5~20g/L，酵母提取物5~15g/L，干牛粪2-10 g/L，调节pH至6.5~7.5，加水定容后，灭菌处理制得；再向基础培养基中分别加入乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸各0.02~0.3 g/L，以及0.02~0.1 g/L 吲哚和0.02~0.1g/L粪臭素，调节pH至6.5~7.5，得到液体放大培养基，其中上述乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸、吲哚、粪臭素的质量浓度均为各组分相对于液体放大培养基的质量浓度；再向该液体放大培养基中接种权利要求1所述的草酸青霉DH-1，1.0 x 106~5.0 x 106 个/ml草酸青霉孢子悬浮液按孢子悬浮液占孢子悬浮液与液体放大培养基的混合液的体积比0.5~3.0%加入液体培养基中，培养温度为28-35℃。
3.根据权利要求2所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉的放大培养方法，其特征在于：利用液体放大培养基进行放大培养后，再利用固体放大培养基进行放大培养，所述固体放大培养基按照各个原料重量比分别为草粉5-10%，麸皮5-15%，豆粕5-15%，玉米粉5-10%，木屑10-20%，干牛粪2-5%，微晶纤维0.5-2%，水40~50%混合制得；并向该固体放大培养基中接种经上述液体放大培养基培养后得到的培养液；该培养液的接种量为其占培养液与固体放大培养基总量的体积百分比为5~10%，培养过程中每10-20分钟搅拌一次，培养温度为28-35℃。
4.根据权利要求3所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉的放大培养方法，其特征在于：利用固体放大培养基进行放大培养后，再利用固体土豆培养基进行分离纯化或菌种保藏鉴定，所述固体土豆培养基按照各个原料的质量浓度分别为土豆10-20 g/L，葡萄糖5-20g/L，琼脂粉1.5-2.5%制得，培养温度为28-35℃。
5.权利要求1所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉的应用，其特征在于，其应用于降解有机酸、吲哚、粪臭素。
6.根据权利要求5所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉的应用，其特征在于：其应用在奶牛粪污处理中。
7.根据权利要求6所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉的应用，其特征在于，其应用在奶牛粪污原位处理中，具体为：将上述降解有机酸臭物的草酸青霉DH-1添加到奶牛养殖床中，所述奶牛养殖床由至少一种生物质垫料堆积而成。
8.根据权利要求7所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉的应用，其特征在于：所述草酸青霉DH-1的添加量为≥1.0x105CFU/g生物质垫料。
9.根据权利要求7所述的一种降解有机酸臭物的草酸青霉的应用，其特征在于：所述奶牛养殖床的处理温度为25~40℃，pH值为4.0~9.5。
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